КлиниТест-АЛТ

ЭКО
СЕРВИС
КлиниТест-АЛТ
ИНСТРУКЦИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ НАБОРОВ РЕАГЕНТОВ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ
АКТИВНОСТИ АЛАНИНАМИНОТРАНСФЕРАЗЫ В СЫВОРОТКЕ И ПЛАЗМЕ КРОВИ
(КАТ.№№ B-10371, B-10372, В-10373, В-10374, В-10377)
Утверждена приказом Росздравнадзора от 19.01.2009 г. № 226-Пр/09
РУ № ФСР 2009/04022 от 19.01.2009 г.
НАЗНАЧЕНИЕ
Íàáîðû ïðåäíàçíà÷åíû äëÿ ôîòîìåòðè÷åñêîãî îïðåäåëåíèÿ
àêòèâíîñòè àëàíèíàìèíîòðàíñôåðàçû (ÀËÒ) â ñûâîðîòêå è
ïëàçìå êðîâè ôåðìåíòàòèâíûì êèíåòè÷åñêèì IFCC-ìåòîäîì
áåç ïèðèäîêñàëü-5-ôîñôàòà â êëèíèêî-äèàãíîñòè÷åñêèõ
ëàáîðàòîðèÿõ è â íàó÷íî-èññëåäîâàòåëüñêîé ïðàêòèêå.
Íàáîðû ðàññ÷èòàíû íà 100 è 500 îïðåäåëåíèé ïðè êîíå÷íîì
îáú¸ìå ðåàêöèîííîé ñìåñè 1 ìë.
ПРИНЦИП МЕТОДА
ÀËÒ êàòàëèçèðóåò ðåàêöèþ ïåðåàìèíèðîâàíèÿ ìåæäó
L-àëàíèíîì è 2-îêñîãëóòàðàòîì ñ îáðàçîâàíèåì L-ãëóòàìàòà è ïèðóâàòà. Â õîäå ïîñëåäóþùåé îêèñëèòåëüíîâîññòàíîâèòåëüíîé ðåàêöèè ìåæäó ïèðóâàòîì è ÍÀÄÍ,
êàòàëèçèðóåìîé ëàêòàòäåãèäðîãåíàçîé, â ýêâèìîëÿðíûõ
êîëè÷åñòâàõ ïîëó÷àþòñÿ ëàêòàò è ÍÀÄ+. Ñêîðîñòü óìåíüøåíèÿ
êîíöåíòðàöèè ÍÀÄÍ ïðÿìî ïðîïîðöèîíàëüíà àêòèâíîñòè ÀËÒ.
СОСТАВ НАБОРОВ
Ðåàãåíò 1 (Р1). ÒÐÈÑ-HCl – 0,1 моль/л, ËÄÃ – 1200 Å/ë, L-àëàíèí
– 0,5 ìîëü/ë, азид натрия
Ðåàãåíò 2 (Р2). ÒÐÈÑ-HCl – 0,1 моль/л, 2-îêñîãëóòàðàò–15 ììîëü/ë,
ÍÀÄÍ –0,18 ììîëü/ë, азид натрия
Êàò.¹ Êîìïëåêòàöèÿ
Â-10371 Ð1 1õ80 ìë + Ð2 1õ20 ìë
Â-10372 Ð1 5õ80 ìë + Ð2 1õ100 ìë
Â-10373 Ð1 1õ40 ìë + Ð2 1õ10 ìë
Â-10374 Ð1 5õ20 ìë + Ð2 1õ25 ìë
Â-10377 Ð1 4õ100 ìë + Ð2 1õ100 ìë
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
×óâñòâèòåëüíîñòü – íå áîëåå 15 Åä/ë.
Ëèíåéíîñòü. Îò 20 äî 240 Åä/ë. Îòêëîíåíèå îò ëèíåéíîñòè
íå áîëåå 5%.
Êîýôôèöèåíò âàðèàöèè – íå áîëåå 5%.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Âî èçáåæàíèå âîçìîæíîãî èíôèöèðîâàíèÿ ïðè ðàáîòå
ñ îáðàçöàìè êðîâè íåîáõîäèìî íàäåâàòü îäíîðàçîâûå
ðåçèíîâûå ïåð÷àòêè.
Ïðè èñïîëüçîâàíèè íàáîðîâ ñëåäóåò ñîáëþäàòü ïðàâèëà
òåõíèêè áåçîïàñíîñòè ïðè ðàáîòå ñ õèìè÷åñêèìè âåùåñòâàìè.
АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
Ñâåæàÿ íåãåìîëèçèðîâàííàÿ ñûâîðîòêà èëè ãåïàðèíèçèðîâàííàÿ ïëàçìà.
Îïðåäåëåíèå àêòèâíîñòè ÀËÒ äîëæíî áûòü ïðîâåäåíî â äåíü
âçÿòèÿ îáðàçöà, ïîñêîëüêó ôåðìåíò òåðÿåò àêòèâíîñòü êàê ïðè
êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå (18-25îÑ), òàê è ïðè çàìîðàæèâàíèè
[1,2].
ПОДГОТОВКА РЕАГЕНТОВ ДЛЯ АНАЛИЗА
Приготовление монореагента для схемы 1
Ñìåøàòü íåîáõîäèìûå êîëè÷åñòâà ðåàãåíòîâ 1 è 2 â
ñîîòíîøåíèè 4:1. Ïîëó÷åííûé ìîíîðåàãåíò ñòàáèëåí â
òå÷åíèå 14 суток ïðè òåìïåðàòóðå 2-8°Ñ.
ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
Äëèíà âîëíû 340 íì.
Êþâåòà ñ äëèíîé îïòè÷åñêîãî ïóòè 10 ìì.
Òåìïåðàòóðà ïðîâåäåíèÿ ðåàêöèè 37°C.
Схема 1. Запуск реакции образцом
 êþâåòó âíåñòè 1 ìë ìîíîðåàãåíòà, èíêóáèðîâàòü â òå÷åíèå
5 ìèí. ïðè 37°Ñ, çàòåì äîáàâèòü 0,1 ìë àíàëèçèðóåìîãî
îáðàçöà è ïåðåìåøàòü. ×åðåç 60 ñ èçìåðèòü îïòè÷åñêóþ
ïëîòíîñòü (Å1). ×åðåç 60 ñ ïîâòîðèòü èçìåðåíèå (Å2).
Ðàññ÷èòàòü èçìåíåíèå îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè çà ìèíóòó (Å1- Å2).
Схема 2. Запуск реакции реагентом 2
 êþâåòó âíåñòè 0,8 ìë ðåàãåíòà 1 è 0,1 ìë îáðàçöà, ïåðåìåøàòü è èíêóáèðîâàòü 5 ìèí. ïðè 37°Ñ, çàòåì äîáàâèòü 0,2
ìë ðåàãåíòà 2 è ïåðåìåøàòü. ×åðåç 60 ñ èçìåðèòü îïòè÷åñêóþ
ïëîòíîñòü (Å1). ×åðåç 60 ñ ïîâòîðèòü èçìåðåíèå (Å2).
Ïðèìå÷àíèå. Åñëè âíîñèòñÿ 1 ìë ðåàãåíòà 1, òî îáú¸ì îáðàçöà
ñëåäóåò óâåëè÷èòü äî 0,125 ìë , à îáú¸ì ðåàãåíòà 2 äî 0,25 ìë.
Ðàññ÷èòàòü èçìåíåíèå îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè çà ìèíóòó (Å1 - Å2).
РАСЧЁТ
Àêòèâíîñòü À àëàíèíàìèíîòðàíñôåðàçû â åäèíèöàõ Åä/ë
ðàññ÷èòàòü ïî ôîðìóëå:
À = 1746 • (Å1-Å2)
ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
Àíàëèçàòîðû îòêðûòîãî òèïà ðàçëè÷íûõ èçãîòîâèòåëåé,
íàáîð ïèïåòîê, ïîçâîëÿþùèõ îòáèðàòü îáú¸ìû 0,1–1,0 ìë,
òåðìîñòàò, ñåêóíäîìåð.
1
НПЦ «ЭКО-СЕРВИС» Тел. (812)70-210-44, 450-67-79, (921)77-525-88 www.ecoservice-spb.ru
КлиниТест-АЛТ
ПАРАМЕТРЫ ДЛЯ БИОХИМИЧЕСКИХ АНАЛИЗАТОРОВ
Òèï àíàëèçàòîðà
Ëþáîé
Ìåòîä èçìåðåíèÿ Êèíåòèêà
Äëèíà âîëíû, íì 340
Èçìåðåíèå ïðîòèâ Âîçäóõà èëè
äèñòèëë.âîäû
Òåìïåðàòóðà ðåàêöèè 37îÑ
Åäèíèöà èçìåðåíèÿ Å/ë ×èñëî çíàêîâ ïîñëå çàïÿòîé 0
Èçìåíåíèå îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè Óìåíüøàåòñÿ
Ôàêòîð 1746
Ñîîòíîøåíèå ðåàãåíò/ïðîáà 10:1
Êîëè÷åñòâî èçìåðåíèé, íå ìåíåå 3
Âðåìÿ ïðåèíêóáàöèè, ñåê. 60
Âðåìÿ ðåàêöèè, ñåê. 60
Âåðõíèé ïðåäåë àáñîðáöèè ðåàãåíòà ïðîòèâ âîäû, Å 2
Íèæíèé ïðåäåë àáñîðáöèè ðåàãåíòà ïðîòèâ âîäû, Å 0,8
Ïðåäåë ìàêñèìàëüíîé àáñîðáöèè ∆Å/ìèí. 0,14
Ãðàíèöû ëèíåéíîñòè 20-240
Ìàêñèìóì íîðìû 40*
Ìèíèìóì íîðìû 6*
* Ïðèâåäåíû íîðìàëüíûå âåëè÷èíû äëÿ ìóæ÷èí.
2
ПРИМЕЧАНИЯ
1. Äëÿ êàæäîãî àíàëèçàòîðà ñëåäóåò óòî÷íèòü ôàêòîð
ïåðåñ÷¸òà ïî êîíòðîëüíûì ñûâîðîòî÷íûì êàëèáðàòîðàì,
àòòåñòîâàííûì äàííûì ìåòîäîì.
2.  ñëó÷àå âîçíèêíîâåíèÿ êàêèõ-ëèáî òðóäíîñòåé ìîæíî
çàïðîñèòü àäàïòèðîâàííóþ èíñòðóêöèþ ïî ðàáîòå ñ íàáîðàìè
«ÊëèíèÒåñò-ÀËÒ» íà âàøåì àíàëèçàòîðå.
3. Åñëè àêòèâíîñòü ÀËÒ âûøå 240 Åä/ë, îáðàçåö ðàçâåñòè
ôèçðàñòâîðîì â 10 ðàç, àíàëèç ïîâòîðèòü, âåëè÷èíó
ðàññ÷èòàííîé àêòèâíîñòè óìíîæèòü íà 10.
НОРМАЛЬНЫЕ ВЕЛИЧИНЫ
Ìóæ÷èíû
îò 6 äî 40 Åä/ë
Æåíùèíû
îò 6 äî 32 Åä/ë
Ðåêîìåíäóåòñÿ â êàæäîé ëàáîðàòîðèè óòî÷íÿòü äèàïàçîí
íîðìàëüíûõ âåëè÷èí.
УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ
НАБОРОВ
Íàáîðû íåîáõîäèìî õðàíèòü ïðè òåìïåðàòóðå 2-8°Ñ â
óïàêîâêå ïðåäïðèÿòèÿ-èçãîòîâèòåëÿ â òå÷åíèå âñåãî ñðîêà
ãîäíîñòè (12 ìåñÿöåâ). Реагенты 1 и 2 после вскрытия флаконов могут храниться при температуре 2-8оС и при условии
достаточной герметичности флаконов в течение всего срока
годности набора.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Êîíòðîëü êà÷åñòâà ìîæåò áûòü ïðîâåä¸í ïî îòå÷åñòâåííûì
èëè çàðóáåæíûì êîíòðîëüíûì ñûâîðîòêàì, àòòåñòîâàííûì
äàííûì ìåòîäîì.
ЛИТЕРАТУРА
1. Îáåñïå÷åíèå êà÷åñòâà ëàáîðàòîðíûõ èññëåäîâàíèé.
Ïðåàíàëèòè÷åñêèé ýòàï. Ïîä ðåä. Â.Â. Ìåíüøèêîâà, Ì., 1999,
«Ëàáèíôîðì».
2. Ýíöèêëîïåäèÿ êëèíè÷åñêèõ ëàáîðàòîðíûõ òåñòîâ. Ïîä ðåä.
ïðîô.Í.Ó.Òèöà, Ì., 1997, “Ëàáèíôîðì”.
НПЦ «ЭКО-СЕРВИС» Тел. (812)70-210-44, 450-67-79, (921)77-525-88 www.ecoservice-spb.ru