Набор реагентов для иммуноферментного определения антител класса M к

Набор реагентов для иммуноферментного определения антител класса M к
Toxoplasma gondii в сыворотке крови (ИммуноФА-IgM-Токсо)
Номер по каталогу ИФ-20-05
ТУ 9398-037-41566050-2009
Регистрационное удостоверение № ФСР 2010/06886
Набор предназначен для качественного определения антител класса M к
Toxoplasma gondii в сыворотке крови людей методом непрямого иммуноферментного
анализа (ИФА) на стрипованных полистироловых планшетах.
Возбудитель – T. gondii относится к простейшим. Жизненный цикл
возбудителя проходит внутри клеток организма-хозяина. Окончательный хозяин
паразита – обычно зараженные кошки выделяют с испражнениями особую форму
токсоплазм - ооцисты. Попавшие в организм промежуточного хозяина (грызуны,
птицы, скот, человек) ооцисты продолжают жизненный цикл, в мышечной и других
тканях организма, где образуются псевдо- и истинные цисты. Передача возбудителя
от человека к человеку исключена (кроме вертикальной передачи во время
беременности), поскольку токсоплазма ни в одной из форм не выделяется из
организма человека. При инфицировании беременной женщины в первом
триместре, возможно самопроизвольное прерывание беременности; вероятность
инфицирования плода составляет не более 15%, но тяжесть неврологических
дефектов и риск возникновения хориоретинитов у плода выше. У инфицированных
новорожденных врожденный токсоплазмоз часто проявляется в виде
генерализованного поражения. В случае заражения в третьем триместре
беременности, вероятность инфицирования плода повышается до 65%, в этом случае
врожденный токсоплазмоз проявляется поздно. При обследовании беременных
женщин первичная инфекция определяется по увеличению титров специфических
антител в 3 и более раз. Обнаружение в крови беременной специфичных антител
класса M и нарастание титров антител класса G подтверждает первичное заражение
токсоплазмой. Такие беременные, независимо от наличия или отсутствия
клинических проявлений, подлежат срочному лечению с целью профилактики
заражения плода. Определение антител класса M играет решающую роль при
постановке диагноза токсоплазмоза у новорожденных, поскольку специфические
антитела класса G, в отличие от антител класса M, могут передаваться плоду от
матери. Высокая чувствительность анализа позволяет диагностировать ранние
стадии заболевания, что особенно важно для пациентов с иммунодефицитами и для
младенцев, у которых уровень антител в крови, как правило, очень низкий.
Принцип метода – непрямой двухстадийный ИФА
Е
Е
Е
Е
S
Е
Е
Р
Иммобилизованный
антиген
Анализируемый
образец
Иммобилизованные иммунокомплексы
Конъюгат
вторичных
антител с
пероксидазой
Иммобилизованные иммунокомплексы с мечеными антителами
Субстратная
реакция
СХЕМА ПРОВЕДЕНИЯ АНАЛИЗА
1. Внесение в лунки планшета: по 0,1 мл положительного, отрицательного и
порогового контрольных образцов, разведенных в 101 раз образцов исследуемых
сывороток крови и инкубация (30 мин, +37оС).
2. Промывка лунок планшета.
3. Внесение в лунки планшета по 0,1 мл конъюгата и инкубация (30 мин, +37оС).
4. Промывка лунок планшета.
5. Внесение в лунки планшета по 0,1 мл субстратного раствора и инкубация
(15
мин, +37оС).
6. Внесение в лунки планшета по 0,1 мл стоп-реагента.
7. Измерение оптической плотности (λ=450 нм), интерпретация результатов.
ОСНОВНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА
Результаты ИФА учитываются при следующих условиях:
Значение ОПК+(ср) - не ниже 1,0.
Значение ОПК-(ср) - не выше 0,1.
Значение ОП к пор - не ниже 0,1.
В противном случае исследование необходимо повторить.
Интерпретация результатов:
ОП образца > 1,1х ОПКпор – положительный,
ОП образца < 0,9х ОПКпор – отрицательный,
0,9х ОПКпор <ОП образца < 1,1х ОПКпор
исследование.
- сомнительный, необходимо повторить
Длина волны измерения: 450 нм.
Субстрат: 3,3`,5,5`-тетраметилбензидин (ТМБ).
Условия инкубации (время, tоС):
- 1-я инкубация 30 минут при +37оС;
- 2-я инкубация 30 мин при +37оС;
- инкубация с ТМБ 15 мин при +37оС.
Время проведения анализа: 1 час 30 минут.
Объем пробы: 100 мкл.
Количество анализируемой сыворотки: 5 мкл (для анализа сыворотка разводится в 101
раз и анализируется 100 мкл разведенной сыворотки).
Количество анализов: набор рассчитан на проведение 96 анализов, включая
контрольные образцы.
Планшеты: стрипованные, разделяющиеся на отдельные лунки.
Срок годности набора: 12 месяцев.
Все реагенты набора представлены в жидком виде.