Слайд 1 - Вектор

ФЦП «Исследования и разработки по приоритетным направлениям
развития научно-технологического комплекса на 2014-2020 годы»
Соглашение о предоставлении субсидии
от «27» июня 2014 г. № 14.604.21.0061 по теме
«РАЗРАБОТКА АДРЕСНОГО ТЕРАПЕВТИЧЕСКОГО СРЕДСТВА
ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ КОСТНЫХ МЕТАСТАЗОВ НА ОСНОВЕ
БИФОСФОНАТОВ И БЕЛКОВ-ЦИТОКИНОВ»
Руководитель проекта- директор Института медицинской биотехнологии
ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор»
Елена Дмитриевна Даниленко
Организация-получатель субсидии – ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор»
Роспотребнадзора
Индустриальный партнер - ООО «Вектор Фортис»
Объем финансирования:
Средства субсидии: 19,5 млн.руб.
2014 г.-6,0 млн.руб.
2015 г.-7,5 млн. руб.
2016 г.-6,0 млн.руб.
Внебюджетные средства: 6,5 млн.руб.
2014 г- 2,0 млн.руб.
2015 г.-2,5 млн.руб.
2016 г.-2,0 млн.руб.
Актуальность проекта
Неуклонный рост числа онкологических заболеваний в
мире и в стране
Выявление онкологических заболеваний преимущественно
на поздних стадиях заболевания, стадиях метастазирования
Скелет- третья по частоте локализация метастатического
поражения после легких и печени
Наличие костных метастазов как фактор ухудшения
качества жизни онкологических больных
Более длительный период выживаемости по сравнению с
метастазами в висцеральные органы
Невысокая эффективность лечения костных метастазов в
силу их труднодоступности
Следовательно, создание эффективных средств лечения
костных метастазов актуально, социально значимо и
экономически целесообразно.
Научно-техническая проблема
Активные компоненты
Ключевые
характеристики
препарата для лечения
метастазов:
• противоопухолевая
активность и
селективность действия;
• наличие
антирезорбтивной
активности;
• эффективное средство
адресной доставки
ФНО-альфа
ИФН-гамма
Векторная молекула
Алендроновая
кислота
Средства доставки
ALN-TNF-α
ALN-IFN-γ
1
2 3
Цель проекта
Цель проекта - разработка методов получения противоопухолевого
препарата направленного действия на основе фактора некроза опухоли
альфа, интерферона гамма и алендроновой кислоты– прототипа
принципиально нового лекарственного средства для лечения костных
метастазов
Технические требования
Препарат должен обеспечивать:
-накопление противоопухолевых цитокинов ФНО-альфа, ИФН-гамма в
области экспериментальной опухоли в кости до уровня, не менее чем в
2 раза превышающего концентрацию препаратов в крови;
-снижение содержания ФНО-альфа и ИФН-гамма в сыворотке крови в
течение часа после внутривенного введения не менее чем на 90%;
-торможение роста экспериментальных метастазов опухоли не менее
чем на 30%;
-статистически значимое ингибирование уменьшения объема костной
ткани не менее, чем на 25%.
Результаты
В рамках работ по этапу № 1 «Выбор направления исследований.
Подготовка исходных данных и образцов»
• Оформлен аналитический обзор «Разработка лекарственных препаратов
на основе бифосфонатов и биологически активных веществ пептидной
природы для лечения костных патологий, в том числе, костных метастазов
опухолей» (на 45 стр., 91 источник, из них – 71 источник за 2008-2014 гг.)
• Выполнены патентные исследования в соответствии с ГОСТ 15.011-96
• Обоснован выбор направления исследований, включая обоснование
выбора методов получения конъюгатов и конструкций, содержащих
алендроновую кислоту, ФНО-альфа и ИФН-гамма
• Выбрана и обоснована экспериментальная модель костных метастазов
• Разработана Программа экспериментальных исследований
• Наработана биомасса штаммов-продуцентов рекомбинантных ФНОальфа и ИФН-гамма человека
• Получены образцы рекомбинантных аналогов ФНО-альфа человека и
ИФН-гамма человека, по показателям качества соответствующие
проектам НД.
Метастазирование лейкоза L1210/1 в теменные кости мышей линии DBA/2
(внутривенное введение опухоли, 500 тыс.клеток)
Метастазы развиваются в
области
швов между костями,
нарушается структура костей.
Макропрепараты.
Теменные кости
здоровых мышей
Инвазия опухолевых клеток лейкоза L1210/1 в теменные кости мышей
Опухолевые клетки в метастазе
Опухолевые клетки
(окрашены в красный цвет)
прорастают в костную ткань
(окрашена в синий цвет),
ровная граница кости
становится изрезанной.
Окраска по методу
пикро-Маллори.
Получение биомассы штамма-продуцента и
образцов рчФНО-альфа
Электрофореграмма биомассы E. сoli SG
20050/pTNF311Δ, штамма-продуцента рчФНОальфа, в 12% ПААГ (А) и денситограмма образца 1
с.010814 (Б)
А
к 1
14,4 кДа
рчФНОальфа
Дорожки:
К – лизоцим, 14,4 kDa
1,2- образцы биомассы
E.Сol iSG20050/pTNF311 Δ
1 2
3 4
Дорожки:
1 – лизоцим (14,4
кДа);
2 –рчФНО-альфа,10
мкг/лунку;
3 - рчФНО-альфа, 40
мкг/лунку;
4 – белковый маркер
М31 (10 – 250 кДа)
+ лизоцим (14,4 кДа).
Б
2
Электрофореграмма рчФНОальфа с. 010814 в 12% ПААГ,
окрашивание Кумасси R-250
Пик,
соответствующий
белку рчФНОальфа
Молекулярная масса 16,9 кДа
Неспецифические примеси:
-ДНК- < 0,1 пкг/мкг
-белки штамма-продуцента-0,093
нг/мкг белка
-ЛПС - < 25 ЕЭ/106МЕ
-Специфическая активность0,8*108Ед/мг
Выводы
В ходе работ на первом этапе проекта завершены:
-работы по выбору направления исследований и подготовке
исходных данных для получения образцов активных
компонентов нового лекарственного средства;
- работы по получению экспериментальных образцов белковцитокинов– компонентов нового препарата.
На следующем этапе планируется:
- разработать методы конъюгирования алендроновой кислоты с
белками-цитокинами (ФНО-альфа, ИФН-гамма);
-получить экспериментальные образцы конъюгатов;
-провести исследования физико-химических и биологических
свойств;
-исследовать накопление конъюгатов в костной и опухолевой
ткани.
Достижение показателей результативности
Индикаторы
-Объем привлеченных внебюджетных средств -2,0 млн руб., из
них 300 тыс.руб.-средства Индустриального партнера (план-2,0
млн.руб./300 тыс.руб.)
-Число публикаций - 1 (1)
-Доля исследователей в возрасте до 39 лет – 53,6% (40%)
Показатели
-Средний возраст исследователей – участников проекта -40 лет
(41 год)
-Количество мероприятий по демонстрации и популяризации
результатов и достижений науки -2 (1)
-Число организаций, использовавших научное оборудование
сети центров коллективного пользования научным
оборудованием -1 (1)
Благодарю за внимание!