И ‐ /268

ИЗУЧЕНИЕ ВРЕМЕННОЙ ДИНАМИКИ ЭКСПРЕССИИ
РАННИХ ГЕНОВ C‐FOS И ZIF/268 В МОЗГЕ
ЛАБОРАТОРНЫХ МЫШЕЙ ПРИ ВЫРАБОТКЕ
УСЛОВНОГО РЕФЛЕКСА ЗАМИРАНИЯ
Сухоруков Григорий
Шарф Леа
Руководители:
Иванова А.А.
Ивашкина О.И.
НИИ Нормальной физиологии
им. П.К.Анохина, РАМН
Временная
динамика индукции
и спада уровня мРНК
и белка с-fos и zif/268
в клетках первичной
зрительной
коры
крыс (Zangenehpour,
Chaudhuri, 2002)
Увеличение уровня мРНК с-fos и
zif/268 в гиппокампе крыс после одной
сессии обучения в пространственной
версии водного лабиринта Морриса
(Guzowski et al., 2001)
Экспрессия белка zif/268 в дорзальном
гиппокампе крыс после обучения условнорефлекторному замиранию на звуковой
стимул (Lonergan et al., 2010)
Нейроанатомический субстрат
условно-рефлекторного замирания:
Кора
Контекст (УС)
Таламус
СА1
Гиппокамп
Зубчатая фасция
Миндалина
Гипоталамус
Боль (БС)
Цель работы:
Исследование временной динамики экспрессии генов
транскрипционных факторов с-Fos и Zif/268 в нейронах
гиппокампа мыши после однократного сеанса обучения в модели
условно-рефлекторного замирания
Задачи исследования:
1) Провести количественный анализ экспрессии генов
транскрипционных факторов с-Fos и Zif/268 в нейронах
гиппокампа через разные временные интервалы после сеанса
обучения условно-рефлекторному замиранию
2) Охарактеризовать динамику изменения уровня экспрессии
генов транскрипционных факторов с-Fos и Zif/268 в течение 1
суток после обучения
3) Определить минимальный временной интервал после
воздействия, за который уровень экспрессии каждого из
исследованных генов достигает максимального значения
Методика:
Иммуногистохимическое
выявление белковых
продуктов ранних генов cfos и zif/268
Выработка условного рефлекса замирания:
2 мин
обследование
камеры
2с
ЭКР
(1 мА)
30 с
СА1
Зубчатая фасция
ПК 0 0,25 0,5
ПК = пассивный контроль
(отсутствие обучения)
1
1,5
2
3
4
6
24
t, часы
(время до
извлечения
мозга)
Результаты: экспрессия Zif/268
в поле СА1 гиппокампа
#
n=3
n=5
n=3
n=3
# - p=0,09; критерий Манна-Уитни
n=3
n=5
n=4
n=5
n=5
n=3
n=3
Результаты: экспрессия Zif/268
в зубчатой фасции гиппокампа
n=3
n=5
n=3
n=3
n=3
n=5
n=4
n=5
n=5
n=3
n=3
Результаты: экспрессия c-Fos
в поле СА1 гиппокампа
*
*
n=3
n=7
n=4
n=4
n=4
* - p<0,05; критерий Манна-Уитни
n=5
n=3
n=4
n=3
n=4
n=3
Результаты: экспрессия c-Fos
в зубчатой фасции гиппокампа
*
n=7
n=4
n=4
n=4
* - p<0,05; критерий Манна-Уитни
n=5
n=3
n=4
n=3
n=4
n=3
n=3
Выводы:

Выявлены отличия во временной динамике экспрессии
транскрипционных факторов с-Fos и Zif/268: экспрессия
Zif/268 раньше достигает максимального уровня, чем
экспрессия с-Fos

Характер временной динамики экспрессии обоих ранних
генов различается в двух исследованных зонах
гиппокампа: в поле СА1 повышенный уровень
экспрессии сохраняется в течение длительного времени;
при этом в зубчатой фасции гиппокампа происходит
быстрое кратковременное увеличение интенсивности
экспрессии, и затем - ее быстрое снижение
Иммуногистохимия