Legionella Agar Base Основа агар Легионелла M809 Эту среду

advertisement
Legionella Agar Base
Основа агар Легионелла
M809
Эту среду со специальными добавками используют для культивирования легионелл.
Состав**:
Ингредиенты
Дрожжевой экстракт
Уголь активированный
Буфер ACES
-Кетоглютарат
Калия гидроксид
Агар-агар
грамм/литр
10,00
1,50
6,00
1,00
1,50
17,00
Конечное значение рН (при 25ºС) 6,9 ± 0,2
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 18,5 г порошка в 500 мл дистиллированной воды. Стерилизовать
автоклавированием при 1,1 атм (121ºС) в течение 15мин. Не подогревать до стерилизации.
Остудить до 50ºС и асептично добавить растворенное в воде содержимое 1 пузырька с
ростовой добавкой для легионелл (FD016) и содержимое 1 пузырька с селективной
добавкой для легионелл (FD017). Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки
Петри. Во время розлива осторожно перемешивать, чтобы частицы угля распределялись
равномерно.
Принцип и оценка результата:
Эту среду вначале называли агаром F-G. Ее модифицировали Feely и соавт. (1), заменив
крахмал на активированный уголь и гидролизат казеина на дрожжевой экстракт, что
способствовало улучшению выделения Legionella pneumophila (2). Pasculle и соавт. (3)
сообщил, что добавление буфера ACES (N-2-ацетамидо-2-аминоэтан сульфокислота)
повышает питательную ценность среды. Edelstein (4) для повышения чувствительности
среды предложил добавить в ее состав -кетоглютарат.
Среда содержит дрожжевой экстракт, который служит источником необходимых для
роста легионелл азотистых питательных веществ. -Кетоглютарат удовлетворяет
специфические питательные потребности легионелл. Активированный уголь нейтрализует
токсические вещества, образующиеся в процессе роста бактерий или стерилизации среды.
ACES придает буферные свойства среде, препятствуя резким сдвигам рН и удерживая его
значения в зоне оптимума для легионелл. Антибиотики, входящие в состав добавки,
подавляют рост разнообразных контаминирующих бактерий и грибов.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий серый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,7%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Среда имеет черную окраску, непрозрачна, если в чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25ºС водный раствор (3,7% вес/об) имеет рН 6,9 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 48-72 ч при 35ºС.
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
Рост
Цвет колоний
Legionella pneumophila (33153)
Хороший или обильный
Legionella dumoffii (33343)
Хороший или обильный
Светло-голубые или
серо-белые
Светло-голубые или
серо-белые
Ссылки:
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25ºС. Использовать до даты, указанной на
этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8ºС.
Download