по применению изделия медицинского назначения «Набора реагентов ИНСТРУКЦИЯ

ИНСТРУКЦИЯ
по применению изделия медицинского назначения «Набора реагентов
«Трипсина раствор для культур клеток»»
1. Назначение
1.1. «Трипсина раствор» (Регистрационный номер _____, дата регистрации «____»__________200__г.) предназначен для диспергирования тканей и
органов человека и животных, для отделения клеток от субстрата.
1.2.«Трипсина раствор» может быть использован для культур клеток в санитарно-профилактических, лечебно-профилактических и научно-исследовательских
учреждениях при диагностике in vitro вирусных инфекций и в вирусологических исследованиях.
2. Характеристика «Трипсина раствора»
2.1.«Трипсина раствор» разрушает связи между клетками при дезагрегации
тканей и органов млекопитающих, а также при диспергировании монослойных культур клеток. Основным действующим веществом «Трипсина раствора» является протеолитический фермент трипсин.
2.2. «Трипсина раствор» представляет собой смесь трипсина и неорганических солей, растворенную в воде очищенной или в воде для инъекций, стерилизованную методом мембранной фильтрации с использованием фильтров с конечным
размером пор 0,22 мкм.
Состав. В 1 л раствора трипсина содержатся следующие ингредиенты:
№
п/п
1
Наименование ингредиента
Натрий хлористый
Кол-во
вг
8,0
2
Калий хлористый
0,2
3
1,45
4
Натрий фосфорнокислый двузамещенный
12-водный
Калий фосфорнокислый однозамещенный
5
Трипсин
2,5
6
Вода очищенная или вода для иньекций
0,2
до 1 л
3. Аналитические характеристики
«Трипсина раствор» должен иметь буферную емкость не менее 1,5 мл. Содержание хлор-иона – от 4,53 до 5,53 г/л. Раствор должен быть не токсичным для
клеток, обладать протеолитической активностью – не менее 96 ЕД/мл, обеспечивать
полное отделение клеток от субстрата и выход из 1 г ткани не менее 30 млн жизнеспособных клеток.
4.Меры предосторожности
При работе с набором не требуется соблюдение специальных мер по
технике безопасности.
5.Оборудование и материалы
«Трипсина раствор» выпускают в бутылках стеклянных по 450 мл, которые
герметически укупорены резиновыми пробками и завальцованы алюминиевыми
колпачками. Для работы с набором реагентов необходимы асептические условия и стерильные материалы (культуральная посуда, пипетки, пробки и др.)
6. Способ применения
Перед использованием раствор трипсина (0,25%) необходимо подогреть на
водяной бане до 37 0С. Его добавляют в трипсинизационную колбу к измельченной и
отмытой от форменных элементов крови ткани. Диспергирование производят на
магнитной мешалке в течение нескольких циклов по 15-20 мин до полного истощения ткани. После каждого цикла трипсинизации надосадочную жидкость фильтруют
через двойной слой стерильной марли и центрифугируют при 1000 об/мин в течение
10 мин. Полученный осадок ресуспендируют в питательной среде, в камере Горяева
определяют концентрацию и жизнеспособность клеток.
Для отделения клеток от субстрата из флакона с монослойной культурой клеток удаляют питательную среду, во флакон добавляют раствор трипсина подогретый
до 37 0С в объеме, обеспечивающем полное покрытие монослоя. Флаконы выдерживают в термостате при температуре от 35 0С до 37 0С в течение 2-5 мин. Затем раствор трипсина осторожно удаляют, а флакон встряхивают.
7. Условия хранения и транспортирования
Набор хранят при температуре от 2 до 8 0С в защищенном от прямых солнечных лучей месте в течение всего срока годности (6 месяцев).
Транспортируют при температуре от 2 до 8 0С всеми видами крытого транспорта.
Рекламации направлять на предприятие-изготовитель ФГУП «Предприятие по
производству бактерийных и вирусных препаратов Института полиомиелита и вирусных энцефалитов им. М.П. Чумакова РАМН», 142782, Московская обл., Ленинский р-н, поселок сельского типа Институт Полиомиелита, 27 км.Киевского шоссе,
тел. (495) 439-90-02, факс (495) 439-93-21.