Исследование агрегационной активности тромбоцитов

Исследование агрегации
тромбоцитов
Д.м.н., профессор Кочетов А.Г.
Ассистент Лянг О.В.
Механизмы предупреждения кровопотери
Повреждение сосудистой
стенки
Спазм сосуда
Первичный
(тромбоцитарный)
гемостаз
Вторичный (плазменный)
гемостаз
Остановка кровотечения
Тромборезистентность эндотелия
Активированные
факторы
свертывания
Тканевой
активатор
плазминогена
Простациклин
PgI2
Ингибиторы
протеаз
Тромбомодулин
ЭНДОТЕЛИЙ
Тц
Тц
Тц
Тц
Строение тромбоцитов
• Тромбоциты – плоские
безъядерные клетки, диаметр 1-5
мкм
• Образуются из мегакариоцитов
костного мозга
• Содержание тромбоцитов в крови здорового человека
составляет 180-420 тыс. в 1 мл
• Циркуляция в кровотоке – от 5 до 11 суток
• Разрушение происходит в печени и селезенке
Строение тромбоцитов
«Электронноплотные» гранулы
АТФ, АДФ, ГТФ, ГДФ, серотонин, Са2+
α-гранулы
трансформирующий ростовой фактор,
фибриноген, фактор V, фактор VIII, калликреин,
α2-антиплазмин, тромбоспондин, гистамин,
тромбоцитарный фактор 4
Лизосомы
кислые гидролазы
1 - гранулы
2 - микротрубочки
3 - вакуоли
Функции тромбоцитов (1)
1. Тромбостатическая:
• Поддержание вазоспазма путем высвобождения
вазоактивных веществ, содержащихся в плотных и
α-гранулах тромбоцитов;
• Образование тромбоцитарной пробки за счет
адгезии к субэндотелиальному слою и
образования агрегатов;
• Участие тромбоцитарных факторов в процессе
свертывания крови и в регуляции фибринолиза
Функции тромбоцитов (2)
2. Ангиотрофическая – способность поддерживать
нормальную структуру и функцию стенок
микрососудов, в том числе жизнеспособность и
репарацию эндотелиальных клеток,
фагоцитирующих тромбоциты;
3. Репаративная - стимуляция процесса репарации в
местах повреждения сосудистой стенки за счёт
выделения из подвергшихся адгезии тромбоцитов
ростовых факторов.
Этапы образования тромбоцитарного тромба
Повреждение сосудистой стенки
Активация плазменного звена
системы гемостаза
Выброс клеточных медиаторов
(адреналин, АДФ, тромбопластин)
Контактная активация
(коллаген)
Активация тромбоцитов
(изменение формы)
Адгезия тромбоцитов
Обратимая агрегация тромбоцитов
Реакция дегрануляции
(высвобождения)
Необратимая агрегация
Адгезия тромбоцитов
Адгезия тромбоцитов осуществляется
за счет взаимодействия
специфических рецепторов мембран
тромбоцитов (гликопротеина Ib, IIb,
IIIа), коллагена, фактора Виллебранда
и некоторых других белков
(тромбоспондин, фибронектин).
Фактор Виллебранда образует
мостики между коллагеном
субэндотелия сосудов и рецепторами
(Ib) тромбоцитов.
Агрегация тромбоцитов
Агрегация тромбоцитов между собой опосредуется фибриногеном; рецептором служит
гликопротеид IIb/IIIa.
Эндотелий
Сильные агонисты (тромбин, коллаген, АДФ и
арахидоновая кислота в высоких концентрациях,
фактор активации тромбоцитов)
Каскад арахидоновой кислоты
Эндотелиальная клетка
Фосфолипиды мембраны
Арахидоновая кислота
Активность фосфолипазы 
Эндоперекиси
простагландинов G2, H2
Цитоплазма Са2+ 
Р
Е
Ц
Е
П
Т
О
Р
Ы
цАМФ
простациклинсинтетаза
Аденилатциклаза 
агонисты
Р
Е
Ц
Е
П
Т
О
Р
Ы
Эйкозопентаеновая кислота
циклооксигеназа
п
р
п
р
о
т
а
ц
и
к
л
и
н
п
ро
оссст
та
ац
ци
ик
кл
ли
ин
н
Простациклин

Аденилатциклаза 
агрегация
агрегация

Тромбоксан
А2
т
т
р
о
м
б
о
к
а
н
А
2
тр
ро
ом
мб
бо
ок
кссса
ан
нА
А
2
2
тромбоксансинтетаза
цАМФ
Цитоплазма Са
2+

Эндоперекиси
простагландинов G2, H2
циклооксигеназа
Активность фосфолипазы 
Эйкозотетраеновая кислота
Арахидоновая кислота
Фосфолипиды мембраны
Тромбоцит
Рис.2 Источники и продукты реализации «каскада арахидоновой
Для чего исследуют агрегационную
способность тромбоцитов?
Оценка тромбоцитарного гемостаза
Мониторинг антиагрегантной терапии
Методы исследования агрегационной
способности тромбоцитов
Качественные
Количественные
Качественный экспрессметод визуальной оценки
на предметном стекле по
А.С. Шитиковой
Турбидиметрический
оптический метод по
Борну и О’Брайену
Качественный
пробирочный метод по
R.M. Biggs
Флуктуационный
метод по З.А
Габбасову
Гемолизат-агрегационный
тест по З.С. Баркагану, Б.Ф.
Архипову и В. М.
Кучерскому
Импедансная
агрегатометрия
Люминисцентная
агрегатометрия
«Золотой
стандарт»
Турбидиметрический метод исследования
агрегации тромбоцитов
1000 об/мин, 10 минут
Богатая тромбоцитами плазма
3000 об/мин, 10 мин
Бедная тромбоцитами плазма
3,8% цитрат натрия
Кровь-Цитрат 9:1
200 мкл плазмы (+25 мкл индуктора)
Принцип метода
Светопропускание 100%
Бедная тромбоцитами плазма
Регистрируются изменения
светопропускания богатой
тромбоцитами плазмы после
добавления индуктора агрегации
Светопропускание 0%
Богатая тромбоцитами плазма
15
30
25
3
10
20
15
5
10
2
5
0
0
0 – неактивированные тромбоциты
1 – фаза активации
2 – фаза индуцированной агрегации
3 – фаза дезагрегации с последующей стабилизацией
0
1
Время, мин
Светопропускание, %
Низкая концентрация индуктора
агрегации
3
5.0
30
25
4.0
20
3.0
15
2.0
1.0
10
2
5
0
0
0 – неактивированные тромбоциты
1 – фаза активации
2 – фаза индуцированной агрегации
3 – фаза высвобождения с последующей стабилизацией
0
1
Время, мин
Светопропускание, %
Высокая концентрация индуктора
агрегации
Флуктуационный метод
• Основан на анализе флуктуаций светопропускания,
вызванных случайным изменением числа частиц в
оптическом канале
• Относительная дисперсия таких флуктуаций
пропорциональна среднему радиусу агрегатов
• Метод отличается высокой чувствительностью, что
делает его пригодным для исследования
спонтанной агрегации и агрегации под
действием низких концентраций индукторов
15
30
25
10
2
20
15
5
3
10
5
0
0, 1
0
Время, мин
0 – неактивированные тромбоциты
1 – фаза активации
2 – фаза индуцированной агрегации, увеличение числа и размера агрегатов
3 – фаза дезагрегации с последующей стабилизацией, уменьшение числа и
размера агрегатов
Светопропускание, %
Интерпретация R-кривой (кривой размера агрегатов)
Низкая концентрация индуктора агрегации
30
5.0
3
4.0
2
25
20
3.0
15
2.0
10
1.0
5
0
0, 1
0
Время, мин
0 – неактивированные тромбоциты
1 – фаза активации
2 – фаза индуцированной агрегации, увеличение числа и размера агрегатов
3 – фаза высвобождения с последующей стабилизацией, уменьшение числа и
увеличение размера агрегатов
Светопропускание, %
Интерпретация R-кривой (кривой размера агрегатов)
Высокая концентрация индуктора агрегации
Проблема стандартизации
• Ни один из вышеперечисленных методов не
является унифицированным и
стандартизованным
• Каждой лаборатории рекомендуется
устанавливать свои референсные пределы, в
зависимости от прибора и реагентов
• В 1999-2007 г. Кочетовым А.Г. и соавт. была
проведена работа по стандартизации данного
метода на агрегометре БИОЛА
Исследование функциональной активности
тромбоцитов
Без добавления
индуктора
агрегации
Исследование
агрегации
Спонтанная
агрегация
Спонтанная с
холодовой
активацией
АДФ
(4 разведения)
Индуцированная
агрегация
Коллаген
Ристомицин
Оценка агрегационной
чувствительности
тромбоцитов
Оценка агрегационной
активности тромбоцитов
Оценка
выраженности
эндотелиальной
деструкции
Стандартные агрегатограммы, характеризующие
агрегационную активность тромбоцитов
10
10
%
60
50
8
50
8
R
6
Cлияние фазы
высвобождения с фазой
индуцированной агрегации
40
30
40
6
Фаза
высвобождения
4
4
20
20
2
0
30
2
10
0
0
Фаза индуцированной
агрегации
10
0
АДФ 10 мкг/мл-индуцированная
агрегация
АДФ 5 мкг/мл-индуцированная
агрегация
Референсные значения: амплитуда
кривой светопропускания 50-80%,
кривая однофазная, необратимая
(наличие фазы высвобождения,
слияние ее с фазой индуцированной
агрегации)
Референсные значения: амплитуда
кривой светопропускания 50-80%,
кривая двухфазная (реже
однофазная), необратимая (наличие
фазы высвобождения,)
Стандартные агрегатограммы, характеризующие
агрегационную чувствительность тромбоцитов
20
20
1.0
R
15
0.8
Фаза дезагрегации
15
25
20
6
10
10
4
0.4
5
0
8
30
10
0.6
0.2
15
10
%
2
R
5
5
Фаза
индуцированной
агрегации
0
0
0
Спонтанная агрегация
Референсные пределы: амплитуда
R-кривой не более 1,5 у.е., кривой
светопропускания – не более 5 %.
АДФ 1,25 мкг/млиндуцированная агрегация
Референсные пределы:
амплитуда кривой
светопропускания 10-40 %,
кривая однофазная,
резкообратимая (отсутствие
фазы высвобождения)
10
5
%
0
15
АДФ 2,5 мкг/млиндуцированная агрегация
Референсные пределы:
амплитуда кривой
светопропускания 10-40 %,
кривая однофазная,
(не)обратимая (отсутствие
фазы высвобождения)
0
Стандартные агрегатограммы, косвенно
характеризующие функцию эндотелия
35
70
8.0
60
6.0
8
25
50
40
4.0
30
20
2.0
6
20
4
15
10
2
5
10
0
0
Ристомицин-индуцированная
агрегация
Косвенно характеризует активность фактора
Виллебранда
Референсные пределы: амплитуда кривой
светопропускания 50-80%, кривая
однофазная, необратимая
30
0
0
Коллаген-индуцированная агрегация
Характеризует целостность
эндотелиального слоя
Референсные пределы: амплитуда кривой
светопропускания 30-60 %, кривая
однофазная, необратимая
Агрегатограммы, характеризующие ПОВЫШЕННУЮ
агрегационную ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ тромбоцитов
25
40
20
5.0
2.5
40
20
30
15
4.0
30
3.0
1.5
20
10
15
2.0
20
2.0
10
1.0
10
5
0
5
1.0
10
0.5
0
0
0
0
АДФ 1,25 мкг/млиндуцированная агрегация
АДФ 2,5 мкг/млиндуцированная агрегация
Однофазная СЛАБОобратимая
с малой степенью
светопропропускания без
фазы стабилизации
Однофазная необратимая с
повышенной степенью
светопропропускания
0
Низкотемпературная
активация
Повышение амплитуды
обеих кривых
Агрегатограммы, характеризующие ПОВЫШЕННУЮ
агрегационную АКТИВНОСТЬ тромбоцитов
3.5
80
80
3.0
3.0
2.5
60
2.0
60
2.5
2.0
40
1.5
1.0
1.0
0
3.0
60
2.5
50
2.0
40
1.5
30
1.0
20
0.5
10
20
0.5
0
70
40
1.5
20
0.5
3.5
0
0
0
0
АДФ 10 мкг/мл –
высокая концентрация
АДФ 5 мкг/мл – средняя
концентрация
АДФ 2,5мкг/мл – низкая
концентрация
ПОВЫШЕНА –повышение
амплитуды кривой
светопропускания
ПОВЫШЕНА - повышение
амплитуды кривой
светопропускания, слияние
фазы высвобождения с
фазой индуцированной
агрегации
ПОВЫШЕНА – выраженное
повышение амплитуды
кривой светопропускания,
наличие фазы
высвобождения, слияние ее
с фазой индуцированной
агрегации
Агрегатограммы, характерные для состояния
эндотелиальной дисфункции (деструкции)
2.5
60
8.0
80
2.0
50
60
6.0
40
30
4.0
1.5
40
1.0
20
20
0.5
2.0
10
0
0
0
0
Коллаген-индуцированная
агрегация
Ристомицининдуцированная агрегация
ПОВЫШЕНА – повышение
амплитуды кривой
светопропускания
ПОВЫШЕНА – повышение
амплитуды кривой
светопропускания
Антиагрегатные
препараты
Ингибиторы циклооксигеназы (ЦОГ)
Ацетилсалициловая
кислота
(аспирин,
тромбо-асс,
кардиомагнил, кардиаск), индобуфен, трифлюзал
Ацетилсалициловая кислота – «золотой стандарт»
антитромбоцитарной терапии
ТРОМБОЦИТ
ЦОГ
Ацетилсалициловая
кислота
Арахидоновая
кислота
Эндоперекиси
Тромбоксан А2
ацекардол,
Антагонисты рецептора АДФ Р2Y12
Необратимые ингибиторы активности P2Y12 - клопидогрел (плавикс),
тиклопидин (тиклид), празугрел
Обратимые антагонисты — AZD6140 (для перорального применения) и
ARC69931МХ (кангрелор) для внутривенного использования
ТРОМЬТ
ТРОМБОЦИТ
АДФ
Ингибиторы цАМФ-фосфодиэстеразы
Дипиридамол (курантил), пентоксифиллин (трентал)
ТРОМБОЦИТ
АТФ
цАМФ
5-АМФ
ТРОМБОЦИТ
Аденилатциклаза
Дипиридамол
Фосфодиэстераза
Блокаторы рецепторов к фибриногену
GP IIb/IIIa
Для внутривенного введения — абсиксимаб (Реопро), эптифибатид
(интегрилин), тирофибан (агграстат)
Для перорального применения —ксимелофибан, орбофибан, сибрафибан,
лотрафибан и др. Исследования не подтвердили клиническую
эффективность этих препаратов.
ТРОМБОЦИТ
Фибриноген
Цель антиагрегантной терапии –
добиться блокирования реакции
высвобождения
Аспириноподобное снижение агрегационной
активности тромбоцитов
за счет блокирования пула хранения
20
35
40
8.0
10
12
30
25
30
6.0
4.0
2.0
0
8
20
15
8
10
20
6
6
15
4
4
10
2
2
5
0
0
0
10
5
10
0
0
АДФ 10 мкг/мл – высокая
концентрация
АДФ 5 мкг/мл – средняя
концентрация
АДФ 2,5 мкг/мл – низкая
концентрация
СНИЖЕНА – отсутствие
фазы высвобождения
СНИЖЕНА – отсутствие
фазы высвобождения
БЕЗ ИЗМЕНЕНИЙ
Аспириноподобное снижение агрегационной
активности тромбоцитов
за счет блокирования пула хранения
25
10
8
15
6
10
4
20
10
20
8
6
20
15
15
10
10
4
10
5
5
5
2
5
2
0
0
0
0
0
0
АДФ 10 мкг/мл – высокая
концентрация
АДФ 5 мкг/мл – средняя
концентрация
АДФ 2,5 мкг/мл –
низкая концентрация
СНИЖЕНА – отсутствие
фазы высвобождения,
наличие фазы
дезагрегации
СНИЖЕНА – отсутствие
фазы высвобождения,
наличие фазы
дезагрегации
БЕЗ ИЗМЕНЕНИЙ
РЕКОМЕНДУЕТСЯ СНИЖЕНИЕ ЧАСТОТЫ ПРИЕМА ИЛИ ДОЗЫ АНТИАГРЕГАНТА
Фосфодиэстеразоподобное (дипиридамолподобное) снижение
агрегационной активности тромбоцитов
за счет блокирования пула хранения на средние дозы индуктора
15
20
30
50
10
10
25
8
20
6
15
4
10
2
5
40
10
30
20
5
15
8
6
10
4
5
2
10
0
0
0
-2
-5
0
0
0
АДФ 10 мкг/мл – высокая
концентрация
АДФ 5 мкг/мл – средняя
концентрация
АДФ 2,5 мкг/мл – низкая
концентрация
СОХРАНЕНА - слияние
фазы высвобождения с
фазой индуцированной
агрегации
СНИЖЕНА – отсутствие
фазы высвобождения
БЕЗ ИЗМЕНЕНИЙ
Аспиринорезистентность
Клиническая
аспиринорезистентность
• Развитие сосудистых осложнений у пациентов,
длительно принимающих аспирин
• Частота 10-20%
Лабораторная
(биохимическая)
аспиринорезистентность
• Неспособность подавлять агрегацию тромбоцитов
за счет недостаточного ингибирования продукции
тромбоксана А2, выявляемая посредством
лабораторных методов
• Частота 5-45%
Причины развития аспиринорезистентности
Биодоступность
Взаимодействие
тромбоцитов с
другими клетками
крови
Курение,
гиперхолестеринемия,
физическая нагрузка,
стресс и пр.
Функциональное
состояние
тромбоцитов
Единичныме
нуклеотидные
полиморфизмы
Аспиринорезистентность
10
70
15
50
50
60
8
40
40
50
6
10
10
30
4
30
30
40
20
5
20
5
20
10
2
10
10
0
0
0
0
0
0
АДФ 10 мкг/мл –
высокая концентрация
АДФ 5 мкг/мл – средняя
концентрация
АДФ 2,5 мкг/мл –
низкая концентрация
СОХРАНЕНА – слияние
фазы высвобождения с
фазой индуцированной
агрегации
СОХРАНЕНА – наличие
фазы высвобождения
ПОВЫШЕНА –
повышение амплитуды,
наличие фазы
высвобождения
Рекомендации по проведению мониторинга
антиагрегантной терапии
Перед исследованием:
•
Отмена приема нестероидных противовоспалительных препаратов за 1,5
недели перед исследованием
•
Исследование концентрации тромбоцитов в цельной крови перед
выполнением агрегатограммы
Агрегатограмма выполняется:
•
•
•
•
До начала терапии
Через 1-3 дня после начала терапии
1 раз в месяц в первые 3 месяца
1 раз в 3 месяца в дальнейшем
При выявлении резистентности:
•
•
Смена препарата или добавление нового (для необратимых
антиагрегантов): асприн + клопидогрел
Увеличение дозы (для обратимых антиагрегантов)
Клинические примеры
Пациент В., 1964 г.р.
Спонтанная агрегация.
1-ф.необр. 0,58%, 1,08 у.е. (N)
Низкотемпературная активация.
1-ф. необр. 1,18 %, 1,03 у.е. (N)
20
Коллаген
1-ф. необр. 52,9 % (N)
Ристомицин
1-ф. необр. 65,3 % (N)
20
1.0
7.0
1.0
50
8.0
60
6.0
15
0.8
0.8
40
15
0.6
0.6
4.0
10
4.0
10
3.0
5
0.2
0.2
20
10
0
0
0
АДФ 10 мкг/мл
1-ф. необр. 57,9% (N)
10
8
50
10
40
8
6
30
6
4
20
4
2
10
2
0
0
0
40
20
10
0
АДФ 1,25 мкг/мл
2-ф. необр. 32,6 % (↑)
8.0
8
0
30
1. Стандартные кривые низкотемпературной и спонтанной
агрегации.
2. Стандартная кривая АДФ 10 мкг/мл-индуцированной агрегации.
3. Снижение амплитуды кривой АДФ 5 мкг/мл-индуцированной
агрегации.
4. Повышение амплитуды кривой АДФ 2,5 мкг/мл-индуцированной
агрегации.
5. Наличие фазы высвобождения, отсутствие фазы дезагрегации по
кривой АДФ 1,25 мкг/мл-индуцированной агрегации.
6. Стандартная кривая Коллаген-индуцированной агрегации.
7. Стандартная кривая Ристомицин-индуцированной агрегации.
25
30
6.0
20
6
20
4.0
15
4
10
10
2
2.0
5
0
0
0
ЗАКЛЮЧЕНИЕ:
30
40
10
0
0
АДФ 5 мкг/мл
1-ф. необр. 46,2 % (↓)
АДФ 2,5 мкг/мл
1-ф. необр. 41,8% (↑)
2.0
1.0
0
30
20
2.0
5
0
50
40
30
0.4
0.4
10
6.0
5.0
0
Результаты агрегатограммы свидетельствуют о повышенной
агрегационной чувствительности тромбоцитов.
Клинические примеры
Пациентка Ш., 1949 г.р. Принимает Тромбо-асс, 100 мг.
Спонтанная агрегация.
1-ф. необр. 2,02 %, 1,15 у.е. (N)
Низкотемпературная активация.
1-ф.необр. 1,07 %, 1,06 у.е. (N)
Коллаген
1-ф. необр. 40,6 % (N)
20
20
Ристомицин
1-ф. необр. 65,9 % (N)
40
1.0
7.0
1.0
0.8
8
6.0
30
15
15
0.8
0.6
10
0.4
40
20
10
0.4
0.2
3.0
10
2
0.2
4.0
30
4
5
5
2.0
1.0
0
0
0
АДФ 10 мкг/мл
1-ф. необр. 42,0% (↓)
12
10
10
25
30
6
20
6
15
20
4
10
4
10
2
5
2
0
0
0
АДФ 2,5 мкг/мл
1-ф. слабообр. 29,6% (N)
25
10
8
6
15
5
10
2
5
0
0
20
1. Стандартные кривые низкотемпературной и спонтанной
агрегации.
2. Снижение амплитуды кривой АДФ 10 мкг/мл-индуцированной
агрегации.
3. Снижение амплитуды кривой АДФ 5 мкг/мл-индуцированной
агрегации.
4. Стандартная кривая АДФ 2,5 мкг/мл-индуцированной агрегации.
5. Пологая фаза дезагрегации кривой АДФ 1,25 мкг/млиндуцированной агрегации.
6. Стандартная кривая Коллаген-индуцированной агрегации.
7. Стандартная кривая Ристомицин-индуцированной агрегации.
15
20
4
0
АДФ 1,25 мкг/мл
1-ф. слабообр. 24,6 % (↑)
10
0
ЗАКЛЮЧЕНИЕ:
30
8
8
10
0
АДФ 5 мкг/мл
1-ф. необр. 34,5 % (↓)
40
20
0
0
0
50
5.0
6
0.6
60
10
5
0
0
-5
Результаты агрегатограммы свидетельствуют об аспириноподобном
снижении агрегационной активности тромбоцитов на фоне
незначительного повышения агрегационной чувствительности.
Клинические примеры
Пациентка А., 58 лет.
Спонтанная агрегация
1-ф.необр. 0,32%, 1,1 у.е. (N)
Низкотемпературная активация
1-ф.необр. 0,39 %, 1,49 у.е. (N)
Ристомицин
1-ф. необр. 76,1 % (N)
20
3.0
20
Коллаген
1-ф. необр. 41,1% (N)
40
10
1.0
7.0
2.5
15
15
0.8
8
30
6.0
2.0
70
60
5.0
50
4.0
40
3.0
30
2.0
20
1.0
10
6
0.6
10
1.5
10
20
4
0.4
1.0
10
5
5
2
0.5
0.2
0
0
0
АДФ 10 мкг/мл
1-ф. слабообр. 43,0% (↓)
0
0
0
АДФ 5 мкг/мл
1-ф. слабообр. 43,6 % (↓)
12
12
0
0
ЗАКЛЮЧЕНИЕ:
40
40
10
10
30
30
8
8
6
6
20
20
4
4
10
10
2
2
0
0
АДФ 2,5 мкг/мл
1-ф. обр 20,0% (N)
АДФ 1,25 мкг/мл
1-ф. обр. 1,31% (↓)
20
20
10
4.0
15
15
8
6
0
0
3.0
10
10
2.0
4
5
1.0
5
2
0
1. Стандартные кривые спонтанной и низкотемпературной
агрегации.
2. Снижение амплитуды, наличие фазы дезагрегации по кривым
АДФ 10 и 5 мкг/мл-индуцированной агрегации.
3. Стандартная кривая АДФ 2,5 мкг/мл-индуцированной агрегации.
4. Снижение амплитуды по кривой АДФ 1,25 мкг/млиндуцированной агрегации.
5. Стандартная кривая Коллаген-индуцированной агрегации.
6. Стандартная кривая Ристомицин-индуцированной агрегации.
0
0
0
Результаты агрегатограммы свидетельствуют о снижении
агрегационной активности тромбоцитов.
Клинические примеры
Пациентка Т., 1945 г.р. Принимает кардиомагнил, трентал, берлитион, глицин.
Спонтанная агрегация
1-ф.необр. 0,30%, 1,20 у.е. (N)
Низкотемпературная активация
1-ф. необр. 2,73 %, 0,85 у.е. (N)
20
1.1
1.0
1.0
Ристомицин
1-ф. необр. 69,8 % (N)
20
6.0
8.0
0.8
15
Коллаген
1-ф. обр. 22,9 % (↓)
20
15
60
5.0
50
0.8
6.0
0.6
10
0.6
15
10
0.4
3.0
4.0
0.4
10
5
5
2.0
0
0
5
0
30
15
20
10
4
4
10
5
2
2
0
0
АДФ 2,5 мкг/мл
1-ф. обр. 25,1% (N)
0
АДФ 1,25 мкг/мл
1-ф. обр. 25,1 % (N)
25
10
6
0
0
8
6
8
10
ЗАКЛЮЧЕНИЕ:
20
0
20
1.0
АДФ 5 мкг/мл
1-ф. обр. 20,9 % (↓)
10
6
30
2.0
0
0
АДФ 10 мкг/мл
1-ф. обр. 37,1% (↓)
8
40
0.2
0.2
0
4.0
25
10
20
20
8
15
6
1. Стандартные кривые низкотемпературной и спонтанной
агрегации.
2. Снижение амплитуды, отсутствие фазы высвобождения, наличие
фазы дезагрегации по кривым АДФ 10 и 5 мкг/млиндуцированной агрегации.
3. Стандартная кривая АДФ 2,5 мкг/мл-индуцированной агрегации.
4. Стандартная кривая АДФ 1,25 мкг/мл-индуцированной
агрегации.
5. Снижение амплитуды, наличие фазы дезагрегации по кривой
Коллаген-индуцированной агрегации.
6. Стандартная кривая Ристомицин-индуцированной агрегации.
15
10
4
10
4
2
5
2
5
0
0
0
0
Результаты агрегатограммы свидетельствуют об аспириноподобном
снижении агрегационной активности тромбоцитов за счет
блокирования пула хранения
Клинические примеры
Пациентка К., 61 год. Принимает Тромбо-асс, 100 мг.
Спонтанная агрегация
1-ф.необр. 0,35%, 1,12 у.е. (N)
Низкотемпературная активация
1-ф. необр. 3,96 %, 1,67 у.е. (↑)
20
1.1
20
Коллаген
1-ф. необр. 87,4 % (↑)
Ристомицин
1-ф. необр. 76,9% (N)
3.5
80
1.5
3.0
1.0
15
0.8
1.0
60
2.0
10
10
1.5
0.4
8
60
15
2.5
0.6
10
0.5
5
40
20
2
20
5
40
4
1.0
0.5
0.2
6
0
0
-2
-20
0
0
0
0
АДФ 10 мкг/мл
1-ф. необр. 86,7% (↑)
АДФ 5 мкг/мл
2-ф. необр. 67,5 % (N)
80
60
10
8.0
50
60
8
40
6.0
6
30
40
4.0
4
20
2.0
0
12
20
2
10
0
0
0
АДФ 2,5 мкг/мл
1-ф. обр. 50,6% (↑)
АДФ 1,25 мкг/мл
1-ф. обр. 23,7 % (N)
50
10
40
8
20
10
15
8
30
6
6
4
10
20
4
2
0
2
5
0
0
10
0
0
0
ЗАКЛЮЧЕНИЕ:
1. Стандартные кривые спонтанной агрегации.
2. Повышение амплитуды R-кривой низкотемпературной
агрегации.
3. Повышение амплитуды кривой АДФ 10 мкг/мл-индуцированной
агрегации.
4. Стандартная кривая АДФ 5 мкг/мл-индуцированной агрегации.
5. Повышение амплитуды кривой АДФ 2,5 мкг/мл-индуцированной
агрегации.
6. Стандартная кривая АДФ 1,25 мкг/мл-индуцированной
агрегации.
7. Повышение амплитуды кривой Коллаген-индуцированной
агрегации.
8. Стандартная кривая Ристомицин-индуцированной агрегации.
Результаты агрегатограммы свидетельствуют о неэффективности
применяемой антиагрегантной терапии (сохранение фазы
высвобождения на высоких и средних концентрациях индуктора
агрегации АДФ). Рекомендуется коррекция антиагрегантной
терапии.
Клинические примеры
Пациент Н., 63 года. Состояние после ОНМК.
Спонтанная агрегация
1-ф.необр. 0,74 %, 1,12 у.е. (N)
Низкотемпературная активация
1-ф. необр. 4,79 %, 1,12 у.е. (N)
20
20
15
0.8
Ристомицин
1-ф. необр. 88,5 % (↑)
10
1.1
1.0
Коллаген
1-ф. необр. 71,5 % (↑)
60
15
1.0
8
80
8
60
6
0.8
0.6
10
10
0.6
40
4
6
4
40
20
0.4
5
0.2
2
0.4
5
0
0.2
0
0
0
0
2
20
0
0
0
-2
-20
АДФ 10 мкг/мл
1-ф. необр. 97,7% (↑)
АДФ 5 мкг/мл
1-ф. необр. 70,4 % (N)
10
10
60
80
8
60
6
40
4
8
40
6
4
20
2
20
0
0
2
0
0
-2
АДФ 2,5 мкг/мл
1-ф. необр. 81,5% (↑)
АДФ 1,25 мкг/мл
1-ф. необр. 36,2 % (↑)
80
30
10
60
4.0
20
40
5
2.0
10
20
0
0
0
0
-10
-2.0
-20
ЗАКЛЮЧЕНИЕ:
1. Стандартные кривые низкотемпературной и спонтанной
агрегации.
2. Повышение амплитуды кривой АДФ 10 мкг/мл-индуцированной
агрегации.
3. Стандартная кривая АДФ 5 мкг/мл-индуцированной агрегации.
4. Повышение амплитуды кривой АДФ 2,5 мкг/мл-индуцированной
агрегации.
5. Отсутствие фазы дезагрегации по кривой АДФ 1,25 мкг/млиндуцированной агрегации.
6. Повышение амплитуды по кривой Коллаген-индуцированной
агрегации.
7. Повышение амплитуды по кривой Ристомицин-индуцированной
агрегации.
Результаты агрегатограммы свидетельствуют о высокой
агрегационной активности и чувствительности тромбоцитов за счет
коллагеновой стимуляции в кровотоке и повышениия активности
факторов Виллебранда. Рекомендуется антиагрегантная терапия.
Клинические примеры
Пациент М., 30 лет.
Спонтанная агрегация
1-ф.необр. 0,00 %, 1,15 у.е. (N)
Низкотемпературная активация
1-ф. необр. 0,53%, 1,26 у.е. (N)
20
Коллаген
1-ф. необр. 56,1 % (N)
Ристомицин
1-ф. необр. 66,6 % (N)
20
8.0
8.0
1.1
15
15
1.0
1.0
60
50
40
6.0
6.0
40
0.8
10
50
30
10
0.6
4.0
4.0
30
0.5
20
0.4
5
20
5
0
0
2.0
2.0
0.2
10
0
0
0
АДФ 10 мкг/мл
1-ф. необр. 52,1% (N)
АДФ 5 мкг/мл
2-ф. необр. 57,7 % (N)
10
50
8
40
8
40
30
6
30
4
20
2
10
0
0
4
20
АДФ 2,5 мкг/мл
1-ф. необр. 20,8% (N)
5.0
2
10
0
0
АДФ 1,25 мкг/мл
1-ф. обр. 20,6 % (N)
20
0
0
ЗАКЛЮЧЕНИЕ:
10
50
6
0
10
1. Стандартные кривые спонтанной и низкотемпературной
агрегации.
2. Стандартная кривая АДФ 10 мкг/мл-индуцированной агрегации.
3. Стандартная кривая АДФ 5 мкг/мл-индуцированной агрегации.
4. Стандартная кривая АДФ 2,5 мкг/мл-индуцированной агрегации.
5. Стандартная кривая АДФ 1,25 мкг/мл-индуцированной
агрегации.
6. Стандартная кривая Коллаген-индуцированной агрегации.
7. Стандартная кривая Ристомицин-индуцированной агрегации.
20
4.0
15
10
15
Показатели агрегатограммы в пределах референсных значений.
3.0
10
10
2.0
1.0
0
5
5
5
0
0
0
Клинические примеры
Пациентка У., 1936 г.р. Принимает плавикс, конкор, престариум.
Спонтанная агрегация
1-ф. необр. 0,13%, 1,46у.е. (N)
Низкотемпературная активация
1-ф.необр. 1,33%, 1,01у.е. (N)
20
Коллаген
1-ф. необр. 51,2 % (N)
Ристомицин
1-ф. необр. 70,2 % (N)
20
70
50
1.1
5.0
1.5
60
15
40
15
1.0
4.0
1.0
0.8
1.0
10
30
3.0
10
50
40
0.6
20
0.5
5
20
5
10
1.0
0.2
0
0
0
АДФ 10 мкг/мл
1-ф. необр. 67,7 % (N)
0
0
60
50
8.0
50
40
6.0
30
4.0
30
4.0
20
20
2.0
10
0
2.0
10
0
0
АДФ 2,5 мкг/мл
1-ф. необр. 41,8% (↑)
10
0
АДФ 1,25 мкг/мл
2-ф. необр. 31,1 % (↑)
40
8
30
5.0
4.0
30
20
15
20
2.0
4
10
10
1.0
2
0
0
0
1. Стандартные кривые спонтанной и низкотемпературной
агрегации.
2. Стандартная кривая АДФ 10 мкг/мл-индуцированной агрегации.
3. Стандартная кривая АДФ 5 мкг/мл-индуцированной агрегации.
4. Повышение амплитуды кривой АДФ 2,5 мкг/мл-индуцированной
агрегации.
5. Наличие фазы высвобождения, отсутствие фазы дезагрегации по
кривой АДФ 1,25 мкг/мл-индуцированной агрегации.
6. Стандартная кривая Коллаген-индуцированной агрегации.
7. Стандартная кривая Ристомицин-индуцированной агрегации.
25
3.0
6
0
ЗАКЛЮЧЕНИЕ:
8.0
40
10
0
0
АДФ 5 мкг/мл
1-ф. необр. 56,2% (N)
6.0
30
2.0
0.5
0.4
5
0
Результаты агрегатограммы свидетельствуют о неэффективности
применяемого антиагреганта (сохранение фазы высвобождения на
всех концентрациях индуктора агрегации АДФ). Рекомендуется
коррекция антиагрегантной терапии.
Клинические примеры
Пациент Р., 1954 г.р. Принимает плавикс, 75 мг.
Спонтанная агрегация
1-ф. необр. 3,54 %, 1,10 у.е. (N)
20
Низкотемпературная активация
1-ф.необр. 0,45 %, 1,50 у.е. (N)
20
1.5
Коллаген
1-ф. обр. 48,1 % ()
Ристомицин
1-ф. необр. 39,3 % (↓)
20
5.0
40
1.0
15
15
0.8
15
30
1.0
10
0.6
10
10
0.4
5
0.5
20
10
0
0
0
АДФ 10 мкг/мл
1-ф. обр. 25,0% (↓)
25
20
20
15
15
20
15
15
10
10
10
10
5
5
0
0
5
5
0
0
АДФ 2,5 мкг/мл
1-ф. обр. 11,3 % (N)
АДФ 1,25 мкг/мл
1-ф. обр. 1,31% (↓)
20
20
0
0
0
-10
ЗАКЛЮЧЕНИЕ:
1. Стандартные кривые спонтанной и низкотемпературной
агрегации.
2. Снижение амплитуды, отсутствие фазы высвобождения, наличие
фазы дезагрегации по кривым АДФ 10 и 5 мкг/млиндуцированной агрегации.
3. Стандартная кривая АДФ 2,5 мкг/мл-индуцированной агрегации.
4. Отсутствие агрегационного ответа на индуктор АДФ в
концентрации 1,25 мкг/мл.
5. Наличие фазы дезагрегации по кривой Коллагениндуцированной агрегации.
6. Снижение амплитуды кривой Ристомицин-индуцированной
агрегации.
4.0
15
15
15
3.0
10
10
1.0
0
АДФ 5 мкг/мл
1-ф. обр. 12,2% (↓)
25
20
-1.0
0.2
0
3.0
30
2.0
5
5
4.0
10
10
5
5
0
0
2.0
1.0
0
5
0
Результаты агрегатограммы свидетельствуют о выраженном
снижении агрегационной активности тромбоцитов за счет полного
блокирования пула хранения. Рекомендуется коррекция
антиагрегантной терапии с уменьшением частоты или дозы
применяемого антиагреганта и наблюдение в динамике.
Клинические примеры
Пациентка Л., 58 лет.
Спонтанная агрегация
1-ф. необр.4,91%, 3,42 у.е. ()
Низкотемпературная активация.
1-ф. необр. 2,42%, 2,32у.е. ()
20
15
1.5
70
15
2.5
30
4.0
10
10
1.5
0
0
АДФ 5 мкг/мл
1-ф. необр.74,0% (N)
70
15
30
5
50
15
40
10
30
20
10
0
0
20
5
20
50
15
40
30
10
60
20
15
10
10
0
50
5
0
6
10
4
0
2
10
-10
0
0
20
1. Повышение амплитуды R-кривых низкотемпературной и
спонтанной агрегации.
2. Стандартная кривая АДФ 10 мкг/мл-индуцированной агрегации.
3. Стандартная кривая АДФ 5 мкг/мл-индуцированной агрегации.
4. Повышение амплитуды, слияние фазы высвобождения с фазой
индуцированной агрегации по кривой АДФ 2,5 мкг/млиндуцированной агрегации.
5. Повышение амплитуды, наличие фазы высвобождения по
кривой АДФ 1,25 мкг/мл-индуцированной агрегации.
6. Стандартная кривая Коллаген-индуцированной агрегации.
7. Стандартная кривая Ристомицин-индуцированной агрегации.
40
30
20
20
0
0
АДФ 1,25 мкг/мл
2-ф. необр. 63,2% ()
60
5
10
0
АДФ 2,5 мкг/мл
1-ф. необр. 63,3% ()
40
20
ЗАКЛЮЧЕНИЕ:
60
20
50
40
50
70
25
60
10
8
30
0
0
АДФ 10 мкг/мл
1-ф. необр. 71,9% (N)
60
5
0.5
0
10
2.0
1.0
5
0.5
40
6.0
2.0
1.0
Ристомицин
1-ф. необр. 71,7 % (N)
20
3.0
2.0
Коллаген
1-ф. необр. 44,4% (N)
10
0
Результаты агрегатограммы свидетельствуют о высокой
агрегационной чувствительности тромбоцитов .