Набор вирусу реагентов для иммуноферментного определения антител класса G к

Набор реагентов для иммуноферментного определения антител класса G к
вирусу простого герпеса 2 типа в сыворотке крови
(ИммуноФА-IgG-ВПГ2)
Номер по каталогу ИФ-20-03
ТУ 9398-032-41566050-2008
Регистрационное удостоверение № ФСР 2009/04830
Набор
ИммуноФА-IgG-ВПГ2
предназначен
для
качественного
и
полуколичественного определения антител класса G к вирусу простого герпеса 2
типа в сыворотке крови человека методом иммуноферментного анализа на
стрипованных полистироловых планшетах.
В природе распространены два варианта вируса простого герпеса, которые
имеют различные биологические и эпидемиологические характеристики. У людей
оба типа вируса вызывают инфекционные заболевания разной степени остроты - от
характерных высыпаний на коже и слизистых до энцефалитов. Вирус герпеса 2 типа
обычно ассоциируется с повреждением слизистых половых органов: генитальный
герпес – одно из наиболее часто передаваемых половым путем заболеваний.
Однажды возникнув, инфекция персистирует в латентной форме в сенсорных
ганглиях, вызывая периодические обострения. Распространение вируса 2 типа
составляет 4-7% для различных популяции. IgG-антитела вируса 2 типа
встречаются у 6% людей в возрасте 20-29 лет. Беременные женщины,
инфицированные генитальным герпесом, имеют в 2-3 раза более высокую
вероятность спонтанного аборта и преждевременных родов, чем неинфицированные.
Активное выделение генитального вируса у беременных женщин может приводить к
острой неонатальной герпетической инфекции, приобретаемой при прохождении
новорожденного через
инфицированные половыеорганы (риск заражения
новорожденных 40-60%), что ведет к высокой заболеваемости и смертности при
отсутствии терапии. Специфические антитела класса G обычно появляются через
две-три недели после первичного заражения. У пациентов с рецидивирующим
заболеванием часто не обнаруживается увеличение концентрации IgG-антител.
Быстрая и точная диагностика герпетической инфекции необходима, чтобы
уточнить этиологию, оценить динамику заболевания и гарантировать своевременное
назначение селективной антивирусной химиотерапии с целью ограничения
распространения инфекции.
Принцип метода – непрямой двухстадийный ИФА
Е
Е
Е
Е
S
Е
Е
P
Иммобилизованный
антиген
Анализируемый
образец
Иммобилизованные
иммунокомплексы
Конъюгат
вторичных
антител с
пероксидазой
Иммобилизованные иммунокомплексы
с мечеными
антителами
Субстратная
реакция
СХЕМА ПРОВЕДЕНИЯ АНАЛИЗА
1. Внесение в лунки планшета: по 0,1 мл положительного, отрицательного и
порогового контрольных образцов, разведенных в 101 раз образцов исследуемых
сывороток крови и инкубация (30 мин, +37оС).
2. Промывка лунок планшета.
3. Внесение в лунки планшета по 0,1 мл конъюгата и инкубация (30 мин, +37оС).
4. Промывка лунок планшета.
5. Внесение в лунки планшета по 0,1 мл субстратного раствора и инкубация (15 мин,
+37оС).
6. Внесение в лунки планшета по 0,1 мл стоп-реагента.
7. Измерение оптической плотности (λ=450 нм), интерпретация результатов.
ОСНОВНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА
Чувствительность набора относительно ОСО 42-28-373-04 (утверждена ГИСК им. Л.А.
Тарасевича), а также относительно набора SERION ELISA classic Herpes Simplex Virus 2
IgG (фирма Virion\Serion GmbH) составляет 100%.
Специфичность набора относительно ОСО 42-28-373-04 (утверждена ГИСК им. Л.А.
Тарасевича), а также относительно набора SERION ELISA classic Herpes Simplex Virus 2
IgG (фирма Virion\Serion GmbH) составляет 100%.
Результаты ИФА учитываются при следующих условиях:
Значение ОПК+(ср) - не ниже 1,0.
Значение ОПК-(ср) - не выше 0,15.
Значение ОП к пор(ср) - не ниже 0,2.
В противном случае исследование необходимо повторить.
Интерпретация результатов
Результат анализа исследуемых образцов следует считать:
положительным при ОП выше 1,1х ОПпор (исследуемый образец содержит IgG к ВПГ-2),
отрицательным при ОП ниже 0,9х ОПпор (исследуемый образец не содержит IgG к ВПГ-2).
Результаты при ОП в диапазоне 0,9хОПпор – 1,1хОПпор являются сомнительными, в этом случае
необходимо провести повторное исследование вновь полученных сывороток.
Длина волны измерения: 450 нм.
Субстрат: 3,3`,5,5`-тетраметилбензидин (ТМБ).
Условия инкубации (время, tоС) :
- 1-ая инкубация 30 мин при +37оС;
- 2-ая инкубация 30 мин при +37оС;
- инкубация с ТМБ 15 мин при +37оС.
Время проведения анализа: 1 час 30 минут.
Объем пробы: 100 мкл.
Количество анализируемой сыворотки: 10 мкл (для анализа сыворотка разводится в 101
раз и анализируется 100 мкл разведенной сыворотки).
Количество анализов: набор рассчитан на проведение 96 анализов, включая
контрольные образцы.
Планшеты: стрипованные, разделяющиеся на отдельные лунки.
Срок годности набора: 12 месяцев.
Все реагенты набора представлены в жидком виде.