R-6016 ИХТ «Chlamydia ТЕСТ» для выявления антигенов

28 Pierre Köenig St., Talpiot Industrial Area
P.O.B 53231 Jerusalem 91531 ISRAEL
Phone: 972-2-6781861; Fax : 972-2-6781852
e-mail: info@novamed.co.il
Chlamydia ТЕСТ
ЭКСПРЕСС-ТЕСТ ДЛЯ КАЧЕСТВЕННОГО ОДНОЭТАПНОГО ВЫЯВЛЕНИЯ АНТИГЕНА
Chlamydia trachomatis В МАЗКАХ ИЗ КАНАЛА ШЕЙКИ МАТКИ У ЖЕНЩИН И МОЧЕИСПУСКАТЕЛЬНОГО
КАНАЛА У МУЖЧИН, А ТАКЖЕ В СОСКОБАХ КОНЪЮКТИВЫ И МOЧE
Кат. № R-6016.
ИНСТРУКЦИЯ K ПРИМЕНЕНИЮ
НАЗНАЧЕНИЕ
Chlamydia Тест производства Novamed Ltd, Израиль представляет собой
бесприборную одношаговую иммунохроматографическую экспресс тестсистему для прямого качественного определения антигена Chlamydia
trachomatis в мазках из канала шейки матки у женщин и
мочеиспускательного канала у мужчин, а также в соскобах конъюктивы и
моче у пациентов с характерной симптоматикой с целью помощи в
диагностике хламидиозной инфекции.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ
Хламидиозы,
связанные с инфекцией Chlamydia trachomatis,
представляют собой группу болезней, различающихся по путям
инфицирования, эпидемиологии и клинической симптоматике. В эту
группу входят две самостоятельные нозологические формы (трахома,
венерическая
лимфогранулема),
воспалительные
заболевания
мочеполовых органов у мужчин и женщин, внутриутробная инфекция и
заболевания новорожденных, поражения глаз, перигепатит, синдром
Рейтера, заболевания ЛОР-органов 2. К роду Chlamydia, вызывающих
заболевания у человека, относятся три вида: Chlamydia trachomtis,
Chlamydia pneumonia (первично патогенна для человека) и Chlamydia
psittasi (первично патогенна для животных) 1. В настоящее время
инфекция вызванная Chlamydia trachomatis является одним из наиболее
распространенных бактериальных заболеваний, передающимся половым
путем. Заболевание характеризуется асимптоматическим течением, часто
вызывающим серьезные осложнения у женщин и новорожденных.
Вместе с тем, 70% случаев эндоцервикального инфицирования у женщин
и до 50% случаев уретрального инфицирования у мужчин имеют
характерную
симптоматику.
Золотым
стандартом
диагностики
хламидийной инфекции является выделение Chlamydia в культуре клеток
ткани, но в связи с громоздкостью, дороговизной и продолжительностью
метода, он не нашел широкого распространения в медицинских
учереждениях. Наиболее распространенными методами лабораторного
определения антигена Chlamydia trachomatis служат иммуноферментный
(ИФА) и иммунофлюоресцентный методы (ПИФ), которые также
требуют для своего проведения специальное оборудование и
высокоподготовленый персонал 3,4.
ПРИНЦИП
Chlamydia Тест производства компании Novаmed Ltd, Израиль выявляет
специфичный для рода Chlamydiaе
липополисахаридный антиген.
Эндоцервикальные мазки у женщин, уретральные мазки у мужчин и
соскобы с конъюктивы глаз предварительно обрабатываются буфером для
изоляции/экстракции Chlamydiaе-липополисахаридного антигена в случае
его присутствия и только затем полученный экстракт исследуется с
помощью
Chlamydia Тест.
Chlamydia Тест представляет собой
помещенную в пластиковый футляр (кассету) полоску нитроцеллюлозной
мембраны с фиксированными на ней в области добавления пробы
мышинными
моноклональными
антителами
к
Chlamydiaе
липополисахаридному антигену, конъюгированными с коллоидными
частицами золота. В области тестового окошка мембраны зафиксированы
моноклональные
антитела
специфические
к
Chlamydiaе
липополисахаридному антигену. Козьи поликлональные антимышинные
антитела зафиксированы в контрольной зоне мембраны. Chlamydiaе
липополисахаридный антиген содержащийся в пробе реагирует с
меченными поликлональными антителами, формируя комплекс антигенантитело, который мигрирует по мембране, образуя в тестовой зоне
розово-сиреневую линию, что оценивается как положительный результат.
Непрореагировавший конъюгат мигрирует далее к контрольной зоне, где
захватывается козьими поликлональными антимышинными антителами,
формируя также розово-сиреневую линию в контрольной зоне.
Контрольная линия появляется всегда. Наличие контрольной линии
подтверждает корректность результатов теста (правильный объем пробы,
необходимый темп миграции, требуемое качество реагентов).
КОМПЛЕКТАЦИЯ НАБОРА
В состав набора входит:
20 тест-систем (кассет) Chlamydia Тест для выявления антигена
Chlamydiaе производства компании Novаmed Ltd, Израиль, упакованных в
индивидуальные алюминиевые пакетики;
20 стерильных урогенитальныx тампонов;
20 бутылочек-капельниц с вмонтированными в крышку фильтрами;
2 бутылочки-капельницы содержащих по 10 мл раствора для эктракции
антигена, представлающего собой смесь буфера, детергента и азида
натрия (NaN3 < 0.1%);
1 инструкция к применению.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ И МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
1. Не допускается использование набора и его компонентов после
истечения срока годности.
2. Все компоненты набора предназначены только для профессионального
использования "in vitro" в целях лабораторной диагностики.
3. Исследование проб регламентируется правилами работы с
инфекционными агентами.
4. Не проводить исследование, используя компоненты наборов разных
серий.
5. Нарушение временного и температурного режимов инкубации при
проведении исследования может привести к получению ошибочных
результатов.
6. Chlamydia Тест должен быть проведен в течение двух часов после
вскрытия индивидуальной упаковки.
7. Необходимо избегать попадания едких реагентов для экстракции на
кожу, глаза, слизистые оболочки. В случае контакта реагентов с
кожными покровами немедленно промыть водой место контакта.
8. Внимательно прочтите инструкцию перед использованием.
ХРАНЕНИЕ
Chlamydia Тест необходимо хранить при температуре 4-30оС. Не
замораживать!.
CБОР, ХРАНЕНИЕ И ПОДГОТОВКА ПРОБ.
Качественно проведенный забор пробы является одним из важных
моментов при проведении исследования. Исследуемый образец
обязательно должен содержать клеточный материал.
Цервикальные образцы
1.Для забора образца следует использовать только тампоны прилагаемые
к набору. Разрешается в качестве альтернативы использовать также
тампоны из дакрона и вискозы. Запрещается использование ватных
тампонов на деревянной ручке или любых других тампонов помещенных
в какую-либо транспортную или агаровую среду.
2.Перед забором образца следует удалить избыточную слизь из области
канала шейки матки с помощью отдельного ватного шарика. Замечание:
неполное очищение канала от слизи может обусловить ложноположительный результат теста.
3.Ввести урогенитальный тампон в канал шейки матки так, чтобы
большая часть ручки тампона перестала быть видимой. Повращать
тампон в течение 15-20 секунд и аккуратно озвлечь его стараясь не задеть
стенки влагалища.
Уретральные образцы
1.Для забора образца из мочеиспускательного канала у мужчин следует
использовать только стандартный урогенитальный зонд покрытой
вискозным ворсом или вискозный тампон с алюминевой ручкой или
одноразовые щёточки для цитологических исследований.
2.Проинструктировать пациента не мочиться как минимум за 1 час до
забора образца.
3.Ввести зонд в уретру примерно на 2-4 см, вращать в течение 3–5 секунд,
вывести зонд.
Тампон/зонд со взятым образцом может быть отправлен или храниться в
сухом виде в пластиковой пробирке (не прилагается). Желательно
исследовать образец немедленно после его забора. В случаях когда
немедленное ислледование невозможно, образец должен быть помещен в
сухую пластиковую пробирку и храниться при температуре 2-8°C до 72
часов. Не замораживать пробу!
Оразцы мочи (только у мужчин)
1.Собрать 20-40 мл первой утренней порции мочи в чистую посуду и
осторожно отлить не менее 15 мл в центрифужную пробирку .
2.Процентрифугировать пробу при 10,000 об/мин в течение 10 мин.
3.Осторожно удалить надосадочную жидкость и добавить 12 капель
раствора для эктракции антигена к осадку содержащему клетки
Chlamydia.
4.Ресуспендировать осадок в растворе для эктракции антигена с помощью
одноразовой пипетки и перенести полученную суспензию обратно в
пробирку для экстракции антигена.
5.Продолжить процедуру выполнения теста согласно инструкции
используя в качестве образца полученную суспензию.
Использовать для анализа только собранный на дне пробирки осадок.
Хотя и проба мочи может служить материалом для выполнения анализа,
рекомендуется использовать материал собранный с помощью
урогенитальных тампонов с целью повышения чувствительности метода.
Экстракция исследуемого образца.
1.Поместить в пробирку для экстракции 22 капли (0.9 мл) раствора для
эктракции антигена.
2.Поместить зонд/тампон в пробирку для экстракции и тшательно
перемешать содержимое пробирки с исследуемым материалом круговыми
движениями зонда/тампона в течение 10 секунд для лучшей реабсорбции.
3.Поместить пробирку для экстракции с находящимся в ней
зондом/тампоном в штатив и инкубировать в течение 10-15 минут при
комнатной температуре.
4.В последние 2-3 минуты экстракции вращать зонд/тампон в
содержимом пробирки и с целью максимального освобождения жидкости
прижать зонд/тампон к стенке пробирки одновременно прокручивая его.
5.Выбросить зонд/тампон согласно правилам пользования инфекционным
материалом.
Полученный экстракт следует хранить при комнатной температуре до 30
минут до начала проведения исследования.
2.
Результат анализа учитывают через 20 минут после загрузки тестовой
кассеты пробой.
ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
Отрицательный результат
Появляется розово-сиреневая линия только в контрольной зоне (C)
тестовой кассеты.
Положительный результат
Появляются розово-сиреневые линии как в тестовой (T) так и в
контрольной (C) зонах тестовой кассеты.
Сомнительный (недействительный) результат
При отсутствии видимой розово-сиреневой линии в контрольной зоне
(C), вне зависимости от наличия или отсутствия окрашенной линии в
тестовой зоне (Т), результаты анализа оценивают как сомнительные.
Неправильный объем пробы, несоблюдение процедуры тестирования или
качество реагентов – наиболее частые причины отсутствия контрольной
линии. Проанализируйте процедуру тестирования и повторите ее с
использованием новой тест-кассеты. Если проблема остается, следует
прекратить тестирование и связаться с местным дистрибьютором.
Замечания по интерпретации результатов
Интенсивность окраски линий в тестовой зоне кассеты (Т), меняется в
зависимости от концентрации антигенов в образце. Однако ни
количественное содержание антигенов, ни степень их возрастания не
могут быть установлены с помощью данного качественного теста.
Экстракция Положительного Контроля.
1.Поместить 5 капель (0.2 мл) Положительного Контроля в пробирку для
экстракции антигена содержащую 5 капель (0.2 мл) раствора для
экстракции.
2.Тщательно перемешать реагенты энергичным всряхиванием пробирки и
инкубировать при комнатной температуре в течение 10-15 минут.
3.Закрыть
пробирку
для
экстракции
крышкой-капельницей
оборудованной фильтром и продолжить процедуру выполнения теста
согласно инструкции как для урогенитальных мазков.
Техника исполнения анализа:
Перед началом тестирования тестовую кассету и материал для
исследованиа довести до комнатной температуры (15-30ºC). Не вскрывать
индивидуальную упаковку теста до начала исследования. Маркировать
тестовую кассету инициалами или идентификационным номером
пациента.
1.Закрыть пробирку для экстракции крышкой оснащенной фильтром и
держа ее вертикально над окошком для внесения пробы (S) тестовой
кассеты, внести туда 6 капель (приблизительно 200 мкл) экстракта. Перед
внесением очередной капли экстракта в окошко для внесения пробы (S)
дождаться полной абсорбции предыдущей капли избегая появления
пузырей в окошке при внесении капель.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
1. Chlamydia Тест предусматривает
внутренний контроль за
правильностью проведения процедуры. Pозово-сиреневаяя линия
появляющаяся в контрольной зоне (C) тестовой кассеты, указывает на
правильность проведения процедуры теста.
2. Результаты теста не учитывают в случае если неясный фон мешает
интерпретировать результаты.
ОГРАНИЧЕНИЯ
1. Отрицательный результат Chlamydia Тест не исключает возможность
наличия инфекции в отдельных случаях по причине низкой
концентрации вирусных антигенов.
2. Для постановки корректного диагноза необходимо сопоставление
результатов Chlamydia Тест с прочей клинической информацией.
3. Набор Chlamydia Тест предназначен только для профессионального
использования в диагностике in vitro. Тест может быть использован
только для идентификации Chlamydia из мазков канала шейки матки у
женщин и мочеиспускательного канала у мужчин, а также в соскобах
конъюктивы.
4. Chlamydia Тест не дает информации о количестве антигена в образце,
обеспечивая исключительно качественную идентификацию.
5. Chlamydia Тест идентифицирует исключительно антигены Chlamydiae и
не
дифференцирует
жизнеспособных
и
нежизнеспособных
микроорганизмов.
6. Для проведения исследования необходимо использовать только
материалы, поставляемые в наборе Chlamydia Тест (стерильные зонды,
реагенты). Использование зондов, не поставляемых в наборе, может
повлиять на качество отбора пробы.
ХАРАКТЕРНЫЕ ОСОБЕННОСТИ ТЕСТА
A.Чувствительность
Клиническое сравнение.
В таблице 1 и 2 представлены результаты сравнительного исседования
425 эндоцервикальных мазков взятых у пациентов подозрительных на
хламидиозную инфекцию. Сравнивались результаты полученные при
исследовании
мазков
методом
иммунохроматографического
одноэтапного экспресс-анализа Chlamydia Тест производства Novamed
Ltd, Израиль с результатами исследования методами культуры клеток и
Полимеразной Цепной Реакции с помощью Amplicor ROCHE (ПЦР).
УТВЕРЖДАЮ
Генеральный директор ООО «ГЕМ»
_____________С.А. Гольдберг
«23» июня 2010 г.
Таблица 1. Сравнение результатов методов
иммунохроматографического экспресс-анализа Chlamydia Тест и
культуры клеток (n =425).
Kультурa клеток
Всего:
Положит.
Отрицат.
Chlamydia
Положит.
67
1
68
Тест
Отрицат.
5
352
357
Всего:
72
353
425
Таблица 2.Сравнение результатов методов иммунохроматографического
экспресс-анализа Chlamydia Тест и Полимеразной Цепной Реакции с
помощью Amplicor ROCHE (n =425).
ПЦР
Всего:
Положит.
Отрицат.
Chlamydia
Положит.
67
2
69
Тест
Отрицат.
6
350
356
Всего:
73
352
425
Исходя
из
представленных
результатов,
метод
иммунохроматографического одноэтапного экспресс-анализа Chlamydia
Тест производства Novamed Ltd, Израиль, показывает хороший уровень
чувствительности среди популяции с низким риском инфекции (
распространенность 4.3%), что выгодно отличает его от других похожих
коммерческих тестов. По сравнению с методом культуры клеток,
считающимся "золотым стандартом" чувствительность метода Chlamydia
Тест производства Novamed Ltd, Израиль составляет 93% (67/72) и
специфичность - 99.7 % (352/353).
Б. Перекрестное реагирование.
Тест не дает неспецифических перекрестных реакций со следующими
возбудителями:
Acholeplasma
Acinetobacter spp
Aeromonas spp
Bacteroides spp
Haemophilus influenzae
Herpes simplex virus
Klebsiella pneumoniae
Klebsiella spp
Campylobacter spp
Lactobacillus spp
Candida spp
Listeria spp
Citrobacter spp
Clostridium spp
Corynebacterium
xerosis
Cytomegalovirus
Enterobacter spp
Escherichia coli
Fusobacterium
Gardnerella spp
Mycobacterium smegmatis
Mycoplasma spp
Salmonella spp
Saccharomyces cerevisiae
Serratia spp
Shigella spp
Staphylococcus spp (coag.
Neg.)
Staphylococcus spp (coag.
Pos.)
Streptococcus spp
Torulopsis globrata
Neiseria gonorrhoeae
Trichomonas spp
Peptococcus spp
Peptostreptococcus spp
Propionebacterium
Proteus spp
Pseudomonas spp
Ureaplasma urealyticum
Veinonella spp
Концентрация исходных суспензий микроорганизмов 107 КОЕ/мл
ЛИТЕРАТУРА:
1. Hackstadt T., Fischer E.R., Scidmore M.A., Rockey D.D. Heinen R.A.
origins and functions of the chlamydial inclusion. Trends microbiol. 5 , 1997 :
288-293.
2. Centers for disease control and prevention. 1998 Guidelines for treatment of
sexually transmitted diseases. MMWR MORB. Mortal Wkly rep. 1998; 47 : 1118.
3. Burstein G., Gaydos C.A., Diener-West M., Howell M.R., Zenilman J.M.,
Quinn T.C.. Incident of Chlamydia trachomatis infections among inner-city
adolescent females. JAMA 1996; 280 : 521-526.
4. Stokes T. Screening for Chlamydia in general practice : a literature review
and summary of the evidence. Journal of Public Health Medicine 1997; 19 :
222-232.
5. Lea A.P., Lamb H.M., Azithromycin. A pharmacoeconomic review of its
use as a single-dose regimen in the treatment of uncomplicated urogenital
Chlamydia trachomatis infections in women. Pharmacoeconomics 1997; 12 :
596-611.
6. Black C.M. Current methods of laboratory diagnosis of Chlamydia
trachomatis infections. Clin. Microbiol. Rev. 1997; 10 : 160-184.
7. Schachter J. DFA, EIA, PCR, LCR, and other technologies : what tests
should be used for diagnosis of chlamydia infections ?. Immunol. Invest. 1997;
26 : 157-161.
Представительство в РФ: ООО «ГЕМ»
г. Москва, Новый Зыковский проезд, д. 4А.
+7 (495) 787-04-32
www.hemltd.ru
IFU-ChlamydiaTest-R-6016-HEM-russ.-v.03-14.07.13