Выделение ДНК из агарозных гелей на магн. частицах

Методика
тел:
Выделение ДНК из агарозных
гелей на магнитных частицах
версия от 3 декабря 2013
ЗАО "Силекс"
+7 (495) 737 42 24
+7 (495) 998 42 88
+7 (495) 737 42 24
факс:
эл. почта: info@sileks.com
Выделение ДНК из агарозных гелей на магнитных частицах
кат. номер К0301
1. Описание набора
Набор предназначен для очистки препаратов ДНК из агарозных гелей. Преимущество этого
набора перед аналогичными наборами других фирм в том, что он не требует применения
каких­либо специальных сортов агарозы или проведения электрофореза в определенных буферах.
Набор позволяет выделять ДНК из геля с выходом 60 ­ 90%. Выделенная ДНК является чистой
и годится для использования в любых молекулярно­биологических манипуляциях, включая
процедуры клонирования, сиквенирования, ПЦР, рестрикционный анализ и т.п.
Применяемые в наборе магнитные частицы обладают повышенной ёмкостью связывания ДНК
по сравнению с обычными силикатными сорбентами (напр., GlassMilk) и даже по сравнению с
аналогичными частицами зарубежного производства. Теперь вы можете получать большее
количество ДНК, используя меньшее количество сорбента.
Использование магнитных частиц упрощает процедуру выделения.
Вы можете полностью собрать содержащую ДНК водную фазу, не опасаясь попадания в
раствор мелких частичек сорбента. Они все будут полностью собраны на стенке пробирки в
магнитном штативе и не будут мешать вашим экспериментам.
Состав набора:
Более
подробную
Магнитные частицы 500 мкл
информацию о наборе для
Буфер GL
15 мл
выделения ДНК из агарозных
Буфер Wash
20 мл
гелей Вы можете получить
Буфер WashEnd
10 мл
на нашем интернет­сайте,
Буфер EL
2 мл
перейдя по ссылке
http://www.sileks.com/ru/shortlink/Kits_Isol_DNA_Gel
или
воспользовавшись расположенным рядом QR­кодом, который можно
отсканировать любым смартфоном, планшетом, веб­камерой.
2. Протокол выделения ДНК из агарозного геля
1. Используя острое лезвие или скальпель, вырежьте кусочек геля, содержащий
интересующий фрагмент ДНК (по возможности освободитесь от лишних фрагментов геля).
Перенесите вырезанный кусочек геля в пробирку.
2. Добавьте к кусочку геля 300 мкл Буфера GL (из расчета, что кусочек геля равен прибл.
100 мг) и перемешивайте на вортексе до полного растворения кусочка геля.
3. Как только гель растворится, добавьте 10 мкл суспензии магнитных частиц (из расчёта
10 мкл сорбента на 5 мкг ДНК) и перемешайте на вортексе.
Перед использованием магнитные частицы необходимо тщательно перемешать на
вортексе до гомогенного состояния
4. Инкубируйте смесь при 50 °С в течении 10 мин. Периодически перемешивайте смесь,
чтобы частички сорбента находились во взвешенном состоянии.
5. Соберите частицы, поместив пробирку в магнитный штатив (1 мин). Как можно тщательнее
удалите супернатант, переставьте пробирку в обычный (немагнитный) штатив, добавьте к
осадку 400 мкл Буфера Wash, тщательно перемешайте.
6. Соберите частицы, поместив пробирку в магнитный штатив. Как можно тщательнее
удалите супернатант.
7. Добавьте к осадку 200 мкл Буфера WashEnd. Перемешайте, соберите частицы, поместив
пробирку в магнитный штатив.
8. Как можно тщательнее удалите супернатант.
9. Просушите осадок на 60 °С в течение 10 мин.
10. Добавьте к осадку 20 мкл Буфера EL (если в п.3 было добавлено больше, чем 5 мкл
сорбента, увеличьте пропорционально объем добавляемого буфера), перемешайте и
инкубируйте 10 мин при 60 °С.
11. Соберите частицы, поместив пробирку в магнитный штатив на 3 мин. Как можно
тщательнее отберите супернатант. Перенесите супернатант, содержащий препарат ДНК, в
другую пробирку.
Если в вашем препарате ДНК остались мелкие магнитные частицы, повторите процедуру,
описанную в п.11, поместив пробирку в магнитный штатив на 5 мин.
Выделение ДНК из агарозных
гелей на магнитных частицах
ЗАО "Силекс"
Страница 1 из
3. Связанные продукты
Магнитные частицы SiO2
1 мл, кат. номер K0170
Ссылка на раздел на интернет­сайте:
http://www.sileks.com/ru/shortlink/MagBeads_SiO2
Для быстрого перехода на нужную страницу
воспользоваться расположенным рядом QR­кодом.
Вы
можете
Малогабаритные лабораторные миксеры серии LabMix Mini
Способен значительно ускорить процедуру выделения, полностью
заменяя ручное пипетирование в процессе перемешивания.
Существенно снижает расход пластика.
Ссылка на раздел на интернет­сайте:
http://www.sileks.com/ru/shortlink/LabMixMini
Магнитные штативы для работы с частицами
Магнитные штативы различных конструкций позволяют решать самые
разнообразные научные задачи с использованием магнитных частиц.
Ссылка на раздел на интернет­сайте:
http://www.sileks.com/ru/shortlink/MagRacks
Есть ещё вопросы?
Если у Вас есть вопросы или Вы нуждаетесь в консультации:
телефон:
+7 495 737 4224
+7 495 998 4288
эл. почта:
info@sileks.com
Не оставайтесь наедине со своими вопросами и сомнениями.
Выделение ДНК из агарозных
гелей на магнитных частицах
ЗАО "Силекс"
Страница 7 из