Набор для выделения ДНК из животных тканей

www.diamond-dna.ru
Набор для выделения ДНК
из животных тканей
Протокол
Состав набора DiamondDNATM
Необходимое оборудование:
1. Лизис-буфер.
Центрифуга для пробирок 1,5 мл (≥10000g).
2. Протеиназа К.
Термостат для 1,5 мл пробирок.
3. Сорбент.
Дозаторы (от 1 до 1000 мкл).
Морозильная камера (-16 -20˚С).
В наборе не содержатся токсичные вещества и запрещенные к
свободному обороту компоненты.
1. Растереть 5-10 мг ткани (биоптат, мышечная, соединительная
TM
Хранение и подготовка к работе набора DiamondDNA
При получении набора необходимо поместить протеиназу К в
морозильную камеру (-20˚С) для более длительного хранения. Фермент
находится в лиофилизированном виде и переносит транспортировку при
комнатной температуре без заморозки. Перед использованием фермент
растворить в бидистиллированной или деионизированной воде (1 мл на
1 пробирку). В дальнейшем протеиназу К хранить только при -20˚С.
Остальные компоненты набора необходимо хранить при комнатной
температуре
(в
составе
отсутствуют
нестойкие
соединения).
Допускается выпадение осадка солей в буферных растворах при
понижении температуры менее +15˚С, при этом достаточно нагреть
растворы до +60˚С для полного восстановления свойств. Суспензия
сорбента при хранении может выпадать в осадок, при этом для
гомогенизации
достаточно
энергичного
встряхивания
использованием.
Срок годности набора составляет не менее 1 года.
перед
ткань, печень, 1-5 корней волос, ногтевая пластинка, эпителий,
костный порошок) в 100 мкл лизис-буфера, добавить 10 мкл
протеиназы К, встряхнуть на вортексе для перемешивания.
2. Инкубировать 15-30 мин при 56˚С. Периодически перемешивать
легким встряхиванием
3. Инкубировать 5 мин. при 90˚С.
4. Добавить 100 мкл сорбента, перемешать на вортексе или
покачиванием (если необходимо получить высокомолекулярную
ДНК).
5. Центрифугировать пробу 2 мин при более 10 000 об./мин.
6. Супернатант перенести в новую пробирку и использовать для
постановки ПЦР в объеме 2-5 мкл или убрать на хранение в
холодильник (+4˚С ДНК хранится в течение нескольких недель,
при – 20˚С – до нескольких лет).
Примечание. Не нужно брать слишком много материала. Сорбент лучше набирать
дозатором с широким наконечником (рассчитанным на объем 100-1000 мкл).