Характеристика вакцин как тест
advertisement
Презентация подготовлена при поддержке гранта BII-GAP-20606 по программе БиоПромышленная Инициатива (BII) Государственного Департамента США Характеристика вакцин как тест-материала неклинического исследования безопасности Оксана Николаевна Хохлова Лаборатория биологических испытаний Филиал института биоорганической химии имени академиков М.М.Шемякина и Ю.А.Овчинникова РАН ТЭМП GLP: Основы доклинических исследований 1 Лицензированный биологический продукт должен быть: • Безопасным: относительно свободным от опасных/нежелательных эффектов • Чистым: свободным от посторонних примесей • Активным: оказывать желаемый эффект • Единообразным: произведенным в соответствии с GMP (Good Manufacturing Practices) ТЭМП GLP: Основы доклинических исследований 2 Характеристика каждого лота Стерильность (бактериальная/грибковая контаминация) Общая токсичность (непредвиденная токсичность на морских свинках и мышах) Идентичность (SDS-PAGE, Western blot, immunologic assay or amino acid analysis) Чистота (влажность, SDS-PAGE, HPLC, эндотоксины) Активность (in vivo и in vitro тесты на иммуногенность, содержание антигенов, химический состав) Тесты на отсутствие возможной контаминации в производственном процессе ТЭМП GLP: Основы доклинических исследований 3 1 Активность вакцин Выбор адекватной модели Тесты часто не отражают механизмы защиты у человека Проверка соответствия производственного процесса (фармакопейные статьи) При отсутствии адекватной животной модели измерение иммунологического ответа in vitro (серология) Физико-химические характеристики (уровень антигена, размер антигена и др.) Зависит от типа вакцины ТЭМП GLP: Основы доклинических исследований 4 Характеристика каждого лота Стабильность Определить срок хранения (1 – 2 года) Программа определения стабильности через установленное время • Активность • Влажность • Стерильность ТЭМП GLP: Основы доклинических исследований 5 Good Manufacturing Process: обеспечение качества вакцин Обеспечение безопасности Характеристика происхождения/источника Качество используемых материалов Стабильность/Активность Тестирование/Квалификация процессов Очистка от включений, контаминантов Контроль процессов (особенно, обеспечивающих безопасность) ТЭМП GLP: Основы доклинических исследований 6 2 Good Manufacturing Process: обеспечение качества вакцин Совершенствование продукта и производственного процесса Стабильность/Активность Совершенствование формы Исходный материал/ Характеристика компонентов Совершенствование методик анализа/ Валидация Спецификация Контроль производства и валидация ТЭМП GLP: Основы доклинических исследований 7 Good Manufacturing Process: обеспечение качества вакцин Элементы GMP Персонал Контроль качества Помещения и оборудования Лабораторный контроль Контроль компонентов Контроль производства Документация Маркировка ТЭМП GLP: Основы доклинических исследований 8 Характеристика вакцин Субстанция препарата - иммуногенный компонент будущего препарата вакцины Препарат вакцины - готовая лекарственная форма вакцины для введения ТЭМП GLP: Основы доклинических исследований 9 3 Характеристика субстанции препарата Описание Название (биологическое, химическое) Происхождение клеток Идентификация активного компонента/выделенного антигена Физико-химическое описание синтетического антигена Описание химических модификаций/конъюгаций Перечень возможных неактивных компонентов ТЭМП GLP: Основы доклинических исследований 10 Характеристика субстанции препарата Описание аналитических процедур для установления идентичности, стабильности, чистоты, активности Физико-химические методы • Спектрометрия • Аминокислотный анализ • Картирование пептидов • Определение дисульфидных связей • Хроматографические методы • SDS-PAGE • ЯМР спектроскопия • Др. методы по определению производных субстанции и производственных примесей ТЭМП GLP: Основы доклинических исследований 11 Характеристика субстанции препарата Описание аналитических процедур для установления идентичности, стабильности, чистоты, активности Биологическая активность • Специфичные тесты на идентичность (Western blot, ELYSA) • Цитометрия • Тест на нейровирулентность • Серотипирование • Электрофоретическое типирование • Инактивация • Методы нейтрализации • Описание всех результатов in vitro и in vivo ТЭМП GLP: Основы доклинических исследований 12 4 Производитель субстанции препарата Идентификация производителей • Имена, адреса каждого участника производства субстанции • Ответственность каждого участника Схема производственных помещений • Путь/перемещение субстанции в процессе производства • Идентификация смежных операций, способных влиять на субстанцию Перечень других веществ в производственных и смежных помещениях, деконтаминация общего оборудования ТЭМП GLP: Основы доклинических исследований 13 Производитель субстанции препарата Предотвращение контаминации • Воздушная система (кондиционирование): состояние, проверка • Краткое описание процедур и дизайна помещений для контроля контаминации и перекрестной контаминации • Общий дизайн оборудования (закрытые/открытые системы, обеспечение стерильности) • Обеспечение стерильности и обнаружение контаминации ТЭМП GLP: Основы доклинических исследований 14 Метод производства субстанции препарата Первичные материалы • Список всех материалов (культуральные среды, буферы, носители для пептидного синтеза, реагенты) со спецификациями • Сертификаты анализа/качества от поставщика • Качество воды, газов, используемых в производстве ТЭМП GLP: Основы доклинических исследований 15 5 Метод производства субстанции препарата Схема получения/синтеза субстанции • Пошаговая диаграмма получения • Оборудование, материалы, помещения, условия • Цикл синтеза, специфические фазы (расщепление, конденсация) • Перенос/транспортировка промежуточных и готовых субстанций ТЭМП GLP: Основы доклинических исследований 16 Метод производства субстанции препарата Детальное описание получения субстанции Животные • Вид, возраст животных • Микробиологический статус • Результаты контроля статуса • Условия содержания животных • Процедуры ветеринарного и лабораторного контроля состояния животных • Описание инокуляции животных • Выделение продукта из тканей ТЭМП GLP: Основы доклинических исследований 17 Метод производства субстанции препарата Детальное описание получения субстанции Вирусы • Источник • Данные об исходном лоте штамма • История пассажей • Культуральная технология поддержания исходного штамма ТЭМП GLP: Основы доклинических исследований 18 6 Метод производства субстанции препарата Детальное описание получения субстанции: Микробные клетки • Источник/происхождение • Вид, штамм, серотип • Биохимические характеристики (ферментативный профиль) • Генетические характеристики (маркеры, вставки, делеции) • Плазмиды • Генетическая стабильность • Вирулентность (метод инактивации) ТЭМП GLP: Основы доклинических исследований 19 Метод производства субстанции препарата Детальное описание получения субстанции: клетки Животные клетки первичные • Источник: вид, возраст животных, ткани • Микробиологический статус животного • Условия содержания животных • Ветеринарный и лабораторный контроль • Выделение клеток • Контроль контаминации ТЭМП GLP: Основы доклинических исследований 20 Метод производства субстанции препарата Детальное описание получения субстанции: клетки Клеточные линии • Человеческие Материалы и методы, ткань/орган, этническое/географическое происхождение, возраст, пол, физиологическое состояние, медицинская история • Животные Вид, линия, условия разведения и содержания, географическое происхождение линии, орган/ткань, физиологическое состояние, контроль нежелательных агентов ТЭМП GLP: Основы доклинических исследований 21 7 Метод производства субстанции препарата Детальное описание получения субстанции Генетические конструкции и рекомбинантные клеточные линии • Хозяйские клетки Источник, фенотип, генотип, маркеры • Ген Ген, происхождение, методы получения, нуклеотидная и АК последовательности, полученные характеристики • Вектор Происхождение и функции компонентов, рестриктазы, генетические маркеры • Финальная генная конструкция Описание клонирования, рестриктазы • Получение рекомбинантной клеточной линии ТЭМП GLP: Основы доклинических исследований 22 Метод производства субстанции препарата Детальное описание получения субстанции Клеточный банк • Система • Размеры • Контейнер/Закрытая система • Методы, реагенты, среды • Условия криоконсервации и хранения • Контроль процессов • Контроль контаминации • Защита от «катастроф» • Master Cell Bank, Working Cell Bank • Контроль продуктивности • Контроль контаминации продукта ТЭМП GLP: Основы доклинических исследований 23 Метод производства субстанции препарата Детальное описание получения субстанции Рост клеток и выделение • Размножение/рост (условия, контролируемые параметры, материалы и среды) • Выделение (методы, контроль стерильности) ТЭМП GLP: Основы доклинических исследований 24 8 Метод производства субстанции препарата Детальное описание получения субстанции Очистка • Инактивация (методы/агенты, стадия, контроль) • Очистка (методы, оборудование, реагенты, критерии разделения на партии, тестирование в процессе, контроль контаминации) • Проверка идентичности, стабильности, уровня; стадии проверки во время очистки • Критерии приемлемости • Улучшение стабильности (консерванты, лиофилизация, абсорбция), проверка в условиях • Детоксификация ТЭМП GLP: Основы доклинических исследований 25 Метод производства субстанции препарата Детальное описание получения субстанции Синтетические субстанции • Синтетические пептиды (синтез, очистка) • Конъюгаты и модифицированные субстанции (исходные материалы, условия реакций, контроль, тест идентичности и активности, стабилизация) • Спецификация ТЭМП GLP: Основы доклинических исследований 26 Контроль производства субстанции препарата Валидация процессов: Роста клеток Выделения Инактивации Очистки Микробиологических процедур Контроль загрязнения и контаминации Стабильность производственных процессов ТЭМП GLP: Основы доклинических исследований 27 9 Субстанция препарата Описание спецификации Идентичность Стабильность Активность Физико-химические методы Валидация, приемлемые критерии Включения, вспомогательные компоненты Связанные с продуктом Производственные Контейнер Поставщик, совместимость, материал, стерильность Тесты на токсичность, контаминацию, сохранение стерильности продукта ТЭМП GLP: Основы доклинических исследований 28 Вакцина: лекарственная форма Состав и характеристики Перечень всех субстанций препарата (активных веществ) Перечень всех вспомогательных веществ и включений (сертификаты анализа, идентичность) ¾ растворители, разбавители, абсорбенты, стабилизаторы Адьюванты (перечень, количество) Консерванты (перечень, обоснование – результаты) Спецификация и методы определения состава Для всех дополнительных веществ ТЭМП GLP: Основы доклинических исследований 29 Вакцина: лекарственная форма Производство Перечень производителей и ответственность Методы производства Стабильность производственных процессов (проверка лотов) ТЭМП GLP: Основы доклинических исследований 30 10 Вакцина: лекарственная форма Спецификация готового продукта Перечень всех методов (стабильность, идентичность, активность, чистота) Сертификаты анализов Данные процесса валидации Контейнер/Упаковка Контроль стерильности, валидация методов Лиофилизация Стабильность Срок хранения, условия хранения Данные стабильности для разных возможных условий ТЭМП GLP: Основы доклинических исследований 31 Вакцина: промежуточная форма для исследования Отличие от готовой коммерческой лекарственной формы Состав Процесс производства, производители Данные сравнения, биоэквивалентность ТЭМП GLP: Основы доклинических исследований 32 Производство вакцин: специальные процедуры и системы Вода и водоснабжение Система вентиляции Компьютерные системы Система стерильности, контроль контаминации ТЭМП GLP: Основы доклинических исследований 33 11
