липопротеиды низкой плотности ch 2656, 2657, 3841, 9702

ЛИПОПРОТЕИДЫ НИЗКОЙ ПЛОТНОСТИ
Назначение.
Для количественного определения in vitro концентрации
ЛПНП-холестерина в сыворотке или плазме.
Кат. No. CH 2656
R1 Энзим-реактив 1
6 х 78 мл
R2. Энзим-реактив 2
3 х 52 мл
Кат. No. CH 2657
R1 Энзим-реактив 1
6 х 30 мл
R2. Энзим-реактив 2
3 х 20 мл
Кат. No. CH 3841
R1 Энзим-реактив 1
3 х 51 мл
R2. Энзим-реактив 2
3 х 20 мл
Кат. No. CH 9702
R1 Энзим-реактив 1
6 х 20 мл
R2. Энзим-реактив 2
2 х 20 мл
Принцип метода.
Анализ состоит из двух отдельных групп реакций:
1. В результате взаимодействия исследуемого образца с
полианионными и амфотерными детергентами, входящими в
состав Реагента 1, происходит связывание ЛПНП, что
делает
их
недоступными
для
взаимодействия
с
холестеролэстеразой. Остальные фракции липо-протеинов
(хиломикроны,
ЛПОНП
и
ЛПВП)
подвергаются
ферментативной
деградации
с
участием
холестеролэстеразы, холестеролоксидазы и каталазы с
образованием бесцветных продуктов реакции.
Сложный эфир
Холестеринэстераза
холестерина
-------------------------→
Холестерин +
жирная кислота
Холестериноксидаза
Холестерин + О2 ---------------------- → Холестенон + Н2О2
Каталаза
2 Н2О2 --------------------→ 2 Н2О + О2
2. При добавлении в реакционную смесь R2 происходит
ингибирование каталазы азидом натрия, содержащимся в
энзим-реактиве 2, и разрушение комплекса ДетергентыЛПНП, что делает холестерин-ЛПНП доступным для
взаимодействия с холестеролэстеразой
Сложный эфир
холестерина
Холестерин эстераза
Холестерин + жирная
кислота
Холестерин оксидаза
Холестерин + O2
Холестенон + H2O2
Пероксидаза
2H2O2 + 4-AA* + TOOS*
Хинон-пигмент + 4H2O
*Ключ: 4 - AA = 4 - Аминоантипирин
TOOS
=
N-Этил-N-(2-гидрокси-3-сульфопропил)-3метиланилин
Интенсивность полученной в ходе реакции хинонеминовой
окраски прямо пропорциональна концентрации холестерина
в пробе, если измерения проводятся при 600 нм.
Сбор и подготовка проб.
Сыворотка, гепаринизированная или ЭДТА плазма.
Проба стабильна 6 дней при температуре хранения
+2..+8°C.
CH 2656, 2657, 3841, 9702
Набор предназначен только для диагностики in vitro.
Не пипетируйте ртом. Соблюдайте обычные при
лабораторных процедурах меры предосторожности.
Стабильность и приготовление реактива.
R1. Энзим-реактив 1
Содержимое флакона готово к использованию.
Реактив стабилен до окончания срока годности при
температуре хранения +2..+8°C в защищенном от
света месте.
Вскрытый реактив стабилен на борту анализатора 28
дней при температуре приблизительно +10°C.
R2. Энзим-реактив 2
Содержимое флакона готово к использованию.
Реактив стабилен до окончания срока годности при
температуре хранения +2..+8°C в защищенном от
света месте.
Вскрытый реактив стабилен на борту анализатора 28
дней при температуре приблизительно +10°C.
Калибровка и контроль качества.
Выполнение калибровки рекомендуется проводить с
использованием RANDOX калибровочной сыворотки
LDL/HDL (CH 2673).
Для проведения ежедневного контроля качества
рекомендуется использовать RANDOX липидный
контроль уровень 1 (LE 2661), уровень 2 (LE 2662) и
уровень 3 (LE 2663).
Искажение результатов.
Перечисленные ниже вещества не влияют на
результаты данного анализа при их содержании в
пробе вплоть до указанных концентраций: билирубин
425 мкмоль/л, интралипид 0,6%, триглицериды 2,9
ммоль/л, гемоглобин 10 г/л.
Значения нормы.
Оптимальный уровень
< 2,59 ммоль/л
Выше оптимального уровня 2,59 – 3,35 ммоль/л
Пограничный уровень
3,36 – 4,12 ммоль/л
Высокий уровень
4,13 – 4,89 ммоль/л
Очень высокий уровень
> 4,9 ммоль/л
Линейность.
Метод линеен до концентрации ЛПНП в сыворотке и
плазме 22.2 ммоль/л (860 мг/дл).
Чувствительность.
Минимально выявляемая концентрация ЛПНП в
пробе, определяемая с приемлемым уровнем
воспроизводимости составляет 0,16 ммоль/л.
Расчет ЛПВП.
Исходя
их
уровня
общего
холестерина,
триглицеридов и ЛПНП можно рассчитать ЛПВП по
формуле:
Состав реактивов.
ЛПВП = Холестерин – ЛПНП – ТГ/2,2
R1 Энзим-реактив 1
Pipes буфер
50 ммоль/л, рН 7,0
Пиперазин-1,4-bis(2-этансульфоновая кислота)
N-Этил-N-(2-гидрокси3-сульфопропил)-3-метиланилин 2,0 ммоль/л
Холестеринэстераза
≥600 Ед/л
Холестериноксидаза
≥500 Ед/л
Каталаза
≥600 КЕд/л
R2 Энзим-реактив 2
Pipes буфер
50 ммоль/л, рН 7,0
Пиперазин-1,4-bis(2-этансульфоновая кислота)
4-аминоантипирин
4 ммоль/л
Пероксидаза
≥4 КЕд/л
Азид натрия
0,05 %
В программе биохимического анализатора Сапфир400 можно задать расчетную методику для
вычисления уровня ЛПВП .
Меры предосторожности