 Иммуногенетические особенности клинического течения хронического лимфолейкоза

Иммуногенетические особенности клинического течения хронического …
309
Е. Л. Назарова, И. А. Докшина, В. И. Шардаков,
В. Т. Демьянова, Е. Н. Зотина

Иммуногенетические особенности
клинического течения
хронического лимфолейкоза
ФГБУН «Кировский НИИ гематологии и переливания крови ФМБА России»
С
реди заболеваний системы крови хронический лимфолейкоз
(ХЛЛ) по своей частоте превалирует у лиц пожилого возраста.
Эта патология является также наиболее распространенной в
странах Европы и Северной Америки, где на долю ХЛЛ приходится около 30% от всех гемобластозов. В настоящее время важное
этиопатогенетическое значение при ХЛЛ придается нарушению
баланса между апоптозом и пролиферацией лимфоидных клеток,
где значимую роль играют генетические факторы, опосредующие соотношение и активность этих процессов, а также определяющие скорость развития и прогрессирования заболевания.
К сожалению, с молекулярно-генетических позиций ХЛЛ изучен
недостаточно полно. Так, подавляющее число работ по исследованию роли различных генов- кандидатов в формировании подверженности хроническому лимфолейкозу – проведено за рубежом, тогда как в Российской Федерации основное внимание в
решении этой проблемы уделено лишь генам системы детоксикации ксенобиотиков. Роль иных генетических вариантов, а
также изменений профиля экспрессии генов иммунного ответа в
формировании и клиническом течении ХЛЛ среди населения
России изучена крайне слабо. Не установлены четкие клиникогенетические параллели с учетом клинического течения ХЛЛ, а
оно весьма вариабельно: от «тлеющего» до прогрессирующего
характера течения заболевания.
Целью настоящего исследования являлась оценка мутационного статуса генов иммунного ответа в качестве прогностического критерия при доброкачественном и прогрессирующем
течении ХЛЛ.
Проведен ретро- и проспективный анализ клинических
данных у 30 больных ХЛЛ – жителей Кировской области, иден-
310
Вопросы онкогематологии
тифицирующих себя как русские. В исследование вошли пациенты, у которых диагноз заболевания установлен на основании
классических критериев в период с 2001 по 2013 гг. Среди них
наблюдалось 17 мужчин и 13 женщин (соотношение 1,3:1).
Геномное тестирование 19 полиморфных участков 14 генов
иммунного ответа (IL1β, IL2, IL4, IL6, IL10, IL17A, TNF, TLR2, TLR3,
TLR6, TLR9, CD14, FCGR2A) проводили методом полимеразной
цепной реакции с аллель-специфичными праймерами и электрофоретической детекцией продуктов реакции в агарозном геле. Распределение генотипов по исследуемым полиморфным локусам проверяли на соответствие равновесию Харди-Вайнберга с
помощью точного теста Фишера. Для расчета результатов использовали пакет программ Statistica V.12 и MS Office Excel 2003.
Cтатистически значимыми считали различия при p<0,05. Анализ
межгенных взаимодействий выполнялся с помощью непараметрической программы GMDR (Generalized Multifactor – Dimensionality Reduction) [Lou X.Y. et al., 2007; http://www.healthsystem. virginia.edu/internet/addiction-genomics/Software/].
Характеристика обследованных больных представлена в
таблице.
Таблица – Характеристика
лимфолейкозом
Показатель
групп
больных
Доброкачественная
форма (n=17)
хроническим
Прогрессирующая
форма (n=13)
Пол:
- мужской
10 (58,8%)
7 (53,9%)
- женский
7 (41,2%)
6 (46,1%)
- соотношение
1,4:1
1,2:1
Возраст на момент постановки
56 (54-64)
58 (58-73)
диагноза (лет), Ме (25-75‰)
Стадия ХЛЛ на момент постановки диагноза (по Binet J. L.
et al., 1981):
-А
2 (11,8%)
0 (0%)
-В
15 (88,2%)
11 (84,6)
-С
0 (0%)
2 (15,4)
Число пациентов, нуждающихся в лечении на момент поста11 (64,7%)
10 (76,9%)
новки диагноза
Период от момента постановки диагноза до начала терапии
19 (8-34)
12 (4-12)
(мес.), Ме (25-75‰)
Общая выживаемость (число
17 (100%)
8 (61,5%)*
больных)
Бессобытийная выживаемость
25 (23-36)
36 (14-60)
(мес.), Ме (25-75‰)
Примечание. Ме – медиана показателя; 25-75‰ – верхний и нижний квартили; * – достоверность различий показателя в группах больных ХЛЛ.
Иммуногенетические особенности клинического течения хронического …
311
Не было выявлено гендерных, возрастных отличий показателей в изучаемых группах, а также сроков начала лечения и бессобытийной выживаемости. В 15,4% случаев прогрессирующее
течение заболевания устанавливалось у пациентов в момент постановки диагноза уже на стадии С, что не наблюдалось при доброкачественном течении процесса. Найдены отличия в общей
выживаемости между I и II группами пациентов (100% vs. 61,5%,
χ2=7,85, р=0,0051): за период наблюдения умерли 5 больных с
прогрессирующим ХЛЛ вследствие перехода заболевания в терминальную фазу.
Учитывая роль генетической компоненты в развитии и течении ХЛЛ, нами была изучена частота распространения аллелей
и генотипов генов иммунного ответа при доброкачественном и
прогрессирующем течении ХЛЛ.
Установлено, что при доброкачественном течении ХЛЛ:
- достоверно чаще выявлялся мутантный аллель А гена TNF
(G-308A) (28,1% vs. 7,7%; χ2=3,90; р=0,05; OR=4,70 (95%CI: 0,9224,10)),
- мутантный аллель С гена TLR9 (T-1237C) (25,0% vs. 3,8%;
2
χ =4,90; р=0,03; OR=8,33 (95%CI: 0,97-71,76)),
- мутантный аллель А гена TLR2 (Arg753Gln) (50,0% vs.
15,4%; χ2=3,80; р=0,05; OR=5,50 (95%CI: 0,91-33,18)),
- реже – аллель «дикого типа» С гена IL6 (C-174G) (12,5% vs.
46,2%; χ2=4,07; р=0,04; OR=6,00 (95%CI: 0,95-37,77)).
При анализе межгенных взаимодействий выявленных генов-кандидатов предрасположенности к развитию прогрессирующего течения ХЛЛ были найдены статистически достоверные сочетания гаплотипов в двух- и трехлокусной моделях. Так,
при наличии генотипа ТТ гена TLR9 (T-1237C) в сочетании с генотипом GG гена TLR2 (Arg753Gln) риск развития прогрессирующей формы заболевания возрастал в 23,8 раза (χ2=6,23; р=0,01;
OR=23,83 (95%CI: 1,50-377,42)), а при сочетании вышеуказанных
гаплотипов с генотипом GG гена TNF (G-308A) – в 36 раз
((χ2=6,70; р=0,01; OR=36,00 (95%CI: 1,43-905,40)).
Таким образом, с доброкачественным характером течения
ХЛЛ и, следовательно, выживаемостью пациентов уже в момент
постановки диагноза коррелируют присутствие мутантных аллелей генов TNF, TLR9 и TLR2, а также низкая частота выявления
аллеля «дикого типа» гена IL6. Кроме того, наличие комбинации
нормальных гомозигот генов TNF, TLR9 и TLR2 увеличивает вероятность развития прогрессирующей формы заболевания, что
может способствовать оптимизации выбора терапии.