Острая и хроническая недостаточность мозгового

Вестник Бурятского госуниверситета
2010/12
Макушкина Юлия Эдуардовна – аспирант Института общей и экспериментальной биологии СО РАН.
670047, Улан-Удэ, ул. Сахьяновой 6, тел. 8(3012) 43-37-13.
Бардымова Саяна Дамдинжаповна – заместитель главного врача по лечебной работе Республиканского
перинатального центра. Улан-Удэ, ул. Солнечная 4 а.
Николаев Михаил Павлович – врач-уролог Городской клинической больницы скорой медицинской помощи
им. В.В. Ангапова. 670042, Улан-Удэ, пр. Строителей 1.
Mondodoev Alexander Gavrilovich – dr. of medical sci., senior stuff scientist, Institute of General and Experimental Biology, SB RAS. Ulan-Ude, Sakhyanova str., 6.
Lemza Sergey Vasilievich – cand. of biol. sci., senior scientist, Institute of General and Experimental Biology, SB
RAS. Ulan-Ude, Sakhyanova str., 6, ph. (3012) 433713.
Azhunova Tatyana Alexandrovna – dr of biol. sci., leading scientist, Institute of General and Experimental Biology,
SB RAS. Ulan-Ude, Sakhyanova str., 6, ph. (3012) 433713, e-mail: azhunova&biol.bscnet.ru.
Makushkina Yuliya Eduardovna – post-graduate student of laboratory of Institute of General and Experimental
Biology SB RAS. Ulan-Ude, Sakhyanova str., 6.
Bardymova Sayana Damdinzhapovna – obstetrian-gynecologist of Republican perinatal centre. Ulan-Ude, Solnechnaya str., 4 a.
Nikolaev Mikhail Pavlovich – urologist of urological department of the V.V. Angapov Municiple clinical hospital of
first aid. 670042, Ulan-Ude, pr. Stroiteley 1, ph.: 8(3012) 55-62-58; e-mail: bsmp@mail.ru
Т.С. Серебрянская, Г.Г. Николаева,
М.Ю. Тулонов, С.М. Гуляев
УДК 615.43 : 547.466
СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ СВОБОДНЫХ АМИНОКИСЛОТ СБОРА
ЛЕКАРСТВЕННЫХ РАСТЕНИЙ И ЕГО ПОЛИЭКСТРАКТА СУХОГО,
ОБЛАДАЮЩИХ НЕЙРОПРОТЕКТОРНЫМ ДЕЙСТВИЕМ
Статья посвящена методу определения качественного и количественного состава свободных аминокислот
сбора девяти лекарственных растений и его полиэкстракта сухого. В результате проведенного эксперимента
обнаружено 24 свободных аминокислоты в сборе лекарственных растений и 19 – в полиэкстракте сбора сухом.
Из обнаруженных свободных аминокислот 9 являются незаменимыми. Проведен сравнительный анализ полученных данных.
Ключевые слова: свободная аминокислота, полиэкстракт.
Т.S. Serebryanskaya, G.G. Nikolaeva,
М.Yu. Тulonov, S.М. Gulyaev
The comparative analysis of free amino acids of herbs collection
and its polyextract having neuroprotective action
The article is devoted to the estimation method of a qualitative composition and a quantitative composition of free
amino acids of nine herbs collection and its polyextract. As the result of the experiment it was founded twenty four free
amino acids in the collection of herbs and nineteen – in a dry polyextract of the collection. Among the detected free amino
acids 9 are irreplaceable. A contrastive analysis of the gotten data was made.
Key words: free amino acid, polyextract.
Острая и хроническая недостаточность мозгового кровообращения является одной из ведущих причин заболеваемости, смертности и инвалидизации населения как в России, так и во всём мире. В связи
с этим нами разрабатывается биологически активная добавка к пище не только с целью профилактики
заболевания, но и для восстановления после перенесенного инсульта. В состав рекомендованных к использованию БАД к пище («Невро-Стронг», «Аминокомпозит-Р» и др.) входят аминокислоты [3].
Аминокислоты являются одним из самых распространенных классов биологически активных веществ. В живых организмах они находятся в связанном и свободном состоянии. Связанные аминокислоты как составные части белков участвуют во всех биохимических процессах живой клетки; свободные находятся в динамическом равновесии при многочисленных обменных реакциях, а также выпол88
Т.С. Серебрянская, Г.Г. Николаева, М.Ю. Тулонов и др. Сравнительный анализ свободных аминокислот сбора лекарственных
растений и его полиэкстракта сухого, обладающих нейропротекторным действием
няют специфическую функцию. Благодаря этому свободные аминокислоты широко применяются при
профилактике и лечении многих заболеваний головного мозга, в т.ч. острой и хронической недостаточности мозгового кровообращения [1, 2].
Нами разработан многокомпонентный сбор лекарственных растений и полиэкстракт сухой на его
основе, обладающие нейропротекторной активностью. В состав сбора входят шлемник байкальский
Scutellaria baicalensis Georgi, астрагал перепончатый Astragalus membranaceus (Fisch.) Bunge, боярышник кроваво-красный Crataegus sanguine Pall. и др. [4]. Данные компоненты представляют собой различные морфологические части растений – соцветия, плоды, траву, побеги, корневища и корни. Они
подобраны по принципу сочетания разностороннего действия на организм и дублирования оказываемого действия.
Цель работы: изучение качественного и количественного состава свободных аминокислот сбора
лекарственных растений и его полиэкстракта сухого в сравнительном аспекте.
Методика
Качественное обнаружение аминокислот проводили с помощью нингидриновой реакции [1, 2]. К 1
мл очищенного водного извлечения сбора лекарственных растений прибавляли 1 мл свежеприготовленного 0,25 %-ного раствора нингидрина в спирте этиловом и осторожно нагревали в течение пяти минут
на кипящей водяной бане. Появлялось постепенно усиливающееся красно-фиолетовое окрашивание.
Для идентификации содержания свободных аминокислот использовали автоматический аминокислотный анализатор марки ААА-339 (Чехия).
1,000 г (точная навеска) измельченного сбора с частицами, проходящими сквозь сито с отверстиями диаметром 2 мм, экстрагировали водой, очищенной на кипящей водяной бане в течение 30 минут.
Водное извлечение очищенной хлороформом от липидов и гидрофобных пигментов, осаждение полисахаридов проводили двойным количеством 96 %-ного спирта этилового. Полученный осадок удаляли
центрифугированием, концентрирование водного извлечения проводили на роторном испарителе при
температуре 35 ºС.
Полученный сухой остаток растворяли в цитрат-литиевом буферном растворе (рН 2.2), осаждение
белков проводили 30%-ной сульфосалициловой кислотой, образец центрифугировали и анализировали. Содержание аминокислот определяли по площади пиков идентифицируемых аминокислот.
По приведенной выше методике проводили определение содержания свободных аминокислот в полиэкстракте сбора сухом.
Результаты
С помощью автоматического аминокислотного анализатора марки ААА-339 (Чехия) были определены
свободные аминокислоты сбора и его полиэкстракта сухого. Результаты представлены в таблицах 1 и 2.
Свободные аминокислоты сбора лекарственных растений
№
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
Аминокислота
Треонин*
Таурин
Серин
Цистин
Метионин*
Изолейцин*
Цистеиновая кислота
Аспарагиновая кислота
Аспарагин
Лейцин*
Глутамин
Глицин
*-незаменимые аминокислоты
мг/1 г
№
Аминокислота
Таблица 1
мг/1 г
0,019262
0,118946
0,006846
0,136534
0,095903
0,074958
0,028801
0,028156
13
14
15
16
17
18
19
20
Аланин
α-аминомасляная кислота
Валин*
Глутаминовая кислота
γ-аминомасляная кислота
Фенилаланин*
Тирозин
Этаноламин
0,010179
0,224449
0,109781
1,047312
0,319271
0,103524
0,055753
0,005609
0,560968
0,033675
0,457765
0,120433
21
22
23
24
Орнитин
Лизин*
Гистидин*
Аргинин*
0,011241
0,088235
0,205857
1,013431
89
Вестник Бурятского госуниверситета
2010/12
Свободные аминокислоты полиэкстракта сбора сухого
№
Аминокислота
мг/1 г
Таблица 2
№
Аминокислота
мг/1 г
1
Треонин*
0,287138
11
Глутаминовая кислота
0,895135
2
Серин
0,283770
12
γ-аминомасляная кислота
0,233112
3
Цистин
0,811013
13
Фенилаланин*
0,087623
4
Метионин*
0,161868
14
Тирозин
0,087229
5
Изолейцин*
0,250929
15
Этаноламин
0,033726
6
Аспарагиновая кислота
0,179173
16
Орнитин
0,006386
7
Лейцин*
4,740365
17
Лизин*
0,036975
8
Глицин
0,413050
18
Гистидин*
0,623560
9
Аланин
0,511629
19
Аргинин*
0,107968
10
Валин*
0,128279
* – незаменимые аминокислоты.
Выводы
В результате проведенных экспериментов был определен качественный и количественный состав
свободных аминокислот сбора и его полиэкстракта сухого. Обнаружено 24 свободных аминокислоты
в составе сбора и 19 – в составе полиэкстракта сбора сухого. Среди обнаруженных аминокислот 9 из
10-ти являются незаменимыми.
В композиции в максимальном количестве содержится аргинин* (1,013431 мг/1г), в минимальном
– серин (0,006846 мг/1г).
В полиэкстракте сбора сухом в максимальном количестве содержится лейцин* (4,740365 мг/1г), в
минимальном – орнитин (0,006386 мг/1г).
При сравнении полученных данных обнаружено, что в сборе в отличие от его полиэкстракта сухого
присутствуют цистеиновая кислота, таурин, аспарагин, глутамин, α-аминомасляная кислота; содержание аргинина значительно больше, а содержание аланина, цистина и лейцина меньше, чем в полиэкстракте сбора сухом.
Литература
1. Дэвени Т., Гергей Я. Аминокислоты, пептиды и белки. – М.: Мир, 1974. – 364 с.
2. Якубке Х.-Д., Ешкайт Х. Аминокислоты, пептиды, белки: пер. с нем. – М.: Мир, 1985. – 456 с.
3. Федеральный реестр биологически активных добавок к пище / под ред. Т.Л. Пилат. – М.: Когелет, 2000. – С. 157-160.
4. Serebryanskaya T.S., Nikolaeva G.G. Componental structure of a composition of neyroprotective actions. Development and
a substantiation // The 4th International Symposium on Traditional Medicine and Innovative Drugs. – Inner Mongolia, P.R. CHINA,
2009. – P. 26.
Серебрянская Татьяна Степановна – аспирант Института общей и экспериментальной биологии СО РАН,
лаборатории медико-биологических исследований. 670047, Улан-Удэ, ул. Сахьяновой, 6, тел.: 8-9025-62-00-91,
e-mail: t_serebryanskaya@mail.ru
Николаева Галина Григорьевна – доктор фармацевтических наук, профессор, ведущий научный сотрудник
Института общей и экспериментальной биологии СО РАН, лаборатории медико-биологических исследований.
670047, Улан-Удэ, ул. Сахьяновой, 6, тел.: 8-9021-65-43-47.
Тулонов Михаил Юрьевич – аспирант Института общей и экспериментальной биологии СО РАН, лаборатория экспериментальной фармакологии. 670047, Улан-Удэ, ул. Сахьяновой, 6, тел.: 8-9021-67-02-49.
Гуляев Сергей Миронович – кандидат медицинских наук, научный сотрудник Института общей и экспериментальной биологии СО РАН, лаборатория экспериментальной фармакологии. 670047, Улан-Удэ, ул. Сахьяновой 6, тел.: 8-9025-64-55-90, e-mail: s-gulyaev@inbox.ru
90
И.К. Иванова, А.Н. Петунова, Э.А. Алексеева и др. Механизмы антистрессорного действия растительного средства «Тантон»
Serebryanskaya Tatyana Stepanovna – post-graduate of laboratory of experimental pharmacology, Institute of
General and Experimental Biology SB RAS. 670047, Ulan-Ude, Sahyanova str., 6, ph. 8-9025-62-00-91, e-mail: t_
serebryanskaya@mail.ru
Nikolaeva Galina Grigorievna – doctor of pharmaceutical science, professor, senior scientific researcher of laboratory of medical and biological researches of Institute of General and Experimental Biology SB RAS. 670047, Ulan-Ude,
Sahyanova str. 6, ph.: 8-9021-65-43-47.
Tulonov Mikhail Yurievich, post-graduate of laboratory of experimental pharmacology, Institute of General and
Experimental Biology SB RAS. 670047, Ulan-Ude, Sahyanova str., 6, ph: 8-9021-67-02-49.
Gulyaev Sergey Mironovich – candidate of medical science, scientific researcher of laboratory of experimental
pharmacology, Institute of General and Experimental Biology SB RAS. 670047, Ulan-Ude, Sahyanova str. 6, ph.: 8-902564-55-90, e-mail: s-gulyaev@inbox.ru
И.К. Иванова, А.Н. Петунова,
Э.А Алексеева, Л.Н. Шантанова
УДК 615.322
МЕХАНИЗМЫ АНТИСТРЕССОРНОГО ДЕЙСТВИЯ РАСТИТЕЛЬНОГО СРЕДСТВА «ТАНТОН»
Статья посвящена изучению механизмов антистрессорного действия растительного средства «Тантон»
при продолжительном иммобилизационном стрессе белых крыс с изучением выраженности катаболических повреждений тимуса, надпочечников и селезенки, описанием патоморфологических изменений слизистой оболочки
желудка, определением показателей антиоксидантной системы и концентрации ТБК-активных продуктов, исследованием мембраностабилизирующей активности «Тантона».
Ключевые слова: многокомпонентное растительное средство, «Тантон», иммобилизационный стресс, биологически активные вещества, фармакологическая эффективность.
I.K. Ivanova, A.N. Petunova,
E.A. Alekseeva, L.N. Shantanova
Mechanisms of the Antistressful Effect
of the Vegetative Medicine «Tanton»
The article is devoted to the studying of mechanisms of antistressful effect of the vegetative medicine «Tanton» at the
continuous immobilizative stress of white rats with the studying of cathobolic injuries of thimus, superarenal glands and
spleen, the description of pathomorphological changes of the mucous membrane of the stomach, the definition of indices
of the antioxidant system and the concentration of TBA active products, investigation of the membranestabilizing action
of «Tanton».
Key words: multicomponent vegetative medicine «Tanton», immobilizing stress, biologically active substances, pharmacological effectiveness.
За последние десятилетия накоплен достаточно большой клинико-экспериментальный материал,
свидетельствующий об эффективности профилактики и коррекции стрессорных повреждений с помощью адаптогенов, в ряду которых наиболее перспективными являются средства природного происхождения. Ранее нами было установлено, что жидкий экстракт «Тантон» обладает адаптогенной активностью, повышая резистентность организма к действию экстремальных факторов различной природы,
в том числе к острому иммобилизационному и эмоциональному стрессу.
Цель настоящего исследования – определение возможных механизмов антистрессорного действия
растительного средства «Тантон».
Материалы и методы
Исследования выполнены на крысах линии Вистар обоего пола массой 180-190 г. Животные были
разделены на 4 группы: 1-я – интактные животные; 2-я – контрольные животные, которых подвергали
иммобилизационному стрессу; 3-я – животные, получавшие «Тантон» при иммобилизационном стрессе; 4-я – животные, получавшие препарат сравнения. Иммобилизационный стресс моделировали путем
помещения животных в специальные пластиковые пеналы в течение 8-ми часов. Животным 3-й группы
внутрижелудочно вводили деалкоголизированный раствор «Тантона» в объеме 3,0 мл/кг превентивно в
течение семи дней до иммобилизации. Крысы контрольной группы получали эквиобъемное количество
91