ВИРУСНЫЕ ГЕПАТИТЫ (А, Е) У ЛАБОРАТОРНЫХ ПРИМАТОВ

ВИРУСНЫЕ ГЕПАТИТЫ (А, Е) У ЛАБОРАТОРНЫХ ПРИМАТОВ.
ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ИНФЕКЦИЙ.
Корзая Л.И., Кебурия В.В., Лазарева И.Я., Лапин Б.А.
Вирусные гепатиты А и Е (ГА и ГЕ) являются острыми инфекциями с фекальнооральным механизмом передачи. ГА распространен повсеместно в различных регионах
мира, а ГЕ является эндемичной инфекцией, которая регистрируется в странах
тропического и субтропического климата. Россия является неэндемичной по ГЕ страной.
В последнее время возник повышенный интерес к гепатиту Е как зоонозной инфекции,
что связано с обнаружением антител к ВГЕ (анти-ВГЕ) среди населения неэндемичных
регионов, в том числе и в нашей стране. Циркуляция ВГЕ - подобного вируса обнаружена
среди различных видов животных - свиней, крыс, а также кур [4, 6]. Наиболее важным в
настоящее время является
проведение сероэпидемиологического мониторинга, поиск
случаев острого гепатита Е, возникших непосредственно на территории России, а также
обнаружение и характеристика вирусов от людей и животных [4].
Известно, что маркеры вирусных ГА и ГЕ обнаруживаются у обезьян многих
приматологических центров, в том числе, и у обезьян Адлерского питомника [1, 2, 3, 6].
Вопрос об эпидемиологическом значении обезьяньих штаммов ВГА для человека
окончательно не решен. По данным приматологической группы европейской ассоциации
по лабораторным животным, гепатит А обезьян относится к инфекциям второй группы
биологической опасности для человека [8]. Однако существование различных генотипов
ВГА человека (1А, 1B, 2, 3А, 3В, 7) и низших обезьян Старого Света (4, 5, 6) [5, 7], а также
отсутствие сведений о случаях возникновения ГА у обслуживающего обезьян (за
исключением шимпанзе) , дают основание отрицать эпидемиологическую роль штаммов
ВГА обезьяньего происхождения для человека [5]. Принимают ли участие обезьяны в
распространении ВГЕ - инфекции в человеческой популяции, до настоящего времени не
изучено. В предлагаемой генотипической классификации штаммов ВГЕ человеческого и
зоонозного происхождения [9] отсутствуют генотипические варианты штаммов ВГЕ от
обезьян. В связи с этим, представляют интерес недавно полученные нами данные об
обнаружении анти-ВГЕ у нескольких сотрудников, принадлежащих к обслуживающему
персоналу питомника [1, 2 ].
Настоящая работа посвящена изучению частоты распространения анти-ВГА и антиВГЕ (IgG и IgM) среди обезьян в сравнительном аспекте с человеком, в частности,
обслуживающим персоналом питомника и некоторыми другими категориями населения
Адлерского
региона.
Представлялось
важным
проанализировать
и
оценить
1
эпизоотологическую
и
эпидемиологическую
ситуацию
в
отношении
этих
двух
энтеральных инфекций - ГА и ГЕ.
В работе использовали коммерческие иммуноферментные диагностические тестсистемы - "ДС-ИФА-АНТИ-HEV-G" и "ДС-ИФА-АНТИ-HEV-M",
а также "ДС-ИФА-АНТИ-
HAV-G" и "ДС-ИФА-АНТИ-HAV-M" производства НПО "Диагностические системы" (Нижний
Новгород).
Представляют интерес данные о довольно высокой частоте распространения антиВГЕ среди макак Адлерского питомника в период 1999-2007 гг. Анти-ВГЕ IgG были
обнаружены у 334 (50,2 %) из 665 обследованных макак резусов, у 16 (16 %) из 100 макак
яванских, а также у 3 (2,8 %) из 106 зеленых мартышек. Частота выявления анти-ВГЕ
широко варьировала среди обезьян в зависимости от места содержания. Следует
отметить факт обнаружения анти-ВГЕ IgM, свидетельствующих о случаях «свежей»
инфекции, у 3 (4,3 %) из 69 макак яванских и у 12 (2,9 %) из 418 обследованных макак
резусов. Реактивность таких сывороток варьировала от 0,389 до 1,200 ОП450.
Серопозитивные особи встречались во всех возрастных группах обезьян, начиная с 1
года. Подробный анализ частоты распространения анти-ВГЕ у макак резусов в
зависимости от места содержания и возраста был проведен нами ранее [2].
Являлось важным проведение сравнительного изучения частоты распространения
анти–ВГА и анти-ВГЕ среди макак резусов, содержашихся на 14 различных участках
питомника (вольеры) в период 2003-2007 г.г. (табл. 1). Как видно, общая частота
распространения анти-ВГА среди макак резусов была в 2 раза выше (83,3%), чем антиВГЕ – (42,8%). Показатели анти-ВГА и анти-ВГЕ варьировали в зависимости от места
содержания обезьян (52-100 % и 10-88,9% соответственно), что говорит о различной
эпизоотологической ситуации на различных участках питомника. Практически во всех
вольерах, за исключением двух, были обнаружены особи с анти-ВГА IgM, что
свидетельствует о наличии случаев «свежей» инфекции. Процент
анти-ВГА IgM -
позитивных обезьян варьировал от 3,2 до 42,1% и суммарно составил 13,2%. Наиболее
высокие показатели были обнаружены в 4-х вольерах (21,9-42,1%). Что касается антиВГЕ IgM, то они были обнаружены лишь у 5 (1,7%) из 291 обследованных обезьян,
причем, только в двух из 14 обследованных вольер. Как видно из табл. 1, реактивность
сывороток обезьян к ВГА и ВГЕ широко варьировала от места их содержания, но в целом,
оказалась практически одинаковой и достаточно высокой (значения ОП450 составили
более 1.000). На фоне высокой частоты распространения анти-ВГА среди обезьян
практически всех вольер отмечался высокий удельный показатель ВГЕ-позитивных
обезьян лишь в 5 из 14.
Таблица 1.
Частота распространения анти-ВГА и анти-ВГЕ среди макак резусов (период 2003 -2007).
2
№№ №№
Дата
п.п. вольер обследования
Анти-HAV
Ig G
Анти-HEV
Ig M
* ОП450
Ig G
ОП450
Ig M
* ОП45
0
*
*
ОП450
1.
73
23.09.03
16/19*
(84,2)
0.625
8/19
(42,1)
0.363
3/19
(15,8)
1.241
0/3
(0)
0
2.
66
5.11.03
32/32
(100)
1.236
7/32
(21,9)
0.456
27/33
(81,8)
1.418
0/23
(0)
0
3.
60
15.09.05
29/31
(93,5)
1.027
1/31
(3,2)
0.351
6/27
(22,2)
0.979
0/31
(0)
0
4.
74
21.09.05
24/24
(100)
1.562
7/24
(29,2)
0.599
8/16
(50)
0.773
0/13
(0)
0
5.
73-2
5.10.05
22/25
(88,0)
0.899
1/25
(4,0)
0.402
11/25
(44,0)
1.017
3/25
(12,0)
0.283
6.
29
25.10.05
13/18
(72,2)
1.119
3/18
(16,7)
0.551
16/18
(88,9)
1.505
0/25
(0)
0
7.
31
19.12.05
17/21
(81)
0.794
0/21
(0)
0.412
7/21
(33,3)
0.518
0/21
(0)
0
8.
30
1.02.06
6/6
(100)
0.942
0/10
(0)
0
11/14
(78,6)
1.460
0/14
(0)
0
9.
8
7.02.06
13/13
(100)
1.067
5/15
(33,3)
0.535
5/14
(35,7)
0.691
2/14
(14,3)
0.342
10.
63
28.02.06
26/27
(96,3)
1.173
1/27
(3,7)
0.530
14 /24
(58,3)
1.337
0/27
(0)
0
11.
25
1.12.06
11/20
(55)
0.689
2/20
(10)
0.653
2/20
(10)
1.335
0/20
(0)
0
12.
59
11.01.07
18/27
(66,7)
0.672
1/27
(3,7)
0.661
7/27
(25,9)
0.826
0/27
(0)
0
13.
42
7.02.07
20/25
(80)
0.775
1/25
(4)
0.327
7/25
(28)
1.032
0/25
(0)
0
14.
28
28.02.07
12/23
(52)
0.797
0/23
(0)
0
7/23
(30,4)
1.126
0/23
(0)
0
259/311
(83,3)
1.006
42/317
(13,2)
0.482 131/306 1.141
(42,8)
5/291
(1,7)
0.307
Итого:
Примечание: * количество позитивных обезьян/число обследованных (%),
ОП450 – реактивность сывороток в ИФА (средняя арифметическая), 0 – негативные
сыворотки.
Следует отметить, что процент серопозитивных обезьян к ВГА (83,3 %) в 2003-2007
г.г. оказался в 1,8 раза выше по сравнению с таковым (47,3 %) в 1999-2000 г.г.[1]. Повидимому, как и в человеческой популяции, среди обезьян происходит колебание
стадного иммунитета и, как следствие, происходит циклический подъем заболеваемости.
3
Эпидемиологические аспекты инфекции. С целью оценки эпидемиологической
ситуации в отношении ГЕ было проведено сероэпидемиологическое обследование
различных категорий сотрудников НИИ медицинской приматологии и обслуживающего
персонала питомника, студентов РУДН, обучающихся на базе НИИ МП РАМН, а также
жителей окружающего региона (Адлерский район) на наличие анти-ВГЕ (табл. 2). При
неоднократном обследовании подтвердились данные об обнаружении анти-ВГЕ у 3
(5,3%) из 57 обследованных сотрудников Института, причем все 3 (9,1%) из 33
принадлежали к обслуживающему персоналу питомника, т.е. к группе наиболее высокого
риска. Впервые факт обнаружения анти-ВГЕ у сотрудников был выявлен в 2002-2003 г. В
дальнейшем, новых случаев сероконверсии среди сотрудников не наблюдалось.
Таблица 2.
Частота обнаружения анти-ВГЕ среди сотрудников НИИ МП РАМН
и населения Адлерского региона.
Группа обследованных лиц
Сотрудники НИИ МП РАМН (научные
сотрудники и лаборанты научных
подразделений)
Обслуживающий персонал питомника
(рабочие по уходу за обезьянами,
зоотехники, ветеринарные врачи и
фельдшера, работающие с обезьянами)
Студенты РУДН, обучающиеся на базе НИИ
МП РАМН
Пациенты городской поликлиники №2,
обслуживающей Адлерский регион г. Сочи.
Пациенты Адлерской районной больницы
Примечание: *
Анти-ВГЕ
IgG
0/24*
(0)
Анти-ВГЕ
IgM
0/24
(0)
3/33
(9,1)
0/16
(0)
1/18
0/18
(5,6)
(0)
45/300
7/255
(15)
(2,7)
4/17
2/17
(23,5)
(11,8)
количество позитивных сывороток/число исследованных (%)
Наибольшее значение имеют данные о значительной частоте распространения
обнаружении анти-ВГЕ среди взрослого населения Адлерского региона – пациентов
лечебно-профилактических
учреждений,
сыворотки
которых
были
направлены
в
лабораторию для биохимических исследований. Удельный вес анти-ВГЕ позитивных
сывороток среди пациентов поликлиники составил 15%, а среди больных - 23,5%. Всего
нами выявлено 49 (15,5%) из 317 анти-ВГЕ IgG позитивных образцов сывороток от людей,
которые проживали как в городской, так и в сельской местности. Возраст серопозитивных
лиц варьировал от 22 до 83 лет и в среднем составил 60 лет. Позитивные сыворотки
характеризовались различной реактивностью. Высокие показатели (1.000 – 2.358 ОП450)
были выявлены в 17 (38,6%) из 44 анти-ВГЕ IgG позитивных сывороток, средние (0.6001.000 ОП450) – в 8 (18,2%) и невысокие (0.280-0.600 ОП450) – в 19 (43,2%). Средняя
арифметическая титра составила 0.952 ОП450. О существовании свежих случаев
4
инфекции
свидетельствовало
обнаружение
анти-ВГЕ
IgM
у
9
(3,3%)
из
272
обследованных лиц. У трех человек анти-ВГЕ IgM были выявлены на фоне присутствия
анти-ВГЕ IgG (значения реактивности сывороток составили 0.352 и 1.748, 1.868 и 1.643,
1.573 и 0.284 ОП450 соответственно). У остальных шести человек были обнаружены
только анти-ВГЕ IgM (1.010, 0.544, 0.475, 0.373, 0.352, 0.333 ОП450 соответственно).
Представлялось интересным охарактеризовать анти-ВГЕ - позитивные сыворотки от
человека и на присутствие маркеров ВГА. Было установлено, что анти-ВГА были
обнаружены в 40 (91%) 44 исследованных сывороток. Преобладали сыворотки с высокой
и средней степенью реактивности в отношении ВГА. Высокие показатели (1.000 – 1.827
ОП450) были выявлены в 21 (52,5%) из 40 анти-ВГЕ IgG позитивных сывороток, средние
(0.600-1.000 ОП450) – в 12 (30%) и невысокие (0.280-0.600 ОП450) – в 7 (17,5%). Средняя
арифметическая титра составила 0.952 ОП450.
Следует
обратить
внимание,
что
частота
распространения
анти-ВГА
среди
обслуживающего персонала питомника обезьян составила 7 (50%) из 14, что оказалось
даже ниже, чем среди сотрудников научных сотрудников и лаборантов НИИ МП РАМН 16 (76,2%) из 21, а также среди студентов – 6 (75%) из 8 обследованных. Средняя
реактивность сывороток по анти-ВГА была, наоборот, выше в первой группе (0,839 ОП50)
по сравнению с двумя другими группами (0.447 и 0.493 соответственно)
Таким образом, в результате проведенных исследований выявлена высокая частота
распространения анти-ВГА и анти-ВГЕ среди макак резусов - 83,3% и 42,8%
соответственно, что свидетельствует о широкой циркуляции этих вирусов в питомнике.
Наличие IgM позитивных особей, как по анти-ВГА (13,2%), так и по анти-ВГЕ (1,7%),
является показателем активности эпизоотологического процесса среди обезьян, особенно
в отношении ГА (среди отдельных групп обезьян этот показатель достигал 42%). В этот же
самый период частота распространения анти-ВГА и анти-ВГЕ среди сотрудников НИИ МП
РАМН составила 65,7% и 5,3% соответственно. Не наблюдалось существенных различий
в частоте распространения
анти-ВГА среди сотрудников отдельных групп, как и не
выявлено существенной разницы в уровне гуморального иммунитета. В каждой из
профессиональных было обнаружено лишь по 1-2 человека, имеющих высокую
реактивность сывороток к ВГА, у остальных были выявлены, в основном, низкие
показатели. Следует подчеркнуть, что все серопозитивные по анти-ВГЕ индивидуумы
(9,1%) находились в группе наиболее высокого риска и имели прямой контакт с
обезьянами. Случаев заболевания ГА и ГЕ у обслуживающего персонала питомника не
отмечалось, однако выявлены единичные факты выраженной сероконверсии как к ВГА,
так и к ВГЕ при динамическом наблюдении.
Установлен значительный уровень выявления анти-ВГЕ IgG (15,5 %)
взрослого
населения
Адлерского
региона,
являющихся
пациентами
среди
лечебно-
5
профилактических учреждений и территориально не связанных с местом расположения
питомника обезьян. Возраст серопозитивных лиц варьировал от 22 до 83 лет. Особый
интерес представляют данные по выявлению анти-ВГЕ IgM в 9 (2,9%) из 313
исследуемых сывороток человека, что свидетельствует о наличии случаев острого ГЕ,
обнаруженных
непосредственно
на
территории
южного
региона
нашей
страны.
Дальнейшие исследования, возможно, позволят выявить и охарактеризовать штаммы
ВГЕ, циркулирующие как среди населения Адлерского региона, так и среди обезьян
приматологического центра.
Настоящее исследование поддержано РФФИ (№ проекта 06-04-96794)
Литература
1. Корзая Л.И., Лапин Б.А., Кебурия В.В., Лазарева И.Я., Крылова Р.И. Вирусные гепатиты
у лабораторных приматов. // В кн.: Перспективные направления использования приматов
в медико-биологических исследованиях. Материалы Российской научной конференции
(Сочи-Адлер, 8-10 августа 2006 г.). - С. 43-48.
2. Корзая Л.И., Лапин Б.А., Кебурия В.В., Лазарева И.Я. Частота выявления антител к
вирусу гепатита Е у обслуживающего персонала и у макак Адлерского питомника. // Вопр.
вирусол. – 2007. - С. 36-40.
3. Лапин Б.А., Шевцова З.В., Корзая Л.И., Крылова Р.И. Спонтанный и экспериментальный
гепатит А у низших обезьян Старого Света и их использование для изучения этой
инфекции. // Мир вирусных гепатитов. - 2006. - №6. - С. 3-9.
4. Михайлов М.И., Замятина М.А., Полещук В.Ф. Вирусный гепатит Е. Проблемы изучения.
// Вопр. вирусол. – 2005. - № 3. – С. 20-22.
5. Полещук В.Ф., Михайлов М.И., Замятина Н.А. Приматные модели вирусных гепатитов
человека. . // Вопр. вирусол. – 2006. - № 4. – С. 6-13.
6. Purcell R.H. and Emerson S.U. Animal models of hepatitis A and E. // ILAR. - 2001 - Vol. 42.
- No 2. –P. 161 – 177.
7. Robertson B.H. Viral hepatitis and primates: historical and molecular analyses of human and
non-human primate hepatitis A, B and GB-related viruses. // J. Viral. Hepatit. – 2001. – Vol. 8.
– P. 233-242.
8. Weber H., Berge E., Finch J. Health monitoring of non-human primate colonies. // Lab.
Anim. - 1999. - Vol. 33, Suppl. - P. S1-S18.
9. Wang.Y., Ling R., Erker J.C. et al. A divergent genotype of hepatitis E virus in Chinese
patients with acute hepatitis. // J. Gen. Virol. – 99. – Vol. 80. – P. 169-177.
6
В кн.: Фундаментальные и прикладные проблемы медицины и биологии в опытах
на обезьянах. Материалы международной научной конференции. 19-22 сентября
2007 года, Сочи-Адлер. – 2007. -С. 94-103.
ВИРУСНЫЕ ГЕПАТИТЫ (А, Е) У ЛАБОРАТОРНЫХ ПРИМАТОВ.
ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ИНФЕКЦИЙ.
Корзая Л.И., Кебурия В.В., Лазарева И.Я., Лапин Б.А.
РЕЗЮМЕ
Настоящая работа посвящена изучению частоты распространения анти-ВГА и антиВГЕ (IgG и IgM) среди обезьян в сравнительном аспекте с человеком, в частности,
обслуживающим персоналом питомника и некоторыми другими категориями населения
Адлерского
региона.
Представлялось
важным
проанализировать
и
оценить
эпизоотологическую и эпидемиологическую ситуацию в отношении двух энтеральных
инфекций - ГА и ГЕ.
По материалам 1999-2007 г.г. получены данные о довольно высокой частоте
распространения анти-ВГЕ среди обезьян Адлерского питомника. Анти-ВГЕ IgG были
обнаружены у 334 (50,2 %) из 665 обследованных макак резусов, у 16 (16 %) из 100 макак
яванских, а также у 3 (2,8 %) из 106 зеленых мартышек. Частота выявления анти-ВГЕ
широко варьировала среди обезьян в зависимости от места содержания. Следует
отметить факт обнаружения анти-ВГЕ IgM, свидетельствующих о случаях «свежей»
инфекции, у 3 (4,3 %) из 69 макак яванских и у 12 (2,9 %) из 418 обследованных макак
резусов. Реактивность таких сывороток варьировала от 0,389 до 1,200 ОП450.
Серопозитивные особи встречались во всех возрастных группах обезьян, начиная с 1
года.
Представлялось важным провести сравнительное изучение частоты распространения
анти–ВГА и анти-ВГЕ среди макак резусов, содержащихся на 14 различных участках
питомника (вольеры). Выявлена высокая частота распространения анти-ВГА и анти-ВГЕ
среди макак резусов - 83,3% и 42,8% соответственно, что свидетельствует о широкой
циркуляции этих вирусов в питомнике. Наличие IgM позитивных особей, как по анти-ВГА
(13,2%), так и по анти-ВГЕ (1,7%), является показателем активности эпизоотологического
процесса среди обезьян, особенно в отношении ГА (среди отдельных групп обезьян этот
показатель достигал 42%).
В этот же самый период частота распространения анти-ВГА и анти-ВГЕ среди
сотрудников НИИ МП РАМН составила 65,7% и 5,3% соответственно. Не наблюдалось
существенных различий в частоте распространения анти-ВГА среди обслуживающего
персонала питомника и других категорий сотрудников института, как и не выявлено
7
существенной
разницы
в
уровне
гуморального
иммунитета.
В
каждой
из
профессиональных групп обнаружено лишь по 1-2 человека, имеющих высокую
реактивность сывороток к ВГА, у остальных были выявлены, в основном, низкие
показатели.
Следует подчеркнуть, что все серопозитивные по анти-ВГЕ индивидуумы (9,1%)
находились в группе наиболее высокого риска и имели прямой контакт с обезьянами.
Случаев заболевания ГА и ГЕ у обслуживающего персонала питомника не отмечалось,
однако при динамическом наблюдении выявлены единичные факты выраженной
сероконверсии как к ВГА, так и к ВГЕ.
Установлен значительный уровень выявления анти-ВГЕ IgG (15,5 %) среди взрослого
населения Адлерского региона, являющихся пациентами лечебно-профилактических
учреждений и территориально не связанных с местом расположения питомника обезьян.
Возраст серопозитивных лиц варьировал от 22 до 83 лет. Особый интерес представляют
данные по выявлению анти-ВГЕ IgM в 9 (3,3%) из 272 исследуемых сывороток человека,
что свидетельствует о наличии случаев острого ГЕ, Дальнейшие исследования, возможно,
позволят выявить и охарактеризовать штаммы ВГЕ, циркулирующие как среди населения
Адлерского региона, так и среди обезьян приматологического центра.
8