2. ФУНКЦИИ • • • • транскрипция трансляция сплайсинг репликация Ген как цистрон (группа некомплементирующих друг друга мутаций) Трансформирующий фактор (Griffith,1928) … = ДНК (Avery-MacLeod-McCarthy, 1944) ДНК – носитель генетической информации фагов (Херши-Чейз, 1948) Генетическая карта Коллинеарность гена и белка (Brenner, 1964) Коллинеарность гена и белка (Yanofsky, 1967) «ДОГМА» Транскрипция in vivo Инициаторный комплекс recA rpsL aroF lpdA cyoA uvrD atpI tonB rpsU cirA fur ampC uvrB argC rpmH rplT gyrA Промоторы ttgatactgtat---gagcatacagtataat ttgacaccttttc--ggcatcgccctaaaat ttgaaaacttta---ctttatgtgttatcgt tttaaaaattgtt--aacaattttgtaaaat tttacagtaatgt--aaccttcccgtaaaat ttggcatctctg---acctcgctgatataat ttgaaatcacgg---gggcgcaccgtataat ttgaatatgattgc-tatttgcatttaaaat tttacaaagcagca-gcaattgcagtaaaat ttgataattgtta--tcgtttgcattatcgt ttttcatttaggc--gtggcaattctataat ttgtcacgctga---ttggtgtcgttacaat gtgatgaactgttt-ttttatccagtataat ttgacacacct----ctggtcatgatagtat ttgactccggagt--gtacaattattacaat ttaacgttttta---actttttaattagaat tttacctcaaactgcgcggctgtgttataat Промотор Слабые промоторы carB nagB ilvG cysK smp amn ileR fabB dnaN argC araB sulA trpR dnaN cspA rpsU rpoH ttatcgagttaattgagcagtaccgtaaaac tttactggctaaa--ccagaaaacttatttt ttgccagcccacgg-tcggtcgacttactgt atgtcattattt---cccttctgtatataga ttgcttctggca---acattaagtctcaaat gtgacatacta----tcggatgtgcggtaat atgccagcagag---ttttttatgcgttaat ttgttcggcgtac--aagtgtacgctattgt atatcaaagaag---atttttcaaatttaat tcgataaatggcg--gtaatttgtttttcat ctgacgcttttt---atcgcaactctctact ttgtcactggatgt-actgtacatccataca gttactgatccgc--acgtttatgatatgct ttgcaggaaaaact-ggtcaccatcgacaat ttgcatcacccgc--caatgcgtggcttaat tcgcccctggaga--aagcctcgtgtatact ttcacaagcttgcattgaacttgtggataaa Lac - промотор gcgcccaatacgcaaaccgcctctccccgcgcgttggccgattcattaatgcagctggca cgacaggtttcccgactggaaagcgggcagtgagcgcaacgcaattaatgtgagttagct cactcattaggcaccccaggctttacactttatgcttccggctcgtatgttgtgtggaat tgtgagcggataacaatttcacacaggaaacagctatgaccatgattacgaattcgagct cggtacccggggatcctctagagtcgacctgcaggcatgcaagcttggcactggccgtcg ttttacaacgtcgtgactgggaaaaccctggcgttacccaacttaatcgccttgcagcac atccccctttcgccagctggcgtaatagcgaagaggcccgcaccgatcgcccttcccaac agttgcgcagcctgaatggcgaatggcgcctgatgcggtattttctccttacgcatctgt Lac - промотор cgacaggtttcccgactggaaagcgggcagtgagcgcaacgcaattaatgtgagttagct cactcattaggcaccccaggctttacactttatgcttccggctcgtatgttgtgtggaat tgtgagcggataacaatttcacacaggaaacagctatgaccatgattacgaattcgagct Lac - промотор cgacaggtttcccgactggaaagcgggcagtgagcgcaacgcaattaatgtgagttagct cactcattaggcaccccaggctttacactttatgcttccggctcgtatgttgtgtggAat tgtgagcggataacaatttcacacaggaaacagctatgaccatgattacgaattcgagct Lac - промотор cgacaggtttcccgactggaaagcgggcagtgagcgcaacgcaattaatgtgagttagct cactcattaggcaccccaggcTTtACActttatgcttccggctcgTATgtTgtgtggAat tgtgagcggataacaatttcacacaggaaacagctatgaccatgattacgaattcgagct транскрипция - кино Генетический код • триплетный • неперекрывающийся • вырожденный Триплетность кода (Крик, 1961) Генетический код Рибосома Аминоацил-тРНК-синтетаза и тРНК Инициация трансляции Сайты инициации трансляции dnaN gyrA serS bofA csfB xpaC metS gcaD spoVC ftsH pabB rplJ tufA rpsJ rpoA rplM ACATTATCCGTTAGGAGGATAAAAATG GTGATACTTCAGGGAGGTTTTTTAATG TCAATAAAAAAAGGAGTGTTTCGCATG CAAGCGAAGGAGATGAGAAGATTCATG GCTAACTGTACGGAGGTGGAGAAGATG ATAGACACAGGAGTCGATTATCTCATG ACATTCTGATTAGGAGGTTTCAAGATG AAAAGGGATATTGGAGGCCAATAAATG TATGTGACTAAGGGAGGATTCGCCATG GCTTACTGTGGGAGGAGGTAAGGAATG AAAGAAAATAGAGGAATGATACAAATG CAAGAATCTACAGGAGGTGTAACCATG AAAGCTCTTAAGGAGGATTTTAGAATG TGTAGGCGAAAAGGAGGGAAAATAATG CGTTTTGAAGGAGGGTTTTAAGTAATG AGATCATTTAGGAGGGGAAATTCAATG Сайты инициации трансляции dnaN gyrA serS bofA csfB xpaC metS gcaD spoVC ftsH pabB rplJ tufA rpsJ rpoA rplM ACATTATCCGTTAGGAGGATAAAAATG GTGATACTTCAGGGAGGTTTTTTAATG TCAATAAAAAAAGGAGTGTTTCGCATG CAAGCGAAGGAGATGAGAAGATTCATG GCTAACTGTACGGAGGTGGAGAAGATG ATAGACACAGGAGTCGATTATCTCATG ACATTCTGATTAGGAGGTTTCAAGATG AAAAGGGATATTGGAGGCCAATAAATG TATGTGACTAAGGGAGGATTCGCCATG GCTTACTGTGGGAGGAGGTAAGGAATG AAAGAAAATAGAGGAATGATACAAATG CAAGAATCTACAGGAGGTGTAACCATG AAAGCTCTTAAGGAGGATTTTAGAATG TGTAGGCGAAAAGGAGGGAAAATAATG CGTTTTGAAGGAGGGTTTTAAGTAATG AGATCATTTAGGAGGGGAAATTCAATG Элонгация трансляции Цикл элонгации трансляции Терминация трансляции Полисомы Полисомы трансляция - кино Процессинг (сплайсинг, кепирование, поладенилирование) Ген кональбумина интроны (7500 пн) 17 экзонов (2500 пн) Сплайсинг (Шарп, Робертс, 1975) Механизм сплайсинга Альтернативный сплайсинг Репликация ДНК Репликация ДНК (Мезельсон-Сталь, 1958) Инициация репликации ДНК Матричный ступенчатый синтез ДНК ДНК-полимераза III ДНК-полимераза III Проблема полярности; фрагменты Окадзаки Топологический инвариант Микроскопия суперспиральной ДНК Репликация ДНК в целом Варианты репликации репликация - кино 3. РЕГУЛЯЦИЯ (в следующей серии)