Выявление в моче свободных легких цепей иммуноглобулинов в
advertisement
ОПРЕДЕЛЕНИЕ В МОЧЕ СВОБОДНЫХ ЛЕГКИХ ЦЕПЕЙ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ В МОНОМЕРНОЙ И ДИМЕРНОЙ ФОРМАХ В ЦЕЛЯХ РАННЕГО ВЫЯВЛЕНИЯ ПАРАПРОТЕИНУРИИ БЕНС ДЖОНСА С.А. Саламатова, к.м.н., Т.Н. Томина МЦ « ИММУНОТЕСТ» В связи с тем, что катаболизм легких цепей иммуноглобулинов происходит в почках, их моноклональная секреция с наибольшей частотой приводит к развитию нефропатии, которая в таких случаях является показанием к началу химиотерапии. Однако, в настоящее время известно, что нефротоксичность моноклональных легких цепей связана преимущественно с их физико-химическими свойствами, а не с их количественной характеристикой. Таким образом, для раннего выявления моноклональных легких цепей, присутствующих в моче, и вызывающих различный характер повреждений нефрона, в настоящее время уже необходимы новые представления об их свойствах, в частности, о способности к полимеризации. В последнее время в литературе появляются данные о превалировании димеров легких цепей иммуноглобулинов над мономерами при выраженной парапротеинурии Бенс Джонса. Электрофоретическое разделение белков даже с последующей иммунофиксацией с использованием моноспецифических антисывороток против легких цепей иммуноглобулинов не дает точного представления о степени полимеризации белков. Для решения этой задачи необходимо параллельно использовать разделение белков не только по заряду, но и по молекулярной массе. В нашей работе для параллельного исследования нативной и концентрированной в 100 раз суточной мочи 106-и пациентов с подозрением на наличие моноклональной секреции была использована автоматическая система для электрофореза Hydrasys (Франция) и наборы для дифференциации протеинурии и для определения белковых фракций Hydragel. В результате были сформированы 3 группы: 1- с наличием белка Бенс Джонса в моче, доказанным присутствием М-градиента, иммунофиксацией и радиальной иммунодиффузией (РИД) - 37 человек; 2- с подозрением на наличие белка Бенс Джонса при отсутствии М-градиента в ЭФ, но выявленных легких цепях методом РИД - 23 человека; 3- без белка Бенс Джонса в моче - 46 человек. Во всех исследуемых образцах методом электрофореза белков мочи по величине молекулярной массы были идентифицированы полосы разной интенсивности, соответствующие молекулярной массе 25 и 50 кD, что полностью совпадало с молекулярной массой белка Бенс Джонса, выделенного препаративным электрофорезом из мочи больных с подтвержденным диагнозом миеломной болезни. При этом в 1-ой группе распределение свободных легких цепей в мономерной и димерной формах выглядело следующим образом: в 27% случаев выявлялись свободные легкие цепи только в мономерной форме, в 3% случаев – исключительно в димерной форме и в 70% случаев – в сочетанной форме. Во 2-ой группе (с подозрением на наличие, но недоказанной иммунохимическими методами парапротеинурией Бенс Джонса) распределение выявленных мономеров и димеров легких цепей выглядело сходным образом: в 30% случаев были обнаружены только мономеры легких цепей, совсем не были выявлены димерные формы легких цепей, в 70% случаев – обнаруживалось сочетание мономерной и димерной форм свободных легких цепей. В третьей группе в 63% случаев свободные легкие цепи вообще не были обнаружены, в 11% случаев были выявлены свободные легкие цепи в мономерной форме, в 2% случаев – в димерной и в 24% случаев в сочетанной форме. Также, по нашим данным, сочетание мономеров и димеров свободных легких цепей с превалированием димерной фракции сопровождается более высоким средним уровнем бета-2микроглобулина в моче, определяемым методом иммуноферментного анализа (ИФА): от 7,46 мкг/л до 8, 91 мкг/л, что почти в 300 раз выше нормы и соответствует серьезным изменениям в канальцевом аппарате нефрона, более медленному восстановлению канальцевых функций и худшему прогнозу. Таким образом, серьезной группой риска по отсутствию выявления моноклональной секреции легких цепей иммуноглобулинов является группа с не выявленным в электрофорезе М-градиентом, но с наличием следовой протеинурии, обусловленной присутствием свободных легких цепей в мономерной и димерной формах. Следовательно, скрининговые исследования уропротеинограммы (электрофорез по молекулярной массе) в сочетании с определением уровня бета-2-микроглобулина в моче позволяют в большей степени избежать диагностических ошибок при подозрении на развитие парапротеинурии Бенс Джонса.
