ГЛЮКОЗА (812) 412-8380 www.olvex-d.ru

(812) 412-8380
www.olvex-d.ru
ГЛЮКОЗА
Кат. №: 005.004 - 200 мл
Кат. №: 005.014 - 500 мл
Кат. №: 005.024 - 1000 мл
Количество определений зависит
от характеристик используемого анализатора
и минимального рабочего объема кюветы.
НАЗНАЧЕНИЕ
Набор
«ГЛЮКОЗА-4-ОЛЬВЕКС»
предназначен
для
количественного определения содержания глюкозы в
цельной (капиллярной или венозной) крови человека
энзиматическим колориметрическим методом с депротеинизацией в клинико-диагностических и биохимических
лабораториях и в научно-исследовательской практике.
Набор рассчитан на проведение 100, 250 или 500
определений при расходе 2,0 мл рабочего реагента на
один анализ.
содержимом одного флакона с Реагентом 1 при аккуратном
перемешивании. Рабочий реагент готов к применению
через 2 минуты после полного растворения лиофилизата.
Рабочий реагент хранить в защищённом от света месте при
+2-8 °С в плотно закрытом флаконе не более 6 месяцев.
ПРИНЦИП МЕТОДА
D-D-глюкоза под действием фермента глюкозооксидазы
(GOD) окисляется с образованием эквимолярного количества перекиси водорода. Образующаяся в данной
реакции перекись водорода (Н2О2) при участии фермента
пероксидазы
(POD)
способствует
окислительному
азосочетанию 4-аминоантипирина (4-ААP) и фенола с
образованием окрашенного соединения (хинониминовый
краситель). Интенсивность окраски реакционной среды
пропорциональна содержанию глюкозы в исследуемом
материале и определяется фотометрически при длине
волны 500 (490-540) нм.
СХЕМА РЕАКЦИИ
GOD
β-D-глюкоза + О2 + Н2О _______> глюконовая кислота + Н2О2
POD
2Н2О2 + 4-ААР + фенол _____> хинонимин.краситель + 4Н2О
СОСТАВ НАБОРА
Реагент 1 (буферный раствор).
Реагент 2 (лиофилизат).
Реагент 3 (хлорная кислота).
Калибратор – раствор глюкозы 10 ммоль/л.
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Линейная область определения концентрации глюкозы в
диапазоне от 1,0 до 30,0 ммоль/л.
Отклонение от линейности не более 5%.
Чувствительность определения не более 0,5 ммоль/л.
Коэффициент вариации результатов определений не > 5%.
Окраска стабильна в течение 1 часа.
Качество набора может проверяться на отечественных или
зарубежных контрольных сыворотках с аттестованным по
данному методу показателем.
Нормальные величины содержания глюкозы в крови 3,5 5,7 ммоль/л. В венозной крови содержание глюкозы на 0,5
ммоль/л меньше, чем в капиллярной.
Рекомендуется в каждой лаборатории уточнять диапазон
нормальных величин для обследуемого контингента.
!
АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
Капиллярная или венозная кровь человека.
Отделить от клеточных элементов немедленно!
Для замедления гликолиза и предотвращения свертывания
при заборе крови использовать пробирки, содержащие
фторид натрия и антикоагулянт.
ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ
Приготовление рабочего реагента.
Содержимое одного флакона с Реагентом 2 растворить в
Тщательно закрывайте флаконы с реагентами после
каждого использования!
Подготовка анализируемых образцов к анализу.
Пробоподготовку провести в соответствии с таблицей:
КОМПОНЕНТЫ
РЕАКЦИОННОЙ СРЕДЫ
ОПЫТНАЯ
ПРОБА
КАЛИБРОВОЧН.
ПРОБА
КОНТРОЛЬНАЯ
(ХОЛОСТАЯ) ПРОБА
Реагент 3, мл
0.5
0.5
0.5
Цельная кровь, мл
0.05
-
-
Калибратор, мл
-
0.05
-
Вода дистиллир., мл
-
-
0.05
Пробы тщательно перемешать и выдержать в течение
10 минут при +18-25 °С, после чего опытные пробы
центрифугировать с ускорением 900 g в течение 10 минут
при комнатной температуре. Для дальнейшего анализа
использовать
прозрачную
надосадочную
жидкость
(супернатант).
Надосадочную жидкость опытной пробы можно хранить
в герметично закупоренном флаконе (эппендорф) при
+2-8 °С не более 5 дней.
ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
Приготовить пробы в соответствии с таблицей:
КОМПОНЕНТЫ
РЕАКЦИОННОЙ СРЕДЫ
Рабочий реагент, мл
Супернатант
опытной пробы, мл
Супернатант
калибровочной пробы, мл
Супернатант контрольной
(холост.) пробы, мл
ОПЫТНАЯ
ПРОБА
КАЛИБРОВОЧН.
КОНТРОЛЬНАЯ
ПРОБА
(ХОЛОСТАЯ) ПРОБА
2.0
2.0
2.0
0.1
-
-
-
0.1
-
-
-
0.1
Реакционную смесь тщательно перемешать и инкубировать
в течение 20 минут при +37 °С. Измерить оптическую
плотность опытной и калибровочной проб против контрольной (холостой) пробы при длине волны 500 (490-540)
нм в кювете с длиной оптического пути 1,0 см.
Окраска растворов стабильна не менее 1 часа после
окончания инкубации при хранении проб в защищённом
от света месте при комнатной температуре (+18-25 °С).
Объёмы исследуемого образца и рабочего реагента можно
изменить, соблюдая соотношение 1:20.
РАСЧЕТ
Расчет концентрации глюкозы в крови (С):
Е пробы
С = ____________ x 10 ммоль/л,
Е калибр.
где: Е пробы - оптическая плотность исследуемой пробы,
Е калибр. - оптическая плотность калибровочной пробы,
10 ммоль/л - концентрация глюкозы в калибраторе.
УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА
Набор хранить в упаковке предприятия-изготовителя при
+2-8 °С в защищённом от света месте в течение всего срока
годности. Срок годности набора 12 месяцев.
Калибратор после вскрытия флакона хранить при +2-8 °С
не более 6 месяцев.