БИОЛОГИЯ Б.К. КУРМАНОВ1, Р.И. БЕРСИМБАЙ1,4, Л.Б

БИОЛОГИЯ
Б.К. КУРМАНОВ1, Р.И. БЕРСИМБАЙ1,4, Л.Б. ДЖАНСУГУРОВА1, А.И. ШИБАНОВА2,
Ш. ЙАМАШИТА 3
РОЛЬ ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНОВ СЕМЕЙСТВА ГЛУТАТИОН-S-ТРАНСФЕРАЗ
В ПРЕДРАСПОЛОЖЕННОСТИ К РАЗВИТИЮ РАКА ПИЩЕВОДА НА ПРИМЕРЕ
КАЗАХСТАНСКИХ ПОПУЛЯЦИЙ
( 1Институт общей генетики и цитологии, Алматы)
( 2КазНИИ онкологии и радиологии, Алматы)
( 3Нагасакский университет, Нагасаки, Япония)
( 4Евразийский национальный университет им.Л.Н.Гумилева)
Изучена роль делеционного полиморфизма генов семейства глутатион-S-трансфераз (GSTM1 и GSTT1) в
предрасположенности к развитию рака пищевода Установлено, что высокий риск развития рака пищевода связан с
гомозиготным состоянием как GSTM1 (OR=8,078), так и GSTT1 (OR=3,447) генов.
В настоящее время уровень онкопатологий в Казахстане выше, чем в Европейском регионе и
один из самых высоких среди Центрально-азиатских стран. При этом наиболее распространенными
являются онкологические процессы, возникающие в постоянно обновляющихся тканевых системах,
таких как эпителиальные ткани и ткани внутренней среды.
В структуре смертности от онкологических заболеваний рак пищевода занимает 4-е место.
Отмечается значительная неравномерность в географическом распределении заболевания, причем
самые высокие показатели (в 3-5 раз выше среднего уровня) зарегистрированы в Китае, Иране и
государствах Центральной и Средней Азии. В Казахстане, Туркменистане, Азербайджане и Киргизии
рак пищевода занимает высокие позиции по частоте заболеваемости, в сравнении с другими видами
рака его доля достигает 6-11%. Уровень заболеваемости раком пищевода в Казахстане и
Туркменистане достигает 23,7-28,3 на 100 тыс. населения, что в 10-12 раз выше заболеваемости этим
видом рака в Молдове, Украине и Белоруссии [1]. Отмечено, что наиболее высокие показатели
встречаются у мужского населения, женщины болеют этим видом рака в 2-3 раза реже. Проблема
усугубляется поздней диагностикой заболевания. Из всех заболеваний пищевода на долю рака
приходится 70-90%. Рак пищевода чаще всего диагностируется в пожилом возрасте, в возрастной
группе лиц старше 60 лет находится до 80% всех заболеваний раком пищевода.
Возникновению рака пищевода способствуют разнообразные факторы [2]. На территории с
низким уровнем заболеваемости наибольшую роль играет курение и злоупотребление алкогольными
напитками. В районах с высоким уровнем заболеваемости канцерогенный эффект связывают с
приемом слишком горячей пищи и напитков, употреблением мелкокостной рыбы и жесткого
мороженого мяса. Имеет значение однообразное питание с недостаточным потреблением фруктов и
овощей, в результате чего в организме создается дефицит витаминов А, С и рибофлавина.
Факторами риска развития рака пищевода признаются систематический контакт с канцерогенными
веществами, хроническое лучевое воздействие, чрезмерное механическое, термическое, химическое
раздражение слизистой оболочки пищевода, рубцовое сужение пищевода после химических ожогов,
его ахалазия, грыжа пищеводного отверстия диафрагмы, рефлюкс-эзофагит [3]. Хронический
эзофагит создает условия для реализации токсического эффекта канцерогенных веществ,
содержащихся в табачном дыме и поступающих в составе пищевых продуктов, что нередко
сопровождается дисплазией эпителия слизистой оболочки пищевода.
Многочисленные факторы внешней и внутренней среды воздействуют на геном. Участие
разных генов в развитии любой патологии далеко не одинаково. Практически для каждой болезни
можно выделить главные гены, продукты которых играют ключевую роль в инициации
патологического процесса, и второстепенные, чьи продукты играют дополнительную роль.
Индивидуальные отличия в последовательностях генов, вовлеченных в реакцию организма на
условия окружающей среды, могут играть большую роль в развитии предрасположенности к
294
мультифакторным заболеваниям. Активно изучается роль геномного полиморфизма в развитии рака
пищевода [4].
Наиболее широка и многообразна активность семейства генов глутатион-S-трансфераз (GST),
продукты которых участвуют во второй фазе детоксикации, метаболизируют тысячи ксенобиотиков и
ряд эндогенных веществ. О важности этих ферментов свидетельствует их чрезвычайно широкая
распространенность [5].
У человека можно выделить 4 наиболее важных подсемейства GST обозначаемые как GSTA
(α), GSTM (μ), GSTT (θ) и GSTP (π). Каждое из этих подсемейств состоит из нескольких членов,
обозначаемых арабскими цифрами (GSTA1, GSTA2 и т.п.). Для многих членов этих семейств GST
генов характерно наличие полиморфизмов, значительно снижающих или полностью выключающих
функциональную активность соответствующих белковых продуктов. Это может приводить к ряду
заболеваний и патологических состояний.
Многие работы, посвященные изучению ассоциации полиморфизмов генов семейства GST с
канцерогенным действием, указывают на важную роль делеционных полиморфизмов генов GSTM1 и
GSTT1 [6, 7].
Целью нашей работы было изучить влияние делеционного полиморфизма GSTT1 и GSTM1
генов на развитие рака пищевода в казахстанской популяции.
Материалы и методы исследования
Материалом для исследования служили образцы EDTA-обработанной периферической крови и
буккальные мазки 184 жителей г. Алматы, с нормальным и патологическим состоянием пищевода:
норма – 86 человек, эпидермоидная карцинома – 91 человек, аденокарцинома – 7 человек. Материал
собирали на базе Казахского научно-исследовательского института онкологии и радиологии МЗ РК с
согласия пациентов. Верификация клинических диагнозов проводилась гистологически на
биопсийном материале.
ДНК выделяли стандартным фенол-хлороформным методом с модификациями в составе
лизирующеего буфера для образцов периферической крови (0,2 M ацетата натрия и 1%
додецилсульфата натрия, pH 8,0) и буккальных мазков (0,02М EDTA; 0,02 М трис HCl, pH 8,0; 0,16 M
NaCl; 0,5 % SDS).
Генотипирование GSTM1 и GSTT1 аллелей проводили в мультиплексном режиме ПЦР с
использованием Taq-полимеразы (Sigma, США). По 20–50 нг ДНК амплифицировали в 20 мкл
реакционной смеси, содержащей по 15 пкмоль специфических праймеров. В качестве внутреннего
контроля реакции использовали амплификацию фрагмента гена -глобина. Продукты амплификации
анализировали в 1,4% агарозном геле в присутствии бромистого этидия и визуализацией
фрагментов в проходящем УФ-свете. -глобин дает одну полосу размером 268 п.н. Присутствие или
отсутствие GSTM1 и GSTT1 генов определялось наличием (или отсутствием) полос в области 480
т.п.н. (GSTT1 ген) и 215 т.п.н. (GSTM1 ген),
которые позволяли различить
гомозиготную/гетерозиготную делецию от нормальной гомозиготы.
Статистический анализ ассоциации полиморфизма GSTT1 и GSTM1 генов выполнен с
использованием метода χ2 в программах Software GraphPad Instat tm Copyrigh (V. 2.04.
Ralf Stahlman, Purdue University) и «Калькулятора для расчета статистики в исследованиях «случайконтроль»», предоставляемой сайтом компании «Тапотили» лаборатории молекулярной диагностики
и геномной дактилоскопии Государственного Научного Центра Российской Федерации "ГосНИИ
генетика" (http://www.tapotili.ru).
Результаты и их обсуждение
Для поиска ассоциации между делеционным полиморфизмом GSTT1 и GSTM1 генов и
развитием рака пищевода проводили исследование методом «случай-контроль». На основе
гистологического анализа биоптатов пищевода среди жителей г. Алматы, обращавшихся в КазНИИ
онкологии и радиологии МЗ РК, была выделена группа больных (98 человек) 1920-1977 года
рождения с диагнозами эпидермоидная карцинома пищевода (плоскоклеточный рак) и
аденокарцинома пищевода (мелкоклеточный рак). Среди пациентов с эпидермоидной карциномой
диагностированы высоко- (6 случаев), умеренно- (34 случая) и низкодифференцированные (51
случай) варианты плосколеточного рака. Аденокарцинома Баррета была определена у 7 человек.
295
С учетом возраста, этнической принадлежности, пола и социального фактора (городское
население) была подобрана контрольная группа здоровых людей (86 человек). Гистологический
анализ показал нормальное состояние эпителия пищевода. Соответствие выбранных когорт
представлено в таблице 1.
Таблица 1
Соответствие контрольной и исследуемой популяции больных раком пищевода
Когорта
Рак
пищевода
Норма
Год
рождения
1920-1977
Национальность, чел. (%)
Казахи
Русские
88 (89,80)
10 (10,20)
Пол, чел. (%)
Мужчин Женщин
45 (45,92) 53 (54,08)
1921-1976
76 (88,37)
37 (43,02)
10 (11,63)
49 (56,98)
Всего, чел.
98
86
Генотипирование образцов ДНК представителей контрольной и исследуемой популяции
проводили методом мультиплексного ПЦР с применением специфических праймеров к GSTT1 и
GSTM1 генам, а также к гену -глобин в качестве контроля реакции (рис. 1).
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
480 п.н.
Рисунок 8 - Электрофореграмма
268 п.н.
215 п.н.
Рисунок 1 - Электрофореграмма амплифицированных аллельных вариантов GSTM1 и GSTT1
генов.
На рисунке 2 представлено распределение выявленных аллельных вариантов среди
представителей изученных групп, выраженное через процент особей определенного генотипа в
когорте.
GSTT1
а
GSTM1
б
Рисунок 2 – Распределение аллельных вариантов полиморфизма гена GSTT1 (a) и GSTM1 гена (б)
в изучаемых когортах
Распределение частот нормальных аллелей и делеций локусов генов детоксикации
ксенобиотиков GSTT1 и GSTM1 в изученных популяциях соответствует распределению ХардиВайнберга (GSTT1: χ2=15,61, p=8,0е-5; GSTM1: χ2=35,53, p=3,0е-9). Частота функционального аллеля
GSTT1 в контрольной популяции составила 0,360, а для больных раком пищевода – 0,179, частота
делеции этого локуса в контроле – 0,640, в случае рака - 0,821. Частота встречаемости
функционального аллеля GSTM1 гена в контрольной популяции составила 0,506, в случае рака
пищевода – 0,209, соответственно делеция GSTM1 гена встречалась с частотой 0,494 у здоровых
людей и с частотой 0,791 у больных раком пищевода.
Сравнивая частоты делеций генов GST-семейства в казахстанских популяциях с данными,
представленными в литературе [6], можно отметить, что в контрольной популяции жителей г.Алматы
частота делеции GSTT1 гена довольно высока (0,640). Литературные данные свидетельствуют, что в
296
популяциях азиатов (0,480-0,540) частота делеции этого гена выше чем в популяциях европейцев
(0,160-0,385). Высокое распространение делеции GSTT1 гена в популяции здоровых доноров может
быть обусловлено относительно небольшим объемом выборки (86 чел.). Возможно также, что
делеция данного гена случайным образом сильно распространилась среди жителей г. Алматы.
Частота встречаемости делеции GSTM1 у здоровых жителей г. Алматы (0,494) не противоречит
литературным данным, полученным при анализе азиатских (0,490-0,540) и европейских популяций
(0,420-0,540).
Для оценки значения полиморфизма GST-генов в предрасположенности к развитию рака
пищевода проведен статистический анализ с использованием χ2 –теста. Применено 2 варианта
анализа: в первом случае гетерозиготные варианты генотипов объединены в одну группу с
гомозиготными по минорному аллелю исследуемого локуса вариантами (доминантная модель), в
другом – носители наиболее часто встречающегося аллеля (гомозиготы и гетерозиготы по
нормальному аллелю) представляли одну группу, а гомозиготы по полиморфному аллельному
варианту – другую (рецессивная модель). Все результаты анализа представлены в таблице 2.
Таблица 2
Относительный риск влияния полиморфизма генов GSTT1 и GSTМ1 на развитие рака пищевода в
популяциях жителей г. Алматы
Вид
полиморфизма
GSTT1
GSTT1
Доминантная
модель
GSTT1
Рецессивная
модель
GSTM1
GSTM1
Доминантная
модель
GSTM1
Рецессивная
модель
Генотип
Рак
пищевода,
чел (%)
Контроль,
чел (%)
4 (4,08)
11 (12,79)
+/-/+/+
27 (27,55)
67 (68,37)
40 (46,51)
35 (40,70)
4 (4,08)
11 (12,79)
+/- и -/-
27+67=94
(95,92)
4+27=31
(31,63)
67 (68,37)
40+35=75
(87,21)
11+40=51
(59,30)
35 (40,70)
4 (4,08)
22 (25,58)
+/-/+/+
33 (33,67)
61 (62,25)
43 (50,00)
21 (24,42)
4 (4,08)
22 (25,58)
+/- и -/-
33+61=94
(95,92)
4+33=37
(37,75)
43+21=64
(74,42)
22+43=65
(75,58)
+/+
+/+ и +/-/+/+
+/+ и +/-/-
61 (62,25)
21 (24,42)
OR
0,318
CI (95%)
0,187-0,667
1,055-11,261
3,447
1,055-11,261
14,70
0,00013
4,64
0,03124
14,20
0,00016
32,61
1,125e-08
17,45
0,00003
26,53
2,597e-07
0,089-0,948
0,173-0,582
3,149
0,063
1,719-5,769
0,264
8,078
0,124
0,135-0,517
2,658-24,554
8,078
2,658-24,554
0,196
0,103-0,371
5,103
P
0,173-0,582
0,353
3,447
0,290
0,318
χ2
0,019-0,203
0,041-0,376
2,692-9,672
Из представленных данных видно, что с развитием рака пищевода в изученных казахстанских
популяциях проявляют достоверную ассоциацию «нулевые» генотипы (-/-) как по гену GSTТ1
(OR=3,447), так и по гену GSTM1 (OR=8,078).
Согласно литературным данным, гены глутатион-S-трансфераз, особенно GSTM1, вовлечены в
патогенез различных раков и выступают в качестве модификаторов и факторов риска при самых
различных заболеваниях, связанных с неблагоприятным действием факторов внешней среды.
Влияние полиморфизма GST-генов ассоциируется с развитием многочисленных
злокачественных опухолей: рака легкого 8-10], мочевого пузыря 11, 12], прямой кишки 13],
желудка 14, 15], пищевода 16], груди [17], яичников и кожи 18], а также лейкемии [19]. Выявлена
ассоциация делеционного полиморфизма GST-генов с доброкачественными новообразованиями,
такими как первичные опухоли мозга [20], аденома прямой кишки 18] и эндометриоз 21]. Есть
работы, показывающие связь полиморфизма генов, кодирующих ферменты 2-ой фазы детоксикации,
с хроническими и наследственными заболеваниями: хроническим бронхитом, бронхиальной астмой
22], гипертонией 23], ревматоидным артритом 24] и алкогольным циррозом 25].
297
Отмечено, что нулевой вариант гена GSTM1 предрасполагает к тем видам заболеваний, для
которых имеет важное значение связь с мутагенными факторами (особенно курением, потреблением
алкоголя, пищевыми злоупотреблениями и профессиональным вредом), в то время как для гена
GSTT1 такая связь в большинстве случаев не характерна [18].
В нашей работе с высокой степенью достоверности показано, что высокий риск развития рака
пищевода у жителей г.Алматы может быть связан с гомозиготным по делеции состоянием как
GSTМ1 гена, так и GSTT1 гена. В условиях неблагополучной экологической ситуации г. Алматы
отсутствие в генотипе функциональных генов глутатион-S-трансфераз должно быть тревожным
сигналом. В связи с выявленной нами высокой ассоциативностью нулевого генотипа GSTМ1 гена,
возможно, было бы интересно изучить влияние фактора курения на развитие рака пищевода у
жителей г.Алматы. Однако, это не представляется возможным, поскольку информация о курении в
анкетных данных представителей исследованных групп неполная.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
Аксель Е.М., Давыдов М.И. Статистика заболеваемости и смертности от злокачественных
новообразований в 2008 году.// Злокачественные новообразования в России и странах СНГ в
2008 г.// РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН. Москва. 2009. C.85-106.
Заридзе Д.Г. Канцерогенез.// Медицина. Москва 2004. С. 132-141.
Enzinger P.C., Mayer R.J. Esophageal Cancer.// N Engl J Med. 2003. V.349. P.2241-2252.
Hiyama T., Yoshihara M., Tanaka S., Chayama K. Genetic polymorphisms and
Wilce M.C.J., Parker M.W. Structure and function of glutathione S-transferases.// Biochim. Biophys.
Acta. 1994. V.1205. P.1–18.
Their R., Bruning T., Roos P.H., et al. Markers of genetic susceptibility in human environmental
hygiene and toxicology: the role of selected CYP, NAT, GST genes.// Int J Hyg Environ Health. 2003.
V.206. P.149–171.
Landi S. Mammalian class theta GST and differential susceptibility to carcinogens: a review.// Mutat
Res. 2000. V.463. P.247-283.
Seidegard J., Pero R.W., Markowitz M.M., Roush G. et al. Isoenzyme(s) of glutathione transferase
(class A) as a marker for the susceptibility to lung cancer: a follow up study // Carcinogenesis. 1990,
Vol.11, P.33-36.
Saarikoski S.T., Voho A., Reinikainen M., et al. Combined effect of polymorphic GST genes on
individual susceptibility to lung cancer.// Int J Cancer. 1998. V.77. P.516-521
Nazar-Stewart V., Vaughan T.L., Stapleton P., Van Loo J., Nicol-Blades B., and Eaton D.L. A
population-based study of glutathione S-transferase M1, T1 and P1 genotypes and risk for lung cancer //
Lung Cancer. 2003, V.40, P.247-258.
Kempkes M., Golka K., Reich S., Reckwitz T. et al. Glutathione S-transferase GSTM1 and GSTT1 null
genotypes as potential risk factors for urothelial cancer of the bladder // Arch. Toxicol. 1996, V.71,
P.123-126.
Okkels H., Sigsgaard T., Wolf H. and Autrup H. Glutathione S-transferase M as a risk factor in bladder
tumors // Pharmacogenetics. 1996, V.6, P.251-256.
Seow A., Yuan J.M., Sun C.L. et al. Dietary isothiocyanates, glutathione S-transferase polymorphisms
and colorectal cancer risk in the Singapore Chinese Health Study.// Carcinogenesis. 2002. V.23(12).
P.2055-2061.
Setiawan V.W., Zhang Z.F., Yu G.P. et al. GSTT1 and GSTM1 null genotypes and the risk of gastric
cancer: a case-control study in a Chinese population.// Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. 2000. V.9.
P.73–80.
Tamer L., Ates N.A., Ates C., Ercan B., Elipek T., Yildirim H., Camdeviren H., Atik U., Aydin S.
Glutathione S-transferase M1, T1 and P1 genetic polymorphisms, cigarette smoking and gastric cancer
risk.// Cell Biochem Funct. 2005. V.23(4). P.267-272.
Abbas A., Delvinquiere K., Lechevrel M. et al. GSTM1, GSTT1, GSTP1 and CYP1A1 genetic
polymorphisms and susceptibility to esophageal cancer in a French population: different pattern of
squamous cell carcinoma and adenocarcinoma.// World J Gastroenterol. 2004. V.10(23). P.3389-3393.
Park S.K., Yoo K.Y., Lee S.J. et al. Alcohol consumption, glutathione S-transferase M1 and T1 genetic
polymorphisms and breast cancer risk // Pharmacogenetics. 2000, Vol.10, P.301.
Strange R.C. and Fryer A.A. The Glutathione S-Transferases: Influence of Polymorphism on Cancer
Susceptibility // IARC Scientific Publications, IARC, Lyon. 1999, P. 231-249.
298
19. Little M.P., Charles M.W., Wakeford R. A review of the risks of leukaemia in relation to parental preconception exposure to radiation // Health Phys. 1995, V.68, P.299-310.
20. Pinarbasi H., Silig Y., Gurelik M. Genetic polymorphisms of GSTs and their association with primary
brain tumor incidence.// Cancer Genet Cytogenet. 2005. V.156(2). P.144-149.
21. Baranova H., Bothorishvili R., Canis M., Albuission E., et al. Glutation-S-transferase M1 gene
polimirphism and susceptibility to endometriosis in a Franch population // Mol. Hum. Reprod. 1997, V.
3, № 9, P. 775-780.
22. Gilliland F.D., Li Y.F., Saxon A., Diaz-Sanchez D. Effect of glutathione-S-transferase M1 and P1
genotypes on xenobiotic enhancement of allergic responses: randomised, placebo-controlled crossover
study.// Lancet. 2004. V.363. P.119-125.
23. Saadat M., Dadbine-Pour A. Influence of polymorphism of glutathione S-transferase M1 on systolic
blood pressure of normotensive individuals.// Biochem Biophys Res Commun. 2005. V.326(2). P.449454.
24. Yun B.R., El-Sohemy A., Cornelis M.C., Bae S.C. Glutathione S-transferase M1, T1, and P1 genotypes
and rheumatoid arthritis.// J Rheumatol. 2005. V.32(6). P.992-997.
25. Афанасьева И.С., Спицын В.А. Наследственный полиморфизм глутатион-S-трансферазы печени
человека в норме и при алкогольном гепатите. // Генетика. 1990, Т.26, №7, С. 1309-1315.
Өңеш ісік ауруына бейімделуде глутатион-S-трансфераза гендер жүйесі полиморфизмінің рөлі
Глутатион S-трансфераза - GSTT1 және GSTM1 - гендер жүйесінің делециялық полиморфизмі мен өңеш ісік
ауруының арасындағы байланыстар зерттелді. Бұл зерттеулер біріші рет Қазақстан популяциясында жүргізілді. Алынған
мәліметтер бойынша гомозиготалық GSTM1 (OR=8,078) және GSTT1 (OR=3,447) гендер жүйесінің делециялық
полиморфизмі адамдардың өңеш ісік ауруына қауіпті екендігі анықталды.
The role of polymorphism of gluthatione-S-transferase genes in predisposition to esophagus carcinoma
in
Kazakhstan population
An association of gluthatione-S-transferase GSTM1 and
GSTT1 gene polymorphism and esophagus cancer in
Kazakhstan population was analysed. The statistically significant association of homozygous GSTM1 (OR=8,078) and GSTT1
(OR=3,447) genes with disease was shown.
299
Б.К. КУРМАНОВ1, Р.И. БЕРСИМБАЙ1,4, Л.Б. ДЖАНСУГУРОВА1, А.И. ШИБАНОВА2,
Ш. ЙАМАШИТА3, В. САЕНКО3
РОЛЬ ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНОВ РЕГУЛЯЦИИ КЛЕТОЧНОГО ЦИКЛА В
ПРЕДРАСПОЛОЖЕННОСТИ К РАЗВИТИЮ РАКА ПИЩЕВОДА НА ПРИМЕРЕ
КАЗАХСТАНСКИХ ПОПУЛЯЦИЙ
(1Институт общей генетики и цитологии, Алматы қ.)
(2Институт онкологии и радиологии, Алматы қ.)
(3 Нагасакский университет, Нагасаки, Япония)
(4 Евразийский национальный университет им.Л.Н.Гумилева, Астана қ.)
Изучен полиморфизм двух генов регуляции клеточного цикла - протоонкогена CCND1 и онкосупрессора TP53 в
периферической крови и буккальных мазках 184 жителей г.Алматы с нормальным и патологическим состоянием пищевода
(норма – 86 человек, эпидермоидная карцинома – 91 человек, аденокарцинома – 7 человек). Поиск ассоциации
полиморфизма генов-регуляторов клеточного цикла TP53 (Arg72Pro) и CCND1 (A870G) с развитием рака пищевода в
казахстанских популяциях был проведен впервые. Показано достоверное влияние гомозиготного генотипа А870А CCND1, а
также гетеро- Arg72Pro и гомозиготного Pro72Pro генотипов ТР53 на развитие плоскоклеточного и мелкоклеточного рака
пищевода.
Одной из высоко агрессивных форм злокачественных новообразований является рак пищевода.
Он часто склонен к метастазированию. Прогноз выживаемости пациентов с диагнозом рака пищевода
весьма неблагоприятен. По смертности среди всех видов рака он занимает шестое место в мире. [1,2].
Зачастую рак пищевода диагностируется на поздних стадиях, в связи с чем пятилетняя выживаемость
при этом виде рака составляет только 5-10%.
Наиболее частыми гистологическими формами рака пищевода (более 90%) являются
плоскоклеточный рак и аденокарцинома. Плоскоклеточный рак является преобладающей формой.
Однако в последние годы имеется тенденция к увеличению числа случаев аденокарциномы,
особенно в западных странах [3].
Рак пищевода (большей частью плоскоклеточный рак) имеет определенный характер
географического распределения с наибольшей частотой встречаемости в Центральной и Южной
Азии. Так называемый «пояс рака пищевода» тянется на восток от Ирана через Туркменистан,
северный Афганистан, Узбекистан и Казахстан в северный Китай и Монголию. Этот «пояс»
характеризуется очень высокой, почти эпидемической частотой рака пищевода по сравнению с
остальным миром [4].
В Казахстане доля рака пищевода в общей структуре онкологической заболеваемости достигает
6-11% (8-16 случаев на 100000) [5].
В этиологию рака пищевода вносят вклад многие факторы: окружающая среда, курение,
злоупотребление алкоголем, особенности питания (потребление горячего чая, малое потребление
фруктов и овощей и пр.) [6]. Наряду с факторами внешней среды немаловажное значение имеют и
генетические факторы. Недавние исследования указывают на роль генетических полиморфизмов
ряда генов в развитии рака пищевода. Это гены, вовлеченные в такие важные процессы как
детоксикация ксенобиотиков, репарация ДНК, регуляция клеточного цикла [7].
Нарушение нормальной регуляции клеточного цикла происходит в результате изменения
структуры ключевых генов, относящихся к двум группам: протоонкогенам и онкосупрессорам.
Полиморфизмы, обусловленные точковыми мутациями в определенных локусах, способны
приводить к активации протоонкогенов, либо к инактивации онкосупрессных генов, что, в свою
очередь, ведет к нарушению регуляции клеточного цикла и развитию злокачественных опухолей.
В данной работе нами были изучены полиморфизмы двух ключевых генов регуляции клеточного
цикла: протоонкогена CCND1 и онкосупрессора TP53,
Циклин D1, кодируемый геном CCND1 (иначе BCL1, PRAD1) действует как сенсор ростовых
факторов, связующий внеклеточные сигналы с механизмами клеточного цикла и способствующий
переходу клеток из фазы G1 в фазу S [8]. Циклины группы D связываются с киназами Сdk4 или
Сdk6, которые фосфорилируют и инактивируют белки семейства ретинобластомы (pRb и Rbподобные белки р105 и р130), являющиеся негативными регуляторами перехода из фазы G1 в S-фазу.
У млекопитающих имеется два варианта транскрипта циклина D1: циклин D1a (CD1a) и циклин D1b
(CD1b). CD1a кодируется экзонами 1-5, а CD1b – экзонами 1-4 с включением в состав транскрипта
интрона 4. Экзон 5, входящий в состав CD1a имеет последовательность, ответственную за
убиквитин-опосредованный протеолиз данного белка [8, 9]. CD1b, лишенный экзона 5 и,
соответственно, не имеющий этой последовательности характеризуется более продолжительным
300
временем существования [9]. Синтез циклина D1b обусловлен однонуклеотидным полиморфизмом
A870G в экзоне 4 гена CCND1. Такая замена гуанина на аденин не приводит к замене кодируемой
аминокислоты, то есть данный кодон по-прежнему кодирует аминокислоту пролин (Pro), однако она
ведет к альтернативному сплайсингу с образованием CD1b транскрипта. В результате даже в
гетерозиготном (GA) состоянии в клетках организма поддерживается повышенный уровень CD1b
[10, 11]. Это приводит к более продолжительному связыванию циклина D1 с циклин-зависимыми
киназами и, соответственно, к пролиферации клеток, даже с неисправным геномом.
TP53 – ключевой ген-онкосупрессор человека, кодирующий транскрипционный фактор p53,
участвующий в ряде важных клеточных механизмов, таких как блокирование клеточного цикла,
репарация ДНК и индукция апоптоза [12]. Белок р53 активируется при повреждениях генетического
аппарата, а также при стимулах, которые могут привести к подобным повреждениям, или являются
сигналом о неблагоприятном состоянии клетки (стрессовом состоянии). Один из механизмов
действия белка p53 заключается в активации синтеза белка p21, являющегося ингибитором комплекса
циклин-Cdk, что приводит к остановке клеточного цикла в G1 и G2 периоде. Мутации гена TP53
обнаруживаются в клетках приблизительно 50% опухолей и в основном затрагивают ДНКсвязывающий домен молекулы p53 [13].
Определенный вклад в развитие опухолей может вносить полиморфизм Arg72Pro гена TP53. У
человека существует два варианта аллелей дикого типа данного гена: Arg72 и Pro72, обусловленные
наличием аминокислоты аргинин либо аминокислоты пролин в кодоне 72 [14].
Целью нашей работы было изучить влияние однонуклеотидных полиморфизмов CCND1 A870G
и TP53 Arg72Pro на развитие рака пищевода в казахстанской популяции.
Материалы и методы исследования
Материалом для исследования служили образцы EDTA-обработанной периферической крови и
буккальные мазки 184 жителей г. Алматы, с нормальным и патологическим состоянием пищевода:
норма – 86 человек, эпидермоидная карцинома – 91 человек, аденокарцинома – 7 человек. Материал
собирали на базе Казахского научно-исследовательского института онкологии и радиологии МЗ РК с
согласия пациентов. Верификация клинических диагнозов проводилась гистологически на
биопсийном материале.
ДНК выделяли стандартным фенол-хлороформным методом с модификациями в составе
лизирующеего буфера для образцов периферической крови (0,2 M ацетата натрия и 1%
додецилсульфата натрия, pH 8,0) и буккальных мазков (0,02М EDTA; 0,02 М трис HCl, pH 8,0; 0,16 M
NaCl; 0,5 % SDS).
По 20-50 нг ДНК использовали для выявления изучаемых видов полиморфизма методом
прямого секвенирования ДНК (для TP53 Arg72Pro) и методом дискриминации аллельных вариантов
TaqMan (для CCND1 A870G).
Статистический анализ ассоциации полиморфизма изученных генов регуляции клеточного
цикла выполнен с использованием метода χ2 в программах Software GraphPad Instat tm Copyrigh (V.
2.04. Ralf Stahlman, Purdue University) и «Калькулятора для расчета статистики в исследованиях
«случай-контроль»», предоставляемой сайтом компании «Тапотили» лаборатории молекулярной
диагностики
и
геномной
дактилоскопии
Государственного
Научного
Центра
Российской
Федерации
"ГосНИИ
генетика"
(http://www.tapotili.ru).
Результаты и их обсуждение
Для поиска ассоциации между однонуклеотидными полиморфизмами CCND1 A870G и TP53
Arg72Pro и развитием рака пищевода проводили исследование методом «случай-контроль». На
основе гистологического анализа биоптатов пищевода среди жителей г. Алматы, обращавшихся в
КазНИИ онкологии и радиологии МЗ РК, была выделена группа больных (98 человек) 1920-1977 года
рождения с диагнозами эпидермоидная карцинома пищевода (плоскоклеточный рак) и
аденокарцинома пищевода (мелкоклеточный рак). Среди пациентов с эпидермоидной карциномой
диагностированы высоко- (6 случаев), умеренно- (34 случая) и низкодифференцированные (51
случай) варианты плосколеточного рака. Аденокарцинома Баррета была определена у 7 человек.
С учетом возраста, этнической принадлежности, пола и социального фактора (городское
население) была подобрана контрольная группа здоровых людей (86 человек). Гистологический
анализ показал нормальное состояние эпителия пищевода. Соответствие выбранных когорт
представлено в таблице 1.
301
Таблица 1
Соответствие контрольной и исследуемой популяции больных раком пищевода
Когорта
Рак
пищевода
Норма
Год
рождения
1920-1977
Национальность, чел. (%)
Казахи
Русские
88 (89,80)
10 (10,20)
Пол, чел. (%)
Мужчин Женщин
45 (45,92) 53 (54,08)
1921-1976
76 (88,37)
37 (43,02)
10 (11,63)
Всего, чел.
49 (56,98)
98
86
Генотипирование образцов ДНК представителей контрольной и исследуемой популяции
проводили методом прямого секвенирования для определения полиморфизма гена TP53 Arg72Pro и
методом дискриминации аллельных вариантов TaqMan для гена CCND1 A870G. На рисунке 1
представлено распределение выявленных аллельных вариантов среди представителей изученных
групп, выраженное через процент особей определенного генотипа в когорте.
CCND1 A870G
TP53 Arg72Pro
а
б
Рисунок 1 – Распределение аллельных вариантов полиморфизма гена TP53 Arg72Pro (а) и гена
CCND1 A870G (б).
Распределение изученных аллельных вариантов генов TP53 и CCND1 в изученных популяциях
соответствует распределению Харди-Вайнберга (TP53: χ2=4,30, p=0,04; CCND1: χ2=7,03, p=0,008).
Частота аллеля Arg72 гена TP53 в контрольной популяции составила 0,762, а для больных раком
пищевода – 0,663, частота другого полиморфного аллельного варианта Pro72 в контроле – 0,238, в
случае рака - 0,337. Частота встречаемости аллеля G870 гена CCND1 в контрольной популяции
составила 0,547, в случае рака пищевода – 0,408, соответственно алельный вариант А870 встречался с
частотой 0,453 у здоровых людей и с частотой 0,592 у больных раком пищевода.
Сравнивая частоты полиморфных вариантов генов TP53 и CCND1 в казахстанских популяциях с
данными, представленными в базе данных по полиморфизмам единичных нуклеотидов (ПЕН) SNP
database NCBI, можно отметить, что в контрольной популяции жителей г.Алматы частота редкого
аллеля (Pro72 – 0,238) больше соответствует европейским популяциям (0,233), однако гораздо ниже
частот, определенных для азиатов (0,409-0,511). Стоит заметить, что в качестве азиатских популяций
в мире представлено большое число данных по анализу населения Китая, Кореи, Японии, Малайзии,
Сингапура и др. Казахи представляют абсолютное большинство обеих изученных популяциях (табл.
1), поэтому можно считать, что по частоте встречаемости полиморфных аллельных вариантов TP53
Arg72Pro казахское население ближе к европейскому, чем к азиатскому.
Частота встречаемости полиморфного аллеля G870 гена CCND1 в популяции здоровых жителей
г.Алматы (0,547) более соответствует литературным данным, полученным при анализе азиатских
популяций (0,456-0,656), чем европейскому населению (0,475-0,483).
Для оценки значения изученных видов полиморфизма генов TP53 и CCND1
в
предрасположенность к развитию рака пищевода проведен статистический анализ с использованием
χ2 –теста. Также применено 2 варианта анализа: в первом случае гетерозиготные варианты генотипов
объединены в одну группу с гомозиготными по минорному аллелю исследуемого локуса вариантами
(доминантная модель), в другом – носители наиболее часто встречающегося аллеля (гомозиготы и
гетерозиготы по нормальному аллелю) представляли одну группу, а гомозиготы по полиморфному
аллельному варианту – другую (рецессивная модель). Все результаты анализа представлены в
таблице 2.
Таблица 2
Относительный риск влияния полиморфизма генов TP53 и CCND1 на развитие рака пищевода в
популяциях жителей г. Алматы
302
Вид
полиморфизма
TP53 Arg72Pro
TP53 Arg72Pro
Доминантная
модель
TP53 Arg72Pro
Рецессивная
модель
CCND1 A870G
CCND1 A870G
Доминантная
модель
CCND1 A870G
Рецессивная
модель
Генотип
Рак
пищевода,
чел (%)
Контроль,
чел (%)
44 (44,90)
49 (56,98)
Arg/Pro
Pro/Pro
Arg/Arg
42 (42,86)
12 (12,24)
33 (38,37)
4 (4,65)
44 (44,90)
49 (56,98)
Arg/Pro и
Pro/Pro
Arg/Arg и
Arg/Pro
Pro Pro
G/G
42+12=54
(55,10)
44+42=86
(87,76)
12 (12,24)
33+4=37
(43,02)
49+33=82
(95,35)
4 (4,65)
19 (19,39)
24 (27,91)
G/A
A/A
G/G
42 (42,85)
37 (37,75)
46 (53,49)
16 (18,60)
19 (19,39)
24 (27,91)
G/A и A/A
42+37=79
(80,61)
19+42=61
(62,25)
37 (37,75)
46+16=62
(72,09)
24+46=70
(81,40)
16 (18,60)
Arg/Arg
G/G и G/A
A/A
OR
0,616
CI (95%)
0,769-2,612
1,004-11,121
1,625
0,907-2,914
0,108-1,128
0,887-9,229
0,395
2,654
0,621
0,192-0,811
1,345-5,236
1,610
0,809-3,201
2,654
4,25
p=0,03929
2,67
0,10204
3,33
0,06816
6,76
p=0,00932
1,86
0,17305
8,19
0,00421
0,343-1,103
2,860
0,342
0,377
P
0,390-0,976
1,417
3,341
0,615
0,350
χ2
0,148-0,793
0,312-1,236
0,191-0,743
1,345-5,236
Из представленных данных видно, что с развитием рака пищевода проявляют достоверную
ассоциацию генотипы гетерозигот Arg72Pro (OR=1,417) и гомозигот Pro72Pro (OR=2,860) гена ТР53.
Носители полиморфного аллеля А870 гена CCND1 также имеют повышенный риск развития рака
пищевода (OR=2,654) с высокой степенью достоверности.
Полиморфизм Arg72Pro локализуется в SH3 домене белка p53, богатом пролином. SH3 домен
играет важную роль в индукции апоптоза, поскольку позволяет белку p53 взаимодействовать с
различными апоптотическими белками, также имеющими SH3 домен. Кроме того этот
полипролиновый домен играет важную роль в правильной конформации белка p53 [15]. Известно,
что преобладающим вариантом для многих популяций является аллель Arg72 [16]. Считается что
аллель Arg72 способствуют продукции белка, более эффективного по инициации процесса апоптоза,
чем аллель Pro72 [17,18]. Однако продукт аллеля Arg72 более подвержен деградации под влиянием
белка E6 вируса папилломы человека. Поэтому предполагается, что индивидуумы, гомозиготные по
аллелю Arg72, более подвержены риску развития рака шейки матки [19-21]. Также предполагается
взаимосвязь аллеля Arg72 с повышенным риском развития рака мочевого пузыря и рака желудка [22,
23]. В то же время наличие аллеля Pro72 связано с риском развития плоскоклеточного рака головы и
шеи [24], рака щитовидной железы [25], рака легкого [26, 27] и рака простаты [28]. Поскольку в
нашем исследовании ассоциация аллеля Pro72 с развитием рака пищевода проявляется как в
гомозиготе, так и в гетерозиготе, можно сделать вывод, что для развития злокачественных патологий
пищевода большое значение имеет скорость инициации апоптоза: данный аллель способствует
продукции менее эффективного в отношении инициации апоптоза белкового продукта. Однако в этой
связи стоит отметить работу китайских исследователей по анализу ассоциации данного вида
полиморфизма с развитием рака пищевода в популяции казахов-носителей папилломавирусной
инфекции, проживающих на территории Китая (Xinjiang, China) [29]. В этой работе демонстрируется
влияние аллеля Arg72 на HPV-ассоциированный рак пищевода на фоне неинфицированных HPV
носителей аллеля Pro72 с высоким риском развития рака пищевода.
По литературным данным суперэкспрессия гена CCND1 может быть причиной с развития рака
головы и шеи [30], рака эндометрия [31], рака пищевода [32, 33] и др. Предполагалось, что вариант
А870 аллеля, приводящий к образованию CD1b транскрипта и соответствующего белкового
продукта, не имеющего последовательности, ответственной за убиквитин-зависимый протеолиз
данного белка, может быть связан с с индукцией пролиферации в нескольких типах раковых клеток.
Однако, недавно было показано, что CD1b белок не аккумулируется в клетках, как это считалось
ранее. Содержание CD1b белка остается стабильным по отношению к CD1a. Более того, CD1a циклин
является лучшим катализатором RB-зависимой фосфориляции/инактивации и поэтому может
способствовать раковой трансформации клеток
[34]. Появилось несколько публикаций о
303
взаимосвязи CD1a транскрипта, и, соответственно, G870G генотипа с развитием
малодифференцированных раков головы и шеи, в частности сквамозной клеточной карциномы [35,
36], рака гортани [37], носоглотки [38]. Высказывается предположение о регуляции экспрессии
циклина CD1a через ядерный фактор NF-jB [38].
Также появляются публикации о связи АА
генотипа с развитием рака различных органов, например, рака простаты [39] и рака молочной железы
[40]. Возможно, большое значение для проявления эффекта различных транскриптов циклина D1
имеет тканевая специфичность или этническая принадлежность. Результаты нашего исследования с
высокой степенью достоверности свидетельствуют в пользу влияния А870А генотипа на развитие
рака пищевода.
Обобщая вшесказанное, следует отметить, что поиск ассоциации полиморфизма геноврегуляторов клеточного цикла TP53 Arg72Pro и CCND1 A870G с развитием рака пищевода в
казахстанских популяциях, представляющих жителей г.Алматы, был проведен впервые и показал
достоверное влияние гомозиготного генотипа CCND1 А870А, а также ТР53 гетеро- (Arg72Pro) и
гомозиготного (Pro72Pro) генотипов на развитие плоскоклеточного и мелкоклеточного рака
пищевода.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Tew W.P., Kelsen D.P., Ilson D.H. Targeted Therapies for Esophageal Cancer.// Oncologist. 2005
V.10. P.590-601.
2. Shigemitsu K., Naomoto Y., Shirakawa Y. et al. A case of advanced esophageal cancer with
extensive lymph node metastases successfully treated with multimodal therapy.// Jpn J Clin Oncol. 2002.
V.32(8). P.310-314.
3. Yang P.C., Davis S. Incidence of cancer of the esophagus in the US by histologic type.// Cancer.
1988. V.61. P.612-617.
4. Kuska B. New Chapter Opens in Iranian Research History-Cancer Belt.// J Natl Cancer Inst. 2001.
V.93. P.86-88.
5. Аксель Е.М., Давыдов М.И. Статистика заболеваемости и смертности от злокачественных
новообразований в 2008 году.// Злокачественные новообразования в России и странах СНГ в 2008 г.//
РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН. Москва. 2009. C.85-106.
6. Enzinger P.C., Mayer R.J. Esophageal Cancer.// N Engl J Med. 2003. V.349. P.2241-2252.
7. Hiyama T., Yoshihara M., Tanaka S., Chayama K. Genetic polymorphisms and esophageal cancer
risk.// Int. J. Cancer. 2007. V.121. P.1643–1658.
8. Sherr C.J. D-type cyclins.// Trends Biochem Sci. 1995. V.20. P.187-190.
9. Diehl J.A., Zindy F., Sherr C.J. Inhibition of cyclin D1 phosphorylation on threonine-286 prevents
its rapid degradation via the ubiquitin-proteasome pathway.// Genes Dev. 1997. V.11. P.957-972.
10.Solomon D.A., WangY., Fox S.R., et al. Cyclin D1 splice variants. Differential effects
on localization, RB phosphorylation, and cellular transformation. // J Biol Chem. 2003. V.278. P.30339
– 303347.
11.Hosokawa Y., Arnold A. Mechanism of cyclin D1 (CCND1, PRAD1) overexpression in human
cancer cells: analysis of allele-specific expression.// Genes, chromosomes & cancer. 1998. V.22(1). P.66-71.
12.Bates S., Vousden K.H. Mechanisms of p53-mediated apoptosis.// Cell. Mol. Life Sci. 1999. V.55.
P.28–37.
13.Заридзе Д.Г. Канцерогенез.// Медицина. Москва 2004. С. 132-141.
14.Matlashewski G., Tuck S., Lamb P., Schneider J., Crawford L. Primary structure polymorphism at
amino acid residue 72 of human p53.// Mol Cell Biol. 1987. V.7. P.961–963.
15.Walker K., Levine A. Identification of a novel p53 functional domain that is necessary for efficient
growth suppression.// Proc. Natl. Acad. Sci. 1996. V.93. P.15335–15340.
16.Beckman G., Birgander R., Sjalander A., et al. Is p53 polymorphism maintained by natural
selection?// Hum. Hered. 1994. V.44. P.266–270.
17.Thomas M., Kalita A., Labrecque S., et al. Two polymorphic variants of wild-type p53 differ
biochemically and biologically.// Mol Cell Biol. 1999. V.19. P.1092–1100.
18.Pim D., Banks L.. p53 polymorphic variants at codon 72 exert different effects on cell cycle
progression.// Int J Cancer. 2004. V.108. P.196–199.
19.Storey A., Thomas M., Kalita A., et al. Role of a p53 polymorphism in the development of human
papillomavirus-associated cancer.// Nature. 1998. V.393. P.229–234.
304
20.Zehbe I., Voglino G., Wilander E., et al. Codon 72 polymorphism of p53 and its association with
cervical cancer.// Lancet. 1999. V.354. P.218–219.
21.Zehbe I., Voglino G., Wilander E., et al. P53 codon 72 polymorphism and various human
papillomavirus 16 E6 genotypes are risk factors for cervical cancer development.// Cancer Res. 2001. V.61.
P.608–611.
22.Soulitzis N., Sourvinos G., Dokianakis D.N., Spandidos D.A. P53 codon 72 polymorphism and its
association with bladder cancer.// Cancer Lett. 2002. V.179. P.175–183.
23.Shen H., Solari A., Wang X., et al. P53 codon 72 polymorphism and risk of gastric cancer in a
Chinese population.// Oncol Rep. 2004. V.11. P.1115–1120.
24.Shen H., Zheng Y., Sturgis E.M., et al. P53 codon 72 polymorphism and risk of squamous cell
carcinoma of the head and neck: a case-control study.// Cancer Lett. 2002. V.183. P.123–130.
25.Granja F., Morari J., Morari E.C., et al. Proline homozygosity in codon 72 of p53 is a factor of
susceptibility for thyroid cancer.// Cancer Lett. 2004. V.210. P.151–157.
26.Wang Y.C., Chen C.Y., Chen S.K., et al. P53 codon 72 polymorphism in Taiwanese lung cancer
patients: association with lung cancer susceptibility and prognosis.// Clin Cancer Res. 1999. V.5. P.129–
134.
27.Fan R., Wu M.T., Miller D., et al. The p53 codon 72 polymorphism and lung cancer risk.// Cancer
Epidemiol Biomarkers Prev. 2000. V.9. P.1037–1042.
28.Suzuki K., Matsui H., Ohtake N., et al. A p53 codon 72 polymorphism associated with prostate
cancer development and progression in Japanese.// J Biomed Sci. 2003. V.10. P.430–435.
29.Xiao-Mei Lu, Yue-Ming Zhang, Ren-Yong Lin, Xiao-Hui Liang, Ya-Lou Zhang, Xing Wang, Yan
Zhang, Yan Wang, Hao Wen. p53 polymorphism in human papillomavirus-associated Kazakh’s esophageal
cancer in Xinjiang, China // China World J Gastroenterol. 2004. V. 10. N. 19. P. 2775-2778.
30.Michalides R., van Veelen N., Hart A., Loftus B., Wientjens E., Balm A.: Overexpression of cyclin
D1 correlates with recurrence in a group of forty seven operable squamous cell carcinomas of the head and
neck.// Cancer Res. 1995. V.55. P.975–978.
31.Yager J.D., Liehr J.G. Molecular mechanisms of estrogen carcinogenesis. Annual review of
pharmacology and toxicology 1996, 36:203-232.
32.Arber N., Gammon M.D., Hibshoosh H., et al. Overexpression of cyclin D1 occurs in both squamous
carcinomas and adenocarcinomas of the esophagus and in adenocarcinomas of the stomach.// Hum Pathol.
1999. V.30. P.1087-1092.
33.Miller C.T., Moy J.R., Lin L., et al. Gene amplification in esophageal adenocarcinomas and Barrett’s
with high-grade dysplasia.// Clin Cancer Res. 2003. V.9. P.4819-4825.
34.Solomon D.A. et al. Cyclin D1 splice variants. Differential effects on localization, RB
phosphorylation, and cellular transformation // J Biol Chem. 2003. V.32. P. 30339–30347.
35.Matthias C. et al. Polymorphism within the cyclin D1 gene is associated with prognosis in patients
with squamous cell carcinoma of the head and neck // Clin Cancer Res. 1998. V.4. P. 2411–2418.
36.Matthias C. et al. Cyclin D1, glutathione S-transferase, and cytochrome P450 genotypes and
outcome in patients with upper aerodigestive tract cancers: assessment of the importance of individual genes
using multivariate analysis // Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. 1999. V. 8. P. 815–823.
37.Monteiro E., Varzim G., Pires A.M., Teixeira M., Lopes C. Cyclin D1 A870G polymorphism and
amplification in laryngeal squamous cell carcinoma: implications of tumor localization and tobacco exposure
// Cancer Detect Prev 2004. V. 28. P. 237–243.
38.R.J. Catarino, E. Breda, V. Coelho, D. Pinto, H. Sousa, C. Lopes, R. Medeiros. Association of
A870G cyclin D1 gene polymorphism with genetic susceptibility to nazopharingial carcinoma // Head &
Neck-DOI 10.1002. 2006. P. 603-608.
39.Wang L. et al. Increased risk of prostate cancer associated with AA genotype of cyclin D1 gene
A870G polymorphism. Int J Cancer 2003;103:116–120.
40.U.V. Onay, K. Aaltonen, L. Briollais et al. Combined effect of CCND1 and COMT polymorphisms
and increased breast cancer risk // BMC Cancer. 2008. V.8 N.1186. P. 1471-1476.
Өңеш ісік ауруына бейімделудегі клеткалық циклді реттейтін гендердің полиморфизмінің қазақстандық
популяциядағы рөлі
Алғаш рет клеткалық циклді реттейтін екі геннің - протоонкоген CCND1 және онкосупрессор TP53 - полиморфизмінің
өңеш ісік ауруына бейімделудегі ролі анықталып зерттелді. Барлығы 184 адам (Алматы тұрғындары) зерттеуге
пайдаланылды: бақылау – 86 адам, эпидермалық карцинома – 91 адам, аденокарцинома – 7 адам. Бұл зерттеулер біріші рет
Қазақстан популяциясында жүргізілді. Алынған мәліметтер бойынша CCND1 геннің А870А гомозиготалық генотипінің,
ТР53 генінің Arg72Pro гетерозиготалық және Pro72Pro гомозиготалық генотиптерінің адамдардың өңеш ісік ауруына
бейімделуде қауіпті екендігі анықталды.
305
The role of polymorphism of cell cycle regulating genes in predisposition to esophagus carcinoma in Kazakhstan
population
The polymorphism of two cell cycle regulating genes- pro-oncogen CCND1 and onco-supressor TP53- in predisposition to
esophagus carcinoma in Kazakhstan population were studied. Totally 184 citizens of Almaty are included in the analysis (86 healthy people, control; epidermic carcinoma – 91, adenocarcinoma -7). We found the association between esophagus carcinoma
and the A870A homozygote CCND1 gene, Arg72Pro- hetero and Pro72Pro- homozygote ТР53 genes and the development of
esophagus cancer.
Поступила в редакцию 15.01.10.
Рекомендована к печати 30.01.10.
306