Автор: Степанец Валерия Николаевна, учащаяся 11

ТЕСТ-ОПРЕДЕЛЕНИЕ НИТРИТ- И НИТРАТ-ИОНОВ
В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ
Автор: Степанец Валерия Николаевна,
учащаяся
11
класс,
МБОУ
Зимаревская СОШ, ул. Приозерная
д.33 кв.4; 89628134997
Научный руководитель: Кандаурова
Анна
Михайовна,
предмет
преподавания химия и биология,
учитель первой категории, магистр,
МБОУ Зимаревская СОШ; адрес
школы: Алтайский край, Калманский
район, с. Зимари, ул. Центральная 54;
дом. адрес: Калманский район, с.
Зимари, ул. Центральная д.50 кв. 8; 8962-796-6369
Барнаул 2013
АННОТАЦИЯ
Основные результаты научного исследования:
1.
Приведены результаты адаптации методики В.М. Островской по
определению нитрит-ионов для анализа мясной продукции путем:
- замены реагента α-нафтиламина на N-(1-нафтил)-этилендиамин;
- замены носителя.
2. Предложен экспресс-метод определения нитрат-ионов в продуктах
растительного происхождения:
- носителем выбрана стеклоткань;
- использован в качестве реагента на нитрат-ионы дифениламин в
концентрированной
серной
качественного анализа.
кислоте,
ранее
применяемый
лишь
для
СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ……………………………………………………………………..
1 ТЕСТ-МЕТОДЫ
5
ОПРЕДЕЛЕНИЯ НИТРИТ- И НИТРАТ-ИОНОВ В ЖИДКИХ
СРЕДАХ………………………………………………………………………...
8
1.1 Нитрит- и нитрат-ионы, как объекты химического мониторинга
пищевых продуктов …………………………………………………………
8
1.2 Методика определения нитрит-ионов………………………………
10
1.3 Фотометрический метод определения нитрита по ГОСТ 8558.1-78…………..
13
1.3.1 Сущность метода………………………………………………...
13
1.3.2 Отбор и подготовка проб………………………………………..
13
1.3.3 Подготовка к анализу……………………………………………
14
1.3.4 Построение градуировочного графика…………………………
15
1.3.5 Проведение анализа……………………………………………...
16
1.3.6 Обработка результатов…………………………………………..
16
1.4 Методика определения нитрат-ионов……………………………….
17
1.5 Фотометрический метод определения нитратов и нитритов по ISO
13395……………………………………...………………………………...
19
1.5.1 Сущность метода………………………………………………....
19
1.5.2 Подготовка к анализу……………………….................................
20
1.5.3 Построение градуировочного графика…….................................
21
1.5.4 Проведение анализа……………………………………………....
22
1.5.5 Обработка результатов……………………………………………. 22
2 ТЕСТ-ОПРЕДЕЛЕНИЕ
ФОРМ АЗОТА С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ИНДИКАТОРНЫХ
ПОЛОС В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ………………………………………………
24
2.1 Вредное воздействие нитрит- и нитрат-ионов на организм
человека………………………………………………………………….....
24
2.2 Тест-метод определения нитрит-ионов в мясных продуктах……....
25
2.3 Тест-метод определения нитрат-ионов в продуктах растительного
происхождения…………………………………………………………….
29
ЗАКЛЮЧЕНИЕ…………………………………………………………………… 32
ВЫВОДЫ………………………………………………………………………..
35
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК………………………………………………...
36
ПРИЛОЖЕНИЕ А………………………………………………………………...
38
ПРИЛОЖЕНИЕ Б………………………………………………………………… 39
ВВЕДЕНИЕ
Одной из важнейших тенденций развития современной аналитической
химии является стремление к удешевлению и упрощению процедуры анализа в
тех случаях, когда это возможно, за счет разработки методов и средств
экспресс-контроля, к числу которых могут быть отнесены и тест-методы.
Работы в области тест-методов анализа ведутся в России много лет. Есть
области, где тест-методы применяют в течение длительного времени, например,
клинический анализ, обнаружение боевых отравляющих веществ и наркотиков;
в настоящее время тест-методы приобретают все большее значение для анализа
объектов окружающей среды.
Тест-системы могут быть использованы для качественного обнаружения
компонентов, полуколичественного и количественного их определения. Они
должны – обладать нужной чувствительностью и избирательностью действия,
обеспечивать необходимую точность и надежность определения, быть
простыми в использовании. Важно, чтобы взаимодействия и реакции протекали
быстро, а их эффект был наглядным и доступным.
Тест-методы особенно хороши для оценки обобщенных показателей
безопасности объекта, например, общей токсичности воды или суммарного
количества тяжелых металлов в воде. Их удобно использовать при анализе
жидких пищевых продуктов. В первую очередь это относится к анализу
питьевой и минеральной воды, фруктовых и овощных соков, винной продукции,
водки, слабоокрашенных напитков [1].
Актуальность. Проблема токсичного накопления нитратного азота в
пищевых продуктах и вредного воздействия его на организм человека на
современном этапе является одной из наиболее острых и актуальных.
Вредное воздействие нитрит- и нитрат-ионов на организм человека было
доказано давно. Все опасные последствия для человека, в том числе рак и
метгемоглобинемию, вызывают нитрит-ионы, восстанавливающиеся из нитратионов воды и пищи при хранении, кулинарной обработке и в пищеварительном
тракте человека под действием разнообразных микроорганизмов и ферментов,
необходимых для человека.
Актуальность исследования обусловлена и тем, что в современных
условиях необходима адаптация экспрессных методов определения нитрит- и
нитрат-ионов в пищевых продуктах, к числу которых могут быть отнесены и
тест-методы.
Цель работы: адаптация и модификация тест-методов определения
нитрит- и нитрат-ионов с использованием индикаторных полос и применение
предлагаемых тест-систем для анализа реальных объектов.
Задачи исследования:
1. Изучить современное состояние проблемы и подготовить обзор
литературы по изучаемой теме.
2.
Рассмотреть
возможность
применения
известного
тест-метода
определения нитрит-ионов для анализа пищевых продуктов, путем замены
носителя и реагента.
3.
Разработать
экспресс-метод
определения
нитрат-ионов
с
дифениламином.
4. Определить содержание нитрит- и нитрат-ионов с помощью тестметодов.
5. На основании полученных данных провести обсуждение результатов.
Научная новизна. В данной работе предпринята попытка адаптации
известного тест-метода определения нитрит-ионов в сточных водах и водной вытяжке
почв для анализа пищевых продуктов. Методика модифицирована следующим
образом: вместо бумаги марки F использована хроматографическая бумага. Это
связано с тем, что последняя обладает более высокими адсорбционными
свойствами,
благодаря
чему
окраска
по
всей
поверхности
носителя
распределяется равномерно и не возникает трудностей с ее идентификацией.
Заменен канцерогенный реагент на его производное, отвечающее всем требованиям к
импрегнируемых на бумаге реактивам.
Предложен
новый
экспресс-метод
определения
нитрат-ионов
с
дифениламином, ранее применяемый лишь для качественного анализа. Выбор
методики обусловлен следующими причинами: доступность используемых
реактивов,
отсутствие
сложной,
дорогостоящей
аппаратуры,
простота
выполнения, экспрессность.
Установлено, что оптимальные условия проведения реакции в растворах
совпадают с условиями сорбции определяемых ионов на модифицированных
органическими реагентами носителях. Учтены требования к аналитическим
реагентам: контрастность цветовой шкалы, высокая скорость взаимодействия с
определяемым компонентом, прочное удерживание реагента в порах бумаги.
Наличие стандартных цветовых шкал и индикаторных полос позволяют
определять содержание нитрит- и нитрат-ионов в пищевых продуктах.
1 ТЕСТ-МЕТОДЫ
ОПРЕДЕЛЕНИЯ НИТРИТ- И НИТРАТ-ИОНОВ В ЖИДКИХ
СРЕДАХ
1.1 Нитрит- и нитрат-ионы, как объекты химического мониторинга
пищевых продуктов
Природные источники: основные источники нитрит- и нитрат-ионов в
ненарушенных
и
агроландшафтах
–
органическое
вещество
почты,
минерализация которого обеспечивает постоянное образование нитрит- и
нитрат-ионов. Скорость минерализации органического вещества зависит от его
состава,
совокупности
экологических
факторов,
степени
и
характера
землепользования. Поэтому динамика нитрит- и нитрат-ионов в земных
экосистемах
определенным
образом
связана
с
малым
биологическим
круговоротом азота.
Сельскохозяйственное использование почвы приводит к уменьшению
запасов органического азота. Убыль почвенного азота усиливается при
проведении агротехнических мероприятий, стимулирующих минерализацию
органического вещества (севообороты с паром и пропашными культурами,
интенсивная обработка почвы, внесение повышенных доз минеральных
удобрений). В этой связи роль почвенного азота в загрязнении природных вод
нитрат-ионами и в накоплении растениями, по-видимому, более существенная,
чем считалась до сих пор.
Антропогенные источники: антропогенные источники нитрит- и нитратионов подразделяются на аграрные (минеральные и органические удобрения,
животноводческое производство), индустриальные (отходы промышленного
производства и сточные воды) и коммунально-бытовые.
Азотные удобрения представляют собой главный антропогенный
источник азота, который по своим масштабам приближается к биологической
его фиксации на суше и по некоторым прогнозам уже в ближайшие десятилетие
превысит ее.
В России, как и в других странах мира, азотные удобрения в основном
производят в виде концентратов при этом из этого ассортимента наибольшее
место
занимают
мочевина
и
аммиачная
селитра.
Преимущественное
использование аммонийных и амидных форм азотных удобрений в земледелии
не снижает опасности значительных потерь азота из почвы в силу
нитрофикации аммонийного азота.
Отходы животноводческого производства, главным образом сточные
воды и активный избыточный ил, отличаются высоким содержанием общего
азота (38-150 мг/л), большая часть которого представлена органической и
аммонийной
формами.
Наряду
с
рассмотренными
выше
аграрными
источниками увеличение уровня нитрат-ионов в агроландшафтах может быть
обусловлено и иными формами сельскохозяйственной деятельности. Так,
замена традиционных систем земледелия с участием и чередованием
разнообразных
культур
более
интенсивными
и
специализированными
технологиями, которые способствуют усилению минерализации органического
вещества почвы и разрушению ее структуры, ограничение площадей, занятых
травами, распашка кормовых угодий под постоянную пашню, утяжеление
машин и их использование на постоянных технологических колеях, отсутствие
защитных зон вокруг полей приводят в конечном счете к усилению
внутрипочвенного и поверхностного выноса азота. Концентрация нитрит- и
нитрат-ионов в водоемах возрастает при мелиорации переувлажненных земель
и в первые годы их сельскохозяйственного использования. Наиболее высокий
уровень
нитрат-ионов
принимающих
обнаруживается
дренажные
воды.
в
магистральных
Длительное
водостоках,
сельскохозяйственное
использование осушенных земель приводит к некоторому повышению
содержания нитрат-ионов и в грунтовых водах. Потенциальное значение осадка
сточных вод как источника нитрат-ионов определяется способом его
утилизации,
нормой
внесения
в
почву
и
скоростью
минерализации
азотсодержащих соединений. Наиболее распространенный путь утилизации
осадков сточных вод заключается в приготовлении на его основе компостов,
непосредственном внесении в почву с целью мелиорации земель или в качестве
удобрения.
На первых этапах компостирования осадка сточных вод преобладают
процессы аммонификации.
В целом роль илов, шламов как источника нитрат-ионов невелика, так
как основное количество азота в них находится в трудногидролизуемых
соединениях.
1.2 Методика определения нитрит-ионов
Для определения нитрит-ионов в работе была выбрана методика,
предложенная В.М. Островской для анализа сточных вод и почв и перенесена
на наш предмет исследования [1, 2]. Предлагаемый В.М. Островской αнафтиламин (реактив Грисса: сульфаниловая кислота + α-нафтиламин),
обладающий
канцерогенными
свойствами,
был
заменен
на
другие
сочетающиеся реагенты: диазотируемый амин + азосоставляющая: N-(1нафтил)-этилендиамин + сульфаниловая кислота.
В
работе
вместо
предложенной
бумаги-основы
марки
F
с
фильтровальной способностью 40 мм/мин использовали хроматографическую
бумагу. Индикаторные полосы готовили путем однократной пропитки ее
реактивом
Грисса.
сульфаниловой
Для
кислоты
этого
в
смешивали
уксуснокислом
равные
растворе
объемы
и
растворов
N-(1-нафтил)-
этилендиамина. Затем закрепляли 0,3%-ым раствором желатина. Высушивали в
потоке теплого воздуха, бумагу нарезали полосами размером 12 х 30 мм.
Индикаторная бумага не изменяет своих свойств в обычных условиях две
недели, если над осушителем - до двух месяцев.
Для создания стандартной цветовой шкалы использовали ГСО 7479-98
(С(NO2---) = 0,95-1,05 мг/см3). Для этого в колбу на 100 мл добавляли 1 мл ГСО и
доводили до метки дистиллированной водой (С(NO2-) =10 мкг/мл). Рабочие
растворы меньших концентраций 0,050; 0,100; 0,150; 0,175; 0,200; 0,250; 0,270
мкг/мл
готовили
последовательным
разбавлением
исходного
раствора
дистиллированной водой. При контакте индикаторных бумаг с рабочими
растворами наблюдалось появление окраски и ее изменение в зависимости от
концентрации определяемого компонента. Окраска изменялась от бледнорозовой до красной. Стандартная цветовая шкала представлена на Рисунке 1.
Индикаторную бумагу использовали для определения нитрит-ионов в
мясных продуктах. Пробоподготовка проводилась методом квартования [3, 4].
Затем пробы дважды измельчали в блендере. 10 г пробы, подготовленной к
анализу помещали в мерную колбу вместимостью 200 мл, доводили
дистиллированной водой до метки и перемешивали. Колбу с содержимым
нагревали на водяной бане, периодически встряхивая до (55 ± 2) °С, в течение 5
мин. Затем вытяжку фильтровали через бумажный фильтр «Черная лента», не
перенося осадка на фильтр. В мерную колбу вместимостью 100 мл вносили
пипеткой 10 мл обезбелоченного фильтрата, доводили дистиллированной водой
до метки и перемешивали. Тест-полосу опускали в полученный фильтрат на 5
секунду и наблюдали ее цвет после высушивания на воздухе через 1 минуту.
Интенсивность окраски реакционной зоны оценивали по стандартной цветовой
шкале (рисунок 1).
Массовая доля нитрит-ионов в процентах при навеске 10 г и объеме 10
мл указана в Таблице 1.
Таблица 1. Ориентировочное содержание нитрит-ионов
Номер
Массовая концентрация
Массовая доля нитрит-иона, %
нитрит-иона, мкг/мл
1
0,050
0,0010
2
0,100
0,0020
3
0,150
0,0030
4
0,175
0,0035
5
0,200
0,0040
6
0,250
0,0050
7
0,275
0,0055
Массовую долю нитрит-ионов (χ) в процентах вычисляли по формуле:
(1)
где М – массовая концентрация нитрит-ионов, найденная по стандартной
цветовой шкале, мкг/мл;
m – навеска продукта, г;
ν – количество фильтрата, мл;
106 – коэффициент перевода в граммы.
За
окончательный
результат
испытания
принимали
среднее
арифметическое результатов трех параллельных определений.
Время анализа составляет 10-15 минут.
Результаты анализа представлены в Таблице А.2 (Приложение А).
Правильность метода контролировали фотометрическим методом [5].
1.3 Фотометрический метод определения нитрита по ГОСТ 8558.1 -78
1.3.1 Сущность метода
Настоящий стандарт распространяется на мясные продукты всех видов,
при изготовлении которых применяют нитрит, а также рассолы и посолочные
смеси и устанавливает методы определения нитрита.
Первый метод основан на реакции нитрита с N-(1-нафтил)-этилендиамин
дигидрохлоридом
последующем
и
сульфаниламидом
фотоколориметрическом
в
обезбелоченном
или
визуальном
фильтрате
и
определении
интенсивности окраски.
При фотоколориметрическом определении интенсивности окраски метод
соответствует международному стандарту ISO 2918-75 и применяется при
разногласиях в оценке качества.
Второй метод основан на реакции Грисса.
В качестве параллельного метода был использован первый метод
определения нитрита [5].
1.3.2 Отбор и подготовка проб
1.
Пробы колбасных изделий, продуктов из свинины, говядины,
баранины, мяса птиц отбирают по ГОСТ 9792-73.
2.
Пробы к анализу готовят следующим образом.
С колбасных изделий снимают оболочку; с фаршированных колбас и
языков в шпике – поверхностный слой шпика и оболочки; с окороков, лопаток,
рулетов, корейки и грудинки – поверхностный слой шпика; затем пробы
дважды измельчают на мясорубке с отверстиями решетки диаметром от 3 до 4
мм.
Продукты, состоящие из шпика с промежуточными слоями мышечной
ткани (ветчина в форме, прессованный бекон) измельчают полностью.
Полученный фарш тщательно перемешивают, помещают в стеклянную или
пластмассовую банку вместимостью от 200 до 400 см3, заполнив ее, и
закрывают крышкой.
3.
Пробу хранят при (4 ± 2) ºС до окончания анализа. Анализ проводят
не позднее чем через 24 ч после отбора проб. Пробы сырых продуктов
анализируют сразу после измельчения [5].
1.3.3 Подготовка к анализу
І. Растворы для осаждения белков
1. Реактив Карреза1: 106 г железистосинеродистого калия растворяют в
дистиллированной воде и доводят объем раствора до 1000 см 3. Реактив хранят в
склянке из темного стекла не более месяца.
2. Реактив Карреза2: 220 г уксусно-кислого цинка и 30 см3 ледяной
уксусной кислоты растворяют в дистиллированной воде и доводят объем
раствора до 1000 см3. Реактив хранят не более месяца.
3. Насыщенный раствор буры: 50 г тетраборно-кислого натрия
растворяют в 1000 см3 теплой дистиллированной воды, и охлаждают до (20 ± 2)
°С.
ІІ. Растворы для проведения цветной реакции
1. Раствор 1. 2 г сульфаниламида растворяют в 400 см3 раствора соляной
кислоты (1 : 1) и доводят этим раствором кислоты до объема 1000 см3.
2. Раствор 2. 0,25 г
N-(1-нафтил)-этилендиамин дигидрохлорида
растворяют в воде и добавляют до 250 см3. Раствор хранят в склянке из темного
стекла в холодильнике не более месяца.
ІІІ. Приготовление стандартных растворов
Для приготовления стандартных растворов использовали ГСО 7479-98
(С(NO2---) = 0,95-1,05 мг/см3). Для приготовления рабочего раствора 1 см3
основного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3, доводят
водой до метки и перемешивают. Из полученного раствора готовят серию
стандартных растворов: 2; 5 и 10 см3 рабочего раствора пипеткой вносят в три
мерные колбы вместимостью 100 см3, доводят водой до метки и перемешивают.
Полученные стандартные растворы содержат в 1 см3 соответственно 1,0;
2,5 и 5,0 мкг нитрит-иона.
Готовят три
серии
стандартных растворов, начиная
каждый
с
приготовления основного раствора из ГСО 7479-98 (С(NO2---) = 0,95-1,05 мг/см3).
Стандартные
растворы
нитрит-иона
не
стойки,
поэтому
их
готовят
непосредственно перед построением градуировочного графика [5]
1.3.4 Построение градуировочного графика
В четыре мерные колбы вместимостью 100 см3 пипеткой вносят: в
первую колбу для сравнения 10 см3 воды, а в остальные по 10 см3 стандартных
растворов, содержащих 1,0; 2,5 и 5,0 мкг нитрит-иона в 1 см3 раствора.
В каждую колбу добавляют по 50 см3 воды; 10 см3 раствора 1 для
проведения цветной реакции. Растворы в колбах перемешивают и выдерживают
в темном месте 5 мин. Добавляют 2 см3 раствора 2 для проведения цветной
реакции, перемешивают и снова выдерживают в темном месте при (20 ± 2) °С 3
мин.
Растворы в колбах доводят водой до метки и перемешивают. Измеряют
интенсивность красной окраски на спектрофотометре при длине волны 540 нм с
зеленым светофильтром в кювете с толщиной поглощенного свет слоя 1 см в
отношении раствора сравнения.
По полученным средним данным из трех стандартных растворов строят
градуировочный график. На оси абсцисс откладывают концентрацию нитритионов (в мкг в 1 см3 окрашенного раствора); на оси ординат – соответствующую
оптическую плотность [5].
Градуировочный график должен проходить через начало координат
(градуировочный график представлен на Рисунке 2).
1.3.5 Проведение анализа
В мерную колбу вместимостью 200 см3 помещают 10 г подготовленной к
анализу пробы, взвешенной с погрешностью не более 0,001 г добавляют
последовательно 5 см3 насыщенного раствора буры и 100 см3 воды
температурой (75 ± 2) ºС.
Колбу с содержимым нагревают на кипящей водяной бане 15 мин.,
периодически встряхивая, затем охлаждают до (20 ± 2) ºС, тщательно
перемешивая, последовательно добавляют по 2 см3 реактива Карреза1 и
реактива Карреза2, доводят до метки и выдерживают 30 мин. при (20 ± 2) ºС.
Затем содержимое колбы фильтруют через складчатый фильтр «Черная лента».
Полученный обезбелоченный фильтрат вносят в количестве 10 см3
пипеткой в мерную колбу вместимостью 100 см3 и проводят цветную реакцию и
фотометрирование согласно 1.4.4 используя вместо стандартных растворов
вышеуказанное количество обезбелоченного фильтрата.
Параллельно проводят контрольный опыт на реактивы, помещая в
мерную колбу вместимостью 200 см3 вместо 10 г пробы 10 см3 воды [5].
1.3.6. Обработка результатов
Массовую долю нитрита (χ1) в процентах вычисляют по формуле:
(2)
где М1 – массовая концентрация нитрита, найденная по градуировочному
графику, мкг/см3;
m – навеска продукта, г;
ν – количество фильтрата, взятое для фотоколориметрического измерения, см3;
106 – коэффициент перевода в граммы.
За
окончательный
результат
испытания
принимают
среднее
арифметическое результатов трех параллельных определений и вычисляют с
точностью до 0,0001 %.
Предел возможных значений относительной погрешности измерений – 2
% при вероятности 0,95 [6].
Результаты анализа представлены в Таблице А.2 (Приложение А).
1.4 Методика определения нитрат-ионов
Для
определения
нитрат-ионов
была
предложена
качественная,
химическая, специфическая реакция на анион третьей аналитической группы –
нитрат-ион [7].
Для изготовления тест-полос использовали стеклоткань. Носитель
готовили путем однократной пропитки в 4-5 каплях раствора дифениламина в
концентрированной
серной
кислоте.
Раствор
дифениламина
в
концентрированной серной кислоте является очень чувствительным реактивом
на нитрат-ион. Носитель, пропитанный в сернокислом растворе дифениламина,
закрепляли 0,3%-ым раствором желатина, затем высушивали в потоке теплого
воздуха, нарезали полосами размером 12 х 30 мм. Носитель не изменяет своих
свойств в течение двух месяцев при хранении в эксикаторе (в темном месте).
Для создания стандартной цветовой шкалы использовали ГСО 6094-91
(С(NO3-) = 0,95-1,05 мг/см3). Рабочие растворы меньших концентраций 2,00;
4,00; 6,00; 8,00; 10,00; 12,00 и 15,00 мкг/мл готовили последовательным
разбавлением исходного раствора дистиллированной водой. При контакте
полученного носителя с рабочими растворами наблюдалось появление окраски
и ее изменение в зависимости от концентрации определяемого компонента.
Окраска изменялась от бледно-голубой до ярко-синей. Стандартная цветовая
шкала представлена на Рисунке 3.
Индикаторные реагентные полосы использовали для определения
нитрат-ионов в яблоках. Анализируемое яблоко, не снимая кожуры, измельчали
в блендере, затем отжимали сок. 10 мл, полученного сока переносили в колбу на
25 мл и доводили дистиллированной водой до метки. Тест-полосу опускали
полученного раствор на 5 секунду и затем наблюдали ее цвет после
высушивания на воздухе через 1 минуту. Интенсивность окраски реакционной
зоны полосы оценивали по стандартной цветовой шкале. Время анализа
составляет 3-5 минут.
Расчет результатов анализа проводят по формуле:
g = (C· Vc · Vк / Vа ) / mябл ,
(3)
где g – содержание нитрат-ионов, мг/кг;
C – содержание нитрат-ионов, найденное по градуировочному графику, мкг/мл;
Vc – общий оъем сока, мл;
Vк – объем колбы (с учетом разведения), мл;
Vал – объем фильтрата, взятый для анализа, мл;
mябл – масса яблока, взятого для анализа, кг
За
окончательный
результат
испытания
принимают
среднее
арифметическое результатов трех параллельных определений.
Результаты анализа представлены в Таблице Б.3 (Приложение Б).
Параллельно те же пробы проанализировали фотометрическим методом
[8].
1.5 Фотометрический метод определения нитратов и нитритов по
ISO 13395
1.5.1 Сущность метода
ISO 13395 устанавливает метод определения нитритов, нитратов или их
суммарного содержания в различных типах вод – грунтовых, поверхностных,
сточных, а также в питьевой воде. Система может быть адаптирована для
анализа проб пищевых продуктов (водной вытяжки).
Сущность метода заключается в восстановлении нитрата в нитрит с
помощью металлического кадмия с последующим определением окрашенного
соединения, полученного после ряда реакций с участием нитрита. Содержание
нитрита в пробе определяют без обработки кадмиевым восстановителем.
Реакция проходит в две стадии: при действии на сульфаниловую кислоту
нитрита, который в уксуснокислой среде переходит в азотистую кислоту,
образуется диазосоединения (фенилдиазонийсульфокислота), которое реагирует
с α-нафтиламином и образует азокраситель [8]:
O N OH + NH2
HO3S + CH3COOH
-H2O
HO3S
N N CH3COO
(1)
HO3S
HO3S
CH3COOH
N N CH3COO
NH2
N N
NH2
(2)
Реакция относится к числу наиболее чувствительных колориметрических
реакций и дает возможность определить 0,5 мкг N/л (чувствительность метода).
Данный метод позволяет определять без разбавления до 0,3 мг NO2---/л.
Определению мешают взвешенные вещества и мутность воды, поэтому перед
анализом пробу фильтруют. В анализируемой пробе не должны присутствовать
сильные окислители или восстановители. Мешают определению медь, железо,
ртуть,
серебро,
метованодаты.
висмут,
Железо
сурьма,
маскируют
свинец,
золото,
лимонной
хлороплатинаты
кислотой.
При
и
больших
концентрациях исследуемую пробу рекомендуется разбавлять.
Высокая чувствительность метода требует тщательного предохранения
применяемых в анализе реактивов и дистиллированной воды от загрязнения
нитритами. Исследуемые пробы и реактивы нельзя оставлять открытыми, так
как в воздухе почти всегда содержатся следы окислов азота. Особое внимание
должно быть обращено на чистоту посуды.
1.5.2 Подготовка к анализу
Система
должна
быть
оборудована
колонкой
с
кадмиевым
восстановителем с эффективностью 90 %.
Кадмиевая колонка (редуктор с амальгамой кадмия) представляет собой
трубку высотой около 40 см, внутренним диаметром 10 мм. В верхней части
трубки желательно воронкообразное расширение для удобного наполнения
трубки жидкостью.
Для приготовления амальгамы кадмия берут 100 г гранулированного
кадмия, очищают их поверхность, обрабатывая их поверхность 1 н.
хлористоводородной кислотой, затем промывают водой и для стабилизации
погружают в раствор сульфата меди с концентрацией 2,5 г/л (при этом
поверхность гранул становится чёрной). Полученный амальгированный кадмий
промывают достаточным объемом дистиллированной воды и наполняют им
трубку редуктора, на дно которого предварительно помещают слой стеклянной
ваты. Переносят амальгированный кадмий в трубку вместе с дистиллированной
водой и заливают его водой так, чтобы вода его покрывала и в колонке не было
пузурьков воздуха. Амальгама кадмия должна заполнять 1/3
трубки.
Пропускают анализируемый раствор через редуктор со скоростью 4 мл/мин.
Первые
несколько
миллилитров
прошедшего
через редуктор
раствора
отбрасывают, далее определяют содержание нитрит-ионов фотометрическим
методом.
Метод применяется для определения нитрат-ионов в концентрациях от
0,002 до 0,5 мг/л. Определению мешают взвешенные вещества и мутность,
поэтому
перед
анализом
пробу
фильтруют.
Мешают
фосфат-ионы
в
концентрациях превышающих 100 мг/л. Присутствующие в пробе нитриты
проходят через редуктор без изменения. Их определяют отдельно, и результат
вычитают из результата определения нитратов. Не мешают хлориды (до 50 мг),
фториды (до 25 мг), сульфаты (до 25 мг), сульфиты (до 10 мг), фосфаты (до 25
мг) и бораты (до 1 мг).
Недостатком этого метода является низкая скорость прохождения
анализируемого раствора через кадмиевую колонку, поэтому этот процесс
занимает много времени [8].
1.5.3 Построение градуировочного графика
Приготовление рабочего раствора нитрита.
Для приготовления рабочего раствора 1 мл ГСО (С(NO2---) = 0,95-1,05
мг/см3)
переносят
в
мерную
колбу
вместимостью
100
мл,
доводят
дистиллированной водой до метки и перемешивают (С(NO2---) =10 мкг/мл).
Построение градуировочного графика для нитрита.
В 6 мерных колб на 25 мл из рабочего раствора нитрита берут аликвоты
0,00; 3,00; 3,50; 4,00; 4,50; 5,00 мл. Затем последовательно во все колбы
приливалют по 1 мл реактива Грисса, растворы в колбах доводят
дистиллированной водой до метки и через 30 минут после развития окраски
выполняют фотометрирование. Измеряют поглощающую способность красной
окраски на спектрофотометре при длине волны 540 нм с зеленым
светофильтром в кювете с толщиной поглощенного свет слоя 1 см в отношении
раствора сравнения (1 мл реактива Грисса в 25 мл воды).
По полученным данным строят градуировочный график. На оси абсцисс
откладывают концентрацию нитрит-ионов (в мкг в 1 мл окрашенного раствора);
на оси ординат – соответствующую оптическую плотность [8].
Градуировочный график должен проходить через начало координат
(градуировочный график представлен на Рисунке 4).
1.5.4 Проведение анализа
В центрифужные пробирки помещают 10 мл яблочного сока, 5 мл
насыщенного раствора лимонной кислоты (для связывания железа, с константой
нестойкости Кнест=3,54*10-15). Затем центрифугируют 15-20 раз, отделяют
осадок от раствора. 10 мл последнего помещают в мерную колбу на 25 мл,
добавляют 1 мл реактива Грисса, доводят дистиллированной водой до метки и
относительно «холостого» раствора, через 30 минут после развития окраски
фотометрируют. По градуировочному графику определяют концентрацию
нитрата/нитрита.
Для определения нитрат-ионов пропускают анализируемый раствор
через кадмиевую колонку, состоящую из стеклянной трубки, заполненной
амальгамированным кадмием:


NO3   Cd  2CH3COOH 
 NO2  Cd 2  2CH3COO  H2O
(3)
По разности концентраций в пробе нитрата/нитрита и нитрит-ионов,
найденных по градуировочному графику, определяют содержание нитрат-ионов
в анализируемом объекте [8].
1.5.5. Обработка результатов
Расчет результатов анализа проводят по формуле:
g = (C· Vc · Vк / Vа ) / mябл ,
(4)
где g – содержание нитрат-ионов, мг/кг;
C – содержание нитрат-ионов, найденное по градуировочному графику, мкг/мл;
Vc – общий оъем сока, мл;
Vк – объем колбы (с учетом разведения), мл;
Vал – объем фильтрата, взятый для анализа, мл;
mябл – масса яблока, взятого для анализа, мл
За
окончательный
результат
испытания
принимают
арифметическое результатов трех параллельных определений [8].
Результаты анализа представлены в Таблице Б.3 (Приложение Б).
среднее
2 ТЕСТ-ОПРЕДЕЛЕНИЕ
НИТРИТ- И НИТРАТ-ИОНОВ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ
ИНДИКАТОРНЫХ ПОЛОС В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ
2.1 Вредное воздействие нитрит- и нитрат-ионов на организм
человека
Проблема токсичного накопления нитратного
азота в пищевых
продуктах и вредного воздействия его на организм человека на современном
этапе является одной из наиболее острых и актуальных.
Впервые заговорили о нитратах в нашей стране в 70-х годах, когда в
Узбекистане случилось несколько массовых желудочно-кишечных отравлений
арбузами, при их чрезмерной подкормке аммиачной селитрой.
В мировой науке о нитратах знали еще гораздо раньше. Сейчас
общеизвестно, что нитрат-ионы обладают высокой токсичностью для человека
и сельско-хозяйственных животных:
Нитрат-ионы
под
воздействием
фермента
нитратредуктазы
восстанавливаются до нитрит-ионов, которые взаимодействуют с гемоглобином
крови и окисляют в нем 2-х валентное железо в 3-х валентное. В результате
образуется вещество метгемоглобин, который уже не способен переносить
кислород. Поэтому нарушается нормальное дыхание клеток и тканей организма
(тканевая гипоксия), в результате чего накапливается молочная кислота,
холестерин, и резко падает количество белка.
Особенно опасны нитрат-ионы для грудных детей, так как их
ферментная основа несовершенна, и восстановление метгемоглобина в
гемоглобин идет медленно.
Нитрат-ионы способствуют развитию патогенной (вредной) кишечной
микрофлоры, которая выделяет в организм
человека ядовитые вещества
токсины, в результате чего идет токсикация, то есть отравление организма.
Основными признаками нитратных отравлений у человека являются:
- синюшность ногтей, лица, губ и видимых слизистых оболочек;
- тошнота, рвота, боли в животе;
- понос, часто с кровью, увеличение печени, желтизна белков глаз;
- головные боли, повышенная усталость, сонливость, снижение
работоспособности;
- одышка, усиленное сердцебиение, вплоть до потери сознания;
- при выраженном отравлении – смерть.
Нитрат-ионы снижают содержание витаминов в пище, которые входят в
состав многих ферментов, стимулируют действие гормонов, а через них влияют
на все виды обмена веществ.
У беременных женщин возникают выкидыши, а у мужчин – снижение
потенции.
При длительном поступлении нитрат-ионов в организм человека (пусть
даже в незначительных дозах) уменьшается количество йода, что приводит к
увеличению щитовидной железы.
Установлено, что нитрат-ионы сильно влияют на возникновение раковых
опухолей в желудочно-кишечном тракте у человека.
Нитрат-ионы способны вызвать резкое расширение сосудов, в результате
чего понижается кровяное давление.
При всем вышеизложенном следует помнить, вред наносят организму
человека не сами нитрат-ионы, но и их метаболиты: нитрит-ионы и
нитрозосоединения, в которые они превращаются при определенных условиях
[9].
2.2 Тест-метод определения нитрит-ионов в мясных продуктах
В методике, предложенной В.М. Островской [1, 2], в качестве носителя
использовалась бумага марки F с фильтровальной способностью 40 мм/мин,
которая была заменена на хроматографическую бумагу. Это связано с тем, что
последняя обладает более высокими адсорбционными свойствами, благодаря
чему окраска по всей поверхности носителя распределяется равномерно и не
возникает трудностей с ее идентификацией.
Предлагаемый в методике В.М. Островской α-нафтиламин был заменен
на N-(1-нафтил)-этилендиамин. N-(1-нафтил)-этилендиамин обладает рядом
преимуществ перед канцерогенным α-нафтиламином:
-N-(1-нафтил)-этилендиамин не имеет неприятного запаха, подобного
запаху более летучего 1-нафтиламина;
-N-(1-нафтил)-этилендиамин более трудно растворим;
-N-(1-нафтил)-этилендиамин
обладает
значительно
большей
устойчивостью к окислению и разложению, что особенно заметно при хранении
на воздухе и на свету и, как следствие, большей устойчивостью при хранении
как в таре, в адсорбированном виде на бумаге, так и в продуктах его
азосочетания.
В основе применяемого тест-метода лежит реакция Грисса - реакция
диазотирования и азосочетания с образованием азокрасителя. Так как реакция
диазотирования может проходить как в кислой, так и щелочной среде, то было
решено провести исследования по выявлению влияния рН среды на образование
окрашенной зоны. Контроль рН осуществлялся с помощью рН-метра.
Необходимое значение рН создавалось при помощи концентрированных
растворов соляной кислоты и гидроксида натрия. Максимально различимая
контрастность окраски наблюдалась в интервале рН от 2 до 4. Начиная с рН=5,
тональность окраски ближайших концентраций все более сглаживалась, и
разница почти была не видна. При рН ≥ 7, нитрат-ионы начинали
восстанавливаться до аммиака; происходило выделение тепла, которое
разрушало образующуюся соль диазония [2, 10].
Реакция Грисса:
O N OH + NH2
HO3S + CH3COOH
-H2O
HO3S
N N CH3COO
(4)
HO3S
HO3S
N N CH3OO
CH3COOH
NHR
N N
NHR
(5)
где R = CH2 – CH2 – NH2
Оптимальной средой для проведения реакции служит кислая среда
(рН=2-4) В случае появления при смешивании растворов розовой окраски
добавляли цинковую пыль. При действии цинка в присутствии уксусной
кислоты нитрат-ионы восстанавливаются до нитрит-ионов. [7, 11]:


NO3   Zn  2CH3COOH 
 NO2  Zn 2  2CH3COO  H 2 O
(6)
При изготовлении индикаторных полос использован метод закрепления
реагентов с помощью 0,3%-го раствора желатина, который препятствует вымыванию
реагента с поверхности носителя, что ранее не использовалось в предложенной
методике [1].
Полученные
индикаторные
бумаги
использованы
для
создания
стандартной цветовой шкалы (Рисунок 1).
0,050 0,100
0,0010
0,150
0,0020
0,175
0,0030
0,200
0,0035
0,250
0,0040
0,270 мкг/мл
0,0050
0,0055 %
Рисунок 1 – Стандартная цветовая шкала для определения нитрит-ионов
Индикаторную бумагу использовали для определения нитрит-ионов в
мясных продуктах. Соли этого кислотного остатка добавляют в готовую
мясную продукцию с целью улучшения ее потребительских свойств, которые
придают ей розовый мясной цвет, а также для более длительного хранения
(нитриты натрия и калия обуславливают цвет, вкус и аромат мясных изделий,
ингибируют рост микрофлоры и образование токсинов в мясопродуктах). Это
пищевые добавки Е249-Е252 [12].
В качестве метода сравнения в работе использовали фотометрический
метод [5]. Концентрацию нитрит-ионов определяли по градуировочному
графику (Рисунок 2).
Рисунок 2 – Зависимость оптической плотности от концентрации
нитрит-ионов
Результаты анализа представлены в Таблице А.2 (Приложение А).
Массовая доля нитрит-ионов не должна превышать 0,0050% [12]. Из
результатов анализа можно сделать выводы, что образцы 3 и 4 содержат нитритионы больше допустимого значения.
2.3 Тест-метод определения нитрат-ионов в продуктах растительного
происхождения
В основе применяемого тест-метода лежит реакция взаимодействия
дифениламина в концентрированной серной кислоте с нитрат-ионами. В
присутствии нитрат-ионов появляется интенсивно синяя окраска вследствие
окисления дифениламина образующейся азотной кислотой с образованием
имониевых солей дифенилбензидина (схема реакции Кермана) [6, 13]:
C6H5 NH C6H5
H2SO4 k HNO3
C6H5N
NHC6H5 OSO3H
(7)
В литературе существует описание этой реакции, но описание химизма
не встречается. В качестве носителя использовали стеклоткань (ткань
стеклянная) – волокнистая основа, состоящая из переплетенных стеклянных
нитей. Это экологически чистый материал, обладающий высокой стойкостью к
разложению и механическому износу, долговечен, прочен, сочетает в себе
пористость структуры и гидрофильность, не притягивает пыль, так как не
обладает статистическим зарядом. Степень удержания реагентов на стеклоткани
выше (70-90%), чем на бумаге (40-50%) по причине беспорядочной сшивки
стеклянных крученных комплексных нитей.
Установлено, что оптимальные условия проведения реакции в растворах
совпадают с условиями сорбции определяемых ионов на модифицированных
органическими реагентами носителях.
При изготовлении индикаторных полос также использован метод
закрепления реагентов с помощью 0,3%-го раствора желатина.
Полученные
индикаторные
полосы
использованы
для
создания
стандартной цветовой шкалы (Рисунок 3).
2,00
4,00
6,00
8,00
10,00
12,00
15,00мкг/мл
Рисунок 3 – Стандартная цветовая шкала для определения нитрат-ионов
Индикаторную бумагу использовали для определения нитрат-ионов в
яблоках.
В качестве метода сравнения в работе использовали фотометрический
метод [8]. По разности концентраций в пробе нитрата/нитрита и нитрит-ионов,
найденных по градуировочному графику, определяли содержание нитрат-ионов
в анализируемом объекте (Рисунок 4).
Рисунок 4 – Зависимость оптической плотности от концентрации
нитрит-ионов
Результаты анализа представлены в Таблице Б.3 (Приложение Б).
Предельно допустимая норма нитрат-ионов в яблоках 60 мг/кг (0,060
мг/г). Из результатов анализа можно сделать вывод, что содержание нитратионов не превышает предельно допустимого значения только лишь в Образце 2
«Мария-Ра».
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
В начале экспериментальной деятельности по определению нитритионов за основу была взята методика, предложенная В.М. Островской для
анализа сточных вод и почв и перенесена на наш предмет исследования.
Впоследствии в первоначальный вариант внесены следующие изменения:
- В качестве носителя вместо бумаги марки F с впитывающей
способностью 40 мм/мин, использовалась хроматографическая бумага. Это
связано с тем, что последняя обладает более высокими адсорбционными
свойствами,
благодаря
чему
окраска
по
всей
поверхности
носителя
распределяется равномерно и не возникает трудностей с ее идентификацией, а
так же обладает лучшими светоотражающими свойствами.
- В основе применяемого тест-метода была положена реакция Грисса реакция диазотирования и азосочетания с образованием азокрасителя, и ее
различные модификации:
H+
RNH2 + NO2- → RN ≡ N+
RN ≡ N+ + R1H → RN = NR1
Использовано
несколько
(8)
(азоиндикатор)
вариантов
замены
(9)
канцерогенного
α-
нафтиламина:
1. Замена на 1-нафтиламин-7-сульфокислоту (кислота Клеве). При
замене α-нафтиламина на 1-нафтиламин-7-сульфокислоту (кислота Клеве)
нитрит-ионы можно определить только качественно, так как тональность при
различных концентрациях визуально неотличима.
2. Замена на N-(1-нафтил)-этилендиамин. Было установлено, что N-(1нафтил)-этилендиамин обладает рядом преимуществ перед канцерогенным αнафтиламином:
-N-(1-нафтил)-этилендиамин не имеет неприятного запаха, подобного
запаху более летучего 1-нафтиламина;
-N-(1-нафтил)-этилендиамин более трудно растворим;
обладает
-N-(1-нафтил)-этилендиамин
значительно
большей
устойчивостью к окислению и разложению, что особенно заметно при хранении
на воздухе и на свету и, как следствие, большей устойчивостью при хранении
как в таре, в адсорбированном виде на бумаге, так и в продуктах его
азосочетания.
Поэтому для определения нитрит-ионов в качестве реагента был выбран
N-(1-нафтил)-этилендиамин.
- Подобран оптимальный интервал рН: от 2 до 4. Именно при таких
условиях удается получить шкалу с максимально различимой тональностью
окраски ближайших концентраций.
При определении нитрат-ионов так же возник вопрос в выборе реагента.
Были апробированы различные модификации реакции Грисса. Но эти процессы
требовали длительного времени, так как нитрат-ионы можно было определить
только после их предварительного восстановления до нитрит-ионов.
Пробовали в качестве реагента использовать фенилдисульфокислоту,
Недостатком данного метода является то, что ее нужно синтезировать из фенола
и концентрированной серной кислоты, что очень опасно, требует большого
внимания и много времени.
Поэтому было решено разработать экспресс-метод определения нитратионов с дифениламином, ранее применяемый лишь для качественного анализа.
Выбор
методики
обусловлен
следующими
причинами:
доступность
используемых реактивов, отсутствие сложной, дорогостоящей аппаратуры,
простота выполнения, экспрессность.
Недостатком
предложенного
метода
является
то,
что
реакция
дифениламина в концентрированной серной кислоте характерна так же для NO2, CrO42-, MnO4-, Fe3+, [Fe(CN)6]3- и других окислителей, имеющих достаточно
высокий стандартный потенциал. Но как показывает опыт, при низких
концентрациях эти ионы не дают реакции с дифениламином.
Основным
недостатком
определения
нитрат-ионов
параллельным
методом является необходимость их восстанавливать. Однако здесь имеется
небольшая проблема: при избытке восстановителя возможно нитрат-ионы
восстановить до аммиака, который уже определяется реактивом Несслера.
Учтены требования к аналитическим реагентам: контрастность цветовой
шкалы, высокая скорость взаимодействия с определяемым компонентом,
прочное удерживание реагента в порах бумаги и стеклоткани.
Наличие стандартных цветных шкал (Рисунок 1, 3) и индикаторных
полос позволяют определять содержание нитрит- и нитрат-ионов в пищевых
продуктах.
Конечно, данные методы не могут соперничать по точности с другими
методами анализа, поскольку являются полуколичественным. Однако они
обладают рядом неоспоримых преимуществ: простотой, экспрессностью,
отсутствием сложной аппаратуры.
Предлагаемые методы позволяют значительно повысить наглядность
анализа по сравнению с контролируемым методом, получить оперативную
информацию о качестве анализируемого объекта.
ВЫВОДЫ
1.
Адаптирован известный тест-метод определения нитрит-иона для
анализа пищевых продуктов, путем замены носителя и реагента: α-нафтиламина
на его алкилпроизводное.
2.
Предложен
экспресс-метод
с
дифениламином
для
полуколичественного определения нитрат-иона
3.
Изготовлены
индикаторные
полосы
и
созданы
стандартные
цветовые шкалы для быстрого определения содержания нитрит- и нитратионов. Индикаторные полосы сохраняют свои реакционные свойства при
правильном хранении не менее двух месяцев.
4.
Тест-методы апробированы на содержание нитрит-иона в мясной
продукции, а нитрат-иона в продуктах растительного происхождения.
5.
Диапазоны определяемых содержаний нитрит-иона составляют
0,010-0,275 мкг/мл, время определений 10-15 минут. Диапазоны определяемых
содержаний нитрат-иона составляют 2,00-15,00 мкг/мл, время определений 3-5
минут.
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК
1.
Островская В.М. Вода индикаторные системы. М.: Мир, 2002. 265 с.
2.
Золотов Ю.А., В.М. Иванов., В.Г. Амелин. Химические тест-методы
анализа. М.: Едиториал, УКСС, 2002. 304 с.
3.
ГОСТ 9792-73 Отбор и подготовка проб колбасных изделий. Введ.
1993-01-01. М.: Изд-во стандартов, 1993. 6 с.
4.
ГОСТ
26929-94 Сырье и продукты пищевые. Подготовка проб.
Минерализация для определения содержания токсичных элементов.
Введ.
1996–01-01. М.: Изд-во стандартов, 1996. 14 с.
5.
ГОСТ 8558.1-78 Продукты мясные. Методы определения нитрита.
Введ. 1993-01-01. М.: Изд-во стандартов, 1993. 21 с.
6.
Каррер П. Курс органической химии. 2-е изд., перераб. и доп. Л.:
1962. 570 с.
7.
Крешков А.П. Основы аналитической химии. Теоретические
основы. Количественный анализ. М.: Химия. 1999. Т 2. 472 с.
8.
Фомин
радиационной
Г.С.
Вода
безопасности
Контроль
по
химической,
бактериальной
международным
и
стандартам:
энциклопедический справочник 2-е изд., перераб. И доп. М.: Протектор, 2000.
848 с.
9.
Соколов О.Н., Агаев В.Ю. Нитраты в окружающей среде. М.: 1990.
46 с.
10. Yamaguchi K.F. Spectral data of natural products // Journal of An
alytical Chemistry. 2000. № 6. P. 295-297.
11. Алексеев В.Н. Курс качественного химического полумикроанализа.
М.: Химия, 1973. 584 с.
12. ГОСТ 16290-86. Характеристики на мясные продукты. Введ. 1993–
01–01. М.: Изд-во стандартов, 1993. 11 с.
13. Аверина А.В., Снегирева А.Я. Лабораторный практикум по
органической химии. Учебное пособие для техникумов. М.: 1980. 184 с.
ПРИЛОЖЕНИЕ А
Результаты мониторинга нитрит-ионов в мясных продуктах
Таблица А.2 – Результаты мониторинга нитрит-ионов в мясных продуктах (n=3,
Р=0,95)
Объект
анализа
Образец 1
Найдено
тестметодом, %
(103)
2,7 ± 1,2
Найдено
фотометрическ
им методом, %
(103)
2,8 ± 0,6
Срок реализации при t
хранения от 0º до +6ºС и
относительной влажности
75±5%
30 суток
Образец 2
2,7 ± 1,2
2,1 ± 0,5
15 суток
Образец 3
5,3 ± 0,7
5,4 ± 0,5
72 часа
Образец 4
5,3 ± 0,7
5,2 ± 0,3
60 суток
Образец 5
4,8 ± 1,7
3,5 ± 0,2
30 суток
Примечания
Образец 1 - колбаса московская, вареная, высший сорт, охлажденная ГОСТ Р
52196-2003;
Образец 2 - колбаса любительская, вареная ТУ 9213-186-01597945-03;
Образец 3 – колбаса молочная, вареная ГОСТ 16351-86;
Образец 4 – колбаса докторская, вареная ГОСТ ОСТ 5647-88;
Образец 5 – колбаса нежная, вареная ГОСТ ОСТ 4938-85.
ПДК нитрит-ионов в мясных продуктах составляет 50 мг(NO2-)/кг (0,0050 %)
Приложение Б
Результаты мониторинга нитрат-ионов в яблоках
Таблица Б.3 – Результаты мониторинга нитрат-ионов в яблоках (n=3, Р=0,95)
Объект
анализа
Образец 1
Образец 2
Сектор торговли
Найдено тестметодом, мг/г
Мария-Ра
Рынок Старый
базар
Мария-Ра
Рынок Старый
базар
0,090 ± 0,012
0,100 ± 0,034
Найдено
фотометрическим
методом, мг/г
0,088 ± 0,002
0,118 ± 0,006
0,045 ± 0,015
0,065 ± 0,012
0,044 ± 0,001
0,061 ± 0,003
Примечания
МДУ=0,060 мг∕г
Образец 1 - яблоки «Фуши», Китай; Образец 2 - яблоки «Гала», Италия.
ПДК нитрат-ионов в яблоках составляет 60 мг(NO3-)/кг