(специальность медицинская биохимия) на весенний

1
ПРОГРАММА
практических занятий по общей микробиологии для студентов 2 курса МБФ
(специальность медицинская биохимия) на весенний семестр
2013-2014 учебного года
Раздел 1. «Морфология и ультраструктура микроорганизмов»
Занятие №1 Микробиологическая лаборатория. Классификация
микроорганизмов. Морфология бактерий
Контрольные вопросы:
1. История кафедры микробиологии СибГМУ.
2. Микробиологическая лаборатория и правила работы в ней.
3. Техника иммерсионной микроскопии.
4. Классификация
микроорганизмов.
Основные
таксономические
единицы.
5. Морфология бактерий.
Самостоятельная работа студентов:
1. Изучение техники иммерсионной микроскопии.
2. Освоение методики приготовления бактериального мазка.
3. Изучение набора красителей.
4. Освоение метода простой окраски мазка.
5. Приготовление, окраска и микроскопирование мазков из культур
бактерий стафилококка, ложносибиреязвенной бациллы, кишечной
палочки.
Занятие № 2 Ультраструктура и молекулярная организация бактериальной
клетки. Клеточная стенка. Сложные методы окраски
Контрольные вопросы:
1. Основные отличия эукариотических и прокариотических клеток.
2. Принципиальная организация прокариотической клетки.
3. Организация генетического материала. Нуклеоид. Плазмиды, их
классификация, функции.
4. Цитоплазматическая мембрана, строение, функции. Мезосомы.
5. Периплазматическое пространство, его роль.
6. Клеточная стенка бактерий, строение, функции. Пептидогликан,
тейхоевые кислоты, минорные и мажорные белки, ЛПС.
7. Различие в строении клеточной стенки грамположительных и
грамотрицательных бактерий. Принцип окраски бактерий по Граму.
8. Сферопласты, протопласты, L-формы, их значение, свойства и способы
получения.
Самостоятельная работа студентов:
1. Изучение организации генетического аппарата бактериальной клетки.
2. Изучение свойств плазмид по таблицам.
3. Приготовление сложного мазка из бактериальных культур кишечной
палочки и стафилококка.
4. Окраска сложного мазка по методу Грама, микроскопия.
2
Занятие № 3 Ультраструктура бактериальной клетки (продолжение).
Кислотоустойчивые бактерии. Капсула, жгутики. Сложные методы окраски
Контрольные вопросы:
1. Кислотоустойчивые бактерии. Особенности строения клеточной
стенки, свойства. Методы выявления.
2. Капсула бактерий, химический состав, биологическое значение,
методы выявления.
3. Жгутики бактерий, их строение, методы обнаружения. Пили, их
физиологическая роль.
4. Принцип устройства темнопольного микроскопа.
Самостоятельная работа студентов:
1. Приготовление сложного мазка из культур стафилококка и
микобактерий. Окраска по методу Циля-Нильсена, с целью выявления
кислотоустойчивых бактерий.
2. Просмотр демонстрационного препарата, изготовленного из мокроты
больного туберкулезом, и окрашенного по методу Циля-Нильсена.
3. Просмотр демонстрационного препарата (окраска по Бурри-Гинсу) с
целью выявления капсул.
4. Изучение подвижности бактерий в препарате «раздавленная» или
«висячая» капля.
5. Приготовление
препарата «висячая» капля из культуры сенной
палочки и его микроскопия в темном поле.
Занятие № 4 Ультраструктура бактериальной клетки. Споры. Включения
Контрольные вопросы:
1. Рибосомы бактерий. Строение малой и большой субъединиц.
Химический состав рибосом и функции.
2. Споры бактерий, их строение. Биологическое значение спор.
3. Споруляция и прорастание спор. Методы выявления спор.
4. Внутриклеточные включения бактерий, их роль в процессах
жизнедеятельности бактерий. Методы выявления.
5. Принцип устройства фазово-контарстного и люминесцентного
микроскопа.
Самостоятельная работа студентов:
1. Приготовление мазка из спорообразующей культуры и его окраска по
методу Ожешко, с целью выявления спор.
2. Просмотр демонстрационных
препаратов из чистых культур
возбудителей ботулизма и газовой гангрены, с целью выявления спор.
3. Приготовление мазка из культуры дрожжевых грибков и его окраска по
методу Нейссера, с целью выявления зерен волютина.
4. Просмотр демонстрационного препарата из чистой культуры
возбудителя дифтерии, с целью выявления зерен волютина.
3
Занятие № 5 Актиномицеты. Морфология спирохет. Бактерии
внутриклеточные паразиты – риккетсии, хламидии. Микоплазмы –
мембранные паразиты
Контрольные вопросы:
1. Актиномицеты, их классификация, морфология, особенности
химического состава клеточной стенки. Методы выявления.
Распространенность, практическое значение.
2. Спирохеты, их классификация, ультраструктура, морфология. Значение
в инфекционной патологии человека. Методы выявления.
3. Бактерии внутриклеточные паразиты, их общая характеристика и место
в экологии.
4. Риккетсии и хламидии: таксономическое положение, морфология,
особенности жизненного цикла. Значение в инфекционной патологии
человека. Методы выявления.
5. Микоплазмы, их отличие от других бактерий, особенности морфологии
и ультраструктуры. Причина паразитизма. Роль в патологии человека.
Таксономическое положение, методы выявления.
6. Электронный микроскоп.
Самостоятельная работа студентов:
1. Приготовление мазка из культуры актиномицетов и его окраска по
Граму.
2. Просмотр
демонстрационных
препаратов,
окрашенных
по
Романовскому-Гимзе, с целью изучения морфологии спирохет.
3. Просмотр демонстрационных препаратов, окрашенных по Граму и
Романовскому-Гимзе, с целью изучения морфологии риккетсий.
4. Просмотр
демонстрационного
препарата,
окрашенного
по
Романовскому-Гимзе (мазок из цервикального канала пациентки с
хламидиозом), с целью выявления хламидий.
Занятие № 6 Эукариотические микроорганизмы. Грибки и простейшие
Контрольные вопросы:
1. Грибки,
их
классификация
и
общая
характеристика.
Распространенность в природе, практическое значение.
2. Морфология плесневых грибков. Методы выявления.
3. Морфология дрожжевых грибков и методы их выявления.
4. Значение грибков в патологии человека.
5. Простейшие, их классификация.
6. Морфология простейших. Методы выявления. Роль в патологии
человека.
Самостоятельная работа студентов:
1. Изготовление нативных препаратов из культур мукоровых,
аспергиловых и пеницилловых грибков, с целью изучения морфологии
с помощью светового микроскопа.
2. Изготовление препарата из культуры дрожжевых грибков и его окраска
по Граму, с целью изучения морфологии.
3. Просмотр демонстрационных препаратов, с целью изучения
морфологии простейших.
4
Занятие № 7 Итоговое по разделу «Морфология и ультраструктура
микроорганизмов»
Раздел 2. «Физиология и биохимия микроорганизмов»
Занятие № 8 Питание, культивирование бактерий. Выделение чистых
культур аэробных микроорганизмов
Контрольные вопросы:
1. Химический состав бактерий. Потребность в химических элементах.
2. Питательные среды, их классификация. Требования к питательным
средам.
3. Понятие о метаболизме бактерий.
4. Классификация бактерий по типам питания. Механизмы транспорта
питательных веществ в бактериальную клетку.
5. Чистые и смешанные культуры. Методы выделения чистых культур.
Самостоятельная работа студентов:
1. Изучение набора питательных сред.
2. Освоение техники посева бактерий на жидкие и плотные питательные
среды.
3. Изучение методов выделения чистой культуры аэробных бактерий.
4. Освоение метода выделения чистой культуры. Посев смешанной
культуры по Дригальскому (первый этап).
Занятие № 9 Рост и размножение бактерий. Репликация. Особенности
культивирования внутриклеточных паразитов
Контрольные вопросы:
1. Рост и размножение бактерий.
2. Культуральные свойства бактерий. Характер роста на плотных и
жидких питательных средах.
3. Репликация бактериальной хромосомы.
4. Биосинтез.
5. Периодические, непрерывные, синхронные культуры. Рост бактерий в
периодической культуре, фазы роста. Хемостаты, турбидостаты.
6. Особенности размножения хламидий, риккетсий, микоплазм.
Самостоятельная работа студентов:
1. Изучение культуральных свойств стафилококка на МПБ и МПА.
2. Макро- и микроскопическое изучение изолированной колонии.
3. Выделение чистой культуры (второй этап). Пересев изолированной
колонии на скошенный агар.
4. Ознакомление
с
методами
культивирования
бактерийвнутриклеточных паразитов.
5. Подготовка к первому этапу выделения чистой культуры Cl.
pasteurianum с поверхности клубней картофеля.
5
Занятие № 10 Анаэробы. Брожение, его виды. Методы культивирования
анаэробов
Контрольные вопросы:
1. Понятие об энергетическом метаболизме.
2. Пути
энергетического
метаболизма
углеводов:
фркутозодифосфатныый путь (Эмбдена-Мейергофа), пентозофосфатный
(Варбурга-Диккенса-Хореккера)
и
кето-3-дезокси-6фосфоглюконатный путь (Энтнера-Дудорова).
3. Типы дыхания. Анаэробы.
4. Брожение его виды. Гомо- и гетероферментное брожение.
Использование анаэробных бактерий в промышленности.
5. Методы и среды для культивирования анаэробов.
Самостоятельная работа студентов:
1. Изучение состава питательных сред для культивирования анаэробов.
2. Изучение методов и аппаратуры для культивирования анаэробов.
3. Составление схемы выделения чистой культуры анаэробов.
4. Выделение чистой культуры аэробов (третий этап).
5. Первый этап выделения чистой культуры анаэробов (приготовление
мазка и окраска его по Граму из бродильной жидкости и пересев на
среду Китта-Тароцци).
6. Определение маслянокислого типа брожения (выявление масляной
кислоты с помощью качественной реакции).
Занятие № 11 Ферменты микроорганизмов
Контрольные вопросы:
1. Ферменты микроорганизмов, их характеристика.
2. Классификация бактериальных ферментов по механизму действия,
характеру субстрата, синтеза и связи с бактериальной клеткой.
Международная классификация ферментов.
3. Индуцибельные и конститутивные ферменты. Работа лактозного
оперона.
4. Продукты ферментативных реакций микроорганизмов. Роль ферментов
в идентификации бактерий.
5. Дифференциально-диагностические среды, тест системы для
определения ферментативной активности бактерий.
Самостоятельная работа студентов:
1. Изучение набора дифференциально-диагностических сред. Изучение
состава и принципа работы ДДС.
2. Изучение методов определения сахаролитической активности бактерий
на средах Гисса, Ресселя, Клиглера и др.
3. Определение протеолитической активности бактерий.
4. Ознакомление с современными методами определения
ферментативной активности бактерий (демонстрация микротест
систем, наборов Ла-Хема).
5. Выделение чистой культуры анаэробов (продолжение).
6
Занятие № 12 Итоговое по разделу «Физиология и биохимия
микроорганизмов»
Раздел 3 «Экология микроорганизмов»
Занятие № 13 Влияние физических и химических факторов на
микроорганизмы. Химиотерапия. Химиотерапевтические вещества.
Химиотерапевтический индекс
Контрольные вопросы:
1. Физические факторы (температура, давление, влажность, ультразвук,
различные виды излучений) и их влияние на микроорганизмы.
2. Действие химических факторов на микроорганизмы.
3. Асептика. Стерилизация, виды и методы стерилизации.
4. Антисептика. Дезинфекция, виды дезинфекции.
5. Химиотерапия. Понятие, принципы. Химиотерапевтический индекс.
6. Химиотерапевтические вещества, механизм действия.
Самостоятельная работа студентов:
1. Изучение влияния физических факторов (температуры и УФО) на
спорообразующие и неспорообразующие культуры микроорганизмов.
2. Изучение методов стерилизации.
3. Изучение принципа работы автоклава.
4. Изучение влияния химических веществ (3% раствор хлорной извести,
5% раствор карболовой кислоты, генцианвиолета) на спорообразующие
и неспорообразующие культуры микроорганизмов.
5. Освоение методики определения чувствительности к антибиотикам
диско-диффузионным методом.
Занятие № 14 Влияние биологических факторов на микроорганизмы.
Антибиотики
Контрольные вопросы:
1. Типы взаимоотношений микроорганизмов. Микробный антагонизм.
2. Колицины. Понятие, биологическое значение.
3. Антибиотики. История открытия и получения антибиотиков.
4. Классификация антибиотиков. Мишени для действия антибиотиков.
5. Методы
определения
чувствительности
к
антибиотикам.
Антибиотикограмма.
6. Пути формирования и преодоления антибиотикорезистентности.
Принципы рациональной антибиотикотерапии.
Самостоятельная работа студентов:
1. Учет чувствительности микроорганизмов к антибиотикам дискодиффузионным методом.
2. Учет чувствительности микроорганизмов к антибиотикам методом
серийных разведений.
3. Определение бактерицидной и бактериостатической дозы антибиотика.
4. Определение бета-лактамазной активности.
7
Занятие № 15 Экологическая микробиология
Контрольные вопросы:
1. Роль микроорганизмов в круговороте веществ в природе.
2. Экологическая
микробиология.
Основные
понятия.
Виды
экологических связей в микробиоценозах.
3. Санитарная микробиология. Предмет, задачи. Понятие о санитарнопоказательных микроорганизмах.
4. Микрофлора почвы. Полный и краткий санитарно-бактериологический
анализ почвы.
5. Микрофлора
воды.
Методы
санитарно-бактериологического
исследования воды. Требования, предъявляемые к питьевой воде по
ГОСТ. Понятия «коли-титр, коли-индекс».
6. Микрофлора
воздуха.
Методы санитарно-бактериологического
исследования воздуха.
Самостоятельная работа студентов:
1. Определение общей микробной обсемененности, коли-титра,
перфрингенс титра почвы.
2. Определение общей микробной обсемененности, коли-титра, колииндекса водопроводной воды.
3. Определение общей микробной обсемененности, коли-титра, колииндекса воды реки Ушайки.
4. Определение микробной обсемененности воздуха седиментационным и
аспирационным методами.
5. Посев микрофлоры пальцев рук на МПА и микрофлоры зева на
кровяной агар для занятия № 16.
Занятие № 16 Нормальная микрофлора тела человека
Контрольные вопросы:
1. Основные биотопы тела человека и их микробиоценозы.
2. Биопленки.
3. Значение микрофлоры для организма. Микробиом. Гнотобиология.
4. Формирование микрофлоры новорожденного.
5. Микрофлора желудочно-кишечного тракта. Эубиоз. Дисбактериозы,
классификация, причины возникновения. Методы коррекции.
6. Методы исследования микрофлоры кишечника.
Самостоятельная работа студентов:
1. Изучение микрофлоры полости рта. Приготовление мазков из зубного
налета, окраска негативным методом.
2. Изучение микрофлоры кожи пальцев рук. Приготовление мазков из
колоний, выросших при посеве на МПА, и окраска по Граму.
3. Изучение микрофлоры зева. Приготовление мазков из колоний,
выросших при посеве на кровяной агар, и окраска по Граму.
4. Изучение набора препаратов для коррекции дисбактериоза кишечника.
Занятие № 17 Итоговое по разделу «Экология микроорганизмов»
8
Занятие № 18 Зачетное занятие по разделам «Морфология
микроорганизмов»,
«Физиология
микроорганизмов»,
«Экология
микроорганизмов»
Всего 18 занятий по 3 часа
Основная литература
1. Коротяев
А.И. Медицинская микробиология, иммунология и
вирусология: учебник для студентов медицинских вузов / А.И.
Коротяев, С.А. Бабичев. -4-е изд., испр. и доп. – СПб.:СпецЛит, 2008. 767 с.
2. Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии /
Под ред. проф. Е.П. Красноженова.-Томск: Изд-во Том. ун-та, 2003.-260с.
3. Медицинская
микробиология:
учебное
пособие.
Сибирский
медицинский университет (Томск); ред.: Е.П. Красноженов, М.Р.
Карпова, Ю.Н. Одинцов. – Томск: Печатная мануфактура, 2012. – 252 с.
1.
2.
3.
4.
Дополнительная литература
Борисов Л.Б. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология:
учебник для студентов высших заведений, обучающихся по
медицинским специальностям / Л.Б. Борисов. – 4-е изд., доп. и перераб.
– М.: МИА, 2005. – 736 с.
Противомикробные средства (принципы антимикробной терапии,
сульфаниламидные препараты, антисептические и дезинфицирующие
средства): учебное пособие для студентов медицинских вузов / Л.В.
Ловцова [и др.]; ред В.Б. Кузин; Нижегородская медицинская академия
(Нижний Новгород). – Нижний Новгород: НижГМА, 2008. – 108 с.
Иммунобиологические препараты для профилактики, лечения и
диагностики инфекционных заболеваний: учебное пособие. Сибирский
медицинский университет (Томск); ред.: Е.П. Красноженов, Т.Л.
Мирютова. – Томск: Печатная мануфактура, 2007. – 292 с.: Режим
доступа: http://www.elib.ssmu.ru
Аллергология: научное издание / Российская Ассоциация аллергологов
и клинических иммунологов (М); ред.: Р.М. Хаитов, Н.И. Ильина. -2-е
изд., испр. и доп. – М.: ГЭОТАР – Медиа, 2009. – 256 с.
Зав. кафедрой микробиологии СибГМУ,
профессор
Красноженов Е.П.