На правах рукописи КОСТЮКОВ Игорь Олегович ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ СЕМЕННОЙ ПРОДУКТИВНОСТИ И

На правах рукописи
КОСТЮКОВ Игорь Олегович
ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ СЕМЕННОЙ ПРОДУКТИВНОСТИ И
КАЧЕСТВА СЕМЯН КАЛЕНДУЛЫ ЛЕКАРСТВЕННОЙ И САЛАТА
ЛИСТОВОГО
03.00.16 – Экология
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени
кандидата биологических наук
Новосибирск – 2009
Работа выполнена в ФГОУ ВПО Новосибирский государственный аграрный
университет
Научный руководитель:
доктор биологических наук, профессор,
заслуженный деятель науки РФ
Наплекова Надежда Николаевна
Официальные оппоненты:
доктор биологических наук, профессор,
заслуженный деятель науки РФ
Цильке Регинальд Александрович
доктор сельскохозяйственных наук
Пасько Ольга Анатольевна
Ведущая организация: ГНУ Сибирский научно-исследовательский институт растениеводства и селекции СО Россельхозакадемии
Защита состоится «____»_______________ 2009 г. в___ часов на заседании
диссертационного совета Д 220.48.03 при ФГОУ ВПО Новосибирский государственный аграрный университет (630039, г. Новосибирск, ул. Добролюбова, 160)
тел.: 8(383) 267-05-10; факс 8(383) 264-29-34
e-mail: norge@ngs.ru
С диссертацией можно ознакомится в библиотеке ФГОУ ВПО Новосибирский государственный аграрный университет и на сайте www.nsau.edu.ru
Автореферат разослан «_____»_______________ 2009 г.
Ученый секретарь
диссертационного совета
Маренков В.Г.
2
1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность работы. Высокая продуктивность используемых в народном
хозяйстве России разнообразных полезных растений, в том числе сельскохозяйственных и лекарственных, является необходимым условием для эффективного ведения культуры этих растений.
Выявление потенциальных возможностей получения массы используемых
человеком органов, определение факторов, влияющих на формирование этих органов и оптимизация условий выращивания растений постоянно и в разных аспектах
составляют содержание научных исследований, направленных на повышение продуктивности растений. Наиболее существенным при этом является изучение влияния экологических факторов на реализацию потенциальных (генотипических) возможностей получения урожая растений и определение приемов выращивания,
обеспечивающих максимальное удовлетворение потребностей растения и, как
следствие, формирование высокой продуктивности. Факторы, влияющие на ход
жизненного цикла растения, могут быть самыми разнообразными, начиная от природных (почвенно-климатических), обусловленных районом выращивания (географическим пунктом) и кончая приемами непосредственного воздействия на растение
через приемы регулирования роста и развития растений, изменяющие направленность и соотношение вегетативного роста и репродуктивных процессов.
В условиях роста антропогенного воздействия на агроценозы и ухудшения
фитосанитарного состояния сельскохозяйственных угодий в связи с нарушением
севооборотов все чаще наземная часть растений и семена загрязняются фитопатогенами, это непременно отражается на качестве семян.
Цель исследований – найти пути улучшения семеноводства полезных растений и выявить главные экологические факторы, определяющие их семенную
продуктивность в сибирском регионе. Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:
1. Изучить особенности цветения и формирования семян представителей
двух родов из семейства Asteraceae Dumort (Compositae Giseke) календулы и салата
под влиянием экологических факторов (абиотических и биотических) и различного
местоположения семян на растениях.
2. Определить влияние комплекса метеорологических условий вегетационного периода ряда лет на созревание и качество семян изучаемых растений.
3. Выявить влияние экологических факторов на элементы семенной продуктивности изучаемых растений, используя статистический анализ.
4. Изучить микрофлору филлосферы семян календулы разного морфологического строения, и ее влияние на качество семян в зависимости от способов хранения. Выявить влияние календулы на фитотоксичность почв.
Защищаемые положения: 1. Экологическая обусловленность неоднородности семян календулы и салата на разных уровнях; 2. Различия семян по посевным и
продуктивным качествам, сформировавшихся в разных экологических условиях; 3.
Микрофлора надземных органов и семян календулы и ее взаимосвязь с качеством
семян и фитотоксичностью почвы.
3
Научная новизна. Впервые изучено влияние экологических факторов на
формирование семян календулы и салата в Новосибирске в связи с местоположением на растении (почвенно-воздушное питание), с комплексом метеорологических
параметров периода вегетации и отдельных этапов морфогенеза и влияние природных (почвенно-климатических) условий мест выращивания растений в регионе
Сибири.
Применен специально разработанный метод подготовки базы данных многолетних метеорологических наблюдений для корреляционного анализа при изучении изменчивости семян, выращенных в разных экологических условиях;
Определено влияние патогенной и сапрофитной микрофлоры на качество семян календулы от холодного и теплого режимов хранения, выращенных в разных
экологических условиях Сибирского региона.
Практическая ценность работы. Семена календулы и салат, сформировавшиеся на побегах I-II порядков, по посевным качествам (массе 1000 семян и всхожести) превосходят семена с побегов III- V порядков. На побегах всех порядков показатели качества семян убывают от верхнего яруса к нижнему. Зрелые и осыпавшиеся семена выше по посевным и продуктивным качествам, чем обмолоченные.
Обоснование неоднородности семян в структуре семенного растения, позволяет
получить лучшие семена для селекционно-семеноводческих целей.
Метод подготовки базы данных многолетних метеорологических условий
для корреляционного анализа позволяет выявить в комплексе метеоусловий, лидирующие факторы, влияющие на процессы роста и развития растений, в частности,
для установления связи отдельных параметров с ветвлением семенников, семенной продуктивностью и качеством семян.
Апробация результатов. Основные положения диссертационной работы докладывались и обсуждались: на совещании Новосибирского аграрного Государственного университета 2005; на Международных научно-практических конференциях 1. «Пища Экология. Качество» (Новосибирск 2003 г.); 2. «Нетрадиционные и
редкие растения, природные соединения и перспективы их использования» (Белгород, 2006 г.);
Публикации. По результатам исследований опубликовано 8 работ, в том
числе по теме диссертации 7, из них 1 в рецензируемом журнале.
Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, 6 глав,
выводов, списка литературы и приложений. Основной текст изложен на 186 с., содержит 44 таблицы и 28 рисунков. Список литературы включает 178 наименование,
в том числе 73 на иностранном языке.
Диссертация выполнена в Новосибирском государственном аграрном университете с использованием первичных полевых материалов, полученных в Центральном сибирском ботаническом саду Сибирского отделения Российской
академии наук при выполнении коллективной сквозной темы по шести ботаническим садам региона Сибири в 1980-1984 гг., организатором и руководителем
которой была доктор сельскохозяйственных наук, профессор Л.Л. Еременко.
За предоставленные материалы по посевной продуктивности календулы и
салата, а также за постоянные консультации при выполнении диссертации автор выражает ей глубокую благодарность.
4
2. УСЛОВИЯ И МЕТОДЫ ПРОВЕДЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЙ
В работе использован большой массив данных, полученных в 1980-1984 гг.
из шести географических пунктов (интродукционных центров) Сибири – Новосибирска, Омска, Томска, Барнаула, Иркутска и Якутска. Сбор данных проводился по
специально разработанной программе и единой методике сотрудниками ботанических садов региона Сибири и студентами вузов как коллективная работа. В центральной части региона – почвенно-климатических условиях Новосибирска - в
Центральном сибирском ботаническом саду Сибирского отделения Российской
академии наук (ЦСБС СО РАН) выращивались семена модельных видов из разных
групп полезных растений, из которых нами изучались календула лекарственная Calendala officinalis L. и салат листовой - Lactuca sativa L.
ЦСБС расположен в правобережье Обского моря в лесостепи Приобской
ландшафтно-климатической зоны. Географические пункты находятся в обширном
климатическом районе от 73 до 130 0 в.д. и от 52 до 62 0 с.ш. – на расстоянии более
1000 км с юга на север и более 3000 км с запада на восток. Эти пункты являются
первым экологическим фактором в полевом многофакторном опыте; второй фактор
погодные условия различных вегетационных периодов и третий – влияние архитектоники семенных растений на качество семян (местоположение семян на побегах
различных порядков) и степень созревания семян (Еременко, 1983, 1989).
Для настоящей диссертации использованы в основном экспериментальные
данные, полученные в Новосибирске и, частично, в других географических пунктах.
Метеорологические условия. Город Новосибирск относится ко II агроклиматическому району, характеризующемуся как умеренно теплый и недостаточно увлажненный с гидротермическим коэффициентом 1,2-1,0 (Агроклиматические ресурсы
…, 1971). Климатические ресурсы его вполне достаточны для семеноводства холодостойких цветочных растений. Наиболее близкими по метеорологическим условиям вегетационных периодов – умеренно-прохладных и увлажненных - были 1980 –
1982 гг. 1983 и 1984 гг. характеризуются как прохладные, но вегетационные периоды 1983 г. и 1984 г. умеренно увлажненные.
Почвенный покров участков ЦСБС, на которых проводились опыты, представлен дерново-среднеподзолистыми почвами, легкими по механическому составу. Почвы мало и среднегумусные. Содержание гумуса в слое 0-20 см колеблется от
2% до 4%, а на глубине 50-60 см не превышает 0,8%. При общих небольших запасах питательных веществ почвы характеризуются значительной подвижностью азота, фосфора, калия. Реакция почвенной среды кислая или слабокислая (рh=5,5-6,9).
Методы исследований. Изучалось цветение (сроки и продолжительность),
образование и формирование плодов и семян, а также цветение и плодоношение на
побегах разных порядков ветвления. Основу для наблюдений над цветением и плодоношением составляли контрольные растения (10-20), выделяемые из популяции
и являющиеся по величине и габитусу типичными для нее.
Наблюдения проводились на учетных побегах II порядка, расположенных в
верхнем, среднем и нижнем ярусах главного стебля. Счет побегов II порядка и их
разветвлений до III-V порядков велся сверху от основания соцветия вниз.
5
После сушки семенников в хорошо проветриваемых помещениях, с них убирались семена путем срезания побегов с соцветиями. При этом со всех 20 контрольных растений собираются семена по всем порядкам побегов и ярусам. При
этом побеги III-IV порядков нумеруются по их местоположению на побегах второго порядка, то есть двойной нумерацией, например (II1III1, II1III2, II1III3, II2III1). Таким образом, складываются партии семян с разным местоположением и сроком
формирования на растении, то-есть группы с разными экологическими характеристиками.
Поскольку созревание семян происходит неравномерно, производится сбор
полностью созревших семян (с учетом местоположения), выборочно (выборочный
сбор). Кроме того, собираются отдельно семена, осыпавшиеся при уборке – они
составляют общую партию (осыпь 1).Высушенные семенники перед обмолотом
сильно встряхиваются, при этом собираются семена, дозревшие на растениях,
убранных с поля (осыпь 2). Все что при этом не осыпалось, обмолачивается в массовую партию (обмолот). После обмолота и очистки семян, они подвергаются анализам для определения посевных качеств: масса 1000 семян, энергия прорастания и
всхожесть. При необходимости эти партии семян высеваются на будущий год для
определения продуктивных свойств семян. Анализы проводятся по ГОСТу 12-03-66
для семян сельскохозяйственных культур и «Международным правилам определения качества семян …, 1969».
Для изучения влияния погодных условий чаще всего пользуются среднесуточной температурой и суммой осадков. Пользуются также суммами температур (активных и эффективных) выше пределов 0°, 5°,10° и 15°С. Но эти показатели пригодны лишь для общих суждений и сравнений, так как они не могут дать отражения
конкретной метеорологической ситуации, проявляющейся в специфике роста и
развития растений. Выбор оптимальных для данной задачи показателей погодных
условий связан с перебором разных вариантов и их сопоставлении с данными о
развитии растения, что требует трудоемких выборок из первичных таблиц метеоданных. Поэтому были использованы подходы, основанные на компьютерном анализе метеорологических параметров (Еременко Л.Л. Еременко С.И., 1995, 1999).
Для применения указанного метода была создана база данных по метеоусловиям в шести точках региона Сибири (Новосибирск, Барнаул, Омск, Томск, Иркутск, Якутск) за 1980 - 1984 годы. В базу введены восемь показателей, из которых
нами исследованы среднесуточная температура воздуха, сумма осадков - за сутки,
среднесуточная относительная влажность воздуха.
Анализ эпифитной микрофлоры календулы лекарственной проводили общепринятыми в микробиологии методами (Методы почвенной микробиологии…,
1980). Содержание жизнеспособных микроорганизмов устанавливали по числу колониеобразующих единиц (КОЕ) (Мишустин, 1975). Изучали следующие группы
микроорганизмов: аммонифицирующие (на мясо-пептонном агаре); использующие
минеральный азот (на крахмально-аммиачном агаре); нитрификаторы автотрофные
(на средах Виноградскго для первой и второй фазы процесса); олигонитрофилы (на
среде Эшби); денитрифицирующие – (на среде Гильтая); целлюлозоразрушающие
(на среде Гетчинсона); микроскопические грибы (на среде Чапека); дрожжи (на
среде Ганзена); молочно-кислые бактерии (капустной среде). Видовой состав бак6
терий и грибов определяли по руководствам (Красильников, 1949; Литвинов, 1967;
Gilman, 1959;).
Опыты проведены в период активного цветения растений в 2005 – 2006 гг.
Определяли также микрофлору семян после холодного (+ 4 °С) и теплого (20-22 ºС)
способов хранения, фитотоксичность почвы под календулой, устанавливали методом почвенных пластинок по подавлению прорастания семян и роста проростков
растений биотеста редиса «жара». (Методы изучения… 1966). Определение показателей свойств почв в лабораторных условиях проводили общепринятыми агрохимическими методами (Аринушкина,1970).
Потенциальную фитотоксическую активность копиотрофной микрофлоры
оценивали методом микробного токсикоза почв (Методы почвенной микробиологии…,1991). Материалы исследований статистически обработаны. Для оценки фитотоксичности почв применяли ранговый метод (Ананьева, 1996).
3. ИЗМЕНЧИВОСТЬ РЕПРОДУКТИВНЫХ ПРОЦЕССОВ
КАЛЕНДУЛЫ ЛЕКАРСТВЕННОЙ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ
ЭКОЛОГИЧЕСКИХ УСЛОВИЙ
Календула лекарственная − однолетнее растение, образующее в условиях
Новосибирска разветвленный куст, состоящий из главного стебля – побега I порядка – и боковых побегов II-V порядков. При – типичном ходе морфогенеза образуется 10-15 побегов II порядка, которые вместе с побегом I порядка составляют основное ветвление. Развитие побегов II порядка на разном уровне главного стебля
различается, в результате чего обозначаются три яруса по 3-5 побегов в каждом. В
среднем на растении образуются побеги I порядка – 1, II порядка – 11, III−36, IV−
56 и V−34 то-есть растение состоит из 137 побегов. Средняя длина побегов I и II
порядков 28-29 см, III – 22 см, а IV и V – 19-15 см, в связи, с чем суммарная длина
побегов возрастает от I порядка к IV и затем убывает к V (рис 1).
Рис. 1. Схема ветвления главного стебля и боковых побегов разных ярусов
календулы лекарственной
7
Цветение и плодоношение на побегах разных порядков и ярусов. Цветение
календулы обычно начинается в первых числах июля и продолжается до конца вегетационного периода. Оно начинается с побега I порядка – главного соцветия и
постепенно продвигается на побеги II порядка после конца цветения на главном
соцветии со сдвигом 10 дней; на побегах III порядка соответственный сдвиг составляет также 10 дней по отношению ко II порядку; на побегах IV порядка –17 дней, а
на V – 19 дней. Этот сдвиг сохраняется в основном и в последующие фазы полного
и конца цветения, а также завязывания и созревания семян.
Продолжительность цветения на побегах разных порядков колеблется от 5 до
13 дней (с увеличением на побегах IV и V порядков); формирование и созревание
семян продолжается от 9 до 16 дней, сокращаясь на побегах высших порядков. Расположение побегов разных порядков по ярусам главного стебля не отражается значительно на продолжительности созревания семян на их соцветиях. Общая продолжительность периода репродуктивной вегетации у календулы – от начала цветения до полного созревания семян на побегах всех порядков составляет в среднем
33 дня.
В среднем за 5 лет наблюдений (1980-1984) цветение и плодоношение календулы изменялось в зависимости от погодных условий: колебания общей продолжительности репродуктивных процессов составили от 21 до 34 дней. В зависимости
от суммы температур выше 10 С и гидротермического коэффициента, с увеличением тепла и снижением влажности воздуха процессы цветения и формирования
семян ускоряются. При этом основные зависимости продолжительности репродуктивных процессов от местоположения соцветий на побегах разных порядков и
ярусов сохраняются.
Семенная продуктивность. У календулы лекарственной формируется на растении около 40 г плодов-семянок, называемых обычно семенами. Они завязываются и созревают постепенно в течение всей вегетации в соответствии со ступенчатыми сроками и различной продолжительностью цветения на побегах разных порядков и ярусов. В среднем на растении на концах плодоносящих побегов формируются около 100 соцветий–соплодий, при этом наибольшее участие в урожае семян
принимают побеги III и IV порядков. Количество сформировавшихся семян увеличивается от верхнего яруса к нижнему. Наибольшее количество вызревших семян
образуется на побегах II и III порядков, а также в нижнем ярусе растений (рис. 2).
При различных погодных условиях семенная продуктивность растения колебалась сравнительно в небольших пределах – от 31 до 41 г. В среднем в условиях
Новосибирска созревает около 60 % семян на растении, что позволяет считать семеноводство календулы вполне возможным, а при сочетании со сбором лекарственного сырья рентабельным.
Качество семян в зависимости от экологических условий. Формирующиеся
на растении календулы, семена неоднородны и сильно зависят от условий развития
на ранних этапах, в связи, с чем образуются разные морфологические типы семян.
Под влиянием внешних условий при дальнейшим формировании семян образуются
разные экологические группы в зависимости: от местоположения семян на растении – на побегах разных порядков и ярусов; от степени созревания семян к моменту
8
уборки, обусловленной погодными условиями вегетационного периода; в целом от
природных условий места выращивания семян.
Примечание: В – верхний, С – средний, Н – нижний
Рис. 2. Структура урожая календулы лекарственной с учетом местоположения на
растении Ярусы по главному стеблю
Качество семян в зависимости от экологических условий. Формирующиеся
на растении календулы семена неоднородны и сильно зависят от условий развития
на ранних этапах, в связи с чем образуются разные морфологические типы семян.
Под влиянием внешних условий при дальнейшим формировании семян образуются
разные экологические группы в зависимости: от местоположения семян на растении – на побегах разных порядков и ярусов; от степени созревания семян к моменту
уборки, обусловленной погодными условиями вегетационного периода; в целом от
природных условий места выращивания семян.
Морфологические типы семян. В семенной продукции календулы лекарственной имеются семена трех морфологических типов, которые различаются не
только по форме, но и по крупности (масса 1000 шт.) и всхожести (рис 3). При посеве семян разных типов на растениях-потомках снова формируются семена всех
трех типов, свойственных виду. В урожае когтевидные семена составляют 20%, ладьевидные 45% и кольцевидные 35%, а масса 1000 шт. соответственно 24,8 г, 21,5 и
14,6 г.
Зародыши всех трех типов семян существенно не различаются, всхожесть
семян всех трех типов колеблется в пределах 80-90% (87). В среднем для всех порядков побегов масса 1000 штук в урожае потомков из ладьевидных семян на 14%
выше, чем из когтевидных семян и на 52%, чем из кольцевидных, а всхожесть соответственно выше на 15 и 5%.
9
Различия по качеству семян на растениях, выращенных из семян всех типов,
достоверны во всех случаях при 5%-ном и 1%-ном уровнях значимости. Для растений - потомков всех трех типов семян, характерно, что крупность и всхожесть снижаются от низших порядков ветвления к высшим.
Примечание: морфологические типы семян и их зародыши*, I - когтевидные, II - ладьевидные,
кольцевидные.
III -
Рис. 3. Морфологические типы семян календулы
Местоположение семян на растении. Семена урожая календулы лекарственной неоднородны по размерам и способности к прорастанию. Главную роль
в урожае играют побеги III и IV порядков (34 и 36% соответственно), главный стебель и побеги II порядка составляют 13,4%, а V порядка – 12,5%. Распределение
массы семян по ярусам растения следующее: 14% на верхнем ярусе и по 43% на
среднем и нижнем. Качество семян на побегах разных порядков и из различных
ярусов по главному стеблю семенного растения также существенно различается.
Масса 1000 шт. на побегах I и II порядков более чем на 100% превышает массу
1000 шт. на побегах V порядка, а всхожесть была соответственно выше примерно
на 35%. Качество семян на побегах верхнего яруса выше, чем на побегах среднего и
нижнего ярусов. Уровень достоверности различий по качеству семян, сформировавшихся на побегах разных порядков сильнее выражен для массы 1000 шт. Лучшие по качеству семена с побегов I и II порядков недостоверно отличаются от семян с побегов III порядка и только для побегов высших порядков (V) достоверность
различий возрастает. Различия в семенах с побегов III и IV порядков также мало
достоверны.
Оценка семян по посевным качествам (массе 1000 штук, энергии прорастания, всхожести) недостаточна. Большую роль играют продуктивные свойства семян, то есть урожай и качество семян выращенного из них потомства.
Зависимость от погодных условий (степень зрелости семян). В урожае семян
формируются три группы: зрелые; дозревшие; массовая партия – обмолот. Соотношение этих групп семян в урожае зависит от погодных условий в период формирования, в годы с теплой осенью преобладают зрелые семена, а в холодную и
дождливую осень большую часть составляет обмолот.
10
Лучшими посевными качествами отличаются зрелые семена. Дозревшие семена
несколько уступают зрелым по крупности и по всхожести. Обмолоченные семена
(массовая партия) достоверно ниже по качеству, как по крупности, так и по всхожести по сравнению со зрелыми и дозревшими семенами. В отдельных случаях различия по крупности семян между зрелыми и обмолоченными несущественны, что
объясняется погодными условиями в ранний период формирования семян (первая
половина августа); то же наблюдается и по всхожести. Ранние сроки уборки семенников календулы в начале сентября снижают их посевные качества, так как до половины сентября идет активный процесс дозревания семян.
Анализ неоднородности семян, различно расположенных на растениях – на разных порядках побегов и в разных ярусах по высоте главного стебля, показал, что
зависимости между группами семян по зрелости, выявленные за четыре года для
всего растения, закономерно повторяются для всех его частей.
Степень зрелости высеваемых семян отражается на семенной продуктивности
растений - потомков. Последействие посева семян разных групп зрелости выявило
преимущество зрелых семян в потомстве, как по крупности, так и по всхожести у
семенников - потомков.
Влияние почвенно-климатических условий на качество семян. В общем виде
влияние экологических факторов на качество семян изучалось на партиях, выращенных в 1982-1984 гг. в шести географических пунктах. При этом сформировались различные экологические группы семян, полученных в разных природных
условиях, в разные годы из трех разных репродукций. Различия между экологическими группами по всхожести и крупности семян по всему массиву данных (84 варианта) очень разнообразны и составляют по массе 1000 штук от 5 до 22 г, а по
всхожести от 3 до 99 %. При этом в большинстве случаев крупность семян в разных
природных условиях является более стабильным показателем, чем всхожесть. В
58% случаев различия между качеством семян достоверны. Из этого следует, что в
разных природных условиях региона Сибири при посеве семенами разных репродукций получаются близкие по посевным качествам семена, что говорит о широких
возможностях местного семеноводства календулы в Сибири.
4. ВЛИЯНИЕ ЭКОЛОГИЧЕСКИХ УСЛОВИЙ НА ЦВЕТЕНИЕ,
ПЛОДОНОШЕНИЕ И КАЧЕСТВО СЕМЯН САЛАТА ЛИСТОВОГО
Салат листовой (скороспелый сорт Московский парниковый) – однолетнее разветвленное растение. При посеве семенами в грунт в условиях Новосибирска ветвление идет до V. Основное ветвление растения – побег I порядка (главный стебель)
и около 30 побегов II порядка. По характеру развития побеги II порядка делятся на
три яруса по главному стеблю (счет побегов сверху вниз): верхний ярус с 1-го по
10-й, сверху от главного соцветия; средний ярус – с 11-го по 20-й; нижний ярус – с
21-го по 30-й побег. К этим же ярусам относятся побеги III, IV и V порядков, расположенные на соответствующих побегах II порядка. Среднее число побегов у салата составляет: I порядка – 1, II – 29, III – 255, IV – 381, V – 223; средняя длина побегов соответственно 64, 26, 7, 3 и 2 см. Суммарная длина побегов повышается от I
11
к III порядку и убывает к V, что определяет значение побегов разных порядков в
семенной продуктивности растения (рис. 4)
Цветение салата начинается с главного соцветия и распространяется дальше на
побеги II и последующих порядков. По средним данным за 5 лет (1980-1984 гг.)
цветение салата начинается в середине июля и продолжается до 20-х чисел августа
(V порядок побега).
Рис 4. Схема ветвления главного стебля и боковых побегов разных порядков салата
листового
Цветение на каждом последующим порядке побегов начинается со сдвигом
8-12 дней по сравнению с предыдущим порядком. Продолжительность цветения
отдельного соцветия убывает от I порядка к V, в целом различия на побегах разных
порядков незначительны и составляют в среднем 4-5 дней. Формирование семян (от
конца цветения до начала созревания) продолжается на побегах разных порядков в
среднем 8 дней и не имеет явно выраженной зависимости от порядков побегов. Созревание семян продолжается в среднем 6-7 дней и отчетливо сокращается от I порядка к V-VI. Общий репродуктивный цикл от начала цветения до полного созревания колеблется от 10 до 31 дня (в среднем 20 дней). В погодных условиях Новосибирска на растении салата формируется около 7 граммов семян, из которых около 40 %, созревает на растении. В зависимости от погодных условий колебания се12
масса семян с 1 растения, г
менной продуктивности составляют от 3 до 11 г, повышается в теплые и умеренно
увлажненные годы и понижается в прохладную и влажную погоду.
Наименьшее количество семян формируется на побегах II порядка, а на
главном соцветии, как правило, семена остаются недоразвитыми. Преобладающие
количество семян располагаются в нижнем ярусе растения, и уменьшается с низу в
верх. Основной урожай семян салата формируется на побегах IV порядка, количество которых зависит от степени ветвления – суммарной длины побегов III порядка
(рис. 5).
12
10
8
6
4
2
0
II
III
IV
V
Сумма
порядки побегов
1980
1981
1982
1983
1984
Рис. 5. Изменчивость урожая семян салата на побегах разных порядков по годам
5. ЭПИФИТНАЯ МИКРОФЛОРА И ФИТОТОКСИЧНОСТЬ ПОЧВ ПОД
КАЛЕНДУЛОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ
Микробный ценоз семян календулы лекарственной чрезвычайно богат, причем численность микроорганизмов выше на семенах ладьевидной формы, чем на
когтевидных и кольцевидных. Эта тенденция сохраняется независимо от экологогеографических условий формирования семян. Эпифитная микрофлора семян одинаковой морфологии наименее богата при формировании в менее благоприятных
условиях.
Состав аммонифицирующих микроорганизмов на семенах календулы одинаков и представлен двумя доминирующими видами из рода Pseudomonas: флюоресцирующим и желтопигментным. Они относятся к эпифитным сапрофитам, но в некоторых случаях эволюционируют в сторону паразитизма. Микроорганизмов,
усваивающих минеральные формы азота, на поверхности ладьевидных семян календулы больше, чем на когтевидных или кольцевидных семенах. Доминирует при
этом один вид бактерий с желто-зеленым пигментом. Среди эпифитных микроорганизмов семян календулы встречаются и азотфиксирующие. Представлены они
преимущественно олигонитрофилами, которые наиболее многочисленны при
формировании семян в условиях г. Омска.
Эколого-географические условия формирования семян календулы лекарственной сказываются на численности и составе микрофлоры. Ухудшение условий
13
формирования приводит к увеличению численности фитопатогенной микрофлоры,
что может снизить качество семян. Численность микроорганизмов на надземных
органах календулы была более высокой на растениях в условиях интродукции в г.
Якутске. Наиболее богатый микробоценоз наблюдается на цветках.
Бактерицидность семян не проявляется у календулы, независимо от места ее
интродукции, ни к сапрофитными бактериям, ни к фитопатогенным грибам. Слабое
стимулирующее действие оказывают только выделения листьев календулы, интродуцированной в Барнауле и Новосибирске, на изученные бациллы. Цветки и семена
календулы не обладают ни стимулирующим, ни антагонистическим влиянием на
сапрофитные и фитопатогенные микроорганизмы (табл. 1). При холодных условиях хранения семян календулы (в холодильнике при +4 С) количество эпифитных
микроорганизмов на них уменьшается в 4-10 раз по сравнению с теплым хранением
(20-22С), однако соотношение находящихся на них видов бактерий сохраняется.
Численность микроорганизмов в разных местах интродукции составляла (КОЕ на 1
г сырой массы) при холодном хранении в Новосибирске – 62, а Омске – 36, в Томске – 80, в Барнауле – 38, в Иркутске – 48, в Якутске – 72, а при теплом хранении
соответственно 247 – 285 – 327 – 514 – 326 – 558 тысяч. Фитотоксичность почвы
под календулой лекарственной связана с питанием растений и микроорганизмов.
Таблица 1. Действие фитонцидов надземных органов календулы лекарственной на микроорганизмы
Место интродукции,
часть растения
Барнаул
Лист
Цветы
Семя
НовосиЛист
бирск
Цветы
Семя
Якутск
Лист
Цветы
Семя
Характер
действия
Стимулирует
Не влияет
Не влияет
Не влияет
Не влияет
Не влияет
Не влияет
Не влияет
Не влияет
Bacillus
subtilis
+
+
+
+
+
+
+
+
+
Bacillus
cereus
+
+
+
+
+
+
+
+
+
Pseudomones
fluorescens
+
+
+
+
+
+
+
+
+
Alternaria
teuuis
+
+
+
+
+
+
+
+
+
Содержание гумуса и элементов питания показало заметные различия в исследуемых почвах. Токсичность почвы более вероятна при содержании гумуса 2,33,6 % и очень низкая при содержании гумуса 4,8-6,8 (рис. 6). Следовательно, любые
агротехнические мероприятия, приводящие к потере гумуса, могут привести к усилению токсичности почв.
Токсикоз почв возможен под календулой в дерново-подзолистых почвах
Томской и Новосибирской областей. Токсикоз почв под календулой в черноземах
обыкновенных не отмечается. Что касается дерново-подзолистых почв ЦСБС Новосибирска, то по запасу гумуса они близки к чернозему выщелоченному опытных
полей Института садоводства им. Лисовенко в г. Барнауле, что возможно связано с
их окультуриванием и внесением органики. Токсичность почвы под календулой
лекарственной чаще всего здесь проявляется, но описывается рангом средней фитотоксичности. В формировании фитотоксичности почв под календулой лекар14
ственной определяющими являются экологические факторы: содержание гумуса,
подвижного и валового фосфора.
Примечание: 1- Чернозем обыкновенный (г. Барнаул) , 2 – Дерново-подзолистая, (г.
Новосибирск), 3 – Дерново-подзолистая, (г. Томск), 4 – Чернозем обыкновенный (г.
Омск), 5 – Мерзлотная таежная палевая (г. Якутск).
Рис. 6 Взаимосвязь фитотоксичности с содержанием гумуса
6. ВЛИЯНИЕ МЕТЕОРОЛОГИЧЕСКИХ УСЛОВИЙ НА СЕМЕННУЮ
ПРОДУКТИВНОСТЬ И КАЧЕСТВО СЕМЯН
Анализ погодных условий в годы исследований 1980-1984 показал, что все
они по разным метеорологическим параметрам, так или иначе, отличались от среднемноголетних. В некоторые годы в периоды морфогенеза складывались благоприятные условия для вегетативного роста, в другие – для цветения, формирования
и созревания семян.
У календулы лекарственной зависимость семенной продуктивности и качества семян от погодных условий за вегетационный период была неоднозначной.
Коэффициенты корреляции общего гидротермического режима (ГТК) с массой семян с растения положительны на низком уровне, а с числом всхожих семян с растения на достаточно сильном. Это говорит о том, что в целом погодные условия для
вегетации календулы в Новосибирске благоприятны для урожая семян, но не
вполне удовлетворительны для их качества. Корреляции сумм температур выше 510 и 15ºС с урожаем семян находятся на среднем и сильном уровнях, а с качеством
семян только сумма температур выше 15 ۫С обеспечивает сильную положительную корреляцию. Зависимость урожая и качества семян от условий увлажненности
в течение всей вегетации положительна на среднем и сильном уровне, что характеризует растение календулы как требовательное к условиям увлажненности (табл. 2).
На фоне общих зависимостей семенной продуктивности и качества семян календулы от погодных условий вегетационного периода были выявлены более конкретные коэффициенты корреляции для отдельных периодов морфогенеза (табл. 3).
15
Таблица 2. Влияние погодных условий вегетационного периода на формирование
и качество семян календулы лекарственной (среднее за 1980-1984 гг.)
Коэффициент корреляции с параметрами
Масса семян с 1 растения, г (СП)
Число всхожих семян
с 1 растения (ИСП)
средне
суточная
темпера
тура воздуха
сумма
осадков
относи
тельная
влажность
воздуха
0,858
0,273
0,563
0,742
0,929
0,754
сумма температур выше
ГТК
Показатель семенной
продуктивности
5 ۫С
10 ۫С
15 ۫С
0,265
0,517
0,428
0,903
0,926
-0,530
-0,472
0,644
Примечание: недостоверные коэффициенты корреляции - выделены курсивом
- в период вегетативного роста на фоне достаточного тепла и умеренной влажности корреляции между суммами температур всех уровней и среднесуточной температурой с СП положительная средняя, а с качеством семян выявлена положительная связь только с суммой температур выше 15 ۫С (r = 0,552). Следовательно теплообеспеченность роста вегетативных органов – листьев и побегов календулы для
массы семян удовлетворительна, но для формирования зачаточных генеративных
органов, обеспечивающих ИСП, требуются более высокие температуры. Корреляция количества осадков с семенной продуктивностью и качеством семян средняя, а
с влажностью воздуха слабая, то - есть в этот период влагообеспеченность календулы удовлетворительна.
Таблица 3. Взаимосвязь метеорологических параметров с семенной продуктивностью календулы лекарственной по периодам морфогенеза, средняя за 1980-1984 гг.
Период
морфогенеза
Вегетативный рост
Цветение
Формирование семян
Созревание семян
Вегетативный рост
Цветение
Формирование семян
Созревание семян
Коэффициент корреляции с метеорологическими параметрами
средне
сумма
относисумма температур выше
суточная осадков тельная
темперавлаж5 ۫С
10 ۫С
15 ۫С
тура возность
духа
воздуха
Масса семян с 1 растения (СП)
0,671
0,623
0,382
0,326
0,909
0,505
0,584
-0,495
0,771
0,208
0,367
0,148
0,449
-0,058
0,071
0,564
Число всхожих семян с 1 растения (ИСП)
0,209
0,546
0,040
-0,402
0,209
0,273
0,733
0,233
0,429
0,429
-0,017
-0,469
0,432
0,032
-0,281
-0,752
0,415
-0,287
0,272
0,626
0,442
0,200
0,364
0,547
-0,512
0,078
-0,523
-0,800
0,552
0,260
0,532
0,731
Примечание: см. – табл. 2
- в период цветения на фоне более влажной и прохладной погоды высокая
положительная корреляция была выявлена только по среднесуточной температуре
с массой семян с растения. В целом теплообеспеченность календулы в этом перио16
де для урожая и качества семян была достаточной. Корреляции показателей увлажненности были для СП и ИСП положительны на среднем и слабом уровнях.
- в период формирования семян условия для растения календулы в целом благоприятны. Корреляция на высоком для СП и среднем для ИСП уровнях наблюдается только со среднесуточной температурой воздуха и с суммой температур выше
150С. С условиями увлажненности выявлена средняя корреляция: для СП с влажностью воздуха, а для ИСП с количеством осадков.
- в период созревания семян на фоне снижающегося количества тепла и повышения увлажненности у растения календулы была выявлена средняя положительная корреляция показателей теплового режима с семенной продуктивностью.
А для показателей интегральной семенной продуктивности была сильная положительная корреляция – средняя с температурой воздуха и высокая с суммой температур выше 150С. Условия увлажненности в этот период были удовлетворительны –
корреляции по обоим показателям с урожаем и качеством семян слабые с переходом в отрицательные.
Салат листовой. Погодные условия вегетационного периода в Новосибирске достаточны для вызревания семян салата скороспелых сортов при посеве семенами в грунт. Корреляции температурных условий с семенной продуктивностью и
качеством семян салата положительны: с ГТК и среднесуточной температурой
связь средняя и сильная, с суммами температур всех уровней в основном слабая,
что говорит о достаточном количестве тепла в течение вегетации. Корреляции
условий увлажненности с семенной продуктивностью и качеством семян средние,
и только с интегральным показателем семенной продуктивности связь высокая
(табл. 4).
Таблица 4. Влияние погодных условий вегетационного периода на формирование и
качество семян салата листового (среднее за 1980-1984 гг.)
Показатель семенной
продуктивности
средне суточная
температура воздуха
Масса семян с 1 растения, г (СП)
Число всхожих семян
с 1 растения (ИСП)
0,985
Коэффициент корреляции с параметрами
сумма относи сумма температур выше
осадтельная
ков
влажГТК
5 ۫С
10 ۫С
15 ۫С
ность
воздуха
0,523
0,661
0,520
0,191
0,280
0,638
0,548
0,976
0,582
0,920
0,043
0,218
0,098
Примечание: см. – табл. 2
На фоне удовлетворительных условий для роста и репродуктивных процессов салата, требования растения к метеорологическим факторам по отдельным периодам морфогенеза различны (табл. 5).
17
Таблица 5. Взаимосвязь метеорологических параметров с семенной продуктивностью салата листового по периодам морфогенеза средняя за 1980-1984 гг.
Период
морфогенеза
Вегетативный рост
Цветение
Формирование семян
Созревание семян
Вегетативный рост
Цветение
Формирование семян
Созревание семян
Коэффициент корреляции с метеорологическими параметрами
средне сусумма
относисумма температур выше
точная
осадков тельная
темперавлаж5 ۫С
10 ۫С
15 ۫С
тура возность
духа
воздуха
Масса семян с 1 растения, (СП)
0,688
0,637
0,430
0,840
0,813
0,652
0,467
0,104
0,551
-0,172
-0,017
0,224
0,487
0,361
0,683
0,718
0,664
0,119
-0,036
0,584
-0,044
-0,325
-0,126
0,172
Число всхожих семян с 1 растения (ИСП)
-0,805
-0,071
-0,270
0,298
0,379
-0,256
-0,355
0,103
0,384
-0,965
-0,878
0,243
0,395
0,361
-0,772
0,500
0,350
0,119
0,310
0,584
0,950
-0,106
-0,119
0,004
Примечание: см. – табл. 2
- в период вегетативного роста, когда идет формирование листовой массы и
стеблей, растения салата требовательны к теплу. Корреляционная связь тепловых
параметров с формированием массы семян сильная. Качество семян (ИСП) в
меньшей степени зависит от теплового фактора в этот период – корреляция слабая
и отрицательная. Условия увлажненности в период коррелируют с массой семян
положительно на среднем уровне, а с их качеством корреляция отрицательна и слабая.
- в период цветения, более теплый и влажный по сравнению с предыдущим,
корреляции тепловых факторов с семенной продуктивностью колеблются от средней с температурой воздуха до слабой и отрицательной по суммам температур.
Корреляции показателей теплового режима с качеством семян отрицательны и
только с суммой температур выше 15 ۫С связь слабая положительная. С показателями увлажненности корреляция СП и ИСП в целом положительная – с осадками
слабая, а с влажностью воздуха средняя.
- в период формирования семян в условиях более прохладной и сухой погоды
корреляция температурного фактора с массой семян положительна на среднем и
высоком уровнях, а с показателем качества семян – средняя. Для урожая и качества
семян в этот период условия теплообеспеченности в целом достаточны, о чем говорят слабые коэффициенты корреляции с суммами температур выше 15 ۫С. Корреляции показателей увлажненности с урожаем и качеством семян положительны на
среднем уровне, но для ИСП связь переходит в отрицательную с влажностью воздуха.
- период созревания семян был теплее, чем два предыдущих и с умеренной увлажненностью. Корреляции условий теплового режима с семенной продуктивностью и
качеством семян были отрицательные и слабые, только с суммой температур выше
15 ۫С наметился переход к слабой положительной корреляции. С показателями
увлажненности связь СП и ИСП положительная, средняя и сильная. Для созрева18
ния семян салата в конце августа и сентябре погодные условия, в общем, складывались благоприятно (см. табл. 5).
Выводы
1. Установлена разная степень влияния экологических абиотических и биотических факторов на семенную продуктивность и качество семян календулы лекарственной и салата листового на трех экологических уровнях: первый – почвенноклиматические условия географических пунктов; второй - метеорологические условия разных вегетационных периодов; третий – различные комплексы почвенновоздушного питания на побегах различного местоположения на растениях. Под влиянием внешних условий формируются группы неоднородных семян.
2. Календула лекарственная образует в природных условиях Новосибирска разветвленный куст из побегов I-V порядков, в том числе главного стебля и 10-15 побегов II порядка, которые на разном уровне главного стебля в связи с неодинаковым
почвенно-воздушным питанием, образуют три яруса по 3-5 побегов II порядка в
каждом. Общая продолжительность периода репродуктивной вегетации у календулы
– от начала цветения до полного созревания семян - составляет в среднем 33 дня (от
21 до 34).
3. Салат листовой (скороспелый сорт Московский парниковый) при посеве семенами в грунт в условиях Новосибирска ветвится до V, иногда до VI порядков, образуя, главный стебель и около 30 побегов II порядка, которые делятся на три яруса
(от главного соцветия) верхний, средний и нижний по 10 побегов в каждом в месте с
соответствующими побегами III-V порядков. Цветение салата начинается с главного
соцветия в середине июля и распространяется на побеги II и последующих порядков
до 20-х чисел августа.
4. Показана эффективность способа подготовки многолетнего исходного материала метеорологических наблюдений и их взаимосвязи с семенной продуктивностью и качеством семян, позволяющего выявить реакцию растений на погодные
условия за любой календарный период как для всего вегетационного периода в течение нескольких лет, так и для отдельных периодов морфогенеза растений в течение
вегетации. Установлена зависимость семенной продуктивности и качества семян
календулы и салата от гидротермического режима за вегетационный период, особенно от суммы температур выше 15 ۫С, а также от условий увлажненности в течение
всей вегетации, начиная с самых ранних этапов развития растения в отдельные периоды морфогенеза выявленные корреляции достоверно существенно различаются.
5. Местоположение семян на растении определяет их неоднородность по размерам и способности к прорастанию. В структуре урожая семян календулы главную
роль играют побеги III и IV порядков (72 %). Качество семян на побегах разного
местоположения неодинаково снижается в зависимости от ветвления и яруса сверху
вниз, сильнее по крупности семян. Максимум вызревших семян находится на побегах II и III порядков, а также в нижнем ярусе растений, в среднем на растении созревает около 70%. Под влиянием экологических факторов на эмбриологическом уровне
в семенной продукции календулы формируются семена трех морфологических типов
(когтевидные, ладьевидные, кольцевидные), которые различаются также по крупности и всхожести. При посеве семян разных типов на растениях-потомках снова фор19
мируются семена всех трех типов, свойственных виду. В урожае когтевидные семена составляют 20%, ладьевидные 45% и кольцевидные 35%, а зародыши всех трех
типов существенно не различаются. Продуктивные свойства семян разных типов
неодинаковы. Семенная продуктивность растений-потомков из кольцевидных семян
составляет около 70% от двух других типов, а по крупности и всхожести семян лучшие потомки из ладьевидных семян.
6. В урожае семян формируются три экологические группы: зрелые (выборочный сбор – семена, созревшие на растениях плюс осыпавшиеся при уборке семена –
осыпь-1); дозревшие (семена, осыпавшиеся после сушки семенников перед обмолотом – осыпь-2); массовая партия – обмолот. Лучшими по посевным качествам и продуктивным свойствам отличаются зрелые семена, дозревшие, несколько уступают им
по крупности и по всхожести, а обмолоченные по обоим показателям ниже.
7. Формирование семян салата не имеет явно выраженной зависимости от порядков побегов. Общий репродуктивный цикл от начала цветения до полного созревания колеблется от 10 до 31 дня. На растении салата формируется около 7 (3-11)
граммов семян, из которых около 40 % созревает на растении. Основной урожай
семян салата формируется на побегах IV порядка, а наименьшей на побегах II порядка. Преобладающее количество семян располагается в нижнем ярусе растения.
8. Качество семян календулы определяется не только природными и метеорологическими условиями, но и эпифитной микрофлорой растения и семян. Эпифитная
микрофлора особенно многочисленна на ладьевидных семенах, формирующихся в
неблагоприятных эколого-географических условиях: г. Якутска, г. Томска. В составе
эпифитной микрофлоры календулы доминируют неспорообразующиеся бактерии и
темноцветные грибы. Численность и состав микробных сообществ семян календулы
зависит от условий их хранения: в пониженных температурах (+ 4 ºС) по сравнению
с комнатными условиями число микроорганизмов в 4-14 раз меньше, а в составе их
снижается доля токсических микроорганизмов, что положительно сказывается на
всхожести семян. Фитотоксичность почв под календулой незначительна, она увеличивается в почвах при снижении их плодородия.
ПРЕДЛОЖЕНИЯ
1. Для повышения качества семенной продукции календулы целесообразно проводить сборы соцветий для лекарственного сырья с побегов I и II порядков, улучшая тем самым условия для формирования семян на побегах III и IV порядков. С
появлением распустившихся соцветий на побегах V и VI порядков их следует
только собирать на сырье до самой уборки семенников с поля.
2. Семена, сформировавшиеся на побегах I II порядков, по посевным качествам
(массе 1000 семян и всхожести) превосходят семена с побегов III- VI порядков, поэтому выборочный сбор семян позволяет получить лучшие семена для селекционно-семеноводческих целей.
3. Технология уборки и обработки семян календулы должна предусматривать
отделение зрелых и дозревших семян от массовой партии, что обеспечивает более
высокую продуктивность растений при посеве на следующий год.
4. Для семян более пригодно холодное хранение (+ 40С), обеспечивающее снижение сапрофитной и патогенной микрофлоры.
20
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДЕССЕРТАЦИИ
1. Еременко Л.Л. О качестве продукции календулы лекарственной /Л.Л.Еременко,
И.О. Костюков/ Пища экология качество // Труды III междунар. науч.-практич. конфер.
Краснообск 30.05 – 01.06. 2003 г. – Новосибирск: Сибирское отделение РАСХН, 2003 – с.
39-42.
2. Наплекова Н.Н. Влияние экологических факторов на микрофлору филлосферы календулы лекарственной /Н.Н. Наплекова, И.О. Костюков// Вестник Новосибирского аграрного Государственного университета № 3 – Новосибирск, 2005 – с. 85-91.
3. Еременко Л.Л. Особенности цветения и плодоношения календулы лекарственной в
связи с местоположением на растениях /Л.Л.Еременко, И.О. Костюков// Нетрадиционные
и редкие растения, природные соединения и перспективы их использования / VII Междунар. симпозиум Т. 2, 24.05 – 27.05.2006, Белгород, 2006 – с. 138-143.
4. Еременко Л.Л. Экологические аспекты неоднородности семян календулы лекарственной в Новосибирске /Л.Л.Еременко, И.О. Костюков/ Нетрадиционные и редкие растения, природные соединения и перспективы их использования // VII Междунар. симпозиум Т. 2, 24.05 – 27.05.2006, Белгород, 2006 – с. 245-251.
5. Костюков И.О. Изменчивость семян на растении календулы лекарственной в связи
с ветвлением / Современные тенденции развития аграрной науки в России // Материалы
IV междунар. науч.-практич. конфер. молодых ученых, посвященной 70-летию НГАУ –
28.03 – 30.03.2006 – Новосибирск, 2006 – с.23-24.
6. Костюков И.О. Зависимость качества семян салата листового от экологических
факторов /И.О. Костюков, Л.Л.Еременко// Вестник Новосибирского Государственного
аграрного университета № 4 – Новосибирск, 2006 – с. 20-34.
7. Костюков И.О. Цветение и плодоношение салата листового в связи с положением
семян на растении /И.О. Костюков, Л.Л.Еременко// Сибирский вестник сельскохозяйственных наук, № 2 (182), 2008. – с.105-107.
Объем 1, 0 печ. л. Тираж 120 экз.
Отпечатано рекламно-полиграфическим центром "Махаон",
630091, г. Новосибирск, ул. Семьи Шамшиных, 77,
тел: (383) 291-43-49, e-mail: ra_machaon@mail.ru
21
.