На правах рукописи ЦЫМБАЛ АЛЕКСАНДР АЛЕКСАНДРОВИЧ ХАРАКТЕР ИЗМЕНЕНИЙ НАРУШЕННЫХ
advertisement
На правах рукописи ЦЫМБАЛ АЛЕКСАНДР АЛЕКСАНДРОВИЧ ХАРАКТЕР ИЗМЕНЕНИЙ НАРУШЕННЫХ КОАГУЛЯЦИОННЫХ И ФИБРИНОЛИТИЧЕСКИХ СВОЙСТВ КРОВИ ПОД ВЛИЯНИЕМ ТЕРАГЕРЦОВЫХ ВОЛН НА ЧАСТОТАХ ОКСИДА АЗОТА 150,176-150,664 ГГц 03.00.13- Физиология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Саратов – 2007 3 Работа выполнена в Государственном образовательном учреждение высшего профессионального образования «Саратовский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию». Научный руководитель: заслуженный деятель науки РФ, доктор медицинских наук, профессор Киричук Вячеслав Федорович. Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор Анищенко Татьяна Григорьевна; доктор медицинских наук, профессор Пучиньян Даниил Миронович. Ведущая организация - ГОУ ВПО «Российский государственный медицинский университет Росздрава» Защита состоится “____”________________ 2007г. в _____часов на заседании диссертационного совета Д. 208.094.03 при ГОУ ВПО «Саратовский ГМУ Росздрава» (410012, Саратов, Б.Казачья, 112). С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Саратовский ГМУ Росздрава». Автореферат разослан “____”_________________ 2007г. Ученый секретарь диссертационного совета кандидат медицинских наук, доцент Бабиченко Н.Е. 4 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ИССЛЕДОВАНИЯ Актуальность работы Высокий уровень сердечно-сосудистых заболеваний, в частности, ИБС, нестабильной стенокардии, инфаркта миокарда и непрекращающийся их рост - одна из характерных особенностей современного общества, а совершенствование методов лечения и реабилитации больных ИБС продолжает оставаться одним из чрезвычайно актуальных аспектов практического здравоохранения, поскольку данная патология по-прежнему лидирует среди основных причин смертности взрослого творчески активного, работоспособного населения Российской Федерации [Оганов Р.Г., 1993; Тожиев М.С., Шестов Д.Б., Воробьев В.И., 2000]. В возникновении перечисленных и многих других форм патологии человека важную роль играет чрезмерная по интенсивности или длительности стрессорная реакция, вызванная различными факторами окружающей среды [Селье Г., 1979; Меерсон Ф.З., 1986; Тигранян Р.А., 1990; Судаков К.В., 1992; Толянина В.Г., 1997]. В исследованиях, проводимых в последние годы, показана эффективность многофакторной профилактики ИБС, касающаяся снижения уровней факторов риска и смертности от данного заболевания [Чазов Е.И., 1997]. Современное медикаментозное лечение больных с заболеваниями органов кровообращения способно благоприятно влиять на выживаемость определенных групп больных и улучшать качество их жизни [Амосова Е.Н., 1998; Руксин В.В., 2003]. Вместе с тем, использование лекарственных препаратов, наряду с желаемым эффектом, нередко сопровождается развитием тяжелых побочных и аллергических реакций, требует тщательного лабораторного и клинического контроля во время применения [Steptol A., 1993]. Таким образом, очевидна необходимость совершенствования методов лечения пациентов с патологией органов системы кровообращения и поиска новых альтернативных терапевтических подходов. В последние годы значительно расширен арсенал физиотерапевтических методов лечения болезней сердечно-сосудистой системы за счет новых физических факторов, ранее не применявшихся в кардиологической практике. Анализ данных литературы и клинические наблюдения свидетельствуют о том, что низкоинтенсивные ММ- волны эффективны при многих хронических заболеваниях как в качестве монотерапии, так и в комбинации с медикаментозными средствами, усиливая и закрепляя лечебное действие последних [Девятков Н.Д., Бецкий О.В., 1985; Головачева Т.В., 1991; Девятков Н.Д., Голанд Н.Б., Бецкий О.В., 1991; Родштат И.В., 1991; Киричук В.Ф., Головачева Т.В., Чиж А.Г., 1999; Паршина С.С., Киричук В.Ф., Головачева Т.В. и др., 2004]. В настоящее время исследуются вопросы взаимодействия биологических объектов с более широким диапазоном низкоинтенсивных ММ-волн. Низкоинтенсивное ЭМИ терагерцового диапазона частот все больше обращает на себя внимание, поскольку в этом диапазоне сосредоточены частотные спектры излучения и поглощения важнейших активных клеточных метаболитов (NO, O2, СО2, СО, ОН- и др.) [Rothman L.S., Barbe A., Chris Benner D. et. аl., 2003]. Совершенно закономерно, что наибольший интерес в экспериментальной науке и клинической медицине вызывают электромагнитные волны терагерцового 5 диапазона на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц, поскольку оксид азота является одним из важнейших биологических медиаторов, вовлеченный во множество физиологических и патофизиологических процессов [Iggnaro L.G., 1990; Murray J., 1991; Furchgot R.F., Jothianandan D., 1991; Snуder S.H., Bredt D.S., 1992; Murad F., 2003]. Цель исследования Изучить закономерности и механизмы влияния электромагнитного излучения терагерцового диапазона на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения (МСИП) оксида азота 150,176-150,664 ГГц на нарушенные коагуляционные и фибринолитические свойства крови белых крыс, находящихся в состоянии иммобилизационного стресса, разработать оптимальные режимы терагерцового облучения, при которых наблюдается максимальная нормализация нарушенных показателей коагуляционного звена системы гемостаза и фибринолиза. Задачи исследования 1. Установить нарушения коагуляционного потенциала и фибринолитических свойств крови крыс обоего пола, находящихся в состоянии острого и хронического иммобилизационного стресса. 2. Изучить влияние ЭМИ терагерцового диапазона на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц в непрерывном режиме в течение 30 минут на процессы гемокоагуляции и фибринолитический потенциал крови интактных крыс- самцов. 3. Исследовать и выявить наиболее эффективное влияние ЭМИ терагерцового диапазона на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на процессы свертывания крови и фибринолиз белых крыс-самцов, находящихся в состоянии острого и хронического иммобилизационного стресса, в зависимости от времени и режима облучения. 4. Провести сравнительный анализ непрерывного и дробного режимов терагерцового облучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на показатели коагуляционного звена системы гемостаза и фибринолиза белых крыссамцов, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса. 5. Сопоставить влияние предварительного и последующего терагерцового облучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на показатели коагуляционной и фибринолитической активности крови белых крыс- самцов, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса. 6. Изучить и выявить наиболее эффективное влияние ЭМИ терагерцового диапазона на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на показатели гемокоагуляции и фибринолиза белых крыс-самок, находящихся в одной из двух фаз эстрального цикла Dioestrus и Oestrus, при остром иммобилизационном стрессе в зависимости от режима облучения. 7. Изучить особенности влияния предварительного 15-минутного непрерывного ЭМИ терагерцового диапазона на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на концентрацию стресс-реализующего гормона кортикостерона в крови крыссамцов, находящихся в состоянии острого и хронического иммобилизационного стресса. 6 Научная новизна Впервые показано, что при остром и хроническом иммобилизационном стрессе у крыс-самцов и крыс-самок, находящихся в одной из двух фаз эстрального цикла Dioestrus или Oestrus наблюдаются нарушения коагуляционных и фибринолитических свойств крови. Белые крысы - самки реагируют на острый иммобилизационный стресс не одинаково в зависимости от фазы эстрального цикла: в фазе Dioestrus они менее чувствительны к стрессорному фактору, чем в фазе Oestrus. Воздействие ТГЧ-облучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц в непрерывном режиме в течение 30 минут на интактных животных не вызывает изменений в прокоагулянтной, антикоагулянтной и фибринолитической активности крови крыс- самцов. ТГЧ-облучение на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц частично или полностью нормализует нарушения в коагуляционной и фибринолитической активности крови у стрессированных белых крыс-самцов в зависимости от времени и режима облучения. Впервые установлено, что при облучении животных в непрерывном режиме на фоне острого иммобилизационного стресса наиболее эффективным является 30 минутный режим воздействия. Предварительное облучение животных до действия стрессора в непрерывном режиме предупреждает развитие нарушений в различных фазах процесса свертывания крови и фибринолиза при 15-минутном облучении. При дробном режиме облучения животных на фоне острого иммобилизационного стресса происходит полное восстановление исследуемых показателей коагуляционного звена системы гемостаза и фибринолиза при 15-минутном ТГЧ воздействии на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц. Ежедневное предварительное ТГЧ - облучение в непрерывном режиме в течение 30 минут крыссамцов, находящихся в состоянии хронического иммобилизационного стресса, полностью предупреждает нарушения в системе свертывания крови и фибринолизе. Сравнительный анализ влияния непрерывного и дробного режимов терагерцового облучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на показатели коагуляционного звена системы гемостаза и фибринолиза крови белых крыс-самцов, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса, показал, что при 15-минутном ТГЧ - воздействии в дробном режиме наблюдалась полная нормализация нарушенных показателей гемокоагуляции и фибринолитической активности крови. Непрерывный режим облучения в том же временном пределе показал лишь частичное восстановление показателей коагуляционного звена системы гемостаза и фибринолиза. Влияние предварительного и последующего терагерцового облучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на показатели коагуляционной и фибринолитической активности крови белых крыс-самцов, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса неоднозначно. Впервые показано, что предварительное непрерывное облучение стрессированных животных в течение 15 минут полностью предотвращает развитие нарушений в коагуляционном звене системы гемостаза и фибринолизе. Непрерывный режим облучения на фоне развившегося иммобилизационного стресса в том же временном пределе оказывает 7 лишь частичное восстановление показателей коагуляционной активности крови и фибринолитического потенциала. Впервые обнаружены особенности влияния ЭМИ ТГЧ-диапазона на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц на коагуляционное звено системы гемостаза и фибринолиз белых крыс-самок, находящихся в одной из двух фаз эстрального цикла Dioestrus и Oestrus, при остром иммобилизационном стрессе в зависимости от режима облучения. Показано, что предварительное облучение крыс-самок в непрерывном режиме ТГЧ-волнами на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц в течение 15 минут, до действия стрессорного агента, полностью предупреждает развитие нарушений коагуляционного потенциала крови и показателей фибринолиза не зависимо от фазы эстрального цикла. Дробное ТГЧ-облучение на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц в той же временной экспозиции на фоне острого иммобилизационного стресса оказывает только частичное восстановление показателей коагуляционного звена системы гемостаза и фибринолиза у крыс-самок в фазах Dioestrus и Oestrus эстрального цикла. Показано, что наиболее эффективным в восстановлении нарушенных коагуляционных и фибринолитических свойств крови у крыс-самок в фазах Dioestrus и Oestrus эстрального цикла является превентивный непрерывный режим ТГЧ - облучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц в течение 15 минут. Предварительное непрерывное 15-минутное воздействие ЭМИ ТГЧ на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц ограничивает развитие острой и хронической стресс-реакции за счет уменьшения выделения глюкокортикоидов, в частности кортикостерона, корой надпочечников. Данный факт служит доказательством антистрессорного эффекта ЭМИ данного диапазона частот. Диссертационная работа Цымбала А.А. выполнена в соответствии с тематикой и планом научной деятельности СГМУ. Номер государственной регистрации02.03042330329. Практическая значимость Доказано отсутствие изменений в коагуляционной и фибринолитической активности крови интактных крыс-самцов под влиянием ЭМИ ТГЧ на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц, что подтверждает безопасность ТГЧвоздействия на указанных частотах на здоровых животных. Получены новые данные о характере воздействия ТГЧ-волн на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на нарушенные коагуляционные и фибринолитические свойства крови белых крыс, показаны половые особенности в реакциях коагуляционного звена системы гемостаза и фибринолиза в зависимости от времени и режима ТГЧ-облучения. Доказан более выраженный нормализующий эффект дробного и непрерывного предварительного ТГЧ-облучений на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц в восстановлении нарушенных коагуляционных и фибринолитических свойств крови экспериментальных животных. Полученные данные являются экспериментальным обоснованием возможности применения различных режимов ТГЧ-облучения в клинической 8 практике для нормализации нарушенных коагуляционных и фибринолитических свойств крови у пациентов с учетом половых различий. Работа является фрагментом отраслевой научно-исследовательской программы № 9: «Этиопатогенез, диагностика и лечение заболеваний крови» на тему: «Исследование влияния на сложные биологические системы электромагнитных колебаний на частотах молекулярных спектров излучения и поглощения веществ, участвующих в метаболических процессах» (договор № 005/037/002 от 25 сентября 2001 года с МЗ РФ). Основные положения, выносимые на защиту 1. Острый и хронический иммобилизационный стресс у белых крыс обоего пола сопровождается нарушениями коагуляционных и фибринолитических свойств крови. При остром иммобилизационном стрессе наблюдаются гиперкоагуляционные изменения в процессе свертывания крови и угнетение фибринолитической активности крови. При хроническом иммобилизационном стрессе обнаружены развитие коагулопатии потребления и значительная активация фибринолитического процесса, характерные для диссеминированного внутрисосудистого свертывания крови. 2. Непрерывное облучение ЭМИ ТГЧ - диапазона на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц в течение 30 минут не оказывает влияния на коагуляционное звено системы гемостаза и фибринолитическую активность крови интактных крыс - самцов. 3. Влияние ЭМИ ТГЧ - диапазона на частотах МСИП оксида азота 150,176150,664 ГГц на коагуляционное звено системы гемостаза и фибринолиз белых крыссамцов, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса, зависит от времени и режима облучения. При непрерывном облучении стрессированных животных наиболее эффективным в восстановлении нарушенных коагуляционных и фибринолитических свойств крови является 30-минутный режим воздействия. Превентивное облучение в непрерывном режиме до действия стрессора предупреждает развитие нарушений в исследуемых показателях свертывания крови и фибринолиза при 15-минутном облучении. При дробном режиме облучения стрессированных животных происходит полное восстановление показателей системы коагуляционного гемостаза и фибринолиза при 15-минутном ТГЧ воздействии. Предварительное непрерывное ТГЧ - облучение в течение 30 минут крыс-самцов, находящихся в состоянии хронического иммобилизационного стресса, предотвращает развитие нарушений в коагуляционном звене системы гемостаза и фибринолизе. 4. При сравнении влияний непрерывного и дробного режимов ТГЧ-облучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на коагуляционные и фибринолитические свойства крови белых крыс-самцов, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса, обнаружено, что дробный режим облучения в течение 15 минут более эффективен в восстановлении нарушенных коагуляционных и фибринолитических свойств крови животных, нежели в том же временном пределе непрерывное ТГЧ - облучение. 5. Сравнительный анализ влияний предварительного и последующего терагерцового облучений на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на 9 нарушенные показатели коагуляционной и фибринолитической активности крови белых крыс-самцов показал, что предварительное непрерывное облучение животных в течение 15 минут более эффективно предупреждает постстрессовые нарушения в системе гемостаза и фибринолиза по сравнению с аналогичным временным режимом на фоне развившегося острого иммобилизационного стресса. 6. Влияние ЭМИ ТГЧ - диапазона на частотах МСИП оксида азота 150,176150,664 ГГц на коагуляционные и фибринолитические свойства крови белых крыссамок, находящихся в одной из двух фаз эстрального цикла Dioestrus и Oestrus, в состоянии острого иммобилизационного стресса зависит от режима облучения: предварительное непрерывное облучение перед развившимся острым иммобилизационным стрессом в течение 15 минут полностью предупреждает нарушения в коагуляционном звене системы гемостаза и фибринолизе; дробное ТГЧ-облучение в течение 15 минут на фоне острого иммобилизационного стресса вызывает частичное восстановление коагуляционной и фибринолитической активности крови облученных крыс-самок. 7. Ограничение развития острой и хронической стресс-реакции у крыс-самцов за счет уменьшения выделения глюкокортикоидов, в частности, кортикостерона, корой надпочечников обусловлено воздействием предварительного непрерывного 15-минутного ЭМИ терагерцового диапазона на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц. Внедрение Полученные результаты используются в процессе преподавания на кафедре нормальной физиологии ГОУ ВПО «Саратовский ГМУ Росздрава». Апробация диссертации Основные положения работы доложены на второй международной конференции «Патофизиология и современная медицина» (Москва, 2004); на 65 юбилейной научно-практической конференции студентов и молодых ученых СГМУ «Молодые ученые – здравоохранению региона» (Саратов, 2004); на 2-й Всероссийской конференции с международным участием «Клиническая гемостазиология и гемореология в сердечно-сосудистой хирургии» (Москва, 2005); на 66-й научно-практической конференции студентов и молодых специалистов СГМУ «Молодые ученые - здравоохранению региона» (Саратов, 2005); на 1-м съезде физиологов СНГ (Сочи, 2005); на международной конференции «Гемореология в микро- и макроциркуляции» (Ярославль, 2005); на Всероссийской конференции «Тромбозы, геморрагии, ДВС-синдром» (Ярославль, 2005); на 2-й Всероссийской конференции с международным участием «Микроциркуляция в клинической практике» (Москва, 2006); на межрегиональной научно-практической конференции студентов и молодых ученых с международным участием «Молодежь и наука: итоги и перспективы» (Саратов, 2006); на 7-й Международной научнопрактической конференции «Здоровье и образование в XXI веке» (Москва, 2006); на 3-й Всероссийской конференции с международным участием «Клиническая гемостазиология и гемореология в сердечно-сосудистой хирургии» (Москва, 2007); на 14-м Российском симпозиуме с международным участием «Миллиметровые волны в медицине и биологии» (Москва, 2007); на 65-й юбилейной научнопрактической конференции студентов и молодых ученых с международным 10 участием «Актуальные проблемы экспериментальной и клинической медицины» (Волгоград, 2007); на межрегиональной конференции, посвященной 150-летию первого ректора Императорского Саратовского университета В.И. Разумовского «Аспирантские чтения» (Саратов, 2007). По результатам диссертационного исследования опубликовано 27 работ, в том числе в 8 реферируемых журналах; выдан 1 патент на изобретение. Получен диплом на IV конкурсе научно-практических работ молодых ученых «Диагностика, профилактика и терапия гемокоагуляционных и гемореологических нарушений» за актуальность, оригинальность, научную новизну и практическую значимость выполненного исследования (Москва, 2007). Объем и структура диссертации Диссертация состоит из введения, обзора литературы, материала и методов исследования, 2 глав собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы, включающего 223 отечественных и 102 зарубежных источника. Текст диссертации изложен на 212 страницах, содержит 37 таблиц, 15 рисунков. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ Объекты исследования Исследованы образцы плазмы крови 260 беспородных крыс-самцов и 120 беспородных крыс-самок массой 180-220 г. Нарушения в системах гемостаза и фибринолиза моделировали иммобилизационным стрессом [Антонов А.М., Беликина Н.В., Георгиева С.А. и др., 1964]: острый стресс - жесткая фиксация крыс на спине в течение 3 часов, хронический - в течение 5 дней по 3 часа ежедневно. Исследования проводились в следующих группах животных: ● Самцы: 1-я группа интактные животные (n=15) - группа контроля; 2-я группа животные в состоянии острого иммобилизационного стресса (n=15); 3-я группа интактные животные, подвергнутые ТГЧ - облучению на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц в течение 30 минут (n=15); 4-я группа - животные, подвергнутые ТГЧ - облучению на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на фоне острого иммобилизационного стресса в течение 5, 15 и 30 минут (n=45); 5-я группа - животные, подвергнутые предварительному ТГЧ - облучению на частотах МСИП оксида азота до действия стрессора в течение 5, 15 и 30 минут (n=45); 6-я группа - животные, подвергнутые дробному ТГЧ - облучению на частотах МСИП оксида азота, на фоне развившегося острого иммобилизационного стресса в течение 5, 15 и 30 минут (n=45); 7-я группа - животные в состоянии хронического иммобилизационного стресса (n=15); 8-я группа - животные в состоянии хронического иммобилизационного стресса, подвергнутые предварительному ТГЧ - облучению на частотах МСИП оксида азота 150,176150,664 ГГц в течение 30 минут (n=15); 9-я группа - интактные животные, у которых определялась в крови концентрация кортикостерона (n=10); 10-я группа животные в состоянии острого и хронического иммобилизационного стресса, у которых в крови определялась концентрация кортикостерона (n=20); 11-я группа 11 остро и хронически стрессированные животные, подвергнутые предварительному ТГЧ - облучению на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц, у которых в крови исследовали концентрацию кортикостерона (n=20). ● Самки: 1-я группа - интактные самки в фазе Dioestrus и Oestrus эстрального цикла (n=30); 2-я группа - самки в фазе Dioestrus и Oestrus, подвергнутые острому иммобилизационному стрессу (n=30); 3-я группа - самки в фазе Dioestrus и Oestrus в состоянии острого иммобилизационного стресса, подвергнутые предварительному ТГЧ - облучению на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц в течение 15 минут (n=30); 4-я группа - самки в фазе Dioestrus и Oestrus эстрального цикла в состоянии острого иммобилизационного стресса, подвергнутые дробному ТГЧ облучению на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц в течение 15 минут (n=30). Облучение экспериментальных животных проводилось электромагнитными волнами на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на предварительно выбритый участок кожи площадью 3 см 2 над областью мечевидного отростка грудины. Мощность излучения генератора составляла 0,7мВт, а плотность мощности, падающей на участок кожи, равнялась 0,2 мВт/см2. Продолжительность однократного облучения составляла 5, 15 и 30 минут. Для облучения животных использовался медицинский аппарат “КВЧ-NO”, разработанный в МТА КВЧ (г. Москва) совместно с ФГУП «НПП-Исток» (г.Фрязино) и ОАО ЦНИИИА (г.Саратов). Все животные при проведении экспериментов находились в одинаковых условиях. Для устранения влияния сезонной и циркадной зависимости на систему гемостаза эксперименты с животными осуществлялись в осенне-зимний период в первой половине дня. Забор крови у экспериментальных животных для исследования состояния коагуляционного звена системы гемостаза и фибринолиза осуществляли путем пункции сердца одноразовым шприцем в пластиковые пробирки. В качестве стабилизатора крови использовался 3,8%-ный раствор цитрата натрия в соотношении 9:1. Эксперименты на животных проводились в соответствии с требованиями Женевской конвенции «International Guiding principles for Biomedical Research Involving Animals» (Geneva, 1990). Методы исследования Состояние коагуляционного звена системы гемостаза исследовали с помощью серии тестов, выполненных на гемокоагулометре CGL 2110 «Solar» (Республика Беларусь, г. Минск) с использованием реактивов фирмы НПО “РЕНАМ” (г. Москва, Россия). Основными исследованными показателями, характеризующими коагуляционное звено системы гемостаза у экспериментальных животных, являлись: активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ); протромбиновое время; международное нормализованное отношение (МНО); тромбиновое время; концентрация фибриногена; активность фактора XIII в плазме крови (Баркаган З.С., Момот А.П., 1999). 12 Антикоагулянтные свойства крови у экспериментальных животных исследовали путем определения активности естественного антикоагулянта антитромбина III и системы протеина С (Баркаган З.С., Момот А.П., 1999). Состояние фибринолитической активности крови у экспериментальных животных оценивали путем определения Хагеман-зависимого фибринолиза; индуцированного стрептокиназой эуглобулинового фибринолиза; вычисления индекса резерва плазминогена (Баркаган З.С., Момот А.П., 1999); концентрации ранних продуктов деградации фибриногена и растворимых фибрин-мономерных комплексов РФМК-тестом (Елыкомов В.А., Момот А.П., 1987) и тестом склеивания стафилококков (Момот А.П., Лычев В.Г., 1988). Определение концентрации кортикостерона в сыворотке крови у экспериментальных животных производили утром в одно и то же время методом конкурентного иммуноферментного анализа с применением моноклональных антител (Шаляпина В.Г., Нарбаев Б.Н., 1999). Статистическая обработка полученных данных проводилась при помощи непараметрического метода U - критерия теста Mann-Whitney (пакет программ Statistica 6.0.). РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 1. Изменения коагуляционных и фибринолитических свойств крови у белых крыс, находящихся в состоянии острого и хронического иммобилизационного стресса, и интактных животных под влиянием терагерцового облучения У крыс-самцов и крыс-самок в фазе Dioestrus эстрального цикла, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса, выявлены гиперкоагуляционные изменения в системе гемостаза, снижение антикоагулянтных свойств крови и угнетение фибринолиза. У крыс-самок в фазе Oestrus, подвергшихся острому иммобилизационному стрессу показатели, характеризующие коагуляционную, антикоагулянтную и фибринолитическую активность крови, выражены значительнее, чем у стрессированных самок в фазе Dioestrus. У крыс-самцов в условиях хронического стресса выявлены развитие коагулопатии потребления и активация фибринолитического процесса, обнаружено значительное количество ранних продуктов деградации фибриногена и растворимых фибрин-мономерных комплексов, характерных для внутрисосудистого тромбообразования. Воздействие ТГЧ-облучения на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц в непрерывном режиме в течение 30 минут на интактных животных не вызывает изменений в прокоагулянтной, антикоагулянтной и фибринолитической активности крови крыс- самцов, о чем свидетельствует отсутствие статистически достоверных отличий между группами интактных и облученными животными. 2. Коагуляционные и фибринолитические свойства крови у крыс-самцов, находящихся в состоянии острого стресса, и их изменения при непрерывном режиме облучения терагерцовыми волнами на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц Воздействие непрерывного ТГЧ-облучения на частотах МСИП NO 150,176150,664 ГГц в течение 5 минут на животных, находящихся в состоянии острого 13 иммобилизационного стресса, не вызывает изменений в свертывании крови и фибринолизе. Об этом свидетельствует отсутствие статистически достоверных различий показателей коагуляционного потенциала, антикоагулянтной и фибринолитической активности крови облученных животных по сравнению с данными группы животных, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса. Анализ результатов исследования фибринолитической активности крови и её коагуляционных свойств у животных, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса и подвергшихся воздействию ТГЧ-облучения на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц в течение 15 минут, показал частичное восстановление показателей антикоагулянтного (рис.1) фибринолитического потенциалов крови и течения всех фаз коагуляционного каскада. Однако при этом отмечалась нормализация протромбинового и тромбинового времени, эуглобулинового фибринолиза, индуцированного стрептокиназой, индекса резерва плазминогена, так как отсутствовало статистически достоверное различие в этих показателях по сравнению с данными группы контрольных животных. При непрерывном 30-минутном облучении животных, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса, ТГЧ-электромагнитным полем на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц наблюдалось полное восстановление измененных показателей гемокоагуляции, антикоагулянтной активности крови (рис.1) и фибринолиза, что подтверждалось отсутствием статистически достоверных их различий по сравнению с данными группы контроля. усл. ед. сек 27 1,2 26 1 # # 0,8 25 * * * 0,6 * 24 0,4 23 0,2 0 22 1 гр. 2 гр. 3 гр. 4 гр. 1 гр. Антитромбин III 2 гр. 3 гр. 4 гр. Протеин С Рис. 1. Изменения антикоагулянтной активности крови у крыс-самцов под воздействием непрерывного 15 - и 30-минутного облучения ТГЧ – волнами на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц на фоне острого стресса Примечание: *- статистически достоверно, по сравнению с группой контроля; # - статистически достоверно по сравнению с группой животных, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса. 1-я гр. - интактные животные; 2-я гр.- животные в состоянии иммобилизационного стресса; 3-я гр. - животные, облученные в течение 15 минут на фоне иммобилизационного стресса; 4-я гр. - животные, облученные в течение 30 минут на фоне иммобилизационного стресса. 14 3. Влияние предварительного непрерывного терагерцового облучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на коагуляционные и фибринолитические свойства крови крыс-самцов, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса Предшествующее стрессу ТГЧ-облучение животных в течение 5 минут на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц приводит к менее выраженному нарушению функциональной активности коагуляционного звена системы гемостаза и фибринолиза, чем у животных, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса без предварительного непрерывного ТГЧ-облучения. Это выражается в статистически достоверном различии таких показателей коагуляционного каскада, как АЧТВ, тромбиновое время, Хагеман-зависимый эуглобулиновый фибринолиз, индекс резерва плазминогена. При этом не выявлено статистически значимых отличий в остальных показателях коагуляционного каскада, антикоагулянтной (рис. 2) и фибринолитической активности крови у животных, подвергнутых предварительному ТГЧ-облучению, по сравнению с группой стрессированных животных. усл. ед. сек 28 1,2 1 26 0,8 * 24 * * 0,6 * 0,4 22 0,2 20 1 гр. 2 гр. 0 3 гр. 1 гр. Антитромбин III 2 гр. 3 гр. Протеин С Рис. 2. Изменения антикоагулянтной активности крови у крыс-самцов под воздействием непрерывного предварительного 5-минутного облучения ТГЧ – волнами на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц до действия стрессора Примечание: *- статистически достоверно по сравнению с группой контроля; 1-я гр. - интактные животные; 2-я гр. - животные в состоянии иммобилизационного стресса; 3-я гр. - животные, облученные в течение 5 минут на фоне иммобилизационного стресса. Предшествующее острому иммобилизационному стрессу у крыс-самцов воздействие ТГЧ-облучения на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц в течение 15 минут полностью предотвращает развитие нарушений в системе коагуляционного звена гемостаза и фибринолитической активности крови животных, так как все показатели, характеризующие коагуляционный каскад, антикоагулянтную активность, фибринолитический потенциал крови у облученных 15 животных статистически достоверно не отличались от показателей группы интактных животных. Предварительное ТГЧ-облучение на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц в течение 30 минут также полностью предотвращает развитие гиперкоагуляционных изменений при остром иммобилизационном стрессе, что подтверждается отсутствием статистически достоверных отличий между группами интактных животных и животных, подвергнутых ТГЧ-облучению на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц в течение 30 минут. Сравнительный анализ предварительного и последующего режимов ТГЧоблучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц, показал, что они неоднозначны. При 5-минутной временной экспозиции электромагнитных волн более эффективным является предварительное ТГЧ-облучение. Воздействие 15-минутного ТГЧ-облучения на фоне развившегося острого иммобилизационного стресса приводит к частичному восстановлению нарушенной функциональной активности системы гемокоагуляции и фибринолитической активности крови, а предварительное ТГЧ-облучение полностью предотвращает развитие нарушений в системе коагуляционного гемостаза и фибринолиза. Следовательно, предварительное ТГЧ-облучение на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц в течение 15-минут обладает более выраженным эффектом на внутрисосудистый компонент микроциркуляции по сравнению с таким же временным облучением на фоне развившегося острого иммобилизационного стресса. Воздействие 30-минутной экспозиции электромагнитных волн ТГЧдиапазона на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц на животных с развившимся иммобилизационным стрессом приводит к полной нормализации показателей функциональной активности системы свертывания крови и фибринолиза, а предшествующее стрессу- полностью предотвращает развитие патологических изменений в механизмах гемокоагуляции и фибринолитической активности крови. Эффективность влияния обоих режимов ТГЧ-облучения на процессы гемокоагуляции и фибринолиза у экспериментальных животных одинакова, поскольку отсутствует статистически значимая разница в их показателях между группами облученных животных. 4. Воздействие дробного режима терагерцового облучения на частотах МСИП оксида азота на коагуляционные и фибринолитические свойства крови крыс-самцов, находящихся в состоянии острого стресса Облучение животных, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса, ТГЧ-волнами в дробном режиме в течение 5 минут не вызывало изменений исследуемых показателей коагуляционного звена системы гемостаза и фибринолиза. Об этом свидетельствует отсутствие статистически достоверных различий показателей прокоагулянтной, антикоагулянтной и фибринолитической активности крови облученных животных по сравнению с данными группы животных, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса. При облучении животных, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса, ТГЧ - волнами в дробном режиме в течение 15 и 30 16 минут не наблюдалось статистически достоверных различий всех изучаемых показателей системы свертывания крови и фибринолиза по сравнению с группой интактных животных, то есть происходило полное восстановление нарушенных прокоагулянтных, антикоагулянтных (рис. 3) и фибринолитических свойств крови. сек усл. ед. 27 1,2 # # 1 26 # * 0,8 25 0,6 * 0,4 24 23 # 0,2 0 1 гр. 2 гр. 3 гр. 4 гр. Антитромбин III 1 гр. 2 гр. 3 гр. 4 гр. Протеин С Рис. 3. Изменения антикоагулянтной активности крови у крыс-самцов под воздействием дробного 15 - и 30-минутного облучения ТГЧ – волнами на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц на фоне острого иммобилизационного стресса Примечания: те же, что и к рис. 1. Сравнительный анализ дробного и непрерывного режимов ТГЧ-облучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц, показал, что они неоднозначны. Так, при 5-минутном непрерывном режиме облучения животных на фоне стрессорного воздействия не наблюдалось восстанавливающего эффекта в отношении показателей, характеризующих коагуляционное звено системы гемостаза и фибринолиз. Дробный режим ТГЧ-облучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц в течение 5 минут также не продемонстрировал нормализующего влияния на показатели системы свертывания крови и фибринолиза. При 15-минутном ТГЧ-воздействии в непрерывном режиме наблюдалась частичная положительная динамика в отношении нарушенных показателей гемокоагуляции и фибринолитической активности крови. Дробный режим облучения в том же временном интервале показал полное восстановление нарушенных показателей коагуляционного звена системы гемостаза и фибринолиза, вызванных действием стрессорного фактора. При облучении животных в течение 30 минут дробным режимом ТГЧволнами на частотах МСИП оксида азота на фоне действия стрессорного агента, выявлено полное восстановление нарушенных показателей фибринолитической активности крови и гемокоагуляции. Аналогичные результаты наблюдались и при непрерывном ТГЧ-излучении на фоне стресса в той же временной экспозиции. 17 5. Влияние терагерцового облучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на нарушенные коагуляционные и фибринолитические свойства крови крыс-самцов, вызванных хроническим стрессом При ежедневном 30-минутном облучении животных, находящихся в состоянии хронического иммобилизационного стресса, ТГЧ-электромагнитным полем на частотах МСИП оксида азота наблюдалось полное восстановление измененных показателей системы свертывания крови, в том числе ее антикоагулянтной активности (рис.4) и фибринолиза. Это подтверждается отсутствием статистически достоверных различий исследованных показателей гемокоагуляции и фибринолиза по сравнению с данными группы контроля. сек усл. ед. 35 1,2 * 28 1 * 0,8 21 0,6 14 0,4 7 0 0,2 1 гр. 2 гр. 0 3 гр. Антитромбин III 1 гр. 2 гр. 3 гр. Протеин С Рис. 4. Изменения антикоагулянтных свойств крови у крыс-самцов под воздействием непрерывного предварительного 30-минутного облучения ТГЧ - волнами на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц при хроническом стрессе Примечание: *- статистически достоверно по сравнению с группой контроля; 1-я гр. - интактные животные; 2-я гр. - животные в состоянии иммобилизационного стресса; 3-я гр. - животные, предварительно облученные в течение 30 минут до действия стрессора. 6. Антистрессорное действие терагерцового излучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц Для оценки антистрессорного действия терагерцового излучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц были проведены серии экспериментов, в которых оценивалась динамика концентрации гормона коры надпочечников кортикостерона в условиях острого и хронического стресса до и после воздействия указанными электромагнитными волнами. В результате проведения экспериментов обнаружено, что концентрация кортикостерона у интактных животных составила 41,3 нмоль/л. У крыс, находящихся в состоянии острого и хронического иммобилизационного стресса, повышалась функциональная активность коры надпочечников. Это сопровождалось 18 статистически достоверным по сравнению с группой контроля увеличением концентрации кортикостерона в сыворотке крови. Так, в условиях острого стресса она возрастала практически в 12 раз (до 493,5 нмоль/л), в условиях хронического стресса - в 7 раз (до 287,5 нмоль/л) (табл. 1). Воздействие ТГЧ-излучения на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота в течение 15 минут вызывало снижение повышенной функциональной активности коры надпочечников, что выражалось в уменьшении уровня кортикостерона в сыворотке крови у животных, при остром стрессе - в 3,7 раз (до 132,3 нмоль/л), а при хроническом - в 1,8 раза (до 153,0 нмоль/л). Таблица 1 Влияние 15-минутного непрерывного предварительного электромагнитного излучения терагерцового диапазона МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на концентрацию кортикостерона крови у крыс-самцов Животные, находящиеся в состоянии Показатели Интактные животные острого стресса хронического стресса (n = 10) (n = 10) (n=10) 41,3 493,5 153,0 (320; 680,0) 287,5 (45,0; 600,0) 132,3 (35,0; 48,0) (45,0; 210,0) (35,0; 240,0) P1 =0,021 P2 =0,173 P1=0,045 Р2=0,011 P1=1,730 P3=0,325 (n = 10) Кортикостерон, нмоль/л Предварительное облучение в течение 15 минут на фоне хронического острого стресса стресса P1 =0,005 (n=10) Примечание: в каждом случае приведены средняя величина (медиана), нижний и верхний квартили (25%; 75%) из соответствующего числа измерений; P1 - по сравнению с группой интактных животных; P2 - по сравнению с группой животных, подвергнутых острому стрессу; P3 - по сравнению с группой животных, подвергнутых хроническому стрессу. Таким образом, предварительное 15-минутное воздействие электромагнитным излучением терагерцового диапазона на частотах МСИП оксида азота 150,176150,664 ГГц лимитирует развитие стрессорных реакций, обусловленных, повышенной секрецией глюкокортикоидов корой надпочечников, вызывающих гиперкоагуляцию крови, и тем самым предотвращает развитие изменений в коагуляционном звене системы гемостаза и фибринолизе. 19 7. Коагуляционные и фибринолитические свойства крови у крыс-самок, находящихся в состоянии острого стресса, и их динамика при непрерывном предварительном режиме облучения терагерцовыми волнами на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц При предварительном непрерывном режиме ТГЧ-облучения в течение 15 минут отмечалось отсутствие постстрессовых изменений во всех изучаемых показателях коагуляционного звена системы гемостаза и фибринолиза у крыс- самок в фазе Dioestrus, так как разница в их величине по сравнению с данными группы интактных животных статистически недостоверна. Воздействие предварительного непрерывного ТГЧ-излучения на указанных частотах в течение 15 минут на самок в фазе Oestrus в состоянии острого иммобилизационного стресса также вызывало полное отсутствие постстрессовых сдвигов в исследуемых показателях гемостаза. Об этом свидетельствовало отсутствие статистически достоверных различий в показателях коагуляционного звена системы гемостаза и фибринолиза (табл. 2) крови по сравнению с данными группы контрольных животных. Таблица 2 Изменение фибринолитической активности крови у крыс-самок в фазе Dioestrus под воздействием непрерывного предварительного 15-минутного облучения ТГЧ – волнами на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц до действия стрессора Самки в фазе Dioestrus Показатели XIIа - калликреинзависимый фибринолиз, мин Индуцированный стрептокиназой эуглобулиновый фибринолиз, с Индекс резерва плазминогена, % Интактные самки Острый иммобилизационный стресс (n = 15) (n = 15) Животные, облученные в течение 15 минут до действия стрессора (n = 15) 15,0 20,1 14,0 (11,0; 20,2) (12,0; 25,7) (10,1; 19,2) P1=0,01 P1=0,355 P2=0,01 125,0 145,0 127,0 (90,0; 150,0) (111,0; 155,5) (100,0;140,0) P1=0,01 P1=0,819 P2=0,01 68,2 55,7 65,5 (55,0; 75,2) (50,0; 71,2) (54,2; 77,0) P1=0,010 P1=0,067 P2=0,013 Примечание: то же, что и к табл. 1. 20 8. Изменения коагуляционных и фибринолитических свойств крови у крыс-самок, находящихся в состоянии острого стресса, при дробном режиме облучения терагерцовыми волнами на частотах МСИП оксида азота 150,176150,664 ГГц При дробном режиме облучения в течение 15 минут крыс-самок в фазе Dioestrus эстрального цикла, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса, наблюдается частичное восстановление показателей, характеризующих коагуляционную активность крови и фибринолиз. Так, тромбиновое время, концентрация фибриногена, активность антитромбина III и протеина С, индуцированный стрептокиназой эуглобулиновый фибринолиз и индекс резерва плазминогена статистически достоверно отличались от группы контрольных животных. В то время такие показатели, как АЧТВ, протромбиновое время, МНО, активность XIII фактора, Хагеман-зависимый фибринолиз и концентрация растворимых фибрин-мономерных комплексов, соответствовали данным группы контрольных животных. При облучении крыс-самок в фазе Oestrus, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса, ТГЧ - волнами в дробном режиме в течение 15 минут наблюдались статистически достоверные различия в показателях, характеризующих коагуляционную активность крови (табл. 3) – активированном частичном тромбопластиновом времени, концентрации фибриногена; фибринолитическую активность крови- Хагеман-зависимом эуглобулиновом фибринолизе и индексе резерва плазминогена, по сравнению с группой контрольных животных, то есть происходило частичное восстановление нарушенных показателей коагуляционного звена системы гемостаза и фибринолитической активности крови. В то же время не наблюдалось статистически достоверных различий в таких показателях, как протромбиновое время, МНО, тромбиновое время, активность XIII фактора, активность антитромбина III и протеина С, индуцированного стрептокиназой эуглобулинового фибринолиза и концентрации растворимых фибрин-мономерных комплексов по сравнению с контрольными животными. Сравнительный анализ эффективности непрерывного предварительного и дробного в течение 15 минут режимов ТГЧ-облучения на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения NO 150,176-150,664 ГГц на фоне развившегося острого иммобилизационного стресса на показатели коагуляционного звена системы гемостаза и фибринолитической активности крови у крыс-самок показал, что они не однозначны. Так, непрерывный предварительный режим ТГЧ-облучения оказался более эффективным в восстановлении нарушенных показателей коагуляционного гемостаза и фибринолиза, вызванных острым иммобилизационным стрессом по сравнению с дробным облучением, так как произошло полное восстановление нарушенных показателей системы гемостаза у крыс-самок в фазах Dioestrus и Oestrus эстрального цикла. При дробном облучении на фоне острого иммобилизационного стресса наблюдалось лишь частичное восстановление нарушенных коагуляционных и фибринолитических свойств крови у крыс самок в обеих фазах эстрального цикла. 21 Таблица 3 Изменения состояния гемокоагуляции у крыс-самок в фазе Oestrus под воздействием дробного 15-минутного облучения ТГЧ – волнами на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц на фоне острого иммобилизационного стресса Самки в фазе Oestrus Показатели АЧТВ, с Интактные самки Острый иммобилизационный стресс Животные, облученные в течение 15 минут на фоне стресса (n = 15) (n = 15) (n = 15) 21,2 18,0 18,6 (18,0; 27,0) (12,3; 24,1) (13,3; 25,0) P1=0,02 P1=0,034 P2=0,299 18,0 15,5 17,0 Протромбиновое время, с (12,0; 24,3) (11,3; 20,3) (11,5; 25,1) P1=0,033 P1=0,240 P2=0,029 Международное нормализованное отношение (МНО), усл. ед. 1,17 0,80 1,0 (0,9; 1,77) (0,65; 1,55) (0,90; 1,75) P1=0,037 P1=0,287 P2=0,040 20,0 15,0 18,8 (17,0; 28,8) (13,0; 20,1) (16,0; 23,0) P1=0,01 P1=0,213 P2=0,020 4,8 6,5 7,0 Фибриноген, г/л (3,5; 8,0) (4,0; 8,5) (3,0; 8,0) Активность фактора XIII, % Тромбиновое время, с P1=0,04 P1=0,014 P2=0,370 60,5 75,5 62,5 (55,0; 100,0) (50,0; 100,0) (51,0; 70,0) P1=0,01 P1=0,500 P2=0,029 Примечание: то же, что и к табл. 1. 22 Выводы 1. При остром и хроническом иммобилизационном стрессе у крыс-самцов и крыс-самок, находящихся в одной из двух фаз эстрального цикла Dioestrus или Oestrus, наблюдаются нарушения коагуляционных и фибринолитических свойств крови. При остром иммобилизационном стрессе обнаруживаются выраженные гиперкоагуляционные изменения в системе гемостаза и угнетение фибринолитической активности крови. При хроническом иммобилизационном стрессе зафиксированы развитие коагулопатии потребления и значительная активация фибринолитического процесса, характерные для диссеминированного внутрисосудистого свертывания крови. 2. В коагуляционном звене системы гемостаза и фибринолитической активности крови интактных крыс-самцов не наблюдается изменений при воздействии ТГЧ-излучением на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц в непрерывном режиме в течение 30 минут. 3. Нормализующий эффект электромагнитного излучения ТГЧ- диапазона на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на нарушенные коагуляционные и фибринолитические свойства крови крыс-самцов, вызванных острым иммобилизационным стрессом, зависит от времени и режима облучения: при непрерывном облучении животных наиболее эффективным является 30-минутный режим воздействия, при превентивном и дробном режимах- 15-минутное облучение. 4. Сравнительный анализ непрерывного и дробного режимов ТГЧ-облучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на коагуляционные и фибринолитические свойства крови белых крыс-самцов, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса, показал, что дробный режим облучения в течение 15 минут более эффективен в восстановлении нарушенных коагуляционных и фибринолитических свойств крови животных, чем непрерывное ТГЧ-облучение в том же временном диапазоне. 5. Сопоставление результатов влияния предварительного и последующего терагерцового облучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на нарушенные показатели коагуляционной и фибринолитической активности крови белых крыс-самцов показало, что предварительное непрерывное облучение животных в течение 15 минут более эффективно нормализует нарушения в системе коагуляционного гемостаза и фибринолиза по сравнению с облучением на фоне развившегося острого иммобилизационного стресса аналогичного временного диапазона. 6. Эффективность влияния электромагнитного излучения ТГЧ - диапазона на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на коагуляционное звено системы гемостаза и фибринолиз белых крыс-самок, находящихся в одной из двух фаз эстрального цикла Dioestrus и Oestrus, зависит от режима облучения: предварительное непрерывное облучение перед развившимся острым иммобилизационным стрессом в течение 15 минут полностью предупреждает постстрессовые изменения в коагуляционном звене системы гемостаза и фибринолизе; дробное ТГЧ-облучение в течение 15 минут на фоне острого иммобилизационного стресса вызывает лишь частичное восстановление коагуляционной и фибринолитической активности крови облученных крыс-самок. 23 7. Ежедневное предварительное непрерывное ТГЧ - облучение в течение 30 минут крыс-самцов, находящихся в состоянии хронического иммобилизационного стресса, предотвращает развитие нарушений в коагуляционном звене системы гемостаза и фибринолизе. 8. Воздействие ТГЧ-излучения на частотах МСИП оксида азота 150,176150,664 ГГц в течение 15 минут на животных, подвергнутых как острому, так и хроническому иммобилизационному стрессу, сопровождается уменьшением уровня кортикостерона в сыворотке крови, что предотвращает развитие нарушений в коагуляционном звене системы гемостаза и фибринолизе. Практические рекомендации Обнаруженные нормализующее и предотвращающее влияния ЭМИ терагерцового диапазона на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на постстрессовые нарушения коагуляционного звена системы гемостаза и фибринолитическую активность крови белых крыс-самцов и самок, находящихся в одной из двух фаз эстрального цикла, могут быть использованы в клинической практике у пациентов с различными, в том числе сердечно-сосудистыми заболеваниями, сопровождающимися нарушениями внутрисосудистого компонента микроциркуляции – коагуляционных и фибринолитических свойств крови. Список работ, опубликованных по теме диссертации 1. Цымбал, А.А. Связь коагуляционного потенциала крови и электромагнитного КВЧ молекулярного спектра поглощения и излучения оксида азота при экспериментальной стресс-реакции / В.Ф.Киричук, О.Н. Антипова, А.А. Цымбал // Патофизиология и современная медицина: Материалы 2-й международной конференции. - М.: Изд-во РУДН, 2004.- С. 191-193. 2. Цымбал, А.А. Влияние электромагнитного излучения крайне высокой частоты молекулярного спектра поглощения и излучения оксида азота на систему коагуляционного гемостаза при стрессе / В.Ф.Киричук, О.Н. Антипова, А.А. Цымбал // Рос. физиол. журнал им. И.М. Сеченова.- 2004.- № 8.- С. 152. 3. Гемокоагуляция и электромагнитное излучение терагерцового диапазона молекулярного спектра оксида азота / В.Ф.Киричук, А.А. Цымбал, О.Н. Антипова и др. // Биомед. технологии и радиоэлектроника.- 2004.- № 11.-С. 28-34. 4. Цымбал, А.А. Нормализация функционального состояния коагуляционного звена гемостаза под влиянием электромагнитного излучения крайне высокой частоты молекулярного спектра поглощения и излучения оксида азота / А.А. Цымбал, О.Н. Антипова // Молодые ученые - здравоохранению региона: Материалы 65-й науч.практ. конф. студентов и молодых специалистов СГМУ. - Саратов, 2004. - С. 103104. 5. Влияние КВЧ-излучения на частотах молекулярного спектра оксида азота на показатели гемокоагуляции при иммобилизационном стрессе / В.Ф.Киричук, А.А. Цымбал, О.Н. Антипова и др. // Рос. физиол. журнал им. И.М. Сеченова.- 2005.№ 6.- С. 78-85. 24 6. Возможность коррекции острых постстрессовых изменений коагуляционного потенциала крови КВЧ-излучением молекулярного спектра оксида азота / В.Ф.Киричук, А.А. Цымбал, О.Н. Антипова и др. // Клиническая гемостазиология и гемореология в сердечно-сосудистой хирургии: Материалы 2-й Всерос. конф. с международным участием. – М., 2005.- С. 146-147. 7. Цымбал, А.А. Тромбогенный потенциал крови и электромагнитное излучение терагерцового диапазона молекулярного спектра оксида азота в условиях острой стресс-реакции / А.А. Цымбал, О.Н. Антипова // Молодые ученые здравоохранению региона: Материалы 66-й науч.-практ. конф. студентов и молодых специалистов СГМУ. - Саратов, 2004. - С. 100. 8. Патология коагуляционного потенциала крови и электромагнитное излучение терагерцового диапазона молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота / В.Ф.Киричук, А.А. Цымбал, О.Н. Антипова и др. // Современные аспекты диагностики, лечения и профилактики в кардиологии: Сб. науч. тр.- Саратов, 2005.С.178-180. 9. Терагерцовые волны в восстановлении нарушения в системе микроциркуляции / В.Ф. Киричук, О.Н. Антипова, А.А. Цымбал и др. // Физиология и здоровье человека: Научные труды I съезда физиологов СНГ. - М., 2005.- С. 235. 10. Цымбал, А.А. Патология гемокоагуляции в условиях острой стресс-реакции и терагерцовая терапия / В.Ф.Киричук, А.А. Цымбал, О.Н. Антипова // Гемореология в микро- и макроциркуляции: Материалы международной конференции.- Ярославль, 2005.- С. 94. 11. Цымбал, А.А. Оценка эффективности терагерцовой терапии при острой патологии коагуляционного звена системы гемостаза / В.Ф.Киричук, А.А. Цымбал, О.Н. Антипова // Тромбозы, геморрагии, ДВС-синдром. Современные достижения: Материалы Всерос. конф.- Ярославль, 2005.-С. 57-58. 12. Цымбал, А.А. Особенности постстрессовой патологии системы гемостаза и терагерцовая терапия / В.Ф.Киричук, А.А. Цымбал, О.Н. Антипова // Тромбозы, геморрагии, ДВС-синдром. Современные достижения: Материалы Всерос. конф.Ярославль, 2005.-С. 58-60. 13. Коррекция острых стрессзависимых нарушений системы гемостаза с помощью аппарата КВЧ-NO / В.Ф.Киричук, А.А. Цымбал, О.Н. Антипова и др. // Медицинская техника.- 2006.- № 1.-С. 29-33. 14. Патология коагуляционного звена системы гемостаза, фибринолитического потенциала крови в условиях хронического стресса и терагерцовая терапия / В.Ф.Киричук, А.А. Цымбал, О.Н. Антипова и др. // Биомед. технологии и радиоэлектроника.- 2006.- № 8-9.-С. 14-22. 15. Состояние системы гемостаза в условиях хронического стресса и терагерцовая терапия / В.Ф.Киричук, А.А. Цымбал, О.Н. Антипова и др. // Тромбоз, гемостаз и реология.- 2006.- № 2.-С. 35-42. 16. Цымбал, А.А. Возможности коррекции патологии системы гемокоагуляции методом терагерцовой терапии / В.Ф.Киричук, А.А. Цымбал, О.Н. Антипова // Микроциркуляция в клинической практике: Материалы 2-й Всерос. конф. с международным участием. – М., 2006.-С. 86. 25 17. Цымбал, А.А. Коррекция острой стресс-зависимой коагуляционной патологии системы гемостаза методом КВЧ – терапии / А.А. Цымбал // Тромбоз, гемостаз и реология.- 2006.- № 2.-С. 43-49. 18. Цымбал, А.А. Терагерцовые волны на частотах оксида азота в нормализации нарушенных коагуляционных и фибринолитических свойств крови / А.А. Цымбал // Молодежь и наука: итоги и перспективы: Материалы межрегиональной науч.-практ. конф. с международным участием СГМУ.- Саратов, 2006.-С. 120. 19. Коагуляционный гемостаз, система фибринолиза и терагерцовая терапия в условиях острого экспериментального стресса / В.Ф.Киричук, А.А. Цымбал, О.Н. Антипова и др. // Миллиметровые волны в биологии и медицине.- 2006.- № 3.-С. 2939. 20. Патология гемокоагуляции, фибринолиза в условиях хронического стресса и терагерцовая терапия / В.Ф.Киричук, А.А. Цымбал, О.Н. Антипова и др. // Миллиметровые волны в биологии и медицине.- 2006.- № 3.-С. 40-50. 21. Характер изменений нарушенных коагуляционных, фибринолитических, гемореологических свойств крови, функциональной активности тромбоцитов, гемодинамических показателей под влиянием терагерцовой терапии / В.Ф.Киричук, А.А. Цымбал, О.Н. Антипова и др. // Здоровье и образование в XXI веке: Материалы VII международной науч.-практ. конф. – М., 2006.-С. 236. 22. Гемокоагуляция и фибринолитический потенциал крови в условиях хронического стресса и терагерцовая терапия / В.Ф.Киричук, А.А. Цымбал, О.Н. Антипова и др. // Рос. физиол. журнал им. И.М. Сеченова.- 2007.- № 1.- С. 46-54. 23. Особенности системы коагуляционного гемостаза при стрессе и терагерцовая терапия / В.Ф.Киричук, А.А. Цымбал, О.Н. Антипова и др. // Клиническая гемостазиология и гемореология в сердечно-сосудистой хирургии: Материалы 3-й Всерос. конф. с международным участием. – М., 2007.- С. 95-96. 24. Характер изменений нарушенных коагуляционных и фибринолитических свойств крови под влиянием терагерцовых волн на частотах оксида азота 150,176150,664 ГГц / В.Ф.Киричук, А.А. Цымбал, А.П. Креницкий и др. // Миллиметровые волны в медицине и биологии: Материалы 14-го Российского симпозиума с международным участием.- М., 2007.-С. 124-127. 25. Цымбал, А.А. Патология системы свертывания крови в условиях острой стрессреакции и терагерцовая терапия / А.А. Цымбал // Актуальные проблемы экспериментальной и клинической медицины: Материалы 65-й юбилейной науч.практ. конф. молодых ученых и студентов с международным участием.- Волгоград, 2007.-С. 121. 26. Цымбал, А.А. Изменение концентрации кортикостерона – объективного маркера острого и хронического стресса и терагерцовая терапия / А.А. Цымбал // Аспирантские чтения: Материалы межрегиональной конф., посвященной 150- летию первого ректора императорского Саратовского университета В.И. Разумовского.Саратов, 2007.-С. 175-176. 26 Изобретения 1. Пат. 2284837 РФ, МКИ А 61N5/02 Способ профилактики и коррекции стрессорных повреждений организма / В.Ф. Киричук, А.А. Цымбал, О.Н. Антипова, А.П. Креницкий, В.Д. Тупикин, А.В. Майбородин, А.Н. Иванов (РФ ЦНИИИА).№ 2005103561/14; Заявл. 14.02.05; Опубл. 10.10.06. Бюл. № 28. Список принятых сокращений АЧТВ - активированное частичное тромбопластиновое время КВЧ - крайне высокие частоты ММ-волны - миллиметровые волны ММД - миллиметровый диапазон МНО - международное нормализованное отношение МСИП - молекулярный спектр излучения и поглощения ТГЧ - диапазон - терагерцовый диапазон ТГЧ - терапия - терагерцовая терапия ЭМИ - электромагнитное излучение NO - оксид азота Выражаю искреннюю благодарность за помощь в выполнении работы генеральному директору ОАО ЦНИИИА (г. Саратов) А.П. Креницкому; нач. отдела спектрально-молекулярных измерений ОАО ЦНИИИА (г.Саратов) А.В. Майбородину; зам. ген. директора ОАО ЦНИИИА (г. Саратов) В.Д. Тупикину. 27 28
