Программа курса (внутренний ресурс)

advertisement
Белорусский государственный университет
УТВЕРЖДАЮ
Декан биологического факультета
________________ В.В. Лысак
«___» ____________ 2010 г.
Регистрационный № УД-
/р.
Иммуноферментный анализ
Учебная программа (рабочий вариант) для специальности:
1-31 01 01 Биология, направления 1-31 01 01-03 Биотехнология
Факультет ___биологический____________________________________
(название факультета)
Кафедра _____биохимии________________________________________
(название кафедры)
Курс (курсы) ___4____________________________
Семестр (семестры) ___7__________________________
Лекции _____26_____
Экзамен _______7_________
(количество часов)
(семестр)
Практические (семинарские)
занятия ___________
Зачет _________________
(количество часов)
(семестр)
Лабораторные
занятия ____10______
Курсовой проект (работа) ________
(количество часов)
КСР
(семестр)
4
(количество часов)
Всего аудиторных
часов по дисциплине ___40___
(количество часов)
Всего часов
по дисциплине ___40____
Форма получения
высшего образования __дневная___
(количество часов)
Составил(а) И.В. Семак, к.б.н., доцент
(И.О., Фамилия, степень, звание)
2010 г.
Учебная программа составлена на основе _______учебной программы
«Иммуноферментый анализ». Утверждена 04.12.2006г., регистрационный
номер____УД-105/баз_____________________________
(название типовой учебной программы (учебной программы (см. разделы 5-7 Порядка)), дата утверждения,
регистрационный номер)
Рассмотрена и рекомендована к утверждению на заседании кафедры
биохимии
(название кафедры)
18.06.2010 г., протокол № 11
(дата, номер протокола)
Заведующий кафедрой
________________
(подпись)
И.В. Семак
(И.О.Фамилия)
Одобрена и рекомендована к утверждению учебно-методической комиссией
биологического факультета
.06. 2010 г., протокол № ____
(дата, номер протокола)
Председатель
________________ В.Д. Поликсенова
ПОЯСНИТЕЛЬНАЯ ЗАПИСКА
Иммуноферментный анализ (ИФА) является одним из наиболее
активно развивающихся направлений химической энзимологии как в нашей
стране, так и за рубежом. Это обусловлено тем, что в ИФА уникальная
специфичность иммунохимического анализа сочетается с высокой
чувствительностью детекции ферментативной метки. Высокая стабильность
реагентов, простота методов регистрации и многие другие достоинства
метода ИФА способствовали его широкому внедрению в различные области
медицины, сельское хозяйство, биологическую промышленность, охрану
окружающей среды, а также в научные исследования.
Цель настоящего курса – дать представление об иммуноферментном
анализе как методе исследования, научить получать реагенты для ИФА,
разрабатывать схемы проведения ИФА и трактовать результаты ИФА.
Задачи курса:
- Освоение студентами основных принципов иммуноферментного
анализа;
- Закрепление теоретических положений лекционного курса на
лабораторных занятиях.
В результате изучения дисциплины обучаемый должен:
знать:
- структуру и свойства антигенов и антител;
- физико-химические закономерности взаимодействия антигенантитело, методы определения и способы расчета аффинности антител;
- ферменты, используемые для ИФА и кинетические закономерности
протекания ферментативных реакций;
- способы получения реагентов для ИФА;
- классификацию методов ИФА, их особенности и схемы проведения;
- современные информационные технологии, используемые в ИФА;
- новейшие достижения и перспективы развития ИФА.
уметь:
- получать реагенты для ИФА;
- разрабатывать схемы проведения ИФА;
- представлять и обрабатывать данные ИФА;
- пользоваться специализированными компьютерными базами данных
и ресурсами Интернета.
При чтении лекционного курса необходимо применять наглядные
материалы в виде слайдов, презентаций, таблиц.
Эффективность самостоятельной работы студентов целесообразно
проверять в ходе текущего и итогового контроля знаний в форме устного
опроса и тестовых заданий по темам курса. Для общей оценки качества
усвоения студентами учебного материала рекомендуется использование
рейтинговой системы.
Учебный курс рассчитан на 40 часов: из них 26 лекционных, 10
лабораторных и 4 КСР.
СОДЕРЖАНИЕ УЧЕБНОГО МАТЕРИАЛА ПРОГРАММЫ
Введение
Современный иммунохимический анализ. Общая характеристика
иммуноферментного анализа; преимущества и недостатки ферментзависимых меток. Области применения ИФА.
Структура и свойства антигенов и антител
Антигены. Структурные основы антигенной специфичности белков,
полисахаридов, нуклеиновых кислот. Гаптены. Использование гаптенов для
изучения
специфичности
антигенных
детерминант,
работы
К.
Ландштейнера. Требования, предъявляемые к антигенам, использующимся в
ИФА в качестве меченых препаратов и стандартов.
Антитела.
Общая
характеристика
структуры
молекул
иммуноглобулинов. Первичная структура H- и L-цепей иммуноглобулинов.
Трехмерная структура иммуноглобулинов. Антигенсвязывающие центры
антител. Характеристика классов иммуноглобулинов: IgG, IgA, IgM, IgE,
IgD.
Специфичность и гетерогенность антител, перекрестная реактивность.
Понятие аффинности и авидности антител.
Физико-химические закономерности взаимодействия
антиген-антитело
Термодинамические и кинетические закономерности реакции
взаимодействия антиген-антитело. Методы определения аффинности
антител: равновестный диализ, фракционное осаждение, флуоресцентные
методы. Способы расчета констант комплексообразования реакции антигенантитело: взаимодействие одной субпопуляции антител с моновалентным
антигеном; взаимодействие одной субпопуляции антител с поливалентным
антигеном; взаимодействие двух субпопуляций антител с моновалентным
антигеном; взаимодействие поликлональной антисыворотки с антигеном.
Ферментные метки в иммуноанализе
Основные понятия и термины, используемые в энзимологии. Физикохимические и каталитические свойства ферментов. Кинетические
закономерности протекания ферментативных реакций. Экспериментальные
методы определения ферментативной активности. Критерии выбора
ферментных меток. Характеристика ферментов, используемых в ИФА в
качестве меток: пероксидаза хрена, глюкозооксидаза, щелочная фосфатаза,
-D-галактозидаза, глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа, малатдегидрогеназа.
Факторы, влияющие на активность ферментов при проведении ИФА.
Получение реагентов для ИФА
Получение антител. Иммуногенность антигенов. Антисыворотки как
источники поликлональных антител. Иммунизация, факторы, влияющие на
успех иммунизации: природа и доза иммуногена, использование адъюванта,
вид взятых для иммунизации животных, способ иммунизации, порядок и
время введения антигена и сбора антисыворотки. Хранение антисывороток.
Тестирование антисывороток.
Моноклональные антитела. Получение гибридом. Использование
моноклональных антител в иммуноанализе.
Выделение и очистка антител из различных источников: осаждение
сульфатом аммония, хроматография, иммуноадсорбция.
Получение иммобилизованных антител и антигенов: носители,
применяемые в
ИФА;
иммобилизация антител
и
антигенов;
неспецифическое
связывание
с
иммуносорбентом.
Cвойства
иммобилизованных антител.
Получение коньюгатов: синтез коньюгатов гаптенов с носителями для
получения антител; получение конъюгатов фермент-белок; получение
конъюгатов гаптен-фермент; получение конъюгатов антигенов (антител) с
субстратами.
Методы ИФА
Общая классификация методов ИФА: анализ типа 1 и анализ типа 2;
конкурентные и неконкурентные, гетерогенные и гомогенные, твердофазные
и гомогенно-гетерогенные методы анализа.
Гетерогенные методы ИФА антигенов и антител: методы, основанные
на определении специфических иммунных комплексов (тип 1);
конкурентные и неконкурентные методы, основанные на определении
оставшихся свободными центров специфического связывания (тип 2).
Методы гетерогенного ИФА, основанные на нековалентном способе
введения ферментной метки. Твердофазный ИФА в проточных системах.
Новые подходы в гетерогенном ИФА.
Гомогенные методы ИФА: методы анализа антигенов, основанные на
использовании меченных ферментом антигенов; методы ИФА антигенов,
основанные на использовании неферментных меток.
Люминесцентный иммуноанализ.
Направления и перспективы развития ИФА.
Методы представления и обработки экспериментальных данных
Анализ результатов определения антигена. Особенности анализа
экспериментальных данных определения антител. Источники ошибок при
проведении ИФА. Параметры, характеризующие ИФА: предел
обнаружения, длительность, точность и специфичность.
СОДЕРЖАНИЕ УЧЕБНОГО МАТЕРИАЛА ПРОГРАММЫ
№
п/п
Наименование
разделов, тем
1
Введение
1
2
Структура и свойства
антигенов и антител
Физико-химические
закономерности
взаимодействия
антиген-антитело
Ферментные метки в
иммуноанализе
Получение реагентов
для ИФА
Методы ИФА
Методы представления
и обработки
экспериментальных
данных
ИТОГО:
4
3
4
5
6
7
Лекции
Количество часов
Практич. Лаб.
КСР
семинар
занятия
6
3
6
3
6
3
4
26
10
4
Самост.
работа
1
1.
1
2
3
2
3
ИММУНОФЕРМЕНТНЫЙ АНАЛИЗ (48ч)
26
2
Введение.
Современный иммунохимический анализ. Общая
характеристика иммуноферментного анализа;
преимущества и недостатки фермент-зависимых
меток. Области применения ИФА.
3
Структура и свойства антигенов и антител.
Антигены.
Структурные основы антигенной специфичности
белков, полисахаридов, нуклеиновых кислот.
Гаптены. Использование гаптенов для изучения
специфичности антигенных детерминант, работы
К. Ландштейнера. Требования, предъявляемые к
антигенам, использующимся в ИФА в качестве
меченых препаратов и стандартов.
2
Структура и свойства антигенов и антител.
Антитела.
Общая характеристика структуры молекул
иммуноглобулинов. Первичная структура H- и Lцепей иммуноглобулинов. Трехмерная структура
иммуноглобулинов. Антигенсвязывающие центры
антител. Характеристика классов
иммуноглобулинов: IgG, IgA, IgM, IgE, IgD.
Специфичность и гетерогенность антител,
4
5
10
6
4
Формы контроля
знаний
Литература
Материальное
обеспечение занятия
(наглядные,
методические
пособия и др.)
управляемая
самостоятельная
работа студента
Название раздела, темы, занятия; перечень
изучаемых вопросов
практические
(семинарские)
занятия
лабораторные
занятия
Количество аудиторных часов
лекции
Номер раздела, темы,
занятия
УЧЕБНО-МЕТОДИЧЕСКАЯ КАРТА
7
8
9
Рисунки,
схемы для
кодоскопа.
ЛО-1,3,4
ЛД1,2,3,5,7
КСР
Рисунки,
схемы для
кодоскопа.
ЛО-2,3
ЛД-2,4
Рисунки,
схемы для
кодоскопа.
ЛО-2,3,7
ЛД-2,4
4
5
6
7
8
перекрестная реактивность. Понятие аффинности
и авидности антител.
Физико-химические закономерности
взаимодействия антиген-антитело.
Термодинамические и кинетические
закономерности реакции взаимодействия антигенантитело.
Методы определения аффинности антител:
Равновестный диализ, фракционное осаждение,
флуоресцентные методы.
Способы расчета констант
комплексообразования реакции антигенантитело.
Взаимодействие одной субпопуляции антител с
моновалентным антигеном; взаимодействие
одной субпопуляции антител с поливалентным
антигеном; взаимодействие двух субпопуляций
антител с моновалентным антигеном;
взаимодействие поликлональной антисыворотки с
антигеном.
Ферментные метки в иммуноанализе
Основные понятия и термины, используемые в
энзимологии. Физико-химические и
каталитические свойства ферментов.
Кинетические закономерности протекания
ферментативных реакций. Экспериментальные
методы определения ферментативной активности.
Критерии выбора ферментных меток.
Характеристика ферментов, используемых в ИФА
в качестве меток: пероксидаза хрена,
глюкозооксидаза, щелочная фосфатаза, -Dгалактозидаза, глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа,
малатдегидрогеназа. Факторы, влияющие на
активность ферментов при проведении ИФА.
Получение реагентов для ИФА. Получение
антител.
Иммуногенность антигенов. Антисыворотки как
источники
поликлональных
антител.
2
Рисунки,
схемы для
кодоскопа.
3
Рисунки,
схемы для
кодоскопа.
Рисунки,
схемы для
кодоскопа.
2
4
ЛО-1,2,3
ЛД-1,2
реферат
ЛО-1,2,3
ЛД-1,2
ЛО-1,2,3
ЛД-1,2
Рисунки,
схемы для
кодоскопа.
ЛО-1,2,3
ЛД-1,2,6
Рисунки,
схемы для
кодоскопа.
ЛО1,2,3,5,7
ЛД-1,2,3,4
9
9
Иммунизация, факторы, влияющие на успех
иммунизации: природа и доза иммуногена,
использование адъюванта, вид взятых для
иммунизации животных, способ иммунизации,
порядок и время введения антигена и сбора
антисыворотки.
Хранение
антисывороток.
Тестирование антисывороток. Моноклональные
антитела. Получение гибридом. Использование
моноклональных антител в иммуноанализе.
Выделение и очистка антител из различных
источников: осаждение сульфатом аммония,
хроматография, иммуноадсорбция. Получение
иммобилизованных
антител
и
антигенов:
носители, применяемые в ИФА; иммобилизация
антител
и
антигенов;
неспецифическое
связывание с иммуносорбентом. Cвойства
иммобилизованных антител.
Получение коньюгатов: синтез коньюгатов
гаптенов с носителями для получения антител;
получение конъюгатов фермент-белок; получение
конъюгатов гаптен-фермент; получение
конъюгатов антигенов (антител) с субстратами.
Методы ИФА
4
Общая классификация методов ИФА: анализ типа
1 и анализ типа 2; конкурентные и
неконкурентные, гетерогенные и гомогенные,
твердофазные и гомогенно-гетерогенные методы
анализа.
Гетерогенные методы ИФА антигенов и антител:
методы,
основанные
на
определении
специфических иммунных комплексов (тип 1);
конкурентные
и
неконкурентные
методы,
основанные
на
определении
оставшихся
свободными центров специфического связывания
(тип 2). Методы гетерогенного ИФА, основанные
на нековалентном способе введения ферментной
метки. Твердофазный ИФА в проточных
системах. Новые подходы в гетерогенном ИФА.
Рисунки,
схемы для
кодоскопа.
О.Л.-1,2,3
Д.Л.-1,2
КСР
10
Гомогенные методы ИФА: методы анализа
антигенов,
основанные
на
использовании
меченных ферментом антигенов; методы ИФА
антигенов,
основанные
на
использовании
неферментных меток.
Люминесцентный иммуноанализ.
Направления и перспективы развития ИФА.
2
Методы представления и обработки
экспериментальных данных
Анализ результатов определения антигена.
Особенности анализа экспериментальных данных
определения антител. Источники ошибок при
проведении ИФА. Параметры, характеризующие
ИФА: предел обнаружения, длительность,
точность и специфичность.
Рисунки,
схемы для
кодоскопа.
ЛО-1,2,3
ЛД.-1,2,6,7
ИНФОРМАЦИОННАЯ ЧАСТЬ
Основная и дополнительная литература
№
№
п/п
Список литературы
Основная (ЛО)
1. Теория и практика иммуноферментного анализа / А.М. Егоров,
А.П. Осипов, Б.Б. Дзантиев, Е.М. Гаврилова – М.: Высшая
школа.
2. Иммунология: В 3-х т. Т.1, 3. Пер. с англ. / Под ред. У. Пола. – М.:
Мир.
3. Петров Р.В. Иммунология. Петров Р.В. - М.: Высшая школа.
4. Иммуноферментный анализ / Под ред. Г.Г. Нго, Г.М. Ленкофф. –
М.: Мир.
5. Иммунологические методы / Под ред. Г. Фримеля. М.:
Медицина,.
6. Новые методы иммуноанализа / Под ред. У. Коллинза. - М.: Мир.
7. Антитела. Методы. В 2-х кн. / Под ред. Д. Кэтти. – М.: Мир.
Дополнительная (ЛД)
1. ELISA: Theory and practice / Ed. by John R. Crowther. – Humana
Press Inc.
2. Antibodies. A Laboratory Manual / Ed. by E. Harlow, D. Lane. – Cold
Spring Harbor Laboratory.
3. Иммунологические методы исследований / Под ред. И.
Лефковитса, Б. Перниса. – М.: Мир.
4. Моноклональные антитела / Под ред. Р.Г. Кеннет, Т. Дж. МакКерн, К.Б. Бехтол. – М.: Медицина.
5. Биотехнология. В 8 кн. / Под ред. Н.С. Егорова, В.Д. Самуилова.
Кн. 3. Клеточная инженерия – М.: Высшая школа.
6. Неизотопные методы иммуноанализа // Итоги науки и техники. –
М.: ВИНИТИ,. Сер. Биотехнология. Т.3.
7. Новые направления в развитии иммунологических методов
анализа // Итоги науки и техники. – М.: ВИНИТИ,. Сер.
Биотехнология. Т.24.
Год
издания
1991
1987-1989
1983
1988
1987
1991
1991
1995
1988
1988
1983
1987
1987
1990
ПРОТОКОЛ СОГЛАСОВАНИЯ УЧЕБНОЙ ПРОГРАММЫ
ПО ИЗУЧАЕМОЙ УЧЕБНОЙ ДИСЦИПЛИНЕ
С ДРУГИМИ ДИСЦИПЛИНАМИ СПЕЦИАЛЬНОСТИ
Название
дисциплины,
с которой
требуется
согласование
Название
кафедры
1. Иммунология
Каф.
микробиологии
Предложения
об изменениях в содержании
учебной программы
по изучаемой учебной
дисциплине
Решение,
принятое
кафедрой,
разработавшей
учебную
программу (с
указанием даты и
номера
протокола)1
ПРИЛОЖЕНИЕ 7
ДОПОЛНЕНИЯ И ИЗМЕНЕНИЯ К УЧЕБНОЙ ПРОГРАММЕ
ПО ИЗУЧАЕМОЙ УЧЕБНОЙ ДИСЦИПЛИНЕ
на _____/_____ учебный год
№№
пп
Дополнения и изменения
Основание
Учебная программа пересмотрена и одобрена на заседании кафедры
(протокол № ____ от ________ 2010 г.)
Заведующий кафедрой
_____________________ _______________ __________________
(степень, звание)
(подпись)
(И.О.Фамилия)
УТВЕРЖДАЮ
Декан факультета
_____________________ _______________ __________________
(степень, звание)
(подпись)
(И.О.Фамилия)
При наличии предложений об изменениях в содержании учебной программы по изучаемой учебной
дисциплине
1
ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОКОНТРОЛЯ
“ИММУНОФЕРМЕНТНЫЙ АНАЛИЗ”
1. Основные иммунологические понятия. Современный иммунохимический анализ.
Методы иммуноанализа без использования меченых реагентов. Методы иммуноанализа,
основанные на использовании меченых реагентов. Радиоиммунологический анализ (РИА).
Общая характеристика иммуноферментного анализа; преимущества и недостатки
фермент-зависимых меток. Сравнение ИФА и РИА. Области применения ИФА.
2. Антигены. Структурные основы антигенной специфичности белков,
полисахаридов, нуклеиновых кислот. Гаптены. Использование гаптенов для изучения
специфичности антигенных детерминант, работы К. Ландштейнера. Требования,
предъявляемые к антигенам, использующимся в ИФА в качестве меченых препаратов и
стандартов.
3. Свойства и функции антител. Общая характеристика структуры молекул
иммуноглобулинов. Первичная структура H- и L-цепей иммуноглобулинов. Трехмерная
структура иммуноглобулинов. Антигенсвязывающие центры антител. Характеристика
классов иммуноглобулинов: IgG, IgA, IgM, IgE, IgD. Антиген-связывающие центры
антител. Специфичность и гетерогенность антител, перекрестная реактивность. Понятие
аффинности и авидности антител.
4. Физико-химические закономерности взаимодействия антиген-антитело. Методы
определения аффинности антител. Равновесный диализ. Методы фракционного
осаждения. Гель-фильтрация. Флуоресцентные методы. Тушение собственной
флуоресценции антител.
Методы расчета физико-химических параметров реакции антиген-антитело.
Представление экспериментальных данных в прямых координатах. Метод двойных
обратных координат. Метод Скэтчарда. Метод Хилла. Взаимодействие одной
субпопуляции антител с моновалентным антигеном. Взаимодействие одной субпопуляции
антител с поливалентным антигеном. Взаимодействие двух субпопуляций антител с
моновалентным антигеном. Взаимодействие поликлональной антисыворотки с антигеном.
5. Термодинамические и кинетические закономерности реакции взаимодействия
антиген-антитело. Константа комплексообразования как термодинамический параметр,
характеризующий изменение свободной энергии взаимодействия антиген-антитело.
Зависимость константы комплексообразования от температуры.
6.
Кинетические
характеристики
взаимодействия
антиген-антитело.
Экспериментальные методы определения кинетических констант. Определение скоростей
комплексообразования с использованием меченых реагентов. Определение константы
скорости ассоциации. Определение константы скорости диссоциации. Метод
температурного скачка.
7. Ферменты как метки в иммуноанализе. Основные физико-химические и
кинетические свойства ферментов. Кинетические закономерности протекания
ферментативных реакций. Экспериментальные методы определения ферментативной
активности. Критерии выбора ферментных меток.
Физико-химические свойства ферментов, используемых в ИФА. глюкозооксидаза,
щелочная
фосфатаза,
-D-галактозидаза,
глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа,
малатдегидрогеназа.
Фотометрические,
флуоресцентные,
хемилюминесцентные
субстраты;
преимущества и недостатки.
8. Получение реагентов для ИФА. Структура иммуногена. Получение
антисывороток. Антисыворотки как источники поликлональных антител. Иммунизация.
Факторы, влияющие на успех иммунизации: природа и доза иммуногена, использование
адъюванта, вид взятых для иммунизации животных, способ иммунизации, порядок и
время введения антигена и сбора антисыворотки. Хранение антисывороток. Тестирование
антисывороток.
Моноклональные антитела. Получение гибридом. Использование моноклональных
антител в иммуноанализе. Выделение и очистка антител из различных источников:
осаждение сульфатом аммония, хроматография, иммуноадсорбция.
Получение иммобилизованных антител и антигенов: носители, применяемые в ИФА;
иммобилизация антител и антигенов; неспецифическое связывание с иммуносорбентом.
Cвойства иммобилизованных антител.
Методы получения конъюгатов для ИФА. Основные требования к методам синтеза
коньюгатов.
Синтез коньюгатов гаптенов с носителями для получения антител. Получение
конъюгатов носителей с гаптенами, содержащими карбоксильную группу. Получение
конъюгатов носителей с гаптенами, содержащими аминогруппу. Получение конъюгатов
носителей с гаптенами, содержащими гидроксильную или карбонильную группу.
Получение конъюгатов белок-фермент. Гомобифункциональные сшивающие
агенты. Получение конюъгатов с помощью глутарового альдегида, п-безохинона,
малеимидный метод. Гетеробифункциональные сшивающие агенты. Получение
конъюгатов с помощью активированных эфиров малеимидных соединений.
Перийодатный метод (метод Накане).
Нековалентные методы.
Получение конъюгатов гаптен-фермент. Получение конъюгатов ферментов с
гаптенами, содержащими карбоксильную группу. Метод смешанных ангидридов.
Карбодиимидный мегод.
Получение конъюгатов гаптенов с ферментами, содержащими аминогруппы.
Методы с применением гомо- и гетеробифукциональных сшивающих реагентов.
9. Методы ИФА. Общая классификация методов ИФА: анализ типа 1 и анализ типа
2; конкурентные и неконкурентные, гетерогенные и гомогенные, твердофазные и
гомогенно-гетерогенные методы анализа.
Гетерогенные методы ИФА антигенов и антител: методы, основанные на
определении специфических иммунных комплексов (тип 1); конкурентные и
неконкурентные методы, основанные на определении оставшихся свободными центров
специфического связывания (тип 2).
Методы гетерогенного ИФА, основанные на нековалентном способе введения
ферментной метки. Твердофазный ИФА в проточных системах. Новые подходы в
гетерогенном ИФА.
Гомогенные методы ИФА: методы анализа антигенов, основанные на
использовании меченных ферментом антигенов; методы ИФА антигенов, основанные на
использовании неферментных меток.
Направления и перспективы развития ИФА.
10. Методы представления и обработки экспериментальных данных. Анализ
результатов определения антигена. Особенности анализа экспериментальных данных
определения антител. Источники ошибок при проведении ИФА. Параметры,
характеризующие ИФА: предел обнаружения, длительность, точность и специфичность.
Темы лабораторных занятий
по курсу «Иммуноферментный анализ» (10 ч)
1) Освоение микропланшетного ридера Multiscan (2 час).
2) Подбор оптимальных условий проведения реакции окисления
тетраметилбензидина пероксидазой хрена в микропланшетах и регистрации продуктов
реакции с помощью микропланшетного ридера Multiscan (4 часа).
3) Определение кинетических параметров окисления тетраметилбензи-дина
пероксидазой хрена (4 часа).
Download