ИССЛЕДОВАНИЕ РАНОЗАЖИВЛЯЮЩИХ И
advertisement
ИССЛЕДОВАНИЕ РАНОЗАЖИВЛЯЮЩИХ И ИММУНОМОДУЛИРУЮЩИХ СВОЙСТВ ПРЕПАРАТА НАРУЖНОГО ДЕЙСТВИЯ «ТИМОГЕЛЬ» Филатова А.В, Тураев А.С, Выпова Н.Л Ташкентский институт Биоорганической химии им. акад. А. С. Садыкова г. Ташкент, Узбекистан albfil@mail.ru Цель исследования – исследование ранозаживляющих и иммуномодулирующих свойств препарата «Тимогель» Объект и методы: Объектом исследования является новый оригинальный препарат с ранозаживляющим действием на основе синтетического полимера, содержащий в своем составе антибактериальный, антисептический и иммуномодулирующий препараты, метронидазол, хлоргексидин и тимоптин. В работе использован комплекс классических и современных методов анализа, в частности метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), позволяющей разделить и количественно определить компоненты ранозаживляющего геля, рентген, электронная микроскопия, элементный анализ. Проблема создания ранозаживляющих препаратов остается актуальной для современной медицины в связи с большим количеством больных, поступающих с различными видами травм, ожогов, открытых резаных, колотых и рваных ран, течение которых часто сопровождается развитием гнойных процессов 1,2. В настоящее время используется ряд ранозаживляющих препаратов на основе антисептиков, обезболивающих и антибактериальных средств. Однако большинство из них обладают однонаправленным действием, тогда как постоянно возникает необходимость в создании полифункциональных препаратов, пригодных для лечения ран различных фаз раневого процесса. В этом отношении гидрогели, содержащие в своем составе комплекс лекарственных веществ, являются перспективными для создания новых ранозаживляющих средств 3. Очевидный прогресс активной хирургической обработки гнойных ран не исключает традиционного метода местного медикаментозного лечения и под повязкой. Накопленный большой клинический опыт, и имеющиеся экспериментальные данные неопровержимо доказывают, что местное медикаментозное лечение ран должно строиться строго в соответствии с теми процессами, которые происходят в разные стадии раневого процесса, помогая их естественному ходу, а не тормозя его 4. По современным представлениям эффективное лечение гнойной раны в первой фазе обеспечивается усилением оттока из раны, некролитическим действием, подавлением микрофлоры, а во второй и третьей репаративно-восстановительных фазах, стимулированием репаративных процессов, созданием протекторного действия на растущие грануляции и защитой раны от вторичной инфекции. Используемые в клинической практике многокомпонентные мази "Левосин" и "Левомеколь", линимент "Левомицетин-Акри5% а также, линимент синтомицина 1%, 5%, 10%-ный, содержащие действующее вещество левомицетин (право- и левовращающие изомеры), обладающие антимикробными, осмотическими и некролитическими свойствами, сокращают сроки лечения или подготовки раны к оперативному закрытию швами или аутодермопластикой. Однако, левомицетин по своим фармакотерапевтическим свойствам оптимален для лечения в I фазе раневого процесса, а мазевые основы, на которых разработаны его мягкие лекарственные формы плохо смешиваются с гнойным экссудатом и подходят для П (репаративно-восстановигельной) фазы, что в целом снижает эффективность лекарственного препарата и не в полной мере удовлетворяют современную хирургию 5,6. Поэтому разработка и создание новых стабильных и эффективных лекарственных средств ранозаживляющего действия, клинико-фармакологический эффект которых учитывает основные стадии течения раневого процесса, является актуальной и имеет большое социально-экономическое значение. Результаты исследований Разработана оригинальная гидрогелевая композиция, на основе синтетического полимера с включением в состав геля известных антимикробного препарата метронидозола, антисептического препарата хлоргексидина и препарата иммуномодулятораТимоптин - комплекс кислых полипептидов из вилочковой железы млекопитающих, содержащих альфа-1-тимозин. Оказывает иммуномодулирующее действие, повышает неспецифическую резистентность организма, стимулирует процессы регенерации тканей и кроветворения. Ранее проведены исследования по разработке и установлению физикохимических и медико-биологических показателей композиции с различной концентрациейгелевой основы и с различным содержанием отдельных активных ингредиентов – субстанций лекарственных препаратов 7,8. Впервые установлено, что ранозаживляющая композиция при контакте с кожной поверхностью и с открытой раной не оказывают токсического, аллергенного, канцерогенного действия. При этом композиция обладает достаточной пластичностью, устойчивостью консистенции, способностью равномерного нанесения их на поверхность раны и они не образуют корку 9. Впервые предложена композиция для применения в лечении инфицированных ран, имеющая состав: Карбопол 0,5-1,0% Этанол 2-6% Хлоргексидин0,01-0,03% Метронидазол 0,1-0,3 % Тимоптин 0,0001-0,001% Остальное вода для инъекции до 100% На модели экспериментальной кожной раны у крыс и кроликов было показано, Тимогель обладает ранозаживляющим действием и на 5-17 дней сокращает время очищения и заживления ран и превосходит по эффективности гель Солкосерил. Тимогель обладает выраженным противоожоговым действием и на 7-13 дней сокращает время очищения и заживления ран. Результаты доклинических испытаний специфической активности и гистологические исследования проведены на кафедре фармакологии Ташкентского фармацевтического института. В таблице 1 приведены данные исследования ранозаживляющей активности «Тимогеля» по сравнению с мазью «Левомиколь» и «Солкосерил» Таблица 1 Результаты лечения накожных экспериментальных ран ранозаживляющим гелем Тимогель в сравнении с гелемСолкосерил и мазью Левомиколь (Мm; n= 15;) №, Препарат Сроки, дни Скорость гр. заживления Очищение ран Заживление ран ран на 7 сутки 1 Контроль 50 141,2 292,0 2 Солкосерил гель 80 101,0 202,0 3 Тимогель 90 81,0 151,0 4 Левомиколь мазь 10±2 18±2,0 86 1. *Р 0,01 по отношению к контролю Как видно из таблицы, препарат «Тимогель» превосходит гель Солкосерил и Левомиколь, как по времени очищения и полного заживления ран, так и по скорости заживления ран Таблица 2 Изучение ранозаживляющего действия геля «Тимогель» на модели термического ожога у крыс. Препара Средняя площадь ран, см2 ты Исход. 1сутки 3сутки 7сутки 14сутки 21сутки 0,05±0,004 Конт 1,4±0,1 1,4±0,1 1,0±0,1 0,84±0,05 0,4±0,02 роль 0±0 Левоми 1,4±0,1 1,2±0,1 0,84±0,05 0,46±0,03 0,08±0,01 коль Тимо 1,4±0,1 1,1±0,1 0,74±0,04 0,33±0,02 0,04±0,004 0±0 гель 0,05±0,004 Солкосе 1,4±0,1 1,34±0,1 1,0±0,1 0,74±0,05 0,4±0,03 рил *Р 0,01 по отношению к контролю Как видно из таблицы, «Тимогель» по сравнению с Левомиколем и Солкосерилом опережает время заживления ожогов Из литературы известно, что Тимоптин активирует иммунную систему организма 10. Поэтому перед нами была поставлена задача, выяснить какое влияние этот препарат оказывает на количество ядросодержащих клеток тимуса и вес самого тимуса при многократном введении. Параллельно мы провели изучение веса и количества ядросодержащих клеток селезенки, а также количество макрофагов в перитониальной жидкости (ПТЖ). Опыты были проведены на 30 белых беспородных крысах, обоего пола с массой 20020г. Ранозаживляющий гель Тимогель и его основу наносили на экспериментальные раны крыс на протяжении 30 дней, после чего животные забивались, и производился забор органов и клеток для исследования. Результаты исследования приведены в таблице 3. Из таблицы видно, что применение ранозаживляющего геля Тимогель в течение 30 дней привело к достоверному увеличению количества макрофагов в перитониальносй жидкости соответственно с 102±10/мл до 220±20 и 185±20 млн/ мл или в 2,2 и 1,8 раза по отношению к контрольной группе. При этом количество ядросодержащих клеток тимуса (ЯСК) увеличилось с 146±10 до 331±25 и 245±20 х 109/ мл по отношению к контролю. Индекс стимуляции (ИС) - отношение показателей опытных групп и контрольной, при этом составлял 2,3 и 1,7. Таблица3 Вес и количество ЯСК тимуса и селезенки, макрофагов в ПТЖ крыс при хроническом применении геля Тимогель (Мm; n=5) Препар ат Вес живот ных. Макрофаги К-во ИС клеток 106/ мл Вес, мг Тимус К-во клеток в мл ИС Вес, мг Селезенка К-во клеток в мл ИС Контро ль Основа 206±15 102±10 - 138±11 146±10 - 717±50 829±50 - 205±15 220±20 2,2 228±20 331±25 2,3 1071±90 1,3 Тимоге ль 216±20 185±15 1,8 282±22 245±21 1,7 1028±60 0 668±50 918±80 1,1 *Р0,05 по отношению к контролю На фоне увеличения количества ЯСК тимуса, увеличивалась средняя масса тимусов, стимулированных ранозаживляющим гелемТимогель и его основой на 104 и 106 %, по сравнению с массой этих органов у контрольных животных. Вес и количество спленоцитов селезенки при применении ранозаживляющего геля изменялись в пределах контрольных данных. На 29% увеличился вес и количество ЯСК селезенки под влиянием основы. Основа геля – сшитый карбовиниловый полимер -0,5%, спирт-5%, метилпарабен-0,1%, вода остальное Таким образом, многократное применение ранозаживляющего геля Тимогель, как и его основы, вызывало стимуляцию иммунной системы, в частности увеличении веса тимуса и количества Т-лимфоцитов и макрофагов. На модели острого экссудативного воспаления показано, что добавление в основу геля иммуномодулирующего препарата Тимоптин, приводит к уменьшению отека у крыс в 2,3-4,5 раза по отношении к основе без Тимоптина. Таблица 4 Объем лапок и антиэкссудативная активность у крыс, леченных различными образцами гелей с разной концентрацией Тимоптина, в сравнении с 0,5% мазью Преднизалон (М±m; n=5) Основа Тимоптин мкг/ 10 г основы Объем лапки через 3 часа после индукции Контроль 70±6,0 Основа 39±3 Тимогель 100 14±1,0 Тимогель 10 8,6±0,3 Тимогель 1 17,0±1,2 Преднизалон 32±2,4* Р* < 0,01 по отношению к контролю Антиэкссудативная активность, % 42±3,6 86±6 88±7 76±6,2 56±5 Р < 0,01 < 0,01 < 0,01 < 0,01 < 0,01 Как видно из таблицы наиболее выраженный эффект образца геля Тимогель с Тимоптином проявился при добавлении последнего в дозе 10 мкг/10г. При этом,антиэкссудативная активность его была равна 88 %. В таблице 5 приведены основные физико-химические показатели геля Тимогель Таблица 5 Основные показатели геля Тимогель Наименование показателей 1. Внешний вид 2. Запах 3. рН 4. Массовая доля сухого остатка,% 5. Цвет 6. Растворимость 7. Стойкость при хранении 8. Окисляемость Размер частиц Показатели Желеобразная масса Без запаха 5,5-6,5 0,4-0,55 Прозрачный Растворяется в воде, плохо растворим в гексане, ацетоне, ограниченно смешивается со спиртом Стабилен в течении 24 месяцев На воздухе не окисляется, не гидролизуется, не полимеризуется Не более 100 мкм Консистенция г/cм2 0,6250,375 Полученные результаты исследования позволили сделать следующие выводы: 1.Препарат «Тимогель» обладает выраженным ранозаживляющим и противоожоговым действиями 2.Добавление в гель иммуномодулятораТимоптин приводит к ускорению репаративных процессов Литература 1. П.И. Толстых, В.К. Гостищев и др. Различные многофункциональные материалы и перевязочные средства г.Москва.-1986.- С. 45-48. 2. И.А. Ерюхин, L. Flint. Ранозаживляющие средства1996.- С. 25-36. 3. Силин Л.Л., Бровкин С.В. Применение гелей в комплексном лечении закрытых повреждений мягких тканей.- Медицинская помощь, 2001.- №2.- С. 15. 4. В.Ю. Терещенко, В.Л. Белобородов, А.П. ТолстиковЛечение гнойно-септических ран с использованием раневого покрытия – салфетки «ВИТАС» /– Казань: КГМУ.- 2005. – С. 18. 5. А.А. Сопуев, Н.Н. Маматов, К.Е.Овчаренко «Оценка эффективности мази левомеколь при интраоперационной профилактике спаечного процесса брюшной полости». //"Хирургия Кыргызстана"- 2011.- No.2. - С. 39-43. 6. Н.Н Аничков, К.Г Волкова,В.Г Гаршин «Морфология заживления ран», г. Москва АМН.- 1952.- С. 1-9 7. А.В. Филатова, А.С. Тураев, Д.Т. Джурабаев. Исследование реологических свойств геля //Узб.хим. Журнал. - 2014.- №1.- С. 54 8. Д.Т Джурабаев, А.В.Филатова, А.С Тураев. «Исследование реологических свойств структурированных растворов гуаровой камеди» УзР ФА акад. С.Ю. Юнусов номидаги Ўсимликмоддаларикимёси институти «Ёшолимларилмийанжумани» Тошкент.- 2005.С. 34 9. А .И., Тенцова, М.Т Алешина. Полимеры в фармации,-М.: Медицина.-I968.-С. 266. 10. М.Д. Машковский. Справочник. -М.: Медицина.-I968.- С. 266.
