МИНИСТЕРСТВО ВЫСШЕГО И СПЕЦИАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ РЕСПУБЛИКИ УЗБЕКИСТАН САМАРКАНДСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМЕНИ

МИНИСТЕРСТВО ВЫСШЕГО И СПЕЦИАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ
РЕСПУБЛИКИ УЗБЕКИСТАН
САМАРКАНДСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМЕНИ
АЛИШЕРА НАВОИ
На правах рукописи
УДК: 612.1:599.325.1
БЕГМАТОВА ДИЛОРОМ АКРАМОВНА
СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ НЕКОТОРЫХ
МОРФОФИЗИОЛОГИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ КРОВИ У
РАЗНЫХ ПОЛОВОЗРАСТНЫХ ГРУПП КРОЛИКОВ
Специальность:
5А140101-Биология
МАГИСТРСКАЯ ДИССЕРТАЦИЯ
на соискание степени магистра
Работа принята и разрешена к
защите
Заведующий кафедрой зоологии
доц. Халимов Ф.З.____________
Научный руководитель:
доц. Алланазарова Н.А. ____
М.П.
САМАРКАНД – 2013
СОДЕРЖАНИЕ
cтр.
Введение……..………………………………………………………………….....3
1. Литературный обзор…………………………………………………..……......7
1.1. Морфофизиологическая характеристика крови животных……………..…7
1.2. Анализ литературных данных…………………………………………..….17
2. Материал и методика исследований…………………………………………22
3. Собственные исследования…………………………………………………..32
3.1.Сравнительный характер изменений в показателях крови кроликов
разного пола……………………………………………………………………32
3.2.Сравнительный характер изменений в показателях крови кроликов
разного возраста………………………………………………………………..41
3.3.Биохимические показатели и макро - микроэлементы крови
кроликов …………………………………………………………………..........46
4. Обсуждение результатов…………………………………………….……...58
Выводы…………………………………………………………………………...58
Рекомендации……………………………………………………………...…….59
Использованная литература ……………………………………….……….......61
2
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность темы. Морфофизиологические исследования составляют
фундамент многих областей биологии и вносят значительный вклад в
разработку её теоретических проблем. Адаптация организма животных к
окружающей среде является одной из главных
проблем физиологии.
Изучение особенностей реализации механизмов срочной и долговременной
совершенной адаптации через изучение крови дает истинное представление
о характере и степени этих процессов. В связи с этим перспективно изучение
в морфофизиологическом плане кровь у разных половозрастных групп
кроликов, которая, выполняя четко выраженные функции, играет ведущую
роль в процессах адаптации отдельных возрастных групп животных [15,54].
Для жизнедеятельности организма кровь имеет чрезвычайное значение,
посредством ее осуществляется свойство живой материи - обмен веществ.
Состав крови является показателем физиологического состояния организма,
связанного с отправлением жизненно важных функций, и тесно связан с
продуктивными качествами животных. Процессы, протекающие в организме
кроликов, всецело зависят от состояния различных функциональных систем.
Одним из показателей уровня их деятельности являются результаты
гематологического исследования [12,115].
В организме различают артериальную, венозную и капиллярную кровь,
которая имеет незначительные цитологические и биохимические отличия.
Для морфологических исследований пользуются почти исключительно
капиллярной кровью, а при биохимических исследованиях - венозной.
Кровь - жидкая ткань, осуществляющая в организме транспорт
химических веществ (в т.ч. кислорода), благодаря которому происходит
интеграция биохимических процессов, протекающих в различных клетках и
межклеточных пространствах, в единую систему.
Кровь у кроликов
составляет 4,5 – 6,7% от общей массы животного [22].
Кролик
-
один
используемых
при
из
самых
распространенных
проведении
целого
3
ряда
видов
животных,
экспериментальных
исследований, в том числе в физиологии, гистологии, фармакологии,
микробиологии и т.д. Кролики широко используются и как лабораторные
животные в медицине, ветеринарии, биологии, а также для приготовления
вакцин, сывороток и других диагностических тестов [20,104].
В настоящее время известно более 60 пород кроликов и 100 их цветных
вариаций. Из этого количества экономически выгодными являются кролики
только 15 пород, в то время как остальные являются генетическим
материалом для их усовершенствования. Одной из самых распространенных
пород в мире является шиншилла, получена путем воспроизводительного
скрещивания ее и породы Белый великан [78].
Цель
и
задачи
исследования.
Цель
наших
исследований
-
сравнительное изучение некоторых морфофизиологических показателей
крови у разных половозрастных групп кроликов.
Задачи данной работы: 1) изучить сравнительный характер изменений в
показателях крови кроликов разного пола; 2) отметить сравнительный
характер изменений в показателях крови кроликов
разного возраста; 3)
выявить особенности структуры крови у кроликов разного возраста и пола; 4)
установить биохимические показатели и макро - микроэлементы крови
кроликов; 5) обсудить результаты, сделать выводы и некоторые практические
рекомендации по результатам работы.
Степень разработки проблемы. Учитывая цель и задачи данного
исследования проведен анализ литературы по вопросам сравнительного
изучения морфофизиологических характеристик крови кроликов разного
пола и возраста, изучение крови как показателя, по которому судят об
особенностях организма, о возможных адаптациях его к окружающей среде.
Научная новизна. Научный интерес к данной теме исследования
объясняется, прежде всего
тем, что данные морфофизиологических
исследований крайне важны для развития медицины, охраны окружающей
среды, животноводства и т.д. Проблемы целостности и взаимодействия
уровней организации служат основой изучения эволюции патогенеза и
4
патологии
и
соответственно
основой
лечения
и
профилактики
патологических процессов. Подобного рода исследования в литературе
вносят отрывочный, эпизодичный характер. Выяснение влияния возрастного
и полового аспекта на систему крови очень важно, так как кровь является
интегральной системой, связывающей воедино и затрагивающей все органы
и ткани, поэтому изменение её состояния может сказаться на работе
функциональных систем организма в целом. Клетки крови одними из первых
встречаются
с
веществами
как
экзогенного,
так
и
эндогенного
происхождения и чутко реагируют на изменения, происходящие в организме,
а стабилизация физиологических реакций, ответственных за доставку и
обмен газов в тканях является одним из критериев адаптации [3].
Проведено сравнительное изучение некоторых морфофизиологических
показателей
крови
у
разных
необходимо для выявления
половозрастных
групп
кроликов,
что
особенностей структуры крови у животных
разного возраста и пола. Установлены нормативы физиологических
показателей, а также морфологических и биохимических компонентов крови
с учетом возраста и пола.
Впервые проведена комплексная оценка
морфофункционального состояния клеток крови
у кроликов разного
возраста и пола в лабораторных условиях.
Предмет и объект исследования. Предмет исследования относиться к
биологии
и
направлен
на
сравнительное
изучение
некоторых
морфофизиологических показателей крови у разных половозрастных групп
кроликов. Объектом исследования является кровь кроликов разного пола и
возраста.
Научно
-
практическая
значимость.
Вопросам
разносторонних
исследований крови в настоящее время уделяется большое внимание в
биологии, медицине, животноводстве и, в частности, в кролиководстве. Как
следствие полученные результаты имеют теоретическое и прикладное
значение. На основании данных о количественном составе сывороточных
белков можно судить об интенсивности азотного обмена в организме,
5
белковообразовательной функции печени и лимфоидной ткани [15];
изменения содержания белка в крови отражают сдвиги белкового обмена
всего организма. По количеству эритроцитов и гемоглобина также можно
судить об обменных процессах. Показатели крови довольно часто
используются для оценки реакции организма в условиях химического
воздействия [18,35,61,89]. Результаты исследования могут быть также
использованы в учебном процессе при чтении лекций по физиологии,
зоологии, ветеринарии, гистологии, биохимии и спецкурсам.
Апробация работы. Магистрант по результатам своих исследований
выступала на ежегодных конференциях магистрантов СамГУ, в 2013 году на
пленарном заседании докладывала на английском языке, а также с успехом
выступила на конференции СамСХИ 2013 года, выступала с докладами на
заседаниях
СНО кафедры зоологии, результаты работы опубликованы в
трудах ежегодной конференции СамСХИ - 2013 года и в сборнике магистров
СамГУ 2013 года.
Публикации.
По
результатам
своих
исследований
магистрантом
опубликованы следующие работы: 1) Изучение морфофизиологических
показателей крови у разных возрастных групп кроликов. Иктидорли талаба
ва магистрларнинг «2013йил - Обод турмуш йили»га багишланган илмий
конференция материаллари туплами. Самарканад, СамКХИ. - 2013; 2)
Морфофизиологические показатели крови кроликов разного возраста
//
Магистрларнинг илмий конференцияси материаллари тўплами. СамДУ. 2013.
Структура диссертации. Диссертация на степень магистра изложена на
71 страницах печатного текста, состоит из введения, 4 глав (литературный
обзор, материал и методика исследований, собственные исследования,
и
обсуждение результатов) выводов, рекомендаций, списка литературы,
который включает 126 источника, из которых 7 иностранная литература и 7
источников интернета, включает 7 рисунков, 5 микрофотографий, 15
диаграмм, 6 таблиц.
6
1. Литературный обзор
1.1. Морфофизиологическая характеристика крови
Кровь - жидкая ткань, с помощью которой ко всем органам и тканям
организма доставляются питательные вещества, а к органам выделения продукты распада. Кровь участвует также в тканевом дыхании - приносит к
клеткам кислород и уносит углекислоту и другие газы. Кровь состоит из
жидкой прозрачной фракции - плазмы, в которой взвешены форменные
элементы - красные (эритроциты) и белые (лейкоциты) кровяные тельца и
кровяные пластинки (тромбоциты) [57,58].
В
плазме
млекопитающих
содержится
90-93%
воды
и
7-10%
органических и минеральных соединений и представляет собой коллоидную
систему, в состав которой входят: солевые растворы, белки (альбумины,
глобулины и фибриноген), жиры (фосфолипиды, холестерин), углеводы
(глюкоза), аминокислоты и различные продукты обмена. Плазма крови
участвует в переносе питательных веществ [31].
Эритроциты
содержится
в
1000
это основной тип клеток крови: в 1 мл крови их
раз
больше,
чем
лейкоцитов.
Эритроциты
-
узкоспециализированные клетки; у млекопитающих животных они в
процессе дифференцировки утратили ядро и приобрели вид двояковогнутого
диска; у всех других позвоночных они овальной формы и содержат ядро с
сильно конденсированным хроматином. Эритроциты животных разных видов
существенно отличаются по размерам: диаметр эритроцита составляет, мкм:
у лошади 5,7, у коровы 5,1, у свиньи 5,5, у овцы 4,3, у слона 9,4, у морской
свинки 7,2, у кабарги 2,5. Размеры эритроцитов не зависят от массы тела
животного: самые мелкие, как правило, обнаруживаются у животных с более
высоким уровнем тканевого метаболизма.
Форма
эритроцитов
обеспечивает
максимальную
площадь
при
минимальном объеме. Эритроциты меньшего диаметра носят названием
микроцитов, большего - макроцитов, а среднего - нормоцитов. В
количественном отношении все три типа соотносятся как 12,5 %, 12,5 % и
7
75% соответственно. Резкое различие эритроцитов по размерам - анизоцитоз
- отмечают при функциональной недостаточности кроветворных органов.
Появление в крови разнообразных по форме эритроцитов - пойкилоцитоз наблюдают при септических заболеваниях и истинных анемиях. При анемиях
и кахексиях снижается способность цитоплазмы эритроцитов воспринимать
эозин, и в мазке крови обнаруживают олигохромные клетки.
Продолжительность жизни эритроцитов составляют дни: у свиньи 70, у
крупного рогатого скота 50-60, а у овцы 140. Ежедневно в организме
разрушаются
миллионы
эритроцитов.
Их
гибель
компенсируется
интенсивным кроветворением. Следует иметь в виду, что соотношение
клеток различных генераций в периферической крови довольно постоянно,
поэтому его нарушение между молодыми и стареющими формами имеет
важное диагностическое значение. Основная функция эритроцитов обеспечение клеток, тканей и органов кислородом. Кроме того, эритроциты
могут
адсорбировать
на
своей
поверхности
и
транспортировать
аминокислоты, некоторые лекарственные вещества и токсины [49].
Цитоплазма эритроцита на 34 % состоит из гемоглобина, содержание
которого в крови колеблется в значительных пределах в зависимости от вида
животных, их пола, возраста, характера кормления и других условий.
У животных гемоглобин составляет 10-15% веса крови (на каждые 100 мл
приходиться 10-15г гемоглобина). Важно отметить, что содержание
гемоглобина в крови соответствует числу и качеству эритроцитов, так как в
норме количество гемоглобина в последних довольно постоянная величина
[122,125].
Лейкоциты в организме выполняют защитную функцию, защищая
организм от проникающих в него бактерий, способны изменять свою форму,
захватывать и уничтожать бактерий. Кроме того, они участвуют в
образовании иммунных (защитных) тел. Отдельные виды лейкоцитов
(эозинофилы)
способны
обезвреживать
бактериями, глистами).
8
токсины
(яды,
образуемые
Количество лейкоцитов в крови может варьировать в зависимости от
функционального
состояния
организма
(увеличиваться
во
время
пищеварения, при усиленной физической работе, беременности). При
инфекционных заболеваниях, особенно гнойного характера, количество
лейкоцитов увеличивается (лейкоцитоз). Некоторое увеличение лейкоцитов
наблюдается
и
у
здоровых
животных
после
принятия
пищи
(пищеварительный лейкоцитоз). Лейкоциты различаются между собой как
морфологически, так и по биологической роли в организме. Наряду с
фагоцитозом, лейкоциты могут образовывать иммунные тела. У многих
низших, а весьма возможно и высших животных особые лейкоциты
выполняют также функцию переноса питательных веществ (трефоциты).
Наконец, отдельные виды лейкоцитов (эозинофилы высших животных)
способны обезвреживать токсины. Крупную роль лейкоциты играют в
обмене веществ и в образовании так называемых трефонов - стимуляторов
клеточного роста, особенно в условиях регенерации тканей [51].
Менее изучены их функциональные особенности, их целлюлярная
физиология. Несмотря на огромное количество работ, онтогенез белой крови
полностью ещё не выяснен. Наконец, сложная нейрогуморальная регуляция
сосудистой и внесосудистой белой крови исследована в чрезвычайно малой
степени. Мало данных имеется даже о длительности жизни белых кровяных
телец. По некоторым авторам, она весьма невелика (3-4 дня) [69].
У различных сельскохозяйственных и лабораторных животных один и тот
же тип лейкоцитов (особенно эозинофилы и нейтрофилы, или гетерофилы)
имеет специфические отличия в структуре. Однако в главном структура
каждого типа лейкоцитов у всех сельскохозяйственных животных весьма
близка.
Эозинофилы имеют очень большое клиническое значение, они или
исчезают из крови (анэозинофилия), или уменьшаются в количестве
(гипоэозинофилия),
или,
наконец,
количество
их
резко
нарастает
(гиперэозинофилия, или просто эозинофилия). Большинство инфекционных
9
заболеваний в первом своём периоде связано с резким уменьшением
количества
эозинофилов
(гипоэозинофилия).
Возврат
эозинофилов
в
кровяное русло считают признаком ослабления болезни. При роже свиней и
при
многих
инвазиях
(особенно
гельминтозах)
наблюдается
резкое
увеличение эозинофилов (эозинофилия), доходящее у крупного рогатого
скота до 40%. Эозинофилия встречается и при аллергических реакциях,
причём здесь её связывают, так же как и при гельминтозах, с раздражением
системы блуждающего нерва. При этом функции эозинофилов недостаточно
изучены [34].
Нейтрофилы
(специальные
зернистые
лейкоциты,
гетерофилы,
псевдоэозинофилы или амфиоксифилы некоторых животных) имеют очень
важное значение для клиники и физиологии. Их клетки округлые, диаметром
от 7,0 до 15,0 µ. В цитоплазме обильная, очень мелкая, нейтрофильная
зернистость. Ядро, по мере развития клетки, постепенно сегментируется.
Зернистость ясно заметна даже в свежей неокрашенной крови. У некоторых
животных (мыши, крысы и кошки) зернистость выражена очень слабо.
Цитоплазма оксифильна, окрашивается в бледно - розовый цвет, иногда
почти бесцветна. Изредка в цитоплазме нейтрофилов встречаются небольшие
участки, сохранившие базофилию, характерную для материнской клетки.
Такие ясно - голубые пятна получили название телец Деле (Dohle) [75].
Базофильные гранулоциты, или тучные клетки, обычно круглой или
округло - овальной формы, диаметром 8-15 µ. (у лошадей и коров несколько
более крупные). Сама цитоплазма слабооксифильна и окрашивается в
бледный, розовато - фиолетовый или, иногда, сыровато - голубой цвет, но
находящиеся в ней крупные округлые зёрна (гранулы) резко базофилъной
природы и окрашиваются метахроматически в тёмный красно - фиолетовый
или ультрамариново - фиолетовый цвет. Расположение гранул в цитоплазме
неравномерное, рыхлое. Часто они закрывают отдельные участки ядра. По
своей химической природе базофильные зёрна являются белками, близкими к
гликопротеидам. Ядро базофилов - неясной структуры, неправильно
10
лопастное или округлое, окрашивается в фиолетово - розовый цвет. В ядре
расплывчато
чередуются
более
светлые
поля
оксихроматина
с
темноокрашенными базихроматиновыми полями.
В базофилах чрезвычайно трудно различить стадии миэлоцита - юную,
палочкоядерную и сегментоядерную. Вообще сегментированность ядра
выражена слабо. Практического значения, для подсчёта лейкоцитарной
формулы, дифференциация базофилов по степени их зрелости не имеет,
прежде всего, потому, что в крови млекопитающих их очень мало: от 0,1 до
1-2%, в среднем 0,5%. Кровь сельскохозяйственных птиц содержит 3-4%
базофилов, а содержание их в крови лягушек доходит до 23%. Вообще,
содержание базофилов очень высоко у амфибий, рептилий и у некоторых
рыб [24].
Функциональное значение базофилов не выяснено. По - видимому, они
играют некоторую роль в защите организма при парентеральном введении
чуждых белков. Они способны фагоцитировать и содержать окислительные
ферменты. Ряд учёных считает их трефоцитами («питающие клетки»
Либмана). Такие клетки, переносящие питательные вещества, особенно
широко распространены у беспозвоночных, где они часто преобладают.
Клиническое значение базофилов невелико. Количество их несколько
возрастает при инъекции белков, при некоторых авитаминозах (группы В) и
гепатических циррозах [93].
Размеры и форма гранул весьма различны. У лошади они очень крупные
(до Зµ в поперечнике), покрывают часть ядра и придают эозинофилу вид
плода малины. Довольно крупные зерна у эозинофилов кролика (до 1,5 µ).
Значительно мельче эозинофильная зернистость овцы. У свиньи зерна очень
правильной круглой формы. Обычно зёрна эозинофилов расположены очень
тесно, у лошади они часто даже сдавливают друг друга и приобретают
угловатую форму и между зёрнами трудно различить цитоплазму. Однако у
некоторых животных (например, у овцы) зерна могут быть расположены
сравнительно редко, особенно в молодых клетках, и тогда цитоплазма видна
11
хорошо. Типичные эозинофилы имеются в крови почти у всех позвоночных
(кроме некоторых рыб). У птиц зёрна эозинофилов относительно мелки. У
рептилий эозинофилы составляют большинство лейкоцитов. Ацидофильные
зёрна эозинофилов рептилий, плотно расположенные в цитоплазме, то
шарообразны, то овальны, иногда имеют форму ромбических кристаллоидов
или,
наконец,
представляют
собой
глыбки
неправильной
формы.
Эозинофилы амфибий весьма напоминают собой аналогичные клетки у
млекопитающих. Их гранулы относительно весьма велики. У большинства
рыб имеются типичные эозинофилы, чаще всего с простым, круглым ядром.
У некоторых видов рыб эозинофилы атипичны, - это лимфоидные клетки с
редкими, но очень крупными гранулами, в цитоплазме. Наконец, в крови
некоторых видов рыб эозинофилы, по-видимому, не содержатся. Зёрна
эозинофилов видны даже в неокрашенных клетках, где они выделяются
жёлтым цветом и высоким показателем преломления. У амфибий, особенно
лягушек, при хорошей фиксации и окраске по Романовскому в модификации
Паппенгейма, зернистость удаётся выявить достаточно ясно. Зернистость
гетерофилов у рептилий выражена слабо, цитоплазма гетерофилов амфибий
красится диффузно или выявляет сетчатое строение, но не содержит
различных гранул, несомненно неправильно [14,23,25,55,56,69].
Гетерофилы содержат оксидазу и протеолитические ферменты (трипсин).
Но некоторым данным, содержание ферментов, особенно трипсина,
увеличивается при преобладании в пище белков.
Количество специальных гранулоцитов в крови довольно велико и
колеблется в зависимости от вида животного, его функционального
состояния и заболевания. Больше всего их у собак (60-70% всех лейкоцитов),
меньше всего - у крупного рогатого скота (25-35%).
При
патологических
состояниях
организма
состав
специальных
гранулоцитов значительно изменяется. Резко уменьшается количество
сегментоядерных клеток и нарастает количество палочкоядерных, юных и
даже миэлоцитов, мобилизуемых из костного мозга в сосудистую кровь [55].
12
Лимфоциты являются типичными агранулоцитами, так как не содержат
никакой характерной зернистости в цитоплазме, за исключением изредка
попадающихся
отдельных
азурофильных
верен.
Клетки
лимфоцитов
округлые, с круглым или овальным ядром, которое окружено или очень
узким (малые лимфоциты), или более широким (средние и большие
лимфоциты) поясом цитоплазмы. Лимфоциты птиц и амфибий (лягушка)
часто
встречаются
с
зафиксированными
в
момент
передвижения
псевдоподиями. Диаметр малых лимфоцитов от 4,5 до 6,5µ, средних от 6,5 до
10 µ и больших от 10,0 до 18,0 µ.
Цитоплазма малых лимфоцитов иногда видна лишь с одной стороны ядра
в виде очень узкого, едва заметного ободка (форма "серпа"). В некоторых
клетках и этот серп незаметен, и тогда малый лимфоцит имеет вид «голого
ядра». Крупные лимфоциты иногда имеют ядро менее правильной формы угловатое, с выступами или вдавлениями. В патологических случаях
встречаются лимфоциты с неправильной лопастной формой ядра или
расчленение ядра может напоминать сегментированные ядра специальных
гранулоцитов [56,117].
Лимфоциты составляют большинство клеток белой крови у крупного
рогатого скота (50-60% всех лейкоцитов), свиней (45-60%), овец (55-65%),
коз (40-50%), кур (45-65%) и кроликов (50-65%). У этих животных имеется
так называемый лимфоцитарный профиль крови. У собаки и лошади
количество лимфоцитов в крови меньше; там превалируют специальные
гранулоциты. Однако и у этих животных число лимфоцитов остаётся
довольно значительным (20-40% от всех белых кровяных телец). Количество
лимфоцитов в крови молодых животных больше, чем в крови взрослых (за
исключением первых дней после рождения). У низших позвоночных
количество лимфоцитов может быть относительно очень велико [57].
Моноциты - большие клетки крови (от 10,0 до 20,0 µ в диаметре),
большей частью округлой, иногда неправильной формы, с хорошо
выраженной
цитоплазмой,
имеющей
13
мельчайшую
азурофильную
зернистость, и большим, часто эксцентрически расположенным ядром с
бухтообразными
вдавлениями
и
лопастями.
Мелкая
азурофильная
зернистость цитоплазмы почти не видна у моноцитов сельскохозяйственных
птиц. Цитоплазма моноцитов слегка базофильна, голубовато - серого или
пепельно - серого цвета («цвета сигарного дыма») при окраске раствором
Гимза и свинцово - серого или грязно синего цвета при окраске по способу
Паппенгейма. У птиц цитоплазма моноцитов серовато - голубая и мало
отличается от цвета цитоплазмы лимфоцитов. Моноциты
- типичные
макрофаги. Они захватывают и переваривают остатки распавшихся клеток,
попадающие в кровь, инородные частички, в том числе некоторые бактерии,
и играют значительную роль в образовании иммунных тел. В моноцитах
имеется протеолитический фермент типа катепсина. Нормальное количество
моноцитов в крови млекопитающих и птиц колеблется в пределах от 2 до 8%.
Моноцитоз (повышенное содержание моноцитов) наблюдается в первую
фазу выздоровления при большинстве случаев инфекционных болезней
(«моноцитарная защитная фаза, или фаза преодоления»), при инфекционной
анемии лошадей, протозойных заболеваниях и большинстве других
инфекционных болезней [114].
Плазматические клетки (клетки раздражения) характеризуются одним
общим
для
них
признаком-резкой
базофилией
цитоплазмы
(ультрамариновый цвет). Иногда в цитоплазме видны вакуоли. Эта весьма
немногочисленная группа клеток имеет полифилетическое, главным образом,
лимфоцитоидное или миэлоидное происхождение. Форма ядра-круглая или
овальная. Правильные
глыбки
хроматина придают ядру пятнистый и
несколько пикнотический характер. Вокруг ядра обычно хорошо заметна
перинуклеарная зона, периферический же слой цитоплазмы окрашен в
интенсивно синий (ультрамаринового оттенка) цвет. Форма клеток-овальная,
иногда сильно вытянутая или полигональная, реже круглая. Расположение
ядра обычно эксцентричное. Структура цитоплазмы волокнистая или
комковатая. Плазматические клетки в крови млекопитающих в заметных
14
количествах встречаются только при патологии. Ими характеризуется так
называемая «пёстрая картина крови». У сельскохозяйственных птиц они
имеются и в нормальной крови (у кур 0,1 %, у гусей до 1,5%) [2,17,57].
Тромбоциты мелкие, ядерные клетки, пластинчатой формы. Вне
кровеносных сосудов они принимают зубчатый вид и свертываются в
аморфную массу. В среднем в 1мм3 крови животных находят от 300000 до
600000 кровяных бляшек. Содержат фермент тромбокиназу, который при
ранении
выходит
в
плазму
и
участвуют
в
свертывании
крови.
Тромбоциты выполняют ту же функцию, что и кровяные пластинки у
млекопитающих - обеспечивают свертывание крови: при повреждении
стенки сосудов останавливают кровотечение путем агрегации или слипания,
образуя тромбы. Активно участвуют в регенерации кровеносных сосудов
эпителиев [24,69].
Общее количество крови в организме кролика составляет от 4,5 до 6,7%
его веса. В течение одной минуты, в зависимости от размеров тела и частоты
пульса,
сердце
кролика
пропускает
от
27
до
150
см3
крови.
Продолжительность кругооборота крови от 4,75 до 10,4 секунды. Число
сокращений сердца в минуту (пульс) в спокойном состоянии у кролика
равняется 120 - 160. При испуге или усиленном движении пульс резко
ускоряется.
В крови кролика эритроциты крупные (в среднем 6,0-6,5-6,8μ в диаметре).
В них очень слабо выражено ослабление окраски в центре. Полихромазия
заметно выражена даже при физиологической норме (до 1%). Ретикулоциты
очень часты (до 8% эритроцитов у взрослых животных и 20 - 80% у
новорождённых и в первые месяцы развития). Изредка встречаются
нормобласты. Красная кровь вообще весьма лабильна. Эозинофилы с
крупными гранулами (1,5 μ), очень густо расположенными в цитоплазме [44].
Специальные гранулоциты кроликов весьма своеобразны. Их зернистость
гораздо крупнее, чем у нейтрофилов других животных, и красится
комбинацией красок по Романовскому в ярко - красный цвет, т. е.
15
эозинофильна (оксифильна). Поэтому специальные гранулоциты кроликов
получили название псевдоэозинофилов. Форма зёрен неправильно округлая,
порою угловатая. Одинаковая окраска и почти одинаковые размер и форма
псевдоэозинофилов
и
эозинофилов
у
кроликов
очень
затрудняют
дифференциацию этих клеток [6,37,50].
Моноциты и лимфоциты у кроликов не имеют характерных видовых
особенностей. В крови кроликов встречаются иногда очень крупные,
напоминающие порою эозинофилы,
фагоцитирующие клетки - так
называемые «клазматоциты». Кровяные пластинки - среднего размера (2,7
μ), довольно многочисленны и имеют более темноокрашенный хромомер.
Лимфатическая
система
у
кролика
замкнута
и
представлена
лимфатическими узлами, соединенными между собой лимфатическими
сосудами. Она отводит в кровь избыток тканевой жидкости - лимфы,
являющейся питательной средой для клеток тканей. Во время циркуляции
крови по кровеносным сосудам часть ее плазмы просачивается в
межтканевые пространства, где смешивается с тканевой жидкостью, а затем
собирается сначала в мельчайших лимфатических сосудах, которые
постепенно сливаются в более крупные. Проходя на своем пути через
несколько лимфатических узлов, лимфа обогащается лимфоцитами клетками, выполняющими защитную роль при инфекционных заболеваниях.
Лимфа течет медленно в направлении из органов тела к передней полой вене.
Ток ее обусловлен присасывающим действием сердца, работой клапанов
лимфатических сосудов и сокращением органов [48,119].
Кроветворные органы кролика представлены в основном селезенкой,
костным мозгом и лимфатическими узлами. Эти органы принимают участие
в постоянном образовании форменных элементов крови. Селезенка в
организме регулирует кровяное давление, поглощает из крови некоторые
вредные вещества. В ней образуются белые кровяные тельца (лейкоциты) и
разрушаются
отживающие
эритроциты.
Костный
мозг
эритроциты, а лимфатические узлы - лимфоциты [62,125].
16
продуцирует
1.2. Анализ литературных данных
В научных исследованиях большое внимание уделяется крови как ткани,
которая в организме выполняет многочисленные жизненно важные функции
и отражает состояние организма в разные периоды жизни. Знание картины
крови помогает диагностировать заболевание
и следить за течением
патологического процесса. Большое значение приобрело в последнее время
изучение крови как показателя, по которому судят о конституционных
особенностях организма, его морфофизиологическом статусе, о возможных
адаптациях к окружающей среде и, в известной мере, о продуктивности.
Согласно исследованиям многочисленных авторов [31,49,58] количество
эритроцитов у животных с возрастом меняется. Например, в среднем у
кроликов считается нормой содержание эритроцитов в 1 мм³ крови в
пределах 5,0-5,8%. Однако в первый месяц жизни этот показатель
значительно ниже, а с увеличением возраста также повышается и к 4-5месячному возрасту приходит в норму. В ходе изучения крови и кровеносной
системы
И.М.
Карпуть
[49]
составил
гематологический
атлас
сельскохозяйственных животных.
Морфологические показатели крови у зверей определяли Н.П. Тихомиров
[101],
В.В. Васильев
[22],
А.М. Юдин [112],
Е. С. Романов [87].
Морфологические и биохимические показатели крови кроликов при
отравлении дельсектом изучали Т.Г. Аббасов и
С.Е. Шерешкова [1]. В
изучении содержания общего белка, общих липидов и глюкозы в крови у
кроликов важную роль сыграли
работы Г.Г. Ефремова, Г.М. Ефремовой,
И.О. Ефимовой [37]. Установлением физиологических норм содержания
гемоглобина, эритроцитов и лейкоцитов у пушных зверей занимались А.М.
Колесников [53], Л.В. Панышева [81], Н.П. Тихомиров [101], Л.Г. Уткин
[104].
И.М. Ганиев [28] применил комбинации сывороток крови различных
видов животных для культивирования клеток и репродукции вирусов. С.Х.
Хаертынов [106] проводил взятие крови с целью получения сыворотки для
17
культивирования клеток. М.Г. Творогова [99] изучала железо сыворотки
крови.
Гетерогенная система гемоглобина,
структура, свойства, синтез,
биологическая роль изучена Н.Ф. Стародубом, В.И. Назаренко [94].
Изучение респираторных болезней молодняка крупного рогатого скота
инфекционной этиологии в условиях Северного Кавказа проводила Н.Ю.
Басова [11], качество сыворотки крови крупного рогатого скота исследовал
Н.И. Гурьянов [32]. Современные биохимические методы исследования в
ветеринарии и зоотехнии созданы
Р.Х. Кармолиевым [47].
В своих
исследованиях Р.Х. Кармолиев [47] дифференцировал белковые вещества
крови крупного рогатого скота, проведя подробное исследование плазмы
крови. Усовершенствованием технологий получения сывороток крови
кур, бычков, эмбрионов коров и изучение их свойств при культивировании
клеток и вирусов занимался кандидат биологических наук Н.И. Гурьянов
[33].
Гематологией сельскохозяйственных животных занимался А.В. Васильев
[22]. Патологические явления кровеносной системы, в частности, динамику
электрокардиограмм в различных системах отведений при развитии
экспериментального
перикардита
у
сельскохозяйственных
животных
исследовал П. Габрашанский [27]. Физиологию сельскохозяйственных
животных, в частности, систему кровообращения и кровь изучали В.И.
Георгиевский [29], А.Н. Голиков [30], Е.А. Кост Л.Г, Смирнова [55]. И.Ф.
Радаева и др. [85] исследовала свойства сыворотки крови различных видов
животных. Дыхательную функцию крови в индивидуальном развитии
млекопитающих изучала Л.И. Иржак [42,43]. Структурно - функциональную
оценку минеральных компонентов в крови и моче у коров различного
физиологического состояния дал Т.К. Казиев [45].
Электрокардиологические исследования копытных животных проводил
М.П. Рощевский [88]. Н.А. Судаков [96] проводил научные исследования по
изменению сердечнососудистой системы у лошадей в связи с телосложением
и конституцией, а также изучал изменение ЭКГ у лошадей в зависимости от
18
их вегетативной индивидуальности и возраста. Г.П. Новошинов [80], изучая
динамику крови, создал электрокардиограмму у кроликов. А.М. Утянов
[103] исследовал динамику гематологических показателей и белкового
состава сыворотки крови кроликов под влиянием овариоцитотоксической
сыворотки.
П.В.
Филатов
проводил
[110]
электрокардиографию
сельскохозяйственных
подробную
животных,
клиническую
изучал
рост,
развитие и продуктивность животных в зависимости от их здоровья,
исследовал электрокардиографические нормативы у овец и коз, установил
клиническую электрокардиографию сельскохозяйственных животных. В
своих
исследованиях
А.Н.
Баженов
изучал
[9]
изменение
электрокардиограммы молочных коров в норме и при нарушении обмена
веществ.
Исследованием
гематологии
животных
Кудрявцева [57]. Ю.С. Белокопытин
и
рыб
занималась
А.А.
[14] изучал изменение некоторых
показателей крови донского судака в нерестовый период. И.А. Болотников
[17] занимался гематологией птиц. Согласно данным С.И. Волковой [23]
были
получены
некоторые
морфофизиологические
показатели
крови
сеголетков карпа в прудах с различным уровнем интенсификации, а также
изучена интенсивность кроветворения у молоди карпа, выращенной в прудах
различного назначения. Ю.Л. Волынкин [25,26] , в целом ряде своих работ
исследовал морфологию и физиологию тромбоцитов рыб, лейкоциты и
тромбоциты периферической крови некоторых рыб отряда окунеобразных
(Perciformes), а также показатели красной крови путассу, выловленной в
Норвежском море.
Целый ряд авторов посвятили свои исследования
пушному звероводству и кролиководству, как глобально, так и в личных
хозяйствах [19,36].
Что касается кроликов,
Н.С. Зусман [41] изучал их биологические
особенности. В своих исследованиях К.С. Кулько [59] подробно изложил и
проанализировал биологические особенности кроликов. В.Н. Жеденов [39] в
19
деталях дал анатомическую характеристику кролика. Ю.А. Калугин [46]
исследовал физиологию питания кроликов и влияние рациона на обмен
веществ и состав крови. В своей работе Н.Н. Мухаметгалиев [79] представил
данные о переваримости и обмен веществ у кроликов при использовании
ферментных препаратов. В.С. Сысоев [97,98] занимался практическими
вопросами
разведения
кроликов,
в
частности,
приусадебным
кролиководством.
Вариабельность сердечного ритма среди кроликов породы шиншилла
изучали К.Ш. Надареишвили, И.И. Месхишвили, Д.Д. Кахиани и др. [21].
В.Н. Помытко [84] предложил зоотехнические основы промышленного
кролиководства. Были изучены вопросы влияния температуры воздуха на
газообмен и теплопродукцию кролика. Ряд авторов представили данные о
структуре и функции синусно - предсердного узла у кролика [95]. Н.Г.
Фенченко [111] занимался разведением, селекцией и содержанием клеточных
пушных зверей и кроликов.
По данным В.А.
Макарова [94]
содержание
Hb
и эритроцитов у
новорожденных выше, чем у взрослых, что объясняется так называемой
плацентарной трансфузией и гемоконцентрацией. В течении первой недели
уровень гемоглобина падает и минимальный уровень достигается 2-6
месяцев и составляет 90-100 г/л. Аналогично ведут себя и эритроциты. Эта
уменьшенная концентрация
гемоглобина
и
эритроцитов
является
результатом повышенного гемолиза фетальных эритроцитов и невысокого
уровня эритропоэза. В дальнейшем, начинается рост концентрации Hb и
содержания эритроцитов
и
к 12-18 годам достигает значения взрослых
кроликов. Ряд авторов изучали гематологические показатели у кроликов,
содержащихся в различных условиях загрязнения окружающей среды
[18,50,70,92].
Взаимосвязь клинических и электрокардиографических показателей у
кроликов разного пола, структурно-функциональные особенности ЭКГ у
кроликов (анализ системы узлов), функциональные различия проводящей
20
системы сердца у кроликов 5,5 месяцев, особенности системы сердца у
кроликов разного пола в 6,5 месяцев, возрастную динамику систем
электрокардиографических показателей самок кроликов 3,5-5,5 месяцев
изучала Т.Н. Макарова [71,72,73], что и продемонстрировала в целом ряде
своих
работ.
Динамику
клинических
и
электрокардиографических
показателей у кроликов разного пола изучали A.A. Самотаев, Т.Н. Макарова
[74].
А.Н.
Куриленко
[60]
изучал
инфекционные
болезни
молодняка
сельскохозяйственных животных, в том числе и кроликов. Закономерности
роста молодняка кроликов пород шиншилла, серый великан, серебристый и
венский голубой изучали Н.А. Липатова, Е.А. Раззаренова [68], М.П.
Тихонова [102] исследовала влияние возраста родителей на рост и развитие
приплода
кроликов.
И.А.
Аршавский
[7]
показал
физиологические
механизмы и закономерности индивидуального развития кроликов. С.Г.
Сипачев [91] в своих исследованиях представил данные о ритмичности роста
животных.
В.Г.
Плотников
[82]
исследовал
вопросы,
связанные
с
выращиванием крольчат. Практические вопросы, связанные с поточным
производством мяса кроликов, изучали П.Д. Бакшеев, Е.П. Наймитенко [10].
Ряд авторов исследовали влияние белковой диеты на структуры крови и
состав мочи кроликов [113], изменение состава крови в динамике при
содержании животных в индустриальных районах, влияние животных и
растительных жиров в рационе кроликов на изменении состава крови [116], а
также метаболизм процессов у кроликов в разные периоды жизни [118].
Анализируя литературный материал, несмотря на кажущийся большой
объем приведенных данных по
исследованию крови, многие вопросы,
касающиеся морфологических, физиологических и биохимических процессов
у животных, в частности, у кроликов, до настоящего времени остаются
малоизученными и разрозненными, а имеющиеся сведения отрывочные, не
систематизированы и часто морально устаревшие.
21
2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
В ходе выполнения работы мы познакомились с рядом методов
исследования крови, как с гистологическими, биохимическими, так и
морфометрическими. Изучены приёмы взятия крови и проведения анализа,
используя
разные компьютерные технологии, освоили разнообразные
статистические методы обработки данных [2,83], как классическими, так и
современными,
освоили
приёмы
гематологии,
лабораторные
методы
исследования в клинике, ознакомились с морфологическими методами
исследования
в
ветеринарии,
медицине,
гистологии
и
др.
[6,8,86,87,90,100,107].
Наши исследования проводились на 20 кроликах разного пола и возраста
пород Советская шиншилла и Белый великан, для чего были использованы
16 кроликов в возрасте от 1 до 4 месяцев, из них 10 самок и 6 самцов, и 4
половозрелых кролика (2 самки и 2 самца выше названных пород).
Исследуемые нами кролики были максимально приближены к естественным
условиям
существования
и
помещены
в
деревянные
клетки
в
неотапливаемом помещении. Исследования проводились в течение 1,5 лет
(2012-2013гг.). Взятие крови проводилось утром, натощак из краевой вены
уха кроликов на 30, 60, 90, 120 сутки жизни.
Для сравнения показателей крови животных изучаемых пород мы
использовали биохимический и морфологический методы исследования
крови для кроликов, рекомендованные профессором И.М. Карпуть [49]. По
этому методу для полного морфологического исследования крови достаточно
получить её несколько капель. Необходимо соблюдать только одно условие:
кровь должна быть свежей. Кровь у животных брали из кровеносных сосудов
уха [59]. Исследование биохимических и морфологических показателей
крови проводилось в клинической лаборатории, в лаборатории макромикроэлементов СамГУ и на кафедре физиологии, генетики и биохимии
факультета Естественных наук.
22
Для морфологических и биохимических исследований использовали
венозную кровь. Кровь для исследования морфологического состава брали из
краевой вены уха. В крови определяли количество эритроцитов, содержание
в них гемоглобина, СОЭ, количество лейкоцитов, тромбоцитов по
общепринятым
в
гематологии
методикам,
а
также
с
помощью
гематологического анализатора Mindray BC-2800.
В сыворотке крови определяли: общий белок, количество глюкозы,
щелочной фосфотазы, АСТ, АЛТ, триглецириды с помощью биохимического
анализатора Mindray BS-120 [122].
Дополнительно определяли содержание меди, железа, марганца, цинка,
кальция,
магний,
натрия,
калия
методом
атомной
адсорбции
на
спектрофотометре «Сатурн» [77].
Сроки исследования крольчат выбраны на основании возрастной
периодизации лабораторных животных и были основаны на данных их
физического развития [40,41].
Прокол тканей для получения крови лучше всего производить иглой
Франка, но мы употребляли обыкновенную иглу или специальное перо для
уколов. Первую выступившую на поверхность каплю крови быстро и
тщательно стирали с места укола, а из второй и последующих капель
готовили мазки. При этом чистое предметное стекло держали, как показано
на рисунке 1, между большим и средним пальцами левой руки. В правой
руке, теми же или большим и указательным пальцами держали чистое
покровное или тонкое шлифованное предметное стекло [108,109].
Полученный таким способом мазок высушивали на воздухе и на нём
записывали
номер животного, его пол (♀ или ♂), и дату взятия крови.
Далее мы использовали фиксацию абсолютным метиловым спиртом. Сухие
мазки на 3 минуты погружали в абсолютный метиловый спирт или на то же
время спирт наливали на мазок, вполне покрывая препарат. Через 3 минуты
мазки вынимали (или сливали с них спирт) и просушивали на воздухе [90].
23
Рис. 2.1. Приготовление мазка крови
В нашей лабораторной практике мы использовали способ окраски по
методу Романовского. Краска Гимза, применяемая при окраске по его
методу, представляет собой комбинацию метилен - азура (азур II) и эозина
(В, жёлтого). Эта краска обычно бывает в готовом виде. Очень многое в
успехе окрашивания определяет безупречное качество раствора краски, а
последнее в высшей степени зависит от реакции воды [47].
Количественное определение гемоглобина. Существуют три основные
группы методов определения количества гемоглобина: колориметрические,
газометрические, по содержанию железа в гемоглобиновой молекуле.
Мы использовали главным образом цианметгемогемоглобиновый метод.
Кровь
смешивали
с
реактивом,
превращающим
гемоглобин
в
цианметгемоглобин (стойкое соединение), концентрацию которого измеряли
фотометрически. В качестве реактива употребляли раствор Драбкина
(NaHC03 - 1 г, KCN-0,05 г, K3[Fe(CN)6] - 0,2 г, дистиллированной воды - до 1
л). Под влиянием железосинеродистого калия гемоглобин окисляется до
метгемоглобина (гемиглобина), который затем превращается при помощи
цианида калия в цианметгемоглобин (гемиглобинцианид). Мы разводили
кровь в реактиве Драбкина - 1:250 (0,02 мл крови и 5 мл реактива). Через 20
мин,
необходимых
для
полного
24
превращения
гемоглобина
в
гемиглобинцианид, измеряли экстинкцию при длине волны 540 нм и
толщине слоя 1 см против воды на ФЭК-М [52].
Определение количества эритроцитов производили
используя
сетку
Горяева.
В
строго
определенном
в счетной камере,
объеме
камеры
подсчитывали под микроскопом клеточные элементы, а затем производили
пересчет полученного результата на 1 мкл крови. Кровь предварительно
разводили с целью уменьшения числа клеток, подлежащих счету. Самым
удобным и достаточно точным является способ разведения крови в
пробирках - метод, предложенный Н.М. Николаевым [76], который
заключается в том, что в предварительно высушенную чистую коническую
пробирку точно отмеривали пипеткой 4 мл разводящей жидкости и
осторожно выдували в нее 0,02 мл капиллярной крови. Полученное
разведение 1:202 можно практически принять равным 1:200. Взвесь
тщательно перемешивали и затем заполняли камеру (рис.2.2).
Рис. 2.2. Схема устройства камеры для подсчета кровяных клеток
Сетка Горяева состоит из 225 больших квадратов (15×15). Большие
квадраты, расчерченные вертикально и горизонтально на 16 малых
квадратов, чередуются с квадратами чистыми, без линий. Глубина камеры
равна 1/10 мм, сторона малого квадрата - 1/20 мм; таким образом, объем малого
квадрата равен 1/4000 мм3 (рис 2.3).
25
Рис. 2.3. Сетка Горяева
Эритроциты считают в 5 больших квадратах (5×16=80 малым квадратам),
расположенных по диагонали, поскольку распределение клеток в камере
может быть неравномерным.
Количество эритроцитов в 1 мкл крови рассчитывают по формуле:
Х=
, где
X - количество эритроцитов в 1 мкл крови;
а - число эритроцитов, сосчитанных в определенном количестве малых
квадратов;
б - количество малых квадратов, в которых считались эритроциты;
в - степень разведения крови;
1
/4000
- объем малого квадрата. Умножая его на 4000, приводим к объему 1
мм3 (1 мкл) крови [51,62,93].
Количество лейкоцитов также определяли методом подсчета в камере
Горяева. При этом взятие и разведение крови осуществляли пробирочным
методом. В пробирку вносили 0,4 мл разводящей жидкости и 0,02 мл
капиллярной крови. Полученное разведение 1:21 можно практически считать
равным 1:20. В качестве разводящей жидкости употребляли 3-5% раствор
уксусной кислоты, подкрашенный метиленовым синим (уксусная кислота
лизирует эритроциты, метиленовый синий окрашивает ядра лейкоцитов).
Перед заполнением камеры Горяева пробирку с разведенной кровью
26
тщательно встряхивали. Камеру заполняют так же, как для подсчета
эритроцитов.
Поскольку лейкоцитов гораздо меньше, чем эритроцитов, и на большой
квадрат их приходится 1-2, то для точности подсчет производили в 100
больших квадратах (не разграфленных). Расчет числа лейкоцитов на 1 мкл
крови аналогичен расчету эритроцитов.
Более точным (ошибка не превышает обычно 2-3%) и совершенным
является подсчет лейкоцитов с помощью электронных аппаратов.
Количество тромбоцитов определяли методом подсчета в мазке крови. В
мазке крови подсчитывают количество тромбоцитов по отношению к 1000
эритроцитов производили под иммерсионной системой микроскопа с
использованием сетчатого окуляра или вкладного окошка. Зная абсолютное
число эритроцитов в 1 мкл крови, вычисляли количество кровяных
пластинок в 1 мкл крови. Для предотвращения агглютинации кровяных
пластинок на место укола в ухе наносили каплю 14% раствора сульфата
магнезии.
Скорость оседания эритроцитов определяли микрометодом. Кровь брали
из вены, смешивали с раствором
антикоагулирующего вещества, или
щавелевокислого или лимоннокислого натрия (1 ч. разводящей жидкости и 4
ч. крови) и, набрав смесь в градуированную пипетку, устанавливали ее вертикально. При оценке скорости оседания эритроцитов за постоянную величину
принимали время (1,5 ч), относительно которого оценивали переменную
величину – оседание [52].
Так же общий анализ крови проводили с помощью гематологического
анализатора Mindray BC-2800, который является полностью автоматическим
и проводит исследования по 19 параметрам и технологии отбора микропроб
[16] (рис.2.4).
27
Рис. 2.4 Автоматический гематологический анализатор Mindray BC-2800
Биохимическое исследование крови так же определяли автоматическим
биохимическим анализатором
Mindray BS-120 (рис.2.5). Используя его
определяли: содержание билирубина, общего белка, глюкозы, АСТ, АЛТ,
триглицериды [122].
Содержание меди, железа, кальция, магния, натрия, калия, фосфора т.е.
определение макро - микро элементов проводили методом атомной
абсорбции на спектрофотометре "Сатурн". При этом подготовка проб к
анализу проходила следующим образом:
1. Для подготовки пробы к анализу навеску пробы 1- 5г помещали в
сушильный шкаф с температурой 180◦С до полного высушивания и
частичного обугливания. Затем переносят пробу в муфельную печь,
нагревают до 450◦С и оставляют до образования золы. Для ускорения процесса озоления в пробу добавляют несколько капель азотной кислоты и
28
помещают в печь до полного озоления. Готовую пробу переводят в раствор
0,1 Н соляной кислотой [8].
Рис. 2.5 Автоматический биохимический анализатор Mindray BS-120
Жидкую пробу определенного объема помещали в фарфоровые чашки и
высушивали в сушильном шкафу при температуре 180◦С. Затем высушенную
пробу переносили в муфельную печь (рис.2.6). И далее процесс протекает по
вышеуказанному методу.
2.
Определение
макро
-
микроэлементов
проводили
атомно
-
абсорбционным методом на спектрофотометре «Сатурн».
В качестве источников излучения использовали спектральные лампы с
полым катодом типа ЛСПК и высокочастотные без электродные лампы ВСБ2, питаемые от источника ППБЛ- 2. Абсорбцию измеряли на самопишущем
потенциометре КСП- 4. В качестве атомизатора использовали пламя
ацетилен – воздух [109].
Для определения калия и натрия пользовались методом атомной эмиссии.
Условия проведения анализа приведены в таблице 2.1.
29
Рис.2.6. Муфельная печь
Таблица 2.1.
Параметры определяемых элементов в спектрофотометре «Сатурн»
Определяе
Zn
Fe
Mn
Zn
Ca
Mg
Na
K
324,8
248,3
279,5
213,9
422,7
285,2
589,0
766,5
ЛСП-1
ЛСП-1
ЛСП-
ВСБ
ЛСП-1
ЛСП-1
ВСБ-2
ВСБ
90
20
20
80
80
мый
элемент
Длина
волны, нм
Источник
излучения
Ток
1
20
30
20
источника
излучения
30
Рис. 2.7. Спектрофотометр "Сатурн"
Анализ проводили на атомно - абсорбционном спектрофотометре
"Сатурн" с атомизатором пламя ацетилен - воздух в соответствии с
правилами эксплуатации (рис.2.7). Работа атомно - абсорбционного
спектрофотометра
основана
на
атомно
-
абсорбционном
методе
спектрального анализа - перевод анализируемой жидкой пробы в атомарное
состояние и последующем измерении поглощения излучения спектрального
источника атомами определяемого элемента [105].
31
3. Собственные исследования
3.1.Сравнительный характер изменений в показателях крови кроликов
разного пола
С возрастом у самок кроликов наблюдается повышение содержания
эритроцитов в крови, а у самцов это выражено в значительной степени. При
этом затраты энергии на возрастные изменения концентрации клеток у самок
значительные [5], а у самцов - максимальны при средней концентрации
показателя 4,8±0,15*106/µл и 6,2±0,02*106/µл у породы Белый великан (рис.
3.1.1) и 5,03±0,23*106/µл и 7,2±0,14*106/µл у породы Советская шиншилла
(рис. 3.1.2).
Первые и вторые месяцы исследования содержание эритроцитов в крови
у самок Белого великана повышалось незначительно от 4,3±0,16*106/µл до
4,9±0,09 *106/µл, тогда как с возрастом происходит повышение показателя и
к 4 месяцу достигает 5,84±0,093*106/µл (рис. 3.1.1).
Рис. 3.1.1. Диаграмма соотношения количества эритроцитов в зависимости
от пола у кролика породы Белый великан
32
У
самок
породы
Советская
шиншилла
повышение
количества
эритроцитов наблюдаеться уже во 2 месяц и достигает 5,76±0,089*106/µл и к
4 месяцу достигает 6,92±0,25*106/µл.
Самцы кроликов имеют более повышенные показатели по сравнению с
физиологической
нормой
(табл.3.1.1),
что
связано
со
сравнительно
повышенным содержанием физиологических параметров, и видимо более
повышенной иммуной системой.
Таблица3.1.1
Нормы морфологических параметров крови взрослого кролика
№
Параметры
Норма
Единица
измерения
1
Эритроциты
5,2 – 6,8
106/µл
2
Гемоглобин
80 – 150
г/л
3
Лейкоциты
2,6 – 9,9
10³/µл
4
Тромбоциты
130 – 900
10³/µл
5
СОЭ
1,2 – 1,5
мм/час
Содержание эритроцитов у самцов породы Белый великан во второй
месяц соответствовало норме - 5,16±0,08*106/µл и в последний исследуемый
месяц составило 6,2±0,02*106/µл. Однако Советские шиншиллы имели
значительно высокие показатели эритроцитов и в 3 - 4 месяц значения
достигли выше нормы 7±0,1*106/µл и 7,2±0,14*106/µл соответственно (рис.
3.1.2).
С возрастом содержание гемоглобина в крови самок и самцов кроликов
увеличивается, что связано с интенсивным ростом молодняка.
В 1 и во 2 месяцы гемоглобин у самок и самцов Белого великана был
67±0,85 г/л и 69±0,3 г/л (рис. 3.1.3), а у Советской шиншиллы 70,8±1,03 г/л и
73,8±1,6 г/л соответственно (рис. 3.1.4).
33
Рис. 3.1.2. Диаграмма соотношения количества эритроцитов в зависимости
от пола у кролика породы Советская шиншилла
Рис. 3.1.3. Диаграмма соотношения количества гемоглобина в зависимости
от пола у кролика породы Белый великан
34
В 3 месяц гемоглобин у самок и самцов обоих пород был от 85±2,1 г/л до
93±2,3 г/л. В 4 месяц содержание гемоглобина у кроликов был значительно
улучшенным, 110,2±4,2 г/л и 124±2,3 г/л у самок и самцов Белого великана,
126,8±1,17 г/л и 127±1,73 г/л у самок
и самцов Советской шиншиллы
соответственно (табл. 3.1.1).
Рис. 3.1.4. Диаграмма соотношения количества гемоглобина в зависимости
от пола у кролика породы Советская шиншилла
У самцов с возрастом происходит неуклонное повышение степени
насыщения гемоглобином эритроцитов, затраты энергии на возрастные
изменения максимальные, а у самок - небольшие при среднем уровне
показателя (табл. 3.1.2).
Концентрация лейкоцитов клеток в крови у самок кроликов с возрастом
неуклонно повышается,
в первую половину у самок и самцов Белого
великана и Советской шиншиллы выражено варьирование значений от
1,2±0,063*10³/µл до 2,03±0,063*10³/µл, а затем во второй половине
повышение у самцов и самок Советской шиншиллы 5,2±0,08*10³/µл 5,76±0,31* 10³/µл и 5,32±0,28*10³/µл - 5,6±0,053*10³/µл соответственно [13].
35
У самок Белого великана содержание лейкоцитов во второй половине
значительно повышается и к четвертому месяцу достигает 6,68±0,3*10³/µл.
Согласно литературным данным [5] затраты энергии на возрастные
изменения у самок значительные, у самцов максимальные при концентрации
показателя (рис. 3.1.5; 3.1.6).
Рис. 3.1.5. Диаграмма соотношения количества лейкоцитов в зависимости
от пола у кролика породы Белый великан
Рис. 3.1.6. Диаграмма соотношения количества лейкоцитов в зависимости
от пола у кролика породы Советская шиншилла
36
Количество тромбоцитов у самок Белого великана в первую половину
составило 101,2±2,7*10³/µл - в первый месяц и 110,2±3,7*10³/µл во второй
месяц.
У
самцов
Белого
великана
тромбоциты
приблизительно
соответствовали значению самок и достигли 105,3±3,2*10³/µл - в первый
месяц и 113,3±3,38*10³/µл во второй месяц.
В третий и четвертые месяцы самки и самцы породы Белый великан
имели
значение тромбоцитов 124,2±1,82*10³/µл и 133,6±12*10³/µл и
127±2,5*10³/µл и 126,6 ±1,6*10³/µл соответственно (рис. 3.1.7).
Рис. 3.1.7. Диаграмма соотношения количества тромбоцитов в зависимости
от пола у кролика породы Белый великан
Значение тромбоцитов у самок породы Советская шиншилла с возрастом
постепенно увеличивается и с первого от 104,8±2,83*10³/µл и в четвертый
месяц достигает 132,2±1,15*10³/µл соответственно (табл.3.1.2).
Самцы Советской шиншиллы имели наиболее
высокое количество
тромбоцитов, чем другие кролики и, если в первый и во второй месяц их
число было 109,3±0,66*10³/µл и 139,6±2,4*10³/µл соответственно, то к
четвертому месяцу количество тромбоцитов достигло 140,6±1,2*10³/µл (рис.
3.1.8).
37
Рис. 3.1.8. Диаграмма соотношения количества тромбоцитов в зависимости
от пола у кролика породы Советская шиншилла
Скорость оседания эритроцитов (СОЭ) у самок породы Белый великан
первые и вторые исследуемые месяцы варьировало у самок 0,94±0,04*10³/µл
и 1,04±0,05*10³/µл, а к четвертому месяцу достигло 1,38±0,089*10³/µл.
Рис. 3.1.9. Диаграмма соотношения СОЭ в зависимости от пола у кролика
породы Белый великан
38
У самцов Белого великана в первый месяц 0,86±0,12*10³/µл, во второй 1,13±0,088*10³/µл, в третьий - 1,26±0,086*10³/µл и в чевертый достигло до
1,3±0,098*10³/µл (рис. 3.1.9).
Самки Советской шиншиллы в первый и во второй месяцы имели
значение
скорости
оседания
эритроцитов
от
1,04±0,05*10³/µл
до
1,18±0,04*10³/µл, во второй половине исследуемых месяцев происходило
уменьшение скорости оседания эритроцитов и к четвертому месяцу достигло
1,44±0,2*10³/µл (рис. 3.1.10).
Самцы Советской шиншиллы имели скорость
оседания
эритроцитов
0,96±0,06*10³/µл в первый месяц, со второго по четвертый месяц показатель
скорости
оседания
эритроцитов
соответственно
повышался
от
1,4±0,06*10³/µл до 1,6±0,1*10³/µл (рис. 3.1.10).
Рис. 3.1.10. Диаграмма соотношения СОЭ в зависимости от пола у кролика
породы Советская шиншилла
Таким образом, наибольшие изменения морфологического состава крови
у кроликов, как и у других видов животных, совпадают с периодами,
связанными с активным течением обмена веществ, т.е. периодами
интенсивного роста молодняка, беременности, лактации и др. Хорошо
прослеживается зависимость изменения показателей с возрастом и полом
животных [38].
39
Таблица 3.1.2
Показатели крови у кроликов породы Белый великан и Советская шиншилла
Порода
Пол
Белый великан
Самки
Самцы
Советская
шиншилла
Самки
Самцы
Показатель
Эритроциты, 10 /µл
Гемоглобин, г/л
Лейкоциты, 10³/µл
Тромбоциты, 10³/µл
СОЭ, мм/час
Эритроциты, 106/µл
Гемоглобин, г/л
Лейкоциты, 10³/µл
Тромбоциты, 10³/µл
СОЭ, мм/час
Эритроциты, 106/µл
Гемоглобин, г/л
Лейкоциты, 10³/µл
Тромбоциты, 10³/µл
СОЭ, мм/час
Эритроциты, 106/µл
Гемоглобин, г/л
Лейкоциты, 10³/µл
Тромбоциты, 10³/µл
СОЭ, мм/час
6
30
4,3±0,16
67,2±0,85
1,6±0,12
101,2±2,7
0,94±0,04
4,8±0,15
68,6±0,88
1,6±0,17
105,3±3,2
0,86±0,12
4,52±0,16
70,8±1,03
1,22±0,13
104,8±2,83
1,04±0,05
5,03±0,23
71,6±2,02
1,2±0,063
109,3±0,66
0,96±0,06
40
Возраст, дни
60
90
4,9±0,09
5,4±0,09
69±0,31
85±2,1
2,0±0,2
5,44±0,23
110,2±3,7
124,2±1,82
1,04±0,05
1,16±0,093
5,16±0,08
6,03±0,14
74,6±1,4
93±2,3
1,7±1,17
5,3±1,17
113,3±3,38
127±2,5
1,13±0,088 1,26±0,086
5,76±0,089
6,44±0,14
73,8±1,6
89,8±0,67
1,64±0,14
5,32±0,28
119,2±3,9
128,4±1,07
1,18±0,04
1,32±0,08
6,03±0,08
7±0,1
75±1,15
92,6±1,85
2,03±0,063
5,2±0,08
139,6±2,4
133,6±0,67
1,4±0,06
1,3±0,06
120
5,84±0,093
110,2±4,2
6,68±0,3
133,6±12
1,38±0,089
6,2±0,02
124±2,3
5,4±0,23
126,6±1,6
1,3±0,098
6,92±0,25
126,8±1,17
5,6±0,053
132,2±1,15
1,44±0,2
7,2±0,14
127±1,73
5,76±0,31
140,6±1,2
1,6±0,1
3.2. Сравнительный характер изменений в показателях крови кроликов
разного возраста
Количество
эритроцитов
согласно
исследованиям многочисленных
авторов [31,49,57,58] с возрастом меняется. Наши исследования [12,13] в
общем не противоречат этим данным. В среднем у кроликов считается
нормой содержание эритроцитов в 1 мм³ крови в пределах 5,2-7,8*106/µл.
Так, в первый месяц жизни количество эритроцитов в крови крольчат
значительно ниже нормы, но с увеличением возраста повышается и к 4месячному возрасту приходит в соответствие с нормой. Так, в месячном
возрасте количество эритроцитов в 1 мм³ во всех группах было ниже
физиологической нормы и составило 4,4±0,16*106/µл и 4,7±0,15*106/µл
соответственно (табл. 3.2.1).
Так у кроликов породы Белый великан в первый месяц содержание
эритроцитов в крови достигало 4,4±0,16*106/µл а в последующие вторые и
третьи месяцы происходило постепенное повышение показателя 5,0±0,07*
106/µл, 5,6 ±0,14*106/µл соответственно.
Рис. 3.2.1. Диаграмма сравнения количества эритроцитов в зависимости от
возраста кроликов
41
К четырёхмесячному возрасту в группах молодняка пород Белый
великан
количество эритроцитов в единице объёма уже соответствовало
физиологической норме и составило 6,0±0,1*106/µл (рис. 3.2.1).
У породы Советская Шиншилла количество эритроцитов значительно
повышается, в первый месяц достигает 4,7±0,15*106/µл, ко второму месяцу
значительно повышаеться до 5,9±0,08*106/µл, в третий исследуемый месяц
количество эритроцитов в среднем равно 6,6±0,14*106/µл и к четвертому
месяцу превышает нормированное значение и достигает 7,2±0,21*106/µл
(табл.3.2.1).
Таблица 3.2.1
Морфологические показатели крови крольчат
Порода
Показатели
Эритроциты,
106/µл
Гемоглобин,
г/л
Белый
Лейкоциты,
великан
10³/µл
Тромбоциты,
10³/µл
СОЭ, мм/час
Эритроциты,
106/µл
Гемоглобин,
г/л
Советская Лейкоциты,
шиншилла 10³/µл
Тромбоциты,
10³/µл
СОЭ, мм/час
Возраст, дни
60
90
30
120
4,4±0,16
5,0±0,07
5,6±0,14
6,0±0,1
67,75±0,7
71±1,24
88±2,3
115,5±3,7
1,9±0,13
1,6±0,09
5,4±0,2
6,2±0,3
103±2,2
111±2,72
131±6,2
125±1,8
0,9±0,05
1,07±0,04
1,3±0,08
1,35±0,06
4,7±0,15
5,9±0,08
6,6±0,14
7,2±0,21
71±0,98
74±1,2
91±1,14
127±0,96
1,2±0,09
1,8±0,12
5,2±0,13
5,6±0,07
106,5±2,03
113±6,5
130±1,27 135,4±1,86
1±0,042
1,3±0,13
1,3±0,05
1,5±0,072
Содержание гемоглобина в крови взрослых животных в среднем
составляет 120 г/л. У молодняка кроликов всех пород этот показатель
несколько занижен и его колебания у Белого великана составили от 67,75±0,7
42
г/л до 115,5±3,7 г/л с первого по четвертые месяцы, тогда как у Советской
шиншиллы эти показатели были повышенные. В первый месяц содержание
гемоглобина в эритроцитах составило 71±0,98 г/л, ко второму месяцу
значение достигло 74±1,2 г/л, а во второй половине 91±1,14 г/л и 127±0,96 г/л
соответственно (табл.3.2.1), (рис. 3.2.2).
Рис. 3.2.2. Диаграмма сравнения количества гемоглобина в зависимости от
возраста кроликов
В крови взрослых животных варьирование лейкоцитов считается
нормальным в пределах от 2,6 до 9,9*10³/µл в 1 мм³ (табл.3.2.1). Однако в
наших исследованиях в 1-2-месячном возрасте выявлено содержание
лейкоцитов ниже физиологической нормы для взрослых кроликов и Белого
великана варьировала от 1,9±0,13*10³/µл до 6,2±0,13*10³/µл, таким образом,
с ростом количество лейкоцитов было в пределах нормы (рис. 3.2.3).
У
кроликов
породы
Советская
шиншилла
в
первой
половине
исследуемых месяцев было так же пониженным 1,2±0,09*10³/µл и
1,8±0,12*10³/µл первые и вторые месяцы соответственно. Во второй
половине количество содержания лейкоцитов повышается и к четвертому
месяцу достигает 5,6±0,07*10³/µл (рис. 3.2.3).
43
Количественное содержание лейкоцитов в крови у кроликов породы
Белый великан повышенное, что, видимо, связано с тем что они являются
альбиносами, и иммунные силы организма более ослабленные.
Рис. 3.2.3. Диаграмма сравнения количества лейкоцитов в зависимости от
возраста кроликов
Количественное содержание тромбоцитов у кроликов породы Белый
великан
наиболее
минимальные
в
первый
месяц
и
составляют
103±2,2*10³/µл, а у Советской шиншиллы 106,5±2,03*10³/µл, а во второй
месяц у Белого великана 111±2,72*10³/µл, а у Советской шиншиллы
113±6,5*10³/µл.
В третий месяц
130±1,27*10³/µл
у
происходит резкое повышение тромбоцитов до
Советской
шиншиллы,
а
у
Белого
великана
131±6,2*10³/µл (рис. 3.2.4).
В последний месяц содержание тромбоцитов у Белого великана
понижаеться до 125±1,8*10³/µл тогда как у Советской шиншиллы количество
тромбоцитов равно 135,4±1,86*10³/µл (рис. 3.2.4).
44
Рис. 3.2.4. Диаграмма сравнения количества тромбоцитов в зависимости от
возраста кроликов
Средние показатели скорости оседания эритроцитов (СОЭ) в крови
опытных кроликов во все возрастные периоды в основном находились в
пределах физиологической нормы. Так у кроликов породы Белый великан в
первый месяц скорость оседания эритроцитов составила 0,9±0,05мм/час. Со
второго по четвертые месяцы скорость оседания эритроцитов составила
1,07±0,04 мм/час; 1,3±0,08 мм/час; 1,35±0,06 мм/час (рис. 3.2.5).
Скорость оседания эритроцитов у Советской шиншиллы в первый месяц
составило 1±0,042 мм/час, а в последующие месяцы варьировало в пределах
нормы
от
1,3±0,13
мм/час
-
1,3±0,05
соответственно.
45
мм/час
-
1,5±0,072 мм/час
Рис. 3.2.5. Диаграмма сравнения СОЭ в зависимости от возраста кроликов
Наибольшие изменения морфологического состава крови у кроликов
совпадают с периодами, связанными с активным течением обмена веществ,
т.е. периодами интенсивного роста молодняка. Хорошо прослеживается
зависимость изменения показателей с возрастом животных.
3.3 Биохимические показатели и макро - микроэлементы крови
кроликов
В доступной литературе в настоящее время преобладают данные
гематологического показателя у кроликов как у вида, не делая акценты на
породы, пол и возраст. Действительно у молодых крольчат невозможно
получить достаточное количество крови, чтобы проследить в динамике
изменение
биохимических
показателей
и
содержание
макро
-
микроэлементов крови. В связи с этим приведенные ниже результаты мы
получили у взрослых кроликов породы Белый великан.
Белки
плазмы
выполняют
самые
разнообразные
функции.
При
интенсивном росте, сукрольности, лактации, а также при заболеваниях
животных соотношение белковых фракций меняется. Количество общего
46
белка в сыворотке крови кроликов 30 - дневного возраста была чуть ниже
нормы, однако с возрастом этот показатель повысился и составил к 120дневному возрасту - 83 г/л, что превышает физиологическую норму
здорового взрослого кролика (табл.3.3.1).
Триглицериды - это жиры, которые накапливаются в организме, а когда
нужна энергия, они выходят из жировой ткани и сжигаются в мышцах.
Уровень триглицеридов в крови зависит от животного. Высокий уровень
триглицеридов в крови часто наблюдается при ожирении, которое приводит к
развитию атеросклероза [55]. Норма триглицеридов в крови до 0,66 ммоль/л,
в нашем исследовании составила 0,63 ммоль/л (табл.3.3.1).
У кроликов и крыс изменение активности щелочной фосфатазы и
содержания мочевины в сыворотке крови, дегенеративные изменения в
лейкоцитах, признаки раздражения костного мозга и лимфоидной ткани.
Отмечены также изменения ЭКГ, проницаемости сосудов, деструктивнодистрофические изменения во внутренних органах [120]. Согласно нашим
данным содержание щелочной фосфатазы составило 53 U/L при нормальном
значении этого показателя от 30 - 90 U/L (табл.3.3.1).
Таблица 3.3.1
Биохимические исследование крови у кролика
№ Параметры
Результат
Норма
(наши данные)
(литературные данные)
1
Общий белок
83
58 – 76 г/л
2
Триглицериды
0,63
0,22 – 0,66 ммоль/л
3
Щелочная фосфатаза
53
30 – 90 U/L
4
АСТ
70,4
3,8 – 45 U/L
5
АЛТ
85,6
9,6 – 60 U/L
6
Глюкоза
7,31
3,6 – 6,16 ммоль/л
Аланинаминотрансфераза (АЛТ или АлАТ) и аспартатаминотрансфераза
(АСТ или АсАТ) объединяют в одну группу ферментов - аминотрансферазы.
47
Аминотрансферазы являются ключевыми ферментами белкового обмена и
являются связующим звеном между ним и углеводным обменом. В состав
этих ферментов входит витамин B6. Ферменты имеют избирательную
тканевую специализацию, поэтому анализ крови на АЛТ свидетельствует о
состоянии печени, анализ крови на АСТ - показатель состояния сердечной
мышцы - миокарда. Главными причинами повышения уровня данных
ферментов в сыворотке крови являются - гепатоцеллюлярное повреждение
(клеток печени), выпуск ферментов (ферментная индукция), мионекроз
(омертвление мышц). При циррозе печени обычно АСТ повышено больше,
чем АЛТ [123]. Содержание АЛТ согласно нашим исследованиям у кролика
составило 85,6 U/L, АСТ – 70,4 U/L (табл.3.3.1).
Содержание сахара в крови и связанное с этим накопление гликогена, а
также в случае необходимости выделение глюкозы с мочой, регулируются в
организме
высших
животных
и
человека
инсулином,
гормоном
поджелудочной железы, и кортикостероном, гормоном надпочечников.
Никогда нельзя определять количество глюкозы у кролика, который долгое
время не ел. Физиологически у кроликов не возникает „голодных“ пауз.
Любое голодание приводит к изменению метаболизма и сбоям работы
желудочно-кишечного тракта [55,93]. Содержание глюкозы в организме у
самки Белого великана к четырехмесячному возрасту составило 7,31 ммоль/л
(табл.3.3.1)
Необходимые для организма минералы делятся на две группы:
макроэлементы и микроэлементы. К макроэлементам относятся кальций,
магний, фосфор, калий, хлор и сера. К микроэлементам относятся хром,
кобальт, медь, йод, железо, марганец, молибден, никель, селен и цинк. Для
некоторых видов животных важны также мышьяк, бор, свинец, кремний и
ванадий.
На
определение
"ежедневной
рекомендуемой
дозы"
этих
компонентов было потрачено так много времени и средств, что сейчас уже
можно не опасаться ни недостатка, ни избытка макро - и микроэлементов в
пище.
48
Для людей рекомендуемая дозировка устанавливается в минимальном
размере,
достаточном
для
предотвращения
дефицита
каждого
из
компонентов. Для животных эта дозировка устанавливается в расчете на
поддержание максимальной производительности. Может показаться, что
именно человеческие нормы должны быть ориентированы на максимальную
производительность, а не наоборот, однако это не так (нормы спортивного
питания
рассчитаны
как
раз
на
поддержание
максимальной
производительности у людей) [126].
Медь входит в состав гемоглобина и участвует в химических реакциях в
крови млекопитающих. Медь необходима для синтеза гемоглобина и
созревания эритроцитов. Недостаток меди может вызвать дефицит железа в
организме и анемию. В условиях дефицита меди развиваются дефекты
костной и хрящевой ткани. Это может отразиться и на зубах. Еще одно
следствие дефицита меди - поседение черных волос (и шерсти) - может
оказаться большой проблемой для пушного звероводства. Медь входит в
состав тирозиназы, фермента, преобразующего аминокислоту тирозин в
меланин - черный пигмент волос (и шерсти). У норок, в пище которых медь
присутствует в избытке, имеют более темный окрас, чем те, в рационе
которых меди не хватает [65,66,67,121,126].
В организме медь играет довольно большую для микроэлемента роль.
Поскольку содержание меди в организме невелико, ее не нужно добавлять в
пищу в больших количествах. Симптомы нехватки меди - анемия (вызванная
нехваткой меди или железа), замедленный рост (дефекты костей),
депигментация и изменения качества и внешнего вида волос, меха и шерсти,
сердечная
недостаточность,
хрупкие
кости,
диарея,
снижение
репродуктивной способности, выраженное в отсутствии или угнетении
эструса (течки). Вот проблемы, которые могут повлиять на продуктивность
животноводства [63]. Согласно нашим данным содержание меди в организме
четырехмесячного кролика составило 0,9 мкг/мл (табл.3.3.2). В организме
присутствуют антагонисты меди - молибден и сера. Молибден и сера
49
образуют
тиомолибдат,
который
в
организме
жвачных
животных
соединяются с медью в нерастворимый комплекс. У кроликов такой реакции
не наблюдается [64,124].
Железо и цинк в высоких концентрациях также могут снизить усвоение
меди. Поскольку в питьевой воде в небольших концентрациях (1:1 000 000)
могут содержаться сульфиды железа. Величина железа в крови кроликов с
возрастом увеличивается, сопровождаясь минимальными энергетическими
затратами при уровне показателя 206,0 мкг/мл (табл.3.3.2).
Таблица 3.3.2
Содержание микро - и макроэлементов в крови кролика породы Белый
великан (возраст 4 месяца)
№
Элемент
1
2
3
4
5
6
7
8
Cu
Zn
Fe
Mn
Ca
K
Na
Mg
Результат
(мкг/мл)
Норма
(мкг/мл)
(наши данные)
(литературные данные)
0,9
9,0
206,0
0,18
22,3
606,0
80,5
19,7
1,0
3-10,0
264,0
60,0
до 1700,0
-
Марганец, его недостаток вызывает разнообразные симптомы и, в
зависимости от вида животных, оказывает влияние на воспроизводство. У
всех видов животных недостаток марганца вызывает аномалии скелета:
потерю гибкости, искривление ребер, увеличение суставов и хрупкость
костей. У крупного рогатого скота также снижается плодовитость. У коров,
содержащихся на без марганцевой диете, наблюдаются нарушения цикла,
уменьшение
частоты
зачатий,
выкидыши,
рождение
мертвых
и
недоношенных детенышей. У кроликов таких последствий не обнаружено
[64]. Содержание марганца в организме четырехмесячного кролика самки
Белого великана составило 0,18 мкг/мл (табл.3.3.2).
50
Основное физиологическое значение кальция в организме заключается в
том, что он входит в состав минеральной части костей, участвует в процессе
свертывания
крови;
повышает
защитные
функции
организма.
Физиологической нормой содержания кальция является 60 мкг/мл. У
четырехмесячного кролика, согласно нашим данным, этот показатель ниже 22,3 мкг/мл (табл.3.3.2), но с возрастом содержание кальция приближается к
физиологической норме.
Калий - один из трех самых распространенных элементов в организме. Он
в больших количествах содержится во внеклеточных жидкостях. Он
участвует в поддержании водного и кислотно - щелочного баланса (pH),
осмотического давления, регулирует сокращение мышц, передачу нервных
импульсов и некоторые ферментативные реакции. Дефицит калия приводит к
снижению аппетита, замедлению набора веса, извращенному аппетиту,
грубой шерсти и мышечной слабости. Такие симптомы могут быть вызваны
и другими причинами. У кроликов дефицит калия может быть вызван
диареей
(поносом).
(минералокортикоид)
Гормоны
надпочечников,
стимулируют
например,
накопление
натрия
альдостерон
и
усиленное
выделение калия почками. По сравнению с другими млекопитающими, у
кроликов активность этих гормонов снижена, что может серьезно повлиять
на баланс ионов натрия и калия [126]. Наши данные показывают, что
содержание калия составило 606,0 мкг/мл (табл.3.3.2).
Натрий также участвует в передаче нервных импульсов, мышечном
сокращении и транспорте глюкозы и аминокислот. Натрий в основном
содержится в плазме крови. Согласно нашим изысканиям содержание натрия
в организме кролика составило 80,5 мкг/мл (табл.3.3.2).
Магний присутствует во всех тканях организма - от 65 до 70 % магния
сосредоточено в костях, 15% в мышцах, 15 % в других тканях и 1% во
внеклеточных жидкостях. Магний является необходимым компонентом
более 300 ферментов. Он абсолютно необходим как компонент АТФ
(аденозин - трифосфат) - магниевого комплекса, который участвует во всех
51
видах биосинтеза в организме, включая гликолиз, активный мембранный
транспорт и перенос ДНК. Магний также участвует в поддержании разности
потенциалов на мембранах нервных и мышечных клеток и в передаче
нервных импульсов [4]. Количество магния в крови кролика составило 19,7
мкг/мл (табл.3.3.2).
52
4. Обсуждение результатов
Знакомство с литературой показало, что данные в этом вопросе либо
морально устаревшие, либо отрывочные, либо имеют общий характер, не
делая акцент на возраст или породу и потому изучение сравнительной
характеристики крови у кроликов разного пола и возраста является
актуальным и своевременным. Так, например, Т.Н. Макарова (71,72,73,74)
показывает морфологические и биохимические показатели крови только у
кроликов породы Советская шиншилла не указывая сравнительных аспектов
с другими породами.
В литературных данных мы не нашли нормированных значений для
магния, натрия и калия. В наших исследованиях эти данные имеют место марганец 0,18 мкг/мл, натрий 80,5 мкг/мл, магний 19,7 мкг/мл. Сравнение
морфологических показателей крови крольчат между породами
великан и Советская шиншилла показала,
Белый
что в 30 дневном возрасте
содержание гемоглобина у Белого великана 67,75±0,7 г/л, а у Советской
шиншиллы 71,0±0,98 г/л, что несколько выше.
Согласно литературным данным в 3х месячном возрасте прекращается
поступление иммунных тел с молоком матери и начинает работать своя
иммунная система. В результате наших исследований кормление молоком
матери прекращается в месячном возрасте, и начинает работать своя
иммунная система, что доказывают показатели результатов исследования
крови.
Анализ крови кролика весьма информативен в плане оценки состояния
организма животного. Полученные результаты исследования: уточняют и
дополняют сведения об особенностях количественно - качественного состава
крови
животных.
Изменения
состава
крови
у
кроликов
носят
неспецифический характер, степень которых зависит от возраста и пола
животных.
Обнаружены существенные изменения количественно - качественного
состава клеток белой крови, что является неспецифической иммунной
53
защитой
организма
взрослых
особей
к
неблагоприятным
условиям
окружающей среды.
Следовательно, проведённые исследования по изучению различий в
биохимическом и морфологическом составе крови показали, что по
морфологическим показателям крови выгодно отличался молодняк породы
Советская шиншилла, тогда как сверстники пород Белый великан, хотя и
имели показатели крови в пределах физиологической нормы, несколько им
уступали.
По общему содержанию белков в крови, преимущество отмечено у
молодняка породы Белый великан, у них же отмечено и наибольшее значение
белкового
коэффициента,
что
свидетельствует
об
их
повышенной
устойчивости против отрицательных воздействий внешней среды [118].
Таким образом, наибольшие изменения морфологического состава крови
у кроликов, как и у других видов животных, совпадают с периодами,
связанными с активным течением обмена веществ, т.е. периодами
интенсивного роста молодняка, беременности, лактации и др. Хорошо
прослеживается зависимость изменения показателей с возрастом и полом
животных. Рост и развитие крольчат в первые четыре месяца постнатального
периода
сопровождаются
закономерными
изменениями
массы,
совершенствованием структурно - физиологической организации крови.
Проводя морфологические исследования крови, мы изготавливали мазки
крови
кроликов
разного
возраста,
наиболее
удачные
из
них
-
микрофотографии морфологии крови кролика породы Белый великан (рис.
4.2, 4.3, 4.4, 4.5).
Следует отметить, что при изучении морфологии клеток мазки должны
быть достаточно тонкими, хорошо фиксированными и окрашенными. Только
в этом случае клетки расположены изолированно, окрашены в розоватый
цвет (для рисунка картины крови 4.1).
54
Рис. 4.1. Микрофотография картины крови с указанием основных клеток
крови, в частности, лимфоцита(←).
Рис. 4.2. Микропрепарат картины крови кролика в возрасте 1 месяц
(увеличение 15×60)
55
Рис. 4.3. Микропрепарат картины крови кролика в возрасте 2х месяцев
(увеличение 15×60)
Рис. 4.4. Микропрепарат картины крови кролика в возрасте 3х месяцев
(увеличение 15×60)
56
Рис. 4.5. Микропрепарат картины крови кролика в возрасте 4х месяцев
(увеличение 15×60)
Так же, наконец, в зависимости от вида, возраста, пола, конституции и
породы животного, а также от времени дня и характера кормления даже у
здоровых
животных
в
показаниях
лейкоцитарной
формулы
крови
наблюдается значительные колебания. Поэтому при оценке лейкоцитарной
формулы пользуются средними цифрами, учитывая предельные колебания
содержания в крови клеток разных форм.
57
Выводы
1.
Наибольшие изменения морфологического состава крови у кроликов,
как и у других видов животных, совпадают с периодами, связанными с
активным течением обмена веществ, т.е. периодами интенсивного роста
молодняка,
беременности,
лактации
и
др.
Хорошо
прослеживается
зависимость изменения показателей с возрастом и полом животных.
2.
С
возрастом
показателей,
обнаружены
увеличение
числа
изменения
эритроцитов,
морфофизиологических
средней
концентрации
гемоглобина, тромбоцитов и скорости оседания эритроцитов.
3.
Самцы
кроликов
имеют
более
повышенные
морфологические
показатели крови, что связано со сравнительно повышенным содержанием
физиологических параметров и видимо более повышенной иммунной
системой.
4.
Исследования
по
изучению
различий
в
биохимическом
и
морфологическом составе крови показали, что по морфологическим
показателям
крови
выгодно
отличался молодняк породы
Советская
шиншилла, тогда как сверстники пород Белый великан, хотя и имели
показатели крови в пределах физиологической нормы, несколько им
уступали.
5.
Были установлены результаты по макро – микроэлементному составу
крови взрослого кролика породы Белый великан, в частности, нормы по
марганцу, натрию и магнию, в литературных источниках не найдены и нами
установлены впервые.
58
Рекомендации
Полученные результаты исследования уточняют и дополняют сведения
об особенностях количественно - качественного состава крови животных,
содержащихся в условиях Республики Узбекистан.
По результатам исследований мы рекомендуем использовать полученные
данные при подготовке специалистов биологического профиля, в научных
лабораториях, ветеринарным врачам при оценке состояния организма
кроликов рекомендуем использовать в качестве нормативов возрастные и
половые физиологические показатели, а также уровни морфологических и
биохимических компонентов крови.
Также фактический материал диссертационной работы может быть
использован:
- при написании соответствующих разделов учебных пособий,
справочных руководств по морфологии, гистологии и физиологии
крови кроликов;
- в учебном процессе при чтении лекций и проведении лабораторнопрактических занятий по анатомии, гистологии и физиологии на
факультетах высших учебных заведений;
- материалы работы могут быть рекомендованы для использования
специалистами, занимающимися вопросами общей и экологической
физиологии и учителями-биологами для чтения лекций и проведения
семинарских занятий;
- при выполнении научных исследований магистрами и соискателями;
- в кролиководческих фермах с целью направленного влияния на рост,
развитие и повышения продуктивности кроликов;
- так как кролики широко используются и как лабораторные животные
в медицине, ветеринарии, биологии, а также для приготовления вакцин,
сывороток и диагностических тестов.
59
Данные по морфофизиологическим и биохимическим показателям кроликов
различных возрастных групп могут быть использованы в качестве критериев
для оценки физиологического состояния кроликов.
60
Использованная литература
1.Аббасов Т.Г. Морфологические и биохимические показатели крови
кроликов при отравлении дельсектом / Т.Г. Аббасов, С.Е. Шерешкова //
Проблемы ветеринарной санитарии и экологии: Сб. науч. тр. — М., 2000.- т.
109.- С. 3-9.
2.Автандилов
Г.Г.
Медицинская
морфометрия
/Г.Г.
Автандилов.
Руководство. - Медицина, 1990. М: - 384. - 14 с.
3.Агаджанян Н.А. Химические элементы в среде обитания и экологический
портрет человека / Н.А. Агаджанян, А.В. Скальный. М., 2001. - 83 с.
4.Агаджанян Н.А., Катков А. Ю. Резервы нашего организма. М.: Знание,
1990. С. 23-204.
5.Александров В.Н. Уровень энергетического питания молодняка кроликов /
В.Н. Александров, К.Н. Морозова, Т.Л. Чичкова // Кролиководство и
звероводство. 2004. - № 3. - С. 9-11.
6.Антонова В.Я. Лабораторные исследования в ветеринарии / В.Я. Антонова,
П.Н. Блинова. — М.: Колос, 1974.- 320 с.
7.Аршавский
И.А.
Физиологические
механизмы
и
закономерности
индивидуального развития. М.: Наука, 1982.- 270 с.
8.Атомно - абсорбционный спектральный анализ. Львов Б.В.,М., «Наука».121 с.
9.Баженов
А.Н. Изменение электрокардиограммы молочных коров при
нарушении обмена веществ / А.Н. Баженов, М.Н. Феклистов // Сб. работ /
ЛВИ.- 1959.-Вып. XXII.-С. 147-151.
10.Бакшеев П.Д. Поточное производство мяса кроликов / П.Д. Бакшеев, Е.П.
Наймитенко. М.: Колос, 1980. - С. 9 -17.
11.Басова Н.Ю. Респираторные болезни молодняка КРС инфекционной
этиологии в условиях Северного Кавказа / Н.Ю. Басова // Автореф. дис. окт.
вет. наук. Краснодар, 2002. - С. 11-14.
12.Бегматова Д.А. Изучение морфофизиологических показателей крови у
разных возрастных групп кроликов - СамСХИ 2013. - С. 103-104.
61
13.Бегматова Д.А. Морфофизиологические показатели крови кроликов
разного возраста // Магистрларнинг илмий конференцияси материаллари
тўплами – 2013. - С. 82-83.
14.Белокопытин Ю.С. Изменение некоторых показателей крови донского
судака в нерестовый период / Ю. С. Белокопытин // Рыбное хозяйство. 1973. № 1. - С. 19-20.
15.Берестов В.А. Биохимия и морфология крови пушных зверей
Изд-во
«Карелия», Петрозаводск - 1971.- 98 с.
16.Боровиков В. П. STATISTICA: искусство анализа данных на компьютере.
Для профессионалов / В. П. Боровиков. СПб.: Питер, 2001.- 656 с.
17.Болотников И.А. Гематология птиц / И. А. Болотников, Ю. В. Соловьев
Ленинград: Науки, 1980.-112 с.
18.Бычкова Н.П. Токсичность алацида /Н.П.Бычкова и др. //Гигиена и
санитария. 1990. - №2. - С.83-85.
19.Вагин Е.А. Пушное звероводство и кролиководство / А.И. Квапиль, П.Т.
Клецкин, Л.Г. Уткин.- M.: Колос, 1971. С. 24-26.
20.Вагин Е.А. Кролиководство в личных хозяйствах / Е.А. Вагин, Р.П. Цвет
кова. М.: Московск. рабочий, 1981. - 160 с.
21.Вариабельность сердечного ритма среди кроликов породы шиншилла /
К.Ш. Надареишвили, И.И. Месхишвили, Д.Д. Кахиани и др. // Бюл.
эксперимен. биологии и медицины.- 2002.-Т.134.-№12.- С. 657-659.
22.Васильев А.В. Гематология сельскохозяйственных животных. М.: ОгизСельхозгиз,1948.-116 с.
23.Волкова C.И. // Интенсификация прудового рыбоводства: сб. науч. тр.
МСХА им. К.А. Тимирязева. М., 1982. - С. 53-56.
24.Волынкин Ю.JI. К вопросу о тромбоцитах рыб / Ю. JI. Волынкин: сб.
науч. тр. Калинингр. техн. ин та рыбн. пром - сти и хоз-ва. - 1980. - Вып. 91.С. 61-65.
62
25.Волынкин Ю.Л. Лейкоциты и тромбоциты периферической крови
некоторых рыб отряда окунеобразных (Perciformes) Ю.Л. Волынкин //
Вопросы ихтиологии. 1983. - Т. 23, вып.5. - С. 865-869.
26.Волынкин Ю.Л. Показатели красной крови путассу, выловленной в
Норвежском море / Ю. Л. Волынкин // III межвузовск. конференции молодых
ученых и специалистов: докл. Калининград, 19846. - С. 103104.
27.Габрашанский П. Динамика электрокардиограмм в различных системах
отведений
при
развитии
сельскохозяйственных
экспериментального
животных
//
перикардита
Физиологические
у
основы
электрокардиографии животных. - М.-Л., 1965. С.76-78.
28.Ганиев И.М. Применение комбинаций сывороток крови различных видов
животных для культивирования клеток и репродукции вирусов / И.М. Ганиев
// Дис. канд. биол. наук. Казань, 2007. - 138 с.
29.Георгиевский
В.И.
Физиология
сельскохозяйственных
животных.-
М.:Агропромиздат, 1990. - 511 с.
30.Голиков Н.Н. Опыт изучения клинических заболеваний кроликов,
вызываемых кокцидиями и кишечной микрофлорой / Голиков Н.Н //
Ветеринария. 1942. №11.- С.25.
31.Гольдберг Д.И. Гематология животных / Д.И. Гольдберг, Е.Д. Гольдберг,
Н.Т. Шубин. - Томск: Изд-во ТГУ, 1973. - 182 с.
32.Гурьянов
Н.И. Усовершенствование технологий получения сывороток
крови кур, бычков, эмбрионов коров и изучение их свойств при
культивировании клеток и вирусов / Н.И. Гурьянов // Автореф. дис. канд.
биол. наук. Казань, 1992. - 19 с.
33.Гурьянов Н.И. Качество сыворотки крови крупного рогатого скота / Н.И.
Гурьянов // Ветеринария. 1997. - № 10. - С. 21 - 22.
34.Гурьянов Н.И. Поиск негативного фактора, влияющего на качество
сыворотки крови животных / Н.И. Гурьянов // Ветеринарная патология.2003. № 1 (5). - С. 98 - 99.
63
35.Дедова Л.С. Система крови при введении циклофосфана в эксперименте.
Автореф. дисс. канд. биол. наук /Л.С. Дедова. Томск, 1969. - 18 с.
36.Дивеева Г.М., Помытко В.Н., Укин Л.Г., Юдин В.К. Пушное звероводство
и кролиководство. М.: Колос, 1982. - 239 с.
37.Ефремов Г.Г. Содержание общего белка, общих липидов и глюкозы в
крови у кроликов / Г.Г. Ефремов, Г.М. Ефремова, И.О. Ефимова // Научнопроизв. конф. по актуальным проблемам АПК. Казань, 2003. -Ч. 1.- С. 285286.
38.Ефремов А.П., Мартынов П.Н. Интерьерные различия крольчат разного
возраста // Фундаментальные исследования. – 2012. – № 5 (часть 1). – С. 138142.
39.Жеденов В.Н. Анатомия кролика / В.Н. Жеденов и др. - М, 1957.- 135 с.
40.Западнюк
И.П.,
Лабораторные
Западнюк
животные.
В.И.,
Разведение,
Захария
Е.А.,
содержание,
Западнюк
Б.В.
использование
в
эксперименте (издание 3-е, переработанное и дополненное).- Киев: Высшая
школа,1983.- 381 с.
41.Зусман Н.С. Биологические особенности кроликов / Зусман Н.С //
Кролиководство и звероводство. 1964. № 3.- С.31-33.
42.Иржак Л.И. Гемоглобины и их свойства. М.: Наука, 1975.- С. 24-89.
43.Иржак Л.И. Дыхательная функция крови в индивидуальном развитии
млекопитающих. М.: Наука, 1964. - 181 с.
44.Йорг Цинке, Полная терапия кроликов и морских свинок: анатомия патология - практический опыт, MVS медицинские издательства, Штуттгарт,
2004 (Йорг Цинке - практикующий ветеринар, владелец клиники мелких
домашних животных в Беремерхафене). - 224 с.
45.Казиев
Т.К.
Структурно
-
функциональная
оценка
минеральных
компонентов в крови и моче у коров различного физиологического
состояния: Автореф. дис. канд. биол. наук. Троицк, 2003. - 24 с.
46.Калугин Ю.А. Физиология питания кроликов / Ю. А. Калугин. - М. Колос,
1980. - 138 с.
64
47.Кармолиев
Р.Х. Современные биохимические методы исследования в
ветеринарии и зоотехнии / Р.Х. Кармолиев М.: Колос, 1971. - 288 с.
48.Карпищенко А.И. Методические лабораторные технологии: Справочник. 2
т. /А.И. Карпищенко. - СПб.: Интермедика, 1999. - 189 с.
49.Карпуть И.М. Гематологический атлас сельскохозяйственных животных.
Минск: Ураджай, 1986. - 183с.
50.Кашапова Р.А. Гематологические показатели у кроликов, содержащиеся в
различных условиях загрязнения окружающей среды. Дисс. на соиск. уч.
степ. канд. биол. наук. Уфа, 2007.- 126 с.
51.Клинический диагноз – лабораторные основы /Под ред. В.В. Меньшикова,
И.И. Дедова. – М.: Медицина, 1987 г.- 126 с.
52.Козловская Л.В. Мартынова М.А. Учебное пособие по клиническим
лабораторным методам исследования. Москва; «Медицина», 1975.- 12 - 44 с.
53.Колесников
А.М
Показатели крови, температуры, пульса и дыхания
серебристо-черных лисиц // Тр. Бурят - Монгольского зооветинститута, вып.
5, 1949.- с. 27-31.
54.Кондрахин И.П. Методы ветеринарной клинической лабораторной
диагностики /И.П. Кондрахин. - М.: Колос, 2004. - 520 с.
55.Кост Е.А. Руководство по клиническим лабораторным исследованиям
/Е.А. Кост, Л.Г. Смирнова. - М.: Медицина, 1964. - С. 236-238.
56.Костин А.П. Физиология сельскохозяйственных животных/ А.П. Костин.М.,Колос,1974. - 301 с.
57.Кудрявцева A.A. Клиническая гематология животных/А.А. Кудрявцева,
Л.А. Кудрявцева.- М.: Колос, 1974.- 452с.
58.Кудрявцева А.А. Гематология животных и рыб / А.А. Кудрявцева, Л.А.
Кудрявцева, Т.И. Привольнов. - М.: Колос, 1964. - 320 с.
59.Кулько К.С. Биологические особенности кроликов / К.С. Кулько //
Кролиководство и звероводство. 2004. - 104 с.
60.Куриленко А.Н. Инфекционные болезни молодняка сельскохозяйственных
животных / А.Н. Куриленко, В.Л. Крупальник - М.: Колос, 2000.- 144 с.
65
61.Курляндский
Б.А.
Токсичность
красителей
для
организма
фталоцианиновых водорастворимых /Б.А. Курляндский, Э.Л.Балабанова,
Н.Л.Торшина и др. // Гигиена и санитария. 1990. - № 2 - С.87-89.
62.Лабораторная гематология /С.А. Луговская и др.. -М: Юнимед-пресс,
2002.- 115 с.
63.Лебедев П.Т. Методы исследования кормов, органов и тканей животных /
П.Т. Лебедев. М.: Россельхозиздат, 1976. - 475 с.
64.Леонтюк
С.В.
Предупреждение
желудочно-кишечных
заболеваний
крольчат / Леонтюк С.В // Кролиководство и звероводство. 1963. № 5.- С. 88
65.Лепешкин В.И., Серебряков K.M. Изменчивость волосяного покрова у
кроликов // Кролиководство и звероводство.- 1960.- № 3.- С. 39-41.
66.Лепешкин В.И. О товарных качествах кроличьих шкурок // Тр. ин-та
НИИПЗК.- 1963.-T. IV. - С. 126-151.
67.Лепешкин
В.И.
Разработка
методов
разведения,
обеспечивающих
повышение качества меха у кроликов // Научный отчет / НИИПЗК.- 1960.- 35
с.
68.Липатова Н.А. Закономерности роста молодняка кроликов пород
шиншилла, серый великан, серебристый и венский голубой / Липатова Н.А.,
Раззаренова Е.А // Труды НИИПЗК. 1968. -т.7. - С. 67-71; 1969.з т.8. - С.56.
69.Луговская С.А. Лабораторная гематология /С.А. Луговская// - М:
Лаборатория, 2001.- №2.- С. 2-3.
70.Любин Н.А, Конова Л.Б. Методические рекомендации к определению и
выведению гемограммы у сельскохозяйственных и лабораторных животных
при патологиях/ Для студентов и аспирантов факультетов ветеринарной
медицины и технологического. Ульяновск, ГСХА.-2005.- 58 с.
71.Макарова Т.Н. Взаимосвязь клинических и электрокардиографических
показателей у кроликов разного пола./ Т.Н. Макарова // Актуальные
проблемы ветеринарной медицины: Материалы Международной научнопрактической конференции, посвященной юбилею П.С. Лазарева .- г. Троицк,
2003.- С. 63-64.
66
72.Макарова Т.Н. Структурно-функциональные особенности ЭКГ у кроликов
(анализ системы узлов) / Т.Н. Макарова, A.A. Самотаев // Актуальные
проблемы ветеринарной медицины: Материалы Международной научнопрактической конференции. - г. Троицк, 2004.- С. 96-100.
73.Макарова Т.Н. Возрастная динамика систем электрокардиографических
показателей самок кроликов 3,5-5,5 месяцев / Т.Н. Макарова А.А. Самотаев
//Актуальные проблемы биологии и ветеринарной медицины мелких
домашних животных: Материалы Международной научно-практической
конференции, посвященной 75-летию УГАВМ, 19-20 мая 2005г.- г. Троицк,
2005.- С. 153-155.
74.Макарова Т.Н. Динамика клинических и электрокардиографических
показателей у кроликов разного пола / A.A. Самотаев, Т.Н. Макарова. // ж.
Главный зоотехник.- 2006. -№ 4,- С.74 - 78.
75.Максимов А.Г. Практические советы кролиководам-любителям/А.Г.
Максимов. – М.: Изд-во правл. о-ва «Знание» России, 1993- 94 с.
76.Меньшиков В.В. Лабораторные методы исследования в клинике. М.,1987.287 с.
77.Методы определения микроэлементов в органах и тканях животных,
растениях, почвах. / В.В. Ковальский, А.Д. Гололобов, Москва, «Колос»,
1969 г.
78.Минина И.С. Как разводить кроликов. / Минина И.С., Леонтюк С.В
Москва, «Колос».- 1981.- С.3-175.
79.Мухаметгалиев H.H. Переваримость и обмен веществ у кроликов при
использовании ферментных препаратов // Функциональные особенности
сельскохозяйственных животных в раннем онтогенезе. М., 1985.- С. 85-88.
80.Новошинов
Г.П., Показатели электрокардиограммы у кроликов / Г.П.
Новошинов, Р.И. Хамитов // Ученые записки Казанского гос. ветинститута.1969. Т. 103. - С.206- 209.
81.Панышева Л.В. Картина крови песцов. Тр. Московского пушно-мехового
ин-та, т. 3,1952.- С. 23-26
67
82.Плотников
В.Г.
Выращивание
крольчат
//
Кролиководство
и
звероводство,- 1992.-№ З.- 27 с.
83.Плохинский H.A. Биометрия М.: Изд-во МГУ, 1969 - 367 с.
84.Помытко В.Н. Зоотехнические основы промышленного кролиководства.
М.:Россельхозиздат, 1984. - 159 с.
85.Радаева И.Ф. Исследование свойств сывороток крови различных видов
животных / И.Ф. Радаева, Г.А.Костина, С.Б. Шмелева, М.А. Андреева //
Цитология.- 1996. - т. 38. - № 2. - 244 с.
86.Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение
пакета прикладных программ STATISTICA / О. Ю. Реброва. М.:
МедиаСфера, 2002. - 305 с.
87.Романов Е.С. Исследование гематологических показателей в зависимости
от возраста, пола и окраски (предварительное сообщение). Доклады ТСХА,
вып. 127, 1966. – С. 37-39.
88.Рощевский М.П. Электрокардиология копытных животных. - Л.: Наука,
1978.- 76 с.
89.Румянцев Г.И. Гигиеническое нормирование метилсалицилата в воздухе
рабочей зоны / Г.И.Румянцев, С.М.Новиков, В.Э.Андрусов // Гигиена и
санитария. 1992. - №7. - С. 28-30.
90.Саркисов Д.С. Микроскопическая техника: Руководство / Д.С. Саркисов,
Ю.Л. Перов. М.: Медицина, 1996. - 544 с.
91.Сипачев С.Г. Ритмичность роста животных. Тюмень: Тюменск. книж. издво, 1970.- 351 с.
92.Соколов В.В. Клеточные и субклеточные реакции в изучении влияния на
организм малых концентраций токсических веществ/В.В. Соколов, И.А.
Грибова, Л.А. Иванова // Гигиена труда и проф. Заболеваний. 1982.- № 7.С.5-7.
93.Справочник по клиническим методам исследования / Под ред. Е.А. Кост. М.: 2е изд., 1975 г.- 98 с.
68
94.Стародуб Н.Ф. Гетерогенная система гемоглобина: структура, свойства,
синтез, биологическая роль / Н.Ф. Стародуб, В.И. Назаренко // Киев: Наук.
Думка, 1987.-200 с.
95.Структура и функция синусно-предсердного узла у кролика / В.К.Бликер,
Ф.Д. Макай, М. Массон, Л.Н. Боуман //Сравнительная электрофизиология:
М-лы междунар. симпозиума.- Л.: 1981,- С.279 -280
96.Судаков H.A. Изменение сердечно-сосудистой системы у лошадей в связи
с телосложением // Тр. МВА.-1959.-Т. ХХ1У.- Вып.2.- С.163-170.
97.Сысоев В.С. Приусадебное кролиководство / В.С. Сысоев. - М.:
Росагропромиздат, 1990. - 172 с.
98.Сысоев B.C. Кролиководство / Сысоев B.C. М.: Агропромиздат, 1985, 272
с.
99.Творогова М.Г. Железо сыворотки крови: диагностическое значение и
методы исследования / М.Г. Творогова, В.Н.Титов // Лабораторное дело.1991.
- №9. - С. 4-10.
100.Титов В.Н. Клиническая лабораторная диагностика /В.Н. Титов, Т.Г.
Творогова// №3, 1995.- С.15-18.
101.Тихомиров Н.П. Картина крови норок. Тр. Московского пушного мехового ин-та, т.3,1952.- С. 121-123.
102.Тихонова М.П. Влияние возраста родителей на рост и развитие приплода
кроликов / Тихонова М.П. // Труды биологического факультета по генетике и
зоологии (Харьковский университет), 1963, т. 36. - 50 с.
103.Утянов А.М. Динамика гематологических показателей и белкового
состава сыворотки
крови кроликов под влиянием овариоцитотоксической
сыворотки / А.М. Утянов, М.М. Шахматов, Н.А. Заманбеков // Эффективные
методы диагностики и организация лечебнопрофилактических мероприятий
при незаразных болезнях. - Алма-Ата,1990.- С. 45-50.
104.Уткин
Л.Г.
Кролиководство
-
Агропромиздат 1987. - С.3-205.
69
справочник.
/
Уткин
Л.Г.,
М.
105.Хавезов И., Цалев Д. Атомно - абсорбционный анализ. Ленинград, 1983г.
- 88 с.
106.Хаертынов С.Х. Взятие крови с целью получения сыворотки для
культивирования клеток / С.Х. Хаертынов, Н.К. Мамлеева // Цитология.
1982. - № 11. - С. 66 - 67.
107.Халафян A.A. STATISTICA 6. Статистический анализ данных / А. А.
Халафян. М.: ООО «Бином-Пресс», 2008. - 512 с.
108.Хонин Г.А. Морфологические методы исследования в ветеринарной
медицине/Г.А. Хонин, С.А. Барашкова, В.В. Семченко // учебное пособие.
Омск: Омская областная типография, 2004.- 198 с.
109.Физико-химические методы анализа под ред. Проф. Алесковского В.Б.,
Ленинград, «Химия», 1988г.- С. 5-29.
110.Филатов П.В. Клиническая электрокардиография сельскохозяйственных
животных: Автореф. дис. канд. вет. наук.- М., 1956.- 29 с.
111.Фенченко, Н.Г. Разведение, селекция, содержание клеточных пушных
зверей и кроликов. Уфа: Гилем, 1999.- 260 с.
112.Юдин А.М. Влияние элеутерококка на некоторые стороны развития
норок. Диссертация. Владивосток, 1965.- 124 с.
113.Corti M.; Greppi G.F.; Serrantoni M.; Nordio C.; Ruffini C.C. Effects of
different dietary protein levels in N.Z.W. rabbits: blood constituents and urinary
nitrogen compounds/ Proc. Budapest, 1988, P. 379-387.
114.Dinamica unor parametrii biochimici sanguini la iepuri crescuti in functi
industrial D.; Savu C.; Predoi G. // Lucrari sti. Ser. C.Med, veter./ Inst. Agron. "N.
Balcescu". -Bucuresti, 1992; 34, P. 19-27.
115. Eltohamy M.M.; Eldeghedy N. Biochemical and physiological changes in the
rabbits due to coccidial infection/ Indian J. anim. Sc, 1985; T. 55. N6, P.395-397.
116.Fekete S.; Hullar I.; Febel H. Rabbit digestion and blood composition after fat
or oil addition to the feed// J. appl. Rabbit Res, 1989; T. 12. N4, P. 233-238.
70
117.Fortun L.; Prunier A.; Etienne M.; Lebas F. Influence of the nutritional deficit
of foetal survival and growth and plasma metabolites in rabbit does// Reprod.
Nutrit. Developm, 1994; Vol.34, N 3, P. 201-211.
118.Partridge G.G.; Lobley G.E.; Fordyce R.A. Energy and nitrogen metabolism
of rabbits during pregnancy, lactation, and concurrent pregnancy and lactation//
Brit. J. Nutrit, 1986; T. 56. N 1, P.199-207.
119. Ewuola O. Haematological and serum biochemical response of growing rabbit
bucks fed dietary fumonisin B1 / O. Ewuola, G. Egbunike // African J. Biotech.
2008. - v. 7. - № 23. - P. 4304-4309.
120. http://www.krolik44.ru
121. http://krolichki.ru
122. http://www.vetlaboratory.ru
123. http://krolik.files-bloodaanalis
124. http://www.razv-krolikov.ru
125. http://www.fermersha.ru
126. http://microelementi.html
71