ЗАДАНИЕ №1 В микробиологическую лабораторию поступил исследуемый материал (кал) от больного Н. с подозрением на инфекционное заболевание (дизентерия). Задание 1.С какой целью доставлен исследуемый материал в лабораторию? Ответ 1.В бактериологическую лабораторию исследуемый материал направляется с целью обнаружения в нем возбудителя инфекционного заболевания и, следовательно, подтверждения предполагаемого диагноза. Задание 2.Какие правила необходимо соблюдать при работе в бактериологической лаборатории? Ответ 2.К работе допускают сотрудников только после ознакомления с правилами поведения и режимом работы: - все сотрудники подвергаются профилактическим прививкам; - каждый сотрудник должен иметь халат, шапочку, в лаборатории – сменную обувь; - должен строго соблюдать личную гигиену, содержать в чистоте рабочее место; - весь поступивший материал для исследования считают инфекционным. Его ставят на специальный поднос, а ёмкость с материалом протирают дезинфицирующим раствором снаружи; - переливать исследуемый материал из одной ёмкости в другую следует над дезинфицирующим раствором. Жидкий материал отсасывают с помощью резинового баллона, надетого на пипетку; - при попадании исследуемого материала на руки, стол, другие предметы их обрабатывают дезинфицирующим раствором; - по окончании работы руки, инструменты, рабочее место обрабатывают дезинфицирующим раствором, культуры обезвреживают или, при необходимости, сохраняют в холодильнике, который опечатывают. ЗАДАНИЕ №2 В бактериологической лаборатории с целью диагностики острого инфекционного заболевания (колиэнтерит) у больного ребенка Н. были проведены микробиологические исследования кала. Задание 1.Каким считается материал от больного с подозрением на инфекционное заболевание? Ответ 1.Материал от больного, полученный для проведения исследования, считается заразным. Задание 2.Какие правила необходимо соблюдать при взятии и доставке этого материала в лабораторию? Ответ 2.Любой материал должен быть собран в стерильную посуду с соблюдением условий, предохраняющих его от загрязнения посторонней флорой. На пробирку, банку, флаконы с материалом для исследования наклеивают этикетку, на которой указаны фамилия, имя, отчество, возраст больного и дата взятия материала. В направлении повторяют сведения, приведенные на этикетке, и дополнительно сообщают: характер материала, учреждение, направившее материал, клинический диагноз, цель исследования и фамилию врача, направляющего материал. Доставку исследуемого материала в лабораторию производят в кратчайший срок в специальных металлических биксах, контейнерах, пеналах. Материал, содержащий микроорганизмы, малоустойчивые во внешней среде, переносят в специальных сосудах, в которых поддерживается температура 37⁰С; при доставке материала, содержащего вирусы, используют термосы со льдом для создания низкой температуры. Правильный сбор и транспортировка материала обеспечивают эффективность микробиологических исследований. ЗАДАНИЕ №3 В микробиологическую лабораторию поступил исследуемый материал (мокрота) от больного Н. с подозрением на туберкулёз. Задание 1.С какой целью доставлен исследуемый материал (мокрота) в лабораторию? Ответ 1.Исследуемый материал (мокрота) направляется в лабораторию для проведения микробиологического исследования с целью обнаружения микобактерий туберкулёза. Задание 2.Какие необходимо соблюдать правила работы с мокротой, полученной от такого больного, и почему? Ответ 2.С мокротой, полученной от больного с подозрением на туберкулёз, необходимо, в первую очередь, соблюдать общие правила работы с заразным материалом: - любой материал должен быть собран в стерильную посуду с соблюдением условий, предохраняющих его от загрязнения посторонней флорой. На пробирку, банку, флаконы с материалом для исследования наклеивают этикетку, на которой указаны фамилия, имя, отчество, возраст больного и дата взятия материала. В направлении повторяют сведения, приведенные на этикетке, и дополнительно сообщают: характер материала, учреждение, направившее материал, клинический диагноз, цель исследования и фамилию врача, направляющего материал. Доставку исследуемого материала в лабораторию производят в кратчайший срок в специальных металлических биксах, контейнерах, пеналах. Материал, содержащий микроорганизмы, малоустойчивые во внешней среде, переносят в специальных сосудах, в которых поддерживается температура 37⁰С; при доставке материала, содержащего вирусы, используют термосы со льдом для создания низкой температуры. Правильный сбор и транспортировка материала обеспечивают эффективность микробиологических исследований; - кроме того, учитывая устойчивость туберкулёзных палочек к внешним факторам (высушивание, действие дезинфицирующих растворов, температура и др.), необходима особая педантичность в соблюдении вышеуказанных правил, и исследуемый материал и культуры микроорганизмов, полученные от больных с подозрением на туберкулёз, должны подвергаться автоклавированию или кипячению в течение 1 часа; - материал, требующий продолжения исследования, ставят в термостат, который опечатывают. При хранении патогенных культур в лаборатории их регистрируют в специальном журнале. Указывают количество культур, даты их поступления, пересева, уничтожения; - в лаборатории категорически запрещается принимать пищу и курить; - в лаборатории ежедневно проводят влажную уборку помещений с применением дезинфицирующих растворов. Ежедневно моют стены, полы, инвентарь горячей водой с мылом. Бокс убирают в конце рабочего дня, а перед работой облучают бактерицидными лампами. Режим работы в лабораториях зависит от степени опасности заражения для лиц, работающих с болезнетворными микроорганизмами или материалом, их содержащим. ЗАДАНИЕ №4 В бактериологической лаборатории из испражнений больного Н., который поступил в инфекционное отделение с диагнозом «острая дизентерия», выделена культура дизентерийных бактерий (шигеллы Зонне). Задание 1.Что обязаны сделать сотрудники лаборатории с этой культурой после окончания работы? Ответ 1.Культуру дизентерийных бактерий необходимо уничтожить (убить). Для этого пробирки с культурой дизентерийных бактерий подвергают автоклавированию при температуре 120⁰С – 30 минут. Задание 2.Какие правила должен соблюдать персонал при работе с культурами, выделенными от аналогичных больных, и почему? Ответ 2.При работе с культурами микроорганизмов, выделенными от аналогичных больных, необходимо тщательно мыть руки с последующей обработкой дезинфицирующим раствором и нельзя принимать пищу и курить в помещении, где производится работа. ЗАДАНИЕ №5 В учебной лаборатории при исследовании суспензии кала, приготовленной из испражнений больного, перенесшего брюшной тиф, студенты разлили ее на столе. Задание 1.Что должен предпринять студент, допустивший эту неосторожность в работе? Ответ 1.Сообщить преподавателю о допущенной ошибке при работе с культурой. Обработать дезинфицирующим раствором лабораторный стол. Осколки разбитой посуды, салфетки, которыми производилась уборка стола, после дезинфекции подвергнуть автоклавированию (температура 120⁰С – 30 минут). Тщательно вымыть руки с использованием дезинфицирующих растворов. Задание 2.Какие правила поведения персонала в баклаборатории необходимо строго соблюдать и почему? Ответ 2.К работе с патогенными культурами допускают сотрудников только после ознакомления с правилами поведения и режимом работы. Строго соблюдать личную гигиену, содержать в чистоте рабочее место. Переливать исследуемый материал из одной емкости в другую следует над дезинфицирующим раствором. Исследуемый материал ставят на специальный поднос. По окончанию работы руки, инструменты, рабочее место обрабатывают дезинфицирующим раствором. В лаборатории категорически запрещается курить. Строгое соблюдение техники безопасности в лаборатории при работе с патогенными культурами необходимо с целью предотвращения распространения заболевания среди персонала лаборатории. ЗАДАНИЕ №6 Студенты на перерыве после работы с исследуемым материалом (испражнения), взятым от больного с подозрением на дизентерию, начали принимать в лаборатории пищу. Преподаватель сделал студентам замечание. Задание 1.Была ли в действиях студентов ошибка? Ответ 1.Да Задание 2.В чём заключалась замечание преподавателя этим студентам? Ответ 2.Преподаватель сказал студентам, что в бактериологической лаборатории, где производится работа с патогенными культурами, нельзя принимать пищу. Задание 3.Какие правила поведения в баклаборатории необходимо обязательно соблюдать и почему? Ответ 3.К работе допускают сотрудников только после ознакомления с правилами поведения и режимом работы; - все работники подвергаются профилактическим прививкам; - каждый сотрудник должен иметь халат, шапочку, в лаборатории – сменную обувь; - должен строго соблюдать личную гигиену, содержать в чистоте рабочее место; - весь поступивший материал для исследования считают инфекционным. Его ставят на специальный поднос, а ёмкость с материалом протирают дезинфицирующим раствором снаружи; - переливать исследуемый материал из одной ёмкости в другую следует над дезинфицирующим раствором. Жидкий материал отсасывают с помощью резинового баллона, надетого на пипетку; - при попадании исследуемого материала на руки, стол или другие предметы их обрабатывают дезинфицирующим раствором, культуры обезвреживают или, при необходимости, сохраняют в холодильнике, который опечатывают. Материал, требующий продолжения исследования, ставят в термостат, который тоже опечатывают. При хранении патогенных культур в лаборатории их регистрируют в специальном журнале. Указывают количество культур, даты их поступления, пересева, уничтожения; - в лаборатории категорически запрещается принимать пищу и курить; - в лаборатории ежедневно проводят влажную уборку помещений с применением дезинфицирующих растворов. Ежедневно моют стены, полы, инвентарь горячей водой с мылом. Бокс убирают в конце рабочего дня, а перед работой облучают бактерицидными лампами. Режим работы в лабораториях зависит от степени опасности заражения для лиц, работающих с болезнетворными микроорганизмами или материалом, их содержащим. ЗАДАНИЕ №7 Студент получил задание изучить морфологию бактерий в окрашенном мазке. Для этого он поместил препарат на предметный столик микроскопа, центрировал объектив с увеличением 40. Осветил поле зрения, нашёл изображение, установил чёткость микрометрическим винтом и на основании просмотра ряда полей зрения сделал вывод о том, что очень трудно рассмотреть микроорганизмы в препарате. Задание 1.Почему студенту не удалось детально рассмотреть форму микроорганизмов в препарате? Ответ 1.Потому что он использовал объектив микроскопа с увеличением 40, «сухой» системы микроскопа, который используется для изучения крупных биологических и гистологических объектов. Задание 2.Какие рекомендации можно дать студенту, выполняющему данное задание? Ответ 2.При изучении микроорганизмов необходимо использовать главным образом иммерсионный, или погружной объектив с небольшим фокусным расстоянием и более высокой разрешающей способностью. Задание 3.С какой целью изучается морфология бактерий? Ответ 3.Морфология бактерий изучается с целью определения принадлежности их к одной из четырёх форм: коккам, палочковидным, извитым, нитевидным формам. Кроме того, изучение морфологии, наряду с другими признаками, проводится с целью определения видовой принадлежности выделенных чистых культур микроорганизмов. ЗАДАНИЕ №8 Студент получил задание изучить морфологию бактерий в окрашенных мазках, используя иммерсионную систему светового микроскопа. Для этого на препарат он нанёс каплю иммерсионного масла, центрировал объектив 90, опустил тубус до погружения фронтальной линзы объектива в масло, поднимая и опуская объектив, пытался найти изображение, но рассмотреть препарат ему не удалось. Задание 1.Какие ошибки допустил студент, выполняя задание и, как следствие, не смог найти изображения бактерий. Ответ 1.Студент не осветил поле зрения после погружения фронтальной линзы объектива в масло и не укрепил препарат на предметном столике. Задание 2.Какие преимущества даёт изучение морфологии бактерий при использовании иммерсионной системы микроскопа, которой студент микроскопировал? Ответ 2.При микроскопии с использованием иммерсионного объектива его погружают в масло (кедровое, персиковое и др.), показатель преломления которого близок к показателю преломления стекла. В этом случае пучок света, вышедший за пределы предметного стекла, не рассеивается, и лучи, не меняя своего направления, попадают в объектив. Катрина строения объекта становится тем более достоверной, чем больше отклоненных лучей попадали в объектив микроскопа. Кроме того, иммерсионный объектив имеет более высокую разрешающую способность. ЗАДАНИЕ №9 Изучая формы бактерий, Вы для микроскопии окрашенных мазков воспользовались иммерсионной системой светового микроскопа. Задание 1.По каким признакам можно определить иммерсионный объектив микроскопа? Ответ 1.Иммерсионные объективы имеют у нижнего края ободок: белый – водная иммерсия, черный – масляная иммерсия. У объективов «сухих» систем ободка нет. Задание 2.Почему при изучении морфологии бактерий необходимо пользоваться иммерсионной системой микроскопа? Ответ 2.При микроскопии с использованием иммерсионного объектива его погружают в масло (кедровое, персиковое и др.), показатель преломления которого близок к показателю преломления стекла. В этом случае пучок света, вышедший за пределы предметного стекла, не рассеивается, и лучи, не меняя своего направления, попадают в объектив. Картина строения объектива становится тем более достоверной, чем больше отклоненных лучей попадали в объектив микроскопа. Кроме того, иммерсионный объектив имеет более высокую разрешающую способность. Задание 3.Какие правила необходимо соблюдать при изучении препаратов с помощью иммерсионной системы микроскопа? Ответ 3.- центрировать иммерсионный объектив; - нанести каплю масла на препарат и укрепить препарат на предметном столике; - установить препарат на предметный столик; - опустить объектив до погружения фронтальной линзы иммерсионного объектива в масло; - осветить поле зрения плоским зеркалом; - найти изображение вращением макрометрического винта (на себя), глядя в окуляр микроскопа; - установить чёткость изображения вращения микрометрического винта на пол-оборота в одну и другую сторону. ЗАДАНИЕ №10 В окрашенных мазках из исследуемого материала (гной) Вы обнаружили шаровидной формы микроорганизмы располагающиеся в виде неправильных скоплений. Задание 1.Как называются микроорганизмы, имеющие такую морфологию? Ответ 1.Стафилококки. Задание 2.С чем связано такое расположение кокков? Ответ 2.Гроздевидное расположение связано с тем, что плоскости деления проходят в разных направлениях. Задание 3.Какие еще виды шарообразных бактерий Вам известны и на основании каких признаков они подразделяются? Ответ 3.Стрептококки, сарцины, тетракокки, диплококки, микрококки. Они подразделяются на указанные формы по морфологии (бобовидные, ланцетовидные), расположению и характеру деления. ЗАДАНИЕ №11 Используя иммерсионную систему светового микроскопа, врач изучал мазки, приготовленные из гноя уретры больного П. В препарате обнаружены розового цвета диплококки бобовидной формы, обращенные вогнутыми поверхностями один к другому, расположенные внутри лейкоцитов. Он поставил диагноз «острая гонорея». Задание 1.На основании изучения каких свойств микроорганизмов врач диагностировал заболевание больного П.? Ответ 1.Диагноз поставлен на основании изучения морфологических, тинкториальных (особенности окраски) свойств и внутрилейкоцитарного расположения гонококков (незавершенный фагоцитоз). Задание 2.Как называется метод диагностики инфекционного заболевания, если видовая принадлежность бактерий определяется при просмотре окрашенных мазков, приготовленных из исследуемого материала? Ответ 2.Бактериоскопическое исследование. ЗАДАНИЕ № 12 При микроскопии мазков студентом были обнаружены фиолетового цвета палочки, располагающиеся цепочками, и такого же цвета ланцетовидной формы кокки, располагающиеся попарно. Задание 1.Каким методом были окрашены мазки? Ответ 1.Они могли быть окрашены по Граму или 1% феноловым раствором генцианового фиолетового. Задание 2.По каким признакам бактерии различаются в препарате? Ответ 2.По форме и расположению в препарате. Задание 3.Назовите формы этих микроорганизмов. Ответ 3.Стрептобациллы и диплококки (Str.pneumoniae). ЗАДАНИЕ № 13 В окрашенных мазках студенты обнаружили шаровидные микроорганизмы фиолетового цвета, которые сгруппированы в виде неправильных скоплений, напоминающих в известной степени «гроздья винограда». Задание 1.Как называются эти микроорганизмы? Ответ 1.Стафилококки. Задание 2.На основании каких признаков Вы определили форму бактерий? Ответ 2.На основании изучения морфологических признаков. Задание 3.С помощью какой системы светового микроскопа были просмотрены мазки? Ответ 3.С помощью иммерсионной системы светового микроскопа. Задание 4.По какому способу могла быть проведена окраска препарата? Ответ 4.Препарат мог быть окрашен либо методом Грама – сложный способ окраски (стафилококки – грамположительные микроорганизмы), либо простым способом – 1% феноловым раствором генцианового фиолетового. ЗАДАНИЕ № 14 В окрашенных мазках студенты обнаружили шаровидные, фиолетового цвета микроорганизмы, располагающиеся в виде цепочек. Задание 1.Как называются эти микроорганизмы? Ответ 1.Стрептококки. Задание 2.С помощью какой системы светового микроскопа были просмотрены препараты? Ответ 2.С помощью иммерсионной системы светового микроскопа. Задание 3.Какой метод окраски был применен? Ответ 3.Препарат мог быть окрашен либо методом Грама (стрептококки – грамположительные микроорганизмы), либо простым способом – 1% феноловым раствором генцианового фиолетового. Задание 4.Для какой цели определяются морфологические и тинкториальные свойства бактерий? Ответ 4.С целью определения видовой принадлежности выделенных микроорганизмов. Задание 5.Какие заболевания могут вызывать бактерии, имеющие вышеописанную морфологию? Ответ 5.Ангину, различные гнойно-септические заболевания, скарлатину, рожистое воспаление, флегмону, абсцессы, стрептодермии, ревматизм, эндокардиты. Задание 6.Чем можно объяснить расположение указанных кокков в виде цепочек? Ответ 6.Делением стрептококков в одной плоскости. ЗАДАНИЕ №15 В окрашенных по Граму мазках Вы обнаружили палочки средних размеров с закругленными концами, розового цвета, расположенные хаотично. Задание 1.Каковы тинкториальные свойства бактерий, из которых был приготовлен мазок? Ответ 1.Это грамотрицательные бактерии. Задание 2.Скакой целью изучаются тинкториальные свойства микробов? Ответ 2.Изучение тинкториальных свойств проводится с целью определения видовой принадлежности микроорганизмов. Задание 3.По каким морфологическим признакам различаются палочковидные бактерии? Ответ 3.По размеру, форме концов и взаимному расположению в препарате. Задание 16 Изучая в световом микроскопе мазок, окрашенный по Граму, приготовленный из отделяемого карбункула больного с подозрением на кожную форму сибирской язвы, были обнаружены фиолетового цвета палочки с обрубленными концами, расположенные в виде коротких цепочек, напоминающих бамбуковую трость, окруженные общей капсулой. Задания 1. Как называется этап диагностики инфекционного заболевания, в основе которого лежит изучение формы, расположения, величины бактерий и особенностей их окраски? 2.Какие по морфологии микроорганизмы Вы увидели в мазке? 3. С какой целью изучается морфология микроорганизмов? 4. Какие преимущества дает окраска мазков по методу Грама ? 5. Как проводится окраска мазков по методу Грама ? Эталоны ответов 1. Бактериоскопическое исследование. 2. Стрептобациллы. 3. С целью определения родовой или видовой принадлежности микроорганизмов. 4. Позволяет дифференцировать грамположительные и грамотрицательные микроорганизмы. Применение этого метода окраски используется для определения видовой принадлежности микроорганизмов, что является важным при проведении бактериологической диагностики некоторых инфекционных заболеваний. 5. Окраска по Граму состоит из четырех этапов: 1) на фиксированные мазок наливают водный раствор метилового фиолетового на 1-2 мин.( при окраске по методу Синева мазок покрывают полоской фильтровальной бумаги, заранее пропитанной раствором генцианового фиолетового и высушенной; на бумагу наносят 2-3 капли дист.воды), затем раствор сливают; 2) обрабатывают мазок раствором Люголя 1 мин. И, не промывая его водой, сливают раствор; 3) обесцвечивают мазок 95▫ спиртом в течении 0.5-1 мин., покачивая стекло до исчезновения серофиолетовых струек красителя, промывают препарат водой; 4) наливают на мазок фуксии Пфейффера, через 1-2 мин. Краситель сливают, препарат промывают водой, высушивают фильтровальной бумагой и микроскопируют иммерсионной системой. Задание 17 Из перитонеальной жидкости был приготовлен мазок и окрашен. При микроскопии мазка видны окрашенные в фиолетовый цвет кокки, расположенные неправильным скоплениями, и палочки средних размеров, с закругленными концами, расположенные хаотично, окрашенные в розовый цвет. Задания 1. Что вы можете сказать о микрофлоре перитонеального экссудата? 2. Какой метод окраски использован в данном случае и каковы его этапы? Эталоны ответов 1. Микрофлора перитонеального экссудата представлена двумя видами (ассоциацией) микроорганизмов: стафилококками и палочками (бактериями). 2. Окраска по Граму состоит из четырех этапов: 1) на фиксированные мазок наливают водный раствор метилового фиолетового на 1-2 мин.( при окраске по методу Синева мазок покрывают полоской фильтровальной бумаги, заранее пропитанной раствором генцианового фиолетового и высушенной; на бумагу наносят 2-3 капли дист.воды), затем раствор сливают; 2) обрабатывают мазок раствором Люголя 1 мин. И, не промывая его водой, сливают раствор; 3) обесцвечивают мазок 95▫ спиртом в течении 0.5-1 мин., покачивая стекло до исчезновения серофиолетовых струек красителя, промывают препарат водой; 4) наливают на мазок фуксии Пфейффера, через 1-2 мин. Краситель сливают, препарат промывают водой, высушивают фильтровальной бумагой и микроскопируют иммерсионной системой. Задание 18 Из исследуемого материала (гной),доставленного в баклабораторию, приготовили мазки и окрасили фуксином Пфеффера. При микроскопии в мазках обнаружены кокки розового цвета, расположенные в виде коротких цепочек. Задания 1. Достаточен ли данный метод окраски для определения тинкториальных свойств бактерий? 2. Какие свойства микробов определяются при бактериоскопии исследуемого материала? Эталоны ответов 1. Нет, так как кокки, делятся на грамположительные ( стрептококки,стафилококки и др.) и грамотрицательные (нейссерии и др.) 2. Морфологические и тинкториальные. Задание 19 Из перитонеальной жидкости был приготовлен мазок и окрашен. При микроскопии мазка видны окрашенные в фиолетовый цвет кокки, расположенные неправильными скоплениями, и палочки средних размеров с закругленными концами, расположенные хаотично, окрашенные в розовый цвет. Задания 1. Что вы можете сказать о микрофлоре перитонеального экссудата? 2. Какой метод окраски использован в данном случае и каковы его этапы? 3. Как подразделяются бактерии в зависимости от особенностей окраски этим методом? Эталоны ответов 1. Микрофлора перитонеального экссудата представлена двумя видами (ассоциацией) микроорганизмов: стафилококками и палочками (бактериями). 2. Окраска по Граму состоит из четырех этапов: 1) на фиксированные мазок наливают водный раствор метилового фиолетового на 1-2 мин.( при окраске по методу Синева мазок покрывают полоской фильтровальной бумаги, заранее пропитанной раствором генцианового фиолетового и высушенной; на бумагу наносят 2-3 капли дист.воды), затем раствор сливают; 2) обрабатывают мазок раствором Люголя 1 мин. И, не промывая его водой, сливают раствор; 3) обесцвечивают мазок 95▫ спиртом в течении 0.5-1 мин., покачивая стекло до исчезновения серофиолетовых струек красителя, промывают препарат водой; 4) наливают на мазок фуксии Пфейффера, через 1-2 мин. Краситель сливают, препарат промывают водой, высушивают фильтровальной бумагой и микроскопируют иммерсионной системой. 3. На грамположительные- фиолетовый цвет и грамотрицательные- розово-красный цвет и грамотрицательные-розово-красный цвет. Задание 20 В окрашенных мазках Вы обнаружили палочки средних размеров с закругленными концами, розового цвета, расположенные хаотично. Задания 1.Какие по морфологии микроорганизмы вы увидели? 2. Какие разновидности этой формы микроорганизмов вам известны? 3.Каким способом мог быть окрашен мазок? Эталоны ответов 1. Бактерии 2. По взаимному расположению палочковидные формы распределяются на три подгруппы: диплобактерии и диплобациллы, располагающиеся парно по длине, стрептобактерии и стрептобациллы, бактерии и бациллы, которые располагаются без определенной системы. 3. Мазоок окрашен либо по методу Грама (сложный способ), либо фуксином (простой способ окраски ). Задание 21 В материале (рвотные массы), поступившем в баклабораторию, больного с подозрением на холеру были обнаружены грамотрицательные, слегка изогнутые палочки, и было проведено изучение подвижности бактерий. Задания 1. С какой целью проводится изучение подвижности микроорганизмов? 2. Как был приготовлен препарат для определения подвижности бактерий, содержащихся в исследуемом материале? 3. При использовании какой системы светового микроскопа изучается подвижность микроорганизмов? Эталоны ответов 1. В практических лабораториях изучение микроорганизмов в живом состоянии используют для определения их подвижности, которая является одним из признаков видовой принадлежности организмов. 2. Препарат готовится методом раздавленной или висячей капли. Более четкие результаты получают при микроскопии в темном поле или фазовоконтрастной микроскопии. 3. Микроскопию можно проводить, используя объектив с увеличением 40 сухой системы светового микроскопа. Задания 22 В бактериологической лаборатории из кала больного А. острым гастроэнтеритом, который сопровождался лихорадкой, выделена чистая культура лактозоотрицательных микроорганизмов. Для дифференциации подвижных бактерий (сальмонелл,кишечных палочек) от неподвижных (шигелл-возбудителей дизентерии) необходимо определить подвижность выделенной культуры. Задания 1. На какую питательную среду и каким способом необходимо произвести посев выделенной культуры микроорганизмов для определения подвижности? 2. Какие еще методы определения подвижности бактерий вы знаете? Эталоны ответов 1. Подвижность бактерий определяется в столбике полужирного агара (0,3%). Посев производят уколом на глубину 1-1.5 см. Подвижные штаммы дают диффузное помутнение среды, не подвижные штаммы растут по линии укола. 2.Изучение препаратов «висячей», «раздавленной» капли проводится в световом микроскопе с использованием объектива 40 «сухой» системы микроскопа. Хорошие результаты дает поле и методом фазовоконтрастной микроскопии. Задания 23 Используя иммерсионную систему светового микроскопа, врач изучал окрашенные по Граму мазки из гноя уретры больного П. В препарате обнаружены розового цвета бобовидные диплококки, расположенные преимущественно внутри лейкоцитов. Задания 1.Какие свойства микроорганизмов можно изучить при микроскопии этого мазка? 2. Что дает знание вышеперечисленных свойств микроорганизмов? 3. Какое заболевание у больного и как называются бактерии, их вызывающие? 4. Как называется использованные метод диагностики? Эталоны ответов 1. Морфологические и тинкториальные. 2. Зная эти свойства, можно по микроскопической картине определить видовую принадлежность микроорганизмов. 3. Острая гонорея. Возбудитель-гонококки. 4. Бактериоскопическое исследование. Задание 24 В окрашенных мазках, приготовленных из мокроты больного острым воспаление легких, обнаружены ланцетовидной формы диплококки, фиолетового цвета, с капсулой. Задания 1.Для чего проводилось изучение мазка, приготовленного из мокроты больного? 2. Какой метод использовали для окраски мазков из мокроты? Эталоны ответов 1. С целью определения вида микроорганизмов, обнаруженных в мокроте. 2. Мазки были окрашены по методу Грама. Задания 25 В бактериологической лаборатории произведен посев исследуемого материала от больного М. в конденсационную жидкость скошенного мясо-пептонного агара. Через сутки культивирования в термостате на питательную среде получен «ползучий» рост микроорганизмов. Задания 1. С какими свойствами бактерий связан их «ползучий» рост? 2. Для какой цели может быть использовано изучение этой особенности роста бактерий на плотных питательных средах? Эталоны ответов 1. «Ползучий» рост на питательной среде характерен для подвижных микроорганизмов с наличием у них жгутиков. 2. Для отличия подвижных микроорганизмов от неподвижных. Подвижность бактерий учитывается при определении видовой принадлежности бактерий. Задание 26 В предложенных Вам окрашенных препаратах при микроскопии выявлены различные микроорганизмы, отличающиеся по морфологическим признакам. Задания 1. Что включает в себя понятие «морфологические признаки» микроорганизмов? 2. С какой целью изучается морфология бактерий? 3. Какую систему светового микроскоп целесообразно применить для изучения морфологии бактерий? Эталоны ответов 1. Понятие «морфологические признаки» включает: размеры, форму, расположение в препарате, наличие тех или иных структурных компонентов бактериальной клетки. 2. Морфология бактерий изучается с целью определения принадлежности их к одной из четырех форм: кокка, палочковидным, извитым, нитевидным формам. Кроме того, изучение морфологии наряду с другими признаками проводится с целью определения видовой принадлежности выделенных чистых культур микроорганизмов. 3. Иммерсионную систему светового микроскопа. Задания 27 В окрашенных мазках из мокроты больного острым воспалением легких обнаружены ланцетовидной формы попарно расположенных кокки, фиолетового цвета, с капсулой. Задания 1. Для чего проводится изучение мазка, приготовленного из мокроты больного? 2. Как называются выявленные в препаратах микроорганизмы? 3. Каким методом был окрашен мазок? 4. Какие методы окраски можно применить для выявления капсул и о чем свидетельствует ее наличие? Эталоны ответов 1. Для определения вида микроорганизмов, обнаруженных в мокроте больных. 2. Str. Pheumoniae (диплококки) 3. Методом Грама (стрептококки пневмонии -пневмококки- грамположительные микроорганизмы). Мазки, приготовленные из исследуемого материала, взятого от больных, окрашиваются прежде всего по Граму. 4. Для выявления капсул можно использовать простой метод окраски или окраску по Гинсу, по Книге, по Антони (т.е. специальные методы обработки бактерий, используемые в диагностических целях). Капсулообразование является видовым признаком, свидетельствующим о вирулентности данных микроорганизмов. Задание 28 У больного Р. С подозрением на дизентерию взят для исследования кал и из него выделена чистая культура палочек средних размеров с закругленными концами. При изучении ее установлено, что она активной подвижностью не обладает. Задание 1. Как можно определить подвижность бактерий? 2. Чем обусловлена подвижность бактерий? 3. С какой целью определяется подвижность выделяемых культур? Эталоны ответов 1. Изучая в световом микроскопе (объектив 40) препараты, приготовленные методом «висячей» и «раздавленной» капли, либо в темном поле. Кроме того, можно изучать, подвижность культур методом посева уколом в столбик полужидкого агара (0,3%). 2. Подвижностью обладают бактерии, имеющие жгутики. 3. С целью определения видовой принадлежности выделенных чистых культур микроорганизмов. Задание 29 У больного ребенка с подозрение на дифтерию было взято на исследование, отделяемое пораженной слизистой оболочки зева. Приготовлен и окрашен мазок. При микроскопии обнаружены голубые палочки с темно-синими утолщениями на концах. Задания 1. Какой структурный элемент микробной клетки определяется у выявленных микроорганизмов? 2. Какие способы окраски могут еще применяться для выявления указанного структурного элемента? 3. По какому методу окраски данный мазок? 4. Какое значение имеет выявление зерен волютина у дифтерийных палочек? Эталоны ответов 1. Включения- зерна волютина. 2. Метод Нейссера. 3. По Леффлеру. 4. Диагностическое Задание 30 При приготовлении препарата «раздавленной капли» на чистое, обезжиренное предметное стекло стерильно пастеровской пипеткой вы нанесли исследуемый материал. Накрыли покровным стеклом. При этом визуально обнаружили пузырьки воздуха и исследуемый материал выступал из края покровного стекла. Задания 1. Правильно ли приготовлен для исследования препарат «раздавленной капли» 2. Какова методика приготовления препарата «раздавленной капли»? 3. При использовании какой системы микроскопа изучается подвижность микроорганизмов? 4. Как отличить активную подвижность бактерий от пассивного броуновского движения? 5. Какие вообще существуют методы определения подвижности бактерий, их достоинства и недостатки? 6. Как можно подразделить бактерии по расположению жгутиков? Эталоны ответов 1. Нет, не правильно. 2. На середину стекла наносят каплю исследуемого материала, чаще всего суточного бульонную культуру микроорганизмов. Каплю накрывают покровным стеклом так, чтобы н появились пузырьки воздуха; жидкость должна заполняться все пространство и не выступать за края стекла. 3. При использовании как сухой, так и иммерсионной системы. 4. Подвижными считаются те микроорганизмы, которые движутся в разных направлениях, иногда совершают вращательные и круговые движения. 5. «Раздавленная капля» - недостатком является быстрое высыхание. «Висячая капля» - в замкнутой полости капля защищена от высыхания. Исследование в темном поле- не позволяет хорошо изучить форму микроорганизмов и, тем более, внутреннее строение. Фазово-контрастная микроскопия- помогает выявить новые детали структуры живых микроорганизмов. 6. По расположению жгутиков подвижные бактерии подразделяются на четыре группы: 1) Монотрихи- бактерии с одним жгутиком. 2) Амфитрихи- бактерии с двумя полярно расположенными жгутиками или имеющие по пучку жгутиков на обоих концах. 3) Лофотрихи- бактерии, которые имеют по пучку жгутиков на обоих концах 4) Перитрихи- бактерии, обладающие жгутиками по всей поверхности тела. Задание 31 В окрашенных мазках из гноя фурункула определяются микроорганизмы фиолетового цвета, шаровидной формы, расположенные в виде неправильной формы скоплений. Задания 1. Назовите описанные микроорганизмы с учетом формы и расположения. 2. Каким методом окрашен этот мазок и назовите его этапы? 3. Чем объясняется такое расположение шаровидных бактерий? Эталоны ответов 1. Стафилококки. 2. Окраска по Граму состоит из четырех этапов: 1) на фиксированные мазок наливают водный раствор метилового фиолетового на 1-2 мин.( при окраске по методу Синева мазок покрывают полоской фильтровальной бумаги, заранее пропитанной раствором генцианового фиолетового и высушенной; на бумагу наносят 2-3 капли дист.воды), затем раствор сливают; 2) обрабатывают мазок раствором Люголя 1 мин. И, не промывая его водой, сливают раствор; 3) обесцвечивают мазок 95▫ спиртом в течении 0.5-1 мин., покачивая стекло до исчезновения серо-фиолетовых струек красителя, промывают препарат водой; 4) наливают на мазок фуксии Пфейффера, через 1-2 мин. Краситель сливают, препарат промывают водой, высушивают фильтровальной бумагой и микроскопируют иммерсионной системой. 3. Такое расположение шаровидных микроорганизмов связано с делением их в различных плоскостях. Задание 32 В мазках, окрашенных по Граму, обнаружены фиолетового цвета палочки, располагающиеся цепочками, и такого же цвета шаровидные микроорганизмы, располагающиеся скоплениями, напоминающими гроздья винограда. Задания 1. Назовите эти микроорганизмы с учетом формы и расположения? 2. Каковы тинкториальные свойства названных микроорганизмов? 3. Какие красители были использованы и каковы этапы окраски по этому способу? Эталоны ответов 1. Стрептобациллы и стафилококки. 2. Это грамположительные микроорганизмы. 3. Генциан фиолетовый или метиловый фиолетовый,фуксин. Окраска по Граму состоит из четырех этапов: 1) на фиксированные мазок наливают водный раствор метилового фиолетового на 1-2 мин.( при окраске по методу Синева мазок покрывают полоской фильтровальной бумаги, заранее пропитанной раствором генцианового фиолетового и высушенной; на бумагу наносят 2-3 капли дист.воды), затем раствор сливают; 2) обрабатывают мазок раствором Люголя 1 мин. И, не промывая его водой, сливают раствор; 3) обесцвечивают мазок 95▫ спиртом в течении 0.5-1 мин., покачивая стекло до исчезновения серо-фиолетовых струек красителя, промывают препарат водой; 4) наливают на мазок фуксии Пфейффера, через 1-2 мин. Краситель сливают, препарат промывают водой, высушивают фильтровальной бумагой и микроскопируют иммерсионной системой. Задание 33 В баклабораторию поступил из хирургического отделения кетгут с направлением, в котором изложена просьба проверить его на стерильность. После проведенных исследований был получен ответ, в котором сообщалось, что кетгут, присланный из исследования, загрязнен бациллами. Задания 1. Что было выявлено у микробов, обнаруженных в кетгуте? Эталоны ответов 1. Споры. Спорообразование является свойством некоторых палочковидных форм бактерий, которые по этому признаку относятся к бациллам. Задание 35 Приготовленные углеводные среды простерилизовали один раз текучим паром. Через некоторое время в средах был отмечен рост микроорганизмов. Задания 1. Правильно ли выбран способ стерилизации? 2. Правильно ли проведена стерилизация? 3. С чем связана неэффективность проведенной стерилизации? Ваши предложения? Эталоны ответов 1. Правильно 2. Нет 3. С тем, что при однократном воздействии текучим паром погибают только вегетативные формы микроорганизмов, а споры сохраняются. Полная стерилизация этим способом достигается лишь при трехкратном воздействии текучим паром в течении трех дней по одному часу. Это дробная стерилизация. Питательные среды в промежутках между прогревание текучим паром находятся при комнатной температуре. После окончания дробной стерилизации питательные среды помещаются в термостат из нескольких дней при температуре 37. Использовать эти среды можно в случае отсутствия на них признаков роста бактерий. Задание 36 Необходимо простерилизовать питательные среды, содержащие вещества, изменяющиеся при температуре выше 100 (мочевину, углеводы). Задания 1. Какой способ стерилизации вы изберете? Обоснование 2. Как быть в том случае, если нет аппарата, специально предназначенного для осуществления этого способа стерилизации? 3. Является ли метод, избранный Вами, методом полной стерилизации? Если да, то за счет чего это достигается? 4.Как осуществляется контроль сред на стерильность? Эталоны ответов 1. Стерилизацию текучим паром, так как при этом способе стерилизуемый материал подвергается воздействию температуры чуть ниже 100 2. Если нет аппарата Коха, можно провести стерилизацию этим способом в автоклаве при открытом кране, через который выпускается воздух 3. Да, При стерилизации текучим паром погибают как вегетативные формы микробов, так и их споры. Достигается это за счет дробной стерилизации (прогревание при температуре 100) 3 дня по одному часу. В первый день гибнут вегетативные формы. Ко второму дню из спор прорастают новые вегетативные формы, которые уничтожаются при действии пара во второй и третий день стерилизации. 4. Питательные среды помещаются в термостат на несколько дней и те пробирки, где наблюдаются рост микробов, бракуются. Задание 37 Для работы вам необходимы: стерильные халаты, стерильные пробирки, пипетки, резиновые пробки, питательные среды, содержащие нативные белки. Задания 1. Какие способы вы изберете для стерилизации указанных предметов? 2. Чем обусловлен выбор того или иного метода стерилизации? Эталоны ответов 1. Халаты, резиновые пробирки следует стерилизовать в автоклаве ( паром под давлением). Там же можно простерилизовать и стеклянные пробирки, пипетки, но можно и сухим жаром ( в печи пастера), предварительно завернув бумагу. Для сред содержащих нативные белки, подходит тиндализация. 2. Свойствами материалов, подлежащих стерилизации Задание 38 Выберите режим стерилизации следующих питательных сред заданий Задания 1. Простые (МПБ, МПА) ответ Аппарат – автоклав. Температура- 120(1 атм.), время- 20 мин 2. С углеводами, молоком, желатином. Ответ Аппарат- аппарат Коха или автоклав ( при открытом выпускном кране),температура – 100( текучий пар), время- 60 мин,3 дня подряд (дробная стерилизация) 3. Белковые сывороточные или яичные (плотные) ответ аппарат- свертыватель Коха, температура- 80-85, время- 1 час три дня подряд 4. Белковые жидкие ответ аппарат – водяная баня или инактиватор, температура-58, время- по 1 часу 5 дней подряд. Задание 39 Для получения экзотоксина от некоторых микроорганизмов их засевают в жидкую питательную среду, где микробы культивируются и куда выделяют их токсины. На определенном этапе необходимо убрать из среды культивируемые микробные клетки, то есть отделить токсины от микробов. Задания 1. Как это сделать и в чем заключается этот метод стерилизации? 2. Какие необходимы приборы для его осуществления? 3. Полная ли стерилизация при этом достигается и как это можно проверить ? Эталоны ответов 1. Пропустить среду через фильтр. Этот метод заключается в механической задержке на фильтре микроорганизмов, не способных. Пройти через поры фильтра. 2. Фильтры Зейтца, Беркефельда, Шамберлана. 3. Нет, не полная. Через фильтры могут проходить, например фильтрующиеся формы микроорганизмов.Проверить можно путем высева на специальные питательные среды. Задание 40 При посеве испражнений переболевшего брюшным тифом на среду Эндо, и последующей инкубации в термостате получили рост колоний, имеющих различную окраску и размеры. Одни колонии были красного цвета,крупные,другие- бесцевтные,мелкие. Задания 1. Одного ли вида микроорганизмы находились в исследуемом материале ? 2. К какой группе сред ( по назначению) относится указания выше среда ? 3. Назовите еще ряд питательных сред, применяемых для этих целей. Эталоны ответов 1. Учитывая, что на среде появились колонии,различные как по цвету, так и по размерам,можно прийти к заключению, что в испражнениях были два различных вида микробов. 2. К дифференциально-диагностическим средам. 3. Плоскирева. Левина, висмут-сульфит агар, среды Гисса. Задание 41 На испражнений больного, который лечился в инфекционном отделении, и бактериологической лаборатории выделена чистая аэробная бактериальная культура, грамотрицательных палочек, вызвавшая следующие изменения в «пестром» ряду: глюкоза лактоза маннит сахароза h2s к - к - индол + - задания 1. Каким представителям семейства кишечных бактерий присущи указанные биохимические свойства? 2. На основании каких изменений в «пестром» ряду определены ферментативные свойства данной культуры. Эталоны ответов 1. Такие биохимические свойства присущи сальмонеллам брюшного тифа. 2.1. На основании изменения цвета среды в пробирках ( ферментация с образованием кислоты) и скопления газа ( ферментация до газообразных продуктов). В Данном случае микроорганизмы ферментируют глюкозу и маннит с образованием только кислоты. 2.2. Выделение индола или сероводорода определяется по изменению цвета индикаторных бумажек, вставленных под пробку в пробирке с питательным бульоном. В Данном случае выделение сероводорода определено по почернению индикаторной бумажки, импрегнированной раствором уксуснокислого свинца (образование соединения РвS Задание 42 У женщины после родов озноб, высокая температура,боли в левой молочной железе,ухудшилось общее самочувствие (гнойный мастит). Был сделан радиальный разрез. Из Гноя выделен стафилококк и определена чувствительность его к антибиотикам. Диаметр зон задержки роста для: пенициллина- 8 мм стрептомицида-8 мм оксалиццина-18 мм ампициллина- 25 мм гентамицина- 22мм тетрациклина- 10 мм Данный ответ получен из баклаборатории на 4-е сутки.В течение этих четырех дней больная получала пенициллин. Задания 1. Нужна ли коррекция антибиотикотерапии 2. Какой бы вы выбрали антибиотик для лечения больной и почему? Эталоны ответов 1.Да, нужна, так как выделенный от больной штамм стафилококка устойчив к пенициллину (d<10 мм). 2. Ампициллин. Вокруг диска,пропитанного этим антибиотиком, наибольшая зона задержки роста микробов, следовательно, этот препарат наиболее активен в отношении выделенных стафилококков. Можно назначить и комбинацию ( ампициллин + гентамицин),эти антибиотики с бактерицидным типом действия, поэтому можно рассчитывать их синергизм при их применении. Задания 43 Больной Н. был доставлен в больницу с жалобами на головную боль, повышенную температуру, частый стул, боли в животе с тенезмами. Врач поставил клинический диагноз «дизентерия?» и направил исследуемый материал (кал) в баклабораторю, используя для транспортировки испражнений флаконы с консервантом. Для лечения больному назначил тетрациклин по схеме. Однако на протяжении последующих 3-х дней состояние больного не улучшилось. Задания 1. Каким методом диагностики врач-бактериолог должен был подтвердить или отвергнуть клинический диагноз?Перечислите его этапы. 2. Целесообразно ли проводить лечение данные антибиотиком и в последующие дни? Эталоны ответов 1. Бактериологическим, которые предусматривает выделение из исследуемого материала ( кала) чисто культуру микробов и идентификацию их на основании изучения морфологический,тинкториальных, подвижности культуральных, биохимических свойств, антигенной структуры. 2. Нет, нужно заменить. Целесообразно с выделенной чистой культурой поставить опыт по определению чувствительности ее к антибиотикам и с учетом полученной антибиотикограммы назначить другой препарат. Задание 44 У женщины на 5-й день после родов повысилась температура, которая со временем приняла гектический характер, отмечалось общее тяжелое состояние, вздутие живота, учащенный пульс, гипотония, нарастание симптомов сердечной слабости. Все это свидетельствует о развитии у больной септицемии. Из крови выделен патогенный стафилококк и определена чувствительность его к различным антибиотикам: Антибиотик МИК(для данного штамма) в мкг/мл Концентрация препаратов в крови при введении терапевтических доз в мкг-мл Пенициллин 128 0,5-2 Ампициллин 2 5-10 Оксациллин 0,5 4-6 Стрептомицин 128 20-25 Эритромицин 32 3-5 Тетрациклин 64 3-5 Гентамицин 0,064 4-6 Рифампицин 0,125 20-32 Задания 1. Каким методом проводилось определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам? 2. Как на основании антибиотикограммы и данных о концентрации препаратов в крови можно наиболее рационально построить антибиотикотерапию? 3. Какой антибиотик или комбинации антибиотиков можно применить для лечения больной? Эталоны ответов 1. Методом серийных разведений. 2. Нужно выбирать тот антибиотик,концентрация которого в крови значительно превышает минимальную ингибирующую концентрацию препарата для данного штамма микроорганизма. 3. Больной целесообразно назначить рифампицин, гентамицин или комбинацию этих антибиотиков. Задания 45 У ребенка в возрасте 1 года с проявлениями рахита возникло воспаление легких. При бактериологическом исследовании мокроты выделили культуру сальмонелл мышиного тифа и определили чувствительность к антибиотикам: МИК: пенициллина – 128 мкг/мл, ампициллина – 128 мкг/мл, стрептомицина – 128 мкг/мл, тетрациклина – 128 мкг/мл, олеандомицина – 128 мкг/мл, левомицетина - 64 мкг/мл, гентамицина – 1 мкг/мл, мономицина -128 мкг/мл, канамицина – 128 мкг/мл. Задания 1. Каким методом определялась чувствительность выделенной культуры к антибиотикам и каковы этапы исследования? 2. Какой антибиотик целесообразно применить для лечения больного ребенка и почему? 3. Что должно быть отмечено при характеристике выделенного штамма? Эталоны ответов 1.1. Методом серийных разведений, так как ответ дан в мкг/мл. 1.2. Готовятся серийные разведения антибиотика (128 мкг/мл,64, 32 и т.д.), а затем к этим разведениям добавляют выделенную чистую культуру в концентрации 10 5-106 микробных клеток в 1 мл. Через 24 часаучет. 1.3. Наименьшая концентрация антибиотика, при которой еще нет видимого роста микробов, - минимальная ингибирующая концентрация. 2. Гентамицин, так как по результатам опыта только к этому препарату чувствительны сальмонеллы мышиного тифа. 3. У этого штамма множественная устойчивость к антибиотикам. Задание 46 При исследовании пунктата, взятого от больного с эмпиемой плевры, была выделена синегнойная палочка (2*10-5 в 1 мл) в ассоциации с патогенным стафилококком (1,5*10 3). Чувствительность синегнойной палочки пенициллин — уст. стрептомицин — уст. канамицин — уст. левомицетин — уст. мономицин — с/чувств. гентамицин — чувств. тетрациклин — уст. ампициллин — уст. Чувствительность стафилококка пенициллин — уст. ампициллин — уст. линкомицин — чувств. тетрациклин — уст. гентамицин — в/чувств. стрептомицин — уст. канамицин — уст. ЗАДАНИЯ 1.Какой должна быть тактика врача в отношенииданного больного, если известно, что больной 3 года назад перенес пиелонефрит? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ Учитывая то, что синегнойная палочка и стафилококк, выделенные из исследуемого материала, проявляют чувствительность к тентамицину, можно было бы назначить этот антибиотик. Но сдерживает тот факт, что у больного в прошлом было заболевание почек, а, как известно, гентамицин обладает нефротоксическим действием. Поэтому перед назначением этого препарата больного необходимо проконсультировать у уролога и лечение следует проводить под постоянным контролем за функцией почек. Задание 47 Больному перед лечением пенициллином поставили пробу на повышенную чувствительность к этому препарату, для чего внутрикожно в объеме 0,2 мл ввели раствор антибиотика (10000 ЕД/мл) на новокаине. Через 30 минут произвели учет пробы. В месте введения раствора образовалась зона отечности и покраснения. ЗАДАНИЯ 1.Можно ли назначать больному данный препарат? Обоснуйте свой ответ. ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ Однозначно ответить на этот вопрос нельзя, нужно исключить влияние новокаина на результат постановки пробы. Если проба на новокаин будет отрицательной, тогда вводить пенициллин нельзя. Задание 48 Больному, который. поступил в отделение с жалобами на высокую температуру, кашель, колющие боли в боку, тяжелое общее состояние, был поставлен диагноз «нижнедолевая пневмония», и врач назначил пенициллин. После первой внутримышечной инъекции пенициллина у больного отмечалось падение кровяного давления, частый пульс, потеря сознания, холодный липкий пот (анафилактический шок). Благодаря введению норадреналина, преднизолона, хлорида кальция, димедрола состояние больного улучшилось. ЗАДАНИЯ 1.Какая была допущена ошибка фельдшером при введении данного антибиотика? 2.Чем можно объяснить возникновение анафилактического шока? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1.Надо было перед введением препарата поставить пробу на чувствительность к нему. 2.Состоянием повышенной чувствительности в ответ на введение пенициллина. Задание 49 В бактериологической лаборатории при повторном исследовании испражнений больного, перенесшего 3 месяца назад брюшной тиф, была выделена культура грамотрицательных палочек средних размеров с закругленными концами, образовавших на плотной питательной среде колонии, плоские, с неровными краями и шероховатой поверхностью. На бульоне выделенные бактерии росли, давая диффузное помутнение среды с образованием осадка. Определение подвижности дало отрицательный результат. После многократных пересевов на жидкой питательной среде в дальнейшем получен рост на МПА в виде колоний с ровными краями и гладкой блестящей поверхностью. По морфологическим, тинкториальным, культуральным, биохимическим и серологическим свойствам культура оказалась брюшнотифозной. ЗАДАНИЯ 1.В какой форме была выделена данная культура в начале исследования? 2.Под влиянием каких факторов могла появиться подобная форма палочек брюшного тифа у этого больного? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1. В R-форме 2. Такая форма колоний палочек брюшного тифа могла появиться под влиянием применения различных лекарственных препаратов, которые принимал больной, и в связи с наличием специфических антител. Задание 50 В хирургическом отделении участились случаи нагноения послеоперационных ран. При проведении микробиологического исследования причиной этих осложнений оказалось распространение в хирургическом отделении госпитальной инфекции. Так, у больного А. из отделяемого послеоперационной раны был высеян патогенный стафилококк, фаготип ЗА ЗС 55 71. У операционной сестры З. из зева также высеян патогенный стафилококк, фаготип 79. У хирурга П.— патогенный стафилококк, фаготип 80, у младшей медсестры Н. послеоперационной палаты — также патогенный стафилококк, фаготип ЗА ЗС 5571: ЗАДАНИЯ 1.Кто из обследованных лиц является носителем патогенной флоры (патогенных стафилококков)? 2. Кто из обследованных лиц послужил источником послеоперационных осложнений у больных? 3.Какие меры необходимо срочно принять для прекращения распространения данной внутрибольничной инфекции? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1.Носителями патогенных стафилококков являются операционная сестра 3., хирург П., младшая медсестра Н. 2. Младшая медсестра послеоперационной палаты, так как культура стафилококка, выделенная от нее и от больных, имела одинаковый фаготип. 3.Санирование бактерионосителей; младшую медсестру временно перевести на работу в другое отделение. Провести дезинфекцию в хирургическом отделении; строго соблюдать масочный режим; провести в отделении облучение воздуха бактерицидными лампами. Задание 51 Группа интернат для прохождения стажировки была направлена в дизентерийная отделение инфекционной больницы. Им было предложено разработать профилактические мероприятия в очагах, из которых поступили больные. ЗАДАНИЯ 1. Какие исследования необходимо провести среди контактных для выявления возможных бактерионосителей или болеющих хронической дизентерией? 2.Какие профилактические препараты следует срочно назначить взрослым и детям в очаге инфекции, а также в детских дошкольных учреждениях, если ребенок посещал их? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ Среди контактных лиц можно провести: 1) бактериологические исследования испражнений; 2) серологические исследования крови (реакцию агглютинации с диагностикумами из дизентерийных бактерий — Флекснера, Зонне и РИГА). 2.Назначить дизентерийный бактериофаг для приема внутрь, жидкий или в таблетках. Поливалентный дизентерийный бактериофак сухой с кислотоустойчивым покрытием назначают взрослым, находившимся в контакте с больными 2 раза по 2 таблетки с интервалом в 3 дня; детям в возрасте от 6 мес. до 3 лет— по 1 таблетке, старше 3-х лет— по 2 таблетки (как взрослым). Дизентерийный бактериофаг принимают внутрь за 1,5—2 часа до еды и запивают 25—30 мл 3% раствора, бикарбоната натрия (питьевая сода). Контактным лицам бактериофаг дают 2 раза: детям в возрасте от 6 мес. до 1,5 лет — по 15 мл 2 дня подряд; детям старше 3-х лет и взрослым – 50 мл с интервалом 3 дня. Задание 52 Студентам было дано учебное задание получить дизентерийный бактериофаг ЗАДАНИЯ 1.Где можно обнаружить дизентерийный бактериофаг? 2.Как можно его выделить? Перечислите этапы выполнения данного задания? 3.Как можно повысить литическую активность бактериофага? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1.Дизентерийный бактериофаг можно обнаружить в испражнениях реконвалесцентов, в водах рек, озер и прудов, в почве. 2.Выделить бактериофаг можно путем фильтрации исследуемой жидкости от микробов, твердый исследуемый материал (образцы почвы, продукты, оформленные испражнения) предварительно измельчают в ступке, эмульгируют, фильтруют вначале через бумажный фильтр, а затем через бактериальный. Наличие фага в полученном фильтрате определяют в жидких питательных средах или на плотных средах по методу Грациа. Присутствие бактериофага в жидких питательных средах определяют по степени прозрачности опытной пробирки (фильтрат + тест-культура — микроорганизмов, в данном случае дизентерийных бактерий). На плотных средах по методу Грацниа, присутствие бактериофага определяют по наличию исследования прозрачных пятен, хорошо видимых на матовом фоне глубинного роста дизентерийных бактерий. 3.Активность бактериофага можно повысить методом последовательных пассажей на чувствительный тесткультуре. Титр бактериофага определяем по методу Аппельмана. Титром бактериофага считают то максимальное разведение фага, при котором наблюдается полный лизис чувствительной к нему культуры. Из этой пробирки содержимое прогревают и вновь определяют титр фага по методу Аппельмана. Полученную при этом величину выражают отрицательном логарифмом 10, где степени указывает разведение фага. Титр бактериофага, используемого для лечения и профилактики, должен быть не ниже 10 – 7. Задание 53 В хирургическом отделении городской больницы в течение года у 50 человек в комплекс лечения гнойных ран, инфицированных стафилококком, включали стафилококковый бактериофаг. При анализе результатов лечения оказалось, что у 24 человек (45%) наступило раннее очищение гнойных ран от гноя с последующим заживлением. У остальных больных процесс очищения и заживления ран происходил в обычные сроки. ЗАДАНИЯ 1.Объясните причину малой эффективности фаготерапии 2.Назовите возможные способы применения бактериофага при лечении гнойных ран ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1. Малая эффективность фаготерапии может быть связана с тем, что заболевание у части больных вызвано лизогенных штаммами стафилококков, находящимися в гнойной ране, которые проявляют устойчивость к действию экзогенного бактериофага. У некоторых пациентов стафилококки, вызвавшие гнойный процесс, проявляли устойчивость к применяемому для лечения бактериофагу. 2.Промывание гнойных ран, повязки на рану, смоченные специфическим бактериофагом. Задание 54 При бактериологическом исследовании сточных вод города Н. на этапах очистки в течение 6 месяцев периодически обнаруживали брюшнотифозный бактериофаг. ЗАДАНИЯ 1.О чем свидетельствует наличие брюшнотифозного бактериофага в сточных водах города? 2.Каким методом можно выделить брюшнотифозный бактериофаг из сточных вод? Перечислите этапы его выделения. ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1.Об эпидемиологическом неблагополучии, связанным с наличием бактерионосителей палочек брюшного тифа в городе Н, которые выделяют возбудителей с испражнениями. 2. Фильтрацией через бактериальные фильтры с последующим определением фага методом Грацио. Мясопептонный агар 1,5% разливают в чашки Петри в количестве 25-30 мл. После застудневания среды чашки ставят на 1,5-2 часа для подсыхания. В пробирку с 2,5 мл 0,7% расплавленного и остуженного до температуры 45С агара вносят 1 мл исследуемого фильтрата и 0,1 мл густого смыва суточной агаровый культуры, соответствующий искомому фагу, в данном случае брюшнотифозному фагу. Содержимое пробирок быстро перемешивают, чтобы не произошло загустевание агара, и выливают в ту же чашку вторым слоем. После застудневание агара посев ставят в термостат при 37С. Учет результатов, как правило, возможен через 5-8 часов инкубации в термостате. Присутствия бактериофага определяют по наличию пятен, хорошо видимых на матовом фоне глубинного роста бактерий. Задание 55 У больного с подозрением на чуму для уточнения диагноза были пунктированы лимфоузлы и содержимое засеяно на МПА чашки Петри. Через сутки на чашках с ростом микроорганизмов появились участки отсутствие роста округлой формы (1-1,5 мм в диаметре). ЗАДАНИЯ 1.Чем можно объяснить появление этих «стерильных пятен» среди роста культуры? 2.Что вы можете сказать о данной мкультуре? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1.Появлением в посевах на МПА специфического умеренного бактериофага. 2. Данная культура является лизогенной. Задание 56 Из крови больного с подозрением на брюшной тиф выделена чистая культура грамоотрицательных, средних размеров палочек с закругленными концами, подвижных образующих на среде Эндо мелкие круглые, слегка выпуклые, прозрачные в проходящем свете колонии (S-формы), ферементирующих в коротком «пестром» ряду Гисса до кислоты глюкозу, мальтозу, маннит и при росте в бульоне образующих сероводород. Выделенная культура не агглютинировалась специфической брюшнотифозной агглютинирующей сывороткой. ЗАДАНИЯ 1.Какие бактериофаги можно использовать в данном случае? 2.Составить схему исследования с указанием этапа, в котором используются бактериофаги. 3.Для чего производится определение фаготипа выделенной культуры? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1.В этом случае можно проверить лизируемость культур соответствующими 0-фагами или провести многократный пересев (5-7 дней подряд) на свежий влажный агар. 2.Необходимо выделить чистую культуру микроорганизмов с использованием дифференциальнодиагностических сред и провести идентификацию по культуральным, биохимическим и антигенным свойством. Затем, используя набор типовых брюшнотифозных бактериофаг, провести фаготипирование выделенной чистой культуры. 3.Фаготипирование брюшнотифозных культур производят с целью установления источника инфицирования населения. Задание 57 В посёлке Н. на протяжении 3 дней заболело 9 человек. При бактериологическом исследовании крови (методом гемокультуры) из этих больных выделены S.typhi. при бактериологическом исследовании воды колодца выяснилось, что она загрязнена брюшнотифозными бактериями. ЗАДАНИЯ 1.Какие мероприятия следует провести для ликвидации эпидемии брюшного тифа в поселке Н? 2. Какой препарат Вы можете применить для предупреждения последующих заболеваний у других лиц, пользовавшихся для питья водой из этого колодца? 3. Можно ли пользоваться водой из этого колодца? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1. Комплекс противоэпидемических мероприятий, куда входит выявление, изоляция и лечение больных, активное выявление бактерноносителей и их санация, специфическая и неспецифическая профилактика среди населения поселка Н. 2.Поливалентный брюшнотифозный бактериофаг с кислотоустойчивым покрытием. В очагах брюшного тифа бактериофаг назначают 1 раз в 5—7 дней. Детям в возрасте от 6 мес. до 3-х лет дают по 1 таблетке бактериофага на прием (таблетку размельчают и разводят в воде или молоке), детям от 3-х лет и взрослым — по 2 таблетки на прием. 3.Нельзя. Воду в колодце необходимо дезинфицировать препаратами хлора, затем исследовать в бактериологической и химической лабораториях СЭС на пригодность для питья. Задание 58 В терапевтическом отделении находился для лечения больной с диагнозом "крупозная пневмония". Для бактериологического исследования отправлен в лабораторию исследуемый материал, из которого приготовленны мазки и окрашены метиловым синим. Полученна следующая микроскопическая картина. Врач поставил предварительный диагноз: "пневмококковая пневмония". Из оставшегося материала приготовлена взвесь с питательным бульоном и введена внутрибрюшинно белой мыши. Через 24 часа мышь погибла. Животное вскрыли, приготовили маски из печени, селезёнки, крови из сердца, окрасили метиленовым синим и получили следующую микроскопическую картину. ЗАДАНИЯ 1. Какой метод диагностики использован в первом случае? 2.Какой метод диагностики использован во втором случае? 3.Для чего производилось вскрытие лабораторного животного? 4. Опишите микроскопическую картину в первом и во втором случае. 5. Какой процесс возник у мыши после внутрибрюшинного введения исследуемого материала? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1.Микроскопический метод диагностики. 2. Биологический метод. 3. Вскрытие лабораторного животного производилось для извлечения пораженных органов, обнаружения в них возбудителя, вызвавшего гибель животного, выделения чистой культуры н определения его места локализации. 4. В обоих случаях в мазках обнаружены голубого цвета кокки, слегка вытянутые, располагаются парами или очень короткой цепочкой, окружены нежной капсулой. 5. Септицемия. Задание 59 В одном из районов Боливии отмечалась массовая гибель грызунов. В это же время среди жителей данной местности возникло заболевание, которое характеризовалась быстрым повышением температуры до 39-40С, сопровождающаяся ознобом, головокружением и тяжелым общим состоянием. В последующем отмечались потеря сознания, бред, кровоизлияние под кожу. У больных были увеличены либо паховые, либо подмышечные железы до величины голубиного яйца, болезненные, плотно спаянные с кожей. Все больные были госпитализированы. Из пункта бубонов специализированной лаборатории выделен возбудитель чумы. ЗАДАНИЯ 1.Как называется форма распространения инфекции, которая в короткий промежуток времени охватывает целые страны и континенты? 2.Как называются заболевания, если источником инфекции являются больные животные, как в данном случае? 3.Как выделить возбудитель из организма животных, выловленных в очагах инфекции, и как выяснить причину их гибели? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1.Эпидемия 2.Такие инфекции называются зоонозными. 3.Выловленных в очаге больных животных необходимо забить, провести микроскопическое исследование окрашенных мазков, приготовленных из крови и органов. Кроме того, посеять кровь из сердца и суспензию органов на питательные среды. Выделить чистую культуру и провести её идентификацию по морфологическим, культуральным, биохимическим и антигенным свойствам. Трупы вскрытых животных сжечь или обезвредить в автоклаве. Задание 60 В инфекционное отделение в течении 3 месяцев из разных районов города поступали больные с тяжелым общим состоянием, высокой температурой, сильными головными болями. На коже живота, груди и спины у этих больных появлялись единичные мелкие розовые пятнышки диаметром 3-3,5 мм, имеющие правильную округлую форму. При бактериологическом исследовании 10-20 мл крови методом гемокультуры были выделены брюшнотифозные палочки. ЗАДАНИЯ 1.Как классифицировать единичные случаи заболевания брюшным тифом в различных районах города? 2. Как называется состояние, когда в крови больного находятся патогенные микробы, но не размножаются в ней? 3.Какие исследования могут помочь решить вопрос о том, связаны ли эти случаи заболеваний с одним источником инфекции или несколькоими? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1.В данном случае речь идет о спорадических случаях брюшного тифа. 2.Бактериемия. 3.Необходимо провести фаготипирование выделенных брюшнотифозных бактерий. В том случае, если фаготип культуры, выделенных от всех больных, одинаков, возможно, что эти заболевания связанны с одним источником инфекции. Задание 61. В лаборатории с целью оценки состояния неспецифической резистентности организма больного Н., страдающего рецидивирующей стафилококковой инфекцией, быда поставлена серологическая реакция с его сывороткой для определения содержания комплемента Ответы: 1.Определение титра комплемента в сыворотке крови больного. 2.Взаимодействие антигена с антителом, образования иммунного комплекса (антиген-антитело) с адсорбцией клмплемента и последующим гемолизом эритроцитов барана. Титр комплемента определяется минимальным количеством сыворотки, вызывающим полный гемолиз сенсибилизированных эритроцитов. Задание 62. В кабинет к врачу-дерматовенерологу обратился больной С. Из гнойного отделяемого уретры этого пациента врач приготовил мазок, окрасил про Граму. При микроскопии в препарате обнаружена масса лейкоцитов, в цитоплазме которых находилось большое количество грамотрицательных бобовидной формы диплококков. Ответы: 1.Это результат фагоцитоза 2.В фагоцитарной реакции различают несколько стадий: хемотаксис, прилипание или аттракция, захват или эндоцитоз фагоцитируемого объекта; внутриклеточное переваривание с выведением остатков захваченных агентов на мембрану клетки или внутриклеточное размножение фагоцитированного микроба. 3.Незавершенный фагоцитоз 4.У больного инфекционный процесс, вызванный гонококками Заданрие 63. У больного А. с подозрением на эпидемический цереброспинальный менингит из осадка спинномозговой жидкости были приготовлены мазки, окрашены метиленовым синим. При микроскопическом исследовании в препарате обнаружены лейкоциты, в цитоплазме которых находились интенсивно окрашенные микроорганизмы бобовидной формы, расположенные попарно, обращенные плоской поверхностью друг к другу. Ответы: 1.Фагоцитоз менингококков. 2.Фагоцитоз относится к наиболее древней форме защиты и представляет собой процесс активного поглощения и переваривания клетками организма попавших в него живых или убитых микробов или других инородных частиц. 3.Фагоциты (макрофаги и микрофаги) Задание 64. В лабораторию судебно-медицинской экспертизы доставлена одежда гражданина Н., проппвешго накануне без вести. Одежда обнаружена в сарае, на ней имеются пятна багрового цвета, которые эксперт определил как следы крови. Ответы: 1.Используется реакция кольцепреципитации с сывороткой , содержащей антитела против глобулинов человека. 2.1.Из участков испачканной одежды приготовить экстракт. 2.2.Экстракт тщательно несколько раз профильтровать через ватно-марлевый фильтр. 2.3.Вузкую пробирку налить пипеткой 0,3-).5 мл неразведенной преципитирующей сыворотки против глобулинов человека 2.4.Другой пипеткой (пастеровской) осторожно наслаивать экстракт ,полученный из пятна крови в таком же объеме. 3.На границе двух жидкостей в течение 5-10мин. Появится преципитат в виде кольца белого цвета Задание 65. Из крови больного Н. в бактериаологической лаборатории выделена чистая культура грамотрицательных палочек средних размеров с закругленными концами, образующая на плотных дифференциальнодиагностических средах гладкие, бесцветные, полусферические колонии, в коротком «пестром» ряду расщепляющая глюкозу, маннит, мальтозу с образованием кислоты и образующая сероводород при росте на МПБ. Для изучения серологических свойств в лаборатории поставлена реакция агглютинации. Ответы: 1.Брюшнотифозную монорецепторную агглютинирующую сыворотку 2.Ореинтеровочная РА проводится на предметных стеклах.Для этого на обезжиренное стекло наносят пастеровской пипеткой несколько капель стандартной сыворотки в разведении 1:10 или 1:20 и каплю изотонического раствора хлорида натрия-для контроля. В каплю сыворотки,а также в каплю контроля вносят петлю суточной культуры ,выделенной из организма больного и выросшей на скошенном агаре. Внесенную культуру тщательно перемешивают,чтобы капля жидкости была равномерно мутной.Реакция происходит при комнатной температуре,результаты оценивают невооруженным глазом через 5-10 минут 3.При положительной реакции в капле с сывороткой наблюдают появление хлопьев (крупных или мелких), хорошо видимых при покачивании стекла. При отрицательной-жидкость остается мутной Задание 66. В лаборатории, обсдлуживающей пункт по приему пушнины,при экпертизе шкур овец использована реакция термопреципитации Асколи с преципитирующей противосибирязвенной сывороткой. При учете реакции кольцепреципитации через 5 минут на границе жидкостей появилось белесоватое кольцо Ответы: 1.Положительная реакция кольцепреципитации 2.С целью определения инфицированности меха возбудителями сибирской язвы 3.Кусочки шерсти измельчаютЮзаливают 25-20 кратным объемом физ.раствора и кипятят в течение 5-10 минут,затем фильтруют через асбестовую вату или фильровальную бумагу,предварительно смоченную физиологическим раствором получая прозрачную жидкость (термоэкстракт). Затем приступают к проведению реакции преципитации. 4.Шкуры овец инфицированы спорами возбудителей сибирской язвы Задание 67. На полу в квартире исчезнувшего гражданина С. При судебно-медицинской экспертизе обнаружены багровые пятна,которые оказались пятнами крови. Из них экперт приготовил экстракт для постановки реакции иммунитета с сывороткой против глобулинов крови человека.Реакция оказалась положительной в течение 5 минут. Ответы: 1.Реакцию преципитации с сывороткой,содержащей антитела против глобулинов крови человека 2.Появление кольца преципитации на границе двух жидкостей в течение 5-10 минут 3.Положительная реакция между антиглобулиновой сывороткой и антигеном,приготовленным из пятна крови, является доказательством того ,что это пятно является засохшей кровью человека Задание 68. При постановке РСК с сывороткой крови больного с подозрением на хроническую гонорею она оказалась положительной со специфическим антигеном в 1,2,3, и 4 пробирках Задание 69. При добавлении гемолитической (индикаторной) системы к пробиркам с бактериальной системой в последних произошел гемолиз. Ответы: 1.О реакции связывания комплемента. 3.В опытных пробирках антитела и антигены не соответствовали друг другу, поэтому не происходит образования иммунного комплекса , комплемент остается свободным, связывается с гемолитической ( индикаторной) системой и происходит ее гемолиз Задание 70. При постановке РСК в пробирке с исследуемой сывороткой больного в системе образовался комплекс антиген+антитело+комплемент,не определяемый визуально Задание 71. При постановке РСК на 3-й неделе заболевания с сывороткой крови с подозрением на токсоплазмоз она оказалась отрицательной во всех разведениях. Ответы: 1.По наличию гемолиза («лаковая кровь») в опытной пробирке. 2.Является свидетельством отсутствия специфических антител к токсоплазмам. 3.Сыворотка больного,антиген,приготовленный из токсоплазм,комплемент(сыворотка крови морской свинки),гемолитическая сыворотка для РСК и 3% взвесь эритроцитов барана Задание 72. При постановке РСК с сывороткой у больного с подозрением на хроническую гоноре.,она оказалась положительной на 4 креста во всех разведениях сыворотки( от 1:5 до 1:160) Ответы: 1.Наличие осадка эритроцитов и бесцв.надосадочной жидкости 2.Для диагностики хронических форм гонореи 3.О наличии антител к возбудителям гонореи 4.Специфические противогонококковые антитела Задание 73. У больного Н.,переведенного из терапевтического отделения в инфекционное ,на 12-й день болезни был поставлен клинический диагноз «дизентерия?» Лечился в терапевтическом отделении поп поподу хронического колита. Трехкратное бактериалогическое исследование кала оказалось отрациательнымшигеллы в испражнениях не обнаружены Для того,чтобы подтвердить предполагаемый диагноз «дизентерия?», в бактериалогическую лабораторию напрален исследуемый материал Ответы: 1.В лабораторию направлена кровь больного для обнаружения в ней специфических антител 2.Для подтверждения диагноза в данном случае назначена РНГА 3.РНГА ставится в полистироловых пластинах с лунками. Исследуемая сыворотка прогревается 30мин при температуре 56 для удаления неспецифических геммаглютининов. Затем в лунках готовятся 2-кратные разведения сыворотки больного ( в объеме 0,5мл).Разведения готовят в физ.растворе ,который предварительно наливают в лунки. Во все лунки с приготовленными разведениями сыворотки добавляют эритроцитарный диагностикум (сенсибил.антигеном эритроциты барана) Реакцию сопровождают контролями: 1) Контроль сенсибилизированных эритроцитов(физ.раствор +сенс. Эритроциты) 2) Несенсибилизированные эритроциты( не сенсиб.антигеном эритроциты барана +физ.раствор) 3) Исследуемая сыворотка + несенсиб. Эритроциты Пластины тщательно встряхивают и помещают в термостат на 30-40 минут при темп 37 4.При положительной РНГА с эритроцитарным жиагностикумом шигелл Флекснера – вразведении сыворотки 1:200,при положит. РНГА с эритроцитарными диагностикумами шигелл Григорьева-Шига,Нькастл – в разведении сыворотки 1:100 Для окончательной диагностики РНГА проводят повторно с интервалом не менее 7 дней,т.к. диагностическое значение имеет нарастание титра антител в 4 раза. Задание 75 При изучении иммунологического статуса больного хроническим воспалением легких теберкулезной этиологии возникла необходимость оценить состояние клеточного иммунитета в связи с рецидивом инфекции и решением вопроса о включении в комплекс лечебных мероприятий иммунокорригирующих препаратов. Ответы: 1.необходимо оценить Т-звено иммунитета.Для этой цели можно использовать тесты оценки иммунного статуса 1-уровня (спонтанное розеткообразование – Е-РОК; реакция бласттрансформации на фитогемаглглютинин -РБТЛ на ФГА и на туберкулин реакция торможения миграции лимфоцитов – РТМЛ в присутствии туберкулина; кожный тест на туберкулин). 2.В защитных механизмах против этой инфекции участвуют много факторов,среди которых основную роль играют фагоцитоз,формирование гиперчувствительности замедленного типа, повышение цитотоксической функции лимфоцитов. Задание 76 У грудного ребенка в возрасте 5 месяцев, поступившего в детское отделение по поводу рецидивирующей герпесной ифекции , врач заподозрил аплазию тимуса. Ответы: 1.Для оценки иммунного статуса ребенка в данном случае необходимо определить в крови суммарное количество Т-клеток и их функциональную активность. Можно использовать реакцию спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана и реакцию бластной трансформации на ФГА. 2. Тимус относится к центральным органам иммунной системы. В нем из потомков стволовых клеток костного мозга дифференциируются тимоциты. Их созревание, пролиферация и дифференцировка происходит под влиянием гормона тимуса-тимозина. Затем эти клетки мигрируют в периферические лимфоидные органы (лимфоузы,селезенка), где превращаются в зрелые Т-лимфоциты. Задание 77 При обыске в доме у гражданина Д., подозреваемого в убийстве, в сарае среди дров нашли топорище со следами засохшей на нем крови. 1.Можно ли доказать видовую принадлежность этих пятницу крови? Да, можно. 2.Какую реакцию необходимо использовать для этой цели? Реакцию кольцепреципитации со специфической сывороткой, содержащей антитела против глобулинов крови человека. 3.Как можно приготовить антиген из пятен крови, обнаруженных на топорище? Из пятна крови приготовить экстракт, смывая пятно физиологическим раствором. Затем эта жидкость тщательно фильтруется до полной прозрачности через ватно-марлевый фильтр. 4.Каким требованиям должен соответствовать антиген, приготовленный для исследования? Ингредиенты должны быть абсолютно прозрачным, антиген не должен содержать посторонних белков, титр преципитирующей сыворотки должен быть 1:100000 или выше. Задание 78 При постановке РСК с сывороткой больного с подозрением на туберкулёз она оказалась положительной на 4 креста во всех разведениях сыворотки после пребывания в течении 2 часов при комнатной температуре и 18 часов в холодильнике. 1.Как вы определили визуально феномен положительной РСК на 4 креста? По феномену полного оседания эритроцитов на дно пробирки и бесцветной надосадочной жидкости. 2.С какой целью использована РСК в данном случае? С целью диагностики туберкулёза. 3.О чем свидетельствует положительная РСК со специфическим антигеном? С целью ранней диагностики туберкулёза и относительной оценки динамики иммуногенеза при вакцинации. Задание 79 Вы получили для работы следующие бакпрепараты: 1.Чумная вакцина. 2.Холерная вакцина. 3.Адсорбированный столбнячный анатоксин. 4.Противостолбнячая сыворотка. 5.Противо…. глобулин. 1.Какой иммунитет создают эти препараты? Искусственный активный и пассивный иммунитет. 2.Для чего их можно применить? Для вакцинопрофилактики, серопрофилактики, терапии инфекционных заболеваний. 3.Какие препараты Вы отнесете к живым, а какие – к убитым вакцинам? Чумная вакцина – состоит из живых микробов чумных вакцинных штаммов ЕВ, анатогенных для человека. Холерная вакцина – представляет собой взвесь выращенных на агаре холерных Эль-Тор вибрионов, убитых нагреванием или формалином. Задание 80 Вам предложены для работы следующие препараты: 1.Бруцеллезная накожная вакцина. 2.Лептоспирозная вакцина. 3.Бруцеллезная жидкая вакцина. 4.Адсорбированная коклюшно-дифтерийно-столбнячная вакцина. 5.Адсорбированный столбнячный анатоксин. 1.Какой иммунитет создают эти препараты? Искусственный активный иммунитет. 2.Для чего их можно применить? Для профилактики и лечения инфекционных заболеваний. 3.Какие препараты относятся к живым, а какие – к убитым вакцинам? Бруцеллезная накожная вакцина – представляет собой взвесь живой культуры вакцинного штамма Br.abarius 19-BA в сахарозо-желатиновой среде, высушенную методом сублимации. Бруцеллезная жидкая вакцина – взвесь убитых нагреванием бруцелл овечьего и коровья вида. АКДС – ассоциированный препарат, включающий смесь коклюшных микробов, убитых формалином, и очищенных концентрированных дифтерийного и столбнячного анатоксинов, адсорбированных на гидроокиси аммония. Задание 81 Вам предложили для работы следующие препараты: 1.Вакцина БЦЖ. 2.Полиомиелитная пероральная живая вакцина Сейбина типов l, ll, lll. 3.Гонокковая вакцина. 4.Противодифтерийная сыворотка. 5.Противосибиреязвенный глобулин. 6.Антирабический гаммаглобулин. 1.Для создания какого иммунитета они применяются? Для создания искусственного активного и пассивного иммунитета. 2.Укажите, для чего применяется каждый препарат? Вакцина БЦЖ применяется для профилактики туберкулёза. Полиомиелитная пероральная живая вакцина l, ll, lll типов – для профилактики полиомиелита у детей. Гонококковая вакцина – для лечения хронических форм гонореи, а также с целью диагностики и установления состояния излеченности. Противодифтерийная сыворотка – используется главным образом с терапевтической целью. Противосибиреязвенный глобулин – применяется с целью терапии и профилактики сибирской язвы у людей. Антирабический гамма-глобулин – с целью профилактики заболеваний гидрофобией. 3.Что представляет собой вакцина БЦЖ? Вакцина БЦЖ – представляет собой взвесь живых микобактерий вакцинного штамма BCG, высушенных под вакуумом из замороженного состояния. Выращивание культуры производят на твёрдой картофельной среде, а затем в жидких синтетических средах. Образовавшуюся на поверхности жидкой среды микробную плёнку снимают, отмывают и гомогенизируют, после чего разводят 1,5% раствором глутамата натрия до концентрации 5 мг в 1 мл. Разведенную вакцину разливают в ампулы нейтрального стекла и высушивают под вакуумом из замороженного состояния. В ампуле содержится 1 мг культуры BCG, что составляет 20 доз по 0,05 мг. Задание 82 Вам предложены следующие препараты: 1.Оспенная дермальная вакцина. 2.Брюшнотифозная спиртовая вакцина, обогащенная Vl-антигеном. 3.Химическая сорбированная тифо-паратифозностолбнячая вакцина. 4.Адсорбированный дифтерийный анатоксин. 5.Противодифтерийная сыворотка. 1.Какой иммунитет создают в организме эти препараты? Искусственный активный и пассивный иммунитет. 2.Для чего они применяются? Для профилактики и лечения инфекционных заболеваний. 3.Какие вакцины вы отнесете к живым, убитым и ассоциированным? Оспенная дермальная вакцина – живой, высушенный со стабилизатором вирус вакцины. Брюшнотифозная спиртовая вакцина, обогащенная Vl-антигеном – комплексный препарат, состоящий из брюшнотифозной спиртовой вакцины и химического растворителя Vl- антигена брюшнотифозных бактерий, который прилагается в качестве растворителя. Тифозно-паратифозно-столбнячная вакцина – TABTe – ассоциированный препарат, который содержит выделенные из брюшно-тифозных, паратифозных А и В бактерий, комплексные или полные антигены и столбнячий анатоксин. Задание 83 Вы получили для работы следующие препараты: 1. Противодифтерийная сыворотка. 2.Противостолбнячная сыворотка, очищенная и концентрированная Диаферм-3. 3.Противосибиреязвенный глобулин. 4.Антирабический гаммаглобулин. 5.Гонококковая вакцина. 6.Сорбированная тифознопаратифозно-столбнячная вакцина. 1.Какой из препаратов относится к химическим вакцинам? Химическая сорбированная тифознопаратифозно-столбнячная вакцина. 2.Какой иммунитет создают эти препараты? Искусственный активный и пассивный иммунитет. 3.Для чего их можно использовать? Для лечения и профилактики инфекционных заболеваний. Кроме того, гонококковая вакцина используется ещё с целью диагностики гонореи и установления состояния излеченности. Задание 84 После окончания агрохимического факультета сельскохозяйственного института молодой специалист С. был направлен на работу в совхоз, специализирующийся на выращивании знаковых культур. Через 2 года работы агрохимик обратился к врачу с жалобами на появление весной и летом насморка, чихания, отчётности лица, слезотечения, при этом больной испытывает недомогание, слабость, которая мешает работать. Зимой и осенью эти явления не наблюдаются. После осмотра терапевтом направления для уточнения диагноза к аллергологу. Врач-аллерголог после тщательно собранного аллергологического анамнеза поставил больному внутрикожную пробу с аллергеном знаковые культур. Через 30 минут реакция оказалась резко положительной. 1.Опишите характер резко положительной реакции на этот аллерген. На месте ведения аллергена появляются волдырь и эритема 20 мм в диаметре, а также отечность и зуд. 2.К какому типу гиперчувствительности относится этот аллерген? К гиперчувствительности немедленного типа. 3.О каком заболевании после учёта внутрикожной пробы можно подумать? Это может быть поллиноз. 4.Какой метод диагностики использован в данном случае? В данном случае использована аллергическая диагностическая проба. 5.Какие рекомендации следует дать пациенту? Необходимо провести десенсибилизирующее лечение и систематически наблюдаться у врачааллерголога. Задание 85 Больной С., зоотехник по специальности, обратился к врачу с жалобами на постоянные боли в мелких и крупных суставах, повышение температуры тела до 37,5-37,7°С, к вечеру слабость, потливость, ограничение подвижности в суставах. Болен 1,5 месяца. Предполагая, что у больного может быть бруцеллез, врач для уточнения диагноза назначил клинико-лабораторные исследования и внутрикожную пробу с бруцеллином (проба Брюне). Через 24 и 48 часов после внутрикожного введения этого аллергена у больного отмечена резко положительная реакция. 1.Опишите картину этой резкой положительной реакции на внутрикожное введение бруцеллина. Через 2448 часов появляется болезненная отечность, которая сопровождается гиперемией. Размер отечности более чем 3×3 см. Обычно отёк удлинённой или овальной формы, хорошо контурирован, с ясным повышением над уровнем нормальной кожи, но может быть внешне и слабо выражен. В этих случаях отёк распознаётся при ощупывании. 2.Как называется такая повышенная чувствительность, развывшаяся у этого больного на продукты жизнедеятельности бруцелл, введённые внутрикожно? Гиперчувствительность замедленного типа – проявление инфекционной аллергии. 3.Как можно объяснить резко положительную пробу Бюрне? Положительная проба Брюне свидетельствует о сенсибилизации организма возбудителями бруцеллеза или вакцинными препаратами против бруцеллеза. Такая реакция развивается после повторной встречи с тем же аллергеном и опосредована клеточной реакцией Т-лимфоцитов и макрофогов, оказывающих цитотоксическое действие на клетки-мишени. При накожном или внутрикожном введении аллергена Т-лимфоциты мигрируют в кожу и вступают в контакт с клетками и межклеточным веществом, связывающим это аллерген. В результате на месте введения антигена образуется плотный клеточный инфильтарт, состоящий из лимфоцитов и макрофагов. Клон сенсибилизированных Тлимфоцитов представляет собой долгоживущие клетки, которые могут сохранять состояние специфической сенсибилизации на протяжении всей жизни индивидума. Задание 86 Больной Н. обратился к врачу с жалобами на появление насморка, чихания, затрудненного дыхания весной при цветении деревьев. Иногда эти явления повторяются летом, а осенью и зимой ничего подобного не замечал. Применение капель в нос, которые больной покупал в аптеке, не улучшили состояние больного. 1.О каком заболевании можно подумать, внимательно изучая жалобы больного? Атопическое заболевание, которое относится к поллинозам. 2.Какие вы можете назначить специальные исследования для подтверждения предполагаемого Вами диагноза? Внутрикожную пробу с аллергеном из пыльцы растений или реакцию торможения миграции лейкоцитов, и реакцию бластной трансформации лимфоцитов на этот аллерген. Можно использовать также реакцию дегрануляции тканевых базофилов. 3.Какие рекомендации можно дать больному? Обратиться к врачу-аллергологу, установить, на какой аллерген имеется повышенная чувствительность и назначить десенсибилизирующую терапию. Задание 87 У больного С., получившего травму в автомобильной катастрофе, через 7 дней появились первые симптомы столбняка: судорожные сокращения травмированной конечности. В связи с этим ему назначили курс лечения противостолбнячной сывороткой по 200.000 МЕ троекратно, и больной начал выздоравливать. Через 2 недели у больного повысилась температура тела до 38,5°С, увеличились лимфоузлы, появилась отечность суставов, сыпь типа «крапивницы", кожный зуд и нарушения со стороны сердечно-сосудистой системы. 1.Какое заболевание появилось у больного через 2 недели? Сывороточная болезнь. 2.К какому типу гиперчувствительности она относится? К гиперчувствительности немедленного типа. 3.Объясните механизм тканевые повреждений при этом заболевании? В основе сывороточной болезни лежит взаимодействие антигена с антителами, которое происходит в кровяном русле с последующим отложением образующихся иммунных комплексов в стенке кровеносных капилляров и повреждением эндотелия. Внутри сосудов образуются конгломераты крови и тромбы, что приводит к тканевым повреждениям. 4.Какие лечебные препараты можно назначить этому больному? Пипольфен, супрастин, хлористый кальций, диазолин. Задание 88 Больному, который поступил в отделение с жалобами на высокую температуру, кашель, колющие боли в боку, был поставлен диагноз «нижнедолевая пневмония», и врач назначил пенициллин. После первой внутримышечной инъекции пенициллина у больного появились следующие симптомы: падение кровяного давления, потеря сознания, отёк лица. Благодаря введению норадреналина, преднизолона, хлорида кальция, димедрола состояние больного улучшилось. 1.Чем можно объяснить возникновение анафилактического шока? Анафилактическая реакция возникла потому, что у больного была повышенная чувствительность к данному лечебному препарату (пенициллину). 2.Была ли допущена ошибка при введении пенициллина? Да, так как больному ввели пенициллин без предварительного проведения внутрикожной пробы на повышенную чувствительность к пенициллину. Задание 89 В стоматологическом кабинете перед экстракцией зуба больному сделали проводниковую анестезию 0,5% раствором новокаина. У больного через несколько минут развился анафилактический шок. 1.К какой группе аллергических реакций относится анафилактический шок, возникший у больного на введение новокаина? Анафилактический шок относится к гиперчувствительности немедленного типа. 2.Как называется доза новокаина, которая вызвала шок? Такая доза новокаина называется разрешающей дозой. 3.Какую ошибку допустил врач-стоматолог? Не проверил состояние сенсибилизации к новокаину. Для этой цели нужно поставить внутрикожную пробу с новокаином. Задание 90 У молодой женщины при использовании доя окраски ресниц туши с добавлением урсола на коже век через 12 часов появилась гиперемия, отечность, зуд. Из анамнеза выяснено, что более двух лет она пользовалась только этой тушью. 1.К какому типу реакций можно отнести это явление? К аллергической реакции замедленного типа. 2.Какой механизм лежит в основе реакции этой группы? В основе лежит взаимодействие антигена с антителом, которое опосредовано клеточной реакцией Т-лимфоцитов и макрофогов, оказывающих цитотоксическое действие на клетки-мишени. 3.Какие можно использовать меры профилактики и лечения у этой пациентки? Не пользоваться тушью, содержащей урсол. 4.Почему подобная реакция появилась у больной сразу после использования этой туши? Так как для развития клинических проявлений аллергических реакций должен предшествовать период сенсибилизации – накопление специфических антител и специфическая сенсибилизация Т-лимфоцитов. ЗАДАНИЕ № 91 Больному перед лечением поставили пробу для определения чувствительности к этому препарату. С этой целью внутрикожно в объеме 0,2 мл ввели раствор антибиотика (1000 Ед/мл) на новокаине. Через 30 минут произвели учет пробы. Вместе введения раствора образовалась зона эритемы в диаметре до 3 мм. ЗАДАНИЯ 1. Как Вы можете трактовать полученные результаты? 2. Можно ли назначить больному лечение пенициллином? 3. Какое замечание Вы сделаете фельдшеру, который ставил пробу чувствительность к пенициллину? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1. Положительная аллергическая реакция на введение пенициллина или новокаина. 2. Можно, но только в том случае, если повторная внутрикожная проба на пенициллин, разведенный дистиллированной водой или физиологическим раствором, окажется отрицательной (менее 0,9 мм в диаметре). 3. Для проверки повышенной чувствительности к какому-либо лекарственному препарату его нужно разводить физиологическим раствором или дистиллированной водой, так как новокаин может вызвать сенсибилизацию организма. Задание №92 Больному человеку по жизненным показаниям было проведено прямое переливание крови. Через неделю у него при вдыхании запаха цветов появился ринит (чихание, насморк, набухание слизистой оболочки носовых раковин). До переливания крови такие явления отсутствовали. Однако через 1-2 месяца эти симптомы исчезли и при дальнейшем наблюдении не повторялись ЗАДАНИЯ 1. Какое объяснение можно дать этому наблюдение? 2.Какую ошибку допустили врачи при переливании крови? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1. Это наблюдение можно объяснить пaccивной анафилаксей, пассивным переносом состояния сенсибилизации из одного организма в другой. 2. Не выяснили у донора, не страдает ли донор каким-либо аллергическим заболеванием. ЗАДАНИЕ № 93 Школьнику К., 12 лет, заболевшему дифтерней (токсическая форма), была введена большая доза противодифтерийной сыворотки (50 000 ME). В течение ближайших трех дней состояние больного улучшилось, нормализовалась температура, но на 9 день после введения сыворотки состояние больного снова ухудшилось, повысилась температура до 38,5 °С, появились боли в суставах и их отечность. При осмотре лимфатические узлы увеличены в размерах и болезненны при ощупывании. На кожа сыпь типа «крапивницы» и отмечается сильный зуд. ЗАДАНИЯ 1. Как называется заболевание, развившееся у данного больного? 2. Почему возникло это заболевание, каков eго патогенез продолжительность течения и прогноз? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1. Сывороточная болезнь. 2. Она возникает в результате введения иммунной (лечебной) сыворотки, приготовленной чаще всего путем иммунизации лошадей. В основе сывороточной болезни лежат взаимодействие антигена с антителом, которое происходит в кровяном русле с после дующим отложением иммунных комплекс в стенке кровеносных капилляров. После однократного введения сравнительно большой дозы сыворотки через 8—12 дней после инъекции, то есть и сроки, достаточные для выработки антител, возникает сывороточная болезнь. При той болезни возникают тканевые повреждения, вызванные иммунным комплексом антиген-антитело. Симптомы заболевания, указанные в условии задачи, могут исчезнуть через несколько дней после отмены препарата. В некоторых случаях заболевание протекает тяжело и может заканчиваться летальным исходом. ЗАДАНИЕ № 94 Врач инфекционного отделения для лечения ботулизма назначил больному Н. интенсивную комплексную терапию, куда входило внутривенное введение смеси антитоксической противоботулиновой сыворотки (15.000 ME типа А; 7500 ME типа В и 15.000 ME типа E). Лечение с введением сыворотки продолжалось на протяжении 3-х дней. Через 11 дней после начала заболевания в связи с ухудшением состояния больного врач вновь назначил дополнительное введение этой противоботулиновой сыворотки внутримышечно, в той же дозировке. После введения этой же сыворотки спустя 20 минут у больного появилась одышка, частый пульс, падение артериального давления, судороги, затем потеря сознания. После введения адреналина, кордиамина, супрастина, хлористого кальция больного удалось вывести из этого состояния. ЗАДАНИЯ 1. Как называется состояние, которое возникло у больного после повторного введения сыворотки? 2. К какому типу реакций вы его отнесете? 3. Какую ошибку допустила медицинская сестра, вводившая противоботулиновую сыворотку? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1. Анафилактический шок. 2. Гиперчувствительности немедленного типа. 3. Не проверила наличие состояния сенсибилизации к лошадиному белку, не поставила внутрикожную пробу с разведенной нормальной лошадиной сывороткой. ЗАДАНИЕ № 95 Больная К., 20 лет, была доставлена в отделение анестезиологии и реанимации в тяжелом состоянии, без сознания. От сопровождающих ее лиц было выяснено, что ее укусила оса, после чего у больной была однократная рвота и появились признаки нарушения дыхания, затрудненность выдоха. У больной, поступившей в клинику, лицо было бледным, с серо-синюшным в оттенком. Лицо отечно, особенно губы. Дыхание поверхностное, тихое, с еле уловимым присвистом. Кожа влажная и холодная. Кисть правой руки гиперемирована и отечна, а на месте укуса осы - красный волдырь. ЗАДАНИЯ 1. Как называется комплекс болезненных проявлений, развившихся после укуса осы? 2. К какому типу реакции по характеру тканевых повреждений можно её отнести? 3. Какие препараты необходимо применить для лечения больной? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1. Анафилактический шок 2. К гиперчувствительности немедленного типа. Гуморальные антитела, индуцируемые аллергеном, фиксируется на поверхности различных клеток (тучные клетки, базофилы, клетки гладких мышц), обусловливая тем самым сенсибилизация тканей. При повторном поступлении аллергена на поверхности вышеперечисленных клеток возникают комплексы антиген-антитело, вызывающие высвобождение из них ряда биологически активных веществ (гистамин, серотонин, брадикинин, действующая субстанция, ацетилхолин, простагландины, факторы проницаемости). В результате происходит бурная реакция типа анафилактического шока. 3. Адреналин, кордиамин, пипольфен, тонгинал, супрастин, аминофиллин. Задание №96 У больного через 10 дней после травмы появились симптомы заболевания: судорожные сокращения жевательной и мимической мускулатуры, и ему был введён лечебный препарат. У больного через несколько минут после введения препарата появилась одышка, частый пульс, упало артериальное давление, появилось затруднённое дыхание (симптомы анафилактического шока). ЗАДАНИЯ 1. Какое заболевание можно заподозрить у этого больного и какой лечебный препарат ему вводился? 2. Какое осложнённое осложнение развилось у больного после введения препарата? 3. В результате чего может развиться подобное осложнение после введения указанного вами препарата? 4. Какие мероприятия вы должны были провести для профилактики подобного осложнения? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1. У больного после травмы развился столбняк и ему для лечения вводилась противостолбнячная сыворотка. 2. Анафилактический шок-повышенная чувствительность немедленного типа на введение чужеродной сыворотки. 3. Такое осложнение могло развиться только при наличии у больного состояния сенсибилизацией к белкам лошадиной сыворотки. 4. Для предотвращения подобных осложнений перед введением сывороточных препаратов проверяется наличие состояние сенсибилизации. Для этих целей пациентам внутрикожно вводится 0,1 мл разведенной 1:100 нормальной лошадиной сыворотки. Наблюдает за реакцией в течение 20 минут. При отрицательной реакции противостолбнячная сыворотка с лечебной целью вводятся в больших дозах (100.000-200.000 МЕ), с учетом тяжести заболевания, внутримышечно и внутривенно. При положительной внутрикожной и пробе с лечебной целью сыворотку вводят под наркозом с особыми предосторожностями. Задание №97 Пострадавший в автомобильной аварии л. был доставлен в травматологическое отделение городской больницы. При обследовании был обнаружен открытый перелом обеих костей левой голени на границе верхней и средней трети с повреждением крупных сосудов. К в связи с массовой кровопотери и после первичной хирургической обработки раны, введение столбнячного анатоксина и 5000 МЕ противостолбнячной антитоксической сыворотки врач-травматолог назначил переливание 500 мл одногруппной крови. Определение группы крови и переливание её осуществляло медсестра. К во время гемотрансфузии и непосредственно После её окончания у больного возникла резкая слабость, головокружение, появился озноб, сильная боль за грудиной и в пояснице, тупая боль в эпигастральной области, тошнота, рвота, появился цианоз слизистых оболочек и признаки спазма периферических сосудов, тахикардия, снижение артериального давления, одышка, двигательное беспокойство. К медсестрам срочно вызвала врача из операционной, и он заподозрил переливание несовместимой крови по системе АВО. Врач диагностировал у пострадавшего гемотрансфузионный шок, развивавшиеся в результате переливания несовместимой крови у больного группа крови АIIRh+, а а ему перелили ВIIRh+. Флаконы донорской крови АIIRh+ и ВIIRh+, стояли рядом на столике. ЗАДАНИЯ 1. К какому типу реакции по механизму тканевых повреждений относятся осложнения на переливании несовместимой крови, возникшая у этого больного? 2. Каков механизм возникшей реакции? 3. Что можно рекомендовать для лечения возникшего у больного осложнения? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1. Возникшая у больного осложнения относятся к немедленным реакциям цитотоксического (цитолитического) типа. 2. Реакция этого типа обусловленная антигенами, связанными с клетками. Антитела, направленные против антигена, связанного с клеткой, дают цитотоксический или цитолитический эффект обычно с участием комплемента. Перелитые донорские эритроциты, несовместимые с кровью реципиента, при контакте вначале подвергаются склеиванию, а затем разрушению. Гемолиз эритроцитов донора в кровеносном русле реципиента является основной причиной развивающихся гемодинамических и метаболических расстройств, лежащих в основе гемолитического шока. 3.Для улучшения общей гемодинамики и процессов микроциркуляции следует вводить плазмозамещающие растворы, обладающие способностью улучшать реологические свойства крови: реополиглюкин, гемодез, 10% раствор сывороточного альбумина, раствор Рихтера или изотонический раствор хлорида натрия. Задание №98 На прием к врачу дерматологу обратилась девушка, 15 лет с жалобами на частое появление фурункулов (гнойников) на лице, шее и плечах. Болеет несколько месяцев. На лице, шее появляются 1-2 фурункула, скрываются, заживают и опять появляются новые точка больная принимала витаминотерапию, антибиотики, пользовалась местным лечением, изменила диету (исключалось употребления пищи, богатая углеводами). Положительного эффекта от проведенной терапии не отмечает. ЗАДАНИЯ 1. Какие микроорганизмы могут вызвать такое заболевание? 2.Составьте схему диагностики фурункулеза, которое поможет выделить и идентифицировать культуру возбудителя. 3. Какие лечебные препараты нужно назначить для специфической терапии (назовите их, дайте краткую характеристику и укажите схему применения) ? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1. Стафилококки. 2.1. Провести бактериологическое исследование гноя, полученного из скрывшегося фурункула. 2.2. Сделать посев на кровяной агар и ЖСА 2.3. Изучить выросшие колонии на кровяном агаре и ЖСА после 24 часов инкубации при 37 °С, обратив внимание на наличие зоны гемолиза на кровяном агаре и лецитоветиллазной реакции на ЖСА. 2.4. Отсев подозрительных колоний на скошенный МПА для выделения чистой культуры. 2. 5. Бактериоскопическое исследование культур, выросших на скошенном МПА, определение плазмокоагулирующей, ДНК-азной активности, способности ферментировать манит в анаэробных условиях. антибиотикам 2.6. Определение спектра чувствительности к антибиотикам. 3.1. Для специфической иммунотерапии назначают какой-либо из препаратов: стафилококковый антифагин, стафилококковую вакцину, отчисленный стафилококковый анатоксин, противостафилококковый человеческий иммуноглобулин. 3.2 Стафилококковый антифагин стерильный экстракт, получаемый из 10-12 культур штаммов и выделенных От больных с гнойничками поражениями кожи. К для получения антифагин густую взвесь агаровой культуры стафилококка прогревают при 100 °С в течение 1 часа и пропускают через бактериальные фильтры. В препарате содержится термолабильные стафилококковый антифагин, обладающий способностью стимулировать защитные реакции организма. К этой девушке можно назначить антифагин в виде ежедневных инъекций по схеме: 0,2; 0,3; 0,4; 0,5; 0,6; 0,7; 0,8; 0,9; 1мл препарата. Если появится терапевтический эффект, введения антифагин можно прекратить до окончания полного курса лечения. При рецидиве фурункулеза можно назначить повторный курс через 10-15 дней. 3.3. Очищенный, адсорбированный стафилококковый анатоксин-получают из нативного анатоксина путем осаждения его трихлоруксусной кислотой с дополнительной очисткой этиловым спиртом и последующей адсорбцией гидроокисью алюминия. При введении в организм стимулирует образование антител, способных нейтрализовать повреждающего действия стафилококкового токсина. Курс применения анатоксина состоит из 2-х инъекций по 0,5 мл с 30-35 дневным интервалом и ревакцинации. Ревакцинацию проводят той же дозой однократно через 3 месяца и повторно через 12 месяцев после второй прививки. 3.4. Стафилококковая вакцина-зверь стафилококков в физиологическом растворе хлорида натрия, инактивированных нагревании. При вакцинации повышаются защитные силы организма В результате активации фагоцитарный свойств лейкоцитов и клеток МФС, я накопление комплимент фиксирующих веществ агглютининов и т.п. курсы лечения вакциной состоит из из 10-12 инъекций, в дозе 0,05 до 0,1 мл, которые производят от 3-4 дневными интервалами подкожно и внутримышечно. 3.5. Противостафилококковый человеческий иммуноглобулин-является гамма-тиреоглобулиновой фракцией сыворотки крови, содержащей повышенные концентрации стафилококкового анатоксина. Исходным материалом для приготовления служат жидкая часть крови людей, иммунизированных стафилококковым адсорбированным анатоксином. При ведении создаётся пассивный иммунитет, который сохраняется 3-4 недели. Препарат вводят внутримышечно. Курс лечения включает от 3 до 5 инъекций ежедневно или через день в зависимости от тяжести течения заболевания и достигаемого терапевтического эффекта. Задание №99 Хирургическое отделение во время ургентного дежурства доставлен больной К., 32 лет с диагнозом: "острый аппендицит?" Под местной анестезией удалённый флегмонозный отросток, на рану наложено несколько швов и оставлен дренаж. На третьи сутки после операции по ходу шва появилась гиперемия и инфильтрация, из раны при легком надавливании выделяется гной. Гнойное отделяемое равной отправлена в бактериологическую лабораторию, из него приготовленной маски, окрашенные по Граму. При микроскопии обнаружено большое количество грамположительных кокков, расположенных в виде неправильных скоплений. ЗАДАНИЯ 1. Назовите микроорганизмы, обнаруженные бактериологом в препарате из гноя. 2. Составьте схему исследований, которые должны провести в баклаборатории, чтобы выяснить, какие микроорганизмы вызвали нагноение послеоперационной раны. 3. Включите в комплекс лечебных мероприятий препараты, обеспечивающие специфическую терапию. ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1. Стафилококки 2.1. После бактериоскопического исследования необходимо произвести посев на чашки с кровяным агаром и чашки с ЖСА, на котором лучше растут. 2.2. После 18-24 часов инкубации изучают колонии. Для дальнейшего исследования отбирают круглые, слегка возвышающиеся с ровными краями пигментированные колонии. На кровяном агаре изучают образование зоны гемолиза на ЖСА-появление вокруг колонии зоны помутнения с радужным венчиком по периферии (т.е. лецитоветиллазная или желточная) реакция. 2.3. Дальнейшее исследование направлено на выделение чистой культуры стафилококка, для чего колонии пересевают на скошенный агар. 2.4. У выделенных культур изучают способность коагулировать цитратную плазму, определяют ДНКазную активность и ферментации маннита в анаэробных условиях. 2.5. Изучают чувствительность культуры стафилококка к антибиотикам и при необходимости определяют фаговар. 3. Для специфической терапии поэтому больному можно назначить какой-либо из препаратов: антистафилококковую плазму, противостафилококковый человеческий иммуноглобулин; для местного лечения - жидкий стафилококковый бактериофаг. Задание №100 У больного Н., 48 лет, на среднем пальце правой руки появилось воспаление околоногтевого ложа; покраснения, припухлость, резкая болезненность. Связи с этим начала лечение домашними средствами. К 5-му дню воспаление распространилась на кисть, повысилась температура до 39,5°. Обратился в хирургический кабинет. После осмотра хирургом был срочно госпитализирован в хирургическое отделение с диагнозом: "Панариций среднего пальца, флегмона правой кисти. Сепсис?" ЗАДАНИЯ 1. Какой исследуемый материал необходимо направить в баклабораторию для установления вида микроорганизма, вызвавшего заболевание? 2. Составьте схему исследования, которая позволит вам подтвердить или исключить диагноз "сепсис"? 3. Назовите препараты, необходимые для лечения больного. ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1. Кровь из вены, а после вскрытия панариция - гной. 2.1. Для этой цели используется бактериологический метод. 2.2. Кровь из вены в количестве 5 мл засевают сахарный бульон и выдерживают в термостате при 37 градусах в течение 18-24 часов стафилококки вызывают равномерное помутнение среды. 2.3. Из гемокультуры готовят мазки затем пересевают её на скошенный мглы в чашку с кровяным агаром для выявления гемолитических свойств. 2.4. Следующим этапом является идентификация выделенной культуры. Выросшую культуру подвергают бактериоскопическому исследованию и проверяют способность коагулировать цитратную плазму крови кролика, вырабатывать ДНК-азу, лецитазу, расщеплять манит с образованием кислоты в анаэробных условиях. 2.5. Выделение чистой культуры стафилококка из крови этого больного является доказательством септического процесса. 3.1. Антибиотики широкого спектра действия после излучения антибиотикограммы - коагуляция антибиотикотерапии с учетом чувствительности выделенной культуры к антибиотикам. 3.2. Сульфаниламидные препараты. 3.3. Мази растворы для местного лечения 3.4. Витаминотерапия 3.5. Иммунная терапия при введении антистафилококковые плазмы или противостафилококковый иммуноглобулина по схеме. (ред.) Задание 101 В мае месяце по плану проводилось обследование родовопомогательных учреждений с целью выявления носителей патогенных стафилококков точка из слизистой носа только у акушерки Д. Родильного отделения Горбольницы № 5 в мае стафилококк, который обладал ДНК-азной активностью, коагулировал плазму, ферментированный маннит в анаэробных условиях. При фаготипировании лизировался 79 и 80 стафилококковым фагом. Акушерка продолжала работать в том же родильном отделении. В сентябре текущего года при повторном плановом обследовании персонала на носительство из слизистой носа акушерки Д. и санитарки С. при посеве воздуха родильного зала этого же отделения выделенные штаммы стафилококка, обладающие такими же свойствами как и культура стафилококка, высеченная в мае из слизистой носа акушерки Д. Проведено фаготипирование штаммов стафилококка, выделенных в августе. Штаммы, выделенные от акушерки, и при бактериологическом исследовании воздуха лизировались 79 и 80 стафилококковым фагом, а от санитарки С. - 55 и 71 стафилококковым фагам. ЗАДАНИЯ 1. Какой можно сделать вывод, проанализировав сложившуюся ситуацию в родильном отделении этой горбольницы? 2. Для чего в баклаборатории у выделенных культур изучали способность коагулировать плазму, вырабатывать ДНК-азу и ферментировать маннит в анаэробных условиях. 3. Какие данные, изложенные в тексте условия, позволили вам оценить сложившуюся ситуацию в родильном доме? 4. Какие мероприятия необходимо провести в этом родильном доме? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1.1. В родильном отделении выявлен бактерионоситель патогенных стафилококков - акушерка. 1.2. Носительство резидентное - стафилококки выделялись у акушерки длительное время(от мая по сентябрь. 1.3. В сентябре выявлен новый бактерионоситель патогенных стафилококков - санитарка. 1.4. В родильном отделении возможно распространение госпитальной инфекции - от акушерки(штаммы стафилококков, выделенные от акушерки и из воздуха, имеют одинаковый фаготип - 79,80) 2. С целью определения патогенности у выделенных культур стафилококков. 3. Данные, полученные из баклаборатории, о принадлежности культур к патогенным стафилококкам и результаты фаготипирования. 4.1. Санацию бактерионосителей патогенных стафилококков. 4.2. Текущую и заключительную дезинфекцию. Задание №102 В хирургическом отделении участились случаи нагноения послеоперационных ран. При проведении микробиологических исследований в баклаборатории причины этих осложнений оказалось распространение в хирургическом отделении и госпитальной инфекции. К так, у больного А из отделяемого послеоперационной раны был вынесен патогенный стафилококк, фаготип 55. У операционной сестры из зева высеян патогенный стафилококк, фаготип 80, у младшей сестры послеоперационной палаты- также патогенный стафилококк, фаготип 55. ЗАДАНИЯ 1. Укажите, кто явился источником вспышки госпитальной инфекции? 2. На основании каких признаков выделенные культуры идентифицированы как патогенные стафилококки? 3. Какие исследования проведены в баклаборатории, позволившие установить источник инфекции? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1. Источником данной вспышки являются младшая сестра послеоперационной палаты, так как фаготип патогенных стафилококков выделенных от неё и больных, одинаков - 55. 2. На основании изучения у выделенных культуры стафилококка в способности коагулировать ацетатную плазму, демонизировать эритроциты, выделять лецитиназу, ДНК-азу, ферментировать маннит с образованием кислоты в анаэробных условиях. 3. Фаготипирование набором типовых стафилококковых бактериофагов. Задание № 103 В хирургическом отделении Горбольницы номер 2 появились случаи нагноения послеоперационных ран. Бактериологические исследования гноя, проведённые в баклаборатории этой больнице, показали, что у всех больных выделен ST aureus с признаками патогенности. С целью выявления причин этого осложнения в бактериологическую лабораторию отправлен остались из носа и зева, смывы с рук оперирующих хирургов, операционных медсестёр, младших медсестёр операционного блока. Кроме того, проведенных посев воздуха операционной палаты аппаратом Кротова и проверено стерильность операционного материала. Из зева хирурга н. И операционной сестры к выделен ST aureus срок младшей медсестры операционного блока- st epidermidis, из воздуха выделены St saprophyticus. ЗАДАНИЯ 1. Проведите исследование, которые позволят вам установить источник инфицирования больных. 2. На основании каких данных проводится оценка результатов указанного вами исследования? 3. Приведите пример исходя из условия Задачи о том, что источником этого осложнения является хирург н. 4. К какой группе инфекций можно отнести осложнения, возникшие в данном хирургическом отделении. ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1.1. После выделения культуры стафилококка и идентификации необходимо провести фаготипирование. Погоди пируэт штаммы ST aureus от больных, хирурга Н. и операционной сестры К. 1.2. Для этих целей используют международный набор стафилококковых бактериофагов, состоящий из 22 флагов, разделённых литическому устройству на 4 группы. 1.3. Чашки Петри заливают агаром и подсушивают в термостате. 1.4. На поверхности агара наливает 4-часовую бульонной культуры стафилококка, подлежащую фаготипированию. 1.5. Избыток культуры удаляют, чашки подслушивают. 1.6. В одной чашке наносят сетку, состоящую из квадратов с обозначениями типовых стафилококковых фагов из Международной коллекции. 1.7 на подсушенные поверхность агара наносят каплю соответствующего бактериофага-по капле в зону каждого квадрата. 1.8. После подсыхания капель инкубация в термостате 12-18 часов 37° 2.1. Литическое действие фага учитывают по появлению прозрачных (негативных) пятен (колоний фага) в каком-либо квадрате 2.2. Положительный результат позволяет отнести исследуемые бактерии к соответствующему фаговару. 3. Если источником осложнения в хирургическом отделении является хирург N., то выделенных стафилококков из всего этого хирурга и гноя послеоперационных ран должен выделяться ST aureus одинакового фаготипа 4. К внутрибольничной инфекции Задание №104 В детском саду после употребления в пищу творога у детей возникли заболевания, характеризующееся острым началом, болями, тошнотой, рвотой, поносом. К при бактериоскопии Мазков из творога и рвотных масс, окрашенных по граму, обнаружены грамположительные кокки. ЗАДАНИЯ 1. Ваш предполагаемый диагноз? 2. Какой материал будете брать для исследования? 3. Какие микробиологические исследования необходимо провести для подтверждения диагноза? 4. Перечислите этапы бактериологического исследования, которые необходимо провести в этом случае? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1. Пищевая токсикоинфекция. 2.1. Творог. 2.2. Рвотные массы. 2.3. Промывные воды желудка. 2.4. Испражнения. 3. Бактериологический. 4.1. 1-й день - посев материала на 10% мольно-солевой агар, 3-5% кровяной агар, желточно-солевой агар. 4.2. 2-й день - подсчет числа колоний стафилококка точка посев на скошенный агар для выделения чистой культуры. 4.3. 3-й день - проверка чистоты культуры. Определение видовой принадлежности выделенных штаммов стафилококка по плазмокоагулирующий ДНК-азной и лизоциназной активности 4.4 4-й день - учёт результатов определяемой принадлежности и чувствительности к антибиотикам точка учёта результатов фаготипирование. Окончательный ответ. Задание №105 В инфекционное отделение поступил или члены семьи к диагнозом "острый гастроэнтерит?". Из анамнеза выяснено, что все они ели бисквитный торт с масляным кремом только торт купили в субботу, хранили в комнате, а в воскресенье за обедом съели. Симптомы заболевания: рвота боли в животе, жидкий стул, выражена интоксикация. Баклабораторию отправлен исследуемый материал: рвотные массы, промывные воды желудка и остатки торта. При посеве на питательные среды из всех образцов доставленного материала выделены стафилококки. ЗАДАНИЯ 1. На Какие питательные среды необходимо было посеять доставленый в лабораторию материал? 2. Какие свойства нужно изучить у выделенных культур? 3. Какие ещё надо провести исследование, для того, чтобы доказать, что эти стафилококки способны вызвать острый гастроэнтерит? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1. Исследуемый материал нужно посеять на питательный бульон, содержащий 10% Глюкозы и кровяной агар, содержащий 6-7% хлорида натрия. Посевы помещают в термостат при 37° 2. У выделенных при пищевых отравлениях стафилококков изучают способность образовывать пигмент, рожать желатин, вызывать гемолиз и коагулировать плазму 3.1. Пищевые отравления вызывают стафилококки, способные продуцировать энтеротоксин. 3.2. Целью определения продукции энтеротоксина выделенные штаммы стафилококка засевают на специальную полужидкую среду, содержащую пептон, однозамещенный фосфорно-кислый натрий и калий, хлорида натрия, хлорид кальция, хлорид магния с добавлением куриного желтка. 3.3. Посевы инкубируют 3-4 суток при 37 в атмосфере CO2, а затем фильтруют через мембранные фильтры. 3.4. Полученный фильтрат 10-15 мл смешивают с равным количеством тёплого молока и скармливают котятам (1-2 месяца) вводят им в желудок через зонд. 3.5. При наличии энтеротоксины через 30-60 минут у котят возникает рвота-основной признак отравления, а через 2-3 часа появляется понос, Возможно даже летальный исход. 3.6. В настоящее время способность культуры вырабатывать энтеротоксин определяют в опыте in vitro с помощью реакции преципитации в геле. ЗАДАНИЕ № 106 В бактериологическую лабораторию поступил материал полученный у Саши К.,5 лет, госпитализированного в инфекционное отделение с диагнозом "Лакунарная ангина? Скарлатина?> Ребенок посещает детский сад № 20 «Солнышко», заболел 2 дня назад. В этом детском саду 10 дней назад установлен карантин по скарлатине. В течение этих 10 дней еще двум детям педиатр поставил диагноз "Скарлатина" на основании типичных клинических симптомов и дети госпитализированы в инфекционное отделение. задания 1.Укажите те основные клинические симптомы которые позволили врачу-педиатру поставить двум детям диагноз скарлатина». 1.1. Острое начало заболевания повышение температуры, симптомы интоксикации( головная боль, рвота, вялость) появление ангины и мелкоточечной розовой сыпи. Сыпь располагается на шее, туловище, конечностях с преимущественной локализацией на сгибательных поверхностях и в складках кожи 1.2. При осмотре больного ребенка в первые дни болезни обращают внимание яркие щеки при бледном носогубном треугольнике , сухие кожа и слизистые блестящие глаза . Обязательным симптомом скарлатины является ангина( катаральная, фолликулярная, лакунарная) с яркой гиперемией дужек и язычка. 1.3. Язык обложен, затем становится малиновым(очищается). Увеличины передне-шейные лимфатические узлы. 2. Составьте схему исследования , которое нужно провести в бактериологической лаборатории с целью дигностики заболевания у Саши К. и двух других детей 2.1.Лучшие результаты можно получить, проводя посев у постели больного непосредственно в пробирку с полужидким агаром с 2-3 каплями дефибринированной крови на дне. 2.2. В данном случае гной, взятый тампоном из миндалин засевают в чашки Петри с кровяным агаром (материал не втирать, а штрихом равномерно распределить по поверхности агара). 2.3. Через 24 часа после инкубации посевов в термостате при 37°С изучают колонии. 2.4. На кровяных средах стрептококки образуют мелкие, полупрозрачные колонии, сероватые или бесцветные. Колонии не врастают в агар и хорошо снимаются петлей. Вокруг колонин образуются различной величины зоны гемолиза. 2.5. Характерные колонии пересевают на жидкую питательную среду без добавления крови и вновь выращивают 24 часа. 2.6. Мазки из выросших культур окрашивают по Граму и микроскопируют. Отмечают расположение грамположительных кокков в виде цепочек. 2.7. В некоторых случаях можно изучить биохимические свойства у выделенных культур. но более целесообразно проводить определение серологической группы и типа выделенного стрептококка. это позволяет судить об их патогенности для человека. 2.8. Группы стрептококка (по Ленефильд) классифицируются по налачию полисахаридного антигена для выявления которого используют реакцию преципитации с групповыми сыворотками (А, В, С, Д и т. д.). 2.9. Серовары стрептококков (по Гриффитсу) определяют с помощью реакции агглютинации на стекле с типовыми агглютинирующими сыворотками. 3. Напишите ответ из бак-лаборатории для лечащего врача Саши К. 3. В инфекционное отделение Саша К., 5 лет. Диагноз: "Лакунарная ангина? Скарлатина?> из зева выделен в-гемолитический стрептококк (стрептококк гр. A) 20.05.87 г. Вр. Соколов 4. Как мог заразиться Саша К. в этом детском саду? 4. От больных детей воздушно-капельным путем. 5. Когда заболевшие дети после выздоровления смогут посещать детский сад? 5. Через 12 дней после полного клинического выздоровления. ЗАДАНИЕ № 107 У больного С. с подозрением на крупозную пневмонию в бактериологической лаборатории при изучении окрашенных мазков обнаружены грамположительные диплококки, слегка вытянутые, со слегка заостренными противоположными концами, окружены нежной капсулой. I. Из какого исследуемого материала готовились эти мазки? 1.1. Мокрота. 1.2. Кровь. 2. Какой метод окраски использован в данном случае? 2. Метод Грама. 3. Какой метод диагностики использован в данном случае и можно ли на его основе определить возбудителя заболевания? 3.1. Микроскопический. эталоны ответов 3.2. Если наследовалась кровь, то можно. 3.3. Если изучалась только мокрота - нельзя, так как указанные микроорганизмы можно обнаружить в мокроте и здоровых лиц. 4 Какие микроорганизмы обнаружены в мокроте и какие особые признаки позволили вам их опознать? 4. 1. Str. pneumoniae. 4.2. Грамположительные, слегка вытянутые диплококки и наличие капсулы 5. Какой метод днагностики можно использовать для проведения окончательной диагностики? 5. Бактериологический. 6. Составьте схему этого метода 6.1. Растереть мокроту и ступке с питательным бульоном, добавив стерильный кварцевый песок или 10% раствор трицепса (для лучшей гомогенизации мокроты). 6.2. Произвести посев на специальную питательную среду (кровяной агар, приготовленный на основе гидролизата бычьих сердец с добавлением экстракта пекарских дрожжей). 6.3. Инкубация в термостате 18-24 часа в атмосфере CO2 6.4. Изучение колоний - в случае обнаружения мелких или точечных колоний сероватого цвета, блестящих, с зоной 1-гемолиза, приготовить мазки, окрасить по Граму, 6.5. Отсеять подозрительные колонии на питательную среду для получения чистой культуры. Инкубация в термостате 18 24 часа (в атмосфере CO2). 6.6. Микроскопическое изучение чистоты выросшей культуры (приготовление мазков, окраска по Граму). 6.7. Изучение чувствительности к желчи, оптохину, ферментации салицина, сорбита, инулина. 6.8. Агглютинация на стекле групповыми типовыми пневмококковыми сыворотками. 7 Какие ферментативные свойства позволяют вам отнести культуру к . Str. pneumoniae. 7. Чувствительность к желчи, оптохину, ферментация инулина до кислоты. ЗАДАНИЕ № 108 В бактериологическую лабораторию доставлена мокрота больного, который госпитализирован в отделение с диагнозом «крупозная пневмония». Мокрота слизисто-гнойного характера, цвет «ржавый». 1. Проведите микроскопическую диагностику данного заболевания 2. 1.1. Приготовить мазки на мокроты. 3. 1.2. Высушить на воздухе. 4. 1.3. Фиксация в пламени горелки. 5. 1.4. Окраска по Граму Сниеву. 2. Укажите подробно этапы выбранного Вами метода окраски. На фиксированный мазок накладывается бумажка Синева (фильтровальная бумажка, импрегнированная генцианвиолетом), и она смачивается несколькими каплями дистиллированной воды, экспозиция окраски 1- 2 мин. 2.2. Затем на препарат наносят раствор Люголя и через 1- 2 мин. его сливают. 2.3. Обесцвечивают спиртом 30 сек. 2.4. Промывают препарат водой. 2.5. Окрашивают разведенным фуксином Циля 2 мин. , промывают, высушивают. 3. Опишите микроскопическую картину препарата в случае обнаружения Str. Pneumoniae с подробной морфологической характеристикой обнаруженных микроорганизмов. 3.1. Грамположительные парные кокки средних размеров, слегка заостренные противоположные концы. 3.2. Наличие капсулы вокруг стрептококков. 4 Какое заключение вы можете дать в терапевтическое отделение на основании изучения микроскопической картины мокроты этого больного. 4, В мокроте больного обнаружены Str. pneumoniae. 5 Укажите все другие методы микробиологической диагностики которые можно использовать для подтверждения пневмококковой этиологии заболевания. 5. Бактериологический, биологический, серологический, феномен Нейфельда, люминесцентносерологический (прямой и непрямой). ЗАДАНИЕ № 109 В боксовом отделении инфекционной больницы на лечении находится Дима В., 5 лет, с днатиозом сменингококкомый менингит». В это отделение мальчик был доставлен в тяжелом со- стоянии 20 дней назад. Своевременная диагностика, интенсивная комплексная терапия оказали свои результаты: Дима В. начал выздоравливать. Мальчик до болезни посещал детский сад «Чебурашка» № 20. Родители Димы спросили у лечащего врача о том, когда их сын будет выписан из стационара и сможет посещать детский сад. В этом детском саду установлен карантин в связи с заболеванием этого мальчика. задания 1. Что ответил врач родителям Димы на вопрос о сроках выписки из стационара и разрешении посещать детский сад? 1.1. Дима будет выписан из стационара после полного выздоровления. 1.2 Вопрос о выписке и разрешении посещать детский сад будет решен положительно после двукратного отрицательного результата бактериологического обследования слизи из носоглотки. 2. Почему в детском саду установлен карантин? 2. Менингококковый менингит - инфекционное заболевание, способное к эпидемическому распространению в детских коллективах воздушно-капельным путем. 3. Какие мероприятия проведены в этом детском саду после госпитализации Димы в инфекционное отделение с диагнозом менингокковый менингит"? 3.1 Детский сад, который посещал Дима, считается очагом менингококкового менингита. 3.2. В этом очаге проводится эпидемиологическое обследование которое включает активное выявление стертых форм менингококковой инфекции ( острые азофарингиты, легкие случаи менингококкцемии) бактерионосителей. С этой целью проводится ежедневный осмотр носоглотки и кожи детей, персонала, термометрия в течении 10 дней 2 раза в сутки. Для выявления носительства менингококков проводят бактериологические исследования слизи носоглотки, взятой тампонами у детей и персонала детского сада. Выявленные носители из персонала при выявленные носители из персонала возможности переводятся на работу в коллективы, не связанные с обслуживанием детей, и подвергаются санации левомицетином в течение 4-х дней. 3.3. Детям, находившимся в контакте с Димой, можно вводить плацентарный гаммаглобулин в дозе 3 мл в наиболее ранние сроки после госпитализации больного. 3.4. В детском саду должна проводиться ежедневная уборка помещения хлорсодержащими растворами и частые проветривания помещения. 4. Проводились ли дома, где живет Дима, какие-либо мероприятия, способствующие прекращению распространения инфекции? 4. Да, проводились, аналогичные тем, которые были проведены в детском саду. ЗАДАНИЕ № 110 Вова К., 4 года, заболел остро. Доставлен в тяжелом состоянии в инфекционное отделение. После осмотра инфекционистом был поставлен диагноз: «цереброспинальный менингит?». Детский сад ребенок не посещает. В санпропускнике из носоглотки взята на исследование слизи и отправлена в баклабораторию для проведения исследования, В баклаборатории из слизи, взятой из носоглотки, приготовили мазки, окрасили по Граму и сообщили в инфекционное отделение куда госпитализирован Вова, что в мазках обнаружены грамотрицательные диплококки бобовидной формы. Задания Можно ли на основании этих данных утверждать, что возбудителем заболевания у Вовы является менингококк? Свой ответ обоснуйте 1. Нет, нельзя, т. к. носоглотке находятся непатогенные нейссерии Как представитель резидентной микрофлоры. 2 Если нужно проведите дополнительные исследования которые позволят подтвердить или отвергнуть предварительный диагноз. 2.1. Необходимо провести диагностическую спинномозговую пункцию. 2.2. Полученную жидкость подвергают центрифугированню. 2.3. Из осадка приготовить мазок. После фиксации окрасить 1% водным раствором метиленового синего. 2.4. Изучить микроскопическую картину мазка, 2.5. В случае обнаружения бобовидной формы диплококков, интенсивно окрашенных, расположенных внутри и вне лейкоцитов, можно поставить предварительный диагноз: «менингококковый менингит». 3 Какие лечебные препараты нужно назначить Вове К.? 3. Антибиотики - пенициллин, окситетрациклин, рифампицин, сульфаниламидные препараты. 4Почему в условии задачи отмечено, что Вова К детский сад не посещает? 4. Менингококковый цереброспинальный менингит - острое инфекционное заболевание, которое передается воздушно-капельным путем и может вызвать эпидемические вспышки в детских коллективах. Если в детском коллективе зарегистрирован случай такого заболевания, необходимо срочно проводить противоэпидемические мероприятия. Если ребенок не посещает детский сад, противоэпидемические мероприятия проводятся в квартире или доме, где проживает заболевший ребенок. ЗАДАНИЕ № 111 В детское инфекционное отделение доставлен ребенок 5 лет. Состояние тяжелое. Температура 39,8°, сознание отсутствует, Пульс частый, I30 ударов в 1 минуту. При осмотре обращает внимание то, что ребенок лежит на боку с запрокинутой назад головой и приведенными к животу коленями. Лицо мальчика гиперемирована. Отмечается ригидность мышц шеи. Учитывая клиническую картину, врач сделал спинномозговую пункцию. Получена мутная спинномозговая жидкость, которая вытекала струей. задания 1. Какие методы исследования необходимо использовать для подтверждения диагноза? 1.1. Бактериоскопический метод. 1.2. Бактериологический метод. 2. Укажите этапы бактериоскопической диагностики. 2.1. Бактериоскопический метод. 2.2. Полученная после спинномозговой пункции жидкость центрифугируется. 2.3. Из осадка приготовить мазок. 2.4. Окраска после фиксации водным раствором метиленового синего. 2.5. Окраска Граму сильно травмирует форменные элементы, обуславливая большое количество артефактов, и на этом этапе исследования не рекомендуется. 3 Опишите микроскопическую картину мазка полученного от этого больного? 3, Прямая микроскопия окрашенного мазка спинномозговой жидкости в части случаев позволяет установить наличие менингококков. Если в мазках выявлены диплококки, интенсивно окрашенные метиленовым синим, бобовидной формы, расположенные как внутри, так и вне цитоплазмы лейкоцитов, можно говорить о наличии в исследуемом материале (спинномозговой жидкости) менингококков. 4 Назовите реакции экспресс-диагностики которые можно применить для диагностики в данном случае? 4Экспресс-диагностика осуществляется с помощью реакции преципитации в геле встречного иммуноэлектрофореза с групповыми преципитирующими антисыворотками или радиоиммунного метода. 4.2. Экспресс-диагностика основана на обнаружении в спинномозговой жидкости специфического антигена, 5. Какие питательные среды Вы возьмете для посева исследуемого материала? 5. Для выделения менингококков из исследуемого материала можно использовать полужидкий сывороточный агар (среда накопления); 2% сывороточный агар и элективную среду с ристомицином. ЗАДАНИЕ #112 В детском саду #11 «3вездочка» проводилось обследовани детей и персонала с целью выявления стертых форм менингококковой инфекции и менингококкового носительства, т. к. сообщили из санэпидстанции, что Вова К., 4 года и Лена С., 5 лет находятся в боксированном отделении детской городско инфекционной больницы с диагнозом «менингококковый менингит». Эти дети неделю не посещали детский сад по болезни. 1.Какой исследуемый материал взят у детей и персонала? 1. Слизь из носоглотки, взятая натощак или через 3-1 часа после еды. 2.Какие скрытые формы менингококковой инфекции могут быть у детей и как их можно выявить? 2.1. Острый назофарннгит и легкне формы ме- нингококкцемии. 2.2. Необходимо проводить ежедневный осмотр носоглотки для выявления острого воспалительного процесса. 2.3. Внимательно осматривать кожу и констатировать неясных по характеру высыпаний. 2.4 Проводить термометрию в течение 10 дней 2 раза в сутки . 3. Выберите метод диагностики и составьте схему, который необходимо использовать при обследовании носительство меннигококков детей и персонала этого детского коллектива. 3.1. Бактериологический. 3.2. Слизь из носоглотки сразу после доставки втирают в поверхность сывороточного агара и сывороточного агара с ристомицином. Нейссерии менигита малочувствительны к этому антибиотику и их рост на этой среде не подавляется. Через 24 часа на этой элективной вырастают преимущественно представители рода нейссерий. 3.3. Изучение роста колоний на указанных средах . На сывороточной среде колонии менингококка мелкие (0,5-1мм)слегка выпуклые , бесцветные ,нежные ,вязкой консистенции, полупрозрачные ,голубоватые в проходящем свете с ровным краем и гладкой поверхностью.На среде с ристомицином - почти прозрачные или окрашены в бледно-голубой цвет в следствие разложения имеющейся в среде мальтозы и изменения индикатора водного голубого. Колонии других нейссерий (не патогенных) бесцветны, т. к мальтозы не разлагают. 2.4. Идентификация выделенной чистой куль-туры прозодится на основании морфологических культуральных свойств, по оксидазной активности (колонии нейecсерий розовеют, а затем чернеют при действии на них 1% солянокислого парадиэтилфенилендиамина ), по способности ферментировать глюкозу и мальтозу с образованием кислоты и отсутствием роста на простых средах. 2.5. Для идентификации можно также использовать реакцию агглютинации с менингококкоными сыворотками. ЗАДАНИЕ # 113 У больного из гноя уретры приготовлен мазок и окрашен по Граму. При микроскопии типичные гонококки не обнаружены. Посев на среду Бейли дал рост различных колоний: одни росли в виде прозрачных, как капли росы ,колоний с ровными краями; другие - не прозрачные,прозрачные , блестящие ,кремового цвета ,тоже с ровными краями. При микроскопии мазков, приготовленных из прозрачных колоний, обнаружены грамотрицательные кокки. Грамположительные кокки обнаружены в мазках из колоний кремового цвета. ЗАДАНИЯ 1. Какие микроорганизмы могли вызвать заболевание ? 1.Заболевание могли вызвать оба вида микроорганизмов. ЗАДАНИЕ 2 Hа oсновании каких признаков можно провести дифференцировку выделенных культур? 2. Прежде чем проводить дифференциальную диагностику, необходимо выделить чистую культуру обоих видов микроорганизмов. Культуры грамотрицательных кокков нужно идентифицировать на основании внешнего вида бактериоскопии мазков, приготовленных из этой чистой культуры, реакции агглютинации с гонококковой сывороткой и ферментацни глюкозы. Чистые культуры грамположительных кокков нужно идентифицировать на основании морфологии, способности коагулировать плазму, обладать гемолитической, лецитиназной, протеолитической и ДНК-азной aктивностью; расщеплять маннит в ана- эробных условиях.Кроме того колонии гонококков в смешанных культурах можно отличить от колоний других видов микроорганизмов ,используя оксидазный тест 1% раствором парафенилдиамина обработать колонии микроорганизмов,выросших на плотной питательной среде .Колонии гонококков через 3-4 минуты становятся черными ,колонии других видов микроорганизмов остаются без изменений ЗАДАНИЕ# 114 На прием к педиатру мать привела четырехлетнюю дочь. Co слов матери, ребенок в течение недели жалуется на сильные рези перед началом и во время мочеиспускания. При осмотре отмечается обильное отделяемое из половой щели. На больших половых губах местами гнойные корки. Врач поставил днагноз «гонорея». 1 Какие исследования необходимо провести для подтверждения днагноза? 1.В данном случае необходимо исследовать гнойное отделяемое из половой щели, осадок мочи после центрифугирования. Методы исследования: бактериоскопический, бактериологический . Следует отметить, что обследовать необходимо всех членов семьи, используя не только бактериоскопический и бактериологический методы ,но и серологический (РСК) 2.Как могло произойти заражение ребенка? 2.Девочка могла заразиться гонореей от кого-либо из членов семьи через предметы личной гигиены и обихода (губки , полотенца,простыни) Задание# 115 У больного С. через 4 дня после полового сношения с незнакомой женщиной появились гнойные выделения из уретры. Па- циент жалуется на сильные рези перед началом и во время мочеиспускания. Отмечастся резкая гиперемия губок уретры, обильные желтовато-зеленоватые гнойные выделения из мочеиспускательного канала. 1 . Какие микроорганизмы могли вызвать данное заболевание? 1. Учитывая клиническую картину и анамнез больного С. можно поставить предварительный диагноз "острая гонорея" 2.Какие исследуемые материалы и дополнительные исследования необходимо провести для уточнения диагноза? 2.Для исследования нужно использовать гнойное отделяемое уретры . Из отделяемого уретры приготовить мазки,окрасить по Граму и метиленовым синим .Окраска по Граму имеет основное дифференциальнодиагностическое значение для распознавания гонококка и является обязательным методом.Следует обращать особое внимание на правильное обесцвечивание препарата . 3.На основании каких признаков микроскопической картины можно подтвердить определяемый диагноз ? 3.Микроскопическая картина: в ответе, даваемом лабораторией, отмечают наличие гнойных и эпителиальных клеток ,слизь ,флору. Гонококки при остром процессе большей частью расположены внутри и вне лейкоцитов грамотрицательные, чаще располагаются парами,имеют слегка овальную форму . Гонококки, находящиеся на эпителиальных клетках нередко имеют характерное расположение правильными рядами . Ни один из признаков гонококка не является абсолютно постоянным. Диагноз можно ставить только по их совокупности. 116 Женщина обратилась к врачу-гинекологу с жалобами на бесплодие после перенесённого воспаления придатков. 1. Какие методы диагностики позволят исключить или подтвердить хроническую гонококковую инфекцию? Бактериологическое исследование соскоба или слизи слизистой оболочки шейки матки, секрета бартолиниевых желез.Серологическое исследование крови в РСК Борде-Жангу. 2. Составьте схему диагностики, которая позволит выделять нейссерии из патологического материала, полученного у этой больной. Перед взятием материала для посева необходимо на 1-2 дня исключить применение местных дезинфицирующих веществ и прием антибиотиков. Снять рекомендуется на МПА, приготовленном из мяса кролика, с добавлением асцитической жидкости или среду Бейли из бычьих сердец и тоже лучше с асцитической жидкостью.Колонии гонококков вырастают через 24 часа инкубации в термостате при 37°С. Рост в виде прозрачных, как капли росы, колоний с ровными краями и гладкой блестящей поверхностью. При бактериоскопическом исследовании мазков, приготовленных из подозрительных колоний, гонококки примерно одинаковой величины, грамотрицательные.В посевах сделанных от больных, леченных стрептоцидом, сульфидином или пенициллином, иногда обнаруживаются и грамположительные гонококки. При дальнейших пересевах получается сплошь грамотрицательная культура. Чистую культуру выделяют на аналогичных средах, разлитых в пробирки. Выросшую чистую культуру центрифугируют на основании внешнего вида, бактериоскопии мазков, приготовленных из этой культуры, реакции агглютинации и сбраживания сахаров (глюкозу с образование кислоты). Для отличия гонококка от других микроорганизмов в смешанных культурах применяют реакцию на оксидазу- нанесение на колонии 1% раствора парафенилендиамина.Гонококковые колонии через 3-4 минуты становятся черными, колонии других микроорганизмов остаются без изменений. 117 У пострадавшего в дорожно-транспортном происшествии было повреждено бедро. Рана бедра глубокая, с попавшими в нее обрывками одежды и частицами почвы. Спустя 2 часа после травмы проведена первичная хирургическая обработка раны и наложены швы. Через два дня состояние больного резко ухудшилось, бедро резко увеличилось в объеме, кожа бледная, блестящая, мышечная ткань(после снятия швов) имеет вид вареного мяса, отделяемое раны зловонное, пенистое, при пальпации кожи вокруг раны ощущается крепитация. 1. Какое заболевание можно заподозрить у этого больного? Клиническая картина заболевания у этого больного свидетельствует об осложнении газовой гангрены. 2. Какие микроорганизмы могли вызвать данное заболевание? Клостридии: Cl.perfringens,Cl.novyi,Cl.septicum,Cl.histolyticum,Cl.sordellii,Cl.fallax. 3. Какие лабораторные исследования можно провести для подтверждения диагноза? Бактериологическое и биологическое исследования. Материал окрашивают по Граму, микроскопируют, обращая внимание на наличие грубых грамположительных споровых палочек или отдельных спор,а затем сеют на казеиновый или мясные жидкие и плотные среды(кровяной агар, среда Вильсона-Блера). Посевы культивируют в анаэростате, а столбики со средой -в термостате при температуре 37°С. Из посевов готовят препараты, окрашивают их по Граму, учитывают характер роста на жидких питательных средах и пересевают материал на плотные среды. Фильтраты культур или центрифугаты проверяют на наличие токсина в опытах на мышах или морских свинках и используют для проведения реакции нейтрализации с диагностическими сыворотками. Характер роста на плотных питательных средах учитывают на 3-й день. Иглой отпирают колонии и засевают столбиком в полужидкий агар, содержащий 0.5% глюкозы. Определяют морфологию выделенных бактерий, их подвижность, способность сбраживать углеводы, изменять цвет лакмусного молока, разжижать желатин, свёрнутую сыворотку или яичный белок. Кроме того исследуют токсигенность выделенных бактерий на лабораторных животных и методом люминесцентной микроскопии. Для этого колонию эмульгируют на предметном стекле в капле акридинового оранжевого, покрывают покровным стеклом и изучают в иммерсионной системе люминесцентного микроскопа. Наличие только зелёных палочек указывает на присутствие токсигенных особей. Красные или зелёные с красными фрагментами палочки свидетельствуют о слабой токсигенности бактерий или ее отсутствии. 4. Какие специфические лечебные препараты необходимо назначить больному в данном случае? Обязательное оказание квалифицированной хирургической помощи. Ранее введение поливалентной антитоксической очищенной и концентрированной сыворотки"Диаферм-3" по 50.000МЕ. Лечение только одной сывороткой в ряде случаев не даёт нужного эффекта, потому необходимо комплексное применение антитоксической сыворотки, антибиотиков и гипербарической оксигенации. 118 Пострадавшему в автомобильной катастрофе больному С., 45 лет, после оказания экстренной хирургической помощи, было введено 3000 МЕ противостолбнячной антитоксической сыворотки. 1. Как правильно вы должны ввести сыворотку этому больному во избежание пробочных явлений? Сделайте пробу внутрикожно на чувствительность к чужеродному белку(к нормальной лошадиной сыворотки) а потом ввести иммунную сыворотку по методу Безредка. 2. На какой срок в организме этого больного будет создан иммунитет До двух месяцев. Спустя два месяца этот больной был доставлен в инфекционное отделение с диагнозом "столбняк".В течение указанного срока никаких травм не было. 1. Мог ли развиться столбняк у данного больного? Да, мог, так называется "поздний"столбняк. 2. На основании каких основных клинических симптомов врач мог поставить диагноз "столбняк"? Тризм(тоническое напряжение жевательных мышц). Спазм мимической мускулатуры (Сардоническая улыбка).Тоническое напряжение мышц затылка. Онистотонус. 3. Почему у этого больного развился столбняк? Пострадавшему была введена только противостолбнячная сыворотка, которая создаёт кратковременный пассивный иммунитет. Возбудитель мог сохраниться в организме и в дальнейшем вызвать указанное заболевание. 4. Какие вы можете указать врачебные ошибки? Не выяснено, проводилась ли и в какие сроки активная иммунизация против столбняка. Пострадавшему не введен противостолбнячный анатоксин. 5. Какой иммунитет и на какой срок создаёт указанный вами препарат в ответе на задание номер 4? Активный антитоксический, на срок полгода-год. 119 Семья С.госпитализирована в инфекционное отделение с симптомами затрудненного глотания, афонией, понижением слуха, расстройством аккомодации, двоением в глазах, нарушением дыхания. Заболевание закончилось летальным исходом. При изучении причины возникновения интоксикации у человека этой семьи в бактериологической лаборатории проведены исследования остатков рыбных консервов, которые употреблялись пострадавшими в пищу. 1.О каком возбудителе пищевой интоксикации можно думать в данном случае? В данном случае учитывая анамнез и клинические данные можно думать об интоксикации вызванной клостридиями ботулизма. 2. Какие методы диагностики могут быть использованы при исследовании оставшихся продуктов? Остатки пищевых продуктов можно исследовать в реакции нейтрализации с целью обнаружения в них батулических токсинов или для выделения чистой культуры палочек ботулизма использовать бактериологический метод. 3.Составьте схему диагностики которую необходимо провести для подтверждения вашего диагноза. Комочки оставшихся продуктов растереть в стерильной ступке .2/3 растертой пробы предназначаются для обнаружения ботулинических токсинов ,1/3 -для выделения клостридий ботулизма. Обнаружение ботулинический токсинов: Растертую пробу выдерживают в течение часа при комнатной температуре для экстрагирования .Затем экстракт фильтруют через ватно-марлевой фильтр или центрифугируют при 3000 об / мин 15-20 минут. Полученный фильтрат или центрифугат используют для постановки реакции нейтрализации. Реакция нейтрализации: Для обнаружения токсина следует взять 4 мышей весом 16-18 г. Предварительную реакцию необходимо ставить со смесью противоботулинической диагностических сывороток типов A,B,C,E,F. Двум мышам вводят исследуемый фильтрат или центрифугат в количестве 0,50,8 мл внутрибрюшинно или в хвостовую вену (в вену вводят только центрифугат). Другой паре вводят смесь состоящую из 0, 5- 0, 8 мл испытуемого материала и 0,2 мл смеси диагностических моновалентных противоботулинических сывороток типов A,B,C,E,F(по 0,04 мл сыворотки каждого типа).Доза сыворотки, которая рекомендуется для реакции нейтрализации всегда обеспечивает нейтрализацию гомологичного токсина в исследуемой пробе, ибо в экстрактах из пищевых продуктов очень сильные токсины как правило не встречаются .Перед введением смесь исследуемого материала и сывороток выдерживают при комнатной температуре в течение 30 минут .Количество исследуемого материала вводимого животным с сывороткой и без сыворотки должно быть одинаковым. Наблюдение за животными ведут в течение 4 дней однако если мыши болеют или погибают раньше этого срока, тут же ставят реакцию нейтрализации с моновалентными сыворотками.При наличии ботулинического токсина погибают 2 мыши которым вводили не смешанный с сыворотками фильтрат, остальные остаются живы. Обычно картина болезни и гибели мышей очень характерна:появляются учащенное дыхание ,состояние полного расслабления мышц ,западение мышц брюшной стенки (осиная талия),паралич и судороги перед смертью. В случае гибели всех четырёх мышей следует повторить реакцию нейтрализации с экстрактами разведенными в 5, 10 ,20 или даже 100 раз. При разведении экстрактов посторонняя микрофлора теряет способность убивать мышей а ботулинические токсины обладая большей биологической активностью будут вызывать гибель мышей даже при разведении экстрактов .Если же реакция нейтрализации с поливалентной сывороткой дает отрицательные результаты, проводят активацию фильтраторов трипсином и панкреатином. В случае обнаружения в пробе ботулинического токсина сразу же ставят реакцию нейтрализации для определения типа токсина с типоспецифическими диагностическими сыворотками. Обнаружение возбудителей ботулизма: Для обнаружения возбудителей ботулизма делают посев на специфические жидкие питательные среды обеспечивающие анаэробные условия (среда Китта-Тароцци,казеиново- кислая или казеиново- грибная среда ).Засевать исходный поссевный материал необходимо в большой объем среды .Перед посевом среды нагревают в кипящей водяной бане в течение 20 минут, после этого быстро охлаждают и производят посевы .Одну пробу засевают в четыре флакона ,два из которых прогревают - один при температуре 60 °С в течении 15 минут( для селекции клостридий botulinum типа E), другой -при температуре 80 °C в течение 20 минут. Накопление культур клостридий типа Е и F происходит в термостате при температуре 28 °C, для выращивания клостридий типа A,B,C посевы культивируют при температуре 35 °С в течение 48 часов .Для активации токсина Е из протаксина к питательной среде добавляют трипсин до конечной концентрации (0,1% ).Остатки образцов исследуемого материала сохраняют в холодильнике до окончания анализа. Через 24-48 часов пребывания посевов в термостате отмечают наличие помутнения и газообразовании в среде накопления. Из среды, в которой отмечается рост, готовят мазки и окрашивают их по Граму .При обнаружении типичных клостридий со спорами ("ракетки") делают пересев на плотные питательные среды для получения отдельных колоний. Выделение чистой культуры представляет трудности так как клостридии ботулизма часто находятся в ассоциациях с некоторыми аэробными бактериями .Иногда только многократные пересевы и дают возможность получить чистую культуру. На сахарном кровяном агаре клостридии ботулизма образуют колонии неправильной формы с гладкой или шероховатой поверхностью, окруженные зоной гемолиза.В глубине столбика сахарного агара эти колонии имеют вид пушинок или чечевичек .Для идентификации полученную чистую культуру сеют в среды "пестрого" ряда. Клостридии обладают протеолитическими свойствами :разжижает желатин, сыворотку, расщепляет яичный белок, кусочки мяса. Большинство витаминов сбраживают глюкозу, маннит, мальтозу и другие углеводы с образованием кислоты и газа. Антигенные свойства изучают с помощью РА с типовыми сыворотками. Одновременно с изучением ферментативных свойств выявляют ботулинический токсин в фильтрате и бульонной культуры и определяют его тип. 4. Как могли быть инфицированным рыбные консервы ,которые употребляла в пищу семья погибших? У рыбы в кишечнике часто вегетируют клостридии ботулизма и в данном случае стерилизация рыбных консервов была некачественной. 120 При бактериологическом исследовании отделяемого язвы изъятого у больного с подозрением на сибирскую язву получены следующие результаты: в мазке из исследуемого материала видны грамположительные палочки с обрубленными концами ,располагаются одиночно или короткими цепочками, напоминающими бамбуковую трость, окружённые капсулой. На чашках с МПА выросли крупные ,шероховатые, с неровными краями колонии (R-формы),край колонии напоминает "львиную гриву". В бульоне рост выделенной чистой культуры характеризовался образованием через 18-24 часа осадка в виде нежных беловатых хлопьев ("комочек ваты").Среда над осадком осталась прозрачной .При посеве этой чистой культуры в столбик 1012% раствора желатины через 2-5 суток после инкубации при температуре 22° С появился характерный рост по ходу укола в виде беловатого тяжа ,от которого радиально отходят нежные отростки, усиливающиеся книзу -"опрокинутая елочка".Заражённая исследуемым материалом в заднюю часть спины белая мышь погибла через 1.5 суток. 1. Достаточно ли этих данных, для того чтобы дать заключение ,что в исследуемом материале обнаружены палочки сибирской язвы? Нет, не достаточно. 2.Какие исследования ещё нужно включить в бактериологическую диагностику, чтобы подтвердить диагноз сибирская язва? Изучить морфологическую характеристику выделенной чистой культуры. При идентификации использовать тесты жемчужного ожерелья ,лизабельность бактериофагом; изучить специфическую патогенность на белых мышах и капсуло образование. Вопрос 121 К врачу обратился рабочий цеха по сортировке кожевенного сырья с жалобами на высокую температуру (39 градусов), головную боль, разбитость , слабость. Почувствовал себя плохо день назад, а до этого на предплечье появилось зудящее пятно, которое превратилось в пузырь с коркой багрово-красного цвета и черным пятном в центре. Врач предположил, что у больного сибирская язва, и поставил аллергическую пробу с антраксином. Через 48 часов на месте укола образовалась гиперемия и пифильтрат диаметром 4 мм. Как вы оцениваете результат пробы с антраксином? 1. Ответ: проба является отрицательной, так как диаметр гиперемии и пифильтрата менее 8 мм Можно ли на основании полученных результатов отвергнуть предположение о том, что 2. заболевание вызвано B.anthracis? Ответ: нет, нельзя так как иногда наблюдается случаи отрицательной реакции на антраксин у людей, боьных сибирской язвой. Как бы вы поступили, решая в данном случае вопрос об этиологии заболевания? 3. Ответ: необходимо применить бактериологический метод исследования, при котором из исследуемого материала выделяется чистая культура микроба и проводится ее идентификация. Вопрос 122 В бактериологическую лаборатория поступил материал из карбункула больного с подозрением на сибирскую язву. Был приготовлен мазок, в котором, обнаружили грамположительне палочки, располагающиеся единично, попарно и короткими цепочками, напоминающими бамбуковую трость, окруженных общей капсулой. 1. Можно ли на основании микроскопии мазка определить видовую принадлежность этого микроба? Ответ: нет, так как есть микроорганизмы антракоиды, имеющие такую же форму и обладающие аналогичными тинкторальными свойствами. 2. Используя какой метод исследования, можно определить этиологию данного инфекционного заболевания? Ответ: бактериологический, который предусматривает получкение чистой культуры микробов в посевах из первичного, присланного влабораторию, материала или же в посевах биопробного материала, и идентификацию чистых культур. Врпрос 123 В клинику поступил больной с предварительным диагнозом сибирская язва. Заболевание началось с высокой лихорадки и появления на наружной поверхности правого предплечья пузырька диаметром 2-3 мм, наполненного серозной жидкостью. Пузырек вскрылся и на его месте образовался черный струп. Больной связывает это заболевание с ношением нового полушубка, приобретенного на рынке. 1. Какие микробиологические методы можно применить для выяснения вопроса об этиологии данного заболевания? Ответ: микроскопический, бактериологический, биологический. Из лаборатории в тот же день получен ответ, что в мазках из присланного материала обнаружены круаные грамположительные бациллы, образующие черные цепочки, окруженные капсулой. 2. Можно ли поставить диагноз на основании этого заключения? Ответ: да, но тоько предварительный На третьи сутки прислан Ответ: из серозной жидкости. Присланной на на исследование выделены баиллы сибирской язвы. 3. Какой метод диагностики дает основание для этого заключения? Ответ: бактериологический. 4. На основании каких признаков выделенная от больно культура идентифицирована как возбудитель сибирской язвы? Ответ: на основании характерной микроскопической картины, особенностей роста на плотных и жидких питптельных средах, роста на 15% растворе желатина в виде перевернотой елочки, образование феномена жемчужного ожерелья в специальной среде с пенициллином, лизиса культуры специфическим фагом, специфической патогенности для белых мышей и положительного теста на капсулообразование. 5. Каким методом можно выявить инфицированность возбудителя сибирской язвы этого полушубка и других изделий из кожи и меха? Ответ: Серологическим: постановкой реакции термопреципитации Асколи. Кусочки изделия измельчают, помещают в изотонический раствор хлорида натрия и кипятят в течение 10-15 миунут. Полученный термоэктсракт фильтруют до полной прозрачности. В узкие пробирки наливают 0.3 мл преципитирующей сибиреязвенной сыворотки, затем пастеровской пипеткой осторожно наслаивают полученный термоэкстракт в том же объеме. На границе обеих жидкостей не позднее чем через 15 минут должно появитьяс мутно-белое кольцо преципитации, если в материале, взятом для исследованяи. Содержатся споры палочек сибирской язвы. Вопрос 124 В лаборатории особо опасных инфекций проводилась работа с возбудителями сибирской язвы и животными, зараженными этими возбудителями. 1. Как обезвредить: А) исследуемый патологический материал? Б) выделенные чистые культуры микробов В) зараженных животных Г) инструментарий и шприцы?? Ответ: а) автоклавированием(при 126 градусах и течение двух часов); б) так же; в)автоклавированием или сжечь; г) кипячением в 1% растворе бикарбоната натрия не менее 1 часа, автоклавированием Вопрос 125 В инфекционную клинику поступил больной ребенок в возрасте 6 месяцев с клиническим диагнозом острый гастроэнтерит. С целью определения этиологии данного заболевания на исследование в баклабораторию были отправлены испражнения и рвотные массы, из которых выделены E.coli 1. Составьте схему микробиологического исследования , которая позволила бы определить указанный серовар эшерихий. Ответ: 1) испаржнения или рвотные массы посеять на среду Эндо, Плоскиревв термостате 37 град на 18-24 часа 2) в случае обнаружения выпулыхколонийс правильными очертаниями , красного с металлическим блеском или розового цвета (на Эндо), розовых (на Плоскирева), фиолетовых ( на Левина), отбирают 10 лактозоположительных колоний и агглютинируют и х на стекле смесью ОК-сывороток патогенных серогрупп. Отрицательная РА свидетельствует об отсутствии энтеропатогенных эшерихий. При положительном результатеРА оставшуюся часть колонии пересевают на среду ОЛькеницкого. 3) Ферментацию глюкозы и лактозы на среде Олькеницкого с образованием кислоты газа выявляют по изменению цвета среды и нарушению ее целостности. Образование черного кольца на границе столбика и скошенной поверхности свидетельствует о выделении эшерихиями сероводорода. 4) Идентификация ыделенной чистой культуы по биохимическим свойствам 5) Определения сероводорода у выделенной культуры с использованием агглютинирующих поливалентных и типовых ОК-коли сывороток в реакции агглютинациина стекле и в пробирках с гретой и живой культурой. 2. К какому виду эшерихий вы отнесете указанный штамм? Ответ: К энтеропатогенным кишечным палочкам, вызывающим острую кишечную инфекцию у детей колиэнтерит. Вопрос 126 В инфекционную клинику поступил больной ребенок в возрасте 6 месяцев, который находился на искусственном вскармливании с клиническим диагнозом острый гастроэнтерит на исследование в баклабораторию, отправлены испражнения, рвотные массы, слизь из носоглотки, из которых выделены энтеро-патогенные кишечные палочки. 1. Составьте схему микр-биологического исследования, которое необходимо провести для установления этиологии данного заболевания. Ответ: 1) Испражнения, рвотные массы, слизь из зева засевают на среду Эндо и инкубируют в термостате 18-24 ч при температуре 37 гр. 2) Изучают выросшие колонии, для исследования отбирают десять выросших колоний, имеющих следующие признаки: плоско-выпуклые средних, размеров, с гладкими краями, сочные, блестящие, с металлическим блеском или розового цвета. 3) Предварительное испытание отобранных колоний в реакции агглютинации с помощью поливалентных ок-сывороток, после чего пересев на скошенный агар колоний, давших положительную реакцию агглютинации с сывороткой. 4) Через двадцать четыре часа приготовления мазковв из выросшей культуры, изучение подвижности. Культуру грамм отрицательных, хаотично расположенных в мазке палочек средних размеров, обладающих слабой подвижностью, засевают в короткий ряд Гисса для изучения ферментативных свойств и испытывают в реакции агглютинации на стекле с набором типовых ок- и н- сывороток. 5) Культура, которая дает на стекле агглютинацию с сывороткой о111:К58:Н2, испытывается в линейной реакции агглютинации с сывороткой О111:К58:Н2 6) Сыворотка разводится в двух рядах пробирок: в одном ряду до титра К-антител, в другом – до титра Оантител. Титры указаны на этикетке ампулы, выделенная от больных на скошенном агаре культура эшерихий смывается физиологическим раствором и вносится в первый ряд пробирок, часть этой взвеси бактерии прогревается на водяной бане при ста градусах один час и вносится во второй ряд пробирок. 7) Результаты линейной реакции агглютинации учитывают после двадцати часов инкубации при температуре тридцать семь градусов, оценку результатов проводят: невооруженным глазом - с живыми бактериями, учитывая крупно-хлопчатой результат , в агглютиноскопе - с гретыми бактериями, учитывая мелкозернистый агглютинат. 2. К какому серовару эшерихий вы отнесете указанный штамм? Ответ: К энтеропатогенным кишечным палочкам О111:К58:Н2 Вопрос 127 В детскую консультацию на прием к врачу педиатру родители принесли четырех месячного сережу, который находится на искусственном вскармливании. два дня назад у сережи поднялась температура до тридцати восьми градусов, он стал беспокойно спать, часто плачет, появляется частый жидкий стул с неприятным запахом, дважды была рвота. для исследования кал ребенка направлен в баклабораторию. врач поставил диагноз колиэнтерит и назначил ребенку соответствующее лечение. в бак лаборатории испражнения посеяли на среду эндо и через двадцать четыре часа получили сплошной рост колоний красного цвета с металлическим блеском, среди которых было много похожих колоний, но цвет бледно-розовый. колонии, плоско-выпуклые с ровными краями средних размеров. 1. Предложите схему бактериологического исследования испражнения у этого ребенка Ответ: Исследовать необходимо не менее 10 колоний Для исследования отбирают колонии как с металлическим блеском, так и бледно-розовые. Предварительное испытание отобранных колоний в реакции агглютинации с помощью 1 и 2 поливалентных ОК-сывороток, после чего на скошенный агарпересевают колонии, агглютинировавшие в сыворотке. Выделенные чистые культуры микроскопируют, изучают подвижность, засевают в короткий пестрый ряд гисса и агглютинируют типовыми ок-сыворотками в соответствии с наставлением по применению на этикетке для каждой серии. ШТаммы агглютинировавшиеся какой-либо типовой ок-сывороткой на стекле, испытывают в линейной реакции агглютинации в двух рядах пробирок. сыворотку разводят до титра о- и к- антител, указанных на этикетке ампулы.В качестве антигена в один ряд пробирок вносят взвесь живых бактерий, в другой ряд пробирок вносят гретые бактерии. Результаты линейной реакции агглютинации учитывают после двадцати часов инкубации при температуре тридцать семь градусов, оценку результатов проводят: невооруженным глазом - с живыми бактериями, учитывая крупно-хлопчатой результат , в агглютиноскопе - с гретыми бактериями, учитывая мелкозернистый агглютинат. 2. Дапйте характеристику выделенной культуре, в случае если это энтеропатогенныеэшерихии. Ответ: Грамотрицательные, средних размеров. в мазках располагаются хаотично, одиночно, на плотных средах образуют колонии круглой формы, сочные блестящие плоско-выпуклые средних размеров на дифференпиальных средах окрашиваются в цвет краски более или менее интенсивно. ферментируют с образованием кислоты глюкозу, лактозу, манит, некоторые штаммы могут ферментировать лактозу в более поздние сроки. в отношении других углеводов эшерихии ведут себя различно, образуя множество биохимических вариантов. энтеро-патогенные эшерихи дают положительную аггдютинацию с поливалентными ок-сыворотками и с какой-либо типовой. Вопрос 128 На прием к врачу педиатру обратилась мама вовы, который находится на грудном вскармливании возраст пять месяцев, как сообщила мама, заболевание у малыша началось остро - с подъема температуры тела до тридцати восьми градусов, появился частый жидкий водянистый стул до десяти раз в сутки, рвота .в бак лаборатории, проводившие исследование этому ребенку при посеве испражнений и слизи из носоглотки, выделено энтеро патогенная кишечная палочка. 1. Какой диагноз можно поставить ребенку? Ответ: колиэнтерит, вызванный энтеро-патогенной кишечной палочкой 2. какой метод лабораторной диагностики был применен в данном случае, перечислите его основные этапы. Ответ: Проводился бактериологический метод, исследуемый материал засевался на среду Эндо или левина. инкубация в термостате восемнадцатьдвадцать четыре часа при температуре тридцать семь градусов изучение колоний. при наличии плоско-выпуклых, с гладкими краями, цветных колоний отобрать десять подозрительных колоний для исследования предварительное испытание отобранных колоний в реакции агглютинации с помощью 1 и 2 поливалентных ок-сывороток, после чего на скошеной агар пересевает колонии агглютинировавшие в сыворотке. Выделенные чистые культуры микроскопируют, изучают подвижность, засевают в короткий пестрый ряд гисса и агглютиируют типовыми ок-сыворотками в соответствии с наставлением. при выделении подвижных штаммов можно использовать н-сыворотки Штаммы, агглютинировавшиеся какой-либо типовой ок- сывороткой на стекле, испытывают в линейной реакции агглютинации в двух рядах пробирок. сыворотку разводят до титра о- и к- антител, указанных на этикетке ампулы. в качестве антигена в один ряд пробирок вносят взвесь живых бактерий в другой ряд пробирок вносят ту же культуру, прогретую на водяной бане при ста градусах - один час. Результаты линейной реакции агглютинации учитывают после двадцати часов инкубации при температуре тридцать семь градусов, оценку результатов проводят: невооруженным глазом - с живыми бактериями, учитывая крупно-хлопчатой результат , в агглютиноскопе - с гретыми бактериями, учитывая мелкозернистый агглютинат. 3. Какой из этапов проведенного исследования позволил отнести культуру к ЭПКП? Ответ: Развернутая реакция агглютинации в двух рядах пробирок с типовой ОК-сывороткой О111:К4. Вопрос 129 В инфекционное отделение поступил больной 17лет с предварительным диагнозом дизентерия, он жалуется на общую слабость головокружение снижения аппетита тошноту рвоту чувства жести под ложечкой, частый и жидкий стул, температура 36,6 градусов. в баклаборатори, направлены на исследование рвотные массы и испражнения. при бактериологическом исследованием фекалий, шигелл обнаружить не удалось. на среди эндо после посева рвотных масс выросли плоско-выпуклые блестящие красного цвета с металлическим блеском, которые агглютинировались на стекле с поливалентной ок-сывороткой. 1. О каком еще заболевании можно подуматьпосле проведения этого этапа диагностики? Ответ: энтеропатогенные кишечные палочки. 2. Какие этапы лабораторной диагностики необходимо выполнить еще для установления этиологии данного заболевания? Ответ: 5-10 колоний , агглютинирующие на стеклеполивалентной ОК-сывороткой, отсевают на скошенный агар. Выделенные чистые культуры микроскопируют, изучают подвижность, засевают в короткий пестрый ряд Гисса, для изученя ферментативнх свойств можно использовать систему индикаторых бумажек и агглютинируют типовыми ОК-сыворотками, при выделении подвижных штаммовиспользуют еще и Нсыворотки. Штаммы, агглютинировавшиеся какой-либо типовой ОК-сывороткой на стекле, испытывают в линейной реакции агглютинации в двух рядах пробирок. Сыворотку разводят до титра О- и К-антител, указанных на этикетке ампулы. В один ряд пробирок добавляют живую, во второй ряд – убитую прогреванием выделенную чистую культуру эшерихий . 3. Напишите ответ из баклаборатории в инфекционное отделение. Ответ: В инфекционное отделение больной С., 17 лет, из испражнений и рвотных масс выделены энтеропатогенные палочки. Вопрос 130 В августе в родильном доме в райцентре С., заболели дети, появился частый водянистый стул – до 10 раз в сутки и рвота, повышение температуры до 38 градусов. При выяснении причины их возникновения оказалось, что накануне бутылочки для воды, которые использовали для питья дети, младшая сестра не стерилизовала в печи Пастера, а вымыла в горячей воде. Педиатр заподозрил острую кишечную инфекцию и напрвил для уточнения диагноза в баклабораторию испражнения, рвотные массы и слизь из носоглотки. 1. какой метод лабораторной диагностики должен быть применен для подтверждения диагноза острой кишечной инфекции? Ответ: бактериологический метод 2. какие микроорганизмы могли вызвать подобные заболевания? Ответ: энтеропатогенные кишечные палочки, возможно, и другие энтеробактерии – протей клебсиеллы. 3. Какие мероприятия можно провести в детской палате роддома? Ответ: изоляция и полное лечение больных детей. Обследование персонала и матерей на носительство энтеропатогенных эшерихй. Строгое соблюдене санитарно-гигиенических норм. 4. Каким образом могли быть инфицированы дети? Ответ: от носителей через плохо обработанную посуду для питья или воду, если она не кипятилась. Вопрос 131 В инфекционное отделение поступил больной с жалобами на схваткообразные боли в животе, локализующиеся в левой подвздошной полости, часиый жидкий стул с примесью слизи и крови, а также ложные позывы на дефекацию. Температурабольного повышена38,1. Пи пальпации живота определяется резкая болезненность сигмовидной кишки. Заболел остро. Болеет второй день. В домашних условиях лечения не принимал. 1. какую острую кишечную инфекцию можно заподозрить у больного? Ответ: острая дизентерия. 2. какой исследуемый материал подлежит исследованию? Ответ: испражнения, из которых отбирают для посева кусочки слизи и гноя, которые тщательно промывают в физиологическом растворе. 3. Какие методы лабораторной диагностики следует применить для уточнения диагноза? Ответ: Бактериологический. Так как больной не принимал антибиотиков можноиспользовать посев материала сразу на плотные среды Отмытые физиологическим раствором кусочки гноя и слизи переносят на на поверхность питательной среды в чашки Петри и досуха растирают стерильным шпателем. Для исследования используют дифференциальные цветные среды : бактоагар Плоскирева, среда Левина. Через 18-24 ч инкубации изучают характер колоний, ыросших на цветных средах. Шигеллы растут в виде круглых , прозрачных , бесцветных колоний. Подозрительные колонии отсевают на среду Олькеницкого 5-10 колоний. Часть колонии можно испытать в агглютинации на стекле со смесью сывороток Флекснера и Зонне, после чегодать каплям высохнуть, завфиксировать мазки и окрасить по Граму. На среде Олькеницкого шигеллы изменяют окраску столбика без образования газа. Неподвижные грамотрицательные ралочки, не расщепляющие мочевину и не ферментирующие лактозу в перве 24 часа, а разлагающие глюкозу без образования газаподозрительные как шигеллы. Изучение сахаролитических свойств в коротком пестром рядуГисса с добавлением пробирок с рамнозой , дульцитом и арабинозой.Если используются полужидкие среды, в них можно определять и подвижность культур. Учитывают изменения в цветном ряду Гисса через 24 часа, а пробирки с лактозой и сахарозой остаются еще на сутки. В соответсвии с данными пестрого ряда и ориентировочной реакцией агглютинации ставят реакцию на стекле с адсорбированными сыворотками, сначала с видовыми, а потом с типовыми. Вопрос 132 В бактериологической лаборатории из посева испражнений от больного с подозрением на острую дизентерию выросли бесцветные ,мелкие, гладкие, полупрозрачные колонии на среде Плоскирева. Часть колоний отсеяли на среду Олькеницкого и поставили реакцию агглютинации со смесью сыворотокФлекснера и Зонее. 1. Дополните схему исследования этапами и характеристикой культуры в случае, если это выделяются шигеллы Флекснера. Ответ: учесть посевы на среде Олькеницкого через 24 часа – изменение цвета столбика без образования газа, отсутствие расщепления мочевины и не образуется сероводород. Положительная агглютинация со смесью сывороток Флекснера и Зонне. Приготовление мазков, окраска по Граму. В мазках средних размеров грамотрицательные, хаотичнорасположенные палочки с закругленными концами. Спор , капсул нет. Посев выделенной культуры в короткий пестрый ряд Гисса, в который можно можно добавить пробирки с арабинозой, раминозой. Лучше исользовать полужидкие среды, так как сразу можно изучить подвижность. Подвижность отсутствует. Ферментация глюкозы, маннита, иногда дульцита с образованием кислоты. Агглютинация на стекле с адсорбированными сыворотками собственно Флекснера, Ньюкасл и Бойда. После учета биохимических свойств, если выявлен собственно Флекснер, агглютинация на стекле с адсорбированными типовыми сыворотками. Шигеллы Ньюкаслферментируют глюкозу и дульцит с образованием газа, а манит не разлагают. Вопрос 133 В детском саду Ромашка зарагастрирована вспышка острой кишечной инфекции.В инфекционное отделение госпитализировано 7 детей, у которых наблюдается частый – до 7 раз в сутки – жидкий стул с примесью слизи крови, повышенная температура до 38 градусов и схваткообразные боли в животе, частые ложные позывы на дефекацию. Заболевание возникло25 августа, а с 1 августа в этот детский сад поступила новая няня Н., которая принята на работу на кухню. Врач-педиатр и врач-эпидемиолог, выясняя причину вспышки, установили, что у вновь поступившей сотрудницы нет допуска из санэпидемстанции к работе на кухне. 1. Какие исследования необходимо провести с целью расшифровки вспышки этой инфекции? Ответ: бактериологическое исследование испражнений. 2. Укажите симтомы острой кишечной инфекции, указанные в условии, которые позволят поставить предварительный диагноз. Ответ: Острое начало, повышенная температура, жидкий стул с примесью слизи и крови, частые, ложные позывы на дефекацию позволяют заподозрить острую дизентерию. 3. Какие мероприятия вы можете провести в этом детском саду в первую очередь? Ответ: бактериологическое обследование всех детей и персонала этого коллектива. За детьми и персоналом установить строгое наблюдение с двухкратным измерением температурыи осмотром стула у детей. При появлении новых случаев заболевания – немедленная госпитализация ы инфекционное отделение. При выявлении бактерионосителя – изоляция из коллектива и лечение. Проведение дезинфекции на пищеблоке и в подсобных помещениях. 4. для чего врач-эпидемиолог тщательно проверял у персонала этого детского сада наличие допуска из санэпидемстанции? Ответ: Лица, поступающий на работу, на пищевые и приравниваемые к ним предприятия и учреждения, подвергаются однократному бактериологическому обследованию. При выделении возбудителей дизентерии и острых кишечных заболеваний, поступающий на работу не допускается и направляется на лечение.Ссведения и результаты проведенного бактериологического обследования, предъявляются в организацию, куда оформляются лица для работы в сфере общественного питания. Вопрос 134 Больной С., поступил в инфекционное отделение с клиническим диагнозом брюшной тиф. Болен 5 дней. На исследование в баклабораторию отправлена кровь больного, посеянная в отделении на среду Раппопорт. После инкубации в термостате при 37 гр 18 ч, сделан высев из этой среды на среду Эндо. После суточного роста в термостате, на ней выросли мелкие прозрачные , бесцветные, полусферические колонии. 1. Какой метод диагностикибрюшного тифа использован в данном случае? Ответ: бактериологический – исследование гемокультуры. 2. с какого дня заболевания можно использовать этот метод диагностики и какое количество крови необходимо брать для исследования? Какую цель преследовал врач-бактериолог, производя посев крови на среду обогащения Раппопорт? Ответ: на первой неделе заболевания, 10мл крови; возможно на второй и третьей, но количество крови должно быть увелеичено до 20-30 мл. Увеличить количество бактерий, попавших вместес кровью в среду Раппопорт. 3. Какие еще используются среды для выделения этих микроорганизмов? Ответ: 10% желчный бульон. Среда Плоскирева, висмут-сульфит агар, среда Левина. 4. Почему на среде Эндо эти микроорганизмы имеют указанные свойства? Ответ: Поскольку они не ферментируют лактозу, входящую в состав Эндо. 5. Какой характер роста они будут иметь на висмут-сульфит агаре? Ответ: колонии мелкие, гладкие, блестящие, угольно-черного цвета в связи с восстановлением висмута из солей. 6. Какие исследования необходимо еще провести для доказательства видовой принадлежности выделенных из крови микроорганизмов? Ответ: приготовить мазки из подозрительных колоний, окрасить по Граму. В случае обнаружения грамотрицательных средних размеров палочек, отсеять подозрительную колонию на скошенный агар, среду Расселя или Олькеницкого , инкубация в термостате 18-24ч. Микроскопическое изучение выросшей культуры – проверка чистоты выделенной культуры. Изучение ферментативных свойств в коротком пестром ряду Гисса. Агглютинация на стекле с поливалентной сальмонеллезной сывороткой. 7. Какие ферментативные свойства , выявленные в коротком ряду Гисса. Позволяют вам отнести выделенную культуру к S. typhi? Ответ: ферментация глюкозы, маннита и мальтозы до кислоты и выделение сероводорода в МПБ. 8. Какие сыворотки дают положительную агглютинацию на стекле с этой культурой? Ответ: О-агглютинирующая сальмонеллезная сыворотка, с антителами к рецептору 9,12,Вн; Нагглютинирующая сыворотка, с антителами к рецептору d Вопрос 135 Больной Н., 37 лет, с диагнозом брюшной тиф был госпитализирован в инфекционное отделение больницы на 8 день заболевания. Врач-инфекционист с целью подтверждения диагноза сделал посев 20 мл крови в желчный бульон, взял еще 3 мл крови в пробирку без консерванта и отправил этот материал в баклабораторию. Поставленная на следующий день в баклабораторри реакция агглютинации Видаля была положительной с брюшнотифозным О-диагностикумом в разведении 1:200, с О-диагностикумом паратифа А и В в разведении 1:100. 1. Какой метод лабораторной диагностики применен в данном случае и из какого образца исследуемого материала поставлена реакция Видаля? Ответ: серологический метод диагностики. Реакция агглютинации Видаля поставлена с сывороткой крови больного, полученнго из образца крови без консерванта. 2. Составьте краткую схему постановки реакции Видаля. Ответ: Из сыворотки больного в пробирках с физиологическим рвствором готовятся серийные разведения , начиная с 1:50 до 1:1600 Реакция проводится в нескольких видах пробирок, так как используются различные диагностикумы: О; ОН-диагностикумы брюшного тифа, О; ОН-диагностикумы паратифов А и В. После приготовления разведений сыворотки в каждый ряд вносится по 1-2 капли соответсвующего диагностикума. Пробирки с реакцией встряхивают, помещают в термостат на 2 часа при 37 градусах, затем оставляют при комнатной температуре. Учитывают реакции агглютинации через 18-20 часов. 3. Можно ли на основании полученных результатов подтвердить диагноз брюшной тиф? Ответ: можно, так как О-антител к сальмонеллам тифа равен диагностическому – 1:200, однако, учитывая, что в некоторых случаях О-антитела модно обнаружить у привитых., необходимо изучать реакцию Видаля в динамике для выявления нарастания ее титра. 4. Для чего проводился посев 20 мл крови желчный бульон? Ответ: с целью проведения бактериологической диагностики – выделения сальмонелл брюшного тифа из крови. 5. Как вы будете трактовать результаты , если из баклаборатории получен Ответ: больной И, 37 лет. Из крови выделены S. typhi Ответ: в таком случае больному нужно поставить диагноз брюшной тиф. Задание № 137 В баклабораторию исследовалась гемокультура лихорадящегл больного М., который находился на лечение в инфекционном отделении. При посеве крови в желчный бульон выделена грамотрицательная палочка средних размеров, с закругленными концами, подвижная, не образующая спор и капсул. В посевах на среде Эндо выросли полусферические, округлые, с ровными краями, прозрачные, мелкие, блестящие колонии. При изучении биохимических свойств выделенная чистая культура ферменты- рует: г.люкоза лактоза маннит мальтоза сахароза МПБ индол h,s 107 ЗАДАНИЯ 1.На какой среде была выделена чистая культура от этого больного? Назовите выделенную культуру ? 2. Какие надо провести ещё исследования для определения видовой принадлежности выделенного микроорганизма? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1.1.На среде Олькеницкого (трехсахарная среда с мочевиной и индикатором) 1.2. Выделена s. typhi. 2. Для окончательной идентификации этой культуры необходимо использовать реакцию агглютинации вначале с поливалентной сальмонеллезными сывороткой групп ABCDE, а затем с монорецепторными O и Hсальмонеллезными сыворотками (9,12,Vi,d) ЗАДАНИЕ № 138 Больная С., 32 лет, повар по специальности, находилась инфекционном отделении районной больницы на лечении с диагнозом: "брюшной тиф", Такой диагноз поставлен на основании выделения из крови этой женщины S. typhi. Из бактериологической лаборатории, проводившей диагностику, получено и серологическое подтверждение брюшного тифа. Больная С. получила полный курс комплексной терапии, на протяжении 4.5 недель чувствует себя хорошо, жалоб не предьявляет и обратилась к врачу с просьбой выписать ее на работу. Работает она на пищеблоке детского комбината "Звездочка". ЗАДАНИЯ 1)Какие исследования необходимо назначить этой больной, чтобы решить вопрос о ее полном выздоровлении? 2)Какие мероприятия нужно провести в случае, если из баклаборатории получен: А) положительный результат Б) отрицательный результат 3)Чем обусловлено применение указанных вами мероприятий по отношению к лицам, перенесшим брюшной тиф? 4)Какие были проведены мероприятия в детском саду «Звездочка», где работает эта больная? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1.1Выписка переболевших независимо от профессии осуществляется после клинического выздоровления и получения двукратного отрицательного исследования кала мочи, а также однократного исследования дуоденального содержимого. 1.2. Первое исследование проводят перед выпиской не ранее чем через 5 дней установления нормальной температуры и не менее 2-х дней после прекращения лечения антибиотиками, повторное - с промежутком 3-5 дней. За 4-5 дней перед выпиской по - проводят дуоденальное зондирование с посевом желчи порции В и С. 2.1. При получении положительного результата больная должна остаться в больнице для прохождения повторного курса лечения, в конце которого проводят бактериологическое обследование по указанной выше схеме. 2.2. Переболевшие, выписавшиеся из стационара с отрицательными бактериологическими исследованими, состоят на учете в СЭС на протяжении 2-х лет. Учитывая, что больная С. по специальности - повар, она должна находиться на учете в СЭС на протяжении всей трудовой деятельности из пищеблоке. 3.1. Клиническое выздоровление и освобождение организма от патогенных бактерий не совпадают 3.2. В течение первых недель после выздоровления значительная часть реконвалесцентов остается носителями, у 3-5% переболевших носительство продолжается многие месяцы и годы, иногда всю жизнь 3.3. Такие лица могут быть источниками инфицирования населения, особенно если они работают в сфере общественного питания и водоснабжения. 4.1. Бактериологические обследования лиц, общавшихся с больной (персонал, дети, посещающие этот комбинат). 4.2. Санитарное обследование очага (детский сад в этом случае считается очагом брюшного тифа). 4.3. Бактериологические исследования проб воды, продуктов питания (подозреваемых качестве возможных факторов передачи) и смывов с предметов внешней среды 4.4. Текущая и заключительная дезинфекция на пищеблоке детского комбината и подсобных помещениях ЗАДАНИЕ № 139 Больная Иванова К. М., 32 лет, поступила в инфекционное отделение горбольницы № 1 на 12-й день болезни. При поступлении состояние тяжелое, температура 39°С. Больную беспокоит сильная головная боль, ознобы, язык густо обложен белым налетом. Пальпируется край увеличенной печени и селезенки. На коже живота элементы розеолезной сыпи. Врач-инфекционист поставил диагноз «брюшной тиф?». Для подтверждения своего предположения дал указание направить кровь в количестве 20 мл в бактериологическую лабораторию и подготовил направление. ЗАДАНИЯ 1) Напишите текст направления в баклабораторию 2) Составьте схему лабораторного исследования для уточнения предполагаемого диагноза 3) Какие основные тесты идентификации, использованные в лаборатории, позволят отнести выделенную культуру к S. Typhi? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1. В баклаборатории горбольницы №1. Направление. Направляется кровь для бактериологического исследования больного Ивановой К. М., 32 лет. Диагноз: «Брюшной тиф»? 2.1. Кровь при подозрении на брюшной тиф берут из локтевой вены стерильным шприцем и засевают у постели больного во флаконы с 200 мл 10% желчного бульона. Посев инкубируют в термостате 18--20 часов при температуре 37°С. 2.2. Из посева крови в желчный бульон производят высев на чашку со средой Эндо либо с обычным питательным агаром, либо среду Олькеницкого 2.3. Через 18-24 часа инкубации в термостате изучают посевы. Посевы в чашках со средой Эндо исследуют в случае загрязненного роста на скошенном МПА На среде Олькеницкого сальмонеллы брюшного тифа ферментируют глюкозу с образованием кислоты (пожелтение столбика арапа), не расщепляют лактозу (окраска скошенной части агара не изменяется) и продуцируют сероводород (почернение среды на границе столбика агара и скошенной поверхности). 2.4. После учета характера роста и определения чистоты культуры приступают к ее идентификации. 2.5. В Выделенную культуру сеют среды пестрого ряда и проводят реакцию агглютинации с монорецепторными сыворотками. 2.6. Культуры подвижных, грамотрицательных палочек, ферментирующих глюкозу и маннит без образования газа, подозрительные как брюшнотифозные, испытывают в реакции агглютинации с соответствующими О и Н монорецепторными сыворотками (9, 12, Vi; d). 3. По морфологическим признакам это должны быть грамотрицательные палочки, средних размеров, с закругленными концами, располагаются в препарате хаотично, спор, капсул не образуют. Обладают активной подвижностью. 3.2. На среде Эндо растут в виде мелких, нежных, прозрачных, круглых, слегка выпуклых, блестящих колоний. Колонии бесцветные, т. к. эти микроорганизмы не ферментируют лактозу, входящую в состав среды. 3.3. По ферментации углеводов в коротком ряду Гисса: расщепление с образованием кислоты, глюкозы, маннита и мальтозы, образование сероводорода. 3.4. Выделенная культура должна агглютинироваться О - и Н-монорецепторными сыво - ротками (9, 12, Vi; d). Задание 140 В бактериологической лаборатории проводились исследования по диагностике брюшного тифа от 3 больных, поступивших в инфекционное отделение с предварительным диагнозом «брюшной тиф. Сроки заболевания – 7-9 дней. На исследование была отправлена гемокультура от больных. При посеве гемокультуры на среде Эндо выросли мелкие, бесцветные, с гладкими краями колонии. У культур изучены морфологические, культуральные и биохимические свойства, предварительно доказана их принадлежность к s. typhi. Задания 1.На какой среде выделялась чистая культура этих возбудителей (состав среды)? 2.Какие изменения можно увидеть в указанной вами среде, если вырастут s. typhi? 3.Укажите все признаки выделенных микроорганизмов, которые позволили предварительно от нести их к s. typhi 4.Какими исследованиями нужно дополнить идентификацию для окончательной диагностики заболевания? Эталоны ответов : 1.1.Трехсахарная среда олькеницкого. 1.2.В состав среды входит в качестве основы мпа, куда добавляют глюкозу, лактозу. сахарозу, соль мора, гипосульфит, мочевина, водный раствор фенолового красного. 2. Сальмонеллы брюшного тифа ферментируют глюкозу с образованием кислоты (пожелтение столбика агара), не расщепляют лактозу (окраска скошенной части агара не изменяется) и сероводород (почернение среды на границе столбика агара и скошенной поверхности ). 3.1. Грамотрицательные, средних размеров, хаотично расположенные в препарате палочки с закругленными краями. спор, капсул не образуют, выражена подвижность. 3.2.В коротком ряду Гисса ферментируют глюкозу, маннит, мальтозу с образованием кислоты, не расщепляют мочевину в среде олькеницкого, выделяют сероводород. 4.1. Нужно провести серологическую идентификацию выделенных культур с использованием поливалентной сальмонеллезной сыворотки гр. ABCDE и адсорбированных монорецепторных о- и нсальмонеллезных сывороток. (9, 12, vi; d). 4.2.Провести фаготипирование выделенных культур с помощью набора типовых брюшнотифозных viбактериофагов. 4.3.Изучить чувствительность к антибиотикам Задание 141 Гражданин С., переболевший брюшным тифом, был выписан из инфекционного отделения больницы после двукратного отрицательного бактериологического исследования кала на наличие брюшнотифозных бактерий. Через 2 недели заболела брюшным тифом его жена. Задания 1.Можно ли связать заболевание жены с предшевствующей болезнью мужа? 2. Какие исследования необходимо провести, чтобы подтвердить или отвергнуть ваши предположения и какой материал должен быть направлен в баклабораторию для проведения указанных вами исследований? Эталоны ответов: 1.Можно, если муж остался бактерионосителем. Палочки брюшного тифа персистируют в желчном пузыре и желчных путях печени и выделяются из организма периодически. Поэтому при обследовании на бактерионосительство необходимо подвергать бактериологическому исследованию не только испражнению больных ,но и желчь, полученную после дуоденального зондирования в некоторых случаях - даже мочу и костный мозг. 2.1Для этих целей проводят бактернологические исследования порций B и C желчи полученных в процессе дуоденального зондирования, пунктатов костного мозга путем грудины, осадка мочи после центрифугирования. 2.2. Бактериологические исследования проводит с использованием сред обогащения -- соленитовой и магниевой, куда непосредственно засевается исследуемый материал последующим пересевом на дифференциально-диагностические среды, изучения биохимических и серологических свойств. Задание 142 В инфекционном отделении находится на лечении больной Н. 30 лет, с диагнозом «брюшной тиф?». Болен 12 дней. Результаты бактериологических исследований гемокультуры, проведенные в баклаборатории, не подтвердили этот диагноз. На 9 день болезни для проведения серологической диагностики в баклабораторию доставлена сыворотка больного. На следующий день получен результат: больной Н.,30 лет, диагноз «брюшной тиф?». Реакция Видаля с О-диагностикумом брюшного тифа положительная (+ + +) в разведении сыворотки 1:400; с О-днагностикумами салмонелл паратифа А и В положительная (++) в разведении 1:100. Задания 1. Сделайте заключение по результатам реакции Видаля полученным из баклаборатории. 2. Что означает положительная реакция Видаля у этого больного с О-диагностикумами салмонелл паратифа А и В? 3. Дополните серологическое обследование необходимыми реакциями, которые помогут поставить правильный диагноз. Эталоны Ответов 1.1. На основании этих данных можно сказать, что титр О-антител к салмонеллам брюшного тифа у этого больного высше диагностического (1:200). Этот факт может свидетельствовать о заболевании, т.к. О-антитела появляются в крови больных брюшным тифом на второй неделе заболевания (с 8-9 дня). 1.2. В некоторых случаях О-антитела можно обнаружить у привитых, поэтому необходимо изучать реакцию Видаля в динамике для выявления нарастания её титра. 2. Это свидетельство групповой агглютинации, но титр положительной реакции ниже диагностического, поэтому данный результат значения для диагностики заболевания не имеет. 3.1. Обязательно повторить реакцию Видаля с указанными диагностикумами через 5-7 дней. 3.2. Более чувствительной и чаще дающией положительные результаты является РНГА с эритроцитарными монорецепторными диагностикумами О9,012 и Vi. Задание № 143 К школьному врачу обратились 5 учащихся с жалобами слабость, недомогание, тошноту, боли в животе. В конце занятия с аналогичными жалобами обратились еще 15 учащихся. Установлено, что общим блюдом, с которым связано пищевое отравление, были блинчики с творогом, купленные в столовой школы. Доставленные в лабораторию рвотные массы больных с диагнозом «острое пищевое отравление» без обработки были введены двум котятам-сосункам. Через сутки животные погибли. На этом основании был поставлен диагноз стафилококковой интоксикации. При бактериологическом исследовании творога, рвотных масс, испражнений больных выделена грамотрицательная палочка средней величины, с закругленными концами. Выделенная культура агглютинировалась сальмонеллезной О-сывороткой группы В. Задания 1. Об этнологии какого заболевания можно думать? 2. Какой исследуемый материал необходимо направить в лабораторию? Методика взятия материала? 3. Каков ход исследований присланных в лабораторию проб, если предлагается сальмонеллезная этнология этих токсико-инфекций? 4. Какие экстренные профилактические мероприятия необходимо провести в данном случае? Эталоны ответов 1. Пищевая токсикоинфекция сальмонеллезной этнологии. 2.1. Творог, блинчики, рвотные массы, испражнения больных, смывы с рук, инвентаря, оборудования. 2.2. Пробы отбирают в стерильные банки, закрытые притертыми пробками или пергаментной бумагой. 2.3. Творог 1-2 образца от партии в упаковке, рвотные массы и промывные воды(50-100 мл) собирают до применения лекарственных средств, испражнения направляют в количестве 5-10гр. Смывы с рук, инвентаря и оборудования производят стерильными ватными тампонами или марлевыми салфетками, увлажненными стерильной водопроводной водой или физ. раствором. 2.4. Собранный материал в запечатанном виде доставляется в лабораторию немедленно. Пробы подлежат исследованию в любом количество и даже при наличии признаков порчи. Разрешается хранение проб в течение суток при 4-6С. 3.1. Навеску продукта (творог) 20-25 гр. гомогенизируют в стерильной ступке с 0,1% ПВ. Жидкие продукты засевают без предварительной обработки. Пищевые продукты, имеющие кислую реакцию, рвотные массы перед посевом нейтрализуют до рН 7,2-7,4 10% раствором бикарбоната натрия. Испражнения разводят стерильном изотоническом растворе хлорида натрия в соотношении 1:10. 3.2. 1 день. Производят посев исследуемого материала на среду Плоскирева, среды накопления – селенитовую и магниеву среды, из которых через 6-10 часов делают пересев на среду Плоскирева. Инкубация в термостате при 37С. 2 день. Изучают культуральные свойства выросших колоний. Отбирают бесцветные лактозоотрицательные колонии и пересевают на Рессель или скошенный агар для накопления чистой культуры. Инкубация в термостате при 37С. 3 день. Идентификация. Посев в среды Гисса, постановка РА с поливалентной сальмонеллезной сывороткой. При агглютинации культуры с поливалентной сывороткой определяют ее групповую принадлежность при помощи О-сывороток. Затем при помощи монорецепторных Н-сывороток соответствующие группы производят окончательное определение вида испытуемой культуры. 4 день. Учет изменений в средах короткого нестрого ряда Гисса. Возбудители пищевых токсикоинфекций сальмонеллезкой этнологии не ферментируют лактозу и сахарозу, расщепляют глюкозу,, маннит, мальтозу с образованием КГ, не образуют индол, продуцируют сероводород. Выделение сальмонелл из рвотныз масс, творога, испражнений больных является бесспорным подтверждением диагноза пищевой токсиоинфекции сальмонеллезной этнологии. 4. Всем учащимся промыть желудки, назначить поливалентный сальмонеллезный фаг. Задание 144 В бактериологическую лабораторию инфекционного отделения поселка Н. в августе поступили промывные воды и фекалии трех больных с диагнозом: «острый гастроэнтерит?», а также остатки вареной говядины, которую употребляли накануне больные. Все они члены одной семьи, отваренное мясо купили в кули- нарном магазине утром, до обеда хранили на столе в полиэтиленовом пакете, обедали вместе, а к утру заболели. Заболевание началось остро, появились тошнота, рвота, жидкий стул, отмечалось повышение температуры до 38°. В баклаборатории из всех образцов поступившего материала сделаны посевы на цветные дифференциальные среды. Задания 1) Назовите микроорганизмы с учетом морфолонических, культурных признаков и источника выделения. 2) Проведите дальше выделение и идентификацию этой культуры 3) Какие биохимические признаки характеры для выделенных в этой лаборатории бактерий от больных 4) Обьясните необходимость использования последнего этапа идентификации 5) Как могли инфицироваться члены этой семьи указанными микроорганизмами? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1. Это могут быть сальмонеллы 2.1.Мелкие, бесцветные, с жидкими краями полупрозрачные колонии в количестве не менее 5 колоний пересеять на среду Олькеницкого (штрихами по скошенной поверхности, а затем уколом вглубь столби- ка). Пробирки с посевами поместить в термостат при температуре 37 до следующего дня. 2.2. Идентификацию культур, выросших на среде Олькеницкого. Учитывают изменение цвета в нижней части столбика (ферментация глюкозы с выделением газа). Микробы, не ферментирующие лактозу и не расщепляющие мочевину, подвергаются дальнейшему изучению. 2.3. Подозрительные культуры пересевают короткий пестрый ряд Гиса, изучают разование сероводорода и подвижность, 2.4. Серологическая идентификация выделенных культур в реакции агглютинация в начале с поливалентной сальмонеллезной короткой групп А. В. С. Д. Е, а затем набором монорецепторных О и Н агглютинирующих сальмонеллезных сывороток 3. Салмонеллы, возбудители пищевых токсикоинфекций, ферментируют в коротких ряду Гисса глюкозу, маннит и мальтозу с образованием кислоты газа; для большинства культур характерно выделени сероводорода. 4.1. Серологическая идентификация выделенной культуры с поливалентной сальмонеллезной сывороткой (гр. АВСДЕ) поданных грамотрицательных палочек, ферментирующих глюкозу и мальтозу с образованием кислоты и газа, необходима для отнесения микроорганизмов к роду салмонелл. 4.2. При положительной реакции агглютинации с указанной сывороткой выделенной культуры подлежат испытанию в реакцию агглютинации с набором монорецепторных и Н-сальмонеллезных сывороток для определения серовара сальмонелл. 5.1. Отварное мясо могло быть обсеменено сальмонеллами на этапах кулинарной обработки при несоблюдении санитарно-гигиенических норм приготовления этого блюда. 5.2. Учитывая, что члены этой семьи отварили мясо несколько часов хранили вне холодильника, за это время попавшие микроорганизмы могли размножиться и вызвать острый гастроэнтерит. Задание 145 В инфекционное отделение поселка Н. в течение суток были госпитализированы рабочие одного из комбинатов с диагнозом «острый гастроэнтерит?». У всех заболевание началось остро, повышения температуры тела до 38°С, тошноты, рвоты, сопровождалось болями в животе. Появился жидкий стул. Из анализа выяснено, что все они накануне в обеденный перерыв употретребляли в пищу мясной салат, купленный буфете этого предприятия. ЗАДАНИЯ 1) Что необходимо отправить в баклабораторию для микробиологических исследований, чтобы выяснить этиологию этого заболевания? 2) Какие микроорганизмы могли вызывать это заболевание? 3) Составьте схему наиболее оптимального метода диагностики 4) Как могли инфицироваться эти рабочие? 5)Попытайтесь установить источник инфекции 6) Если вам не удалось выделить культуру микроорганизмов, используйте другие методы диагностики ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1. Бактериологическому исследованию подлежат рвотные массы, испражнения и остатки мясного салата, изьятого из буфета предприятия. 2. В данном случае заболевание могло быть вызвано каким-либо представителем семейства энтеробактерий: сальмонеллами, эшерихиями, протеем, клебсиеллами, нереиниями. Но чаще всего такие заболевания вызываются сальмонеллами. 3.1. Лучше всего использовать бактериологический метод, он позволит выделить из исследуемого материала возбудителя заболевания и идентифицировать его. 3.2. Кроме того, часто заболевание вызывается не только указанными микроорганизмами но и их токсинами, накопившимися в пищевом продукте, поэтому целесообразно использовать биологическое исследование. Особенно, если речь идет об остром гастроэнтерите сальмонеллезной этиологии. 3.3. В первый день исследования, наряду с посевом материала на цветные дифференциальные среды (Эндо, Плоскирева, висмут- сульфит агар) производятся пероральное заражение белых мышей. Через 1-2 суток мыши погибают от септицемии. При вскрытии погибших животных обнаруживают резко увеличенную селезенку, иногда печень, а посев крови из сердца и материала из внутренних органов позволяет выделить культуру сальмонелл на цветных дифференциальных средах. 4.1. Мясной салат был приготовлен из мяса животного, болевшего сальмонеллезной инфекцией и плохо обеззараженного при термической обработке (эндотоксин сальмонелл-термоустойчив) 4.2. Мясо для салата могло быть инфицировано на этапах кулинарной обработки либо при несоблюдении санитарно-гигиенических требований приготовления холодных закусок. 5. Для установления источника инфицирования провести бактериологическое или биологическое исследование остатков мясного салата, который употребляли рабочие, смывов с кухонных досок, инвентаря, рук персонала, можно также исследовать испражнения лиц, готовивших этот салат. 6.1. В случае, если не удалось выделить культуру сальмонелл от больных, а речь именно о гастроэнтерите сальмонеллезной этиологии, диагноз можно подтверди рологическим исследованием сыворотки крови больных. Для этой цели используется РА пли РНГА, которые можно принять с первых дней заболевания с повторным исследованием через 7-10 дней для выявления нарастания специфических антител. При проведении этих реакций применяют сальмонеллезные поливалентные групповые (А, В. С диагностикумы (корпускулярные или эритроцитарные). 6.2. Диагностическое значение имеет повышение титра антител в 2-4 раза. Задание 146 7 человек рабочих энергозавода обедали в заводовской столовой. К обеду все заказали котлеты из спинного мяса. Через 8-10 часов у них появились признаки острого гастроэнтерита : тошнота ,рвота ,боли в животе, часто жидкий стул ( 4-5 раз в сутки ) , повышение температуры до 38 градусов. Двое из них в тяжёлом состоянии госпитализированы в инфекционное отделение. ЗАДАНИЯ 1. Какими микроорганизмами мог быть вызван у них острый гастроэнтрит? 2. Какой материал нужно направить в баклабораторию для подтверждения бактериальной этиологии этого заболевания? 3. Какие методы диагностики могут быть использованы в баклаборатории? 4. Каким образом могли быть инфицированы котлеты ,которые употребляли в пишу рабочие ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1. Салмонеллами, протеем или эшихириями. В данном случае наиболее вероятным возбудителем могут быть салмонеллы. 2. Необходимо направить в баклабораторию испражнения ,рвотные массы ,промыть желудок . 3. Для диагностики можно использовать бактериологический , биологический и серологический методы . 4.1 Котлеты могли быть инфицированы в этапах кулинарной обработки в несоблюдение санитарно – гигиенических требований к работе на пищеблоке . 4.2 Котлеты могли быть изготовлены из мяса животного, больного салмонеллезам , при нарушении ветеринарного контроля животных на мясокомбинатах ЗАДАНИЕ № 147 В городскую инфекционную больницу госпитализирована Света К., 8 месяцев, находящаяся на искусственном вскармли- ва нии. Диагноз при госпитализации: "острый гастроэнтерит". Употребляет в пищу различные молочные сухие смеси, овощи, соки, творог, кефир, каши на молоке. Заболела остро, через 4 часа после употребления в пищу овсяной каши из сухой молочной смеси, появилась рвота, жидкий пенистый стул до 5 раз в сутки. К вечеру повысилась температура до 38°. Врач инфекционной больницы для подтверждения диагноза направил в баклабораторна исследование испражнения больного ребенка и слизь из носоглотки. ЗАДАНИЯ 1) Какие методы микробиологической диагностики использованы в баклаборатории больницы для выяснения этиологии острого гастроэнтерита? 2) Составьте схему исследования до этапа выделения чистой культуры. 3)Можно ли считать их возбудителями данного заболевания? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1.1. Бактериологический 1.2. Биологический 2.1. Исследуемый материал засевают на среды Эндо, Плоскирева, Левина. 2.2. После инкубация 18-24 часа в термостате изучают рост колоний на этих средах. 2.3. Исследованию подлежат как цветные, так бесцветные колонии, мелкие и средних размеров, плосковыпуклые, блестящие, с гладким краем. Изучают не менее 10 колоний. 2.4. В случае роста только цветных или слабо окрашенных колоний после бактерноскопического исследования ставят агглютинацию со смесью ОК-сывороток, патогенных серогрупп эшерихий. 2.5. Колонии, дающие положительную агглютинацию этой сывороткой, отсевают на скошечный агар. 2.6. Бесцветные. мелкие колонии отсевают на среду Олькеницкого. В баклаборатории проведено исследование по указанной в эталоне ответа схеме и цветные слабоокрашенные колонии не агглютинировались смесью ОК-сывороток патогенных серогрупп, а бесцветных колоний в посевах на дифференциально-диагностических средах бактериологи не обнаружили. Следует отметить, что рост указанных микроорганизмов был как в посевах испражнений, так и слизи из зева. Морфология микроорганизмов - грамотрицательные, средних размеров палочки, расположенные хаотично, края закругленные, слабо подвижные. 3. Да, можно, так как эшерихии могут вызывать острые гастроэнтериты, которые протекают как пищевая токсикоинфекция. Но в данном случае они не относятся к ЭПКП. Задание № 148 В Одессу приплыли корабль под либерийским флагом, везший груз из Эквадора. В пути случилось несчастье : заболел матрос ,у которого внезапно появились потрясающий озноб, температура 40 градусов,сильная боль, головокружение, лицо стало бледным, с синюшным оттенком и выражением страдания.При подходе в порт больной умер. Задания 1.Можно ли до выяснения причины смерти матроса ставить корабль под разгрузку? 2.Какие методы лабораторной диагностики нужно использовать для уточнения причины смерти матроса ? 3.Какие необходимо провести мероприятия на судне ,если будет диагностировано особо опасное заболевание? Эталоны ответов : 1. Нет,нельзя, в связи с тем, что возможно распространение инфекции в портовом городе 2.1 Бактериоскопический 2.2 Бактериологическое исследование 2.3 Биологическая проба 2.4 Серологическое исследование 3.На корабле установить карантин. Обеспечить систематическое наблюдение за членские экипажа и качественное обследование всех лиц,находящихся на корабле. Задание 149 Группа советских интернов должна поехать в Африку (Уганду).Однако известно, что в этой стране неблагополучная эпидемиологическая обстановка по чуме(в среднем ежегодно заболевают несколько сот человек) Задания 1. Какие необходимо предпринять меры для предупреждения заболеваний среди лиц ,командируемых в эту страну. 2. Как называется препарат используемый для проведения специфический профилактики чумы. Как вводится? 3. Необходимо ли повторное введение препарата, если специалисты будут находиться там по контракту в течении 2-х лет? Эталоны ответов : 1. Для предупреждения заболеваний чумой им надо ввести вакцину 2. Специфический профилактику проводят живой вакциной EV. Применяют подкожно внутрикожно, накожно. 3. Продолжительность иммунитета после введения вакцины в пределах года. Поэтому учитывая неблагополучную эпидобстановку в данном районе им показана ревакцинация через 8-12 месяцев ЗАДАНИЕ № 150 Врач при осмотре охотника заподозрил у него бубонную форму чумы и, соблюдая необходимые меры защиты, произвел бактериоскопию содержимого и посев материала на мясо-пептонный агар. В мазке, окрашенном фуксином Пфейфера, увидел небольшое количество мелких, овоидных, биполярно окрашенных палочек. После суточного инкубирования посева роста на питательной среде не было. ЗАДАНИЯ 1) Как можно обьяснить получение результата? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1.1. Обнаружение в мазках овоидных биполярно окрашенных палочек с учетом эпидемиологических и клинических данных дает основание заподозрить чуму у этого больного. 1.2. Отсутствие роста культуры на средах можно объяснить тем, что в исследуемом материале находились лизогенные иерсинии. Для устранения действия бактериофага перед посевом на поверхность плотной питательной среды необходимо нанести специфическую антифаговую сыворотку. 1.3. Достоверность бактериоскопического наблюдения весьма повышается при применении люминесцентно-серологический методики. С этой целью мазки из патологического материала обрабатывают в соответствии с наставлением, прилагаемым к этому сывороточному препарату, и исследуют в люминесцентном микроскопе. Возбудитель чумы виден в поле зрения микроскопа как мелкая палочка с ярко окрашенным зеленоватым ореолом. ЗАДАНИЕ № 151 При микроскопии препарата, приготовленного из мокроты больного Н., у которого были кашель, боли в груди, очень высокая лихорадка (температура 40°С), повышенное отделение жидкой, пенистой, с примесью крови мокроты, обнаружены мелки с капсулой нежной грамотрицательные палочки, концы которых окрашены интенсивно. В посеве мокроты на МПА были обнаружены на следующий день колонии R-типа, напоминающие «смятый кружевной платочек». ЗАДАНИЯ 1) Можно ли на основании полученных данных поставить предварительный диагноз «чума»? 2) Следует ли применять в этом случае срочные противоэпидемические мероприятия, если в это же время в данной местности началась эпидемия среди грызунов и их массовая гибель? 3) Какие этапы исследования необходимо проделать для определения видовой принадлежности выделенных бактерий? 4) Как можно выделить культуры иерсиний чумы, если материал загрязнен посторонней микрофлорой. ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1. В данном случае можно сказать, что в препарате обнаружены иерсинии. 2. Да, обязательно, так как заражение чумой чаще всего возникает от грызунов. 3. С этой целью необходимо выделить чистую культуру из патологического материала, взятого от больного и погибших грызунов и провести ее идентификацию. Культуры иерсиний выделяют на простых питательных средах. Выделенные культуры идентифицируют и дифференцируют от других родственных видов, в частности, от псевдотуберкулезных микроорганизмов, на основании комплекса признаков с учетом морфологии клеток и структуры колоний. Основными дифференциально-диагностическими критериями между иерсиниями чумы и псевдотуберкулеза считаются: подвижность культур, рост на голодно-кислом агаре, лизис специфическими фагами, ферментация рамнозы, агглютинация противочумной сывороткой, патогенность для лабораторных животных. Для возбудителя чумы характерны следующие признаки: отсутствие подвижности и роста на голодно кислом агаре, лизис чумным бактериофагом, отсутствие ферментации рамнозы, агглютинация противочумной сывороткой, разведенной до титра. Штаммы неренний чумы убивают морских свинок и крыс с характерными изменениями. 4. Выделение чистой культуры чумного микроба затруднено в посевах, загрязненных посторонней микрофлорой. Особенно трудно выделять культуру от больных, леченных комплексом соответствующих антибиотических и сульфаниламидных препаратов. В этом случае исследуют одновременно несколько проб, взятых от одного больного, и материал, как правило, засевают на элективные питательные среды Туманского. Ленской, Коробковой или на агар с 1% гемолизированной крови. Колонии иерсиний чумы, обнаруженные среди посторонней бактериальной флоры, необходимо снять петлей и рассеять на агар, содержащий кровь и генциан-фиолетовый также заразить ими лабораторные животных. Задание 152. В одном из штатов Бразилии геологическая экспедиция,проводившая разведку полезных ископаемых в глубинных областях бассейна реки Амазонки,наткнулась на селение,в котором было много больных тяжелыми заболеваниями,которых «лечил» знахарь.Выяснилось,что заболеваниям людей предшествовала эпизоотия и падеж среди крыс. Заболевания начинались внезапно, сопровождались ознобом, повышением температуры. Больные жаловались на головную и мышечные боли. У них отмечалась невнятная сбивчивая речь, шатающаяся походка. Слизистая глаз гиперемирована, ноздри расширены, губы сухие. В паху у одних, в подмышечной области у других, а у некоторых в области шеи появились бубоны (увеличенные лимфатические узлы), которые, спаиваясь друг с другом и с окружающей подкожной клетчаткой, образуют опухоль, плотную на ощупь, болезненную не только при пальпации, но и в спокойном состоянии. Кожа над бубоном сглаживается, приобретает синюшный оттенок. В течение ряда дней (6-8) бубон может достигать размеров куриного яйца Начальник экспедиции сообщил Федеральному министерству здравоохранения о заболеваниях,а присланные сотрудники Института им. Освальда Круса после проведенных исследований диагносцировали бубонную форму чумы и начали проводить мероприятия по ликвидации данной эпидемии. Задания 1.Какой материал,взятый у больных,был использован для лабораторной диагностики заболеваний? 2.Какие методы исследований могут быть применены для диагностики? 3.В чем заключается бактериоскопический метод исследований? Эталоны ответов 1. При подозрении на бубонную форму чумы подвергается исследованию содержимое бубона. Пунктат из бубона берут стерильным шприцом. Перед пункцией кожа над бубоном смазывается йодной настойкой, протирается спиртом. Пункцию производят в области плотной части бубона. После взятия материала и извлечения иглы кожа обрабатывается спиртом. 2. Для лабораторной диагностики чумы применяются микроскопический, бактериологический, биологический и серологический методы исследований. 3. Для бактериоскопического исследования из материала, полученного из бубона, готовят мазки. Мазки подсушивают, фиксируют в смеси Никифорова, этиловым или метиловым спиртом, окрашивают по Граму и метиленовой синью. При обнаружении в мазках под микроскопом грамотрицательных, биполярно окрашенных, овоидных палочек с учётом клинических и эпидемиологических данных можно поставить ориентировочный диагноз чумы. Большое практическое значение имеют экспресс-методы лабораторной диагностики чумы и, в частности, РФА, прямой или непрямой метод иммунофлюоресценции. Этот метод позволяет обнаружить возбудителя чумы в исследуемом материале в течение 2 часов. Задание 153 В противочумную лабораторию были доставлены несколько трупов крыс,чтобы подтвердить или отвергнуть предположение о том,что грызуны погибли от инфекции,вызванной Y.pestis. Задания 1.Какие методы исследования нужно использовать для уточнения причины гибели животных? 2.Существует ли какая-то зависимость между заболеваемостью людей чумой к эпизоотией среди грызунов? Эталоны ответов 1. Биологический метод. Трупы таких животных с предположением, что они погибли от чумы, погружают в керосин для инактивирования эктопаразитов-переносчиков возбудителей чумы. Трупы вскрывают на доске, помещённой в кювету, с дезинфицирующим раствором. При вскрытии животных о наличии чумы свидетельствуют следующие патологоанатомические изменения: множественные кровоизлияния на слизистой и серозной оболочках, воспаление лимфатических узлов, наличие некротических очагов в селезенке, реже в печени. В брюшной полости наблюдается вязкий экссудат и перерождение паренхиматозных органов. В масках из внутренних органов, крови, экссудата при положительном результате обнаруживают большое количество овоидной формы грамотрицательных, биполярно окрашенных бактерий. Патологический материал (кровь из сердца, кусочки внутренних органов погибших животных) засевают на обычные питательные среды, выделяют чистую культуру и проводят дифференциальную диагностику между иерсиниями чумы и иерсиниями псевдотуберкулеза. При исследовании разложившихся трупов грызунов применяют реакцию преципитации, т.к. выделить чистую культуру бактерий в этом случае трудно. После вскрытия и установления предварительного диагноза труб сжечь или стерилизовать в автоклаве. Всю работу проводить в специальных помещениях с соблюдением особых мер предосторожности. 2. Эпизоотии среди грызунов предшествует возникновению кожной и кожно-бубонной форм чумы у людей. Задание 154 При бактериологическом исследовании внутренних органов найденного трупа грызуна были выделены микроорганизмы, имеющие палочковидную форму, грамотрицательные, биполярно окрашивающиеся, подвижные, растущие на голодно-кислом агаре, разлагающие рамнозу и мочевину. Задания 1.О каком микроорганизме можно думать в данном случае? 2. Нужна ли дальнейшая идентификация чистой культуры микробов с целью установления окончательного диагноза? 3.Надо ли ставить биологическую пробу для уточнения причин смерти животного? Как она проводится? Эталоны ответов 1. В данном случае были выделены иерсинии псевдотуберкулеза. 2. Да, нужно продолжить идентификацию выделенной культуры. С этой целью необходимо определить чувствительность её к псевдотуберкулезному фагу, проверить патогенность на морских свинках и крысах. 3. Да,нужно. Для постановки биологической пробы обычно используют морских свинок и белых крыс. Иерсинии псевдотуберкулеза патогенны(убивают) морских свинок и реже крыс. Материал,не содержащий посторонней микрофлоры, вводят животным подкожно или внутрибрюшинно. При достаточном количестве введённых микробов животные обычно погибают в зависимости от способа введения и вирулентности возбудителя от 3 до 9 дней. При вскрытии павших или забитых животных изучают патологоанатомические изменения в органах. Из органов и крови готовят мазки отпечатки. Если животные погибли от иерсиний псевдотуберкулеза, то при подкожном заражение у свинок на вскрытии обнаруживаются узелки в печени и селезенке, при внутрибрюшинном зараженииутолщенный сальник, налёт на кишечнике. Задание 155 В лаборатории особо опасных инфекций, которая начала функционировать в июле 1972 г. в посёлке М.,в связи с неблагоприятной эпидемической ситуацией по форме № 30,из испражнений больного С.с диагнозом: «острый гастроэнтерит» на щелочном МПА и лактозо-сахарозной среде выделена чистая культура бактерий, представляющая собой грамотрицательные, слегка изогнутые палочки, подвижные, ферментирующие сахарозу и маннозу с образованием кислоты, агглютинирующиеся О-холерной сывороткой. Задания 1.Можно ли на основании этих данных поставить бактериологический диагноз? Если да,то какой? 2. С помощью каких тестов можно определить биовар выделенной культуры и её серовар? 3. Существуют ли ускоренные методы лабораторной диагностики этого инфекционного заболевания, которые можно применить в этом посёлке ввиду сложившейся неблагоприятной эпидемической ситуации? Эталоны ответов 1. Да,можно сказать,что из испражнений больного, который госпитализирован с диагнозом «острый гастроэнтерит», выделены холерные вибрионы, определен хемоваротносится к 1 группе по классификации Хейберга. 2.1.Биовар определяется на основании изучения у культуры фаголизабельности фагами С и Эль-Тор 2,а также по способности гемолизировать эритроциты барана. Можно также использовать определение чувствительности к полимиксину. 2.2. Серовар определяется в реакции линейной агглютинации с типоспецифическими сыворотками Инаба,Огава. 3. Да,в этом посёлке необходимо использовать методы экспрессной диагностики:люминесцентно-серологический; иммобилизации вибрионов О-холерной сывороткой и проба с типовыми холерными бактериофагами. Задание 156 Населенном пункте К.в октябре были диагностированы 9 случаев заболеваний холерой, вызванной холерными вибрионами Эль-Тор. После проведенного комплекса противоэпидемических и санитарно-гигиенических мероприятий в зимний период в этом посёлке санэпидслужбой не зарегистрировано ни одного случая холеры. Перед эпидемиологами встал вопрос,какие мероприятия необходимо провести для ликвидации и предотвращения заболеваний в новом году. Задания 1.Какие результаты исследований, проведенных в лаборатории особо опасных инфекций, позволили эпидемиологам сделать заключение о заболевании холерой Эль-Тор? 2. Какой метод профилактики холеры можно применить в данном случае для реализации цели, поставленной эпидемиологами? Опишите кратко препараты, используемые для профилактики холеры. Эталоны ответов 1. В бактериологической лаборатории по диагностике особо опасных инфекций на щелочных простых питательных средах и селективной среде TCBS выделена культура грамотрицательных, подвижных, слегка изогнутых тонких палочек. Культура агглютинировалось О-холерной сывороткой, ферментировала сахарозу, маннозу с образованием кислоты, лизировалась типовым фагом Эль-Тор 2, вызывала гемолиз эритроцитов барана,проявляла устойчивость к полимиксину. 2.1. С целью профилактики можно в данном случае использовать холерную и Эль- Тор вакцину. Она представляет собой взвесь выращенных на агаре холерных и Эль-Тор вибрионов,убитых нагреванием или формалином. Эффективность вакцины обусловливается содержанием в ней специфического антигена вибрионов (корпускулярного и растворимого). Вакцина изготавливается из штаммов холерных и Эль-Тор вибрионов серологических типов Огава и Инаба. Она выпускается в жидком и сухом виде. Холерная и Эль-Тор вакцина предназначена для подкожных профилактических прививок. Перед употреблением сухую вакцину разводят в физиологическом растворе. Прививки против холеры в этом посёлке нужно проводить взрослым и детям (старше 2-х лет) двукратно с 7-10 дневным интервалом. Доза препарата устанавливается в соответствии с возрастом. Вакцину вводят строго подкожно в участок спины ниже угла лопатки. Иммунитет в организме привитых развивается в течение 30 дней после первичной вакцинации, включающей 2 прививки. Поствакцинальный иммунитет сохраняется у привитых холерной и Эль-Тор вакциной 3-6 месяцев,но напряженный иммунитет-на протяжении первых трёх месяцев,а затем постепенно угасает,исчезая к исходу 6 мес. Это обстоятельство очень важно учитывать при определении в данном случае сроков кампании вакцинации. Ревакцинация работа через 6 мес. однократно дозой, равной дозе первой прививки при вакцинации. В первую очередь вакцинацию нужно провести лицам, вероятность заражения которых наиболее высока. К ним прежде всего относятся медицинские работники и все лица, участвовавшие в борьбе с холерой, работники канализационных и очистных сооружений, работники,занятые сбором мусора и его утилизацией, работники прачечных,водного, железнодорожного и воздушного транспорта,пищевой промышленности и предприятий общественного транспорта. 2.2. Химиопрофилактика холеры проводится в тех случаях, когда регистрируется заболевание холерой и заключается в назначении тетрациклина в течение 5 дней по 1 грамму. Химиопрофилактика показана всем семейным контактам и другим лицам,общавшимся с больными холерой;по указанию МЗ СССР может проводится массовая экстренная химиопрофилактика. Задание 157 В лаборатории по диагностике особо опасных инфекций из испражнений больного Н.,который госпитализирован в инфекционное отделение с диагнозом «острый гастроэнтерит», выделена чистая культура бактерий, представляющая собой грамотрицательные, слегка изогнутые палочки, подвижные, ферментирующие сахарозу и маннозу с образованием кислоты, агглютинирующиеся Охолерной сывороткой. Задания 1.На каких средах выделена эта чистая культура от больного Н.? 2.Определите вид выделенного возбудителя на основании этих признаков. 3.Дополните указанные исследования тестами,необходимыми для окончательной идентификации выделенной культуры. Эталоны ответов 1. На щелочной 1% пептонной воде,щелочном МПА,TCBS,лактозо-сахарозной среде. 2. Холерный вибрион. 3. Необходимо определить хемовар,биовар и серовар выделенного возбудителя. 3.1. Определить хемовар по изучению биохимических свойств в углеводном ряду, состоящем из маннозы,сахарозы и арабинозы. 3.2. Изучить способность гемолизировать эритроциты барана и чувствительность к полимиксину. 3.3. Проверить фаголизабельность фагами С и Эль-Тор 2. 3.4. Определить серовар в реакции агглютинации с типовыми сыворотками Инаба, Огава. 3.5. Для идентификации можно использовать и ряд дополнительных тестов: оксидазный тест,тест окисления ферментации,тест"тяжа", реакцию гемагглютинации куриных эритроцитов,гексаминовый тест. Задание 158 В городе Н. в августе 1971 г. отмечались случаи заболевания холерой (неблагоприятная эпидемическая форме №30). Выделенная в лаборатории особо опасных инфекций этого города из рвотных масс больного С., поступивших на исследование с диагнозом «холера?», культура оказалась подвижной, в окрашенных мазках-грамотрицательные, слегка изогнутые палочки, при росте на среде Ресселя (лактозо-сахарная среда) изменялся цвет нижней части (столбик) без газооб- разования, в пестром ряду, состоящем из сахарозы, маннозы и арабинозы, отсутствовала ферментация арабинозы, а сахарозу и маннозу микроорганизмы ферментировали с образованием кислоты: проходила выраженная агглютинация с О-холерной сывороткой, наблюдался гемолиз эритроцитов барана. Задания 1.Каким исследованием необходимо дополнить идентификацию культуры, чтобы определить биовар? 2. Дайте полное название выделенной культуры на латинском языке с указанием биоваров, типичных для человека. 3. К какой группе по классификации Хeйберга относится этот вид микроорганизмов. Эталоны ответов 1. Для установления биовара необходимо использовать фаги Эль-Тор 2 и с их помощью определить лизабельность культуры. 2. Выделен холерный вибрион Эль-Тор-Vibrio choleraе (EI-Tor или classica). 3. Хемовар 1 группы по классификации Хейберга. Задание 159 В инфекционное отделение машиной скорой помощи доставлен Р. 38 лет, в тяжелом состоянии. Как удалось выяснить у больного, на протяжении 2-х дней был частый жидкий стул. а через 5 часов от начала заболевания присоединилась рвота, вначале содержимым желудка, а затем жидкостью, напоминающей рисовый отвар. В течение дня у него 20 раз был жидкий стул и 7 раз рвота. При осмотре обращали на себя заострившиеся черты лица, с темными кругами под глазами, охриплость голоса и снижение тургора кожи кистей рук (рука прачки). Живот безболезненный, язык сухой. У дежурного вра- ча возникло подозрение, что у больного Р. холера. Он госпитализировал его в боксированное отделение, вызвал заведующего инфекционным отделением. Срочно направил кал и рвотные массы в лабораторию особо опасных инфекций с необходимыми мерами предосторожности. Задания 1. Каким образом был взят исследуемый материал у больного Р. и доставлен в лабораторию особо опасных инфекций? 2. Как Вы оформите направление в лабораторию особо опасных инфекций? 3. Как будет проводиться бактериологическое исследование в лаборатории особо опасных инфекций? 4. Какие результаты исследований позволят врачу- бактериологy дать заключение что в исследуемом содержатся Vibrio choleraе? 5. Что необходимо включить в комплекс лечебных мероприятий для лечения нарушением этого больного? 6. Какие противоэпидемические мероприятия рекомендуется провести очаге? 7. Достаточно ли данных для утверждения о том что обследованный пациент болен холерой? Эталоны ответов 1.1. Поскольку холерный вибрион очень чувствителен к различным дезинфицирующим средствам, поэтому в посуде для сбора материала от больных не должно быть даже слабых концентраций дезинфицирующих средств. Посуда перед сбором материала подвергается кипячению. 1.2. Испражнения и рвотные массы собирают в стерильные стеклянные широкогорлые баночки. 1.3. Допускается взятие материала ректальными тампонами, стеклянными трубками. В таких случаях материал нужно обязательно помещать в пробирку с щелочной 1% пептонной водой. 1.4. Баночки или пробирки плотно закрывают пробкой, обязывают двойным слоем пергаментной бумаги или другим водонепроницаемым материалом. 1.5. На баночку или пробирку наклеивают этикетку с фамилией больного, названием образца, обозначением места времени взятия материала, предполагаемым диагнозом и фамилией лица, взявшего материала. 1.6. При пересылке исследуемого материала отдаленные лаборатории банки с материалом плотно укладывают металлические сосуды (бикс, кастрюля), помещают в деревянный ящик и опечатывают. На крышке ящика надписывают: "Верх! Осторожно!" 2. В лабораторию по диагностике особо опасных инфекций Направление Больной Р, 38 лет. Диагноз: Холера? Направляются для проведения исследования испражнения. Материал взят в санпропускнике инфекционного отделения 24.06.72 г. в 1200 медсестрой Ивановой Т. Врач: Степанов В. Такое же направление выписывается и при направлении рвотных масс и др. материала. 3.1. Исследуемый материал подвергается бактериоскопии и изучается нативный препарат с целью обнаружения подвижных микроорганизмов. 3.2. Параллельно проводится посев на 1 щелочную 1% пептонную воду и щелочной МПА или селективную среду ТСBS. 3.3. Через 6 часов изучается рост на пептонной воде, готовятся мазки, окрашиваются по Граму. Изучение подвижности в нативных мазках и постановка реакции агглютинации с О-холерной сывороткой. Пересев на II 1 neптонную воду и чашки с щелочным МПА. 3.4. Через 12 часов изучение колоний из первичного посева нативного материала на щелочном МПА, характер роста на II 1% пептонной воде (наличие роста в виде нежной голубоватого цвета пленки). 3.5 Идентификация выделенных чистых культур по морфологии, подвижности, способности ферментировать сахарозу и маннозу с образованием кислоты, лизироваться со специфическим фагом по гемолизу эритроцитов барана, чувствительности к лимиксину и агглютинации типовыми сыворотками Инаба и Огава. 3.6 Исследование чашек засеянных со второй пептонной воды, проводят по той же схеме по которой изучались чашки с посевом первичного материала. 3.7 Предварительный результат можно получить через 6-12 часов, окончательный через 36-48 часов. 4.1 Обнаружение грамотрицательных тонких изогнутых подвижных палочек агглютинирующие на стекле o-холерной сывороткой является достаточным для утверждения что в исследуемом материале имеются вибрионы. 4.2 Чтобы установить биовар хемовар необходимо иметь данные о способности выделенной культуры ферментировать сахарозу и маннозу до кислоты вызывать гемолиз эритроцитов барана и агглютинацию эритроцитов кур лизироваться либо фагом C либо Эль-Тор агглютинироваться специфическими сыворотками Инаба и Огава. 5. В комплекс лечебных мероприятий нужно включить сначала внутривенное затем пероральное введение антибиотиков группы тетрациклина. Обязательно должна проводиться борьба с обезвоживанием организма нарушением обмена веществ последствий токсикоза. Для этих целей назначают введение солевых растворов натрия калия влияние плазмы глюкозы препаратов тонизирующих сердечно-сосудистую систему. 6.1 При обнаружении первого случая холеры информировать вышестоящие органы здравоохранения. 6.2 Изолировать и госпитализировать по особым правилам больных и носителей Используя бактериологический метод диагностики. 6.3 Провести текущую и заключительную дезинфекцию в отделение для больных холерой и в очаге. 6.4 Контролировать охрану источников водоснабжения, усилить санитарный надзор за пищеблоками, борьбу с мухами. 6.5 Провести химиопрофилактика в этом очаге холеры. 7. Да, Если через 6-12 часов из лаборатории по диагностике особо опасных инфекций получены предварительные положительный ответ и наличии в исследуемом материале холерных вибрионов, А через 36-48 часов есть сообщение что выделен или классический холерный вибрион или вибрион Эль Тор. ЗАДАНИЕ № 160 Из испражнений больного с острым гастроэнтеритом, который госпитализирован в инфекционное отделение, в лаборатории диагностике особо опасных инфекций выделена чистая бактериальная культура, которая в течение 6 часов дала рост на щелочной 1% пептонной воде в виде нежной, голубоватой плене. На щелочном МПА через 12 часов после посева испражнения образовывались мелкие, гладкие, выпуклые, стекловидно-прозрачнне колонии с голубоватым оттенком; в мазках, окрашеннных по Граму, обнаружены грамотрицательные, мелкие, слегка изогнутые палочки; в препарате висячей капли обнаружена хорошо выраженная подвижность этих бактерий («полет точки»). ЗАДАНИЯ 1.Каким микроорганизмам, вызывающим острую кишечную инфекцию, присущи эти свойства? 2. Какие тесты идентификации позволят Вам определить видовую принадлежность этих бактерий? 3. На основании каких тестов, использованных при идентификации культуры, можно сделать заключение, что выделены классические холерные вибрионы? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1. Вибрионам -холерным нли вибрионам Эль-Тор. 2.1. Указанные тесты в условии: морфология и подвижность. 2.2. Обязательно необходимо использовать агглютинацию с 0-холерной сывороткой. 2.3. У выделенной чистой культуры изучить ферментативные свойства: сбраживать без газа сахарозу и маннозу, вызывать гемолиз эритроцитов барана, агглютинацию эритроцитов кур: проявлять чувствительность к полимиксину; лизироваться специфическими фагами и агглютинироваться специфическими типовыми сыворотками Инаба, Огава 2.4. На основании лизабельности фагом С или Эль-Тор 2 и гемолиз эритроцитов барана 3. На основании лизабельности фагом С. отсутствия гемолиза эритроцитов барана, агглютинации куриных эритроцитов и чувствительности к полимиксину. ЗАДАНИЕ № 161 В инфекционное отделение больницы поступил больной Б. с профузным поносом. Испражнения вначале имели цвет и запах кала, а затем стали белесовато-водянистыми, напоминаюцими рисовый отвар. Позже присоединилась рвота фонтаном без тошноты. В лабораторию по диагностике особо опасных инфекций отправлен исследуемый материал, полученный от этого больного. Вначале лаборант провел бактериоскопическое исследованне испражнений и рвотных масс больного. В мазках, окрашенны по Граму, обнаружил большое количество грамотрицательных, слегка изогнутых палочек, располагающихся скоплениями, напоминающими «стайки рыб». Изучение нативных мазков свидетельствовало о подвижности бактерий. ЗАДАНИЯ 1.Какие микроорганизмы обнаружены в исследуемом материале от этого больного? 2. За сколько часов нужно провести бактеориологические исследования, чтобы выделить и идентифицировать обнаруженные микроорганизмы? 3.Какие питательные среды нужно использовать для посева материала от этого больного? 4. На основании каких результатов бактериологического исследования можно сделать предварительное заключение и в какие сроки? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1.Вибрионы 2.1. Предварительная идентификация 6-12 часов. 2.2. Окончательная-36-48 часов. 3.1. Среды накопления: щелочная 1% пептонная вода. 3.2. Плотные среды для посева материала из сред накопления-щелочно высева МПА. 3.3. Элективные среды: среда ТCBS, среда Монсура. 4.1. Через 6 или 12 часов можно сделать первое предварительное заключение: через 6 часов при пленки на 1 щелочной 1% пептонной воде, через 12 часов-при изучении роста в виде пленки на 2 пентонной воде. 4.2. Предварительное заключение исходит из особенностей морфологии: наличие грамотрицательных, изогнутых, тонких палочек; подвижных паратов; появление через 6 часов роста виде голубоватой нежной пленки на пептонной воде ии равномерное помутненне среды. Кроме того, положительная реакция агглютинации с О-холерной сывороткой. ЗАДАНИЕ № 162 В 1970 г. в августе месяце в портовом городе К. зарегистрированы первые случаи острого кишечного заболевания среди населения, характеризующегося частым жидким стулом (до 20 раз в сутки), который у некоторых напоминал «рисовый отвар», многократной рвотой, обезвоживанием организма у некоторых больных, снижением температуры. Проведенная экспресс-диагностика исследуемого материала (испражнения, рвотные массы) показала, что заболевания вызваны холерным вибрионом Эль-Тор. ЗАДАНИЯ 1. Какие ускоренные методы обнаружения холер-вибрионов использованы могли быть данном случае? 2. Составьте схему исследования (испражнений ротных масс), которая позволит за 6-12 часов обнаружить холерных вибрионов. 3. Какие должны быть проведены в этой лаборатории для установления биовара выделенной культуры ЭльТор? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1. В данном случае скорее всего использован люминесцентно-серологический метод проба с типовыми холерными бактериофагами. 2.1. Посеять исследуемый материал (испражнения, рвотвые массы) на 1 щелочную 1% петтонную воду и в щелочной МПА. 2.2. Через 6 часов инкубации при температуре 37 изучить рост на I петтонной воде – при наличии голубоватого цвета нежной пленки приготовить мазки, окрасить по Граму, изучить морфологию, исследовать подвижность и поставить реакцию агглютинации на стекле с О-холерной сывороткой. 2.3. Сделать пересев на 2 пентонную воду и чашки с щелочным МПА (можно со средой МПА) 2.4. Через 12 часов от начала исследования исследуемого материала (4-6 часов инкубации 2 пептонной воды) изучают рост на 2 пептонной воде и чашках с посевом нативного материала. Со второй пептониой воды проводят те же исследования, которые были выполнены с первой пептонной водой. На чашках выбирают колонии, типичные или подозрительные для холерного вибриона. Из наиболее подозрительных колоний готовят мазкн. окрашивают по Граму, изучают морфологию,, а также подвижность в раздавленной капле. Ставят ориентировочную реакцию агглютинации с Охолерной сывороткой, отсевают не менее 5 подозрительных колоний на лактозно-сахарозную среду. скошенный щелочной МПА, а также пробирку с бульоном. 2.5. Характерный рост в виде нежной, голубоватого цвета пленки иа 1% пептонной воде, характерная морфология (грамотрицательные, изогнутые, очень подвижные палочки), а в некоторых случаях положительная ориентировочная реакция агглютинации с пленки дают возможность определить холерный вибрион через 6-12 часов от начала исследования. 2.6. Для установления хемовара и биовара (Эль- Тор. классический) необходима идентификация выделенной чистой культуры на щелочном МПА или лактозо-сахарозной среде. 3.1. Для установления биовара (Эль-Тор. классический) необходима идентификация выделенной чистой культуры, выросшей на щелочном скошенном МПА или лактозо-сахарозной среде. 3.2. Изучить биохимические свойства в углеводном ряду. состоящем из маннозы, сахарозы и арабинозы. 3.3. Изучить фaголизабельность фагами С и Эль-тор 2. 3.4. Проверить чувствительность к полимиксяну, способность агглютинировать куриные эритроциты, гемолизировагь эритроциты барана. ЗАДАНИЕ № 163 В штате Западный Бенгал (Индия) возникли заболевания, проявляющиеся признаками гастроэнтерита. Испражнения рвотные массы у больных напоминали рисовый отвар. У некоторых больных наблюдалось до 40 дефекаций в день, и заболевшие вместе с испражнениями и рвотными массами теряли очень много жидкости, что приводило к обезвоживанию и обессоливанию организма. Поэтому у больных отмечались заострившиеся черты лица, Гасies choleгіса, осиплый голос. При осмотре мышцы контурированы (поза фехтовальщика), пульс нитевидный, сознание затемнено. Врач, осматривавший больных, поставил диагноз «холера?». Все больные госпитализированы, кал и рвотные массы направлены в лабораторию по диагностике осо- бо опасных инфекций, где произведен посев исследуемого материала на 1% щелочную пептонную воду и среду ТCBS. ЗАДАНИЯ 1. Составьте схему бактериологического исследования на холеру. 2. Какой из используемых тестов идентификаций вибрионов нужно использовать, если культуры не агглютинируются О-холерной сывороткой? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1. Бактериологическое исследование при подозрении на холеру заключается в выделении чистой культуры и ее идентификации на основании морфологических, культуральных, биохимических свойств, лизабельности специфическими фагами антигенной структуры. Исследование производят поэтапно, интервалы между этапами анализа должны быть максимально сближены, что дает возможность получить ответ в наиболее короткие сроки. ПЕРВЫЙ ЭТЛП. Исследуемый материал подвергают бактериоскопии и засевают питательные среды па жидкие и плотные для выделения чистой культуры, В качестве жидких питательных сред чаще всего используют щелочную 1% пептонную воду. Посевы желательно производить в большие объемы первой жидкой среды накопления, Первую и вторую жидкие среды накопления инкубируют в термостате 5-6 часов, посевы на плотных средах-10- 12 часов. При высеве плотные среды рекомендуется МПА селективной средой ТCBS. ВТОРОЙ ЭТАП: Через 6 часов инкубации изучается рост на первой среде накопления. Холерные вибрионы вследствие интенсивного роста на малопитательной среде щелочной реакции опережают рост сопутствующей флоры, дают гомогенную муть и скапливаются на поверхности среды в виде нежной, голубоватой, просвечивающейся пленки, в Которой вибрионы могут быть в чистой культуре. С первой среды накопления производят бактериоскопию окрашенных по Граму мазков, исследуют на подвижность и ставят ориентировочную реакцию агглютинации с О-холерной сывороткой. Производят пересев с первой среды накопления на которую- в пробирки с 5-10 мл 1% пептонной воды, а также сеют на чашке с простыми и селективными средами. Характерный рост в виде нежной, голубоватого цвета пленки на 1% воде, характерная морфология (грамотрицательные, изогнутые, очень подвижные палочки), а в некоторых случаях положительная ориентировочная реакция агглютинации с пленки дают возможность поставить предварительный диагноз через 6-12 часов от начала исследования. ТРЕТИЙ ЭТАП: (Через 10-12 часов от начала исследования). На этом этапе изучают рост на второй среде накопления и на чашке с посевом нативного материала. Со второй среды накопления проводят те же исселедования, которые на втором этапе были выполнены с первой среды накопления. Материал из второй пептонной воды накопления засевают на чашки с плотными средами, На чашках выбирают колонии, типичные или подозрительные для холерного вибриона. На простом щелочном МПА холерный вибрион дает круглые, гладкие, плоские, голубоватые, просвечивающие в проходящем слете, гомогенные с ровным краем колонии диаметром 1-2 мм, Консистенция колоний маслянистая, они легко снимаются и эмульгируются. На ТСBS через 10-18 часов колонии вибрионов плоские, окрашены в желтый цвет на фоне голубовато-серой среды. Сопутствующая флора на ТСBS в эти сроки. как правило, не растет. Рекомендуется брать для исследования не менее 5 подозрительных колоний. Из наиболее подозрительных колоний готовые мазки окрашивают по Граму, изучают морфологию, а также подвижность на раздавленной капле. Ставят ориентировочную реакцию аrтлютинации, отсевают на лактозо-сахарозную среду. скошенный щелочной МПА, а также в пробирку бульоном, Лактозо-сахарозную среду. скошенный агар инкубируют 10-12 часов, а пробирку с бульоном 3- часа при 37С. С молодой бульонной культурой ставят развернутую реакцию агглютинации с типовыми сыворотками, проверяют сахаролитические свойства для определения группы Хейберга посев на сахарозу, маннозу, арабинозу) и фаголизабельность с фагами С и Эль-Тор-2, что дает возможность в случае положительных результатов поставить днагноз через 18-24 часа от начала исследования. . ЧЕТВЕРТЫЙ ЭТАП: (Через 24-28 часов от начала исследования). Учет развернутой реакции фаголизиса и разложения сахаров, Холерные вибрионы ферментируют с образованием кислоты сахарозу и маннозу. Арабиноза остается без изменений. На основании этих тестов можно выдать ответ о выделении холерного вибриона. На четвертом этапе исследуют чашки, засеянные с пептонной воды по той же схеме, по ко- торой изучались чаши с посевом нативного матернала. Из посевов на лактозо-сахарозную среду отбирают культуры, ферментирующие сахарозу без газа и не разлагающие лактозу. Чистые культуры, выросшие на этой среде и на косом агаре, идентифицируются по вышеуказанным признакам (сахаролитические свойства, фаголизабельность специфическими фагами, аrглютинация типовыми сыворотками). По мере роста изучают оставшиеся посевы. Объем исследований по идентификации культур может быть различным в зависимости от того, необходимо ли ее провести только до вида V. cholerae (что является достаточным для практических лабораторий) или дать более детальную характеристику культуры с определением биотипа (Эль-Тор, классический). серотипа (Инаба. Огава) и фаготипа. Сроки выполнения исследования могут быть различными и зависят как от обсемененности исследуемого материала. так и от используемых питательных сред. Положительный ответ через 12-36, отрицательный - 24-48 часов. 2. Обязательным тестом является постановка реакции фаголизиса с типовыми фагами С (Мукерджи-IV) и Эль-Тор-2 определенные группы Хейберга (изучение сахаролитических свойств по отношенню к сахарозе, маннозе и арабинозе). ЗАДАНИЕ № 164 В инфекционное отделение города С. поступил ребенок Сережа К., 10 лет, с профузным поносом и рвотой и с симптомами обезвоживания (сухая кожа со сниженным тургором, охриплость голоса, цианоз, задержка мочеиспускания). В лабораторию особо опасных инфекций, которая проводила диагностику всех острых кишечных инфекций в этом городе, направлен исследуемый материал; рвотные массы. В рвотных массах обнаружены грамотрицательные подвижные, слегка изогнутые палочки. В этот период в городе отмечалась неблагоприятная эпидемическая ситуация по форме 30. ЗАДАНИЯ 1. Какой метод диагностики уже использовался и какое можно сделать предварительное заключение? 2. Составьте схему лабораторной диагностики указанной острой кишечной инфекции. ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1,1. Проводилось бактериоскопическое исследование рвотных масс. 1.2. Предварительное заключение- в рвотных массах обнаружены вибрионы. 2. При острой кишечной инфекции, в случае обнаружения в исследуемом материале вибрионов, используется бактериологический метод. 2.1. Исследуемый материал засевают в 1 щелочную 1% пептонную воду и чашки с щелочным МПА (можно использовать селективные среды Монсура и ТСВS). 2.2. Пептонную воду с посевом нативного материала выращивают 6 часов, чашки 12 часов (селективные среды 18-20 часов). 2.3. Через 6 часов изучают рост на 1 пентонной воде, В случае появления нежной, голубоватой пленки готовят мазки, один из них окрашивают по Граму; другом изучают подвижность (без окраски): обязательная постановка реакции агглютинации на стекле с О-холерной сывороткой. 2.4. Пересев на 2 щелочную 1% пептонную полу и чашки с щелочным МПА. 2.5. Через 12 часов от начала исселедования изучение роста на 2 пептонной воде и колоний, выросших на чашках с посевами нативного материала. 2.6. 2 пептонная вода: изучение морфологии в окрашенных мазках и подвижности, реакция агглютнации на стекле с О-холерной сывороткой. 2.7. Отбирают мелкие, прозрачные, слегка выпуклые, блестящие с голубым оттенком колонии (не менее 5 колоний) и отсевают на лактозо-сакарозную среду, щелочной скошенный МПА и мясопептонный бульон для выделения чистой культуры и окончательной идентификации. 2.8. Через 10-12 часов после инкубации в термостате изучают изменения в лактозо-сахарозной среде: производят посев в углеводный ряд, состоящий из лактозы, сахарозы и арабиннозы; определяют фаголизабельность фагами С и Эль-Тор 2: способность гемолизировать эритроциты барана. Такая схема идентификации позволяет определить хемовар и биовар вибрионов. 2.9. Определение серотипа заключается в постановке развернутой реакции агглютинации с типовыми сыворотками Инаба, Огава. 2.10. Предварительное заключение выделенной культуре можно сделать через 6-12 часов, окончательное через 36-48 часов. ЗАДАНИЕ № 165 Тов. С. оформлялся на работу в кафе на должность технолога по приготовлению холодных закусок. Для установления, не является ли он бактерионосителем патогенных энтеробактерий, в баклаборатории СЭС проводилось микробиологическое исследование кала методом копрокультуры. ЗАДАНИЯ 1. Какие питательные среды необходимо использовать для выделения бактерий-возбудителей кишечных инфекций? 2. Перечислите этапы исследования. 3. Обнаружение каких микроорганизмов в испражнениях тов. С. является противопоказанием к работе в сфере общественного питания? 4. Какие микроорганизмы могут быть выделены на этих средах? 5. Составьте схему дальнейшего исследования с целью выделения и идентификации указанных микроорганизмов. 6. Дайте заключение о возможности допуска тов. С. к работе в кафе. ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1.1. Селенитовую или магниевую среды обогащения для оптимального выделения шигелл и сальмонелл. 1.2. Дифференциально-диагностические среды: Плоскирева, висмут-сульфит агар, можно Эндо, Левина. 2.1. Посев исследуемого материала (испражнений) на селенитовую среду обогащения. 2.2. После 18-24 часов инкубации и изменений цвета среды -пересев на одну из вышеуказанных дифференциально-днагностических сред. 2.3. Изучение роста колоний после 18-24 часов инкубации. 2.4. Отсев подозрительных на сальмонеллы или шигеллы колоний на среду Олькеницкого. 2.5. Изучение изменений на среде Олькеницкого через 18-24 часа, определение морфологии культуры в окрашенных мазках, подвижности, агглютинация на стекле либо со смесью дизентерийных сывороток (Зонне, Флекснера) либо с поливалентной сальмонеллезной сывороткой групп АВСДЕ. 2.6. Определенне ферментативной активности в коротком пестром ряду Гисса. 2.7. В случае обнаружения шигелл Флекснера - агглютинация с типовыми сыворотками; в случае выделения сальмонелл сывороткой – агглютинация на стекле с адсорбированными монорецепторными О-и Нсальмонеллезными сыворотками. 2.8. При обнаружении шигелл – колицинотипирование: сальмонелл – фаготипирование культур. 2.9. Определение спектра чувствительности выделенных культур к антибиотикам, 3. Обнаружение сальмонелл, шигелл энтеропатогенных кишечных палочек является противопоказанием к допуску на работу в сферу общественного питания и водоснабжения. Использованные питательные среды не позволили обнаружить указанных Вами возбудителей кишечных инфекций при троекратном посеве копрокультуры. Поскольку в городе в данный период была неблагоприятная эпидемиологическая ситуация по форме N 30, в лаборатории особо опасных инфекций дополнительно произвели посев испражнений тов. С. на щелочной МПА и щелочную 1% пептонную воду. 4. На указанных средах могут быть выделены холерные и холероподобные вибрионы. При посеве на указанные среды через 6 часов на щелочной 1% пептонной воде появилась нежноголубоватая пленка, а на чашках с щелочным МПА через 10-12 часов инкубации -рост нежных, прозрачных, гладких, мелких колоний, имеющих голубоватый оттенок при изучении их в проходящем свете. 5.1. Изучение морфологии и подвижности мазках с 1% пептонной воды, постановка РА на стекле с Охолерной сывороткой; пересев на 2 пептонную воду и чашки с щелочным МПА или селективной средой TCBS. 5.2. Изучение морфологии, подвижности и РА с О-холерной сывороткой после 6 часов инкубации 2 пептонной воды. 5.3. Изучение через 12 часов от начала исследования испражнений роста колоний на щелочном МПА и через 20-24 часа среде ТСBS. Приготовление мазков подозрительных колоний, окраска по Граму; определение подвижности в раздавленной капле; реакция агглютинации на стекле с О-холерной сывороткой. Отсев не менее 5 подозрительных колоний на лактозо-сахарозную среду, щелочной скошенный МПА и мясопептонный бульон. 5.4. Идентификация выделенной культуры до хемо- и бновара по способности изменять лактозосахарозную среду; по ферментативным свойствам в' цветном ряду, состоящем из маннозы, сахарозы и арабинозы; фаголизабельности специфическими фагами С и Эль-Тор 2; способности гемолизировать эритроциты барана, чувствительности к полимиксину. 5.5. Определение серовара выделенной культуры в линейной реакции типовыми сыворотками Инаба, Огава. 6. При обнаружении в испражнениях холерного внбриона (классического, Эль-Тор, НАГ), тов. С. не может быть допущен к работе в кафе, т. к. он является бактерионосителем, Он нуждается в первоочередной санации и подлежит учету в санэпидстанции как возможный источник холеры. ЗАДАНИЕ № 166 Через 3 недели после приезда в очаг, неблагополучный по туларемии, заболел охотник Н. В течние 5 днсй у него были озноб, повышенная температура (38'С), повышенная потливость, головная боль, разбитость, боли в мышцах. При обследовании обнаружены увеличенные шейные лимфоузлы. Предполагая, что у больного туляремия и зная, что ранним методом диагностики этого заболевания является аллергическая проба, врач поставил внутрикожную пробу с туляривом. Через 48 часов в месте введения аллергена появились гиперемия и отек диаметром 1 см. ЗАДАНИЯ 1. Произведите учет этой пробы. 2. Что собой представляет тулярия? 3. Можно ли, используя данные, изложенные в условии задачи и полученные при постановке аллергической пробы, поставить диагноз «туляремия»? Если нет, то почему? 4. Что нужно предпринять для выяснения этиологии заболевания? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1. Проба положительная, так как положительной она считается при наличии гиперемии и отека диаметром 0,5 см и более. 2. Это взвесь убитых нагреванием при 70° в течение 1 часа туляремийных бактерий вакцинного штамма в физиологическом растворе, содержащем 3% глицерина. В 1 мл препарата 500 млн. бактериальных клеток. 3. Нет, так как проба эта может быть положительной после прививки и перенесенного заболевания. 4. Уточнить: а) не болел ли раньше туляремией; б) не вводили ли ему перед отъездом на работу в данную местность туляремийную вакцину. Провести серологическую диагностику, поставить реакцию агглютинации или непрямую реакцию гемагглютинации Задание 167 Больному который предъявил жалобы на лихорадку сопровождающуюся познабливанием с небольшим потоотделением и у которого при осмотре был обнаружен увеличенный малоболезненный с четкими контурами лимфатический узел (бубон) врач поставил аллергическую пробу с тулярином и взял кровь для реакции агглютинации. Через 48 часов он пришел к заключению что заболевание вызвано Francisella tularensis Вопрос: Какие результаты исследований позволили врачу прийти к выводу что человек болен туляремией? Ответ: Положительная аллергическая проба (припухлость и покраснение более 0,5 см) и положительная реакция агглютинации с туляремийным диагностикумом в разведении 1:100 Задание 168 Обследовав больного К который предъявил жалобы на высокую температуру головную боль боли в мышцах и у которого отмечались резкий отек век гиперемия конъюнктив бубон в околоушной области слева врач поставил диагноз “глазо-бубонная форма туляремии” и направил отделяемое из конъюнктивы глаза в лабораторию особо опасных инфекций. Исследуемый материал посеяли на свернутую желточную среду ввели подкожно белой мыше и приготовили из него мазок. Животное погибло на 5-й день после введения материала на питательной среде к этому времени роста не было а в мазках обнаруживались мелкие грамотрицательные колонии Вопрос: Являются ли полученные результаты исследования подтвержденным тому что заболевание вызвано Francisella tularensis? Ответ: Да так как в мазке обнаружены грамотрицательные мелкие палочки. То что нет роста на средах тоже в какой-то степени подтверждает предположение о том что в исследуемом материале находятся возбудители туляремии. Полученные культуры непосредственно от больного почти всегда дают отрицательные результаты Вопрос: Какими последующими исследованиями можно доказать что лабораторное животное погибло от туляремии? Ответ: Вскрыть животное доказать из органов сделать мазки-отпечатки и посев на свернутую яичную среду. Полученную культуру подвергнуть микроскопическому бактериологическому и биологическому исследованиям Задание 169 У больного врач заподозрил бубонную форму туляремии (температура 39,5 головная боль боли в икроножных мышцах вскрывшийся малоболезненный бубон) и решил выделить из гноя микробов и установить их видовую принадлежность Вопрос: В какого типа лаборатории можно провести исследование? Ответ: В лаборатории особо опасных инфекций. Бактериологическая работа с возбудителем должна проводиться с обязательным соблюдением режима безопасности регламентированной соответствующими инструкциями Вопрос: Какой материал можно взять от больного на исследование? Ответ: Гной Вопрос: В чем особенность бактериологического метода исследования на туляремию? Ответ: Выделить культуру туляремийного микроба из организма больного непосредственными высевами удается исключительно редко. Бактериологическое подтверждение диагноза может получено лишь путем заражения материалом взятым от больного чувствительных к инфекции лабораторных животных с последующим выделением от этих животных и идентификацией возбудителя Задание 170 У охотника за ондатрами повысилась температура тела до 39 появились головные боли разбитость на коже в области шеи образовались неглубокая язва. Больным считает себя 10 дней. При обследовании отмечено что дно язвы покрыто серозно-гнойным отделяемым реактивные явления не выражены язва малоболезненная шейный лимфатический узел увеличен лицо и конъюнктивы гиперемированы. Из соскоба с язвы был приготовлен мазок окрашен по методу Грама в нем были выявлены грамотрицательные очень мелкие кокковидные и палочковидные микробы не имеющие спор и капсул Вопрос: Какие предположения вы можете сделать по поводу этиологии данного заболевания? Ответ: Что это заболевание вызвано Fr tularensis Вопрос: Какие исследования необходимо еще проделать для подтверждения вашего предположения? Ответ: Поставить аллергическую пробу с тулярином Учитывая что 10-й день болезни можно определить антитела к туляремийным микробам в реакции агглютинации В ряде случаев также прибегают к реакции пассивной гемагглютинации обладающей большей чувствительностью чем реакция агглютинации Задание 171 Больной К ветфельдшер обратился к врачу с жалобами на потливость волнообразную лихорадку головную и мышечные боли боли в суставах. При клиническом обследовании поставлен диагноз “бруцеллез?”. Больному назначены дополнительные лабораторные исследования для подтверждения или исключения предварительного диагноза Вопрос: Какие методы лабораторной диагностики можно использовать в обычных микробиологических лабораториях для уточнения диагноза? Ответ: Серологические реакции и аллергические пробы Вопрос: Перечислите серологические реакции которые можно применить для диагностики Ответ: Реакция Райта Хеддлсона опсонофагоцитарная проба РСК РНГА Вопрос: С какого дня заболевания ставится реакция Райта Ответ: В начале второй недели заболевания Вопрос: Что берется в качестве диагностикума в реакции Райта? Ответ: Взвесь убитых бруцелл окрашенных генциановым фиолетовым Вопрос: По каким критериям вы оцениваете положительную реакцию Райта? Ответ: Положительная- при разведении сыворотки больного 1:200; сомнительная- 1:50 Вопрос: У кого реакция Райта может быть положительной? Ответ: У больных и привитых Вопрос: Как отличить по реакции Райта больных от привитых? Ответ: Необходимо повторно поставить реакцию Райта с целью выявления нарастания титра антител которое свидетельствует о заболевании. При прививочных реакциях отсутствует нарастание титра антител в исследуемом сыворотке Задание 172 Больной А 30 лет вет фельдшер работает на животноводческой ферме обратился к врачу с жалобами на боли в мелких и крупных суставах лихорадку недомогание потливость по ночам. Болен около месяца. Учитывая что больной работает на животноводческой ферме и соответствующие жалобы врач заподозрил у него бруцеллез. В этом поселке где проживает больной и находится районная больница нет лаборатории для диагностики особо опасных инфекций Вопрос: Какой материал взятый у этого больного подлежит исследованию в обычной микробиологической лаборатории? Напишите направление в лабораторию Ответ: Сыворотка крови больного Направление: больной А 30 лет Диагноз бруцеллез Направляется кровь для проведения серологической диагностики Врач Дата Вопрос: Какие реакции можно применить для ускоренной диагностики? Ответ: Реакция агглютинации бенгальского розового с кислым антигеном Вопрос: Расскажите о ходе постановки реакции выбранной вами в ответ на вопрос 2 Ответ: На пластины наносят по 0,03 мл цельной сыворотки больного и антигена с красителем бенгальским розовым и буферным растворителем Вопрос: Что используется в качестве антигена в выбранной вами в п 2 реакции? Ответ: взвесь убитых нагреванием бруцелл с использованием буферного растворителя и красителя бенгальского розового Вопрос: Когда и как вы произведете учет этой реакции Ответ: Через 4 минуты учет. Наличие крупно или мелкозернистого агглютината – положительная реакция Задание 173 При плановом обследовании доярок совхоза где ранее отмечались заболевания бруцеллезом коров была поставлена кожно-аллергическая проба Бюрне. У пяти из 30 проба Бюрне положительная. Учитывая что в данном районе на протяжении ряда лет регистрируются случаи бруцеллеза среди животных все работники животноводческих ферм прививались против бруцеллеза Вопрос: C какой целью была поставлена кожно-аллергическая проба Бюрне? Ответ: Для выявления гиперчувствительности замедленного типа к бруцеллину Вопрос: Можно ли на основании положительной реакции Бюрне прийти к заключению что данные лица больны бруцеллезом? Ответ: Нет Положительная реакция бюрне отмечается не только у больных но и у вакцинированных людей Вопрос: Как ставится проба Бюрне? Ответ: На ладонной поверхности предплечья обследуемому строго внутрикожно вводят 0,1 мл бруцеллина Вопрос: Через какое время учитывается проба Бюрне и как правильно оценить положительную и отрицательную реакцию Бюрне? Ответ: Реакция Бюрне учитывается через 24-48 часов Резко положительной считают реакцию если на месте введения появляется гиперемированный болезненный инфильтрат размером 3Х3 и более. Отсутствие гиперемии болезненности и инфильтрата свидетельствует об отрицательной реакции Вопрос: К какому типу аллергических реакций относится проба Бюрне? Ответ: К гиперчувствительности замедленного типа Вопрос: Что такое бруцеллин? Ответ: Фильтрат 3-4 недельной убитой нагреванием бульонной культуры трех основных видов бруцелл: melitensis abortus suis Задание 174 У ребенка 7 лет поставлен диагноз “ангина”. Врач с целью дифференциальной диагностики двумя тампонами взял материал из зева и направил в баклабораторию. На среде Леффлера появился рост напоминающий шагреневую кожу Вопрос: Какие микроорганизмы могут дать такой рост? Ответ: Возбудители дифтерии Вопрос: Зачем забор материала врач произвел двумя ватными тампонами? Ответ: Одним тампоном готовят мазок а другим производят посев на питательные среды Вопрос: Как будете окрашивать мазки из культуры выросшей в виде шагреневой кожи? Ответ: Метод Грама Леффлера Нейссера Вопрос: На какие характерные морфологические признаки необходимо обратить внимание при микроскопии окрашенного мазка? Ответ: Грамположительные палочки и наличие волютиновой зернистости Дифтерийные бактерии располагаются в виде скоплений напоминающих войлок или горсть булавок брошенных на стол Отдельные пары дифтерийных бактерий располагаются под углом в виде римской цифре V Задание 175 В бактериологическую лабораторию доставлен материал от больного ребенка с подозрением на дифтерию. Материал взят для исследования с пленок грязно-серого цвета находящихся на миндалинах. Из исследуемого материала приготовлены мазки и окрашены сложными методами Вопрос: Целесообразно ли в данном случае проводить бактериоскопию исследуемого материала? Ответ: Да так как при наличии в мазках типичных дифтерийных палочек с волютиновыми зернами на полюсах клетки можно поставить предварительный диагноз “дифтерия зева” Вопрос: Какие методы окраски нужно использовать для выявления этих бактерий? Ответ: Метод Грама Нейссера Леффлера Вопрос: На основании каких данных можно в этом мазке определить дифтерийные палочки? Ответ: В мазках окрашенных по Граму коринебактерии дифтерии- грамположительные располагаются попарно под острым или прямым друг к другу. Характерна также неравномерность окраски тела каждой клетки. Особенно интенсивно окрашиваются волютиновые зерна, которые расположены на полюсах клеток дифтерийных бактерий. Поэтому в мазке дифтерийные бактерии напоминают пакет булавок. При окраске по Нейссеру зерна волютина приобретают сине-черный цвет контрастирующий со светлокоричневой окраской всей микробной клетки Окраска по Леффлеру щелочным метиловым синим- волютиновые зерна приобретают интенсивно синюю окраску, микробная клетка имеет более бледный цвет Задание 176 При оформлении на работу воспитательницей в детский сад Звездочка гражданка М проходила тщательное медицинское обследование. Из материала слизистой носа и глотки у нее были выделены дифтерийные палочки. Со слов воспитательницы М респираторными инфекционными болезнями в течение года она не болела а дифтерией вообще никогда не болела чувствует себя совершенно здоровой Вопрос: Как был сформулирован ответ из баклаборатории проводившей исследования материала взятого из слизистой носа и глотки воспитательницы М? Ответ В исследуемом материале гражданки М обнаружены C diphteriae не обладающие токсигенностью Вопрос: Как проводилось исследование на наличие дифтерийных микробов материала воспитательницы М и какие данные позволили бактериологу дать вышеуказанное заключение? Ответ: Исследуемый материал подвергался предварительному бактериоскопическому изучению после окраски мазков по Граму Леффлеру Нейссеру Параллельно проводился посев на элективные питательные среды свернутую сыворотку и кровянойтеллуритовый агар Изучение выросших колоний после инкубации при температуре 37 в течение 18-24 часов Колонии дифтерийных палочек на теллуритовых средах черные мелкие круглые плоско-выпуклые с четко выраженным более темным центром. Колонии типа gravis обычно тусклые матовые более четко выражена зазубренность края. Колонии типа mitis и intermedius мельче и блестящие Для выделения чистых культур и изучения их свойств отбирают подозрительные колонии и пересевают на скошенную свернутую сыворотку а также засевают в виде бляшки на поверхность фосфатно-пептонного агара для определения токсигенности Через 20-24 часа производят бактериоскопию окрашенных по Граму Леффлеру и Нейссеру мазков из культуры выросшей на свернутой сыворотке и проводят идентификацию Чистую культуру сеют в среде пестрого ряда среду с цистином- проба на цистиназу среду с мочевиной. Одновременно проводят реакцию агглютинации на стекле с моноспецифическими дифтерийными сыворотками 1-4-го серовара Вопрос: Можно ли воспитательницу М допустить к работе в детском садике? Ответ: Да но обязательно проводить лечение Вопрос: В чем нуждается воспитательница М и что вы рекомендуете предпринять в данной ситуации? Ответ: В первую очередь одна должна была тщательно обследована оториноларингологом для выявления возможности хронического патологического процесса в носоглотке Определить тип носительства дифтерийных микробов по длительности выделения микробов то есть нужно проводить повторные бактериологические исследования слизи из носоглотки у этой воспитательницы Приводить лечение направленное на ликвидацию выявленного носительства Обязательная регистрация в СЭС у врача-эпидемиолога Вопрос: Как часто можно получить такие результаты при исследовании материала со слизистой на наличие дифтерийных бактерий Ответ: Часто особенно носительство атоксигенных дифтерийных микроорганизмов Задание 177 Врачу-педиатру В который два месяца назад приступил к работе после окончания интернатуры и обслуживает детский сад номер 140 Лилия необходимо провести в этом детском коллективе работу по профилактике инфекционных заболеваний дифтерии коклюша и столбняка Вопрос: Какие препараты могут быть использованы для этой цели? Дайте характеристику составным компонентам этого препарата Ответ: Активную иммунизацию против дифтерии осуществляют в плановом порядке сочетая ее с иммунизацией против коклюша и столбняка с использованием различных препаратов содержащих дифтерийный анатоксин В настоящее время применяют следующие препараты АД-анатоксин- адсорбированный дифтерийный анатоксин АДС-анатоксин-адсорбированный дифтерийно-столбнячный анатоксин Адсорбированный дифтерийно-столбнячный анатоксин с уменьшенным содержанием антигенов АКДС-вакцина-адсорбированную коклюшно-дифтерийно-столбнячную вакцину АД-анатоксин- очищенный концентрированный дифтерийный анатоксин адсорбированный на гидрате окиси алюминия АДС-анатоксин- ассоциированный препарат включающий смесь очищенных концентрированных дифтерийного и столбнячного анатоксинов адсорбированных на гидрате окиси алюминия АДС- с уменьшением содержания антигенов отличатся от АДС-анатоксина обычного состава уменьшенным содержанием в нем обоих компонентов АКДС-вакцина- ассоциированный препарат включающий смесь коклюшной вакцины и очищенных концентрированных дифтерийного и столбнячного анатоксинов адсорбированных на гидрате окиси алюминия Как выяснил врач дети старшей и средней групп уже прививались АКДС и врач оказался в затруднительном положении. Он обратился в районную санэпидстанцию к врачу-эпидемиологу с просьбой оказать содействие в проведении профилактических прививок против вышеуказанных инфекций Вопрос: Составьте схему профилактических мероприятий которые будут проводить врач-педиатр и врачэпидемиолог Ответ: Плановой вакцинации подлежат все здоровые дети которые должны быть предварительно обследованы врачом-педиатром с учетом данных анамнеза и осмотрены с обязательной термометрией непосредственно перед прививкой Врач отвечает за правильный отбор детей Родителей нужно оповестить При отборе детей нужно строго придерживаться перечня медицинский противопоказаний Ряд из которых является временным что делает возможным проведение вакцинации после пересмотра противопоказаний. Непривитые дети остаются восприимчивыми к инфекциям поэтому должны быть под особым наблюдением и привиты после снятия противопоказаний. Дети получившие прививку прививку против какой-либо инфекции могут быть привиты не ранее чем через 2 месяца АКДС-вакциной прививают не болевших коклюшем детей до 6 лет Курс состоит из трех внутримышечных инъекций препарата с интервалом 30-40 дней что обеспечивает развитие напряженного иммунитета в максимально короткие сроки от начала иммунизации. Первая ревакцинация проводится АКДС-вакциной через 1,5-2 года после окончания курса вакцинации поэтому для ревакцинации нужно отобрать детей уже получавших вакцину АКДС- по записям которые имеются в индивидуальных картах развития ребенка АДС-анатоксином прививают детей переболевших коклюшем детей старше 6 лет ранее не привитых АКДС вакциной и детей имеющих противопоказания к прививкам АКДС-вакцины Эти вопросы решает врач-педиатр при изучении индивидуальных карт развития ребенка и других данных полученных из анамнестических данных и осмотре детей Задание 178 В настоящее время заболеваемость дифтерией резко уменьшена а в некоторых городах и районах не регистрируются. Вместе с тем отмечаются отдельные эпидемические вспышки с тяжелым течением поздней диагностикой и естественно поздним началом специфического лечения. Снижения заболеваемости связано с широкой иммунизацией детей вакциной АКДС АДС и АД анатоксином Вопрос: Из каких компонентов состоят АКДС АДС АД как их получают когда и как применяют? Ответ: АКДС-вакцина- ассоциированный препарат включающий смесь коклюшной вакцины и очищенных концентрированных дифтерийного и столбнячного анатоксинов адсорбированных на гидроокиси алюминия АДС-анатоксин- ассоциированный препарат включающий смесь очищенных концентрированных дифтерийного и столбнячного анатоксинов адсорбированных на гидрате окиси алюминия АД-анатоксин- очищенный концентрированный дифтерийный анатоксин адсорбированный на гидрате окиси алюминия Плановые прививки осуществляются в рамках календаря профилактической иммунизации предусматривающего проведение вакцинации и ревакцинации. АКДС-вакциной прививают не болевших коклюшем детей до 6 лет. Курс состоит из 3-х внутримышечных инъекций препарата с интервалом 30-40 дней что обеспечивает развитие напряженного иммунитета в максимально короткие сроки от начала иммунизации АДС-анатоксином прививают детей переболевших коклюшем детей старше 6 лет ранее не привитых АКДС-вакциной и детей имеющих противопоказания к прививкам АКДС-вакциной. Курс вакцинации АДСанатоксином состоит из 2 внутримышечных инъекций с интервалом 30-40 дней Вопрос: Какой антимикробный или антитоксический иммунитет приобретает дети после проведения иммунизации АДС и АД препаратами? Ответ: Дети приобретают антитоксический иммунитет Вопрос: Препятствует ли циркуляция дифтерийных штаммов в человеческой популяции иммунизации вакцинами АКДС АДС АД? Ответ: Вакцинация указанными препаратами не препятствует циркуляции дифтерийных коринебактерий в коллективах так как при вакцинации создается антитоксический иммунитет Вопрос: Как вы думаете каким путем будет решаться вопросы ликвидации дифтерии в нашей стране а может быть и на нашей планете? Ответ: Одним из перспективных направлений в ликвидации дифтерии является создание препаратов обеспечивающих стойкий и напряженный антимикробный иммунитет Другим направлением может быть создание условий на слизистой оболочке которые будут препятствовать размножению дифтерийных коринебактерий Нужно думать о синтезе таких препаратов которые будут способствовать повышенному синтезу секреторных иммуноглобулинов А повышать бактерицидные свойства слизи носоглотки то есть будут непосредственно активизировать местный иммунитет Задание 179 Врача-педиатра вызвали к заболевшему 3-летнему мальчику Вове Т. Как сообщили родители ребенок болен уже сутки. Заболевание началось с повышения температуры до 38,5 и однократной рвоты. Жаловался на боли в горле при глотании появились одутловатость лица и адинамия. Обычно энергичный бегающий малыш прыгающий малыш был малоподвижен сонлив. При осмотре зева были видны грязно-белые пленки на миндалинах переходящие на дужки. Врач заподозрил дифтерию и немедленно машиной скорой помощи ребенок был доставлен в боксированное отделение детской инфекционной больницы. У больного был взят исследуемый материал и направлен в баклабораторию. Вопрос: Каким образом был взят исследуемый материал и что отправил врач в баклабораторию для подтверждения диагноза? Ответ: Для взятия материала используют стерильные сухие ватные тампоны тампон погружают в среду обогащения Материал лучше брать натощак. Перед взятием материала нужно ослабить пробку в пробирке чтобы она быстро вынималась и придерживая корень языка шпателем брать материал под контролем глаза не касаясь языка слизистой оболочки щек и зубов с наиболее пораженного места. При наличии налетов материал следует брать с границы пораженных и здоровых тканей слегка нажимая на них тампоном. Материал забирают двумя тампонами. Если имеется дифтеритическая пленка можно снять часть ее пинцетом если она поддается взятию. Отправлять материал в лабораторию следует как можно быстрее и по доставке немедленно засевать на питательные среды Вопрос: Какие исследования необходимо провести чтобы подтвердить или опровергнуть предполагаемый диагноз? Ответ: Бактериоскопическое исследование Один из доставленных тампонов используют для проведения бактериоскопического исследования. Готовят 3 мазка которые после фиксации в пламени горелки окрашивают один- по граму второй- синью леффлера третий- по нейссеру. В мазках приготовленных из пленки коринебактерии дифтерии имеют вид единичных палочек расположенных под углом подобно цифре V или растопыренным пальцам реже они образуют скопления напоминающие войлок или рассыпанные булавки. По граму они окрашиваются положительно. При окраске синью леффлера на полюсах клетки отчетливо выявляются интенсивно окрашенные гранулы волютина. При окрашивании по Нейссеру зерна волютина приобретают сине-черный цвет контрастирующий со светло-коричневой окраской всей микробной клетки. Ложно дифтерийные бактерии и дифтероиды располагаются параллельно и лишены гранул волютина Бактериологическое исследование Исследуемый материал из второго тампона засевают на одну из элективных сред в пробирку со свернутой сывороткой и в чашку Петри с теллуритовым кровяным агаром хинозольной средой Бучина При выделении коринебактерий дифтерии рекомендуется постоянно использовать одну из указанных сред так как это позволяет получать более четкие и сравнимые результаты. При посеве материал втирают тампоном в поверхность среды. Посевы выращивают в термостате при температуре 37 и исследуют спустя 2024 часа. Учитывая что на свернутой сыворотке коринебактерии дифтерии вырастают раньше других микроорганизмов в виде мелких несливающихся колоний можно проводить исследование и раньше- через 612 часов Выросшие на чашке колонии рассматривают с помощью лупы. Колонии дифтерийных палочек на теллуритовых средах через 18-24 часа черные мелкие круглые плоско-выпуклые с четко выраженным более темным центром. Колонии типа gravis обычно крупные тусклые матовые выражена зазубренность края. Колонии типа mitis и intermedius мелкие блестящие с гладким краем. Дифтероиды растут в виде выпуклых влажных колоний серого или коричневого цвета. Ложнодифтерийные палочки образуют сухие мелкие слизистые колонии серого цвета. Для получения чистой культуры и определения токсигенности подозрительные колонии микроскопируют пересевают на сывороточную среду и в чашки с фосфатнопептонным агаром для определения токсигенности Чистые культуры микроскопируют сеют в среды пестрого ряда среду с цистином- проба на цистиназу среду с мочевиной. Одновременно проводят реакцию агглютинации на стекле с моноспецифическими дифтерийными сыворотками 1-4-го сероваров. На чашках с фосфатно-пептонным агаром учитывают результаты определения токсигенности. Вопрос: На основании каких свойств выделенной чистой выделенной чистой культуры можно утверждать что это дифтерийная палочка? Ответ: При обнаружении грамположительных палочек располагающихся в препарате в виде цифры V или растопыренных пальцев зерен волютина на полюсах, дающих положительную пробу на цистиназу и специфические линии преципитации на фосфатно-пептонном агаре с анатоксической сывороткой можно такую культуру идентифицировать как токсигенные дифтерийные коринебактерии. Вопрос: Какой препарат необходимо обязательно включить в комплекс лечебных мероприятий как он готовится дозируется и вводится? Ответ: Противодифтерийную сыворотку очищенную и концентрированную методом Диаферм 3 ИЭМ АМН Противодифтерийная сыворотка используется главным образом с терапевтической целью. Основным фактором обеспечивающим эффективность лечения является максимально ранее от начала заболевания ее применения Сыворотку вводят подкожно или внутримышечно в любом случае после определения чувствительности к лошадиному белку при помощи внутрикожной пробы Дозировка сыворотки зависит от тяжести заболевания. В данном случае можно назначить 20000МЕ Если однократное введение сыворотки не даст достаточного клинического эффекта препарат можно ввести повторно Противодифтерийную сыворотку получают из крови лошадей гипериммунизированных дифтерийным анатоксином. Сыворотку пере выпуском практику подвергают очистке и концентрации методом ферментативного гидролиза. Действующим началом препарата является дифтерийный антитоксин способный нейтрализовать действие дифтерийного токсина Вопрос: Что нужно провести в очаге откуда был госпитализирован больной? Ответ: Нужно провести дезинфекцию помещения где жил больной ребенок дезинфекцию игрушек и предметов обихода с которым обращался обращался больной. Все эти мероприятия необходимо провести после госпитализации ребенка. Кроме того нужно провести бактериологические исследования отделяемого носоглотки родителей мальчика для исключения возможного бактерионосительства. Вопрос: С какой целью и какие исследования необходимо провести после выздоровления ребенка (перед выпиской из стационара)? Ответ: Перед выпиской из стационара у ребенка нужно взять на исследование слизь из носоглотки сухим стерильным ватным тампоном и отправить в баклабораторию для проведения бактериологического исследования. Бактериологическое исследование слизи из носоглотки у реконвалесцентов проводится однократно с целью обследования на носительство дифтерийных бактерий. Такое исследования проводятся по эпид-показаниям так как носители являются активными источниками инфекции. Выявленные носители подлежат лечению Задание 180 Больной К жалуется на быструю утомляемость плохой сон пониженный аппетит головные боли потливость по ночам и ранним утром лихорадку по типу субфебрильной (до 37,5) кашель с гнойной мокротой. На основании клинических и рентгенологических данных врач заподозрил у больного туберкулез легких Вопрос: Назовите возбудителя чаще всего вызывающего эту форму заболевания Ответ: Человеческий тип возбудителя туберкулеза Вопрос: Какой материал от больного необходимо взять для исследования? Ответ: Мокроту Вопрос: Каким методом диагностики можно выявить возбудителя в исследуемом материале? Ответ: Микроскопичеким Вопрос: Какой метод окраски мазков применяется для выявления возбудителя? Ответ: Окраска по цилю-нильсену Вопрос: Как выглядят возбудители в мазке из исследуемого материала? Ответ: На голубом фоне рубиново-красные тонкие палочки прямые или слегка изогнутые располагаются по одиночке или неправильными группами Вопрос: Как поступить если первичная микроскопия дает отрицательный результат при наличии типичных клинических симптомов? Ответ: Применить методы обогащения исследуемого материала Вопрос: Перечислите методы обогащения которые можно использовать в этом случае? Ответ: Гомогенизация флотации Задание № 181 Из центрифугата утренней порции мочи, взятой у больного с подозрением на туберкулез почек, был приготовлен мазок и окрашен по Цилю-Нильсену. В мазке обнаружены единичные кислотоустойчивые микробы имеющие палочковидную форму. Задания 1. Эталоны ответов Можно ли на основании проведенного исследования установить 1. Нет, нельзя этнологию заболевания? 2. Микобактерии смегмы. 3. Произвести длительное ( в течении 2. Какая сапрофитная микрофлора может определяться в мазке из мочи? 3. Как можно отдифференцировать сапрофитную микрофлору от 45 -60 мин.) обесцвечивание в 3 % солянокислом спирте мазков, окрашенных по Цилю-Нильсену. туберкулезной палочки в мазках, окрашенных по Цилю-Нильсену? Задание № 182 При лабораторном исследовании мокроты больного в микропрепарате обнаружены тонкие, длинные, слегка изогнутые или короткие, окрашенные в ярко-красный, рубиновый цвет, палочки, располагающиеся в виде жгутов («кос»). Задания 1. Назовите возбудителя заболевания. 2. Каким методом диагностики выявился возбудитель? 3. Как проводился этот метод диагностики? 4. Под влиянием какого фактора микроколонии имеют вид жгутов? («кос»). 1. M. tuberculosis. 2. Ускоренным методом микрокультур Прайса 3. Мокроту наносят толстым слоем на несколько стерильных предметных стекол. Высушенный препарат обрабатывают 5 минут 6 % серной кислотой и промывают в изотоническом растворе натрия хлорида. Культивируют в цитратной крови. Через 4872 часа препараты извлекают, фиксируют и окрашивают по Цилю-Нильсену. 4. Эталон ответов Под влиянием липидной фракции микобактерий ( корд-фактора). Задание № 183 При медицинском обследовании учащихся 1 класса поставлена проба Манту. Из 35 учащихся у 15 проба Манту была отрицательной. Задания 1. С какой целью были поставлены пробы Манту? 2. Как ставится проба Манту? 3. Какие препараты используют для постановки пробы Манту? 4. Через какое время и как проводится учет реакции Манту? 5. О чем свидетельствует положительная и отрицательная проба Манту? 6. Что необходимо сделать детям с отрицательной пробой Манту? 7. Каким препаратом и как проводится вакцинация и ревакцинация против туберкулеза? Эталоны ответов 1. С целью отбора учащихся для ревакцинации против туберкулеза и для эпидемиологического исследования инфицированности туберкулезом 2. На ладонную поверхность средней трети предплечья строго внутрикожно вводят 0,1 мл туберкулина. 3.1. Туберкуливы ( РРД; ППД-Л). 3.2. Более стабильным является туберкулин РРД – очищенный белок, приготовленный из фильтров культур микробактерий человеческого и бычьего типов, выращенных на синтетической среде. 4.1 Учитывается поперечный диаметр инфильтрата, если он не превышает 1 мм – реакция отрицательная. Положительной считается реакция при размере инфильтрата не менее 5 мм. 5.1. Проба Манту бывает положительной, если учащийся инфицирован микобактериями или 5. сохранилось аллергическое состояние после введения туберкулезной вакцины. Отрицательная реакция Манту свидетельствует о неинфицированности организма учащихся туберкулезными палочками. 6. Ввести вакцинацию 7.1 Вакцинация БЦЖ. 7.2 Вакцину вводят внутрикожно на наружную поверхность плеча левой руки – доза 0,05 мг БЦЖ в объеме 0,1 мл. 7.3 Первая прививка всем детям на 5 -7-й день жизни при отсутствии противопоказаний, первая вакцинация в 7 лет, вторая - в 12, третья - в 17 лет. Последующие ревакцинации с интервалом в 5 -7 лет до 30-летнего возраста. Задание № 184 Больной П. жалуется на боли в области поясницы, учащенные позывы на мочеиспускание, небольшие подъемы температуры ( до 37,5). Моча мутная ( гной, лейкоциты). При бактериологическом исследовании мочи туберкулезные палочки не выявлены. Посевы мочи на гноеродную микрофлору отрицательные. Клинически – туберкулез почек. Задания 1. Какой еще метод лабораторной диагностики Вы рекомендуете применить для уточнения диагноза заболевания? 2. Сколько времени находится животное под наблюдением и как его исследуют? 3. Какой метод окраски мазков рекомендуется применить для выявления туберкулезных палочек? Эталоны ответов 1. Биологический Заразить подкожно в паховую область неследуемым материалом морскую свинку 2. Через 2-3 недели зараженную морскую свинку взвешивают, определяют наличие и размеры регионарных лимфатических узлов. Для выявления инфицированности животного микробактериями ставят пробу Манту. Если на месте введения образуется покраснение и припухлость, это свидетельствует о том, что животное инфицировано туберкулезными бактериями. Через 2-4 месяца морская свинка погибает. О вирулентности штамма судят по количеству специфических изменений и органах, продолжительности жизни животного, падению массы тела. 3. Метод Циля-Нильсена. Окраска микроорганизмов по методу Циля-Нильсена включает следующие этапы: 1. Фиксированный мазок покрывают полоской фильтровальной бумаги и наливают на нее феноловый фуксии Циля ( можно пользоваться фильтровальной бумагой, предварительно пропитанной красителем и высушенной). Мазок подогревают над пламенем горелки до появления паров, затем отводят в сторону до охлаждения и добавляют новую порцию красителя. Подогревание повторяют 2-3 раза. После охлаждения снимают фильтровальную бумагу и промывают препарат водой. 2. Препарат обесцвечивают путем погружения или нанесения на него 5% раствора серной кислоты и промывают несколько раз водой. 3. Окрашивают препарат водно-спиртовым раствором метиленового синего 3-5 мин, промывают водой и высушивают. При окраске по методу Циля-Нильсена кислотоустойчивые бактерии приобретают интенсивно красный цвет, остальная микрофлора окрашивается в светло-синий. Задание № 185 Больная Д. обратилась к врачу по поводу обильных розовато-красных пятен на туловище и конечностях. На половых органах обнаружены свежие следы заживших язв. В паховых областях пальпируются слегка увеличенные лимфоузлы. С диагнозом «сифилис» больная направлена в венерологический диспансер. Задания 1. Какие исследования Вам необходимо назначить больной для подтверждения этого диагноза? 2. На основании каких данных можно прийти к заключению об этиологии заболевания больной Д.? Эталоны ответов 1. Микроскопическое исследование пункта лимфоузлов, серологические исследования крови 2. Предварительный диагноз можно поставить только на основании клинических данных и соответствующего анамнеза. Окончательный диагноз можно восстановить только на основании данных комплекса бактериоскопического и крови ( реакция Вассермана, осадочные серологических исследований сыворотки реакции). Задание № 186 Больной обратился с жалобами на появление двух язв на головке полового члена, которые появились 12 дней назад. За три недели до заболевания имел случайную половую связь с малознакомой женщиной. Микроскопическое исследование нативного мазка, приготовленного из отделяемого язвы, позволило обнаружить подвижные, спиралевидной формы бактерии, которые совершали поступательные, вращательные, сгибательные движения. Число оборотов спирали возбудителя – от 8 до 12. Завитки равномерны, вверху закруглены, расстояния между ними одинаковые , по направлению к концам уменьшаются. Задания 1. Какой микроорганизм обнаружен специалистом при исследовании препарата? 2. Какие основные морфологические признаки позволили его опознать? 3. Какой метод микроскопии использовался в этом случае? Эталоны ответов 1. В данном случае в препарате обнаружены бледные трепонемы. Клиническая картина, анамнез, типичная морфологическая картина возбудителя позволяют поставить диагноз «сифилис» 2. Извитая форма возбудителя, равномерность завитков и типичные движения. 3. Микроскопия нативного препарата в темном поле зрения. На прием к врачу-дерматовенерологу обратилась женщина с жалобами на появление язвы на большой половой губе, которая специалистом после осмотра охарактеризована, как твердый шанкр. В тканевой жидкости, полученной из этого шанкра, при микроскопии найдена бледная трепонема. Задания 1. На основании каких признаков найденные в мазке возбудители отнесены к бледной трепонеме? 2. Опишите технику взятия и приготовления препарата из тканевой жидкости для этого исследования? 3. Каким методом микроскопии необходимо воспользоваться? 4. Можно ли, используя, метод микроскопии, поставить диагноз «сифилис»? Эталоны ответов 1. Бледная трепонема в темном поле выглядит в виде тонкой спирали, освещенной ровным светом. Для нее характерны плавные движения и особенно маятникообразное движение. Иногда трепонема изгибается под углом. При окраске по Романовскому бледная трепонема окрашивается в бледно-розовый цвет. При обработке препаратов солями серебра ( по Морозову) трепонемы выглядят коричневыми или почти черными. 2. Результат исследования в значительной степени зависят от тщательности взятия материала. Поверхность эрозии или язвы тщательно освобождают от гноя прикладыванием ватки, смоченной физиологическим раствором, при этом растирают поверхность язвы во избежание кровотечения. Затем надавливанием прокаленной и остуженной металлической лопаточки, не торопясь, раздражают поверхность язвы; отделяемое появляется не сразу. Раздражать следует плотную часть шанкра, стараясь получить сок из глубины, так как там бледные трепонемы содержатся в чистом виде и сапрофитических трепонем почти не бывает. Небольшую каплю тканевого сока наносят на тонкое чистое предметное стекло и накрывают ее покровным стеклом. В тех случаях, когда сока очень мало, его вносят в каплю физиологического раствора, предварительно нанесенного на предметное стекло. Не следует делать большие капли, так как трепонемы будут плавать и их труднее обнаружить. Второй препарат нужно высушить на воздухе, фиксировать смесью Никифорова и окрашивать либо по Романовскому, либо серебрением по Морозову. 3. Исследование нативных препаратов в темном диагностики сифилиса в стадии твердого шанкра. 4. Можно, если правильно приготовить нативный препарат и изучать его в темном поле зрения светового микроскопа. Задание № 188 Через 20 дней после полового сношения с малознакомой женщиной у больного О, на головке полового члена появилась безболезненная эрозия с ровными краями, гладкими блестящим дном, без выраженных воспалительных явлений. При пальпации у основания эрозии определяется уплотнение. Больного госпитализировали в венерологический диспансер с диагнозом « сифилис» Задания 1. Какие дополнительные исследования позволят врачу-венерологу поставить окончательный диагноз. Эталоны ответов 1. Микроскопическое исследование нативного мазка, приготовленного из отделяемого эрозии в темном поле. При микроскопии нативных препаратов тканевой жидкости, полученной при раздражении твердого шанкра, бледная трепонема выглядит в виде тонкой спирали, освещенной ровным светом. Для нее характерны плавные движения и особенно маятникообразное движение. Иногда трепонема изгибается под углом. Задание № 189 В инфекционную больницу города К., который расположен в горной местности Азербайджана, поступило 3 лихорадящих больных из одного горного селения, которые работали на просушке табака. Врачинфекционист, расспрашивания и осматривания больных, поставил диагноз «Возвратный тиф?» и с целью подтверждения диагноза назначил микроскопическое исследование мазков крови, взятой из пальца. Задания 1. Опишите технику приготовления мазка крови и каким способом его нужно окрасить. 2. Опишите микроскопическую картину окрашенного препарата, которая позволит подтвердить клинический диагноз. 3. Как могли инфицироваться больные? 4. Какой метод диагностики нужно использовать ( составьте схему) для выяснения эпидемиологической ситуации в этом горном селении? Эталоны ответов 1.1. Мазок крови готовят следующим образом. стерильной иглой указывают предварительно продезинфицированный безымянный палец левой руки. 1.2. Первую каплю крови удаляют сухой ваткой, а затем прикасаются к выступившей капли крови поверхностью хорошо обезжиренного предметного стекла. 1.3. Стекло быстро кладут на стол, придерживая его левой рукой, и прикасаются капли крови на нём краем второго, несколько к более узкого шлифованного стекла, установленного под углом 45 градусов. 1.4. Мягким быстрым движением прижимая шлифованное стекло, продвигают его влево по предметному стеклу, не доходя 1-1,5 сантиметра до края. 1.5. Правильно приготовленный мазок-желтоватого цвета, просвечивается. 1.6. Мазок крови высушивают на воздухе и фиксируют либо в течение 5 минут метиловым спирте или смеси Никифорова-10-15 минут и окрашивают разделённые стандартной краской Романовского 35-45 минут, затем сменяют эту же краску на новую порцию опять окрашивают 30-40 минут. 2. Если у больного возвратный Тиф, вызванный боррелиями, я-то на фоне хорошо окрашенных форменных элементов крови видны извитые микроорганизмы, длина их всегда превосходит поперечник эритроцита в два раза точка Они имеют вид тонких нитей синий фиолетового цвета то с несколькими большими завитками. 3.1. Больные могли инфицироваться посредством укуса клещей, при работе на присушки табака. 3.2. Возможно данном случае речь идёт о клещевом возвратном тифе. 4.1. для подтверждения диагноза клещевого возвратного тифа проводится биологическое исследование. 4.2. С этой целью 0,5-1 мл цитратной крови больного вводят подкожно морским свинкам через 5-6 дней в крови у животных появляется большое количество боррелий, которые определяются при микроскопическом исследовании окрашенных мазков крови морских свинок 4.3. Этот метод позволяет дифференцировать возбудителей эпидемического и клещевого возвратного тифа. 4.4. Возбудители клещевого возвратного тифа вызывают заболевания у морских свинок, тогда, как B. recurrentis не патогенна для них. 4.5. В случае обнаружения возбудителя клещевого возвратного тифа в крови заболевших животных можно считать, что эпидемия возвратного тифа в этом горном районе не будет. Задание №190 В июле в инфекционное отделение города Т. в течении 10 дней поступили 8 человек, работающих в одной из угольных шахт. у всех заболеваниях характеризовалось острым началом, высокой температурой тела (до 40 градусов Цельсия), и мышь болями. инфекционист выявил болезненность при пальпации мышц голени и бедра, увеличенную печень и селезенку. О2 заболевших после 5 дней госпитализации появилась желтуха. врач-эпидемиолог, принимавшие участие в выяснении причин инфицирование Шахтёров, установил, что рабочее число оставляли свои завтраки и фляги для питьевой воды без соблюдения санитарно-гигиенических норм и крысы могли их инфицировать. врач-инфекционист на основании клинико-эпидемиологических данных поставил диагноз: “ лептоспироз”. Задания 1. Какой исследуемый материал подлежит направлению в баклабораторию для уточнения диагноза? 2. Объясните механизм инфицирования лептоспирозом этих Шахтёров. 3. какие методы диагностики будут использоваться в баклаборатории, учитывая, что больные поступили в разные сроки от начала заболевания? 4. Опишите микроскопическую картину препарата, которая доказывает наличие в крови лептоспир 5. Дайте характеристику питательных сред, используемых для выделения лептоспир, и укажите, как проводится их идентификация. 6. Какие мероприятия нужно провести на этой шахте с целью профилактики дальнейшего распространения лептоспироза среди шахтеров? Эталоны ответов 1. Материалом для исследования служит кровь, спинномозговая жидкость, моча. 2. В данном случае крысы могли быть источником лептоспироза. Они часто являются носителями вирулентных лептоспир. Они (лептоспиры) содержится главным образом в извитых канальцах почек грызунов с мочой выделяется в внешнюю среду, загрязняют воду, почву, пищевые продукты. 3.1. У тех лиц, которые поступили в инфекционное отделение в течение 3 дня от начала заболевания, будет проводиться прямая бактериоскопия крови, так как обнаружить лептоспиры в крови больных можно лишь в течение первых дней болезни. 3.2. У лиц поступивших в первую неделю заболевания, проводят исследование Гемокультуры или посев спинномозговой жидкости в вводно-сывороточную среду Фервольта-Вольфа. 3.3. У тех больных, которые поступили в больницу позже 7-8 дня болезни, я исследуют мочу. при этом проводят микроскопическое исследование в темном поле нативных препаратов, приготовленных из осадка мочи после центрифугирования и выделяют чистую культуру лептоспир на указанных выше питательных средах. 3.4. Всем больным, которые поступили в инфекционное отделение после 5-6 дня болезни, назначается серологический метод диагностики, так как антитела агглютиницы и лизины обнаруживаются не раньше чем 4-5-й день а комплементесвязывающие антитела - не ранее, чем на 5-6 день болезни. для серологического диагноза используется реакция агглютинации и лизиса (РАЛ). 4. при микроскопии нативных препаратов крови тёмном поле обнаружения спиралевидных подвижных серебристо-белых нитей, концы которых ключковато загнуты, является доказательством лептоспироза. 5.1. Водно-сывороточная среда: Водопроводная вода с рH - 7,2 - 7,4 С добавлением кроличьей или бараньей сыворотки в количестве не менее 1 капли на 1 мл среды. 5.2. Бессывороточная среда Ферворта-Вольфа на основе буферных смесей. 5.3. Идентификация лептоспир проводится после их культивирования на одной из указанных сред в течение месяца в термостате при 28-30 градусах. 5.4. Лептоспиры размножаются в питательной среде, не изменяя её пищевого вида, поэтому размножение лептоспир контролируют каждые 5 дней путём микроскопии препаратов "раздавленная капля" в темном поле. 5.5 при обнаружении лептоспир сразу проводится пересев на свежую питательную среду с целью сохранения штамма для дальнейшей идентификации. 5.6 Интенсификацию вновь выделенных культур проводят с помощью реакции агглютинации, используя набор специфических лептоспирозных сывороток. 6. Лептоспироз - зоонозная инфекция, поэтому все противоэпидемические мероприятия должны быть направлены на соблюдение санитарно-гигиенических норм труда и отдыха. Задание № 191 В инфекционное отделение больницы тяжёлом состоянии поступил больной с диагнозом "сыпной тиф". из анамнеза установлено, что он болен 10 дней. с целью подтверждения предварительного диагноза Врач назначил исследования. задания 1. Какой материал необходимо взять у больного для проведения исследований? 2. какой метод диагностики сыпного тифа наиболее целесообразно использовать в данном случае? 3. с какого дня болезни целесообразно использовать этот метод диагностики? 4. Какие реакции могли быть поставлены в лаборатории при использовании выбранного вами метода? эталоны ответов 1. Кровь - для обнаружения в ней антител к риккетсиям Провачека. серологический-исследование сыворотки крови больного на наличие антител к риккетсиям 2. Провачека. 3. с 5-7 дня болезни. 4. реакция агглютинации диагностикумом риккетсий Провачека, РСК антигенам из из риккетсий Провачека, РПГА с эритроцитарным сипнатифозным диагностикумом. Задание № 192 При микроскопическом исследовании пораженных волос в нативном препарате обнаружены круглые мелкие артроспоры внутри волоса, напоминающие пробирку, заполненные дробью, или "Мешок с орехами". на границе между пораженной и здоровой частью по ходу волоса обнаруживаются споры в виде цепочек. Задания 1. Для какого микоза характерны данные микроскопии препарата? 2. Как определить, является ли грипп эндотриксом или эктотриксом? 3. как происходит заражение указанным микозом? Эталоны ответов 1. Подобное поражение волос характерным для трихофитии. 2. При надавливании на покровное стекло споры эктотрикса расходятся от волоса в разные стороны, какв то время как у уэндотрикса они высыпаются кучкой в месте разрыва волос. 3. Заражение происходит при ношение головных уборов, принадлежащих лицам, страдающим трихофитией. Задание № 193 В клинику поступил ребёнок, на слизистой оболочке щек, нёба и языка которого обнаружены точечные налеты белого и жёлтого цвета, сливающиеся местами, образуя творожистого вида пленки. к отделение плёнок обнаруживалась гиперемированная слизистая оболочка с гладкой поверхностью. подобранные поражения характерны для кандидоза. задания 1. Какое лабораторное исследование необходимо провести для подтверждения диагноза открыли "кандидоз"? 2. Какой материал необходимо взять для исследования? 3. Как готовится нативный препарат? 4. Опишите микроскопическую картину, которая позволит подтвердить диагноз. эталоны ответов 1. Необходимо провести бактериоскопическое исследование. 2. материалом для исследования является пленчатый налет с разных участков в полости рта, которые забирают петлей или шпателем при соскабливании слизистой оболочки. 3. Соскоб помещают на предметное стекло, заливают 10% раствором едкой щёлочи, которая способствуют набуханию и просверливанию роговых масс. 4. под микроскопом обнаруживаются псевдомицелии либо цепочки круглых удлинённых почкующихся клеток, характерный для грибов рода " кандида” . Задание № 194 при микроскопическом исследовании пораженных волос в нативных препаратах обнаружены тонкие нити редко септированного мицелия, мелкие и крупные артроспоры, пузырьки воздуха и капельки жира. при изучении препарата обнаружен и более широкий мицелий, распадающийся на прямоугольные клетки. волос не полностью заполнен элементами гриба. задания 1. Для какого микоза характерны данные поражения? 2. Как готовятся препараты для исследования пораженных волос? 3. Какие дополнительные исследования необходимо провести для подтверждения диагноза? эталоны ответов 1. Такая микроскопическая картина характерна для волос, пораженных возбудителями фавуса. 2. исследуют пораженные волосы, чешуйки кожи, соскобы ногтевых пластинок. к исследуемый материал помещают на предметное стекло. неокрашенные препараты патологического материала исследует в капельке 10-20% раствора едкое щёлочи, слегка подогретый на пламени горелки. препарат накрывают покровным стеклом. обработанные щёлочью неокрашенные препараты исследуют сначала при малом, а затем при большом увеличение микроскопа. дополнительно можно произвести выделение чистой культуры грибов на среде 3. Сабуро. определение вида грибов проводят всегда на основании их особенностей в патологическом материале с учётом культурных признаков, патогенности, биохимической активности, антигенной специфичности в серологических реакциях. кроме того, можно назначить серологическое исследование и аллергические реакции. Задание № 195 Мама привела на прием к врачу-дерматологу Сережу К., 6 лет, у которого она обнаружила на волосистой части головы небольшие очаги облысения, диаметром до 1-копеечной монеты, волосы частично обломаны запятая в очагах шелушения кожи. Времени появления их точно назвать не могли. при осмотре кожных покровов врач обнаружил аналогичных размеров розоватые шелушащиеся пятна, овальной и круглой формы. Выясняя анамнез заболевания, врач установил, я что Серёжа К. 2 недели назад принес домой заблудившегося котёнка,и он теперь живет в комнате у Серёжи и и играет с ним. Задания 1. Какой патологический материал больного ребенка подлежит исследованию и в какую лабораторию его следует направить? 2. Какие исследования должен провести врач, чтобы установить диагноз заболевания? 3. Дайте описание метода диагностики, которые нужно использовать в первую очередь. 4. Опишите микроскопическую картину препарата из волоса, на основании которой можно поставить диагноз. 5. какие результаты других исследований Вы должны получить в случае подтверждения предполагаемого вами диагноза? Назовите возможную причину заражения Серёжи К. 6. Эталоны ответов 1. Исследованию обходимо подвергать остатки пораженных волос и чешуйки с пораженных участков кожи и направлять в специализированный микологический диспансер или микологическую лабораторию, обслуживающие кожно-венерологический диспансер. 2. Микроскопию нативных препаратов, приготовленных из остатков поражённых волос и чешуек кожи; посев на среду Сабуро и выделение чистой культуры дерматомицетозов; серологические исследования (РСК;РА); аллергическую пробу с экстрактами из грибов. 3. Пораженные волосы пинцетом укладывают на стекло, 1-2 капли 10% едкой щелочи ( KOH или NaOH), накрывают покровным стеклом, слегка подогревают, тут а затем микроскопируют сухой системой микроскопа. 4. Пораженные волосы окружены у основания многочисленными мелкими спорами, которые тесно прилегают друг к другу в виде мозаики. внутри волоса можно обнаружить сентированный мицелий. такая микроскопическая картина позволит поставить диагноз: "микроспория ". 5.1. На среде Сабуро через 6-7 суток вырастают колонки грибов, которые можно идентифицировать по особенностям роста и микроскопическом строению (характер мицелия, расположение конидиеносцев, спор и др.) 5.2. Реакция связывания комплемента положительная с антигеном из микроспорана. 5.3. Через 24-48 часов положительная внутрикожная проба на микроскопии. 6. Сережа К. мог заразиться от котёнка, которого принёс домой. Кошки болеют микроспорией, и шерсть у них часто обсеменена спорами этого гриба. ЗАДАНИЕ №196 Изучая окрашенный по Романовскому мазок крови больного с диагнозом «малярия», врач отметил, что в мазках обнаружены Pl. Vivax. 1. На основании каких данных микроскопической картины мазка можно дать подобное заключение? 1.1. Pl. Vivax. имеет форму кольца – молодой шизонт - цитоплазма голубая, ядро – рубиново-красное; располагается в эритроците. Эритроциты увеличены в размере, деформированы, обесцвечены. 1.2. В стадии полузрелого шизонта хорошо выражены псевдоподии. 1.3. После меруляции мерозонты располагаются в мазке скоплениями, напоминающими «Тутовую ягоду», число их может достигать 12-18. 1.4. В эритроцитах появляется обильная точечная зернистость Шюффиера. ЗАДАНИЕ №197 В женской консультации поселка Н. трем беременным женщинам проведена внутрикожная проба с токсоплазмином. Через 48 часов после учета пробы получен следующий результат: -пациентка С., 21 года, срок беременности 8-10 недель, эритема на месте укола отсутствует; - пациентка К., 23 лет, срок беременности 17-18 недель, на месте введения аллергена эритема размером 1,5х2 см (15х20мм); - пациентка В., 20 лет, срок беременности 10-12 недель, эритема 0,5х0,5 см (5х5 мм). При осмотре специалистом заболеваний не обнаружено, женщины здоровы. 1.Оцените результаты поставленной внутрикожной пробы с токсоплазмином.1.1.Пациентка С. - реакция отрицательна.1.2.Пациентка К. – реакция положительна. 1.3. Пациентка В. – реакция отрицательна. 2. С какой целью в женской консультации проводилась внутрикожная проба с токсоплазмином? С целью диагностики скрытых форм токсоплазмоза, т.к. наличие этого заболевания у беременных женщин может привести к самопроизвольным абортам или уродствам плода. 3. О чем свидетельствует положительная реакция на токсоплазмин у пациентки К.? Положительный результат свидетельствует о том, что данный человек либо болен токсоплазмозом, либо перенес его в прошлом. 4. Какие мероприятия необходимо провести пациентам после оценки результатов внутрикожной пробы? 4.1. Пациентки с отрицательной реакцией на токсоплазмин регистрируются в женской консультации в соответствии с общими правилами учета беременных женщин. 4.2. Пациентке К. необходимо назначить дополнительное обследование, в первую очередь это иммунологические исследования – РСК, реакция с красителем (Сэбина-Фельдмана), РНГА. Паразитологические исследования в данном случае не применимы и они не всегда дают положительные результаты. 5.Провведите интерпретацию результатов назначенных Вами исследований. 5.1.Диагноз токсоплазмоза следует ставить по совокупности данных клинических, лабораторных методов исследования и данных анамнеза. 5.2. Положительная внутрикожная реакция на токсоплазмин не является абсолютным подтверждением диагноза, так как появившись 4-й недели после заражения, она может сохраняться всю жизнь.5.3. Серологические исследования нужно проводить многократно в процессе развития болезни. Если при повторном исследовании сыворотки, взятой от больной, не обнаруживаются антитела, то это свидетельствует о том, что в данном случае заболевание не является токсоплазмозом. 6.акая врачебная тактика в отношении пациентки К., если при использовании дополнительных иммунологических методов будет поставлен диагноз «токсоплазмоз»? 6.1. Необходимо прерывание беременности по медицинским показаниям, так как при зарождении токсоплазмозом во время беременности неизбежны мертворождение или уродство плода. 6.2.Госпитализация больной в инфекционное отделение для лечения. ЗАДАНИЕ №198 Зоотехник С. В июне выехал в командировку в один из животноводческих комплексов Туркмении. Две недели находился в этом районе, выполняя положенный объем работы, часто выезжал в пустынные и горные районы. Это местность отличалась обилием москитов. Спустя несколько дней, вернувшись домой, он обнаружил на месте одного из укусов москита небольшое болезненное уплотнение, покраснение; этот инфильтрант возвышался над уровнем кожи. Он сразу обратился на прием к врачу-дерматовенерологу, рассказав историю болезни, связанную с командировкой в Туркмению. Врач обработал участок кожи спиртом, стерильным шприцем уколол в центр бугорка и каплю серознокровянистой жидкости поместил на предметное стекло и окрасил по Романовскому. 1. Опишите технику фиксации и окраски этого мазка. 1.1. Мазок высушивают на воздухе. 1.2.Фиксация в метиловом спирте или смеси Никифорова 3-5 минут. 1.3. Окраска разведенной 1:10 стандартной краской Романовского 15-20 минут. 1.4. Исследование мазка в микроскопе с иммерсионной системой. 2. Опишите увиденную Вами микроскопическую картину и сделайте соответствующее заключение. 2.1 В препарате много различных фагоцитирующих клеток кожи, в их цитоплазме располагаются паразиты, овальной или почти округлой формы, протоплазма окрашена в голубой цвет, ядро – в рубиново-красный. В препарате встречаются и одиночно лежащие вне клетки паразиты. 2.2. При обнаружении указанной микроскопической картины, характерной папулы, склонной к изъявлению, анамнеза заболевания можно сказать, что у больного кожный лейшманиоз. 3. Укажите и опишите методы диагностики, которые позволят Вам подтвердить диагноз. 3.1.Можно использовать культивирование лейшманий в пробирке со специальной питательной средой (N, N, N): вносят исследуемый материал – жидкость или соскоб папулы, культивируют при температуре 22-25, заливая пробирки парафином. С 3-4 дня становится заметным размножением лептомонад. Они имеют веретенообразную форму, один конец заострен, другой – тупой, имеется жгутик, отходящий от блефаропласта. 3.2.Серологическое исследование – определение антител в крови больных в РСК, РПГА. 3.3.Можно обнаружить лейшмании с помощью биологической пробы – заражение белой мыши или хомячков. Животных заражают внутримышечно, как правило, через 10-30 дней, на месте внесения материала с наличием лейшмании. 4. Как мог заразиться этот зоотехник С. В командировке? Работая в пустыне, он подвергался укусам москитов, которые явились в этом случае переносчиками кожного лейшманиоза. Источником заболевания могли быть грызуны, населяющие пустыню. ЗАДАНИЕ №199 При микроскопическом исследовании нативного препарата из испражнений обнаружена тканевая форма дизентерийной амебы (гематофаг). 1.Какой формой амебиаза (острой или хронической) страдает данный больной? Данный больной страдает острой формой амебиаза, так как в острой стадии с фекалиями выявляются только тканевые формы. 2. Какие формы дизентерийной амебы обнаруживаются у носителей и в период ремиссии? У носителей и в период выздоровления выделяются просветные формы и цисты. 3. Какой характер имеют испражнения больных амебиозом? Испражнения больных имеют вид малинового желе, равномерно пропитанного кровью. 4.Каков механизм заражения человека амебной дизентерией? Заражение человека происходит при заглатывании цист, находящихся в воде, пищевых продуктах. Загрязненных фекалиями. ЗАДАНИЕ №200 В инфекционной отделение городской больницы №1 поступил африканский студент подготовительного отделения университета. Из анамнеза выяснено, что он проживает на северо-востоке ЦАР, известном очаге трипаносомоза, и 3 недели тому назад прибыл на учебу в СССР. У больного отмечается слабость и увеличение шейных лимфатических узлов, недомогание 1.Какие лабораторные исследования Вы назначите для установления диагноза? При африканском трипаноссомозе возбудителя можно обнаружить в начальном периоде болезни месте укуса зараженной мухой це-це, а также в периферической крови. В поздний период лихорадки трипаносом обнаруживают в пунктате увеличенных лимфатических узлов и в спинномозговой жидкости. Исследуют свежие окрашенные по Романовскому препараты. 2. Встречается ли африканская сонная болезнь в СССР? В СССР африканская сонная болезнь в связи с отсутствием переносчика не встречается. ЗАДАНИЕ №201 К врачу дерматовенерологу обратилась больная В. С жалобами на появление выделений из влагалища. Пять дней тому назад вышла замуж. После осмотра из выделений влагалища был приготовлен нативный мазок. Для фиксации были использованы пары формалина и произведена окраска препаратов по Романовскому. Посмотрев препараты, врач поставил диагноз «трихомонадный вульт» (трихоманиаз), назначил обследование мужа и соответствующее лечение больной. 1.Как называется возбудитель трихомониаза? Trichomonas vaginalis. 2.Какова продолжительность инкубационного периода при трихомониазе? Продолжительность инеубационного периода от 3х до 20-30 суток. 3.Какие органы и ткани мочеполовой системы могут поражаться при трихомониазе? У женщин обнаруживают трихомонадные вульвиты, бартолиниты, кольпиты, цервициты, трихомонадные поражения тела матки и ее придатков. Нередко отмечаются уретриты, циститы, пиелиты. 4.Что позволило врачу поставить диагноз трихомониаза? Диагноз трихомониаза был поставлен на основании обнаружения большого количества трихомонад в мазке из отделяемого влагалища. В мазках средних размеров, грушевидной формы или веретенообразной формы с овальным ядром, расположенным к переднего широкого конца тела трихомонад. Хроматин ядра собран в мелкие, равномерно распределенные в его толще зерна. Кпереди от ядра из группы блефаропластов отходят 4 свободных жгутика. Из блефаропластов исходит также ундулирующая мембрана, занимающая только переднюю половину длины тела и не имеющая свободной концевой нити. 5.Какой препарат врач мог использовать для лечения? Метронидазол (трихопол). ЗАДАНИЕ №202 В ЮАР наблюдалась вспышка острых кишечных заболеваний, охватившая около 200 человек. При исследовании испражнений в нативном препарате была обнаружена T.hominis, которая также была определена в питьевой воде. 1.Достаточно ли этих данных для того, чтобы поставить диагноз «кишечный трихомониаз?» Да, так как кишечный трихомониаз передается фекльно-оральным путем, вызывается T.hominis,и они обнаружены в питьевой воде. 2.Назовите все виды трихомонад, обитающих у человека? В организме человека обитают следующие трихомонады: T. hominis T. Elongata, T. Vaginalis. 3.Возможноли заражение мочеполовой сферы трихомонадами из кишечника? Все три вида трихомонад, обитающих у человека, являются самостоятельными видами; и кишечная и ротовая возбудителями мочеполового трихомонадиоза не бывают и в T. Vaginalis не превращаются. 4.Каков механизм заражения мочеполовым трихомонозом? Заражение происходит половым путем, а так же через предметы туалета, губки, унитазы и др. ЗАДАНИЕ №203 В городскую инфекционную больницу поступили больные А., Р., Т. с жалобами на частый стул, до 6-8 раз в сутки. Стул жидкий, кашицеобразный или водянистый со слизью, но без примеси крови. Бактериологические исследования кала на наличие дизентерийных возбудителей дали отрицательные результаты. У лечащего врача возникло предположение, чо колиты у этих трех больных вызваны кишечными трихомонадами. При прямой микроскопии (протозооскопии) обнаружены мелкие веретеновидной формы жгутиконосцы. У переднего расширенного конца тела находится слабо заметный цитостом и пузырьковидное ядро. Врач пришел к заключению, что у больных трихомонадные колиты или кишечные трихомониазы. 1.Как называется возбудитель трихомонадного колита? Trichomonas Hominis. 2.Какие препараты могут быть применены для лечения? Для лечения можно применить аминарсол или биомицин. 3.Какие еще виды трихомонад обитают в организме человека и вызывают заболевания? Trichomonas elongate, Trichomonas vaginalis. ЗАДАНИЕ № 204 Для выявления вирусов из поступившего в лабораторию материала использовали культуры ткани и куриные эмбрионы. В культурах ткани вирусы обнаружить не удалось. Для пассирования вирусов в развивающихся куриных эмбрионах необходимо взять новую партию эмбрионов и заразить их. 1.На какой день инкубации используются куриные эмбрионы для выделения вирусов? Вирусы культивируют на 6-15-дневных куриных эмбрионах. 2. Куда вводится исследуемый материал при заражении куриных эмбрионов? Материал вводится на (хориональную) хорионаллантоисную оболочку (ХАО), в желточный мешок, полость аминона и аллантоиса. ЗАДАНИЕ № 205 В вирусологической лаборатории для выделения вирусов заражены куриные эмбрионы. Одна часть эмбрионов была заражена на ХАО (Хорноналлантоисную), другая часть в аминотическую, а третья – в аллантоисную полость. После культивирования, эмбрионы вскрыты. Врачу необходимо дать заключение о выделении вирусов и если они выделены, то какие вирусы могут быть выделены? 1.Как обнаруживали наличие в ХАО? Какие вирусы могли быть обнаружены на ХАО? На ХАО могли быть выделены вирусы натуральной оспы, осповакцины, простого герпеса, которые образуют бляшки – беловато-выпуклые пятна диаметром 1-2 мм. 2.Что является показателем накопления вирусов в аллантоисной и амниотической полости? Показателем накопления вирусов является гемагглютинация эритроцитов аллантоисной и амниотической жидкостью зараженных эмбрионов. 3. Какие вирусы накапливаются в аллантоисной и амниотической жидкости зараженных эмбрионов? В аллантоисной и амниотичесой жидкости накапливаются ортомиксо- и парамиксовирусы. ЗАДАНИЕ №206 В вирусологическом отделении бактериологической лаборатории проводят выделение вирусов из материалов, взятых у больных. Вам необходимо подобрать тест-системы для выделения вирусов из присылаемых в лабораторию материалов. 1.Какие тест-системы используют при выделении вирусов из материалов, взятых у больных? Выделение вирусов от больных проводят на клеточных культурах, куриных эмбрионах и экспериментальных животных. 2.Какая из тест-систем наиболее широко используется во всех диагностических лабораториях? Наиболее часто и наиболее широко для выделения вирусов используют клеточные культуры. 3.Назовите разновидности наиболее широко используемой тест-системы? Первичные, диплоидные и перевиваемые культуры клеток. ЗАДАНИЕ № 207 В 1958 году делегацией Советского Союза ВОЗ была предложена программа ликвидации натуральной оспы в мире. Программа была принята и реализована практически в 1977 году. В 1980 году ВОЗ объявила о ликвидации натуральной оспы в мире. 1. Кем и когда был предложен метод иммунизации населения против оспы? Иммунизация как метод борьбы с оспой предложен в 1796 году английским врачом Э.Дженнером. 2. Какой материал был использован автором для предупреждения заболеваний натуральной оспой? Для профилактики натуральной оспы Э.Дженнер использовал содержимое везикул, образующихся на руках доярок, страдающих коровьей оспой. 3. Благодаря применению каких препаратов была реализована программа ВОЗ, предложенная делегацией Советского Союза? Для ликвидации оспы в мире была использована сухая оспенная вакцина, ововакцина и культуральная вакцина. ЗАДАНИЕ №208 Через 4 месяца после лечения в хирургическом отделении ЦРБ у 4 больных возник вирусный гепатит. Клиническая картина характеризовалась постепенным началом заболевания полиартальгией, появлением сыпи, появлением желтушности склер, слизистых оболочек и кожных покровов. При эпидемиологическом обследовании было установлено, что всем заболевшим в период лечения было проведено переливание крови небольших количеств донорской крови одной серии. 1. Какая форма вирусного гепатита возникла у заболевших? Гепатит В. 2. Какие можно провести исследования для уточнения диагноза? Иммунологические методы для обнаружения антиНВsAg и HBe-антител, а так же антиНВsAg и HBe-антител, которые обнаруживаются: а)Иммуноферментными реакциями б)радиоиммунным методом в)встречным иммуноэлектрофорезом г)РНГА д)РСК 3. Какие и них являются чувствительными? Иммуноферментный и радиоиммунный ЗАДАНИЕ №209 У беременной женщины (срок 2 мес.) началось заболевание. Температура повысилась до 38,5, появились сильные головные боли , боли в шейных мышцах, сыпь на коже и увеличились лимфоузлы. Врачинфекционист, осмотрев больную, поставил диагноз «краснуха». 1.Что может служить исследуемым материалом для лабораторного подтверждения предполагаемого диагноза? Для исследования необходимо взять: а) для выделения вируса - носоглоточный смыв, кровь, мочу; б) для серологической диагностики – кровь с целью определения титра специфических антител( метод парных сывороток) 2.Какие методы диагностики можно использовать для подтверждения диагноза заболевания? 2.1 Иммунофлюоресцентный, 2.2.Вирусологический, 2.3. Серологический. 3. В какой тест-системе можно выделить вирус из патологического материала, взятого у этой больной? Выделение вируса будут проводить путем заражения тканевых культур. 4.С помощью каких реакций можно определить наличие антител в паоных сыворотках, взятых у беременной женщины? В РТГА и РН с антигеном вируса краснухи 5.Какую опасность представляет краснуха для беременной женщины? В 80% случаев краснуха на первом месяце беременности сопровождается аномалиями разввития плода, а на втором месяце – у 40-60% случаев. 6.Что должен посоветовать врач этой женщине? Прервать беременность по медицинским показаниям. ЗАДАНИЕ №210 В населенном пункте Н. зарегистрирован эпидемический подъем заболеваний, клинически диагностируемый ка ОРВИ. Для уточнения этиологии заболеваний было решено провести ряд исследований. 1.Что может служить исследуемым материалом для решения поставленной задачи? Материалом для исследования служат мазки со слизистой и смывы из носоглотки, при поражении легких – мокрота и промывные воды бронхов; в случае высыпаний на слизистой и коже – содержимое элементов сыпи; парные сыворотки; кровь. 2.Как должен обрабатываться материал для выделения вирусов? Исследуемый материал, находящийся в жидкой фазе, должен быть обработан смесью антибиотиков, которые действуют на грамположительную и грамотрицательную бактериальную флору, а также на грибки. 3.Какие вирусы могли вызвать заболевания, клинически диагностируемые как ОРВИ? ОРВИ могли вызвать из ДНК-содержащих вирусов: аденовирусы, вирусы герпеса 1-го и 2-го типа, вирус ветряной оспы и и опоясывающего лишая. Из РНК-содержащих вирусов: вирусы парагриппа, болезни Ньюкастла, респираторносинтициальный вирус, вирус паротита и кори:коронавирусы, реовирусы, риновирусы, вирусы Коксауи и ЕСНО. 4.Какие методы лабораторной диагностики целесообразно использовать дял решения вопроса об этиологии ОРВИ? 4.1.Эксперсс-методы: иммунофлюорисцентный, иммуноферментный, риноцитоскопию. 4.2.Вирусологический метод – для выделения и идентификации возбудителей. 4.3.Серологический метод – для обнаружения 4-х кратного нарастания титра антител к одному из вирусов. ЗАДАЧА 211 В вирусологической лаборатории при заражении куриных эмбрионов постофарингеальными мазками, взятыми у пациентов с клинической картиной ОРВИ (ОРВИ), были выделены вирусы, вызывающие агрегацию 1% взвеси куриных эритроцитов. Задание 1. О выделении каких вирусов вы можете подумать? 2. Какие типы вирусов можно выделить? 3. По свойствам какого антигена выделенные вирусы делятся на типы? 4. На основании различий в том, какие антигены, один из типов выделенных вирусов подразделяется на несколько подразделов 5. В каких реакциях можно определить серовариант вируса гриппа A, выделенного от пациента? ответ 1. Можно думать о выделении зеленых вирусов 2. Вирусы гриппа A. B, C. 3. По свойствам S-антигена вирусы Гриппа подразделяются в РСК на 3 типы: A, B, С 4. На основании различий антигена гемаглютиина И нейраменидазы вирус типа A делится на ряд подтипов (Н1N1,H2N1, H3,N2) Основными реакциями, по которым определяется тип вируса гриппа типа A, является РТГА и подавление нейрамидазной активности Задача 212 группе иностранных специалистов-медиков. После социального курса медицинской подготовки поручили наладить изготовление антирабических препаратов в НИИ Задание 1 производство каких антирабических препаратов должны освоить преступившие к работе молодые специалисты? 2 какой штамм вируса молодые специалисты должны иметь в лаборатории для изготовления антирабических препаратов? 3 какие свойства вируса должны они проверить перед началом изготовления антирабических препаратов? ответ 1 а) антирабического гамма-глобулина Б) антирабической вакцины типа Ферми В) антирабической культуральной вакцины 2 фиксированый вирус бешенства 3 молодые специалисты должны учитывать отличие фиксированного вируса бешенства от уличного по следующим свойствам А) введение кроликам под твёрдую мозговую оболочку фиксированного вируса приводит к гибели в течении 6-7 дней Б) в клетках цнс фиксированный вирус не вызывает образование телец Бабеша-Негри В) при введении в организм фиксированного вируса вырабатывается вируснейтрализующие антитела, которые нейтрализуют не только фиксированный, но и уличный вирус бешенства Г) фиксированный вирус почти в 10 раз быстрее проникает в клетки цнс , а так же обладает интерфирирующим свойством по отношению к уличному вирусу бешенства ЗАДАНИЕ M 213 Пострадавший, которого укусила неизвестная собака, обратился в хирургический кабинет. При осмотре пострадавшего врач обнаружил обширные рваные раковые образования на лице. Хирург предположил, что жертву укусила бешеная собака. Задание 1 какую врачебно-профилактическую помощь должен оказать хирург пострадавшему? 2какие врачебно-профилактические препараты может использовать хирург? 3 как должны вводиться эти препараты? 4 какой штамм вируса бешенства использовался для приготовления антирабической вакцины? 5 кем он был получен первым и каким образом? 6 по каким свойствам отличается фиксированный вирус бешенства от уличного? Ответы 1 а) ввести столбнячный анатоксин Б) ввести противостолбнячкую сыворотку по методу Безредка В) ввести антирабический грамм-глобулин Г) начать немедленно активную иммунизацию антирабической вакциной 2. А)Столбнячный анатоксин Б) противосттлбнячкую сыворотку В) антирабический грамма-глобулин Г) антирабическую вакцину типа Ферми Д) антирабическую культуральную вакцину 3. Антирабический грамма-глобулин и противостолбнячную сыворотку внутримышечно по методу Безредка 4. Фиксированный вирус бешенства 5. Фиксированный вирус получен Л. Пастером в 1885 году в результате 133 последовательных пассажий уличного вируса от кролика к кролику. Пассаж этого вируса проводился путём введение мозговой кашицы полученной из мозговой ткани заражённого и погибшего кролика, под твёрдую мозговую оболочку здорового кролика 6 а) при подкожном введении кроликам фиксированный вирус не вызывал развитие болезни Б)в клетках цнс не образовывал телец Бабеше-Негри В) при введении в организм вырабатываются вируснейтрализующие антитела, которые нейтрализуют не только фиксированный вирус, но и уличный Г) обладает способностью к интерференции по отношению к уличному вирусу бешенства Д) почти в 10 раз быстрее проникает в клетки цнс ЗАДАЧА214 в областную детскую инфекционную больницу направлен Ребенок С. 5 лет для уточнения предварительного диагноза : «полномиелит». Из анамнеза было установлено, что ребенок заболел 10 дней назад. В начале лечения в отделении центральной районной больницы с днагиозом «ОР3? Грипп? Вирусологические исследования для подтверждения диагноза респираторной инфекции в ЦРБ не проводились, поэтому лечение назначалось симптоматическое. Когда появились первые симптомы пареза конечностей, невролог был приглашен на консультацию, и он заподозрил полиомиелит. В ходе беседы с родителями болезни ребенка нейроватолог выяснил, что ребенку не делали прививок от полиомиелита, и что он не посещает детский коллектив. Вопросы 1 объясните как могли развиться параличи у этого ребёнка? 2 какие методы можно использовать для подтверждения диагноза в данном случае? 3 какой вакциной должны были привить ребёнка и в какие сроки? Ответ 1. Вирус попав в организм ребёнка сначала размножается в клетках слизистой оболочки носоглотки, кишечника и отсюда с током крови переносится в спинной мозг. Так как полновирус обладает выраженным нейротропизмом он вызовет дегенеративно-воспалительный процесс в передних рогах спинного мозга и сером веществе подкорки. Следствием этого и являются развитие параличей у ребёнка 2. Учитывая что ребёнок заболел 10 дней назад наиболее целесообразно для подтверждения диагноза использовать серологический метод. Парные сыворотки необходимо исследовать по РСК или нейтрализации с антигеннами полиовируса (1,2,3 типов ), если во второй сыворотке титр антител увеличится по сравнению с первой сывороткой , можно поставить диагноз полиомиелит 3. Ребёнка должны были вакцинировать согласно календарю прививок в первые 3 года жизни. Прививки проводят ежегодно тривакциной, троекратно с трёхмесячными интервалами. Для этой вакцинации используется полиомиелитная пероральная живая вакцина (жвс) Сейбина типов 1,2,3 с целью повышения термоустойчивости к вакцине добавляют раствор химически чистого хлорида магния . Вакцина выпускается в жидком виде и в форме конфет драже. Она может быть изготовлена в виде моновакцины и тривакцины т.е смеси вирусов 3х типов ЗАДАЧА 215 Среди учащихся 1-3 классов средней школы населенного пункта Н. Появились случаи клинически протекающие как вирусный гепатит. Клиническая картина характеризовалась острым началом заболевания, короткими преджелтушным диспептическим периодом, появлением желтушности склер, слизистых оболочек и кожных покровов Улучшение самочувствия совпало с наступлением желтушного периода. При эпидемиологическом обследовании очагов инфекции было установлено, что за 15-45 дней до появления признаков болезни все заболевшие дети пили воду из источника, вода которого не обезораживалась. Каких либо медицинских манипуляций связанных с повреждение кожных покровов в последние годы заболевшим не проводилось Вопросы 1 о какой форме вирусного отрастила можно думать у заболевших детей учитывая данные эпидемиологического обследования? 2. Какую специфическую профилактику необходимо провести детям которы контактировали с заболевшими учащимися? 3. Какие обследования необходимо провести для уточнения диагноза? Ответы 1 у заболевших можно заподозрить гепатит А 2 для профилактики контактным ввести иммуноглобулин, полученный из смеси донорских сывороток крови взрослых людей 3 для уточнения диагноза используют иммунологические методы как для выявления антигена вируса так и антител относящихся к IgM, lgG А) иммунноферментные реакции Б)радиоиммуный метод на твердофазной основе В) РНГА Г)иммунную электронную микроскопию Задача 216 При серологическом обследовании группы венерически больных, лечившихся в кожно-венерологическом диспансере в течение последних 5 лет, использовалась непрямая венерологическая реакция для выявления СПИД В одном случае реакция оказалась положительная. В этой связи Вам поступило указание собрать образцы крови у больных, находящихся на лечении в стационаре и отослать их для уточнения полученных результатов в центральную лабораторию Вопросы 1 сколько образцов крови необходимо взять у обследуемых для окончательной постановки диагноза? 2. Как долженствующие быть приготовлены образцы крови в течении какого времени после взятия они должны быть отправлены для исследования? Ответы 1. При выявлении подозрительного на СПИД больного для окончательной постановки диагноза необходимо послать в Институт иммунологии МЗСССР два образца крови 2.1 Образцы крови должны быть приготовлены следующим образом: В термитную пробирку содержащую 0.7 мл раствора гепарина поместили 5мл крови. Тщательно перемешать Раствор гепарина приготовить следующим образом: в стерильных условиях 12 мл ампулированного раствора гепарина содержащего , 5 тыс. ед. 1 мл. добавить 24 мл стерильного физиологического раствора Приготовленный раствор гепарина можно хранить в холодильнике в течении 10 дней при температуре + 4(° С). Полученные образцы гепаринизированной крови необходимо доставить в институт иммунологии не позднее, чем через 6-8 часов после взятия крови кровь должна доставлять в охлажденном +4-+12 С, но не в замороженном состоянии. Транспортировку крови желательно производить в сумке холодильнике. 2.2 в случае невозможно получения указанных выше образцов крови получают сыворотку без применения консервантов . Полученную сыворотку разлить в 3-4 ампулы , заморозить при 20• С и направить в институт иммунологии . Транспортировку сыворотки необходимо осуществлять в термосах сохраняющих заданную температуру при невозможности экстренной транспортировки образцы сыворотки следует хранить замороженными при -20*С ЗАДАНИЕ 217 Инженер М., 37 лет, обратился к врачу с жалобами на постепенное в течение недели повышение температуры, частый жидкий стул, потерю веса. Появились отеки нижних конечностей, увеличились лимфатические узлы (лимфоденопатия), ночная потливость. При расспросе больного выяснилось, что ранее, кроме ОP3, ничем не болел. 5 месяев назад вернулся из служебной командировки в Лос-Анжелес (CША). В этом городе при переезде в автомобиле из одного района в другой получил травму. 8 дней находился в госпитале. После выздоровления и выполнения командировочного задания возвратился на Родину. Оценивая анамиез и клиническую картину, врач заподозрил у больного СПИД (синдром приобретенного иммунодефицита). ЗАДАНИЯ 1. Каким образом можно подтвердить или опровергнуть предварительный диагноз? 2. Сколько проб крови необходимо направить для исследования в институт иммунологии или лабораторию, где осуществляется днагностика СПИД? 3. Какие исследования должны быть проведены для диагностики СПИД? 4. Какие результаты проведённых исследований дадут основание утверждать, что у больного СПИД? 5. Как мог заразиться инженер М.? Он - не гомосексуалист, не наркоман. Какие-либо интимные связи вне своей семьи категорически отвергает как в США, так и на Родине. 6. Какие препараты целесообразно применить, если предполагаемый диагноз подтвердится? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1.1. Для подтверждения или опровержения диагноза «СПИД» используют иммунологические методы диагностики с целью обнаружения в крови людей антител к вирусу СПИД. 1.2. Наиболее широко используется иммуноферментный метод. 2. Для проведения исследования направляют в лабораторию 5 мл крови, взятой из локтевой вены шприцем одноразового пользовання. 3. Иммуноферментный или радиоимунный анализ с использованием концентрированного очищенного антигена вируса СпиД 4. Обнаружение в сыворотке крови обследуемых лиц специфических aнтител к вирусу СПИД. 5. Заражение СПИД происходит при попадании вируса в кровь. Учитывая, что инженеру М. могли переливать кровь для восполнения кровопотери после травмы, вирус мог быть внесен с переливаемым образцом крови, если донор предварительно не обследован. 6. Ему можно назначить рибоверин, тимолин, Т-активин, 7 -интерферон, литерлейкины. ЗАДАНИЕ 218 Заболеваемость СПИД в мире, как известно, стремительно нарастает. Предварительные данные обследований, проведенные в СССР, показали, что СПИД в нашей стране пока не имеет широкого распространения. О ранних симптомах этого заболевания должно знать все население и особенно медицинские работники. Вас пригласили на совецание средних медицинских работников с просьбой ответить на ряд вопросов. ЗАДАНИЯ 1. Какне ранние симитомы заболевания характерны для СПИД? 2. Какие результаты иммунологических исследований позволят подтвердить или отвергнуть диагноз СПИД? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1. Ранними симптомами болезни могут оказаться: увеличение лимфатических узлов; которое не исчезает долгое время; общее недомогание: длительная повышенная тем- пература. Проявлением заболевания может быть понос, потливость по ночам, падение веса и пневмония, которая протекает атипично, расстройства психики. 2. Для подтверждения диагноза шприцем разового пользования из вены берут кровь. Пробирки доставляются в лабораторию, где из кровя получают сыворотку. Автоматической пипеткой набирают строго отмеренную порцию сыворотки крови и помещают ее в ячейки специального полистиролового планшета. На поверхности лунок этого планшета сорбирован концентрированный очищенный антиген вируса СПИД. Если в сыворотке крови человека есть антитела, то на поверхности лунок образуется комплекс антиген-антитело. После промывания планшетов в лунки вносят моченные пероксидазой или щелочной фосфатазой антитела против глобулинов человека. Затем вновь планшет промывают, добавляют субстрат для выявления фермента. В положителыных случаях в лунках появляются бурое окрашивание. В отрицателытых анализах субстрат бесцветен. Сравнив цвет испытуемого образца с контрольными, приходят к определенному заключению о наличии антител в крови к вирусу СПИД и, следовательно, соответствующего заболевания. ЗАДАНИЕ N 219 В районе дислокации ССО в связи с отсутствием стационарного жилья необходимо развернуть палаточный городок. По указанию главного врача СЭС перед эпидотделом поставлена задача: представить заключение о степени хозяйственно-бытового загрязнения территории, на которой будет развернут палаточный городок. ЗАДАНИЯ 1. С какой целью и для чего поставлена вышеуказанная задача? 2. Какие санитарно-показательные микроорганизмы необходимо выявлять в объектах внешней среды, почве? 3. Требования, предъявляемые к санитарно-показательным микроорганизмам? 4. Какой материал подлежит исследованию в баклаборатории, правила его взятия, этапы исследования? 5. Какими могут быть результаты исследования и как их необходимо трактовать? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1. Для определения санитарно-эпидемиологического состояния почвенного покрова, выбора источника водоснабжения, мест водозабора при размещении ССО. 2. Санитарно-показательные микроорганизмы при исследовании почвы: кишечная палочка, анаэробы, протей, термофилы. 3.1. Они должны постоянно и в значительно больших количествах (чем патогенные микробы) содержаться в выделениях человека и теплокровных животных. 3.2. Сроки сохранения их жизнеспособности во внешией среде должны совпадать или превышать сроки сохранения выделяющихся этими же путями патогенных микробов 3.3. Не должны интенсивно размножаться во внешней среде. 3.4. Должны легко обнаруживаться, идентифицироваться с помощью простых, несложных методов и не иметь во внешней среде сапрофитов, дифференциация с которыми была бы сложна. 3.5. Должны быть свободны от ингибирующего действия сапрофитов. 3.6. Не должны обладать рано наступающей и далеко идущей изменчивостью. 4. Почва. На обследуемой территории до 1000 м2 выделяют два участка площадью 25 м2. Один участок вблизи источника загрязвения (свалка, мусорный ящик), другой вдали - контроль. С каждого участка составляют средний образец из отдельных проб, взятых в 5 точках по диагонали или в 4 точках по краям и одной в цетре, стерильным инструментом - нож. Во время отбора проб удаляют поверхностный слой почвы толщиной 1-2 см, так как исследование его не отражает истинной картины микробного пейзажа в силу действия инсоляции, подсушивания и т. д. При исследовании поверхностных слоев почвы образцы берут на глубине до 20 см, для установления эффективности обезвреживания нечистот - на глубине 25—150 см. Масса образца - 200-300 гр., а смешанного - 1 кг. Пробы переносят в стерильные банки с ватно-марлевой пробкой. К банке приклеивают этикетку с датой, номером взятой пробы. Банки немедленно доставляют в лабораторию. Если нет возможности приступить к обработке почвы в тот же день, допускается хранение проб почвы в холодильнике не более 24 час. при 1-2°С. Санитарно-бактернологический анализ почвы включает: определение общего числа в 1 г почвы; установление титра Е. сoli; oпределепие титра анаэробов (CL. рeriringens); титра Рroteus; количество термофилов. При наличии эпидемиологических показаний производят исследование почвы на зараженность бактериями тифопаратифозной группы, клостридиями столбняка, ботулизма, сибирской язвы и др. Методика определения микробного чнела почвы аналогична той, которую применяют при исследовании воды. Определенне коли-титра почвы производят методом бродильных проб с использованием среды Кесслер или среды ТТX (трифенилтетразолхлорид), методом мембранных фильтров. Метод бродильных проб с использованием среды Кесслер: Из основной извеси почвы 1:10 готовят разведения: для чистых почв - 1:10, 1:100, 1:1000, 1:10000: для загрязненных - от 1:1000 до 1:1000000. Из приготовленных разведений по 1 мл засевают в среду Кесслер, для определения коли-титра и пробирки со средой Тукаева для определения перфрингенс-титра по схеме 1: При определении перфрингене-титра для освобождения от посторонней неспороносной микрофлоры посевы прогревают в водяной бане при 80°С 15 мин., выращивают при 43°С 10-20 час. Посевы со средой Кесслер культивируют при 48°С 48 час. Коли-титр почвы соответетвует забродившей пробе в пробирке с посевом наибольшего разведения почвенной суспензии в среде Кесслер. Из забродивших проб на среде Кесслер производят высев петлей на среду Эндо. Инкубация в термостате 17-18 час. Производят учет измененнй роста на молочных средах Тукаева. Из положительных проб готовят мазки, окрашивают по Граму, микроскопируют. При наличии в мазках грамположительных палочек рассчитывают перфрингенститр почвы. Изучают посевы на среде Эндо. Отбирают колонии, типичные для бактерий кишечной группы, готовят мазки, окрашивают по Граму, микроскопируют. При обнаружении трамотрицательных палочек делают пересев на среду Эйкмана (2-я бродильная проба), посевы помещают в термостат. Проводят учет результатов 2-й бродильной пробы, определяют коли-титр почвы. Сопоставление величин коли-титра перфрин-генс-титра почвы. Схема санитарной оценки почвы по коли-титру и перфрингенс-титру: Характеристика загрязнения почвы по результатам комплексного определения санитарно-показательных микробов ЗАДАНИЕ 220 Среди группы туристов (25 человек), которые использовали для питья воду из озера, у 7 человек через 2 дня появились симптомы острого гастроэнтерита. Для санитарно-бактериологического анализа была взята вода данного источника и доставлена в баклабораторию. Необходимо определить соответствие показателей качества данного образца требованиям, предъявляемым к воде открытых водоемов. ЗАДАНИЯ 1. Для чего веобходнмо провести санитарно-бактериологический контроль воды из озера? 2. Какие показатели, характеризующие чистоту воды, необходимо определить? 3. Для каких заболеваний бактериальной и вирусной природы фактором распространения может служить вода? 4. Какие мероприятия необходимо провести с целью предотвращения последующих заболеваний среди лиц, осуществляющих турпоходы по данному маршруту? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1. Необходимость в санитарно-микробиологическом исследовании воды открытых водоемов возникает при выборе мест водозабора, отводе участков для пляжей, изучении эффективиости естественного самоочищения или искусственного обеззараживания воды, а также в связи с неблагополучной эпидемической обстановкой. 2.1. Определение общего количества бактерий в одном миллилитре исследуемой воды - микробное чнсло. 2.2. Определение коли-титра и коли-индекса. 2.3. При коли-индексе выше 10000 проводят дополиительные бактериологические исследования на показатели свежего фекального загрязнения, патогенные энтеробактерин и энтеровирусы. 3. Дизентерия, брюшной тиф. паратиф А и В, холера, заболевания, вызываемые энтеропатогенными кишечными налочками, полиомиелит. Коксаки, ЭКХО, гепатит А и др. 4. Разъяснить туристам о сложившейся эпидобстановке. Запретить использование воды данного водоема для питья, приготовления пищи. Рекомендовать туристам брать с собой запас воды. Провести искусственное обеззараживание воды и последующие контрольные бактериологические исследования ее эффективности ЗАДАНИЕ 221 По эпидпоказаниям для санитарно-бактериологического анализа в лабораторию направлена проба воды открытого водоема. Необходимо определить соответствие данного образца воды требованиям, предъявляемым к воде открытых водоемов. ЗАДАНИЯ 1. Для чего необходимо провести санитарно-бактериологический контроль воды? 2. Укажите санитариобактериологические показатели, характеризующие чистоту воды и методы их определения. ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1. Санитарно-микробиологическое исследование воды производится при выборе источника централизованного хозяйственно-питьевого водоснабжения, изучении эффективности естественного самоочищения или искусственного обезвреживания воды, при систематическом санитарном контроле и по эпидемическим показаниям. 2.1. О степени микробной обсемененности воды судят по микробному числу - количеству Е. Coli, обнаруженных в 1 мл воды; бродильному титру-наименьший объем воды, при засеве которого на питательную среду с глюкозой обнаруживается газообразование; коли-титру-наименьший объем воды, в котором обнаруживаются Е. Сoli; коли-индексу-количество кишечных палочек в 1л воды. Согласно требованиям ГОСТа определяют содержание в 1 мл исследуемой воды мезофильных анаэробов и факультативных анаэробов, способных при 37°С в течение суток на МПА образовывать колонии, видимые невооружённым глазом. Из каждой пробы делают высев не менее двух различных объемов. При исследовании чистых вод засевают 1-0,1 мл, более загрязненных вод-0,01—0,001 мл. Указанные объемы вносят в 2 чашки Петри и заливают тонким слоем предварительно растопленного и остуженного до 45°С МПА. Перемешивают, дают застыть, посевы выращивают в течение суток при 37°С. Производится подсчет колоний, выросших на поверхности агара, и в глубине с помощью лупы, дающей увеличение в 2-5 раз. Оценивают только те разведения, при посеве которых выросло от 30 до 300 колоний. Бродильный метод. 1-й день. Посев воды в глюкозо-пептонную среду. Объемы 100 мл, 10 мл засевают в концентрированную среду, дозы по 1,0 и 0,1 мл засевают в пробирки со средой нормальной концентрации. Посевы инкубируют 24 часа при 37°С. 2-й день. Определение бродилького титра на глюкозо-пептонной воде по помутиению и образованию кислоты и газа во флаконах и пробирках. Отсутствие помутнения и газа позволяет дать отрицательный ответ и закончить исследование через 24 часа. Высев из забродивших проб на среду Эндо. Чашки инкубируют в термостате 16- 18 часов при 37°С. 3-й день. Осмотр и бактериоскопия выросших на среде Эпдо колоний. Постановка оксидазного теста. Пересев грамоотрицательных оксидазоотрицательных палочек в полужидкую среду с глюкозой. Инкубация при 37°С 4-5часов. 4-й день. Учет роста в полужидкой среде с глюкозой. При наличии кислоты и газа дают положительный ответ, при отсутствии- отрицательный. При наличии только кислоты оставляют на 24 часа. При отсутствии газа через 24 часа дают окончательный отрицательный результат. По таблицам определяют коли-титр, колииндекс. 2.2. Применяется метод мембранных фильтров. При исследовавии воды неизвестного качества фильтруется 34 дясятикратных объема (например, 3,03 30,0; 100; 200). Когда через фильтр пропускают определенный объём воды, его вынимают, стерильным пинцетом переносят на чашки со средой Эндо так, чтобы он прилегал к среде нижней стороной, чашки помещают в термостат при 37°С на 24 часа, учет-на 2 сутки. При наличии бактерий группы кишечной палочки вычисляют коли-индекс, учитывая объем анализируемой воды. ЗАДАНИЕ 222 При плановом обследовании определения степени загрязненности воздуха родильного дома произведен посев воздуха на чашки Петри с МПА с использованиеи аппарата Кротова. Через сутки произведен учет роста колоний. Суммарное число на двух чашках составило 1600 колоний. На основании полученных данных сделан вывод о высокой стенени загрязненности родильного дома. Заведующий отделением получил предписание СЭС закрыть роддом и провести экстренные профилактические мероприятия. ЗАДАНИЯ 1. Правомочно ли заключение СЭС на основании полученных данных? 2. Для чего необходим санитарно-бактериологический контроль воздуха лечебно-профилактических учреждений? 3. Какие методы санитарно-бактернологического исследования воздуха могут быть использованы? 4. На какие показатели чистоты воздуха следует ориентироваться при проведении исследований воздуха? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1. Нет. Потому, что при обследовании степени загрязненности воздуха родильного дома с использованием аспирационного метода определено количественное содержание бактерий, а качественный состав микрофлоры не проведён. 2. Для разработки комплекса мероприятий, направленных на профилактику воздушно- капельных и внутрибольничных инфекций в лечебном учреждении. 3. Для микробиологического исследования воздуха пользуются методами, в основу которых положены оседания (седиментация) и аспирация. При помощи седиментационных методов можно получить общее представление о встречающихся в воздухе микроорганизмах. Аспирационные методы позволяют определить не только качественное , но и количественное содержание бактерий в определенном объеме воздуха. 4. Операционные: в одном кубическом метре воздуха до операции микробное число-500; после операции микробное число-2000; патогенных стафилококков, стрeптококков не должно быть. Послеоперационные палаты, отделения реанимации: микробное число-750; родильный дом, родильные залы, при поступлении рожениц и приеме родов -1500; патогенных стафилококков и стрептококков не должно быть. Однако эти показатели относительны. ЗАДАНИЕ 223 В населенном пункте возникла неблагоприятная эпидемиологическая ситуация. Она характеризовалась распространением среди населения заболеваний, вызываемых вирусами Коксаки А. Вирусологическая лаборатория выделила эти вирусы как из исследуемого материала, взятого от больных, так и из сточной воды канализационной сети. Исследования сточной воды проводились с целью установления носительства вирусов Коксаки А среди жителей этого населенного пункта. ЗАДАНИЯ 1. Каким образом проводится забор пробы сточной воды? 2. О чем свидетельствует наличие вирусов Коксаки А в сточной воде? 3. Составьте схему вирусологического исследования, которое позволит Вам выделить этих впрусов из сточной воды. ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1. Методом с использованием тампонов Муре: в один из коллекторов канализационной сети на 18-24 час устанавливается ватно-марлевый тампон (стерильный) на специальном держателе, а затем в стерильном целлофановом пакете доставляется в лабораторию. 2. Об эпидемиологическом неблагополучии в данном районе и наличии носителей вирусов Коксаки А, которые выделяют их с испражнениями. 3.1. Проба сточной воды из целлофанового пакета переносится в стерильную посуду. 3.2. Затем проводится концентрация вирусов на бентоните-в специальных колонках. 3.3. Обработка проводится концентрация вирусов смесью антибиотиков (нистатин, пенициллин, стрептомицин). 3.4. Заражение клеточных культур - ФЭЧ, Нер-2, Детройт-6 и заражение новорожденных мышей. 3.5. Поскольку вирусы Коксаки А плохо репродуцируются в тканевых культурах, дальнейшее наблюдение ведется за лабораторными животными. 3.6. У новорожденных мышей на 3-5 сутки развиваются вялые параличи и гибель. 3.7. Идентификация выделенных вирусов проводится с помощью специфической поливалентной и типовых сывороток против вирусов Коксаки А в РСК и РБН. Задание № 74 При исследовании иммунологического статуса больного со злокачественной опухолью желудка выявлено значительное снижение относительного и абсолютного количества Т-лимфоцитов в периферической крови. ЗАДАНИЯ 1. О чем может свидетельствовать снижение количества Т-лимфоцитов в крови больного ? 2. Каким методом можно определить содержание Т-лимфоцитов в крови? 3. Какие изменения Т-звена клеточного иммунитета могут выявляться у онкологических больных? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1.О нарушении Т-клеточного звена иммунитета. 2.Методом спонтанных розеток с эритроцитами барана ( тест Е-РОК ). 3.При злокачественных новообразованиях развивается вторичная недостаточность иммунной системы, степень которой зависит от локализации, гистологического типа и распространенности опухолевого процесса. У большинства больных при злокачественных новообразованиях наряду с уменьшением количества Т-клеток в крови, снижается их функциональная активность. Кроме того, у таких больных выявляется выраженная спонтанная супрессорная активность лимфоцитов, которая не наблюдается у здоровых лиц. У здоровых лиц содержание Т-супрессоров не превышает 10% от общей популяции Т-лимфоцитов, у онкологических больныхзначительно выше. ЗАДАНИЕ № 136 В инфекционном отделении находится лихорадящий больной С., который поступил по направлению участкового терапевта с диагнозом «брюшной тиф?». Болен одну неделю. Для подтверждения или исключения поставленного клинического диагноза врач-инфекционист назначил бактериологическое исследование крови. ЗАДАНИЯ 1.Как называется назначенное больному исследование? Объясните целесообразность его назначения. 2. Как необходимо провести посев крови, на какие среды в этот срок заболевания (первая неделя)? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1.1.Исследование называется : выделение методом гемокультуры. 1.2.В первые дни заболевания тифо-паратифами наблюдается бактериемия, поэтому возбудителя болезни можно выделить из крови. 1.3.Больной С. Болен всего одну неделю, значит у него в случае брюшного тифа можно обнаружить S. typhi. 2.1.У этого больного на исследование нужно взять 10 мл крови из вены стерильным шприцем, который стерилизовался в автоклаве и посеять непосредственно у постели больного во флакон со 100 мл 10-20% желчного бульона или среды Раппонорт. 2.2.При отсутствии среды с желчью можно засеять кровь в обычный МБП или во флакон с 100 мл стерильной дистиллированной воды. 2.3.Если кровь не может быть засеяна в питательную среду у постели больного, её направляют в баклабораторию в стерильной пробке. 3.Основная цель-выделить из крови салмонелл брюшного тифа.
