Содержание Введение.................................................................................................................................................... 3 Часть 1 «ГХ ChemStation» - Анализ данных и Интегрирование................................................... 4 Основные параметры интегрирования........................................................................................ 13 Tangent Skim Mode........................................................................................................................ 13 Tail Peak Skim Height Ratio ......................................................................................................... 15 Front Peak Skim Height Ratio....................................................................................................... 15 Skim Valley Ratio ........................................................................................................................... 16 Baseline Correction......................................................................................................................... 17 Peak-to-Valley Ratio....................................................................................................................... 18 Дополнительный параметры интегрирования........................................................................... 18 Area Reject ...................................................................................................................................... 18 Area Sum ......................................................................................................................................... 19 Baseline at Valleys........................................................................................................................... 20 Baseline Backwards ........................................................................................................................ 20 Baseline Hold................................................................................................................................... 21 Baseline Next Valley ....................................................................................................................... 21 Baseline Now.................................................................................................................................... 22 Detect Shoulders.............................................................................................................................. 23 Height Reject ................................................................................................................................... 24 Negative Peak .................................................................................................................................. 26 Shoulders Mode............................................................................................................................... 26 Slope Sensitivity .............................................................................................................................. 27 Split Peak ......................................................................................................................................... 29 Tail Tangent Skim........................................................................................................................... 29 Tangent Skim Mode........................................................................................................................ 30 Unassigned Peak.............................................................................................................................. 30 Peak Width, Auto Peak Width, Fixed Peak Width ..................................................................... 30 Введение Данное руководство поможет вам освоить некоторые рабочие приемы по работе с программным обеспечением фирмы «Agilent» ChemStation rev.B. «Метод и Контроль» вы можете изучить сами непосредственно при работе с прибором. Содержание данного руководства: Запуск ChemStation в «off-line» режиме Запуск и обработка файлов данных Данное руководство поможет вам освоить некоторые приемы обработки данных при работе с программным обеспечением Agilent ChemStation версии B (разделы, касающиеся работы с прибором в данном руководстве не рассматриваются). Содержание данного руководства: Запуск ChemStation в «off-line» режиме Запуск и обработка файлов данных Список сокращений используемых в тексте: ГХ – газовая хроматография (газовый хроматограф) ЖХ – жидкостная хроматография (жидкостной хроматограф) 3D – трехмерная (спектральная) хроматограмма МС – масс-спектрометрия (масс-спектрометр) ЖХ/МС – жидкостная хромато-масс-спектрометрия Часть 1 Agilent «GC ChemStation» - Анализ данных и Интегрирование Что такое интегрирование? Интегрирование определяет пики на хроматограмме (сигнала детектора) и рассчитывает их площадь. Шаги интегрирования: Количественное выражение – вычисления значений высоты и площади пика Расчет чистоты пиков (только для ЖХ 3D и ЖХ/МС систем) Поиск по библиотеке спектров (только для ЖХ 3D и ЖХ/МС систем) Какие действия выполняет интегрирование? По окончании записи сигнала хроматографа (хроматограммы), программное обеспечение выполняет следующие шаги: Нахождение начало и конца каждого пика и маркировка этих точек вертикальными метками (отрезками) Определение вершины каждого пика - время удерживания (retention time) Построение базовой линии (base line) Расчет площади, высоты и ширины каждого пика Этот процесс контролируется параметрами, которые называются - события интегрирования. Загрузка файла данных (хроматограммы) интегрировании (задание условий и событий) и оптимизация Внимание: Все операции описываются для работы в «OFFLINE» режиме, но они так же верны и для «ONLINE» режима!! 1. Запустите Прибор 1 в «OFFLINE» 2. При запуске программы не должно быть отражено ни каких ошибок!!!! Если все таки какие то ошибки были обнаружены при запуске программы просто нажмите «ОК» 3. Установите в «ChemStation» в меню «View» - полный вид «Full Menu» как показано на рисунке (если полный вид уже установлен, то в меню «View» должно гореть «Short Menu») 4. Переключитесь в режим «Анализ данных» (Data Analysis) (с помощью вкладки меню Вид (View) или кликнув мышью в левом нижнем углу на соответствующей закладке) 5. Сохраните метод как Integration.M (или присвойте свое имя). Для имени используйте латинский шрифт Файл\Сохранить как\Метод (File\Save As\ Method) чтобы сохранить метод под текущем именем кликните мышью на иконке как показано на рисунке 6. С лева вы видите панель «Анализ данных» («Data Analysis»), на этой панели находиться дерево ваших хроматограмм, если вы нажмете на , то эта панель скроется, что может быть очень удобным во время обработки данных. 7. С помощью этой панели хроматограмм загрузите файл либо с помощью меню File/Load signal. В данном случае загрузим сигнал (файл хроматограммы) Demo\100FID5.D. Масштаб пиков зависит от настроек в «Signal Options», а интегрирование от настроек в «Integration Options». Перейдите в «Graphics/Signal Options» установите «Full Scale», и посмотрите, как измениться вид хроматограмме Рассмотрим меню «Graphics» Настройка Перевод Параметры сигнала Signal Options Zoom In Увеличение Zoom Out New Annotation Line Annotation Move Annotation Уменьшение Новое примечание Линия примечания Передвинут примечание Удалить примечание Новое «WMF» примечание Правка параметров примечания Delete Annotation New «WMF» Annotation Edit Annotation Options Что дает Настройка параметров отображения сигнала, хроматограмм и отображения вспомогательных параметров Когда вы начинает масштабировать хроматограмму вы используете либо данную функцию, либо иконку на панели Возврат к полному виду хроматограммы Добавление надписи на хроматограмме Подчеркивание надписи Эта функция поможет вам передвинуть примечание Удалить примечание Сохранить примечание, как отдельный файл Изменение параметров примечания :шрифта, размера шрифта, стиля шрифта, добавление эффектов(подстрочный и зачеркнутый) и т.д. Копировать в буфер Копирование в буфер обмена графика Copy to хроматограммы Clipboard Рассмотрим настройки который вы можете произвести в окне «Signal Options»: Настройка Перевод Что дает Содержит Настройка, которая вам позволит увидеть название пика или Include время удерживания или все это вместе, установите маркер напротив необходимого значения Axes Ось Если поставите маркер, напротив этого параметра, то на графике хроматограмм появятся оси: В противном случае вы видите такую картинку: Baselines Базовая линия При выборе данного параметра, вы сможете видеть под пиком его базовую линию Compound Names Имя компонента Позволяет отражать над пиком имя компонента. Retention Times Время удерживания Позволяет отражать над пиком имя компонента. Tick Marks Контрольная метка Контрольная метка показывает начало и конец пика. Выглядит как маленькая вертикальная полоска, видна только при большом увеличение: Non – overlapping labels Не Функция удобно если у вас на хроматограмме много близко накладывающиеся находящихся пиков, например, если вы выбрали этот пункт метки меню то: два близко стоящих пиков будут выглядеть так, а преувеличение так Peaks Labels Font Font Name Font Size Ranges Шрифт метки пика Название шрифта Размер шрифта Диапазон Full Полный Use Ranges Используемый В этом пункте вы задаете параметры отображения, при этом диапазон у вас активно окно параметров Диапазон времени Диапазон отклика Time Range Response Range Изменение шрифта пика С помощью кнопки «Font» вы можете изменить шрифт и его размер В этом меню вы можете выбрать масштаб изображения хроматограмм Масштаб отображает все хроматограмму При этом от всей хроматограммы вы видите только ее часть Autoscale Авто масштаб Несколько Multi1 Chromatogram хроматограмм 1 В этом меню программа сама масштабирует хроматограмму. Так же в этом режиме активна функция масштабирования по времени, что бывает удобно если вы хотите отсечь растворитель Этот пункт меню поможет вам вывести несколько хроматограмм для сравнения в удобном для вас виде. Для того чтобы у вы могли работать с несколькими хроматограммами необходимо выберете File→Overlay Signal и необходимую для вас хроматограмму, если вам необходима еще одна повторите действие. Для того чтобы вернуть все в прежний вид необходимо просто загрузить исходную хроматограмму. Layout Размещение Separated Разделение Overlaid Наложение Здесь вы задаете, как вы хотите видеть хроматограммы, если вы загружаете одновременно 2 и более сигнала Каждая хроматограмм отображается в своем окне, это удобно для отображение 2-х хроматограмм Все хроматограммы отображается в одном окне. Масштаб Масштабирование хроматограмм Все в одном Все хроматограммы отображаются в одном масштабе масштабе Каждый в своем Каждая хроматограмма и отображается в своем масштабе масштабе Увеличение Позволяет увеличивать масштаб хроматограмм, разделенных отображающихся в разных окнах. Итак, вернемся к интегрированию: 8. Установите автомасштабирование «Graphics/Signal Options» - происходит масштабирование по второму наибольшему пику. Scale All the same Scale Each in full Scale Zoom separate 9. Выполните «Auto-integration»(авто-интегрирование) путем Integration \ Auto Integrate или используя иконку на панели. Результат Автоинтегрирования будет таким как показано на рисунке ниже – заметьте, что все пики буду проинтегрированы и найдены их времена удерживания. Под хроматограммой будет расположена таблица результатов. Для детектора ПИД (FID) высота в пикоамперах (пА), площадь в пикоампер – секундах. 10. Так же вы можете установить параметры интегрирования в ручную. Но сначала давайте познакомимся с меню интегрирования: В меню интегрирования можно войти двумя способами : через вкладку «Integration» в главном меню (см. рисунок ниже) через иконку расположенную в панели над хроматограммой Так оба меню копируют друг друга, то ниже приведена таблица с расшифровкой функций, их описания. Название функции в меню Integration Интегрирование В ход в меню интегрирования Integrate Рассчитать Integration Events События интегрирования Auto Integration Автоингерирование Draw Baseline Нарисовать базовую линию Negative Peak(s) Tangent Skim Расчет инверсионного пика (отрицательного) Наклонная базовая линия Расчет данной хроматограммы по заданным параметрам метода С помощью данной функции вы можете задать параметры интегрирования в ручную (функции в данном подменю будут рассмотрены подробней ниже) Данная функция проводит автоматическое интегрирование хроматограммы. Расчет полностью всей хроматограммы по заводским настойкам. Вы рассчитываете на максимальной чувствительности. Нарисовать базовую линию (т.е. ВЫ сами подводите базовую линию так как считает правильным) Данная функция позволит вам сделать расчет инверсионного пика (отрицательного). Split Peaks Разделение пиков Delete Peak(s) All Valleys Удалить пик Функция удаления пиков Все долины Copy Manual Events to Method Apply Manual Events from Method Remove Скопировать ручные настройки из метода Применить ручные настройки из метода Если вы включи эту функцию, то при ручном интегрирование (кода вы используете функции «Tangent Skim», «Draw Baseline» и «Negative Peak(s)» программа автоматически будет рассчитывать пики, разделять пики если вы подводите одну базовую линию под двумя пиками) Скопировать ручные настройки в метод (те настройки, которые вы вводили сами) 2 Перевод Удалить ручные Иконка на панели Описание С помощью данной функции вы можете подвести базовую линию под пиком наездником. 2 Это функция поможет вам разделить два пика, если вы подними предварительно провели одну базовую линию. Например: Применить ручные настройки из метода( те настройки которые вы вводили сами) Удалить ручные настройки из метода( те Если вы поэкспериментируете, то увидите что функции «Draw Baseline» и «Tangent Skim» копируют друг друга! Manual настройки Events from метода Method из настройки которые вы вводили сами) Этот маркер показывает вам как настроен вид вашего отчет – в данном случае вид отчета короткий Теперь рассмотрим самую важную часть в разделе Интегрирование – События интегрирования и параметры, которые можно использовать в этом разделе. Для удобства все параметры так же сведены в таблицу Что бы войти в режим настройки «Integration Events» необходимо либо Integration→ → Integration Events, либо Разобьем на несколько областей функции интегрирования. Области: • Область 1 – В этой области размещены иконки быстрого доступа к настройкам интегрирования. • Область 2 – Область, в которой собраны иконки основных функций «добавить», «удалить», «скопировать», и т.д. • Область 3 – С помощью данной области вы можете исключить ручные настройки из параметров интегрирования данной хроматограммы. Если не поставить в данной области маркер, то при следующем просмотре хроматограмм ручные настройки будут удалены. • Область 4 – Таблица настроек интегрирования относящаяся ко всем сигналам, которые снимаются на вашем приборе. • Область 5 – В данной области вы выбираете, для какого сигнала (детектора) вы будите производить настройки • Область 6 – Область, в которой находиться таблица настроек событий интегрирования. Данная область настраиваться для каждого сигнала отдельно. Таблица настройки параметров интегрирования разделена на две части: В первой находятся параметры которые относятся ко всей хроматограмме (напротив них в столбце «Time» стоит «Initial»), во второй части параметры которые вы будите вносить. Рассмотрим функции и настройки расположенные в областях 2 и 4. И совместим рассмотрение областей 1 и 6. Область 2 Функция Описание выход из режима Сохранение настроек и изменения параметров интегрирования. Выбор детектора, для которого вы будите производить настройки Открыть таблицу событий интегрирования для извлечения настроек (для каждого детекторов программ предложит вам автоматические настройки) Добавить новое событие интегрирования Удалить событие интегрирования Таблица сигналов и явлений используемых для интегрирования других сигналов Выход из режима редактирования событий интегрирования Справка Область 4 Основные параметры интегрирования Tangent Skim Mode Перевод Построение касательной (базовой линии) для пика наездника Возможные значения Straight Exponential Standard (Default) New Exponential Перевод Прямая Экспоненциальная Стандартная (в данном случае правильней сказать комбинированная, так как в этом случае используются сразу два возможных значения Straight и Exponential) Новая экспотенциальная Рассмотрим каждое возможное значение параметра отдельно. Обратите внимание что ниже представлена хроматограмма рассчитанная с помощью автоинтегрирования, т.е в настройках используется Standard (Default). Все остальные параметры мы будем сравнивать относительно этой хроматограммы. Разберем эту хроматограмму – Для пика наездника в данном случае применяется экспоненциальная кривая, а для основного пика как видно из рисунка прямая. Но в данном случае программа сама автоматически выбирает между Exponential и Straight Straight – в данном случае пик наездника будет подводиться прямой базовой линией, как показано на рисунке Exponential – этом случае пик-наездник подводиться базовой линией в виде экспоненциальной кривой. Базовая основного пика так и остается прямой. New Exponential – данном виде отрезок представляет с собой апрокисмацию экспоненты и выглядит как отрезок прямой 0.422 0.382 5.8 0.334 FID1 A, (DEMO 1\100FID20.D) pA 5.6 5.4 5.2 5 0.35 0.4 0.45 0.5 0.55 min Подводя итог, предлагается использовать как оптимальное решение Standard (Default) , но пользователь может выбирать для сложных случаев и другие возможные значения. Tail Peak Skim Height Ratio Перевод Возможные значения Просматривание отношения высот пиков, с 0 – функция отключена. Любое числовое значение затянутыми хвостами Если отношение высот пика Нр/Нс больше указанного вам значения, то первый пик автоматически достраивается до идеального как показано на рисунке и площадь второго пика автоматически занижается. В противном случае, два пика будут поделены стандартным образом Деления с помощью достраивания Стандартное разделение Данную функцию удобно использовать применительно к исследуемым пикам, если второй пик из двух плохо разделившихся вас не интересует Front Peak Skim Height Ratio Перевод Просматривание отношения затянутым фронтом высот пиков, Возможные значения с 0 – функция отключена. Любое числовое значение Данная функция работает так же как Tail Peak Skim Height Ratio, только для фронта пика. Если отношение высот пика Нр/Нс больше указанного вам значения, то второй пик автоматически достраивается до идеального как показано на рисунке и площадь первого пика автоматически занижается. В противном случае, два пика будут поделены стандартным образом. Деления с помощью достраивания Стандартное разделение Skim Valley Ratio Данная функция работает вместе с «Front Peak Skim Height Ratio» и «Tail Peak Skim Height Ratio» и рассчитывает соотношение высот двух не полностью разделенных пиков. Вы задаете соотношение, если соотношение высот ваших пиков меньше указанного значения, то программа при помощи одной из этих функции «Front Peak Skim Height Ratio» и «Tail Peak Skim Height Ratio» корректно проводит базовую линию. Baseline Correction 0 .3 8 2 0 .4 2 2 FID1 A, (DEMO 1\100FID20.D) pA 9 8.5 8 7.5 0 .3 3 4 7 6.5 6 5.5 5 0.325 0.35 0.375 0.4 0.425 0.45 0.475 0.5 0.525 min Без пересечения 7 0 .4 2 2 FID1 A, (DEMO 1\100FID20.D) pA 0 .3 8 2 No Penetration 6.75 6.5 6.25 6 5.75 5.5 5.25 5 0.35 0.4 0.45 0.5 0.55 min Продвинутая коррекция 0 .4 2 2 FID1 A, (DEMO 1\100FID20.D) pA 0 .3 8 2 Advanced 8.5 8 7.5 0 .3 3 4 Коррекция базовой линии Возможные Перевод значения Classical С помощью данной функции вы задаете параметры коррекции базовой линии - Классическая 0 .3 3 4 Перевод 7 6.5 6 5.5 5 0.3 0.325 0.35 0.375 0.4 0.425 0.45 0.475 min Разница между «No Penetration» и «Advanced» заключается в том, что функция «No Penetration» просто запрещает пересечение линии пика, а «Advanced» производит оптимизацию начала и конца пика и запрещает пересечению Peak-to-Valley Ratio Перевод Отношение высоты пика к высоте точке перегиба двух не полностью поделенных пиков Возможные значения Числовое значение С помощью данной функции вы можете использовать различное построение базовой линии двух не полностью разделенных пиков. Вы задаете соотношение высоты пика Нс к Нmin. Если это соотношение меньше указанного параметра, то базовая линия строиться от начало первого пика до конца второго и перпендикуляр из точки перегиба. Если же соотношение больше заданного вами параметра, то базовая линия стоиться из начала первого пика до точки перегиба и из точки перегиба до конца второго пика. Для облегчения понимания ниже приведен рисунок. Область 6 Дополнительный параметры интегрирования Area Reject Иконка быстрого доступа Перевод Не интегрировать пики, площадь которых указанного значения (исключаемая площадь) Возможные значения Числовое значение меньше Расчет хроматограммы по автонастройкам FID1 A, (DEMO 1\100FID20.D) 1 .6 5 2 pA 16 2 .5 1 6 2 .2 1 8 2 .2 5 5 18 14 12 10 8 6 1.6 1.8 Пики имеют следующую площадь: 1.652 - 13.83561 2.218 - 12.18635 2.255 - 12.55986 2.516 - 15.10048 2 2.2 2.4 2.6 min Если задать условие что не интегрировать пики, площадь которых меньше чем 12.6 то: FID1 A, (DEMO 1\100FID20.D) 1 .6 5 2 pA 2 .5 1 6 18 16 14 12 10 8 6 1.6 1.8 2 2.2 2.4 2.6 min пики имеющие площадь меньше указанного значения обсчитываться не будут. Area Sum Перевод Возможные значения Off On Суммарная площадь Перевод Выкл. Вкл. При включение данной функции пики обсчитываются как сумма. Данная хроматограмма является стандартной, рассчитана с помощью автоинтегрирования. 2 .5 1 6 2 .2 1 8 2 .2 5 5 0 .6 1 3 16 1 .2 3 0 0 .4 2 2 14 12 1 .6 5 2 1 .1 2 6 18 0 .9 6 1 0 .8 0 1 0 .3 8 2 FID1 A, (DEMO 1\100FID20.D) pA 10 8 6 0.5 1 1.5 2 2.5 min Если добавить условие что пики до 0.6 нам нужны суммой, а после этого времени нет. То условие будет выглядеть так А результат таким 0 .6 1 3 16 2 .5 1 6 1 .1 2 6 2 .2 1 8 2 .2 5 5 1 .6 5 2 0 .8 0 1 < 0 .3 0 0 18 0 .9 6 1 FID1 A, (DEMO 1\100FID20.D) pA 14 1 .2 3 0 12 10 8 6 0.25 0.5 0.75 1 1.25 1.5 1.75 2 2.25 2.5 min Baseline at Valleys Перевод Возможные значения Базовая линия подводиться от начало пика до точки перегиба двух не до конца разделенных пиков для первого пика и от нее до конца второго пика. On Off Функция включена Функция выключена Но если вы установите функцию с начала хроматограммы, то так будут обработаны все пики. (почему на этом заостряется внимание это основное отличие от функции Baseline Next Valley) Baseline Backwards Перевод Возможные значения Устанавливает точку, в которой программа расширяет Возможно единственное значение базовую линию горизонтально до пика «» Функция включена Функция выключена Baseline Hold Иконка быстрого доступа Перевод Возможны е значения On Off Функция выключена Функция включена Baseline Next Valley Перевод Возможные значения Базовая линия подводиться от начало пика до точки перегиба двух не до конца разделенных пиков для первого пика и от нее до конца второго пика. On Off Функция включена Функция выключена Данная функция работает только для данных двух пиков и не распространяется на всю хроматограмму ( основное отличие от Baseline at Valleys) Baseline Now Перевод Иконка быстрого доступа Данная функция устанавливает точку начала базовой линии, актуальна для пик наездника. Функция не используется. Если вы задаете следующие условия: То вы получите следующую картинку: Возможные значения Единственное значение «-», оператор не может его изменить Но если вы ошибетесь с точкой начала базовой линии, то можно получить и такой результат (сравните условия с предыдущим рисунком): Распространяется только для этой пары пиков! Detect Shoulders Перевод Нахождение возможных пиков на большом затяжном пике растворителя Иконка быстрого доступа Возможные значения On Off Функция включена Функция выключена Height Reject Перевод Не интегрировать пики, высота которых меньше указанного значения (исключаемая высота) При заданных условиях (условия автоинтегрирования) Вы получите следующий расчет по хроматограмме Возможные значения А если добавить условие и увеличить высоту, то Integration Перевод Интегрирование Иконка быстрого доступа Возможные значения On Off Данная функция задает интервалы интегрирования. Например: То результат будет таким: Т.е вы задали условие: на промежутке от 0.3 до 0.5 не производить расчет. Negative Peak Перевод Возможны е значения Расчет отрицательных (инверсионных) пиков. Необходимо задавать интервал On Off Shoulders Mode Перевод Возможные значения Варианты разметки возможных пиков-наездников на Drop - перпендикуляр большом пике растворителя. Данная функция работает Tan – касательная только при включенной функции Detect Shoulders. Функция с возможным значением Tan Функция с возможным значением Drop Slope Sensitivity Перевод Иконка быстрого доступа Возможные значения Чувствительность к наклону Данная функция позволяет настроить чувствительность к наклону, т.е. определить точки начала и конца пика. Если задать чувствительность – То А если чувствительность увеличить до 300 То результат будет следующим Solvent Peak Перевод Возможные значения Пик растворителя. Данная функция позволяет размечать на ON хвосте пика-растворителя пики-наездники. OFF Рассмотрим хроматограмму Как видно из рисунка, на хвосте пика растворителя присутствует пик вещества, и это вещество рассчитывается некорректно. Тогда если вы используете данную функцию и зададите условие Расчет будет таким Split Peak Перевод Разделить пики Возможные значения «-» Данная функция используется для разделения двух плохо разделенных пиков, причем вы указываете приблизительное время, когда вы считаете что необходимо провести перпендикуляр. Рассмотрим хроматограмму Предположим что в данной группе есть два исследуемых компонента, тогда задаем условие В результате Tail Tangent Skim Перевод Разделение пиков наездников и не полностью разделившихся пиков. Данная функция позволяет вам выбрать способ интегрирования двух плохо разделившихся пиков Функция включена Иконка быстрого доступа Возможные значения On Off Функция выключена Tangent Skim Mode Смотрите «Основные параметры интегрирования» стр.13 Unassigned Peak Перевод Не рассчитывать пика Возможные значения On Off Данная функция позволяет вам рассчитать пики и учесть вклад возможной грязи, которая могла попасть в пробу и не разделиться во время анализа. Используется только если программа в автоматическом режиме рисует «плохую» базовую линию, и вы не можете с помощью других функции настроить нормальное интегрирование. Peak Width, Auto Peak Width, Fixed Peak Width Для более полного понимания рассмотрим эти три функции вместе! Функция Иконка Перевод быстрого Возможные значения доступа Единственное значение «-» и Auto Peak Автоматическая ширина пика. Данная функция оператор не может его изменить Width автоматически увеличивает задается время. расчетную величину ширины пика начиная от первого пика. Числовое значение Fixed Peak Фиксированная ширина пика. С помощью данной функции Width вы задаете фиксированную ширину пика, которая будет обсчитываться Ширина пика. Числовое значение Peak Width Функция Peak Width задает минимальную ширину, которую программное обеспечение будет обсчитывать как пик. Рассмотрим как эти функции работают на практике. 1. Пусть хроматограмма будет рассчитана с помощью автоинтегрирования. В итоге мы получим такую хроматограмму. Настройки параметров интегрирования Теперь поставим «Peak Width» =0.09. Заметьте что первый пик (на предыдущем рисунке) интегрирован как раздельно, после увеличения ширины пика: Теперь предположим что первый пик нам надо интегрировать раздельно, потом второй пик необходимо посчитать вмести с пиком наездником, 3 и 4 не считать, а потом считать только пики с определенной шириной. Введем следующие параметры интегрирования: При этом, необходимо задать «Peak Width» =0.09, а «Fixed Peak Width» =0.06, тогда мы получим следующие интегрирование, причем необходимо отметить, что последние пики проинтегрированы как один! Данную функцию удобно применять при интегрировании пиков высококипящих растворителей, которые обычно выходят в конце хроматограммы и имеют размытую форму. Теперь ведем другие параметры и добавим еще одну функцию: В итоге мы получим такую хроматограмму: Однако, после того как вы применили функцию «Fixed Peak Width», программа автоматически будет рассчитывать только пики с заданной шириной!! Поэтому необходимо использовать на оставшейся длине хроматограммы функцию «Auto Peak Width» для корректного обсчета следующих пиков! Таким образом, с помощью данных параметров вы можете настроить интегрирование таким образом, чтобы получить максимальную воспроизводимость ваших результатов! Не забывайте, пожалуйста, что если вы проводите настройку, используя хроматограммы, с минимальными концентрациями исследуемых веществ, проверить расчет и на максимальных концентрациях! Не забудьте сохранить ваши настройки.
