Лабораторная работа 24

Лабораторная работа 24
Определение содержания каротина в корнеплодах моркови
Принцип метода: используют фотометрический метод. Он основан на переведении
определяемого компонента в растворе в соединение, поглощающее свет, и измерении
светопоглощения полученным соединением.
Если на кювету с окрашенным раствором направить световой поток, то часть его
будет поглощена, а другая пройдет через раствор. Поглощение будет зависеть от
количества молекул, встретившихся на пути светового потока.
Выбирают тот
светофильтр, который пропускал бы лучи, поглощаемые раствором: максимум
пропускания светофильтра должен совпадать с максимумом поглощения раствора.
Светофильтры на ФЭКе установлены с разной длиной волны в области максимума
пропускания. Для измерения их подбирают по принципу дополнительного цвета: при
работе с желто-окрашенным соединением — синий, с синим соединением — красный и
т.д.
Кюветы характеризуются рабочей длиной (расстояние между гранями, которое
указывается на стенке, обращенной к проходящему свету): 5, 10, 20, 30, 50 мм. При
анализе слабоокрашенных растворов берут кюветы с большей рабочей длиной,
сильноокрашенных — с меньшей. Надо, чтобы отсчеты по шкале оптической плотности
не превышали 0,8.
Цель работы: определить количество каротина в корнеплодах моркови.
Ход работы: Навеску моркови (1 г) мелко нарезать и растереть в ступке с песком и
0,3 г СаО (для отнятия воды) до однородной массы. В ступку добавить небольшими
порциями растворитель — ацетон и продолжить растирание. Полученный экстракт слить
в мерную колбу на 25 мл. По окончании экстракции колбу долить растворителем до
метки. Если раствор каротина получился мутный, его фильтруют.
В качестве стандарта используют раствор азобензола (он соответствует 0,00235 г
каротина на 1 мл раствора).
После получения опытного и стандартного растворов приступить к
колориметрированию. Для этого в одну кювету наливают опытный раствор, в другую —
стандартный раствор и колориметрируют на ФЭКе при синем светофильтре. Расчет
производят по формуле:
где X — количество каротина в мг на 100 г моркови;
К — количество каротина для стандарта (0,00235 г);
V — объем раствора в мл (25 мл);
Д1 — оптическая плотность для раствора каротина;
Д2 — оптическая плотность для стандарта.
Определяют суточную потребность человека в моркови, исходя из нормы 5 мг
каротина в сутки.
Оборудование и материалы: 1) корнеплод моркови; 2) ацетон; 3) раствор азобензола; 4) колбы на 25
мл; 5) фарфоровые ступки с пестиками; 6) фильтры; 7) воронки; 8) фотоэлектроколориметр с кюветами; 9)
стеклянные палочки.