Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего профессионального образования

Федеральное государственное автономное образовательное учреждение
высшего профессионального образования
«СИБИРСКИЙ ФЕДЕРАЛЬНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ»
Институт фундаментальной биологии и биотехнологии
Кафедра биофизики
Специальный физический практикум
Под руководством:
О.С. Сутормин
Красноярск, 2013




мониторинг токсичности различных сред
анализ различных метаболитов
определение активности ферментов
другое
Проблема: Ферменты бактериальной
биолюминесцентной системы нестабильны
Цель: исследовать эффекты вязких растворителей
на третичную и вторичную структуры
люциферазы
Задачи:
 Освоить методы флуоресцентной спектроскопии
белковых макромолекул
 Определить методами флуоресцентной
спектроскопии конформационные изменения
модельного белка в вязких средах
L + вязкие агенты
Люминесцентный спектрометр
Концентрация глицерина и сахарозы 25%
Интенсивность, отн. ед
40
35
30
25
буфер
20
глицерин
15
10
сахароза
5
0
250
270
290
310
Длина волны, нм
330
Спектры поглощения люциферазы в разных средах
Интенсивность, отн.ед
12
10
8
6
4
2
0
300
320
340
360
380
400
420
440
Длина волны, нм
Спектры испускания люциферазы в разных средах
 Сахароза и глицерин являются эффективными
протекторами биферментной бактериальной
биолюминесцентной системы
 Сахароза является более сильным вязким
протектором по сравнению с глицерином
 При добавлении исследованных вязких
эффекторов не происходит значительных
конформационных изменений исследуемых
ферментов