***** 1 - MedExpo.kz
advertisement
КОМПЛЕКСНЫЙ ПОДХОД К ДИАГНОСТИКЕ ОСТРОГО ЛЕЙКОЗА: СЛУЧАЙ ИЗ ПРАКТИКИ Научный центр педиатрии и детской хирургии, г. Алматы, 2014 г Лейкозы - опухолевые клональные заболевания кроветворной системы с первичным поражением костного мозга. Мишенью опухолевой трансформации являются стволовые кроветворные клетки и коммитированные клеткипредшественники. Субстрат опухоли представлен бластами. Достоверным диагностическим критерием острого лейкоза является обнаружение бластных клеток в пунктате костного мозга в количестве более 20% клеточного состава ЭПИДЕМИОЛОГИЯ Согласно мировой статистике 3,3-4,7 детей из 100 тысяч заболевают лейкемией в возрасте до 15 лет. Около 40-46 % случаев приходится на детей 2-6 лет. В Казахстане ежегодно заболевают 130 детей Для постановки диагноза «острый лейкоз» по протоколам лечения обязательной составной частью исследований являются: демографическое описание пациента морфология и цитохимия клеток крови и костного мозга иммунофенотипирование цитогенетика, в том числе FISH Согласно существующему алгоритму диагностики для определения варианта лейкоза обязательным является иммунофенотипирование. Определены основные критерии выявления лейкозных бластов, верификации их линейной принадлежности, стадии созревания и определения аберрантности фенотипа с использованием преимуществ многоцветного анализа. ИФТ - является «золотым стандартом» диагностики линейной принадлежности и стадии зрелости бластных клеток. Лейкоз – это клональное заболевание, при котором возможны изменения характеристик лейкозных бластов в течение болезни Проблема! антигенный дрейф, или изменение антигенной экспрессии в течение заболевания или в ответ на адекватную терапию, что является одним из отражений опухолевой прогрессии. Иммунофенотипическая характеристика опухолевых клеток во многом определяется тем, какие моноклональные антитела и в каких комбинациях выбраны лабораторией. FITC CD10 PE CD19 PerCP CD45 APC CD22 PE-Cy7 APC-Cy7 CD34 CD20 Kappa Lambda CD45 IgM CD45 CD15 CD13 CD45 CD117 CD33 CD14 CD4 CD8 CD45 CD2 CD5 CD3 CD7 CD11c CD45 CD41a HLA-DR СD34 CD45 CD41a CD38 TdT MPO CD45 CD79a CD22 K L CD45 IgM CD56 CD3cyt Некоторые комбинации могут показаться повторяющимися или лишними, однако, надо помнить, что опухолевые клетки часто демонстрируют патологическую экспрессию антигенов, т.е. такую характеристику, которая может быть пропущена при использовании неадекватного числа маркеров. Рестриктированная, сокращенная панель может ограничивать возможность и даже приводить к ошибочной диагностике первичного заболевания. Пример : ребенок Х. Р., 14 лет поступил в НЦПиДХ с направительным диагнозом :острый лейкоз. В ОАК: снижение содержания гемоглоблина (ниже 80 г/л) в связи с чем проведена гемотрансфузия эритроцитарной массы. Результаты костно-мозговой пункции: 83.4% бластные клетки. Жалобы при поступлении: повышение температуры тела до 38 С, бледность кожных покровов, слабость, снижение веса, геморрагические высыпания по всему телу, боли в горле и осиплость голоса. Амбулаторно получал антибактериальную терапию. Отмечался кратковременный эффект с последующим повторным подъемом температуры тела. В НЦПиДХ по данным миелограммы: пунктат костного мозга был представлен на 62.4% мономорфными бластными клетками среднего размера, округлой формы, с базофильной цитоплазмой, вакуолизацией ядра. Цитохимические исследования на миелопероксидазу в бластных клетках – отрицательная. Заключение : ОЛЛ, L3 вариант (лимфома Беркитта?). Иммунофенотипирование: в образце костного мозга на цитограмме CD45/SSC выявлена патологическая популяция клеток, составляющая 55% от общего числа ядросодержащих событий. Трансформированные клетки слабопозитивны по CD45, имеют промежуточную степень гранулярности. Суммарный фенотип патологической популяции: CD10+CD19+CD22+CD20+cytIgM+HLADR+CD34+TdT+CD79+Kappa-Lambda соответствует «пре-В варианту ОЛЛ (В3)» РЕЗУЛЬТАТ ИССЛЕДОВАНИЯ FISH: NUC ISH (MYCX2)(5’MYCCEP3’MYCX1)(3’MYCX1)[125]/ (5’MYC,3’MYC)X2[75] ЗАКЛЮЧЕНИЕ При исследовании методом FISH, суспензии костного мозга зондом Color в 62,5% просмотренных перестройка гена C-MYC, что лимфомы Беркитта выполненном на Vysis MYC Dual ядер выявлена характерно для Мы предполагаем, что такое расхождение произошло в результате начатого лечения пациента до поступления в наш центр. Любое однократное введение преднизолона до начала иммунофенотипирования пациента может способствовать слущиванию антигенов с поверхности бластных клеток, и значительно исказить стадию подварианта острого лейкоза. (Антигенный дрейф, или изменение антигенной экспрессии) ОБЪЕКТИВНОСТЬ И СЛАЖЕННОЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ ВСЕХ ЛАБОРАТОРНЫХ ПОДРАЗДЕЛЕНИЙ ПОЗВОЛЯЕТ ОСУЩЕСТВИТЬ КОМПЛЕКСНЫЙ ПОДХОД В ДИАГНОСТИКЕ И ДАЕТ ЛЕЧАЩЕМУ ВРАЧУ ПОЛНУЮ КАРТИНУ ЗАБОЛЕВАНИЯ Спасибо за внимание!
