А. М. Толемисова

“Cоздавая будущее для диагностики ТВ”
Внедрение инновационных
технологий в диагностику
социально значимых заболеваний
в Республике Казахстан
д.м.н., профессор
Толемисова Арай Магауияновна
1
Внедрение новейших методов скрининга и углубленной
диагностики социально значимых заболеваний –
онкологических и туберкулеза - является одной из существенных
задач, решение которых позволило бы снизить высокий уровень
заболеваемости и смертности по этим нозологиям в Республике
Казахстан. Передовые позиции в разрешении этих вопросов
занимает Оздоровительный центр Масимова.
Одним из первых Центр в 2010 году начал работу в новом
направлении - внедрении инновационной технологии ранней
диагностики рака шейки матки совместно с партнерами из
Южной Кореи.
2
В скрининге рака шейки матки впервые в РК была использована
технология жидкостной цитологии с помощью системы Сэлл Скан
южнокорейского производства. Метод жидкостной цитологии
был впервые разработан и одобрен для клинического использования еще в 1996 году в США, а затем получил широкое признание за
рубежом, как эффективный метод скрининга рака шейки матки и
рака некоторых других локализаций, а также предраковых
заболеваний. С помощью системы Сэлл Скан проводится обработка
эксфолиативных клеток, полученных из органов и тканей и
помещенных в презервационный раствор в виалах.
3
Система СellScan Tb
Для сбора образца в системе Сэлл Скан применяется
комбинация методов фильтрации и преципитации.Используют
ся два отличительных метода фильтрации: один из них устано
влен на виале, а другой на мембранной системе. В мембранном
фильтре применяется умеренное вакуумное давление, что
позволяет пропускать презервационный раствор и другие
вещества, кроме тех, которые необходимы для диагностики.
После устранения презервационного раствора и других
веществ на мембране остаются только клетки определенного
размера, которые наносятся в автоматическом режиме в один
слой на микроскопическое стекло, окрашиваются и
микроскопируются.
5
Этапы работы Сэлл Скан
По данным различных авторов, жидкостная технология
производства цервикальных мазков позволяет получить стандартные
цитологические препараты высокого качества, в 6-8 раз снизить
количество неудовлетворительных для оценки мазков и значительно
повысить качество скрининга, уменьшая число ложноотрицательных
заключений, которое при традиционном методе достигает 16%.
Важным преимуществом жидкостной цитологии является
возможность при необходимости провести на полученном материале
дополнительные молекулярные исследования (Hybrid Capture II на
вирус папилломы человека высокого риска, иммуноцитохимические,
молекулярно-генетические и др.).
7
Технология жидкостной цитологии была апробирована
и в ранней диагностике колоректального рака в республике.
Апробация технологии в практических учреждениях
здравоохранения выявила ее большую диагностическую
ценность в сравнении с использовавшимися ранее методами
цитологического исследования, что позволило Оздоровитель
ному центру Масимова при поддержке государства внедрить
технологию жидкостной цитологии в государственную
программу скрининговых исследований по выявлению рака
шейки матки ранней стадии его развития и
колоректального рака.
8
В 2011 году четырем областным онкологическим диспансерам
5-ти городов Центром поставлены по государственному закупу
аппараты жидкостной цитологии CytoFastS.A, а также безвозмезд
но на сумму 8 000 тыс.тенге были переданы расходные материалы
к аппарату, а областному онкологическому диспансеру Южно-Каза
хстанской области – и само оборудование.
В 2013 году комплекты диагностического оборудования Сэлл
Скан 100 и Сэлл Скан 200 безвозмездно переданы 16-ти областным
онкологическим диспансерам, при этом экономия бюджетных сред
ств составила 360 000 тыс.тенге. Параллельно специалисты по
проведению скрининга и по сервисному обслуживанию оборудован
ия за счет средств Центра прошли обучение в Южной Корее.
9
Одним из весьма важных направлений в деятельности Центра
является внедрение инновационных технологий в диагностику
туберкулеза в РК. Несмотря на достаточно сложную эпидемиологиче
скую ситуацию, у Казахстана есть возможность добиться прогресса в
решении этой задачи путем повсеместного внедрения в стране Между
народных стандартов по диагностике и лечению случаев туберкулеза.
Одним
из
важнейших
аспектов
снижения
уровня
заболеваемости туберкулезом является его профилактика, достигаемая
скрининговыми обследованиями населения, в частности, наряду с
другими, бактериоскопией нативного мазка мокроты. Традиционная
бактериоскопия не всегда позволяет обнаружить МБТ. Значительно
повышает ее эффективность концентрирование микобактерий на
стекле, используемое в методе жидкостной цитологии с помощью
прибора Сэлл Скан,
выпускаемого южнокорейской фирмой
Cell & Tech Bio Co.
10
Теория обнаружения туберкулеза методом ЖЦ
Огромное количество слизи
Удаление слизи
Преимущества Сэлл Скан-тb-технологии анализа
мокроты в сравнении с обычной бактериоскопией
Нативный мазок
Дегенерация
пробы
Высокая вероятность
повторного теста
Жидкостная цитология
Стандартизация
пробы
Вероятность
дополнительного теста
Высокая вероятность заражения
Нет риска заражения
Самый распространенный
цитологический метод диагностики
Тонкослойный метод для ясного фона
Результаты окрашивания
Прямой мазок
Посредственный
мазок
(x1000)
Лабораторные испытания, проведенные специалистами
фирмы Cell & Tech Bio Co у 325 больных с подтвержденным
культурально диагнозом туберкулеза показали, что жидкостная
цитология обладает значительными преимуществами перед
обычной микроскопией мазка мокроты. Так, отрицательный
результат при использовании СellScan Tb –метода наблюдался
всего лишь в 2 % случаев, тогда как при обычной
бактериоскопии – в 37% случаев.
Более высок процент обнаружения и при небольшом
количестве МК в полях зрения. Аналогичные результаты были
получены
и в Национальной туберкулезной больнице
Мокпхо-Сити (Ю.Корея).
14
Сравнительные данные по выявлению МБК методом Сell
Scan Tb и обычной бактериоскопией мазка мокроты
СellScan
Результаты
Отрицательный
Положительный
4+ ( более 10 в 1 п/зр)
Абс.
%
7
2
Традиционная
бактериоскопия
Абс.
%
121
37
32
9,8
12
3,69
3+ (1-9 в 1 п/зр)
32
9,8
19
5,8
2+(1-9 в 10 п/зр)
117
36
66
20,3
1+(1-9 в 100 п/зр)
137
42,1
107
32,9
Всего:
325
98 %
325
63%
СellScan Tb – метод позволяет в автоматизированном режиме
осуществить концентрацию микобактерий туберкулеза, нанести
концентрат на микроскопическое стекло и провести сканирование
мазка с выдачей результата.
Аппарат прост в применении, может обслуживаться одним челове
ком (врачом или лаборантом), безопасен в плане возможного
заражения персонала биосубстратами, так как мокрота, кровь и
другой материал забираются в специализированные контейнеры и
обрабатываются в закрытом режиме аппаратом.
Еще одним преимуществом является возможность забора
материала в контейнеры на выезде в отдаленных районах с
последующей обработкой в лабораториях.
16
Преимущества СellScan Tb-метода
 Высокая чувствительность – до 95% (обычная
бактериоскопия – 66%)
 Высокая специфичность - до 100%
 Автоматизированный режим работы
 Простота обслуживания аппарата
 Безопасность
 Возможность онлайн-просмотра
 Возможность забора материала на выезде и последующей
обработкой в лабораториях
 Возможность анализа не только мокроты, но и другого
биоматериала
 Повышение качества и количества выполняемой
специалистами работы
 Расходный материал Сэлл-Скан рассчитан на
о
бработку 120 проб и окрашивание 240 стекол в час, т.е
., за 1 год можно обследовать 172800 человек,
а за
3 года – почти все население РК.
 СellScan Tb - технология прошла апробацию и в Науч
но-исследовательском Центре проблем туберкулеза, г
де получила одобрение.
18
 ОЦМ аппараты жидкостной цитологии для
определения микобактерий туберкулеза поставлены
на безвозмездной основе во все 16 регионов РК,
что позволяет широко использовать этот более
чувствительный цитологический метод и охватить
обследованием значительные слои населения.
19
 Таким образом, внедрение инновационного метода
жидкостной цитологии с помощью системы
Сэлл Скан является одним из необходимых
условий эффективного скрининга и диагностики
туберкулеза и онкопатологии
(рака шейки матки, колоректального рака).
20
Благодарю
за внимание!
Функция антисептика и стерилизации
Тест на культивирование после хранения в презервационном
растворе
Хранение 30 мин
Хранение 2часа
Хранение 24 часа
Эпидемиологическая ситуация по туберкулезу
в РК по данным за 2013 год
Показатели
Заболеваемости, на 100000 населения
Год
2012
2013
Показатели
смертности, на
100000
населения
Всего Взрос- Дети Под- Находя- Всего Находялые
рост- щиеся в
щиеся в
ки
КУИС
КУИС
81,7
105,5 13,7 90,9
941,1
7,4
115,2
73,4
96,0
11,3
76,3
965,8
5,6
88,6
Диагностика TB
Обнаружение TB
Анализ мокроты
Рентгенограмма
Культура, ПЦР
24
Преимущества и ограничения в использовании моле
кулярно-генетических и культуральных методов
диагностики туберкулеза
Метод
Преимущества
Xpert MTB/RIF,  Используется для вы
молекулярноявления МБТ, чувств
генетический
ительности к рифам
метод рекомен
пицину.
дован ВОЗ
 Время – 2-3 часа
 Автоматизировано
 Безопасно для персо
нала
Ограничения в исполь
зовании
 Высокая стоимость
 Требуется соответ-ств
ующее техничес-кое о
бслуживание
 Необходима подго-тов
ка персонала
 Определение чувст-ви
тельности только к ри
фампицину
Преимущества и ограничения в использовании
молекулярно-генетических и культуральных методов
диагностики туберкулеза
продолжение
Hein-test
 Используется д  Высокая стоимость
молекулярно-ге
ля выявле-ния  Требуется соответст-вую
нетический
микобак-терий
щее техническое обслуж
тубер-кулеза (
ивание
МБТ), чувствит  Необходима подготов-ка
ель-ности к ри
персонала
фампицину и и  Длительность
зониазиду.
 Определение чувстви-те
льности только к 2 анти
биотикам
Преимущества и ограничения в использовании молекулярн
о-генетических и культуральных методов диагностики туб
еркулеза
БАСТЕС М  Ускоренное культиви-рован
продолжение  Длительность
GIT-960
ие на жидких питательных  Стоимость
Культураль
средах с автоматической ре
ные методы
гис-трацией роста культур
ы
 Прямое выявление возбуди
теля
 Длительность 7-14 дней
3 Приемы для максимального сохранения клеток
Как получить хорошие результаты
Муколитическое средство
Препятствует растворению
Фильтр
Приводит к химической и физи
ческой реакции свободных мик
роорганизмов, попавших в мок
роту
Микрофильтр отделяет клетки
и микроорганизмы от инородн
ых веществ
Предотвращает воздушно-капе
льный перенос бактерий
Продукт_Cистема ЖЦ Сell Scan_3
○ Метод преципитации и фильтрации (Cell Scan, Cell&Tech Bio)
-Преципитация производится силой центрифуги и гравитацией.
-Два фильтра помогают получить нужное количество клеток.
-Перенос клеток путем штамповки предотвращает потерю клеток.
-При штамповке клетки равномерно распределяются по кругу.
Фильтрующий аппарат
Емкость для преципитации
Автомат
Ручной
Проба
Штамповка
Мембран
а
Аспирация
Механизм