изолированной перфузируемой печени крысы

Федеральное государственное автономное образовательное учреждение
высшего профессионального образования
«СИБИРСКИЙ ФЕДЕРАЛЬНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ»
Институт фундаментальной биологии и биотехнологии
Кафедра биофизики
Особенности метаболизма изолированной
перфузируемой печени крысы
Асанова Анастасия Андреевна
Руководитель работы:
Шадрин К. В.
.
Студенческий лабораторный практикум
Красноярск, 2012
ФИЗИОЛОГИЯ ОРГАНА
•Самая большая железа в
теле позвоночных
•Подразделяющаяся на
четыре доли:
•срединную
•правую
•левую
•хвостатую
2
ПЕРФУЗИЯ

Перфузия – пропускание через ткань раствора,
поддерживающего орган в жизнеспособном состоянии

Изолированная печень крысы часто применяется при
исследовании действия биологически активных веществ
3
ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ
Цель: Выявить динамику ряда физиологических и
биохимических показателей жизнедеятельности
изолированной перфузируемой печени крысы.
Задачи:
 Оценить динамику физиологических параметров
(сопротивление сосудов органа, объем продукции желчи)
изолированной перфузируемой печени крысы;

Оценить динамику глюкозы в оттекающем перфузате,
изолированной перфузируемой печени крысы;

На основе полученных данных сделать выводы о
функционировании печени крысы в условиях
изолированной перфузии.
4
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Метод перфузии:
Подготовка животного к операции;
 Операция по выделению органа из организма и
подключение его к перфузионному аппарату;
 Снимание показателей перфузии

Объем выделения
желчи
Импеданс сосудов
Потребление
кислорода
Желчный проток
Воротная вена
Центральная вена
Мерный цилиндр
Блок венозных датчиков
Вольтметр
Прямое измерение
Прямое измерение
(см3/мин)
(см. вод. столба)
Измерение напряжения
П = 100 – V (мВ)
5
Схема установки
Раствор Кребса-Хенселейта (pH 7.4, 37°C)
Оксигенатор
Термостат
Насос
О2+СО2
Датчики
теплообменник
Термостат
ОРГАН
Датчики
Забор
проб
6
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Глюкозо-оксидазный метод
,
глюкозооксидаза
О2
Н2О2
Н2О2
хромоген
Eo
C  10 
Eкол
7
РЕЗУЛЬТАТЫ
см3
12
90
10
см.
вод.
столба
мВ
80
50
45
40
70
8
35
60
30
50
6
25
40
4
20
30
2
0
0
10
20
30
40
50
Объем выделения желчи
60
70
15
20
10
10
5
Время, мин
0
0
20
40
Потребление кислорода
60
0
80
Импеданс сосудов
Динамика выделения желчи (слева), потребления кислорода и
импеданса сосудов (справа) изолированной перфузируемой печени
крысы;
8
РЕЗУЛЬТАТЫ
12
Концентрация, мМ
10
8
6
Глюкоза
4
2
время, мин
0
0
10
20
30
40
50
60
70
Зависимость концентрации глюкозы от времени
перфузирования;
9
ВЫВОДЫ

Исследуемый орган способен синтезировать желчь в
течение часа перфузирования;

Потребление кислорода согласуется с импедансом
сосудов: резкое возрастание импеданса, сопровождается
спадом уровня кислорода в центральной вене;

В течение 35 минут орган активно потребляет глюкозу,
после чего устанавливается баланс между ее
потреблением и производством;

Печень исследуемого животного способна
метаболизировать в течение 60 минут перфузии.
Полученные показатели жизнедеятельности, схожи с
таковыми in vivo.
10
БЛАГОДАРЮ ЗА ВНИМАНИЕ ;)
11
ИСПОЛЬЗУЕМАЯ ЛИТЕРАТУРА

Шадрин К.В., Особенности метаболизма
изолированной перфузируемой печени крысы /
Шадрин К.В. , Федеральное агентсво по
образованию, Сибирский федеральный университет,
Красноярск, 2011.

Руководство по применению набора реагентов для
определения концентрации глюкозы в
биологических жидкостях энзиматическим
колориметрическим методом /НПП «Глюкоза-Витал».
- М., 2011.
12