Рзакулеева Влияние ошибок преаналитического этапа на
advertisement
Влияние ошибок преаналитического этапа на качество результатов лабораторных исследований Специалист по продукции Greiner bio-one Рзакулеева Людмила, ООО ОМБ Ключевое значение качества биоматериала для лабораторно-диагностического исследования: На преаналитический этап приходится до 68% всех лабораторных ошибок Любой современный, сложный и специфичный наукоемкий тест для диагностики окажется бессильным, если в результате ошибок Преаналитического этапа биоматериал для исследования оказался некачественным!!! M. Pebani and P. Carraro, 1997 ! Некачественный биоматериал приводит к: повторным заборам крови у пациентов большим затратам на повторные исследования с использованием дорогостоящих тест-систем увеличению затрат на сервисное обслуживание и ремонт анализаторов (нити фибрина загрязняют механические элементы анализаторов) увеличению времени постановки диагноза (19% пациентам назначаются ненужные дополнительные исследования) неправильному лечению (6% пациентов получают неправильное лечение) снижению доверия к лаборатории Преаналитические ошибки На этапе подготовки к взятию биоматериала правила подготовки пациента, время взятия маркировка проб, неправильный выбор пробирки образа, В процессе взятия биоматериала наложение жгута, взятие крови шприцом, интенсивная работа кулаком, последовательность взятия крови в пробирки, перемешивание проб, соотношение крови и реагента в пробирке Действия при обработке уже готовой пробы рекомендуемое время инкубации пробы, температурный и световой режим хранения Ошибки в процессе хранения и транспортировки пробы Длительность и условия хранения и транспортировки Guder et al, 2001 Ошибки в процессе подготовки к взятию материала Несоблюдение правил подготовки пациента и времени взятия пробы приводит к искажению показателей аналитов Табл. 1. Факторы, влияющие на показатели аналитов Фактор Аналиты АКТГ Кортизол Тестостерон ТСГ Т4 Соматотропин Пролактин Альдостерон Ренин Адреналин Норадреналин Гемоглобин Железо Калий Guder et al, 2001 Минимум (время дня) 6-10 5-8 2-4 20-2 8-12 21-23* 5-7 2-4 0-6 9-12 9-12 6-8 14-18 14-16 0-4 21-3 20-24 7-13 23-3 1-21 10 12-44 10-12 2-5 2-5 22-24 2-4 23-1 Амплитуда (%% от средней за сутки) 150-200 180-200 30-50 5-15 10-20 300-400 80-100 60-80 120-140 30-50 50-120 8-15 50-70 5-10 Аспартат аминотрансфераза ↑ ↑ Глюкоза Прием пищи Максимум (время дня) Тенденция ↑ Неорг. Фосфат Табл. 2. Суточные колебания некоторых аналитов * Начало фазы сна Аналиты Триглицериды Курение Физические нагрузки Кофеин Аланин аминотрансфераза Калий Кальций Холестирин Мочевая кислота Альбумин Билирубин Жирные кислоты Адреналин Свободный глицерин Альдостерон Кортизол Адреналин Норадреналин СТГ Кортизол АКТГ Инсулин Альбумин Креатинкиназа Ренин плазмы Котехоламины ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↓ ↑ ↑ ↑ ↑ Ошибки в процессе подготовки к взятию материала Рекомендации Памятка для пациента Исследование назначено Вашим лечащим врачом. Цель исследования: объективно оценить состояние Вашего здоровья Вы должны подготовить себя к исследованию следующим образом: воздержаться от физических нагрузок, приема алкоголя и лекарств, изменений в питании в течение 24 часов до взятия крови. Вам не следует принимать пищу после ужина, лечь спать нужно накануне в обычное для Вас время и встать не позднее, чем за час до взятия образца. Утром после подъема воздержитесь от курения. Если Вы испытываете трудности с отменой лекарств, то обязательно сообщите об этом лечащему врачу. Накануне вечером перед проведением процедуры взятия или получения биологического образца, подойдите к медицинской сестре и уточните, где Вам необходимо находиться утром для ее выполнения. Очень важно, чтобы Вы точно следовали указанным рекомендациям, так как только в этом случае будут получены ценные результаты исследования. Кишкун, 2003 Ошибки в процессе подготовки к взятию материала Неправильная маркировка пробирок Перепутанные пробы ведут к • неправильной диагностике • ошибкам лечения • фатальным ситуациям Рекомендации штрих кодируем ДО или СРАЗУ ПОСЛЕ взятия пробы на момент, когда пациент ВСЕ ЕЩЕ в процедурном кабинете Неправильный выбор пробирок • • • • образование сгустка искажение показателей свертывающей системы искажение показателей маркеров ПЦР исследований искажение показателей микрогематокрита, при микроскопическом исследовании морфологии нейтрофилов, при расчете среднего объема тромбоцитов, эритроцитов, эозинофилов Рекомендации см. инструкции к реагентам тест-систем Цветовая кодировка крышек пробирок Vacuette® Крышка Реагенты и добавки Активатор свертывания Описание Оксид кремния (SiO2 ) Применение Биохимические и иммунохимические исследования, лекарственный мониторинг Активатор свертывания и гель Оксид кремния Олефинолигомер Гепарин Литий-, Натрий- и Аммоний- гепарин Гепарин и гель Литий-гепарин Олефинолигомер К2-ЭДТА К3-ЭДТА К2-ЭДТА, К3-ЭДТА (4,1– 6,8 мкМоль/л) Гематологические исследования Цитрат натрия Исследование системы гемостаза Цитрат натрия Цитрат натрия 109 мМоль/л (3,2%) 129 мМоль/л (3,8%) Цитрат натрия 109 мМоль/л (3.2%) Биохимические исследования, экспрессдиагностика СОЭ по методу Вестергрена Антикоагулянт Ингибитор гликолиза I-ацетат + Li-гепарин; NaF + Оксалат калия NaF+ К3-ЭДТА Исследования в диабетологии К2-ЭДТА и гель К2-ЭДТА Олефинолигомер Молекулярная диагностика Без добавок ПЦР, бактериология Цветовая кодировка соответствует международному стандарту по цветовому кодированию реактивов в пробирках ISO 6710 Ошибки в процессе взятия материала Наложение жгута более чем на 1 минуту приводит к: • гемолизу • изменению концентрации и активности аналитов, например концентрации общего белка, аланин аминотрансферазы, креатинкиназы, активности ЛДГ, билирубина, липазы, калия, магния Рис. 2. Влияние гемолиза на уровень и активность различных лабораторных показателей в зависимости от концентрации гемоглобина в сыворотке Рекомендации Наложите жгут на 10 см выше места венепункции (не более, чем на 1 минуту). Ошибки в процессе взятия материала Интенсивное сжимание и разжимание кулака приводит к завышению концентрации калия, электролитов, гормональных показателей Рекомендации во избежание рисков вариации лабораторных анализов следует избегать повторного сжимания и разжимания кулака в процессе венепункции, при непосредственном взятии крови кулак надо расслабить Перенос крови в пробирку с помощью шприца приводит к гемолизу, активации тромбоцитов, высокой вероятности заражения опасными гемоконтактными инфекциями Рекомендации использование вакуумных систем взятия венозной крови Добавка Этикетка Безопасная крышка Держатель Двусторонние иглы Vacuette® Иглы-бабочки Ошибки в процессе взятия материала Неправильное соотношение кровь/реагент • недостаток антикоагулянта – микросгустки • избыток антикоагулянта – увеличение ПВ и АЧТВ, занижение количества клеток крови и показателей гематокрита, изменение морфологии клеток Рекомендации проверьте соответствие уровня заполнения пробирки метке номинального объема (допустимо отклонение не более 10 % от общего объема крови в пробирке) риска наполнения Неправильное перемешивание образца • энергичное - вспенивание или гемолиз • недостаточное или медленное для сыворотки может замедлить образование сгустка • в пробирках с антикоагулянтами неправильное перемешивание приводит к склеиванию тромбоцитов, образованию сгустка Рекомендации бережное переворачивание пробирки на 180 градусов Ошибки при обработке отобранной пробы Нарушение рекомендованного времени инкубации пробы во время формирования сгустка (сыворотка крови) или седиментации осадка (плазма крови) 150g – 5 мин Рис. 3. Центрифугирование сыворотки сразу после взятия: виден сгусток фибрина. Ошибки при обработке отобранной пробы Ошибки при обработке отобранной пробы Особенности центрифугирования пробирок с гелем: • ЗАПРЕЩАЕТСЯ ТРАНСПОРТИРОВКА ПРОБИРОК С ГЕЛЕМ БЕЗ ПРЕДВАРИТЕЛЬНОГО ЦЕНТРИФУГИРОВАНИЯ! РЕЗКИЕ ДВИЖЕНИЯ МОГУТ ВЫЗВАТЬ РАЗРУШЕНИЕ ГЕЛЯ И ПОПАДАНИЕ ЕГО ЧАСТИЦ В ПРОБУ, ЧТО ПРИВЕДЕТ К ОШИБОЧНЫМ РЕЗУЛЬТАТАМ АНАЛИЗА • пробирки с гелем необходимо центрифугировать не позднее 2 часов после взятия крови • в центрифугах с горизонтальными откидывающимися стаканами образуется более стабильный гелевый барьер, чем в центрифугах с фиксированным углом наклона (см. рис. 4) перед транспортировкой пробирки с гелем рекомендуется выдержать в штативе 1 час после центрифугирования (при комнатной температуре) • • запрещается повторное центрифугирование пробирок с гелем Рис. 4 Слева – пробирка с гелем после центрифугирования в угловом роторе, справа – пробирка с гелем после горизонтального ротора. В левой пробирке ясно виден просвет в гелевом барьере; часть сгустка попала в сыворотку. Процесс формирования стабильного гелевого барьера Ошибки при обработке отобранной пробы Табл. 3. Сохранность наиболее распространенных аналитов в крови до и после отделения клеток Аналит Мочева кислота Альбумин АЛТ Амилаза АСТ Простатический антиген Билирубин общий Кальций Хлориды Холестерин Креатинкиназа Креатинин Железо Ферритин ФСГ ГТГ ЛДГ Лютеинизирующий гормон Эстрадиол Щелочная фосфатаза Фосфор неорганический Калий Общий белок Трийодтиронин общий Тироксин общий Мочевина Цельная кровь 25 ⁰С 4ч 3 дня 2ч 4ч 2ч 4ч 4ч 2 дня 4ч 48 ч 4ч 4ч 4ч 4ч 4ч 4ч 2ч 4ч 2ч 3 дня 4ч 2ч 4ч 2 дня 2 дня 4ч Плазма или сыворотка 4-8 ⁰С 25 ⁰С 4ч 3 дня 7 дней 7 дней 3 дня 3 дня 4ч 7 дней 3 дня 3 дня 4ч 1 день 4ч 4ч 2 дня 7 дней 4ч 7 дней 48 ч 7 дней 4ч 4ч 4ч 7 дней 4ч 4ч 4ч Избегать 4ч 7 дней 4ч 7 дней Избегать 2 дня 4ч 14 дней Избегать Избегать 3 дня 4 дня 4ч 3 дня Избегать 6 нед 4ч 4ч 2 дня 1-2 нед 2 дня 1-2 дня 4ч 4ч 4-8 ⁰С 5 дней 30 дней 30 дней 30 дней 7 дней 1 день 7 дней 22 дня 4 нед 7 дней 5 дней 30 дней 7 дней 7 дней 7 дней 7 дней Избегать 14 дней Избегать 4 дня 7 дней 6 нед 3 дня 1-2 нед 1-2 дня 3 нед Балаховский И.С.,1998 Ошибки при обработке отобранной пробы Нарушение температурного и светового режима хранения пробирок, условий транспортировки Пробирки VACUETTE ®GLUCOMEDICS Эффективное решение проблемы гликолиза Уровень глюкозы, % Пробирка VACUETTE® GLUCOMEDICS Пробирка c фторидом натрия Сочетание натрия ЭДТА, фторид натрия, лимонной кислоты приводит к и цитрата мгновенному и натрия полному ингибированию процесса распада глюкозы (гликолиза), что отличает пробирки VACUETTE® GLUCOMEDICS от обычных Время, ч VACUETTE®GLUCOMEDICS предотвращает снижение концентрации глюкозы до 9 мг/100мл (0,5 ммоль/л) в течение первых 3 часов * Американская диабетическая ассоциация пробирок с фторидом натрия. Согласно рекомендациям ADA* пробирки с цитратным буфером, фторидом натрия и ЭДТА являются лучшим гликолиза, что решением принципиально проблемы важно для ранней диагностики сахарного и, особенно, гестационного сахарного диабета. Пробирки Vacuette® для исследования системы гемостаза Внутренняя пробирка из ПП: сохранность водного раст-ра Молекулы цитрата натрия в воды течение всего срока годности + инертность материала. Внешняя пробирка из ПЭТФ: сохранность вакуума в пробирке. Треугольная риска для пробирок объемом 1 – 3,5 мл. Точное соотношение крови и реагента, что очень важно для исследования системы свертывания. Молекулы воздуха Спасибо за внимание
