Быстрая диагностика пациента с подозрением на - SP-GMK
advertisement
«Некоторые аспекты применения экспресс тест-систем в диагностике инфекционных, сердечно-сосудистых и других заболеваний» ООО «Меди-Линк», г. Москва ранняя диагностика беременности была обычным делом в Древнем Вавилоне 700 лет до н.э. Местная акушерка скручивала тампон из овечьей шерсти, пропитывала его соком определенного растения (название волшебной травы держали в строгой тайне) и вводила во влагалище пациентки на 3 дня, попросив воздержаться от секса. Извлеченный тампон опускали в раствор квасцов (минеральных солей): если жидкость краснела, значит, в семье действительно ожидалось пополнение. • В свое время появление лакмусовых бумажек стало прорывом в технике определения кислотности: вместо неудобных тестов достаточно обмакнуть бумагу. Возможно, такой же прорыв осуществит разработка Джорджа Уайтсайдза, «бумажная лаборатория», дешевый и простой способ проведения аналитических реакций, требующий для работы микроскопические количества вещества. Джордж Уайтсайдз известен многочисленными разработками в области нанотехнологии Принцип метода иммунохроматографии (ИХА) Образец (цельная кровь, сыворотка, плазма, моча, экстракт мазков или фекалий), нанесенный на подложку, движется по мембране и доходит до зон, где находятся специфически связывающиеся агенты (антитела или антигены). В этих зонах происходит специфическое связывание тестируемого белка (антигена), находящегося в образце со специфическими антителами к нему (конкретная информация – в инструкциях к каждому тесту). Варианты иммунохроматографических тестов Существует два варианта тестов ИХА: Тест – кассеты Тест – полоски Преимущества экспресс-тестов простая процедура анализа не требуют приборного оборудования индивидуальное тестирование время анализа от 5 до 15 минут доступная цена ~ 2-3 $ за тест визуально читаемые результаты длительные сроки хранения при комнатной температуре использование для анализа не только образцов сыворотки или плазмы, но и цельной крови, а так же биологического материала мазков и смывов Современный портфель экспресс-тестов для диагностики острых сосудистых катастроф на догоспитальном этапе 2007 год Поступило 27 162 больных Умерло 1 115 (4,1%) Выписано 26 047 всего вскрытий 1 060 человек (95,1%) инсульт 158 чел (14,9%) инфаркт 82 чел (7,7%) Итого: инфаркт + Инсульт 78 чел (7,4%) 332 (31,3%) без вскрытия 55 человек 4,7% расслоение аорты 14 чел (1,3%) Маркеры некроза миокарда Количество дней после развития ИМ Anderson, J. L. et al. J Am Coll Cardiol 2007;50:e1-e157 Тропонин I или Тропонин Т Недостатки тропонина T 1) Двухфазный характер выделения в кровь тропонина T предполагает наличия фазы снижения (или как минимум фазы плато) концентрации маркера в крови при существующем остром инфаркте миокарда. 2) Большие разбросы времени максимального повышения и снижения концентрации тропонина T в крови до исходного значения говорят о меньшей достоверности поведения данного кардиомаркера при развитии острого коронарного синдрома. 3) Возврат концентрации тропонина T в крови к исходному уровню на 14 день, ограничивает применение этого маркера в диагностике реинфарктов в большей степени, чем тропонина I. 4) Повышение уровня в крови тропонина T при ХПН и возможность перекрестной реакции АТ к этому кардиомаркеру с белками скелетных мышц. Недостатки тропонина I 1) В плазме 90% тропонина I находится в связанном виде. 2) Нестандартизованность методов анализа тропонина I – диагноз ОИМ ставится на основании мониторирования уровня кардиомаркера в крови. Весьма сомнительно, что мониторирование уровня в крови тропонина I будет осуществляться различными лабораторными системами. В отделении кардиореанимации ГКБ №50 у больных с признаками инфаркта миокарда давностью не более 24 часа был проведен экспресстест на определение тропонина I, ACON. Все результаты были положительны. № Тn I Tn T АсТ, Ед/л ЛДГ, Ед/л 1 + + 279 2270 2 + + 30 677 3 + + 111 718 4 + + 169 2259 5 + - 60 572 6 + + 72 695 7 + + 30 677 8 + + 109 1257 9 + + 70 772 10 + + 40 1156 11 + - 87 478 12 + - 76 564 13 + + 60 890 14 + - 72 734 15 + + 80 1020 Тропонин I или T? Повышение уровня к 96 часам – Исходы к 30 дню после включения пациентов с высоким уровнем cTnI и cTnT 100% у cTnI и cTnT cTnT cTnI cTnT cTnI Luscher, M. S. et al. Circulation 1997;96:2578-2585 Copyright ©1997 American Heart Association Методы определения маркеров некроза миокарда Качественный (ACON, США, метод-иммунохроматографический) cTnI (>0,5 нг/мл) МВ-КФК (>5 нг/мл) миоглобин (>50нг/мл) Точка приложения: -Догоспитальный этап: приемное отделение,СМП, поликлиника Плюсы: -Быстрая диагностика пациента с «болью в груди» -Не требуется специального хранения и оборудования -Ответ «да-нет» -Возможно использование цельной крови/ сыворотки/ плазмы ТРОМБОЭМБОЛИЯ ЛЕГОЧНОЙ АРТЕРИИ (ТЭЛА) Частота ТЭЛА у больных, умерших в различных стационарах А.Л. Верткин и соавт.,2007 Факторы риска Возраст (старше 50 лет) Длительный постельный режим или отсутствие активности (длительный перелет в самолете, долгое путешествие на машине, в поезде) прием оральных контрацептивов или гормональной терапии Операции (особенно на тазовых органах) беременность и роды массивная травма ожоги рак инсульт инфаркт миокарда операции на сердце переломы бедренной кости или шейки бедра нарушение тромбообразования анамнез глубоких венозных тромбозов Стандартные методы подтверждения ТЭЛА, ТГВ – доступны ли они Вентиляционноеперфузионная сцинитиграфия легких Дуплексное Допплеровское исследование сосудов ног КТ-ангиография Качественный тест для определения Д-димера Точка приложения: -Приемное отделение, реанимационное отделение, - СМП, поликлиника Плюсы: -Быстрая диагностика пациента с подозрением на ТГВ, - легочную эмболию, ДВС- синдром - Не требуется специального хранения и оборудования - Ответ «да-нет» - Возможно использование цельной крови - Результаты исследования через 10 мин В результате проведения упрощенного качественного теста для диагностики Д-димера компании «Clearview» была выявлена 100% чувствительность в 527 случаях исследования амбулаторных пациентов с подозрением на легочную тромбоэмболию Анализ Чувствительность Упрощенный качественный тест для диагностики Dдимера компании "Clearview" 100% 47,9% 100% (92,5%-100%)* (43,3%-52,6%)* (98,4%-100%)* 100% 48,8% 100% (92,5%-100%)* (44,1%-53,4%)* (98,4%-100%)* 100% 47,5% 100% (98,2%-100%)* (92,5%-100%)* (42,7%-52,3%)* Новый тест для диагностики D-димера компании "bioMerieux Vidax" Набор STA Liatest D-Di компании "Diagnostica Stago" * = 95% Доверительный Интервал Специфичность приведенное значение Экспресс-тесты для диагностики инфекционных заболеваний ВИЧ 1 & 2 Гепатит В Гепатит С Хламидиоз Сифилис Стрептококк А Туберкулез Хеликобактериоз Алгоритм лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции I этап – скрининговые исследования на ИФА тест-системе с антигенами ВИЧ-1 и ВИЧ-2 Положительный результат II этап – референтное исследование на 2-3 ИФА тест-системах Положительный результат IIIэтап – экспертное исследование методом иммуноблотинга Дополнительные методы экспертной диагностики ВИЧ - инфекции окончательный результат через две недели Метод ПЦР Молекулярная гибридизация ОНКОМАРКЕРЫ ПРОСТАТ-СПЕЦИФИЧЕСКИЙ АНТИГЕН КАРЦИНОЭМБРИОНАЛЬНЫЙ АНТИГЕН АЛЬФА-ФЕТОПРОТЕИН СКРЫТАЯ КРОВЬ В КАЛЕ Портативный иммунофлуоресцентный экспресс- анализатор Triage Meter Pro Экспресс-анализатор Triage® Meter Pro: три простых шага 1. Добавьте кровь в диагностическую панель 2. Вставьте панель в экспресс-анализатор Triage® Meter Pro 3. Прочитайте результаты Пример отображения результатов на экране дисплея Определение маркеров некроза миокарда Количественный – РОС диагностика (Triage® Cardiac Panel, производитель БИОСАЙТ, США Метод - иммунофлюоресцентный): Тропонин I (0,05-30 нг/мл) Миоглобин (5-500 нг/мл)К Креатинкиназа-МВ (1-80 нг/мл) Точка приложения: Госпитальный этап Плюсы: Быстрая диагностика пациента с «болью в груди» Стратификация риска пациентов с ОКС Уменьшает время диагностики до 15 минут Комбинация маркеров помогает установить ранний и поздний ИМ Определение маркеров некроза миокарда в динамике Определение Д-димера РОС - Количественный: Метод –иммунофлуоресцентный (антитела к к 3B6 Ддимеру) (Triage® D-dimer test, производитель БИОСАЙТ, США): Коэффициент корреляции с методами ELISA составляет 92-97%. при подозрении на ТЭЛА, ТГВ, ДВС Результат за 15 минут Диапазон измерений: 100 – 5000 нг/мл Верхняя граница нормы 400 нг/мл Точка приложения: стационар РОС, лаборатория Плюсы: Быстрая диагностика пациента с подозрением на ТЭЛА, ТГВ Клиническая эффективность сопоставима с центральной лабораторией Возможно использование цельной крови либо плазмы, обработанной ЭДТА Результат за 15 минут Определение д-димера в динамике Feied C. Pulmonary embolism. Available at: http://www.emedicine.com/emerg/topic490.htm. Accessed April 11, 2007. 2. Triage D-Dimer Test Package Insert, Revision B, May 2005. 3. Dempfle CE, Zips S, Ergul H, Heene DL. The Fibrin Assay Comparison Trial (FACT): evaluation of 23 quantitative D-dimer assays as basis for the development of D-dimer calibrators. Thromb Haemost. 2001;85:671-678. 4. Stein PD, Hull RD, Patel KC, et al. D-dimer for the exclusion of acute venous thrombosis and pulmonary embolism: a systematic review. Ann Intern Med. 2004;140:589602. 5. Lee-Lewandrowski E, Van Cott EM. Evaluation of the Biosite Triage quantitative whole blood D-dimer assay and comparison with the bioMÈrieux VIDAS® D-dimer exclusion test: validation and utility for use in the central laboratory and at the point of care. Point of Care. 2005;4:133-137. Экспресс-анализатор Триайдж Метер Про Определение BNP Количественный – РОС диагностика (Triage®, производитель БИОСАЙТ, США Метод - иммунофлюоресцентный): Чувствительность теста - 95% Специфичность анализа – 98% (при концентрации 100 пг./мл.) Достоверность отрицательного диагностического уровня (<100 пг./мл.) составляет 98% * Точка приложения: Госпитальный этап, поликлиника Плюсы: Быстрая диагностика СН – время измерения 15 минут Сортировка больных с одышкой на догоспитальном этапе (диф.диагноз) Стратификация риска острого коронарного синдрома, прогноза СН Использование маркера систолической и диастолической дисфункции желудочков сердца Ведение и оценка терапии у больных с ХСН *Maizel A., Krishnaswamy P. Et al. “Rapid mearsurement of B-Type Natriyuretic Peptide In the Emergensis Diagnosis of Heart Failure” The New Journal of Medicine, 2002, Vol.347, 161-167 Maizel A., Koon J.,Krishnaswamy P., Kazanera N. “Utility of of B-natriyuretic Peptide is a rapid, point-of-care test for screening patients undergoing echocardiography to determine left ventriculare disfunction” American Heart Journal 2001, 141, 367-374 Диагностические панели Быстрая объективная диагностика сердечной недостаточности и стратификация риска острого коронарного синдрома Определения уровня в крови В-натрийуретического пептида - маркера систолической и диастолической дисфункции желудочков сердца Быстрая дифференциальная диагностика синдрома одышки в течение небольшого промежутка времени Комплексное определение креатинкиназы-МВ, миоглобина, тропонина I, Внатрийуретического пептида и Д-димера Ранняя диагностика острого инфаркта миокарда одновременное измерение в крови уровня маркеров миоглобина, тропонина I, креатинкиназ-МВ Быстрое исследование пациентов с подозрениями на синдром диссеминированного внутрисосудистого свертывания, тромбоэмболию легочной артерии и тромбоз глубоких вен нижних конечностей Одновременная диагностика инфаркта миокарда и оценка риска сердечной недостаточности Определение наличия в моче метаболитов ряда наркотических средств количественное определение содержания в крови Д-димера Количественное определение Тропонина I, креатинкиназа-МВ, миоглобина, Внатрийуретического пептиада Спектр: до 10 показателей Преимущества анализатора Triage Meter Расширенное меню для проведения иммуноанализа Мультимаркерные диагностические панели Использование цельной крови для анализа Результаты анализа через 15 минут Возможность работа от батареи(портативность) Три вида встроенного контроля Встроенный принтер ( результаты выдаются в электронном и печатном виде) Полная комплектация ( в отличие от других анализаторов) Невысокая стоимость Верное решение для проведения быстрой диагностики непосредственно на месте оказания медицинской помощи ! Вопросы?
