Yersinia Selective Agar Base

advertisement
Yersinia Selective Agar Base
Основа селективного агара для иерсиний
M843
Эта среда рекомендуется для селективного выделения из клинического материала и
пищевых продуктов: Yersinia enterocolitica (с добавкой FD034, в соответствии с
рекомендациями комитета ISO) или Yersinia enterocolitica и Yersinia pseudotuberculosis (с
добавкой FD208).
Состав**:
Ингредиенты
Пептон специальный
Дрожжевой экстракт
Маннит
Натрия пируват
Натрия хлорид
Магния сульфат
Натрия дезоксихолат
Нейтральный красный
Кристаллический фиолетовый
Агар-агар
грамм/литр
20,00
2,00
20,00
2,00
1,00
0,01
0,50
0,03
0,001
12,50
Конечное значение рН (при 25ºС) 7,4 ± 0,2
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 58,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного
растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121ºС) в течение 15
мин. Остудить до 45ºС и асептично добавить растворенное содержимое 2 пузырьков с
селективной добавкой для иерсиний FD034 (для выделения Y. enterocolitica) или
содержимое 1 пузырька с селективной добавкой для иерсиний FD208 (для выделения Y.
enterocolitica и Y. pseudotuberculosis). Тщательно перемешать и разлить в стерильные
чашки Петри.
Принцип и оценка результата:
Данная среда с селективной добавкой используется для выделения энтеропатогенных
иерсиний из клинического и другого материала. Она основана на прописи агара CIN
(ЦИН) Schiemann (1, 2) и рекомендована специалистами международного комитета ISO
(3). Schiemann (1) модифицировал первоначальную пропись агара ЦИН, заменив в ней
смесь желчных кислот на дезоксихолат натрия.
На среде можно отличить бактерии, ферментирующие и не ферментирующие маннит. Ее
селективные свойства связаны с присутствием дезоксихолата натрия и кристаллического
фиолетового, которые подавляют рост грамположительных и многих грамотрицательных
микроорганизмов. Добавление антибиотиков делает ее высоко селективной в отношении
иерсиний. Поскольку в состав добавки FD208 не входят беталактамные антибиотики, на
среде с ней не подавляется рост Y. pseudotuberculosis, а вырастающие дополнительно
некоторые грамотрицательные неферментирующие бактерии не обладают характерной
для энтеропатогенных иерсиний морфологией. Типичные колонии Y. enterocolitica и Y.
pseudotuberculosis на данной среде (с добавкой FD034 или FD208) имеют малинового
цвета четко отграниченный центр и прозрачный бесцветный край («бычий глаз»). Размер
колоний, их гладкость и соотношение размеров центра и края варьируют у разных
сероваров. Поскольку колонии Serratia marcescens, Citrobacter freundii и Enterobacter
agglomerans могут напоминать колонии энтеропатогенных иерсиний, требуется
дальнейшая идентификация, например, в биохимических тестах.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий желтый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,25%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Среда имеет оранжево-красную окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в
чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25ºС водный раствор (5,8% вес/об) имеет рН 7,4 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 24-48 ч при 32ºС
Штаммы микроорганизмов
Характер роста и колоний на среде
(АТСС)
с добавкой FD034
с добавкой
Рост
Колонии
Рост
Yersinia enterocolitica (27729)
Хороший или
Хороший или
прозрачные с
обильный
обильный
малиновым
«глазком» в
центре
Yersinia pseudotuberculosis
Подавляется
–
Хороший или
обильный
Escherichia coli (25922)
Proteus mirabilis (25933)
Enterococcus faecalis (29212)
Pseudomonas aeruginosa (27853)
Подавляется
Подавляется
Подавляется
Хороший или
обильный
Stenotrophomonas
maltophilia
Подавляется
–
–
–
Непрозрачные
крупные желтозеленые
–
Подавляется
Подавляется
Подавляется
Хороший или
обильный
Хороший или
обильный
Ссылки:
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25ºС. Использовать до даты, указанной на
этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8ºС.
Download