УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от Страница из

ОБРАЗОВАНИЯ
И НАУКИ
КАЗАХСТАН
УМК МИНИСТЕРСТВО
042-14.1.01.3.20.01-2006
Редакция
№1 отРЕСПУБЛИКИ
Страница
1 из 134
СЕМИПАЛАТИНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ имени ШАКАРИМА
Документ СМК 3 уровня
УМК
УМКД Учебно-методические
матриалы по дисциплине
«Современные
иммуномодулирующие
биопробиотики применяемые в
ветеринарии»
Редакция № 1 от
25.08.2009
УМК 042.14.4.02.01.20.28/03-2009
УЧЕБНО-МЕТОДИЧЕСКИЙ КОМПЛЕКС
ДИСЦИПЛИНЫ
«Современные иммуномодулирующие биопробиотики применяемые в ветеринарии»
для специальности
051201 - «Ветеринарная медицина»
УЧЕБНО-МЕТОДИЧЕСКИЕ МАТЕРИАЛЫ ПО ДИСЦИПЛИНЕ
Семей 2009
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 2 из 134
Предисловие
1. Разработано
Составители _______ Г.Е. Лавриненко, доцент кафедры «Ветеринарная медицина»,
Семипалатинского государственного университета имени Шакарима
__________________ Е.К. Боярченко, доцент кафедры «Ветеринарная медицина»,
Семипалатинского государственного университета имени Шакарима
__________________ К.Н. Кожанов, профессор кафедры «Ветеринарная медицина»,
Семипалатинского государственного университета имени Шакарима
«___» ___________200 г.
2. Обсуждено
2.1 На заседании кафедры «Ветеринарная медицина», Семипалатинского государственного
университета имени Шакарима
Протокол от «__» _________ 200 года, № __.
Заведующий кафедрой
__________ М.М.Искаков, профессор.
2.2 На заседании учебно-методического совета аграрного факультета
Протокол от «__» _______ 200 года, № _.
Председатель, ___________Г.И.Джаманова, доцент
3. Утверждено
Одобрено и рекомендовано к изданию на заседании Учебно-методического
совета университета
Протокол от «__» _______ 200 года, № __
Председатель УМС, первый проректор __________ А.А.Молдажанова
ВВЕДЕНО ВПЕРВЫЕ
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Содержание
1. Глоссарий
2. Практические и лабораторные занятия
3. Лекции
4. Самостоятельная работа студента
Страница 3 из 134
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 4 из 134
1. Глоссарий
Антиоксиданты - это соединения, защищающие мембраны клеток от вредных
реакций, которые могут вызвать избыточное окисление в организме.
Антиоксиданты - это соединения, защищающие клетки (а точнее мембраны
клеток) от потенциально вредных эффектов или реакций, которые могут вызвать
избыточное окисление в организме.
«Биогенные стимуляторы». При переживании тканей образуются защитные
вещества, получившие название «биогенные стимуляторы». В химическом отношении они
представляют сложный комплекс органических веществ небелковой и белковой природы.
Биогенный стимуляторы, а также высокомолекулярные компоненты в составе тканевых
препаратов активизируют обмен веществ, синтез животного белка, повышают содержание
белкового азота и нуклеиновых кислот в крови и органах, усиливают
иммунобиологическую реактивность организма, повышает тонус центральной
вегетативной нервной системы.
Бактериальные
липополисахариды
(ЛПС)
содержатся
в
оболочке
грамнегативных бактерий и обладают иммуномо-дулирующими свойствами, влияющими
на повышение или снижение иммунного ответа.
Витамины – биологически активные органические вещества различного
химического состава и строения необходимые организму для осуществления нормального
метаболизма.
Бактерии-пробионты
вырабатывают
комплекс
биологически
активных
соединений, избирательно воздействующих на условно-патогенные микробы.
Гинкго билоба (растение, "продлевающее жизнь", "улучшающее познавательные
способности"); это единственное растение, которое выжило после Хиросимы и не
изменилось со времен Ледникового периода благодаря своей устойчивости к загрязнению
окружающей среды, насекомым и болезням; антиоксидантный эффект проявляется в
защите клеток головного мозга и тканей сердца на уровне мелких сосудов, что помогает
предупредить развитие различных заболеваний;
Глутатион является аминокислотой, обладающей мощным детоксикационным
действием.
Динамическое проявление стресса во времени было названо Г. Селье
"генерализованным адаптационным синдромом" (ГАС), который характеризуется
увеличением и гиперактивностью коры надпочечников, язвами желудочно-кишечного
тракта, инволюцией вилочковой железы и лимфатической системы, расстройствами
энзимозависимого метаболизма углеводов, липидов, и, наконец, изменениями
резистентности организма.
Интерферон.
Действие
интерферона
далеко
не
исчерпывается
его
противовирусной активностью и антибластомным эффектом. Хорошо известно его
иммуномодулирующее действие. Интерферон модулирует активность клеток иммунной
системы путем активации макрофагов, стимуляции В-клеток и повышения защитных
свойств естественных киллерных и цитотоксических Т-клеток.
Левамизол является производным имидазола и принадлежит к группе
фенилмидотиазолов. Его иммуномодулирующие свойства связаны с изменениями
пролиферации, миграции и секреторной функции лимфоцитов, макрофагов и
нейтрофилов. Левамизол стимулирует процесс созревания предшественников Тлимфоцитов в зрелые Т-лимфоциты, увеличивает продукцию цитокинов и повышает
количество Т-хелперов относительно Т-супрессоров.
Лигастим – комплексный препарат, в состав которого входят гуминовые кислоты,
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 5 из 134
полученные при гидролизе природного (древесного) лигнина. Препарат представляет
собой стерильную прозрачную жидкость от коричневого до темно-коричневого цвета.
Механизм действия пробиотиков в отличие от антибиотиков направлен не на
уничтожение, а на конкурентное исключение условно-патогенных бактерий из состава
кишечного микробиотопа, чтобы предотвратить усиление и передачу факторов
вирулентности в популяции условно-патогенных бактерий.
Обмен сигнальными молекулами пробионтов с иммунокомпетентными
клетками слизистой кишечника, усиливая продукцию секреторного иммуноглобулина А,
комплемента, лизоцима, которые блокируют прикрепление энтеропатогенных бактерий к
поверхности слизистой.
Премикс (от лат. Рrae — вперёд, предварительно и лат. misceo — смешиваю) технологическое понятие, означающее предварительно смешанные сухие компоненты,
дозируемые в микроколичествах.
Премиксы (минерально-витаминные концентраты) — это однородные
порошкообразные смеси биологически активных веществ с наполнителем. Механизм
действия премиксов обусловлен наличием в них витаминов (А, ДЗ, Е, К, С, группы В),
микроэлементов (железа, меди, марганца, кобальта, йода, селена), макроэлементов
(магния, серы), антиоксидантов (бутилокситолуола, сантохина), противомикробных
препаратов (кормовые антибиотики и др.) в оптимальных количествах и соотношениях.
Препарат АСД- 2Ф является продуктом сухой перегонки сырья животного
происхождения; содержит в своем составе соединения с активной сульфгидрильной
группой, производные алифатических аминов, карбоновые кислоты, алифатические и
циклические углеводороды, производные амидов и воду.
Препарат Биостим-К является продуктом взаимодействия торфа с водными
растворами гидроксида и карбоната натрия, содержит комплекс БАВ, в том числе
натриевые и калиевые соли гуминовых кислот.
Пробиотики следует рассматривать как часть рационального потенциала
животных, поддержания их здоровья и получения продукции высокого качества,
безопасной как в бактериальном, так и в химическом отношении. В состав пробиотиков
входят типичные представители нормофлоры толстого отдела кишечника животных молочнокислые бактерии, бифидобактерий, стрептококки, играющие огромную роль в
защите кишечной стенки и просветного содержимого от избыточной колонизации
грамнегативной микрофлоры.
Состав пробиотических лекарственных средств входят микроорганизмы,
безопасные для здоровья человека и животных, обладающие широким спектром
протективных свойств, в частности, бифидобактерий видов Bif. adolescentis, Bif. bifidum,
Bif. longum, Bif. globosum, Bif. thermo-philus; молочнокислые бактерии L. acidophilus, L.
plantarum, L. bulgaricus, L. rhamnosus, L. fermen-tum; стрептококки Sir. faecium, Str. lactis
diastati-cus; спорообразующие бактерии Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis, Bacillus
cereus var. Toyi, Rurpinococcus albus, Bacillus panthothenticus
Стресс - это совокупность общих, неспецифических структурных, биохимических,
физиологических и психологических реакций организма на действие чрезвычайных
раздражителей различной природы и характера.
Тканевая терапия - наиболее распространенный в ветеринарии метод
неспецифической стимулирующей терапии. Метод основан на введении в организм с
лечебной и профилактической целью препаратов, специально приготовляемых путем
консервирования животных или растительных тканей.
Тканевые препараты получают путем консервирования холодным путем (При
температуре 2-4°С) кусочков свежевзятых органов и тканей в асептических условиях.
Выдерживают их в холодильнике в течение 5-7 дней. Эмульсии или суспензии,
приготовленных из этих органов, затем кипятят или автоклавируют. Тканевые препараты
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 6 из 134
готовят из растительного сырья (алоэ), печени, кожи, селезенки, тканево-агарового
субстрата, мышц, надпочечников и др.
Цинк (микроэлемент) участвует в росте новых клеток, включая производство и
восстановление ДНК и РНК. Большие дозы цинка способствуют заживлению ран и
стимулируют иммунную систему.
Лабораторное занятие №1
Тема: Применение пробиотика «Ветом1.1» в лечении желудочно-кишечных заболеваний
диарейной симптоматики.
Цель: Изучить действие пробиотика «Ветом-1.1» для профилактики и лечения желудочнокишечных болезней, действующее начало.
Рекомендуемая литература:
Основная: 1. В.Д. Соколов, Фармакология 1977.
2. Первый Евразийский ветеринарный конгресс. 2007. С.69-72.
Дополнительная: 1. В.Д.Соколов Фармакология, 1997г.
2. Столяров И.Д. Иммунодиагностика и иммунокоррекция в клинической практике. Спб:
Сотис, 1999
3. В.М.Субботин «Современные лекарственные вещества в ветеринарии». 2003г.
4 Внутренние незаразные болезни сельскохозяйственных животных /Б. М. Анохин, В. М.
Данилевский, Л. Г. Замарин и др.; Под ред. В. М. Данилевского. — М.: Агропромиздат, 1991
Контрольные вопросы:
1. Лекарственные препараты модулирующие процессы иммунитета.
2. Влияние природных минералов резистентность организма кур-несушек, (рассказать о
цеолитах).
3. Средства, устраняющие общие проявления аллергических реакций типа
анафилактического шока.
4. Методические рекомендации:
Пробиотик «Ветом». Открытые и культивируемые в наукограде Кольцове
бактериальные штаммы Bacillus Subtilis и Licheniformis в качестве активных веществ
препаратов серии Ветом чрезвычайно устойчивы и активно вытесняют множество опасных
микроорганизмов из тонкого и толстого кишечника. В кишечник, где они действуют в
течение месяца, они попадают только через желудок. Бактерии представляют собой своего
рода "биореактор", в котором производятся ферменты, аминокислоты, витамины и
бактериоцины. которые также как и антибиотики нейтрализуют болезнетворные
микроорганизмы. Однако при этом не возникает ни привыкания к ним, ни побочных
действий, типичных при применении химических антибиотиков. Наоборот, они способны
убрать уже имеющуюся резистентность, очистить стенки кишечника, повысить их
проницаемость для необходимых питательных веществ, восстановить биологический баланс
кишечной микрофлоры и стимулировать всю иммунную систему. Попыток создать
подобный пробиотик на базе бакт.ерии Bacillus Subtilis достаточно много, однако только
Ветом обладает очень высоким лечебным титром (10/9), только Ветом способен, кроме того
активизировать производство интерферона, который предотвращает размножение вирусов и
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 7 из 134
маркирует инфицированные клетки, в самом организме.
Препараты серии Векш применяются для профилактики и лечения многочисленных
вирусных и бактериальных заболеваний, в частности боррелеза, гепатита, герпеса, гриппа,
вирусного энтерита (кишечный грипп), гастроэнтерита (воспаление слизистой оболочки
желудка и тонкого кишечника), еальмонелезного энтерита (инфекции тонкого кишечника),
хронического энтерита (воспаление стенок тонкого кишечника), колита (острое или
хроническое воспаление слизистой, оболочки толстого кишечника), дизентерии'
(воспалительного заболевания толстого кишечника) и трахеита (воспаление трахеи). При
лечении онкологических заболеваний Ветом прекрасно зарекомендовал себя как средство
восстановительной и дополнительной терапии; то же самое касается лечения астмы,
аллергий, цирроза печени и множества аутоиммунных болезней, в частности Crohn и Colitis
Ulcerosa.
РЕКОМЕНДАЦИИ по применению препарата Ветом 1.1 в ветеринарной практике
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА И МЕХАНИЗМ ДЕЙСТВИЯ
Ветом
1.1
представляет
собой
мелкий
кристаллический продукт,
содержащий микробную массу живых, антагонистически активных клеток рекомбинантного
штамма 7092 бактерий Bacillus subtilis продуцирующего альфа-2 интерферон. Препарат
сладкого вкуса, не имеет запаха, легко растворяется в воле. Срок хранения препарата 12
месяцев в герметичной таре.
При приеме внутрь с водой и кормом бактерии В. subtilis размножаются в желудочнокишечном тракте, л затем, через фиксированное время, полностью выводятся из организма.
ВЕТОМ 1.1 обладает свойствами, дающими ему несомненные преимущества относительно
препаратов -аналогов:
• пролонгированным во времени воздействием на организм животных и птиц;
•
высокой антотонистической активностью к широкому спектру патогенных и
условно-патогенных микроорганизмов, антивирусной активностью;
• способствует стимуляции клеточных и гуморальных факторов иммунитета;
• повышает неспецифическую резистентность организма;
• стабилизирует аллергическую устойчивость организма;
• стимулирует регенеративные процессы в организме;
• нормализует обмен веществ;
• сочетается со всеми прививками животных и усиливает их эффективность.
ПРИМЕНЕНИЕ ПРЕПАРАТА
Ветом 1.1 назначается телятам, поросятам внутрь индивидуально или групповым
способом с профилактической и лечебной целью при острых желудочно-кишечных
заболеваниях незаразной и инфекционной этиологии (колибактриоз, паратиф, сальмоиеллез,
дизентерия), а также для стимуляции иммунитета и получения здорового потомства.
С профилактической целью:
• телятам - в дозе 10(; MI/кг живой массы внутрь, индивидуально в течение 10 дней с
интервалом 48 часов;
• новорожденным поросятам - индивидуально или групповым способом в дозе 50
мг/кт живой массы в течение пяти дней с интервалом 24 часа или в течение 10 дней
интервалом 48 часов;
• супоросным свиноматкам - индивидуально в дозе 300 мг за 20 дней до опороса с
интервалом 48 часов.
С лечебной целью:
•
поросятам - 50 мг/кт живой массы 3 раза в день, индивидуально в течение 4-6
дней;
•
телятам молочникам - 50 мг/кг живой массы 2 раза в день индивидуально в
течение 5-7 дней.
При низком содержании иммуноглобулинов в сыворотке крови новорожденных
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 8 из 134
отмечается их предрасположенность к заболеваниям как незаразной, так и вирусной и
бактериальной этиологии. Способствуют развитию заболеваний и также факторы, как
неполноценное кормление коров в период стельности и свиноматок в период супоросности,
приводящие к нарушению внутриутробною развития плода, а также несоблюдение
технологии содержания молодняка.
В результате применения Ветома 1.1 в вышеуказанных хозяйствах можно сделать
следующие выводы.
1. Применение Вотома 1.1 супоросным свиноматкам за 20 дней до опороса
способствует достоверному повышению сохранности новорожденных поросят.
Среднесуточный прирост живой массы у них при отъеме выше на 23,9 %, а сохранность на
32.4% по сравнению с поросятами, полученными от свиноматок, которым Ветом 1.1 не
давали.
2. Применение Ветома 1.1 новорожденным поросятам с профилактической целью
повышает устойчивость к желудочно-кишечным заболеваниям. В опытных группах больных
поросят было в 2 раза меньше, заболевания протекали в более легкой форме и менее
продолжительно. Прирост живой массы выше на 19,5 %, сохранностъ поросят до отъема в
экспериментальных группах в среднем составил: 91,2 %, в контрольных - 51,3 %.
Сохранность выше при индивидуальной даче препарата.
Лечебное действие Ветома 1.1 изучали при колиинфекции, дизентерии.
При колиинфекции Ветом 1.1 не уступает Тилану, процент сохранности составляет 92
и 91,9 % эффективность выше при трехкратной даче препарата.
При дизентерии свиней Ветом 1.1 оказал наиболее эффективное действие. При
индивидуальной даче препарата в дозе 50 мг/кг живой массы два раза и тень (30
животных) зарегистрирована 100 % сохранность животных.
Применение Beтома 1.1 телятам с профилактической целью снижает процент
желудочно-кишечных заболеваний в два раза, а использование .с лечебной целью сокращает
сроки лечения на 48 часов, повышает уровень естественной резистентность и улучшает
обменные процессы в организме.
Ветом 1.1 удобен в применении, не оказывает отрицательного действия на организм
животного.
Таким образом, проведенные испытания показали, что Ветом .1.1 повышает
иммунологический статус новорожденных животных (телят и поросят), профилактирует
желудочно-кишечные заболевания и обладает выраженным лечебным эффектом.
СОСТАВ И ФОРМА ВЫПУСКА
Препарат является иммобилизованной высушенной споровой биомассой бактерий
Bacillus sublilits
штамм
ВКПМ В-7092, продуцирующий интерферон. Порошок
белуге цвета, сладкого вкуса, без запаха, легко растворим в воде. Расфасовывают в
пластиковые банки по 500 г: ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА
Ветом 1.1 обладает высоком антагонистической активностью к широкому спектру
патогенных и условно патогенных микроорганизмов и проявляет антивирусную активность
за счет свойств рекомбинантного штамма Bacillus subtilis. Препарат предупреждает
развитие дисбактериозов, способствует стимуляции клеточных и гуморальных факторов
иммунитета, повышает неспецифическую резистентности, организма, стабилизирует
аллергическую устойчивость и стимулирует регенерационные процессы в организме,
нормализует обмен веществ.
ДОЗЫ И СПОСОЬI ПРМЕНЕНИЯ
Препарат вводят животным и птице внутрь. Задают индивидуально или групповым
методом с кормом (молоком, молозивом, кипяченой остуженной водой и др.). Собакам после
очистительной клизмы можно вводить ректально Растворы готовят перед применением. С
лечебной целью препарат применяют два раза в сутки с интервалом 12 часов в дозе 50 мг на
1 кг веса животною или 1 раз сутки по 75 мг на 1 кг массы животного ежедневно до
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 9 из 134
выздоровления. Для коррекции иммунодефицитных состояний препарат назначаю в дозе 60
мг на 1 кг веса животного 1-2 раза в сутки в течение 5 дней. С профилактической целью
задают сразу после рождения из расчета 50 мг на 1 кг веса животного 1 раз в двое суток в
течение 10 дней.
ПОБОЧНЫЕ ДЕЙСТВИЯ
При правильном использовании и дозировке побочные явления, как правило, не
наблюдаются.
ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ
Повышенная чувствительность к препарату
ОСОБЫЕ УКАЗАНИЯ
Животноводческая и птицеводческая продукция после применения препарата
используемся для пищевых целей без ограничений.
УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ
В сухом месте при температуре не выше 20 °С. Срок годности — 2 года.
Лабораторное занятие №2
Тема: Современные ветеринарные препараты и методы лечения болезней
сельскохозяйственных животных.
Цель: Изучить действие препаратов, применяемых при акушерско-гинекологической
диспансеризации КРС, а именно «Баймек», «Байтрил», «Кетазол, «Байоколокс Д.С.»
Рекомендуемая литература:
Основная: 1. В.Д. Соколов, Фармакология 1977.
2. Первый Евразийский ветеринарный конгресс. 2007. С.72-75.
Дополнительная: 1. В.Д.Соколов Фармакология, 1997г.
2. Столяров И.Д. Иммунодиагностика и иммунокоррекция в клинической практике. Спб:
Сотис, 1999
3. В.М.Субботин «Современные лекарственные вещества в ветеринарии». 2003г.
4 Внутренние незаразные болезни сельскохозяйственных животных /Б. М. Анохин, В. М.
Данилевский, Л. Г. Замарин и др.; Под ред. В. М. Данилевского. — М.: Агропромиздат, 1991.
Контрольные вопросы:
1.Назовите препараты, стимулирующие иммунологические процессы, левализол, механизм
действие.
2.Применение пробиотика «Ветом-1» в лечении желудочно - кишечных заболеваний.
3.Назовите
средства, уменьшающие повреждение тканей, (кортикоостероиды и др.
противоспалительные средства)
Методические рекомендации:
Полноценное ветеринарное обслуживание на последнем сроке беременности, равно
как кормление и содержание, оказывает решающее влияние на жизнеспособность молодняка
и здоровье матери после родов.
Ветеринарная помощь маткам в предродовой период должна быть ориентирована,
прежде всего, на комплексную профилактику акушерско-гинекологических заболеваний
заразной и незаразной этиологии, нормализацию и стимуляцию обменных процессов у
матери и плода.
С другой стороны, современные ветеринарные технологии уже в период
беременности позволяют создавать предпосылки к увеличению будущей продуктивности и
минимизировать ветеринарные затраты после родов; а экономический эффект ветеринарных
мероприятий в дородовый период в десятки раз выше, чем вложения в послеродовый период.
Кроме того, животные родильного отделения содержатся обособленно, что позволяет врачу
без особых усилий соблюсти принцип индивидуального подхода при выполнении процедур.
Компания «БАЙЕР» предлагает к применению на свиноводческих и скотоводческих
предприятиях технологический регламент ветеринарных обработок в родильном отделении
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 10 из 134
позволяющий
•
эффекгивно, безопасно и дешево проводить санацию помещении как в
отсутствие, так и в присутствие животных;
•
обеспечить максимальное благополучие отношении эндо- и эктопаразитов;
• медикаментозно профилактировать акушерско-гинекологические патологии
различной этиологии (сухостойный мастит, мастит нетелей, послеродовой мастит, синдром
ММА, задержание последа, кетоз, слабость родового акта, послеродовой эндометрит,
субинволюция матки и яичников);
• профилактировать бактериальные болезни молодняка и заболевания, вызываемые
нарушением обмена веществ.
Дезинфекция
Это самый важный пункт в системе ветеринарных мероприятий. К сожалению, во
многих хозяйствах к вопросу дезинфекции подходят «по-старинке», продолжая использовать
морально устаревшие и малоэффективные препараты по схемам 30-летней давности. Между
тем, современное оборудование, интенсивные технологические циклы содержания животных
и повышенная резистентность микробов к давно используемым дезинфектантам вынуждают
специалистов изыскивать новые препараты и адаптировать их использование на своих
предприятиях.
ДЕЛЕГОЛЬ - комплексный дезинфектант широчайшего спектра цидной активности с
моющим эффектом. Препарат обладает уникальными качествами, делающими его
незаменимым на любом животноводческом предприятии.
• 8 активных компонентов - гарантированно предохраняют животных практически от
всех известных вирусов, бактерий и грибов. Согласно данным зарубежных исследователей,
препарат активен даже в отношении кокцидий.
• 0.25-1% рабочий р-р- из 1л препарата простым разбавлением в воде любой
жесткости можно приготовить от 100 до 400 л раствора для дезинфекции без
дополнительных манипуляций!
• 1л/5м2 - экономичный расход рабочего раствора позволяет достигать эффекта
стерильности при минимальном увлажнении помещения; 1л препарата хватает для
обработки от 500 до 2000м2 площади'
• t от 0 до 20°С - все обработки проводят холодным рабочим раствором; очень
практично в холодный период года.
• безопасен - уникальная рецептура и специальные добавки позволяют без опаски
применять препарат для дезинфекции помещении с оборудованием из любых материалов.
•
применим в присутствии животных - в отличив от традиционно
применяемых
2. БАЙМЕК 1% - противопаразитарный препарат ивермектинового ряда. Уникальная
технология производства и высокая степень очистки позволяют применять препарат на
беременных животных абсолютно безопасно для здоровья матери и плода. Использование
БАЙМЕК 1 % на беременных животных открывает ряд преимуществ:
• отсутствие браковки молока;
• профилактика экономически значимых для свиноводства и скотоводства
экто- и эндопаразитозов;
• профилактика гинекологических осложнений бактериальной этиологии,
в
которых первопричиной являются паразиты;
• снижение паразитарной иммуносупрессии.
3. БАЙОКЛОКС ДС - препарат для моментального запуска коров. Это настоящая
находка для молочного скотоводства, поскольку позволяет решить целый комплекс как
ветеринарных, так и общехозяйственных вопросов:
• исключается субъективный фактор при запуске - теперь запустить корову под силу
оператору доения с любой квалификацией;
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 11 из 134
• препарат гарантированно профилактирует мастит, как в сухостое, так и после отела;
• сохраняя стереотип доения до перевода коров в сухостой, владельцы получают
дополнительно до 12% годового удоя;
• запуск коров по схеме от компании «БАЙЕР» обеспечивает рост молочной
продуктивности в предстоящую лактацию до 5%;
• новорожденные телята обеспечены целебным молозивом.
4. БАЙТРИЛ 10% и БАЙТРИЛ 5% - препараты для инъекций, при изготовлении
которых используется оригинальная субстанция энрофлоксацина производства компании
«БАЙЕР». Благодаря высочайшей степени очистки и отсутствию примесей в готовой
лекарственной форме только БАЙТРИЛ можно безопасно и с полной уверенностью в
конечном результате назначать животным внутривенно. В схемах АГД препарат:
• препятствует развитию бактериальной инфекции в организме (в том числе половых
органах и межуточной части вымени);
• обеспечивает системную санацию организма в отношении широчайшего спектра
патогенных микроорганизмов;
• согласно исследованиям немецких ученых в рекомендованной дозе стимулирует
нейтрофильный фагоцитоз - повышает неспецифический иммунитет.
5. КАТОЗАЛ 10% - мощнейший стимулятор обмена веществ. В схемах АГД
обеспечивает:
• оптимизацию углеводного, белкового и жирового обмена - устраняются негативные
последствия физиологичного накопления в организме самки токсинов в конце беременности;
• увеличение запасов гликогена в гладкой мускулатуре матки на 77% - нормализует
родовой акт, профилактика мертворожденности и задержания последа;
• оптимальный баланс гормонов после родов - быстрая инволюция желтого тела
беременности, ускорение активной фазы полового цикла с полноценной овуляцией,
стимуляция многоплодия у свиноматок;
• повышение сохранности молодняка за счет активизации пищеварительных
ферментов и увеличения выработки факторов естественного иммунитета (альбумины,
глобулины). Результаты применения программ АГД на сельхозпредприятиях РФ:
В скотоводстве. При суммарных затратах на ветпрепараты в сухостойный период
(корова, теленок) в районе 300-350 рублей владельцы получают дополнительно от 300 до 500
л молока, гинекологические заболевания (эндометрит, задержание последа, субинволюция
матки, гипофункция яичников и др.) снижаются в десятки раз, сервис-период сокращается в
среднем на 25 дней, многократно возрастает сохранность телят.
В свиноводстве. При суммарных затратах на ветпрепараты перед опоросом
(свиноматка, 12 поросят) около 190 рублей, свиноводы получают дополнительную прибыль
выражающуюся в дополнительных 60 кг привеса на гнездо. При этом минимизируется отход
поросят по причине заболеваний ЖКТ бактериальной этиологии, устраняются последствия
стресс-факторов промышленного свиноводства, свиноматки продуцируют качественное
молозиво, на предприятии забывают о синдроме ММА, после опороса матки своевременно и
полноценно приходят в охоту без гормонотерапии.
Лабораторное занятие №3
Тема: Новые препараты в программе сохранения молочной продуктивности коров и
повышения качества молока
Цель: Изучить распространение в дойном стаде скрытых патологий молочной железы,
диагностику и лечение, профилактику.
Рекомендуемая литература:
Основная: 1. В.Д. Соколов, Фармакология 1977.
2. Первый Евразийский ветеринарный конгресс. 2007. С.75-77.
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 12 из 134
Дополнительная: 1. В.Д.Соколов Фармакология, 1997г.
2. Столяров И.Д. Иммунодиагностика и иммунокоррекция в клинической практике. Спб:
Сотис, 1999
3. В.М.Субботин «Современные лекарственные вещества в ветеринарии». 2003г.
4 Внутренние незаразные болезни сельскохозяйственных животных /Б. М. Анохин, В. М.
Данилевский, Л. Г. Замарин и др.; Под ред. В. М. Данилевского. — М.: Агропромиздат, 1991.
Контрольные вопросы:
1.Иммуностимулятор -тималин, механизм действия, доза
2.Адоптогены - вещества, входящие в эту группу, механизм действия.
3.Пробиотики - неотъемлемый компонент рационального кормления животных.
Методические рекомендации:
1. НОВЫЕ ПРЕПАРАТЫ КОМПАНИИ «БАЙЕР» В ПРОГРАММЕ СОХРАНЕНИЯ
МОЛОЧНОЙ ПРОДУКТИВНОСТИ КОРОВ И ПОВЫШЕНИЯ КАЧЕСТВА МОЛОКА
С 1 января 2007 года компания «Байер» начинает поставки на ветеринарный рынок
РФ серию новых противомаститных препаратов призванных обеспечить максимальной
контроль маститных ситуаций в дойных стадах.
В течение последних лет на территории РФ имеет место устойчивая тенденция
развития молочного скотоводства по принципу строительства крупных молочных
комплексов беспривязного содержания под комплектацию импортными нетелями с высокой
генетической продуктивностью. При этом несомненными преимуществами являются
максимально низкая себестоимость молока и постоянный сбыт у переработчиков.
Одновременно с этим возникают отрицательные моменты, основным из которых
является массовое распространение патологий вымени. Согласно собственным
исследованиям, после первой лактации на современных комплексах с беспривязным
содержанием скрытые патологии молочной железы (субклинический мастит, асептическое
воспаление, раздажение) регистрируется у 52%,клинический мастит (серозный, катарально гнойный и гнойно- катаральный) у 21 %, атрофия долей вымени у 16% коров, нанося
суммарный ущерб эквивалентный недополучению до 20% годового удоя. Это в значительной
степени нивелирует все экономические преимущества новой технологии.
Столь значительному распространению патологий способствует ряд факторов. Вопервых, научно доказано пряма корреляция между высокой генетической продуктивностью
и заболеваемостью маститом; во-вторых, доение в зале подразумевает стереотипное
групповое доение без поправок на индивидуальные особенности коров; в третьих, известные
в настоящее время ветеринарные противомаститные программы разрабатывались под
привязное содержание для коров с продуктивностью не более 3-3,5 тыс. молока.
Первые два фактора необходимо рассматривать как неизбежную технологическую
константу, которая неизменна, в то время как ветеринарную составляющую
противомаститных мероприятий необходимо корректировать и адаптировать индивидуально
в каждом хозяйстве.
Полноценная противомаститная программа должна состоять из следующих регулярно
выполняемых мероприятий:
2. Мониторинг распространения в дойном стаде скрытых патологий молочной
железы (СПМЖ).
Это основопологающий пункт противомаститной программы, поскольку в 66 %
случаев СПМЖ заканчиваются клиническим маститом. Развиваются эти патологии на фоне
все тех же не исправимых технологических нюансов беспривязного содержание.
Соответственно, избавиться от этих патологий невозможно, но контролировать на уровне 4-6
% от дойного стада возможно.
Если в хозяйстве СПМЖ выявляются более чем у 10 % дойного стада,
диагностические мероприятия с последующим воздействием на патологический очаг
необходимо осуществлять два раза в месяц, если менее 10 %-раз в месяц. Для этого удобнее
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 13 из 134
пользоваться быстрыми маститными тестами с применением диагностикумов на основе
поверхностно активных веществ.
Нами разработана технология обследования дойных стад на СПМЖ позволяющая в
течение одной дойки получить исчерпывающую информацию о состоянии молочной железы
по каждой корове, идентифицировать проблемные доли и пролечить больных коров.
Требования кдиагностикуму:
1 .Первая оценка тест-реакции только по одному критерию- гелеобразованию.
2.Время на постановку и оценку теста не более 15 сек.
3.Четкие показания теста при смешивании с молоком содержащим более 400
тыс.соматических клеток в 1мл.
4.Длительный срок хранения.
Хотелось бы предостеречь от использования диагностикумов оставляемых в
хозяйстве в качестве сопровождения доильного оборудования. Как правило, это препараты
для исследования сборного молока, по этому их применение в индивидуальных маститных
тестах по долям вымени не информативно.
После постановки диагноза необходимо в кратчайшие сроки провести воздействие на
патологический очаг (как правило, во время очередного доения). В доли с повышенным
содержанием соматических клеток внутрицистернально назначают противомаститные
препараты. Поскольку на первоначальном этапе контроля распространения СПМЖ
проблемных коров будет до 50% и более то обработка четвертей вымени приобретет
характер массовой. Поэтому при выборе внутрицис-тернального средства необходимо
учитывать следующие критерии:
1. минимальный срок браковки молока во время и после лечения
2. комплексное воздействие на все звенья патогенеза СПМЖ (противомикробное,
обезбаливающее, детоксикационное)
3. гидрофильная лекарственная основа (для максимально быстрого распределения по
выводной системе молочной железы)
4.
не содержит в составе антибиотики, сульфаниламиды и нитрофураны
Систематическое выполнение только ветеринарной программы контроля СПМЖ уже через 3
месяца позволяет снизить заболеваемость и поддерживать его на уровне 4-6 %. Диагностика
и лечение клинического мастита (КМ) у л актирующих коров. КМ - заболевание
полиэтиологическое. Его возникновение может быть обусловлено воздействием нескольких
факторов:
1. биологического - бактерии, вирусы, грибы, простейшие
2. физического - механическая травма, обморожение, ожог.
3. химического-эндо-и экзотоксины, кетозидр.
Так же разнообразны пути проникновения болезнетворного начала в молочную
железу (через сосковый канал, трансдермально, по продолжению из других органов и
систем). Поэтому предрасположенность лактирующих коров к КМ существует в любой
момент времени.
Основа контроля КМ - регулярный и достоверный сбор информации о состоянии
вымени (диагностика), грамотная интерпретация получаемых данных и своевременное
адекватное воздействие на патологический очаг.
Перед каждым доением оператор проводит визуальный контроль вымени (осмотр,
массаж, пальпация) и первых струек молока (цвет, консистенция, однородность, запах).
Согласно полученной информации действуют по алгоритму:
Если все показатели в норме, корову выдаивают
Если визуальные показатели свидетельствуют о какой-либо форме КМ, то корову
подвергают схематическому лечению
Беспривязное содержание и высокая концентрация поголовья вносят свои коррективы
в ветеринарные схемы лечения коров с КМ.
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 14 из 134
Основные требования при этом:
1. максимальный терапевтический эффект и полное восстановление молокоотдачи
2. минимум подходов к корове и минимум лечебных манипуляций
3. лечение не должно растягиваться во времени на срок более 2х суток
Компания «Байер» предлагает к применению методику лечения коров, у которых
обнаружены те или иные признаки КМ в форме технологической карты.
Серозный мастит.
Признаки: патология развивается в течение нескольких часов; животное угнетено;
вымя увеличено в размере и чрезвычайно болезненно при пальпации, упругой консистенции
(«барабан»); секрет водянистый, цвет сероватый, объём молокоотдачи снижен до 20-50 мл.
Патология опасна прогрессивным развитием с угрозой потери молочной продуктивности и
даже жизни животного.
Лечение: сразу после постановки диагноза животное передают на лечение
ветеринарному специалисту, корову помещают в индивидуальный бокс, из рациона
исключают сочные и лактогенные корма; движение, сено, солома, вода вволю. В течение 2х
суток животное необходимо выдаивать руками не менее 4-5 раз в сутки с интервалом 5-6
часов.
Медикаментозное лечение по схеме:
1-е сутки:
БАЙТРИЛ 10 % в дозе 20 мл внутривенно
КАТОЗАЛ 10 % в дозе 15 мл внуримышечно
БАЙОКЛАВ 10% в пораженную долю в дозе 1 шприц-туба двукратно с интервалом
12ч.
100 мл 10% р-ра CaCI+500 мл 40 % р-ра глюкозы внутривенно однократно.
2-е сутки:
БАЙОКЛАВ 10% в пораженную долю в дозе 1 шприц-туба двукратно с интервалом
12ч.
100 мл 10 % р-ра CaCI+500 мл 40% р-ра глюкозы внутривенно однократно.
Катарально-гнойный мастит.
Признаки: общее состояние организма в норме, при глубокой пальпации вымени
могут быть обнаружены болезненные уплотнения ткани различной формы; молокоотдача из
пораженной доли снижена незначительно (на 10-20%), первые струйки молока водянистой
консистенции, сероватого цвета, с включениями гноя в форме тяжей.
Лечение: больную корову доят с соблюдением предусмотренных правил («доение
коров, больных маститом»). После тщательного сдаивания и дезинфекции соска в
пораженную долю вводят препарат БАЙОКЛАВ LC в дозе 1 шприц-туба двукратно с
интервалом 12ч.
Гнойно-катаральный мастит
Признаки: состояние организма в норме, при глубокой пальпации вымени могут быть
обнаружены безболезненные уплотнения ткани различной формы; молокоотдача из
пораженной доли снижена значительно (на 20-50%), первые струйки и секрет из доли
кашеобразной консистенции, кремового цвета, гнилостного запаха.
Лабораторное занятие №4
Тема: Влияние применения комплексного препарата «гемобаланс» на иммунологический
характер крови жеребых кобыл.
Цель: Изучить действие препарата «гемобаланс» иммунный статус жеребых кобыл.
Рекомендуемая литература:.
Основная: 1.В.Д.Соколов Фармакология, 1977г.
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 15 из 134
2. В.Н.Данилевский Внутренние незаразные болезни. 1991г.
Дополнительная: 1. Первый Евразийский ветеринарный конгресс. 2007.Алматы С.100-101.
Контрольные вопросы:
1.Влияние природных минералов на активность пробиотика «торулакт».
2 .Назовите современные методы изучения нарушений функциональной активности
иммунной системы.
3.Биостимулятор для бройлеров.
Методические рекомендации:
Представления о направленном воздействии на иммунную систему или
иммунокоррекции являются весьма разнообразными, а порой и противоречивыми.
Современное состояние общей и инфекционной патологии характеризуется совершенно
новыми, взаимосвязанными друг с другом процессами - снижением иммунологического
гомеостаза, как у людей, так и у животных. Наблюдается стремительный рост инфекционных
заболеваний, вызванных условно патогенными микроорганизмами и генетически
измененными возбудителями (как птичий грипп, ВИЧ инфекция и др.), которые становятся
смертельно опасными для человека.
Сбывается прогноз ВОЗ, о том, что миру в XXI века угрожает глобальный кризис,
связанный с распространением инфекционных заболеваний. Ситуация усугубляется
растущей сопротивляемостью и видоизмением микроорганизмов. Самые современные
антибиотики становятся малоэффективными против инфекции, вследствие возникновения
устойчивых к ним рас, которые становятся настоящим биологическим оружием. Какие же
тогда необходимо разрабатывать препараты для создания антиинфекционного иммунитета?
Это препараты, оказывающие иммунокоррегирующий эффект на уровне клеточных
рецепторов, тогда, когда клетка впервые сталкивается с возбудителем в организме. От того,
насколько силен этот фактор блокирования клеточных рецепторов, особенно, при вирусных
болезнях, во многом зависит дальнейшее течение инфекционного процесса.
Актуальной проблемой иммунокоррекции является: отсутствие полноценного
информативного метода оценки их направленного воздействия на нарушенные иммунные
звенья и объективных критериев оценки результатов их применения. Результативность
предлагаемых для применения иммунокоррегирующих препаратов, можно оценить только
общими клиническими наблюдениями, что не всегда бывает объективным. Этот метод
оценки не всегда позволяет сделать выбор в пользу наиболее эффективного препарата,
обладающего минимальным побочным действием, определить оптимальные дозы и схемы
применения конкретному больному с поражениями иммунной системы, определить
показания и противопоказания к применению иммунокоррегирующего воздействия.
Показаниями для иммунотерапии являются только результаты клинических и
иммунологических исследований иммунного статуса у больного, эмпирическое
бесконтрольное применение может оказаться малоэффективным и даже усугубить состояние
у больного [1, 2].
Все иммуностимулирующие препараты по происхождению разделяются на
эндогенные и экзогенные.
К
экзогенным
препаратам
относятся
вещества
бактериального
и
грибкового происхождения, а также препараты растительного
происхождения. К эндогенным относятся иммунорегуляторные пептиды и цитокины.
Пептидами являются экстракты из органов иммунной системы (тимус, селезенка) или
продукты их жизнедеятельности. Препараты, полученные из тимуса, могут содержать его
гормоны. Цитокины представляют собой биологически активные белки, продуцируемые
лимфоцитами и макрофагами: интерлейкины, монокины, интерфероны. На практике их
используют в составе с рекомбинантными препаратами. Имеется большая группа
иммунокоррегирующих препаратов, которые были получены путем химического синтеза.
Они являются аналогами тех же препаратов, полученных из микробов или организмов
животного происхождения. Некоторые из этих препаратов обладают также и
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 16 из 134
иммунотропными свойствами. Для достижения полноценного лечебного эффекта в
современной клинической ветеринарной иммунологии непременным условием является
включение
в
комплексну
терапию иммунокоррегирующих препаратов,
восстанавливающих расстройства иммунной системы.
Аспекты иммунокоррекции животных при вирусных инфекциях имеют еще
много неразрешенных проблем.
Количество
иммуномодуляторов
непрерывно
возрастает, синтезируются все более новые, обладающие еще и иммуностимулирующим
действием. Предлагаются препараты для лечения заболеваний, не связанных с нарушением
функций 4 иммунной системы, но проявляющих способность к стимуляции или
угнетению их, однако результаты их применения во многом желают оставлять лучшего.
Однако, ни один из имеющихся иммуномодуляторов применяемых против инфекционных
болезней не обладает направленным вирусингибирующим свойством, не оказывает
этиотропного воздействия, следовательно, для cпецифической иммунокоррекции являются
не пригодными.
В настоящее время проблематичность лечения инфекционных болезней связана с
запретом ВОЗ применения в медицинской практике гипериммунных специфических
сывороток. Общеизвестно, что все патологические
процессы
в тканях
при
инфекционных болезнях_ обусловлены двумя основными причинами: вследствие
выделения токсических веществ возбудителем болезни или образованием длительно
циркулирующих в крови иммунных комплексов.
Лабораторное занятие №5
Тема: Пробиотики – неотъемлемый компонент рационального кормления животных.
Цель: Изучить действие пробиотиков при добавлении их в рацион животных.
Рекомендуемая литература:
Основная: 1. В.Д. Соколов, Фармакология 1977.
2. Первый Евразийский ветеринарный конгресс. 2007. С.69-72.
Дополнительная: 1.Столяров И.Д. Иммунодиагностика и иммунокоррекция в клинической
практике. Спб: Сотис, 1999 с. 48-64..
Контрольные вопросы:
1.Биостимулятор для бройлеров.
2.Использование препарата- синбиотик «цеоторулакт» для кормления животных.
3.Стратегия иммунокоррекции ( иммуностимуляторы, гормоны тимуса интерферон,
интерлейкины).
Методические рекомендации:
Качество пищевой продукции является одним из важнейших факторов,
определяющих здоровье нации, сохранение её генофонда. Снижение качества питания в
последние годы обусловлено как недостаточным потреблением питательных веществ, в
первую очередь полноценных белков животного происхождения и витаминов, так и
контаминацией животноводческой продукции ксенобиотиками техногенной и биологической
природы. Безопасность и качество продукции животного происхождения неразрывно
связаны. Невозможно гарантировать качество продуктов питания, если игнорировать
биологические, токсикологические и радиологические факторы риска.
Мировая общественность уделяет серьезное внимание безопасности продуктов
питания. Наиболее ярко это проявилось в отказе от использования антибиотиков стимуляторов роста- в странах Европейского союза.
/Продукты убоя животных при определенных условиях могут быть источником
возникновения не только типичных инфекционных и инвазионных болезней у людей, но и
различных пищевых заболеваний, к которым относят пищевые токси-коинфекции и
токсикозы. Микробные контами-нанты - возбудители пищевых токсикоинфекций - создают
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 17 из 134
особый риск для здоровья человечества. Актуальность этой проблемы вытекает из того, что
почти миллион диарейных инфекций в год связаны с микробиологическим фактором/
Отчеты ВОЗ показывают, что увеличение производства продукции животного
происхождения сопровождается последовательным нарастанием вспышек пищевых
токсикоинфекций у человека, в том числе сальмонеллеза в 7 раз, иерсиниоза и
кампилобактериоза - в 15 раз.
Значимость потребительского мнения, нашедшая отражение в создающейся законодательной базе, делает биологическую безопасность основным критерием качества пищевых
продуктов и воплотилась в "Концепции государственной политики в области здорового
питания населения в Российской Федерации в период до 2005 года", которая была одобрена
постановлением Правительства РФ. Согласно этой Концепции проблема продовольственной
безопасности России рассматривается как с позиции адекватности сложившейся структуры
потребления пищевых продуктов физиологическим потребностям населения в необходимых
пищевых веществах и энергии, так и охраны организма от попадания с пищей ксенобиотиков
техногенного и биологического происхождения.
Важным звеном в решении проблемы здорового питания является интенсификация
животноводства, и в первую очередь птицеводства и свиноводства, которая возможна только
при принятии и неукоснительном исполнении концепции рационального кормления
животных. Данная концепция предусматривает применение полноценных кормов,
обеспечивающих оптимальное и бережное использование генетического потенциала
продуктивности животных и получение от них продукции, благополучной в ветеринарносанитарном отношении.
Накопленный фактический материал и многочисленные научные публикации
последних лет свидетельствуют о том, что характерной чертой современной инфекционной
патологии молодняка является неукоснительный рост оппортунистических кишечных
инфекций, возбудителями которых являются условно-патогенные бактерии. Эти
микроорганизмы широко циркулируют в хозяйствах, обладают широким спектром
вирулентности
(энтеротоксигенности,
адгезивности,
гемолитической
активности,
антибиотикоустойчивости).
Основным биотопом условно-патогенных бактерий родов Escherichia, Proteus,
Citrobacter, Klebsiella, Peptococcus, Bacillus, Clostridium, Bacteroides, Yersinia, Ervinia,
Salmonella, Streptococcus, Staphylococcus, Pseudomonas является кишечник теплокровных
животных. Высокая экологическая пластичность условно-патогенных бактерий позволяет им
длительно сохраняться в различных объектах внешней среды. /" На фоне высокой
обсемененности кормов и различных объектов внешней среды условно-патогенными
микроорганизмами происходит опережающее заселение кишечника новорожденных
животных энтеробактериями и замедление процессов колонизации кишечной стенки
нормальной
микрофлорой
молочнокислыми
бактериями,
бифидобактериями,
пропионовокислыми бактериями и энтерококками/
Не случайно болезни молодняка, сопровождающиеся диарейным синдромом,
остаются наиболее сложной проблемой ветеринарной медицины.
Практика показывает, что существующий в настоящее время комплекс
технологических, зоогигиенических, ветеринарно-санитарных приемов при выращивании
молодняка животных не позволяет поддерживать высокий уровень резистентности к
бактерийным инфекциям, вызванным условно-патогенной микрофлорой. Применение
антибиотиков для профилактики и лечения при желудочно-кишечных болезнях небезопасно
и становится все менее эффективным.
Особую тревогу в современных условиях ведения животноводства и птицеводства
вызывает тенденция увеличения массовой заболеваемости и падежа новорожденных телят и
поросят, а также цыплят второго периода откорма от желудочно-кишечных инфекций.
Доказано, что интенсивная технология выращивания животных искажает процессы
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 18 из 134
формирования кишечного микробиотопа у новорожденных. В отличие от домашних
сородичей у животных промышленного стада - поросят, телят и цыплят - существенно
снижен общий индекс кишечной микрофлоры. Состав кишечного микробиотопа молодняка
характеризуется присутствием анаэробных спорообразующих бактерий, стафилококков,
протея, плесневых и дрожжеподобных грибов. Количество эшерихий со сниженной
ферментативной ативностью может достигать 30-40 %. Значительно снижен уровень
молочнокислой флоры. Количество бифидобактерий минимально.
Защитный потенциал кишечной популяции лактобацилл и бифидобактерий у
молодняка продуктивных животных существенно снижен. Большую часть популяции
лактобацилл и бифидобактерий представляют клоны с низкими колонизационными
характеристиками и слабыми антагонистическими свойствами.
Под действием ряда экзогенных (антибиотики, вакцинация) и технологических
факторов нарушается микроэкологическое равновесие кишечного биотопа, что приводит не
только к доминированию потенциально патогенных микробов. Ускоряются темпы
изменчивости условно-патогенных микроорганизмов, усиливаются генетический обмен и
скорость формирования клонов, несущих плазмиды лекарственной устойчивости и нередко
включающих гены, детерминирующие адгезивные, цитотоксические и энтеротоксические
свойства условно-патогенных бактерий.
Нарушение эволюционно сложившегося равновесия в кишечном микробиотопе
приводит к развитию дисбактериоза и дисбактериозной диареи. На фоне дефицита
нормальной кишечной микрофлоры и ее низких защитных характеристик под прессингом
энтеробактерий происходит прорыв барьеров слизистой кишечника и проникновение их в
кровь и паренхиматозные органы. Накоплены многочисленные факты о проницаемости
слизистой кишечника для микроорганизмов, постоянной миграции бактерий в кровь в
составе макрофагов, о транслокации под действием большого числа факторов, в результате
чего у животного с ослабленной иммунной системой развивается генерализо-ванная
инфекция. Переболевшие животные отстают в росте и развитии и длительное время могут
быть скрытыми носителями условно-патогенных бактерий.
Не случайно одним из основных источников пищевых токсикоинфекций человека
являются животные, вынужденно убитые, а также с латентно протекающими бактерийными
заболеваниями. /В результате постоянного попадания бактерий во внутренние среды в крови
животных накапливаются промежуточные и конечные продукты фагоцитоза, чужеродные
молекулы, представляющие собой компоненты клеточных стенок микроорганизмов, а также
низкомолекулярные соединения микробного происхождения, которые блокируют факторы
естественной резистентности организма.
Дисбактериоз кишечника замыкает патогенетический порочный круг, разорвать
который необходимо как для успешной профилактики основного заболевания, так и для
ликвидации его последствий/
Научные исследования подтверждают, что отдельные компоненты рациона являются
особо полезными для здоровья животных. Использование кормов, обогащенных биологически активными кормовыми добавками, натуральными продуктами с лекарственными
свойствами, минеральными соединениями и витаминами позволяет предотвратить развитие
многих патологий у животных.
С этих позиций пробиотики следует рассматривать как часть рационального
потенциала животных, поддержания их здоровья и получения продукции высокого качества,
безопасной как в бактериальном, так и в химическом отношении.
/В состав пробиотиков входят типичные представители нормофлоры толстого отдела
кишечника животных - молочнокислые бактерии, бифидобактерий, стрептококки, играющие
огромную роль в защите кишечной стенки и про-светного содержимого от избыточной
колонизации грамнегативной микрофлоры.
Механизм действия пробиотиков в отличие от антибиотиков направлен не на
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 19 из 134
уничтожение, а на конкурентное исключение условно-патогенных бактерий из состава
кишечного микробиотопа, чтобы предотвратить усиление и передачу факторов
вирулентности в популяции условно-патогенных бактерий.
Бактерии-пробионты
обеспечивают
опережающее
заселение
кишечника
новорожденных животных нормальной микрофлорой и создают биологический барьер,
преграждающий доступ к ней условно-патогенных бактерий/
В процессе жизнедеятельности бактерии-пробионты вырабатывают комплекс
биологически активных соединений, избирательно воздействующих на условно-патогенные
микробы. Например, лизоцим резко снижает способность грамнегативных бактерий к
делению и размножению, молочная кислота замедляет их рост, перекись водорода разрушает
их клеточную стенку. Бактериоцины обладают общим бактериостатическим действием на
грамотрицательную микрофлору. Таким образом, по силе воздействия на негативную
кишечную микрофлору пробиотики, препараты из живых бактерий могут быть
альтернативой антибиотикам. Снижение популяционного уровня и блокада факторов
патогенное™ у грамотрицательной микрофлоры лежит в основе профилактического эффекта
пробиотиков.
Дополнительным механизмом, усиливающим защитные свойства бактерийпробионтов, является обмен сигнальными молекулами с иммунокомпетентными клетками
слизистой кишечника, усиливая продукцию секреторного иммуноглобулина А, комплемента,
лизоцима, которые блокируют прикрепление энтеропатогенных бактерий к поверхности
слизистой.
Первые попытки использовать пробиотики были связаны с поиском путей
профилактики сальмонеллеза и колибактериоза в промышленном птицеводстве без
применения антибиотиков, хотя по существу доказательство регуляторного влияния
молочнокислых бактерий на микрофлору кишечника установил еще И.И. Мечников (19031905).
Эта задача остается актуальной и в настоящее время, поскольку в международном
сообществе существует четкое понимание того факта, что мясо птицы является не только
диетическим продуктом, но и наиболее дешевым, доступным источником белка животного
происхождения.
В промышленном птицеводстве на смену старым кроссам приходят
высокопродуктивные и быстрорастущие кроссы цыплят-бройлеров, срок выращивания
которых сократился до 35-36 дней. Быстрорастущие цыплята успевают пройти стадию роста;
но не стадию развития. Несформированная иммунная и ферментная системы делают их
высокочувствительными к бактерийным и вирусным агентам.
Дефицит нормальной микрофлоры у цыплят первых дней жизни приводит к бурному
размножению нежелательной кишечной микрофлоры, замедлению процессов формирования
иммуно-компетентных органов, перерасходу энергии, заложенной в желточном мешке.
Снижение иммунного гомеостаза сопровождается повышенной восприимчивостью цыплят к
бактерийным и вирусным инфекциям.
Желудочно-кишечные болезни наносят огромный ущерб животноводству вследствие
высокой заболеваемости и падежа, затрат на
лечебные мероприятия, снижения продуктивных качеств и племенной ценности
животных, хотя в современных условиях ведения отрасли не представляется возможным
оценить реальные масштабы экономических потерь, связанных с нарушением
микроэкологии желудочно-кишечного тракта.
Контаминация кишечника условно-патогенными бактериями приводит к
существенным изменениям в обмене веществ за счет продукции ими энтеротоксинов и
эндотоксинов, которые помимо прямого раздражающего действия на слизистую оболочку
кишечника активируют процессы перекисного окисления липидов, вызывая обезвоживание и
антиоксидантный стресс.
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 20 из 134
Избыточное присутствие в составе кишечного микробиотопа условно-патогенной
флоры негативно сказывается на процессах кишечного микробного пищеварения и снижает
усвоение кормов. Сбраживание углеводов энтеробакте-риями, клостридиями, гнилостными
бактериями и плесневыми грибами происходит по типу уксуснокислого и маслянокислого
брожения, снижающего энергетическую ценность корма. Побочные продукты метаболизма
условно-патогенных бактерий и плесневых грибов - биогенные амины и микотоксины в
высокой мере токсичны для теплокровных животных. Учитывая, что до 20 % энергии
рациона расходуется на поддержание жизнедеятельности кишечной микрофлоры, потери
энергии при негативном изменении состава кишечного микробиотопа бывают ощутимы.
/Включение пробиотиков в технологию выращивания молодняка - наиболее
современный способ профилактики желудочных болезней, основанный на экологически
безопасных механизмах поддержания высокого уровня колонизационной резистентности
кишечника. Мировая практика доказала, что пробиотики предупреждают риск контаминации
кишечника теплокровных животных условно-патогенными бактериями и снижают частоту
их выделения из органов животных при убое/
Пробиотики в отличие от антибиотиков не вызывают привыкания со стороны
условно-патогенных
микроорганизмов,
обладающих
R-плазмидой,
кодирующей
устойчивость к химиопрепаратам. Продукты жизнедеятельности бактерий-пробионтов не
накапливаются в органах и тканях животных и не влияют на товарное качество
птицеводческой продукции. Пробиотики не усиливают экологические характеристики
энтеробактерий, ответственных за вирулентность. Они безопасны для окружающей среды и
обслуживающего персонала.
Возможности использования пробиотиков в ветеринарии затрагивают довольно
широкий круг проблем, начиная от коррекции кишечного биоценоза и распространяв на
коррекцию иммунной, гормональной и ферментативной систем молодняка.
В этой связи отечественные и зарубежные 'ученые считают необходимым внедрение
пробио-тиков в систему выращивания животных для профилактики неинфекционных
желудочно-кишечных
заболеваний
молодняка,
поддержания
колонизационной
резистентности кишечника, повышения физиологического статуса организма новорожденных животных, стимуляции роста и развития, получения качественной продукции,
безопасной в ветеринарно-санитарном отношении.
Широкомасштабную работу по разработке новых пробиотиков и обоснованию
концепции их применения ФГУ ВГНКИ проводит с начала 90-х годов прошлого столетия. За
это время проведены экологические исследования микробиотопов промышленной и
домашней птицы, здоровых и больных желудочно-кишечными болезнями поросят и телят
разновозрастных групп.
Проведено изучение экологических характеристик изолятов лактобацилл и
бифидобактерий, выделенных из кишечника здоровых и больных животных. Определен
видовой состав лакто- и бифидофлоры кишечника поросят и цыплят. Научно обоснованы
критерии отбора штаммов для производства пробиотиков ветеринарного назначения.
Наши исследования показали, что популяция лактобацилл в кишечнике животных
представляет собой сформированное, устойчивое к химическим детерминантам сообщество,
антагонистические свойства которого статистически достоверно ассоциируют с уровнем
продукции молочной кислоты, перекиси водорода и других биологических соединений,
синергидно усиливающих бакте-риостатические свойства этих микроорганизмов.
Выявлено, что антагонистические свойства лактобацилл и бифидобактерий
коррелируют с их адгезивной активностью. Наибольшие шансы для колонизации кишечника
и выживания в нем имеют штаммы лактобацилл и бифидобактерий с высокой
антагонистической и адгезивной активностью. Нами установлено, что в процессе
жизнедеятельности лактобацил-лы и бифидобактерий вырабатывают метаболиты, которые
снижают колонизационный и персистентный потенциал энтеробактерий.
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 21 из 134
Исследования сотрудников отдела пробиотиков и биологически активных препаратов
ФГУ ВГНКИ выявили механизмы влияния пробиотиче-ских микроорганизмов на иммунную
систему животных. В период дачи пробиотиков у животных происходит выраженная
перестройка систем, ответственных за неспецифическую резистент-ность и активацию Тклеточного звена иммунитета. Под влиянием пробиотиков возрастает активность
сывороточного лизоцима, увеличиваются фагоцитоз и бактерицидная активность.
Многочисленные публикации показывают, что включение пробиотиков в систему
выращивания молодняка животных снижает заболеваемость желудочно-кишечными
болезнями, сокращает продолжительность выращивания, снижает затраты кормов, повышает
сохранность. Пробиотики улучшают убойные и мясные качества молодняка свиней и
цыплят-бройлеров.
В настоящее время на вооружении ветеринарной практики имеется достаточное
количество отечественных и импортных пробиотических препаратов различного видового
состава, предназначенных для коррекции кишечного биоценоза, стимуляции откорма,
повышения естественной резистентности молодняка.
Перечень пробиотиков, зарегистрированных в Российской Федерации, насчитывает
около 80 наименований отечественных и импортных пробиотических препаратов.
Пробиотические культуры используют в составе кормовых добавок для молодняка
животных. Ими обогащают заменители цельного молока, витаминные, минеральные,
ферментные кормовые добавки.
В состав пробиотических лекарственных средств входят микроорганизмы, безопасные
для здоровья человека и животных, обладающие широким спектром протективных свойств, в
частности, бифидобактерий видов Bif. adolescentis, Bif. bifidum, Bif. longum, Bif. globosum,
Bif. thermo-philus; молочнокислые бактерии L. acidophilus, L. plantarum, L. bulgaricus, L.
rhamnosus, L. fermen-tum; стрептококки Sir. faecium, Str. lactis diastati-cus; спорообразующие
бактерии Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis, Bacillus cereus var. Toyi, Rurpinococcus albus,
Bacillus panthothenticus. /\Бактерии-пробионты широко используют для изготовления
микробиологических консервантов для кормов (силосных заквасок) и в виде молочнокислых
продуктов. Микроорганизмы, входящие в состав силосных заквасок, усиливают молочнокислое брожение и подавляют бродильные и гнилостные процессы при консервации кормов/'
Таким образом, концепция государственной политики в области здорового питания
населения Российской Федерации может быть реализована только при принятии концепции
рационального кормления животных, обеспечивающей оптимальное использование
генетического потенциала животных, получение продукции, полноценной как с точки зрения
содержания необходимых макро- и микронутриентов, так и безопасной с позиций
контаминации ксенобиотиками техногенного и биологического происхождения.
Многолетнее использование пробиотиков в России и за рубежом свидетельствует, что
пробиотики должны рассматриваться как неотъемлемый компонент рационального
кормления животных.
Лабораторное занятие №6
Тема: Пробиотики вместо антибиотиков это реально.
Цель: Изучить влияние пробиотиков на птицу при выращивании бройлеров.
Рекомендуемая литература:
Основная: Птицеводство №2, 2005, с. 17.
Дополнительная: 1. В.Д.Соколов Фармакология, 1997г.
2. Столяров И.Д. Иммунодиагностика и иммунокоррекция в клинической практике. Спб:
Сотис, 1999
3. В.М.Субботин «Современные лекарственные вещества в ветеринарии». 2003г.
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 22 из 134
4 Внутренние незаразные болезни сельскохозяйственных животных /Б. М. Анохин, В. М.
Данилевский, Л. Г. Замарин и др.; Под ред. В. М. Данилевского. — М.: Агропромиздат, 1991.
Контрольные вопросы:
1.Средства, корректирующие иммунный статус.
2.Новые препараты компании «Байер» для сохранения молочной продуктивности коров и
повышения качества молока.
3.Регуляторы обмена веществ, назовите препараты, повышающие обмены веществ.
Методические рекомендации:
В ветеринарной практике все большее применение находят препараты из живых
микроорганизмов — пробиотики. Учеными Новосибирского ГНЦВБ «Вектор» создан ряд
биопрепаратов на основе спорообразующих бактерий Bacillus subtilis (сенная палочка),
отличающихся высокой антагонистической активностью в отношении многих патогенных и
условно-патогенных микробов, а также безвредностью для лакто- и бифи-добактерий,
находящихся в желудочно-кишечном тракте всех теплокровных. Помимо этого, пробиотики
серии «Ветом» благодаря альфа-2-интерферону, продуцированному рекомбинантным
штаммом Bacillus subtilis, обладают антивирусными свойствами. В нашем центре получена
лекарственная форма препарата, эффективная при пероральном применении, удобная для
хранения и транспортировки. Препарат предназначен для лечения и профилактики
желудочно-кишечных заболеваний, диспепсии, бактериальных инфекций (сальмонеллез,
коли-бактериоз, стрептококкоз), вирусных инфекций (рото- и парвови-русный энтерит,
грипп, парагрипп, гепатит, чума плотоядных), кокцидиоза, для коррекции иммунодефицитных состояний, лечения и профилактики дизбактериозов у телят, поросят, плотоядных,
собак, птицы, а также для стимуляции роста и развития молодняка.
Нормальная микрофлора у животных, поселившаяся как на кожных покровах, так и в
ЖКТ, играет огромную роль в поддержании их здоровья. Функции микроорганизмов
чрезвычайно многообразны:
регуляция работы кишечника, участие в обмене протеинов, жиров, углеводов,
наработка биологически активных соединений (витаминов, аминокислот, ферментов),
нейтрализация токсинов и др. Кроме того, нормальная микрофлора противодействует многим возбудителям болезней, защищает животное от инфекций.
Лечебный эффект препаратов серии «Ветом» обеспечивается продуктами
жизнедеятельности бактерий Bacillus subtilis и Bacillus licheniformis в ЖКТ животных. Эти
пробиотики подавляют широкий спектр патогенных и условно-патогенных микроорганизмов
и обладают противовирусной, проте-олитической, амилолитической, целлюлозолитической
активностью, нормализуют клеточные и гуморальные факторы иммунитета теплокровных,
повышают неспецифическую резистентность, стимулируют регенерационные процессы,
нормализуют обмен веществ.
Пробиотики — это прежде всего профилактика, а профилактика всегда дешевле
лечения. Наиболее целесообразно применять данные пробиотики в профилактических целях,
а для коррекции им-мунодефицитных состояний — сразу после рождения животных. Это
важно и с экономической точки зрения, так как любой препарат задается молодняку с учетом
массы тела.
Пробиотики серии «Ветом» можно использовать не только для профилактики, но и
для лечения острых форм заболеваний как бактериального, так и вирусного происхождения,
поскольку неспецифическая противовирусная резистентность животных и человека в
значительной степени определяется интерфероновой системой и зависит от своевременности
ее включения. К данным препаратам нет привыкания. Патогенная микрофлора не может в
принципе приспособиться к бактериям, содержащимся в них, поскольку они столь же или
даже более динамичны в борьбе с патогенами. Важно также, что пути проникновения как
инфекции, так и бактерий препаратов в организм практически всегда одни и те же.
Испытание пробиотиков «Ветом» проходило на Боровской птицефабрике Курганской
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 23 из 134
области в производственном корпусе, разделенном на четыре помещения (зала) с клеточным
содержанием цыплят-бройлеров, на 30000 голов каждое. Заметим, что птичник и
оборудование в нем самые старые в хозяйстве (им более 20 лет). Здесь все еще применяется
каскадно-сплавная линия удаления помета (жидкая фракция). Под наблюдением находились
три группы цыплят кросса «Смена-4», начиная с суточного возраста. На момент
эксперимента на птицефабрике была неблагоприятная обстановка по микоплазмозу.
Применяли препараты согласно принятой схеме, ежедневно контролировали состояние
птицы и отход.
В первом помещении (30900 голов) цыплят содержали без применения антибиотиков,
во втором (29590 голов) пробиотики скармливали параллельно с антибиотиками по
существующей на птицефабрике схеме лечения птицы. В третьем и четвертом залах (всего
55200 голов) препараты серии «Ветом» не применялись.
Бройлеров выращивали 48 дней. Пробиотики выпаивали им с водой, предварительно
просанировав помещения в присутствии суточных цыплят аэрозолем препарата «Ветом 3.1».
Далее в первом помещении с 1-го по 12-й день в питьевую воду вносили «Ветом 1.1», с 15-го
по 23-й день — «Ветом 2», ас 28-го по 33-й и с 40-го по 45-й день — «Ветом 3» из расчета 75
мг на 1 кг живой массы, два раза в день. Те же формы пробиотиков во втором помещении
давали птице по периодам 1-11, 21-24, 32-36 и 42-45 соответственно.
Результаты приведены в таблице. Как видим, бройлеры, получавшие пробиотики,
весили больше, чем контрольные (помещения 3-4). Затраты корма на единицу продукции
сократились. Однако с учетом прироста живой массы цыплят, снижения расхода кормов,
повышения сохранности поголовья применение пробиотиков оказалось прибыльным только
во втором помещении (зал №2). В первом негативное влияние на экономический результат
оказала низкая сохранность птицы. Кроме того, в заключительные дни выращивания цыплят
и в первом, и во втором зале возникли технические проблемы с кормлением. С 41-го по 46-й
день птицу кормили один-два раза в сутки, а в один из дней вообще не дали корма. До этого
в первом помещении живая масса бройлеров превышала норму на 173 г, во второй — на 106,
в одном контрольном — на 73, а в другом — недобирала 15г.
Показатель
Зал №1
Зал №2
Залы №3 и 4
Начальное поголовье 30900
29600
55200
Сохранность, %
89,3
91,2
90,0
Сдано на убой, гол.
25132
25313
45397
2042
2008
40,0
39,5
Расход корма, всего, 121,0
т
116,1
224,2
Расход корма на 1 кг 2,22
прироста, кг
2,13
2,35
Средняя
бройлера, г
масса 2022
Среднесуточный
прирост, г
39,1
Сохранность поголовья на тот момент составляла 91,8; 94,0; 90,5 и 91,1%. Птица
пережила стресс, что, несомненно, повлияло на результаты эксперимента, который, к тому
же, проводился в августе-сентябре, когда свежие корма еще не появились на рынке и потому
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 24 из 134
использовались оставшиеся с прошлого года. Корма были заражены токсинами.
Тем не менее наши выводы таковы: при использовании пробиотиков серии «Ветом» у
мясных цыплят повышаются интенсивность роста и устойчивость организма к действию
неблагоприятных факторов (в данном примере —несбалансированный и токсичный корм,
стресс-факторы); их можно выращивать без применения антибиотиков в промышленном
масштабе (хотя в эксперименте чуть лучше показатели были во втором помещении — с
применением антибиотиков).
В настоящий момент на птицефабрике продолжается внедрение пробиотиков серии
«Ветом» в производственный процесс.
Лабораторное занятие №7
Тема: Иммуномодулирующие свойства эндогенного интерферона у телят.
Цель: Изучить свойства эндогенного интерферона, обладающего широким спектром
действия.
Рекомендуемая литература:
Основная: Ветеринария №3, 2007г., с.31..
Дополнительная: 1. В.Д.Соколов Фармакология, 1997г.
2. Столяров И.Д. Иммунодиагностика и иммунокоррекция в клинической практике. Спб:
Сотис, 1999
3. В.М.Субботин «Современные лекарственные вещества в ветеринарии». 2003г.
4 Внутренние незаразные болезни сельскохозяйственных животных /Б. М. Анохин, В. М.
Данилевский, Л. Г. Замарин и др.; Под ред. В. М. Данилевского. — М.: Агропромиздат, 1991.
Контрольные вопросы:
1.Иммуномодуляторы, основные задачи.
2.Применеие селена и токоферола на фоне пробиотика.
3 .Нарушение пассивной передачи антител.
Методические рекомендации:
Со времени открытия Айзеке и Линденман (1957) интерферона установлен широкий
спектр биологической активности интерферо-новых белков, которые наряду с другими цитокинами обладают многочисленными свойствами, включая антивирусное действие,
регулирование взаимодействия главных инте-гративных систем организма - нервной,
иммунной, эндокринной.
Система интерферона не имеет специализированных клеток или органов, она существует в каждой клетке, которая в случае вирусной инфекции должна быть защищена от
заражения вирусом (Ф.И. Ершов, О.И. Киселев, 2003). Различают три основных типа
интерферонов: альфа - а, бета -  и гамма - у.
Создание технологии получения генно-инженерных интерферонов позволило, в
частности, выяснить ответственность каждого белка за тот или другой защитный эффект.
Так, γ-интерферон является активатором макрофагов и усиливает их противоопухолевую
активность, подавляет внутриклеточных паразитов. При вирусной инфекции он вызывает
изменения поверхности клеточной мембраны, что защищает клетки от проникновения
вируса, нарушает внутриклеточный синтез вирусов вследствие усиления образования
фермента олигоаденилатсинтетазы и др.
Благодаря рекомбинантной технологии в медицинскую практику вошли чистые
препараты интерферонов, обладающие широким спектром действия у человека. Не меньшее
значение феномен вирусной интерференции имеет и для ветеринарии. Однако вследствие
ряда объективных причин во многих случаях использование чистых интерферонов на
животных экономически мало оправдано или неэффективно, несмотря на все их положи-
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 25 из 134
тельные свойства в отношении антивирусного, антибактериального, противоопухолевого
действия или гармонизации гомеостаза, в том числе иммуногенеза. Наиболее перспективным
направлением в ветеринарии, по нашему мнению, является изыскание активных индукторов
эндогенного интерферона, в первую очередь активных природных индукторов защитных
белков клетки. Суммарный эффект
защитного действия-, -, γ- интерферонов в организме как результат применения удачно
подобранного индуктора может быть использован в комплексе профилактических и лечебных мероприятий при вирусных инфекциях сельскохозяйственных животных.
Все это определило цель нашего исследования - оценить влияние индуцированного
эндогенного интерферона на формирование защитных реакций организма при вакцинации
телят против инфекционного ринотрахеита (ИРТ) и парагриппа (ПГ-3), используя в качестве
индуктора культуру В. subtilis.
Материалы и методы. Микроорганизмы: культура В. subtilis, выращенная на МПБ с
концентрацией бактериальных клеток 2 млрд/мл (коммерческий препарат сахабактисубтил);
вирус инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота, штамм ТК - А; агглютинирующий антиген ПГ-3; вакцина, ассоциированная против ИРТ и ПГ-3, производство Ставропольской биофабрики; вирус везикулярного стоматита (ВВС), штамм Индиана; животные: телята
в возрасте 5,5 - 6 мес; культура клеток: MDBK, на среде Игла Мем с 10 % сыворотки
крупного рогатого скота.
Шесть телят разделили на три равные группы. Животным первой группы подкожно
вводили по 3 мл культуры В. subtilis, а через 3 дня ассоциированную вакцину против
ринотрахеита (штамм ТК - А) и ПГ-3, телятам второй группы - культуру В. subtilis (индуктор
интерферона) одновременно с вакцинным вирусом, в третьей (положительный контроль)
прививали только вакцину против ринотрахеита.
До вакцинации и введения культуры В. subtilis у телят определяли к вирусу ИРТ и
ПГ-3 иммунный (в РН и РТГА) и интерфероновый статус.
Первые 6 дней опыта от телят ежедневно получали пробы крови, в последующем
кровь брали на 30-й и 75-й дни соответственно.
Для определения общего (суммарного) интерферона сыворотку крови прогревали при
56 - 57 °С в течение 1 ч. Наличие интерферона оценивали по ингибированию репродукции
ВВС в культуре клеток MDBK, взятого в титре 100 ТСD50/мл. Реакцию нейтрализации (РН) с
вирусом ИРТ проводили по стандартной методике с использованием пластиковых 96
луночных микропанелей фирмы Nunc.
За положительный результат принимали разведение сыворотки крови при котором
репродукция вируса подавляется на 50 %.
Результаты и обсуждение. В предварительном опыте на 2 телятах было показано,
что подкожное введение культуры В. subtilis вызывает образование у телят эндогенного
интерферона. В течение последующих 3 сут (срок наблюдения) титр интерферона в крови
телят составил 1:16 против 100 ТСD50/мл ВВС и снизился на вторые сутки до 1:8. Вирусы
ИРТ и ПГ-3 являются достаточно активными индукторами интерферона. В нашем опыте
прививка телятам третьей группы ассоциированной вакцины стимулировала у них
продукцию этого ингибитора на 4-е сутки до титра 3 Iog2 с последующим снижением к 30-му
дню.
В первой и второй группах введение вакцины и культуры В. subtilis приводило к
существенному снижению титра интерферона (1,5 - 2,5 Iog2) в те же сроки исследования, с
последующим повышением его уровня на 3-й и 4-е сутки.
Использованные в данном опыте телята имели гуморальные антитела к вирусам ИРТ
и ПГ-3, что было установлено исследованием их сывороток крови в РН и РТГА
соответственно.
Вакцинация этих телят ассоциированной вакциной привела к снижению через 48 ч
титра антител к обоим вирусам. При этом наибольшее снижение уровня антител отмечали у
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 26 из 134
телят третьей группы животных, которым вводили В. subtilis, уменьшение количества антител было менее выражено, особенно при одновременном введении вакцины и индуктора
интерферона (ИИ). В последующие сроки наблюдения уровень антител к вирусам ИРТ и ПГ3 восстанавливался и на 3 - 4-е сутки превышал исходные показатели в 4 - 8 раз.
Интерферониндуцирующая активность свойственна весьма пестрой группе высоко- и
низкомолекулярных природных и синтетических соединений (Ф.И.Ершов, 1998; В.В.Зверев
и соавт., 2002).
В ветеринарной практике преимущества ИИ перед экзогенными интерферонами определяется несколькими факторами. При использовании ИИ образуется собственный
интерферон (ИФН), который в отличие от рекомбинантных не обладает антигенностью, при
однократном введении индуктор обеспечивает длительную продукцию ИФН, тогда как для
достижения подобных концентраций необходимы многократные инъекции экзогенного
ИФН, что в большинстве случаев невозможно в условиях животноводческих хозяйств.
Использование ИИ снижает риск развития аутоиммунных реакций и оказывает
иммуномоделирующее влияние (Ф.И.Ершов и соавт., 1983; Ф.И.Ершов, 1998).
В наших опытах показано, что В. subtilis (ИИ) индуцирует образование ИФН как в
виде монопрепарата, так и при совместном парентеральном введении с двухвалентной
(ассоци-ированой) вакциной ИРТ и ПГ-3 крупного рогатого скота. При одновременном
введении отмечают выраженный иммуностимулирующий эффект в отношении обоих
вирусов, что регистрируется по увеличению в 4 - 8 раз титра вирусспецифических
сывороточных антител.
Заключение. Эндогенный интерферон, образующийся у телят в ответ на парентеральное введение культуры В. subtilis, влияет на динамику иммунного ответа к вирусам ИРТ и
ПГ-3. Более выраженное повышение иммунной реакции отмечено при одновременном
введении вакцины ИРТ и ПГ-3 и индуктора интерферона (В. subtilis).
Лабораторное занятие №8
Тема: Профилактика диарей новорожденных телят пробиотиками.
Цель: Изучить применение пробиотиков на телятах с целью профилактики диареи.
Рекомендуемая литература:
Основная: Ветеринария, №3, 2007 с.10, 47, 51.
Дополнительная: 1. В.Д.Соколов Фармакология, 1997г.
2. Столяров И.Д. Иммунодиагностика и иммунокоррекция в клинической практике. Спб:
Сотис, 1999
3. В.М.Субботин «Современные лекарственные вещества в ветеринарии». 2003г.
4 Внутренние незаразные болезни сельскохозяйственных животных /Б. М. Анохин, В. М.
Данилевский, Л. Г. Замарин и др.; Под ред. В. М. Данилевского. — М.: Агропромиздат, 1991.
Контрольные вопросы:
1.Иммунодепрессанты.
2.Профилактика диарей новорожденных телят пробиотиками.
3.Эрготропики, механизм действия, основные подгруппы.
Методические рекомендации:
Снижение эффективности различных антибиотиков и химиопрепаратов при лечении
больных животных, негативные последствия нерациональной атибиотикотерапии отмечают
многие специалисты и исследователи (В.А.Антипов, 1981; Н.И.Малик, А.Н.Панин, 2001;
Б.В.Тараканов, 2001). В связи с этим предлагается отказаться от антибактериальных
препаратов или же использовать их лишь ограниченный период времени под строгим
лабораторным контролем наряду с другими лекарственными средствами. По своим
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 27 из 134
характеристикам альтернативой антибиотикам могут быть пробиотики. Последние
оказывают позитивное действие на животных благодаря антагонизму ко многим патогенным
и условно-патогенным бактериям, способности конкурировать с ними за "сайты" адгезии на
слизистой тонкого кишечника, стимуляции иммунокомпетентных клеток кишечника, повышению уровня резистентности организма и улучшению обмена веществ (А.Н.Панин и соавт,
1996; Н.В.Данилевская, 2005).
При диареях новорожденных хорошо зарекомендовали себя такие пробиотики, как
лакто-бактерин, бифидумбактерин-"СХЖ", реалак, ромикол, лактобифадол и др.
(А.Т.Марчук и соавт., 1983; В.В.Субботин, М.А.Сидоров, 1997; Д.А.Девришов, Е.С.Воронин,
1998;Т.Н.Грязнева и соавт., 2003; П.С.Рахманин, 2006). И тем не менее по отзывам
практиков, по материалам собственных наблюдений далеко не всегда удается добиться
высокой сохранности молодняка, используя одни бактериальные препараты. В связи с этим
мы попытались выяснить причины низкой эффективности или отсутствия ее при их
применении.
В процессе изучения большое внимание уделили профилактической эффективности
пробиотиков. Обычно радикального действия бактериальных препаратов (лактобактерин,
бифидумбактерин, ветом-3, бифилакт, бифитрилак) при диареях, протекающих с признаками
выраженного угнетения, токсикоза и обезвоживания, мы не наблюдали. Эффективность
пробиотиков при лечении больных животных возрастает при комплексном использовании с
антитоксическими и регидратационными средствами, адсорбентами и иммуномодуляторами
(В.Г.Зароза, 1989; Т.Н.Грязнева и соавт., 1991; А.Н.Панин и соавт., 1998).
Применение пробиотиков с целью профилактики диарей оказалось более результативным, что проявлялось снижением заболеваемости и отхода телят, сокращением токсических
форм заболевания и уменьшением продолжительности болезней. Это отмечают многие
исследователи (В.А.Антипов, 1981; Н.Семенов, Я.Пеев, 1981; В.В.Субботин, М.А.Сидоров,
1997). Однако даже при использовании бактериальных препаратов для профилактики диарей
мы не всегда достигали их высокой эффективности. Довольно часто это отмечали в случаях
несоблюдения наставлений по применению пробиотиков (запоздалое, бессистемное и
нерегулярное использование или совместно с антибактериальными средствами).
Другой немаловажной причиной неудач употребления этих средств профилактики
оказалась низкая концентрация живых бактериальных клеток в используемых препаратах,
что было обусловлено их длительным и неправильным хранением или же изначально низкой
концентрацией. Она характерна для бифитрилака, в 1 г которого, судя по наставлению,
содержится по 0,5 млрд бифидобактерий и по 0,5 млрд лактобактерий трех видов
(acidophilus, bulgari-cus и fermenti). Существенное значение при бактериопрофилактике
диарей имеют этиология и форма течения болезни. Так, при септическом течении
эшерихиоза применение пробиотиков оказывается безрезультатным, поскольку они
оказывают позитивное действие на бакте-риоценоз кишечника, а инфицирование возможно
не только перорально, но и через носоглотку или пуповину. При проникновении в организм
высоковирулентных и инвазивных эшерихий бактерии-антагонисты, входящие в состав
пробиотиков, не в состоянии быстро обеспечить надежную защиту новорожденных. В этих
случаях эффективно внутримышечное использование высокоактивных антибактериальных
средств и специфической сыворотки. Этого оказалось достаточно для ликвидации массового
падежа телят в ЗАО "Кубань" Ленинградского района Краснодарского края и в ОАО
"Южное" Сальского района Ростовской области. Эшерихиоз в обоих хозяйствах был вызван
серотипом О78 и протекал скоротечно и без развития синдрома диареи.
Бактериопрофилактика желудочно-кишечных расстройств успешна при точном
определении их этиологии и правильном выборе пробиотика, поскольку заболевания
вызывают не только эшерихии, но и другие бактерии и вирусы. Среди них наибольшее
значение имеют стрептококки и энтерококки, клостридии, клебсиеллы, сальмонеллы,
кандиды, рота- и коронавирусы.
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 28 из 134
Различные бактерии имеют разную чувствительность к бактериям-симбионтам,
входящим в состав пробиотиков. Высокую устойчивость к факторам антагонизма лактомолочнокислых бактерий и бифидобактерий, энтерококков вида faecium и сенной палочки
проявили культуры протея. Псевдомонады (Ps. aeruginosa) оказались устойчивыми к
ингибирующим факторам лактобактерий, молочнокислых стрептококков и сенной палочки,
входящей в состав ветома. Они были мало чувствительны к молочнокислым стрептококкам,
энтерококкам вида faecium и бифидобактериям. Эшерихии проявили устойчивость к сенной
палочке и были малочувствительны к молочнокислым стрептококкам. В большей мере их
угнетали стрептококки вида faecium и лактобактерий вида fermenti. Зоны задержки их роста
были наибольшими и колебались от 16 до 32 мм.
Сенная палочка не угнетала эшерихии, сальмонелл, клебсиел и псевдомонад, но
задерживала рост стрептококков.
Исходя из полученных данных, вряд ли можно рассчитывать на эффективность
ветома при эшерихиозе или сальмонеллезе телят, но будет оправдано его применение при
стрепто-коккозах.
При диареях, вызванных эшерихиями, сальг монеллами, клебсиеллами, для
профилактики болезней обоснованным будет использование лактобактерий, энтерококков
вида faecium и бифидобактерий или же поливалентных пробиотиков, в которые названные
антагонисты входят. Неудачи от применения пробиотиков могут быть связаны со смешанной
этиологией диарей или с осложнением их протейной, синегнойной и кокковой микрофлорой.
Довольно часто желудочно-кишечные заболевания протекают в виде смешанных
вирусобакте-риальных инфекций, когда корона- или ротави-русы предшествуют бактериозам
и способствуют их возникновению. Вызывая поражение слизистой тонкого кишечника, они
препятствуют созданию колонизационной резистентности при использовании пробиотиков и
формированию местного иммунитета.
Вполне понятна низкая эффективность бактериопрофилактики при молозивном
токсикозе, который отмечают в случаях выпаивания молозива от коров, больных маститами,
при наличии кетозов и нитритном токсикозе маточного поголовья.
Снижают эффективность пробиотиков при диареях или сводят ее на нет
иммунодефициты, связанные с пониженным содержанием гамма-глобулинов в молозиве
коров-матерей, недостаточным его выпаиванием или неполным их проникновением через
стенку кишечника новорожденных.
Не последнюю роль в эффективности пробиотиков, вероятно, играет происхождение
микроорганизмов, входящих в их состав, что влияет на их приживаемость в кишечнике. При
отсутствии таковой пробионты будут быстро элиминировать из организма и их действие окажется кратковременным и минимальным. Поэтому для профилактики диарей предпочтительнее использовать бактериальные препараты ветеринарного, а не медицинского назначения. В
организме телят лучше приживаются лактобактерий или другие пробионты, которые происходят от них же, а не от человека или птицы.
Таким образом, эффективность бактерио-профилактики зависит от множества
факторов, среди которых существенное значение имеет качество используемых пробиотиков.
Заключение. Пробиотики как экологически безопасные и безвредные для организма
препараты предпочтительнее антибиотиков и других антибактериальных средств,
используемых при диареях молодняка. Их эффективность зависит от концентрации живых
бактериальных клеток в 1 г препарата, степени антагонизма к возбудителям болезней,
своевременного и правильного применения, формы течения болезни и качества
выпаиваемого молозива.
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 29 из 134
Лабораторное занятие №9
Тема: Селен и токоферол на фоне пробиотика, «Лечение мочекислого диатеза».
Цель: Изучить действие пробиотиков, селена и токоферола дающих здоровье животным.
Рекомендуемая литература:
Основная: Птицеводство, №10, 2005г., с.51,21..
Дополнительная: 1. В.Д.Соколов Фармакология, 1997г.
2. Столяров И.Д. Иммунодиагностика и иммунокоррекция в клинической практике. Спб:
Сотис, 1999
3. В.М.Субботин «Современные лекарственные вещества в ветеринарии». 2003г.
4 Внутренние незаразные болезни сельскохозяйственных животных /Б. М. Анохин, В. М.
Данилевский, Л. Г. Замарин и др.; Под ред. В. М. Данилевского. — М.: Агропромиздат, 1991.
Контрольные вопросы:
1.Противоаллергические средства , препятствующие освобождению из
сенсибилизированных
тучных клеток физиологически активных веществ
2.Эрготропики- кишечные стабилизаторы, механизм действия.
3.Иммуностимуляторы: растительные средства.
Методические рекомендации:
Мочекислый диатез (подагра) весьма распространен в птицеводческих хозяйствах
Армении. Отход кур порой достигает 20% и более.
У заболевших особей значительно снижаются продуктивность, резистентность, на
этом фоне развиваются секундарные инфекции, вызванные условно-патогенными
микробами.
Совершенствование методов диагностики,профилактики и лечения этого заболевания
имеет большое значение для промышленного птицеводства не только нашей республики.
Мы изучали терапевтический эффект милурита, настоя петрушки и гидрокарбоната
натрия в опыте на 30 курах 78-79-недельного возраста кросса «Хай лайн».
Поголовье разделили на три равные по численности группы. Первую, контрольную,
перевели на обычный рацион. Вторую и третью, у которых воспроизвели так называемый
«протеин-Са-пурининдуцированный» мочекис-лый диатез, перевели на рацион,
обогащенный «протеин-Са-пуриновыми» компонентами.
В дополнение куры третьей группы получали препарат милу-рит (ДВ-аллопуринол) в
дозе 10 мг на 1 кг корма в два приема за сутки, а вместо питьевой воды — настой петрушки в
0,5%-ном водном растворе гидрокарбоната натрия в соотношении 1:300. Наблюдения за
птицей вели с первого дня эксперимента. Птица выглядела подавленной, у нее отмечались
снижение яйценоскости, потеря аппетита, анемичность сережек и гребня, диарея с выделением белого помета, полидипсия, резкое снижение яйценоскости.
После скармливания лечебных средств на 5-й день у кур третьей группы наметилось
улучшение общего состояния, помет стал более оформленным, менее водянистым (но белый
налет присутствовал, и в большом количестве), анемичность сережек и гребня была слабо
выражена, появился аппетит, но полидипсия сохранилась; у птицы второй группы были
такие симптомы, как диарея, анорексия, анемичность сережек и гребня.
По сравнению с исходными данными (до лечения) яйценоскость кур третьей группы
повысилась в 3,6 раза, температура тела снизилась, частота пульса уменьшилась на 26%,
дыхания — на 62%, достигнув нормы.
Клинические показатели в динамике приводятся на рис. 1. Температура тела и частота
дыхания приблизились к величинам здоровых особей. Яйценоскость по сравнению с курами
второй группы повысилась, от 10 кур за 5 дней получено 13 яиц.
На 10-й день лечения у кур третьей группы общее состояние было хорошим, сережки
и гребень порозовели, помет стал нормальной консистенции с небольшим беловатым
налетом, прием корма и воды — удовлетворительный.
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 30 из 134
Во второй группе на 8-й день эксперимента пали две курицы с характерными
признаками подагры, на 14-й день — еще столько же. Патологоанатомические изменения —
идентичные.
Температура тела у кур второй и третьей групп на 15-й день была повышенной,
частота сердечных сокращений в третьей группе уменьшилась на 17%, частота дыхания
практически приблизилась к норме. Яйценоскость по сравнению со второй группой повысилась.
На 5-й день лечения у кур третьей группы замечена тенденция к увеличению в крови
количества эритроцитов, а на 15-й день их стало больше уже на 23,5% (4,3 т/л).
Содержание лейкоцитов у птицы третьей группы за 15 дней лечения уменьшилось на
16%, оставаясь при этом выше нормы, уровень гемоглобина превышал норму на 10%.
Параллельно изменялась и кислородная емкость крови.
Цветовой показатель у кур на 5-й день лечения приблизился к норме, но потом начал
снижаться и на 15-й день составил 0,8 (на 20% ниже нормы). Производственная проверка
применимой нами схемы лечения спонтанной подагры кур показала высокий лечебный
эффект — до 95,2%.
Для лечения мочекислого диатеза предлагаем использовать препарат милурит в дозе
10 мг/кг (с кормом в два приема), а вместо питьевой воды — настой петрушки (1:300) в
0,5%-ном растворе гидрокарбоната натрия. Курс лечения — 15 дней.
Современная сельскохозяйственная птица, обладающая генетически обусловленной
высокой скоростью роста, чувствительна даже к незначительным колебаниям в рационе
уровня питательных веществ, в том числе и антиоксидантов.
В биохимических процессах селен, как и витамин Е, играет роль антиоксиданта.
Недостаток этого элемента в рационе вызывает у птицы заболевание, похожее на авитаминоз
Е. При полном обеспечении селеном потребность ее в токофероле снижается, предотвращая
тем самым мышечную дистрофию, экссудативный диатез. Кроме того, в печени витамин Е и
селен участвуют в регуляции перекисного окисления липидов.
Для всасывания селена и витамина Е важное значение имеет рН среды содержимого
кишечника, в регуляции которого принимает участие микрофлора. Чаще всего в кишечнике
уменьшается количество би-фидобактерий, которые выполняют ряд важных функций:
защищают слизистую от проникновения в кровь патогенных и условно-патогенных
микроорганизмов, в процессе жизнедеятельности синтезируют антиби-отикоподобные
вещества, органические кислоты (уксусную, молочную, пропионовую), препятствующие
развитию патогенов.
Недавно вылупившиеся цыплята более восприимчивы к инфекции по сравнению со
взрослой птицей. Это может быть исправлено замещением вредных конкурентоспособными
полезными микроорганизмами, то есть микробами, входящими в состав пробиотических
препаратов.
В связи с этим представляется весьма актуальной разработка способа повышения
продуктивности цыплят-бройлеров скармливанием им селена и витамина Е при заселении в
пищеварительный тракт бифидо-бактерий.
Экспериментальная часть работы выполнялась в условиях Северо-Осетинской
птицефабрики. Объектом исследований в ходе первого и второго опытов были цыплята
кросса «Смена», а третьего — «Смена-2». Продолжительность их выращивания
соответственно 56 и 49 дней. В группы отобрали методом аналогов по 200 суточных цыплят.
Кормили по нормам ВНИТИП (1999 г.) сухими полнорационными комбикормами по
периодам выращивания: 1-4 недели — рецепт ПК-5; 4-8 недель — рецепт ПК-6. Схема опыта
представлена в таблице 1.
Пробиотик бифидумбактерин на лактулозной основе, производимый фирмой
«Партнер» (Москва), вводили в корм согласно схеме опытов. Селенит натрия и препарат
витамина Е добавляли путем ступенчатого дозирования и скармливали ежедневно в течение
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 31 из 134
всего опыта, а их комплексное соединение «ловит Е + Se» — дифференцирование (в возрасте
1-5; 16-20 и 31-35 дней).
При химическом анализе комбикормов выяснилось, что содержание витамина Е
составило 5 тыс. ME при норме 30 тыс., поэтому недостающее количество (25 тыс. ME)
добавляли в премикс. Селен обнаруживался в комбикормах в виде «следов», и включение
селенита натрия в количестве 0,44 г/т обеспечивало содержание 0,2 мг чистого элемента в 1
кг корма, то есть в пределах нормы.
В 1 кг соединения «ловит Е + Se» содержится 50000 мг витамина Е и 500 мг селена.
Согласно рекомендациям фирмы Lohmann Animal Health (Бельгия), «ловит» цыплятам
скармливали из расчета 1 мл на голову. Таким образом, суточное поступление в организм
витамина Е составляло 50 мкг и селена — 0,5 мкг на голову. Исходя из этого добавляли
препарат периодически.
Важнейшими показателями, позволяющими судить об эффективности кормления,
являются сохранность поголовья, скорость роста молодняка и эффективность использования
корма. В ходе третьего опыта самая высокая сохранность поголовья была в третьей группе,
которая благодаря добавкам бифидума-СХЖ и «ловита» превзошла контроль на 7%.
Результаты первого опыта позволили сделать вывод, что лучшее действие на прирост
живой массы бройлеров оказала совместная добавка токоферола и селенита натрия (третья
группа). Разница в 12% достоверна (Р>0,95) по сравнению с контролем.
Во втором эксперименте наиболее высокой интенсивности роста цыплят
способствовали добавки бифидумбактерина, селенита натрия и витамина Е. Эта группа
также достоверно превосходила контрольную по приросту живой массы (на 11,9%).
При проведении третьего опыта лучшим приростом живой массы отличились цыплята
третьей группы: разница с контролем в 13,3% достоверна. На наш взгляд, причиной этого
явилось лучшее усвоение токоферола и селена из комплексного соединения и более высокий
уровень депонирования их в печени.
Из показателей продуктивности, наиболее эффективно использовали корм бройлеры
третьей группы заключительного эксперимента: по сравнению с контролем на 1 кг прироста
массы тела израсходовано на 9,5% корма меньше.
Показатели перекисного окисления ли-пидов и системы антиоксидантной защиты в
крови цыплят-бройлеров приведены в таблице 2.
Препарат «ловит Е + Se» в комплексе с бифидумом-СХЖ, относительно добавок
селенита натрия и витамина Е в сочетании с пробиотиком, в большей мере ингибировал в
организме цыплят процессы свободно-радикального окисления и стимулировал
антиоксидантный механизм защиты (3-я группа). При этом концентрация конъюгированных
диен (начальных продуктов ПОЛ) у птицы этой группы была ниже на 40% (Р>0,95).
По сравнению с контролем в крови цыплят, потреблявших комплексный препарат в
сочетании с бифидумом-СХЖ, малонового диальдегида (вторичного продукта ПОЛ)
содержалось на 30% меньше (Р>0,95).
Установлено также, что добавки «лови-та» в комплексе с бифидумом-СХЖ способствовали более высокой концентрации в крови глутатионпероксидазы и глутатионредуктазы, чем селенит натрия, витамин Е и пробиотик. Это свидетельствует о том,
что комплексное соединение в наибольшей мере активизировало ферментативную систему,
которая содействовала накоплению энергии в макроэргических связях АТФ, катализируя тем
самым синтез глутамина из глутаминовой кислоты.
Более интенсивное вовлечение селена и витамина Е в механизм ингибирования
свободнорадикального окисления за счет повышения уровня депонированных
антиоксидантов в печени цыплят-бройлеров третьей группы позволило у них по сравнению с
контрольными аналогами снизить активность каталазы на 16,5%.
В целом, комплексное соединение селена и токоферола в сочетании с пробиотиком
оказывает наиболее ярко выраженное стимулирующее действие на антиоксидантную
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 32 из 134
систему организма птицы, ингибируя в нем свободнорадикальное окисление.
Лабораторное занятие №10
Тема: Кормовые антибиотики, пробиотики, подкислители и их комплексы с ферментами при
производстве яиц.
Цель: Изучить действие антибиотика флавомицина, пробиотика бацелла, подкислителя
пребио при производстве яиц.
Рекомендуемая литература:
Основная: Ветеринария, №2, 2007г., с.6, 17.
Дополнительная: 1. В.Д.Соколов Фармакология, 1997г.
2. Столяров И.Д. Иммунодиагностика и иммунокоррекция в клинической практике. Спб:
Сотис, 1999
3. В.М.Субботин «Современные лекарственные вещества в ветеринарии». 2003г.
4 Внутренние незаразные болезни сельскохозяйственных животных /Б. М. Анохин, В. М.
Данилевский, Л. Г. Замарин и др.; Под ред. В. М. Данилевского. — М.: Агропромиздат, 1991.
Контрольные вопросы:
1.Противоаллергические средства, препятствующие взаимодействию свободного гистамина
к тканевым рецепторам.
2.Иммуномодулирующие свойства эндогенного интерферона у телят.
3.Корректоры продуктивности, назовите основные группы.
Методические рекомендации:
1. Генетический потенциал современных высокопродуктивных кроссов птицы
требует постоянного совершенствования норм и рецептов кормления. При этом в последние
годы существенно расширился ассортимент биологически активных добавок (БАД),
направленных на нормализацию микрофлоры желудочно-кишечного тракта, повышение
продуктивности, сохранности птицы, эффективности использование кормов, улучшения
качества продукции и ее безопасности для людей. К их числу относятся ферментные
препараты, пробиотики и подкислители. Учитывая, что применение кормовых антибиотиков
в Европе запрещено, в задачу наших исследований входило сравнительное изучение
эффективности кормового антибиотика флавомицин, пробиотика бацелл и подкислителя
пребио в кормах для кур.
2. Материалы и методы. Исследования проводили в экспериментальном хозяйстве
ВНИТИП на курсах кросса Раидонеж.
Учитывая, что в рационы для кур опытных групп включали 30% голозерного овса,
некрахмалистые полисахариды которого являются хорошей питательной средой для
патогенной микрофлоры, в них добавляли ферментный препарат ксибетен цел.
Продуктивность кур и качество яиц изучали как при комплексном применении
фермента с флавомицином, пребио и бацеллом, так и при добавлении каждого из них
самостоятельно.
Актуальность проблемы возрастает в связи с тем, что российская кормовая база
характеризуется преобладанием сырья с высоким содержанием некрахмалистых
полисахаридов (пептозаны, бетаглюканы и др.), которые являются питательной средой для
клостридий и другой патогенной микрофлоры, отрицательно влияющей не только на
продуктивность птицы, но и на качество продукции.
В период опыта учитывали основные зоотехнические параметры и показатели,
характеризующие качество яиц.
3. Результаты исследований. Использование фермента, антибиотика, пробиотика и
подкислителя в чистом виде, а также фермента в комплексе с каждым из перечисленных
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 33 из 134
препаратов обеспечивало на фоне высокой продуктивности кур незначительное повышение
интенсивности яйценоскости (на 0,19-2,19%). При более высокой продуктивности птица
опытных групп продуцировала более крупные яйца, масса их у подопытных кур была выше
на 0,9-3,09% по сравнению с контролем. Увеличение массы яиц не сказывалась отрицательно
на качество скорлупы, показатель величины упругой деформации яиц, полученных от кур
опытных групп, снижается на 4,1-11,1%.
БАД не только положительно влияли на продуктивность птицы, но и способствовали
улучшению конверсии корма на 0,2-2,17%. По комплексу зоотехнических показателей
лучшие результаты получили при использовании флавомицина с ксибетеном цел (третья
группа) или только флавомицина (седьмая группа).
При изучении витаминного состава яиц установили, что в болыпенстве случаев
добавление в корма фермента, антибиотика, пробиотика, подкислителя и комплекса этих
добавок с ферментом положительно влияло на депонирование витаминов в яйце, особенно
витамина А. В яйце кур опытных групп его содержание было на 30,8-65,5%выше, чем в
контроле. В то же время различия по уровняю витаминов в яйце между опытными группами
были менее значительными. Так, если содержание витамина А в яйце кур пятой группы
принять за 100%, то в остальных опытных группах оно было на 10-21%ниже,то есть в
пределах ошибки метода, которая по ГОСТу составляет 15% для параллельных проб и
20%для межлабораторных расхождений при определении витамина А.
Содержание витамина Е в яйце, полученном от подопытной птицы, имело тенденцию
к увеличению по сравнению с контролем. Различия по содержанию его в яйцах кур
контрольной и Опытной групп были в пределах 2,99-24,05%.
Содержание витамина В2 в яйце птицы опытных групп было либо на уровне
контроля, либо превышало его на 3,3-12,88%в желтке и 2,2-15,89% в белке.
При одинаковом содержании каротиноидов в комбикорме и более высокой
продуктивности кур опытных групп уровень каротиноидов в яйце был более близким к
таковому в яйце кур контрольной группы либо превышал его на 35,3-47,9%.
Лучшее использование курами витаминов и пигментов из комбикорма, возможно,
связано с положительным влиянбием фермента (вторая -пятая группа) на усвоение не только
питательных, но и биологически активных веществ.
Положительное влияние пробиотика и подкислителя на депонирование витаминов и
каротиноидов в яйце можно объяснить их действие на размножение и заселение
пищеварительного тракта птицы полезной микрофлорой, которая, как известно, улучшает
показатели пищеварения и использование питательных веществ из корма.
Следует отметить, что кормовой антибиотик флавомицин не оказывал отрицательн
Необходимо ого действия на депонирование витаминов вы яйце. При этом положительное
влияние БАД на витаминный состав яиц и содержание в них каротиноидов отмечали на фоне
более высокой продуктивности подопытных кур, а следовательно, и большего выноса
витаминов и пигмента из организма.
При исследовании яиц в центральной научно-методической ветеринарной
лаборатории был получен отрицательный результат по наличию в яйце остаточных
количеств антибиотика флавомицина и сальмонелл.
4. Заключение Кормовой антибиотик флавомицин, пробиотик бацелл, подкислитель
пребио, примененные в комплексе с ферментным препаратом ксибетен цел (в комбикормах с
повышенным содержанием овса) и самостоятельно, способствуют повышению
продуктивности кур при снижении затрат кормов на продукцию. Лучшее результаты
получены при использовании флавомицина в комплексе с ферментным препаратом ксибетен
цел или самостоятельно.
Изученные БАД оказывают положительное влияние на депонирование витаминов и
каротиноидов в яйце, профилактируют сальмонеллез.
Флавомицин не накапливается в яйце даже при длительном применении как
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 34 из 134
самостоятельно, так и в комплексе с экзогенным ферментом, усиливающим процессы
расщепления и всасывания питательных и биологически активных веществ.
Лабораторное занятие №11
Тема: Эффективность кормовых добавок «Бацилл» и «Моноспорин» при выращивании
цыплят-бройлеров
Цель: Изучить воздействие «Бацилла» и «Моноспорина» на рост и развитие цыплят
бройлеров.
Рекомендуемая литература:
Основная: 1 Ветеринария № 7, 2006г. с.3.
Дополнительная: 1. В.Д.Соколов Фармакология, 1997г.
2. Столяров И.Д. Иммунодиагностика и иммунокоррекция в клинической практике. Спб:
Сотис, 1999
3. В.М.Субботин «Современные лекарственные вещества в ветеринарии». 2003г.
4. Внутренние незаразные болезни сельскохозяйственных животных /Б. М. Анохин, В. М.
Данилевский, Л. Г. Замарин и др.; Под ред. В. М. Данилевского. — М.: Агропромиздат, 1991.
Контрольные вопросы:
1.Иммуностимуляторы: синтетические препараты.
2.Бацитрацин-механизм действия назовите препараты, входящие в эту грудпу.
3.Проблемы иммунокорекции инефционных болезней.
Методические рекомендации:
1. В интенсификации производства продукции птицеводства большое значение
приобретает полноценность питания птицы, поскольку оно определяет не только
эффективность всей цепи производственных процессов, но также качество и рентабельность
конечного продукта.
Организация кормления животных должна обеспечить условия для физиологической
и морфологической адаптации пищеварительной системы к эффективному использованию
кормов и регуляции микробиологических процессов пищеварения. Биологическая роль
сбалансированным по основным компонентам рационов животных в настоящее время
дополняется функциональным значением полезной микрофлоры и восполнением её
дефицита. В качестве микробиологической добавки используют пробиотики.
Оптимальное соотношение микрофлоры пищеварительного тракта нарушается
воздействием многочисленных факторов: изменения корма, чрезмерной концентрации
поголовья на единицу площади, лечения антибиотиками и др. нарушение его ведёт к
уменьшению всасывания питательных веществ, раздражению кишечных стенок,
вызывающему усиленную перистальтику, снижения поглощения воды и переваримости
корма.
Использование пробиотиков в кормлении птицы способствует развитию полезной
микрофлоры (нормофлоры) в желудочно-кишечном тракте, которая заселяет его,
прикрепляется к эпителиальным клеткам и успешно борется с патогенными
микроорганизмами, поступающими из внешней среды. Кроме того нормофлора
обеззараживает токсины, принимает активное участие в синтезе витаминов В, С, D, Е, К,
аминокислот, вследствие чего улучшается использование кормов организмом.
Механизм действия пробиотиков основан на конкуренции за питательные вещества и
место обитания в эпителии пищеварительного тракта. Полезные бактерии конкурируют с
потенциально патогенными и препятствуют их прикреплению и заселению в
пищеварительном тракте; продукции молочной кислоты и летучих жирных кислот
обеспечивают устойчивость рН.
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 35 из 134
Применение пробиотиков - продуцентов биологически активных веществ, способных
стимулировать развитие и поддержание нормофлоры желудочно-кишечного тракта,
открывает принципиально новые пути обеспечения ими организма животных. Они созданы
на основе нормальной микрофлоры пищеварительного тракта животных и являются
экологически безвредными.
Для их получения используют молочнокислые, пропионовокислые, ацидофильные
бактерии,
бифидобактерии,
"фекальный"
стрептококк,
кишечную
палочку,
целлюлозолитические, каротинсинтезирующие бактерии, бактериофаги, простейшие,
ассоциации микроорганизмов рубца. Такое многообразие пробиотических микроорганизмов
требует тщательного подбора препаратов для достижения их максимальной эффективности в
птицеводстве.
Цель работы - оценка эффективности ферментно-пробиотического препарата бацелл
и кормовой смеси пробиотического действия моноспорин, производимых предприятиями
группы компаний «Кубань-биотехагро» при выращивании цыплят-бройлеров.
Бацелл содержит ассоциацию бактерий, выделенных из желудочно-кишечного
тракта животных: Bacillus subtilis, Ruminococcus albus и Lactobacillus acidophilus. Он обладает
выраженными пробиотическими свойствами, а также целлюлозолитической и глюканазной
активностью. Готовый препарат представляет собой сухой сыпучий порошок со слабым,
специфическим для данного продукта запахом.
Моноспорин производится промышленным способом на основе штамма
микроорганизмов Bacillus subtilis 090 в гелевой форме. Лн обладает высокими
антагоническими свойствами в отношении многих возбудителей кишечных инфекций и
используется как для профилактики дисбактериозов, так и для их лечения. Благодоря
наличию спор эффективность препарата не снижается при прохождении через желудочнокишечный тракт.
Научно-хозяйственный опыт проводили в ОАО "ППЗ Русь" г. Кореновска
Краснодарского края на цыплятах-бройлерах экспериментального кросса «СК Русь 6».
Кормление осуществляли кормосмесями, сбалансированными по основным
питательным и биологически активным веществам по нормам, рекомендуемым ВНИТИП
(2004) для цыплят-бройлеров, за исключением клетчатки.
К основному рациону цыплят первой группы в течение периода выращивания
добавляли бацелл - 0,2% от массы корма, птице второй группы в тот же срок скармливали
бацелл в той же дозе и выпаивали моноспорин - по 3 мл на 100 гол. С 3-го по 14-й и с 30-го
по 35-й день. Молодняку третьей группы в продолжение периода выращивания давали
препарат-аналог с пробиотико-ферментативной активностью - 0,1% от массы корма. В
течение опыта учитывали сохранность поголовья, определяли динамику массы тела, расход
кормов на 1 кг прироста и исследовали состав кишечной микрофлоры (молочнокислые и
целлюлозолитические бактерии, бациллы).
Установили, что совместное использование кормовых добавок бацелл и моноспорин
обеспечивало увеличение интенсивности роста птицы при низких затратах корма.
Для более детального анализа воздействия изучаемых кормовых добавок на птицу
исследовали микробный состав слепых отростков кишечника.
При анализе содержания в слепых отростках целлюлозолитических бактерий и бацилл
отмечали, что наиболее высокий титр микроорганизмов был у цыплят второй группы,
потреблявшей бацелл и моноспорин, что связано с их взаимным стимулированием, которое
обеспечивало активизацию обменных процессов и в конечном итоге влияло на
интенсивность роста птицы.
Заключение. При выращивании цыплят-бройлеров на растительных кормах
целесообразно использовать ферменто-пробиотический препарат бацелл и кормовую смесь
пробиотического действия моноспорин
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 36 из 134
Лабораторное занятие №12
Тема: Кормовые добавки
Цель: Изучить кормовые добавки форму выпуска и показания к применению.
Рекомендуемая литература:
Основная: 1. В.М.Субботин «Современные лекарственные вещества в ветеринарии». 2003г.
Дополнительная: 1. В.Д.Соколов Фармакология, 1997г.
2. Столяров И.Д. Иммунодиагностика и иммунокоррекция в клинической практике. Спб:
Сотис, 1999
3. В.М.Субботин «Современные лекарственные вещества в ветеринарии». 2003г.
4. Внутренние незаразные болезни сельскохозяйственных животных /Б. М. Анохин, В. М.
Данилевский, Л. Г. Замарин и др.; Под ред. В. М. Данилевского. — М.: Агропромиздат, 1991.
Контрольные вопросы:
1.Определение - что такое пробиотики, механизм действия пробиотиков.
2.Производные хиноксолина, назовите стабилизаторы, входящие в эту группу.
3.Иммунодефициты, ассоцированные с демодекозом у собак.
Методические рекомендации:
Премикс (от лат. Рrae — вперёд, предварительно и лат. misceo — смешиваю) технологическое понятие, означающее предварительно смешанные сухие компоненты,
дозируемые в микроколичествах. Премиксы применяются в технологических процессах, где
производится сухое смешивание компонентов для решения проблемы неравномерности
смешивания.
Области
использования премиксов
комбикормовая,
пищевая,
резинотехническая, полимерная и др. промышленность. В узком смысле Премикс —
обогатительная смесь биологически активных веществ. Применяется для повышения
питательной ценности комбикормов и улучшения их действия на организм
сельскохозяйственных животных. Различают: витаминные, минеральные, витаминнотерапевтические, витаминно-минеральные и прочие премиксы. В состав премиксов входят:
1. наполнитель (продукт, способный растворять и удерживать активные вещества) —
овсяная мука, отруби, травяная мука, жмыхи, дрожжи и др.;
2. БАВ (биологически активные вещества) — витамины, микроэлементы,
аминокислоты, химико-терапевтические препараты и др. Премиксы производятся на
специализированных заводах или на специальных линиях комбикормовых предприятий.
Вырабатываются для животных разных видов, возрастов и направлений продуктивности.
Премиксы
(минерально-витаминные
концентраты)
—
это
однородные
порошкообразные смеси биологически активных веществ с наполнителем. Механизм
действия премиксов обусловлен наличием в них витаминов (А, ДЗ, Е, К, С, группы В),
микроэлементов (железа, меди, марганца, кобальта, йода, селена), макроэлементов (магния,
серы), антиоксидантов (бутилокситолуола, сантохина), противомикробных препаратов
(кормовые антибиотики и др.) в оптимальных количествах и соотношениях.
Кормовые добавки, применяемые при недостатке в рационах животных некоторых
химических элементов. В практике кормления рационы контролируют по кальцию, фосфору,
натрию, хлору и некоторым микроэлементам. К кормовым добавкам относятся поваренная
соль, мел, ракушка, костная мука, красная глина, кормовой фосфат. Кормовые добавки
необходимы животным как источник минеральных элементов. Промышленность выпускает
специальные брикеты, состоящие в основном из поваренной соли с необходимыми
микроэлементами.
Витаминно-минеральная кормовая добавка СА-37.
Основная проблема кормления домашних и экзотических животных в городских
условиях состоит в том, что зачастую хозяева не задумываются над понятием
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 37 из 134
«сбалансированный рацион», и как следствие к животному попадают и специальные корма и
пища с кухонного стола. Такое «разнообразие» при отсутствии должного моциона, как
правило, приводит к различным патологиям, особенно у молодых, старых, беременных и
кормящих животных. Каждый день ветеринарным врачам приходится сталкиваться с такими
заболеваниями, как алопеции, дерматиты, рахит, остеомаляция, остеопороз, дисбактериоз,
заболевания сердечно-сосудистой системы, печени и почек. Обычно к врачу приводят
пациента, который нуждается в комплексном и длительном лечении с применением как
симптоматической, так и патогенетической терапии, которая включает в себя использование
витаминов, минеральных веществ, пробиотиков и т. д. Самые распространенные проблемы
при недостаточном или неправильном снабжении организма животного микроэлементами и
витаминами — это заболевания кожных покровов. Шелушение, ломкая и тусклая шерсть,
аллергические реакции — это далеко не полный перечень расстройств, проявляющихся на
фоне гипо- и гипервитаминозов. Безусловно, для устранения этих признаков требуется
хорошо сбалансированное питание, и, прежде всего по витаминам и микроэлементам.
Нарушение обмена веществ в следствие отсутствия или переизбытка макроэлементов
в организме приводит к заболеваниям опорно-двигательного аппарата. Среди них наиболее
часто встречается рахит, который характеризуется нарушением образования тканей скелета,
которые возникают из-за недостаточного количества кальция в новообразующейся костной
ткани, неправильного соотношения кальций — фосфор, или недостатка вит.О в течение
периода роста. Данное заболевание животные начинают приобретать с первых дней своей
жизни. Сначала недостаточность минералов и витаминов возникает из-за неправильного
питания кормящей матери, а затем уже и самих детенышей. Как правило, у кормящих сук
после родов развивается дисбактериоз, сопровождающийся расстройством ЖКТ. Это также
является предпосылкой к возникновению рахита у щенков. В этом случае врачу приходиться
применять одновременно соли Са и Р, масляные растворы витаминов, вяжущие средства,
пробиотики и многое другое. Если потомство оказалось многоплодным, то кормящее
животное рискует приобрести такое расстройство, как остеомаляция, причиной которого
является чрезмерное выделение минеральных веществ из костей без их достаточной
обратной суплементации. В свою очередь это расстройство провоцирует возникновение
более сложных заболеваний, таких как остеопороз и артрозы.
Те специалисты, которые следуют одной из главных заповедей врача: лучше
профилактировать болезнь, чем ее лечить, рекомендуют для своих пациентов условносбалансированные рационы, то есть применять витаминно-минеральные добавки. Тщательно
исследовав эту проблему, специалистами компании «Интервет» была разработана и
выпущена витаминно-минеральная кормовая добавка СА-37. Уникальность этого комплекса
заключается в том, что в его состав одновременно включены разные группы микро- и
макроэлементов, витаминов и пробиотики. Последние представлены бифидо- и
лактобактериями (20 млн.мкр.кл. в 1гр), которые заселяют толстый отдел кишечника, тем
самым, вытесняя патогенную микрофлору. Таким образом, происходит естественная
профилактика и устранение дисбактериозов, улучшается усвояемость корма. Наличие
пробиотиков в Са-37 является основным преимуществом перед другими кормовыми и
витаминными добавками.
Микро- и макроэлементы, необходимые для формирования опорно-двигательного
аппарата растущих животных и поддержания нормального гомеостаза у взрослых,
представлены в СА-37 следующими соединениями: гидрофосфат кальция, хлорид калия, йод,
оксид цинка, сульфат меди, сульфат магния, кобальт, соединения железа. Регулярное
потребление этих солей и элементов нормализует обмен веществ в организме. Как
упоминалось выше, в обменных процессах участвуют не только минеральные вещества, но и
витамины. Их нехватка зачастую приводит к необратимым процессам. Пользу витаминов и
их применение освещает достаточное количество источников. В кормовых добавках очень
большое значение имеет баланс витаминов, и в какой форме они представлены. В комплекс
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 38 из 134
СА-37 внедрены последние научные разработки, что позволяет не опасаться распада и
антагонизма витаминов при хранении и использовании добавки. Скорее наоборот,
соотношение витаминов по отношению друг к другу потенциирует и усиливает общее
действие. В состав СА-37 включены следующие витамины: вит. А, В1, В2, В6, В12, D3, Е,
КЗ, холин хлорид, биотин, D-кальция пантеонат, никотиновая и фолиевая к-ты. Такое
многообразие витаминов, которые регулярно поступают в организм, позволяет решить, а
зачастую и просто избежать многих проблем, связанных со здоровьем, продолжительностью
и качеством жизни мелких домашних животных.
Из химических соединений, прежде всего, хотелось бы отметить антиоксиданты,
которые представлены вит. Е и С, этоксиквином и бутилгидроокситолудином (Bht). В
последнее время антиоксидантам уделяется все большее значение не только в гуманной, но и
в ветеринарной медицине. Эти соединения не являются жизненно необходимыми, но играют
важную роль в метаболитическиих процессах, нейтрализуя перекиси и свободные радикалы.
Последние способствуют возникновению различных патологий, в том числе и трудно
поддающихся лечению — онкологических. Также специалистами компании «Интервет»
опытным путем было доказано, что антиоксиданты повышают иммунный статус. А именно,
титр антител после вакцинации был выше у тех животных, которые регулярно потребляли
СА-37.
Эта витаминно-минеральная добавка рекомендована кроликам, хищным птицам и
мелким грызунам, а так же просто незаменима при составлении рационов экзотическим
животным: черепахам, ящерицам и попугаям за счет своей многокомпонентности и
сбалансированности СА-37 можно применять при любом типе питания у кошек и собак, и
назначать как с профилактической, так и лечебной целью.
Лабораторное занятие №13
Тема: Антиоксиданты
Цель: Изучить механизм действия, защищающий мембраны клеток от вредных эффектов,
которые вызывают избыточное окисление в организме.
Рекомендуемая литература:
Основная: 1. Ветеринария, №2, 2008 с.6,7..
Дополнительная: 1. В.Д.Соколов Фармакология, 1997г.
2. Столяров И.Д. Иммунодиагностика и иммунокоррекция в клинической практике. Спб:
Сотис, 1999
3. В.М.Субботин «Современные лекарственные вещества в ветеринарии». 2003г.
4. Внутренние незаразные болезни сельскохозяйственных животных /Б. М. Анохин, В. М.
Данилевский, Л. Г. Замарин и др.; Под ред. В. М. Данилевского. — М.: Агропромиздат, 1991.
Контрольные вопросы:
1.Назовите препараты разнопланового антистрессового действия.
2.Применение лактобифадола в сочетание с лизином при откорме бройлеров.
3.Гармональное препараты , механизм действия и основные фармакодинамические эффекты.
Методические рекомендации:
Антиоксиданты - это соединения, защищающие мембраны клеток от вредных
реакций, которые могут вызвать избыточное окисление в организме.
Множество болезненных состояний (хронические заболевания, стресс, действие
радиации, процесс старения и др.) протекают в организме с образованием свободных
радикалов (продуктов неполного восстановления кислорода). Их избыток ведет к окислению
основы клеточных мембран и, в результате, к нарушению здоровья и преждевременному
старению.
Важнейшими антиоксидантами являются:
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 39 из 134
Витамины С, Е, бетакаротин, селен, биофлавоноиды (витаминоподобные вещества,
содержащиеся в кожуре растений - апельсины, лимоны, томаты и прочее). Многие
растительные экстракты, витамины, аминокислоты, минералы, микроэлементы обладают
антиоксидантными свойствами или непосредственно, или опосредованно, так как входят в
состав ферментов-антиоксидантов.
Цинк участвует в росте новых клеток, включая производство и восстановление ДНК и
РНК. Большие дозы цинка способствуют заживлению ран и стимулируют иммунную
систему. Он является крайне необходимым компонентом фермента супероксиддисмутазы
(COD). Установлено, что добавки с Zn сокращают восстановительный период на 40%.
Выздоровление пациентов с язвой желудка, принимавших Zn gluconat, заняло одну треть
времени в сравнении с теми, кто не получал цинк.
Глутатион является аминокислотой, обладающей мощным детоксикационным
действием. Университет Джорджии (США) считает, что "глутатион функционирует, как
сточная труба для реактивных свободных радикалов. Заманивая в ловушку эти опасные
молекулы, глутатион препятствует разрушению этими ренегатами клеток".
Глутатион также синергически действует с витамином F и селеном.
Кофермент Q10 играет ключевую роль в генерации клеточной энергии, является
важным иммунологическим стимулятором, усиливающим циркуляцию, противодействует
старению, полезен для поддержания нормального состояния сердечно-сосудистой системы.
Одним из самых мощных антиоксидантов является экстракт ОРС (Pycnogenol),
применялся при различных патологических состояниях сердечно-сосудистой системы
(очищает сосуды, выводит холестерин из организма), при заболеваниях желудочнокишечного тракта (язвенная болезнь, гепатиты), центральной нервной системы и системных
заболеваниях.
Применяется по схеме:
10 дней по 1 капсуле 2 раза в день, затем по одной капсуле 1 раз до окончания
упаковки, 3-4 раза в году.
Антиоксиданты забирают избыток энергии, тормозят развитие цепной реакции
образования новых радикалов.
Самые популярные антиоксиданты это: витамин Е, витамин С, пикногенол, экстрак
виноградных косточек, селен, цинк, Гинко Билоба и другие...
Общие сведения:
Антиоксиданты - это соединения, защищающие клетки (а точнее мембраны клеток) от
потенциально вредных эффектов или реакций, которые могут вызвать избыточное окисление
в организме.
На нашей планете практически всегда процессы разрушения идут с участием
кислорода путем окисления. Ржавеет железо - это окисление. В лесу гниют опавшие листья это окисление. Мы болеем, постепенно стареем и это, очень приблизительно конечно, можно
назвать процессом окисления. Мы окисляемся?!
Множество болезненных состояний (хронические заболевания, стресс, действие
радиации, процесс старения и др.) протекают в организме с образованием свободных
радикалов (продуктов неполного восстановления кислорода). Их избыток ведет к
перекисному окислению липидов - основы клеточных мембран - и, в результате, к
нарушению функций мембран клеток нашего организма, к нарушению здоровья и
преждевременному старению.
В организме существует система антиоксидантной защиты, которая делится на
первичную (антиоксиданты-ферменты) и вторичную (антиоксиданты-витамины). Эта
система работает у нас с рождения, всю нашу жизнь, слабея постепенно с годами. Поэтому
возникает необходимость ее подпитки и поддержки.
Как работают антиоксиданты?
Ферменты (первичная антиоксидантная защита) занимаются "уборкой" активных
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 40 из 134
форм кислорода. Они превращают активные формы кислорода в
перекись водорода и в менее агрессивные радикалы, а затем уже их превращают в
воду и обычный, полезный кислород.
Антиоксиданты-витамины
(вторичная
антиоксидантная
защита)
называют
"тушителями". Они "тушат" агрессивные радикалы, забирают избыток энергии, тормозят
развитие цепной реакции образования новых радикалов. К ним относятся:
- водорастворимые витамины - витамин С, Р (биофлавоноиды - рутин, кверцетин,
цитрин, гесперидин, аскорутин);
- жирорастворимые витамины - витамин А, бета-каротин, Е, К;
- другие соединения -серосодержащие аминокислоты (глютатион, цистеин,
метионин), цитохром С, хелаты, спирт в микродозах, микроэлементы - селен, цинк.
Определенное значение имеют медь, марганец и железо.
Очень важно помнить, что антиоксиданты работают хорошо только тогда, когда они
работают в группе, поддерживая друг друга.
Например: Витамин Е- главный прерыватель реакций окисления липидов,
расходуется и видоизменяется в этих реакциях. Если рядом с ним находится витамин С, то
он его восстанавливает и вводит в строй. Витамин С оберегает также селен от окисления.
Глютатион переводит продукты перекисного окисления липидов в менее вредные и
оберегает витамин Е.
Существуют лекарственные травы, обладающие антиоксидантной активностью:
- Гинкго билоба (растение, "продлевающее жизнь", "улучшающее познавательные
способности"); это единственное растение, которое выжило после Хиросимы и не
изменилось со времен Ледникового периода благодаря своей устойчивости к загрязнению
окружающей среды, насекомым и болезням; антиоксидантный эффект проявляется в защите
клеток головного мозга и тканей сердца на уровне мелких сосудов, что помогает
предупредить развитие различных заболеваний;
- Золотой корень;
- Имбирь лекарственный (корень);
- Чертополох молочный.
Чтобы нейтрализовать процессы окисления, замедлить старение организма полезно
принимать витаминно-минеральные комплексы, обладающие мощной сбалансированной
антиоксидантной защитой: Мульти Вита и Мульти Минерал.
Антиоксиданты
Антиоксиданты (антиокислители) — ингибиторы окисления, природные или
синтетические
вещества,
способные
тормозить
окисление
(рассматриваются
преимущественно в контексте окисления органических соединений).
Механизмы действия
Окисление углеводородов, спиртов, кислот, жиров и др. кислородом воздуха
представляет собой цепной процесс. Цепные реакции превращений осуществляются с
участием активных свободных радикалов — перекисных (RO2*), алкоксильных (RO*),
алкильных (R*). Для цепных разветвленных реакций окисления характерно увеличение
скорости в ходе превращения (автокатализ). Это связано с образованием свободных
радикалов при распаде промежуточных продуктов — гидроперекисей и др.
Механизм действия наиболее распространённых антиоксидантов (ароматические
амины, фенолы, нафтолы и др.) состоит в обрыве реакционных цепей: молекулы А.
взаимодействуют с активными радикалами с образованием малоактивных радикалов.
Окисление замедляется также в присутствии веществ, разрушающих гидроперекиси
(диалкилсульфиды и др.). В этом случае падает скорость образования свободных радикалов.
Даже в небольшом количестве (0,01—0,001 %) антиоксиданты уменьшают скорость
окисления, поэтому в течение некоторого периода времени (период торможения, индукции)
продукты окисления не обнаруживаются. В практике торможения окислительных процессов
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 41 из 134
большое значение имеет явление синергизма — взаимного усиления эффективности
антиоксидантов в смеси, либо в присутствии других веществ.
Применение. Антиоксиданты широко применяют на практике. Окислительные
процессы приводят к порче ценных пищевых продуктов (прогорканию жиров, разрушению
витаминов), потере механической прочности и изменению цвета полимеров (каучук,
пластмассы, волокно), осмолению топлива, образованию кислот и шлама в турбинных и
трансформаторных маслах и др. Для увеличения стойкости пищевых продуктов, содержащих
жиры и витамины, используют природные антиоксиданты — токоферолы (витамины Е),
нордигидрогваяретовую кислоту и др. — и синтетические антиоксиданты -пропиловый и
додециловый эфиры галловой кислоты, бутилокситолуол (ионол) и др.
Антиоксиданты, используемые как пищевые добавки:
* Пектин
* Аскорбиновая кислота (витамин С)
* Лимонная кислота
* Бутилгидроксианизол ВНА, бутилгидрокситолуол ВНТ
* Антоцианины
* ДигидрокверцетинДополнительные компоненты для связывания ионов переходных
металлов:
* Трилон Б (ЭДТА)
Лабораторное занятие №14
Тема: Лечение собак с применением антистрессовых препаратов.
Цель: Изучить механизм снятия стресс-реакции при исследовании адаптогенных и
антистрессовых свойств препаратов.
Рекомендуемая литература:
Основная: 1. Ветеринария, №4, 2007 с.6,7.
Дополнительная: 1. В.Д.Соколов Фармакология, 1997г.
2. Столяров И.Д. Иммунодиагностика и иммунокоррекция в клинической практике. Спб:
Сотис, 1999
3. В.М.Субботин «Современные лекарственные вещества в ветеринарии». 2003г.
4. Внутренние незаразные болезни сельскохозяйственных животных /Б. М. Анохин, В. М.
Данилевский, Л. Г. Замарин и др.; Под ред. В. М. Данилевского. — М.: Агропромиздат, 1991.
Контрольные вопросы:
1.Иммуностимуляторы: препараты бактериальной природы.
2.Премиксы-механизм действия.
3.Эффективность апрамицина при пневмониях.
Методические рекомендации:
Загрязнение окружающей среды, повышение уровня социальных взаимоотношений
при большом скоплении животных изменяют функциональное состояние жизненно важных
систем организма, приводят к развитию чрезмерного стресса и, как следствие, к
возникновению различных функциональных нарушений. Наиболее точное и полное
определение понятия "стресс" дано Ф.И. Фурдуем и соавторами (1992), которое заключается
в том, что стресс - это совокупность общих, неспецифических структурных, биохимических,
физиологических и психологических реакций организма на действие чрезвычайных
раздражителей различной природы и характера. В число стрессовых факторов могут быть
включены избыток или недостаток стимулов окружающей среды, изменение взаимодействия
между организмом и его окружением и другие факторы, вызванные перенапряжением
функций органов, входящих в функциональные системы и обеспечивающих мобилизацию
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 42 из 134
организма в целях поддержания его гомеостаза или адаптации.
Динамическое проявление стресса во времени было названо Г. Селье
"генерализованным адаптационным синдромом" (ГАС), который характеризуется
увеличением и гиперактивностью коры надпочечников, язвами желудочно-кишечного
тракта, инволюцией вилочковой железы и лимфатической системы, расстройствами
энзимозависимого метаболизма углеводов, липидов, и, наконец, изменениями
резистентности организма.
На основании клинических и научно-исследовательских наблюдений Рекевегом была
разработана система "большой защиты", которая состоит из пяти взаимосвязанных
подсистем и имеет одно направление воздействия, в частности - обезвреживание
гомотоксинов, ядов, вызывающих болезнь. Действие на организм различных факторов
окружающей среды и развитие в нем адаптивных реакций происходит по общему механизму
через гипоталамо-гипофизар-но-адреналовую и гипаталамо-симпато-адреналовую системы с
участием катехоламинов. Таким образом, гормоны и медиаторы симпато-адреналовой
системы, к которым относятся адреналин, норадреналин и дофамин, являются важнейшими
регуляторами приспособительных реакций организма.
В своей практике мы постоянно сталкиваемся со стрессами у рабочих служебных
собак, поэтому проблема снятия стресс-реакции очень актуальна для нашей работы.
Проведено исследование адаптогенных и антистрессовых свойств препаратов
Биостим-К и Лигастим, разработанных НПФ "Биофид".
Наставление по применению Биостима-К в ветеринарии утверждено Департаментом
ветеринарии МСХ РФ.
Препарат Биостим-К является продуктом взаимодействия торфа с водными
растворами гидроксида и карбоната натрия, содержит комплекс БАВ, в том числе натриевые
и калиевые соли гуминовых кислот. Применяется перорально. Ранее было установлено
(Бояринцев Л.Е., 2001), что механизм стимулирующего действия препарата опосредуется
изменением активности ферментов аденилатциклазной системы, что приводит к увеличению
внутриклеточной концентрации цАМФ. Повышение уровня цАМФ может усиливать
биологические эффекты в зависимости от типа клетки и ее функционального состояния.
Последующие исследования показали, что в биохимических реакциях перекисного
окисления липидов (ПОЛ) и процессах антиоксидантной защиты (АОЗ) участвуют
гуминовые кислоты, входящих в состав препарата.
Лигастим - комплексный препарат, в состав которого входят гуминовые кислоты,
полученные при гидролизе природного (древесного) лигнина. Препарат представляет собой
стерильную прозрачную жидкость от коричневого до темно-коричневого цвета. Применяется
для парентерального (внутримышечного) введения. Как было установлено, в основе
валеопозитивных эффектов лигастима лежат иммуноантиоксидантные механизмы,
включающие антирадикальную активность, мобилизацию фагоцитов, активизацию
антиоксидантной защиты и иммунокомпетентных органов. Лигастим повышает
резистентность организма к неблагоприятным воздействиям.
Проведено клиническое наблюдение 15 собак разных пород в возрасте от 3-х до 7-и
лет. Все животные в первый день наблюдения находились в состоянии глубокого стресса в
результате воздействия сильных раздражителей экзогенного характера. Следует отметить,
что все травмы, полученные животными, не представляли непосредственной угрозы для
жизни. Причины возникновения стресса: отравления, дорожно-транспортные происшествия,
социально-эмоциональный стресс. При дорожно-транспортных происшествиях в анамнезе
отмечены гематомы, ушибы и ссадины. В число факторов, вызывающих социальноэмоциональный стресс, входили: формирование новых групп, смена обслуживающего
персонала, неправильные приемы дрессировки и т. д.
В период клинического наблюдения применяли схему лечения послестрес-совых
осложнений, состоящую из трех периодов. Для первого периода характерно сильное
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 43 из 134
возбуждение, агрессия, тревога, снижение тонуса мышц, температуры тела, кровяного
давления, расширения зрачков, учащение сердцебиения. Продолжительность этого периода
от 6 до 28 ч. В этот период применяли:
Лигастим в дозе 0,1 мл/кг массы тела внутримышечно при обращении; Лигастим - 0,1
мл/кг массы тела внутримышечно при возобновлении симптомов и Биостим-К - 0,4 мл на кг
массы тела перорально 1 раз в день.
Во втором периоде отмечали снижение возбуждения, нормализацию температуры
тела и кровяного давления, появления аппетита. Продолжительность второго периода
составляла от одних суток до нескольких недель. В этот период назначали Биостим-К в дозе
0,4 мл на кг массы тела перорально 1 раз в день.
Для третьего периода характерно появление и обострение нарушений.
Продолжительность периода составила от двух недель до двух месяцев. При таком
состоянии назначали Биостим-К в дозе 0,4 мл на кг массы тела перорально, ежедневно и
Лигастим в дозе 0,1 мл/кг массы тела внутримышечно 1 -2 раза в неделю в зависимости от
тяжести нарушений.
Следует отметить, что трудности в определении количественных критериев
выздоровления собак с нарушением состояния нервной системы, вынуждают результаты
лечения оценивать по данным клинического осмотра, визуального наблюдения,
направленного осмотра кинологов.
По срокам выздоровления все животные распределились на три группы. Для
животных первой группы было характерно быстрое и устойчивое выздоровление в течение
7-10 дней. Как правило, это молодые собаки со стресс-устойчивой нервной системой.
Большинство животных вошло во вторую группу с периодом выздоровления около 2-3
недель. Остальные животные требовали продолжительного лечения до 35 суток.
У всех собак, проходивших курс лечения биологическими препаратами, полностью
восстановлено равновесие нервной системы. После наблюдения стойкого улучшения на
третьей ступени лечения начинали использовать животных в караульной службе в обычном
режиме.
Из предыдущего опыта известно, что применение традиционного аллопатического
лечения (гидазепам, мепробомат, бромистый калий, аминазин, феназепам, корвалол и т. д.)
часто не приносило желаемого улучшения, и животных приходилось выбраковывать из-за
невозможности восстановить рабочие качества. Кроме того, указанные аллопатические
препараты имеют ряд побочных эффектов и противопоказаний.
Предложенная схема лечения не имеет противопоказаний и побочного действия.
Данная биотерапия является примером экологически безопасного, эффективного и
доступного способа лечения многих заболеваний, связанных с нарушением деятельности
нервной системы в результате испытанного стресса.
Лабораторное занятие №15
Тема: Тканевые препараты
Цель: Изучить механизм действия тканевых препаратов при хроническом течении болезни,
биологические свойства и порядок применения препарата.
Рекомендуемая литература:
Основная: В.Д.Соколов Фармакология, 1997г..
Дополнительная: 1. В.Д.Соколов Фармакология, 1997г.
2. Столяров И.Д. Иммунодиагностика и иммунокоррекция в клинической практике. Спб:
Сотис, 1999
3. В.М.Субботин «Современные лекарственные вещества в ветеринарии». 2003г.
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 44 из 134
4. Внутренние незаразные болезни сельскохозяйственных животных /Б. М. Анохин, В. М.
Данилевский, Л. Г. Замарин и др.; Под ред. В. М. Данилевского. — М.: Агропромиздат, 1991.
Контрольные вопросы:
1.Иммуностимуляторы: средства из органов и тканей животных.
2.Селен- цеолитовые препараты при диарее телят.
3.Стресс- протекторы , что входить в эту группу, механизм действия.
Методические рекомендации:
Тканевые препараты. Тканевая терапия - наиболее распространенный в ветеринарии
метод неспецифической стимулирующей терапии. Метод основан на введении в организм с
лечебной и профилактической целью препаратов, специально приготовляемых путем
консервирования животных или растительных тканей.
Тканевые препараты получают путем консервирования холодным путем (При
температуре 2-4°С) кусочков свежевзятых органов и тканей в асептических условиях.
Выдерживают их в холодильнике в течение 5-7 дней. Эмульсии или суспензии,
приготовленных из этих органов, затем кипятят или автоклавируют. Тканевые препараты
готовят из растительного сырья (алоэ), печени, кожи, селезенки, тканево-агарового
субстрата, мышц, надпочечников и др.
Механизм действия на организм тканевых препаратов, согласно учению В. П.
Филатова, заключаются в том, что в отделенных от организма тканях при нахождении их в
неблагоприятных условиях (но не убивающих ткани) происходят сложные биохимические
процессы. При переживании тканей образуются защитные вещества, получившие название
«биогенные стимуляторы». В химическом отношении они представляют сложный комплекс
органических веществ небелковой и белковой природы. Биогенный стимуляторы, а также
высокомолекулярные компоненты в составе тканевых препаратов активизируют обмен
веществ, синтез животного белка, повышают содержание белкового азота и нуклеиновых
кислот в крови и органах, усиливают иммунобиологическую реактивность организма,
повышает тонус центральной вегетативной нервной системы.
Тканевые препараты используют для стимуляции защитных сил организма при
хроническом течении болезни, вяло протекающих патологических процессах. В отдельных
случаях тканевые препараты используют для повышения мясной продуктивности, главным
образом, птиц и свиней. Вводят их подкожно и внутримышечно, реже - внутрь. В хирургии
препараты применяют подсадки или методом непосредственного наложения на раны или
язвы.
Дозы тканевых препаратов указаны на этикетках и применяют с учетом состояния
организма,типа высшей нервной деятельности.
НАСТАВЛЕНИЕ по применению препарата АСД-2Ф в ветеринарии
Препарат АСД- 2Ф является продуктом сухой перегонки сырья животного
происхождения; содержит в своем составе соединения с активной сульфгидрильной группой,
производные алифатических аминов, карбоновые кислоты, алифатические и циклические
углеводороды, производные амидов и воду.
По внешнему виду представляет собой жидкость от желтого до темно-красного цвета
со специфическим запахом, хорошо смешивающуюся с водой
БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА
Препарат АСД- 2Ф при пероральном применении оказывает активизирующее
действие на ЦНС и вегетативную нервную систему, стимулирует моторную деятельность
желудочно-кишечного тракта, секрецию пищеварительных желез, повышает активность
пищеварительных и тканевых ферментов, улучшает проникновение ионов Na+ и К+ через
клеточные мембраны, способствует нормализации процессов пищеварения, усвоения
питательных веществ и повышению естественной резистентности организма.
При
наружном
применении
препарат
стимулирует
активность
ретикулоэндотелиальной системы, нормализует трофику и ускоряет регенерацию
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 45 из 134
поврежденных тканей, обладает выраженным антисептическим и противовоспалительным
действием
ПОРЯДОК ПРИМЕНЕНИЯ ПРЕПАРАТА.
Препарат АСД-2Ф назначают сельскохозяйственным животным (в том числе птице) и
собакам, с лечебной и профилактической целью при болезнях желудочно-кишечного тракта,
органов дыхания, мочеполовой системы, поражениях кожных покровов, нарушениях обмена
веществ, для стимуляции деятельности центральной и вегетативной нервной системы,
повышения естественной резистентности у ослабленных и переболевших инфекционными и
инвазионными болезнями животных, а также для стимуляции роста и развития поросят,
цыплят и повышения яйценоскости кур.
Внутрь препарат АСД-2Ф назначают животным с питьевой водой перед кормлением
или смеси с комбикормом в утреннее кормление. Наружно АСД-2Ф применяют в виде 2-20%
растворов, приготовленных на стерильном физиологическом растворе или кипяченой воде.
При приготовлении лечебного раствора требуемой концентрации, исходный стерильный
раствор АСД-2Ф принимают за 100%. Лечебный раствор готовят в асептических условиях.
При диспепсии, гастроэнтероколитах, гастроэнтеритах, а также дистрофических
состояниях, вызванных расстройствами пищеварения и нарушениями обмена веществ,
препарат назначают внутрь один раз в сутки, в разовых дозах, указанных в таблице. Лечение
проводят курсами по 5 дней с интервалом 2-3 дня до выздоровления животного.
При тимпании крупного рогатого скота препарат выпаивают животному или вводят в
рубец через желудочный зонд одни-два раза в сутки в разовой дозе, указанной в таблице. В
процессе лечения назначают теплые клизмы, массаж рубца и другие процедуры,
предусмотренные при указанной патологии. При метеоризме кишечника у лошадей препарат
выпаивают животным или вводят через желудочный зонд однократно в дозах указанных в
таблице. В процессе лечения назначают теплые клизмы, массаж живота и другие процедуры,
предусмотренные при указанной патологии. При необходимости лечение повторяют. При
катаральной пневмонии поросят наряду с этиотропным лечением препарат назначают один
раз в день с питьевой водой за 30-40 минут до кормления или в утреннее кормление с
комбикормом в дозах, указанных в таблице. Лечение проводят курсами по 5 дней с
интервалом 2-3 дня до выздоровления. При вагинитах и задержки последа у коров (после его
удаления) применяют 3-5% раствор
препарата, подогретый до 40°С, которым промывают влагалище один раз в сутки в
течение 4-5 дней, расходуя по 1,5-2 л раствора на каждую обработку. Если шейка матки
открыта, то 200-300 мл раствора вводят в матку. При острых и хронических эндометритах,
миометрите и пиометре у коров, если шейка матки открыта, в полость матки вводят 15%
раствор препарата, подогретый до 40°С в количестве 200-300 мл и сразу же его удаляют. Для
этих целей используют катетер с обратным током жидкости. Обработку проводят один раз в
сутки до выздоровления. Наряду с этиотропным лечением при трихомонозе коровам вводят
во влагалище 20% раствор препарата при помощи шприца Жанэ с резиновой трубкой и
специального катетера, имеющего на конечной части большое количество отверстий.
Лечение проводят один раз в сутки в течение 5-7 дней, расходуя по 200-300 мл раствора на
каждую процедуру. При лечении быков, больных острой формой трихомоноза, наряду с
этиотропным лечением препуциальный мешок промывают 2-3% раствором препарата,
который вводят с помощью катетера, соединенного резиновой трубкой с кружкой Эсмарха в
количестве 0,5-1,0 л. После этого наружное отверстие препуциального мешка зажимают на
3-5 мин рукой и производят легкий массаж. Лечение проводят один раз в сутки в течение 5-7
дней.
В целях стимуляции центральной и вегетативной нервной системы, повышения
резистентности у переболевших инфекционными и инвазионными болезнями животных,
ускорения процессов заживления кожных покровов, при некробактериозе, экземах,
дерматитах, трофических язвах препарат применяют с питьевой водой или в смеси с кормом
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 46 из 134
один раз в сутки в дозах, указанных в таблице. Лечение проводят курсами по 5 дней с
интервалом 3 дня до выздоровления.
В целях стимуляции роста и развития телят, поросят и цыплят, препарат применяют
способом группового скармливания из расчета 0,1мл АСД-2Ф на 1 кг массы тела через день
в течение 1-2 месяцев.
Инфицированные вялозаживающие раны промывают 15-20% раствором препарата и
после этого накладывают смоченную этим раствором повязку. Лечение проводят один раз в
сутки до очищения раны от гноя. При наличии свищей, вскрытых полостей абсцессов,
флегмон, в их полость вводят марлевый дренаж, смоченный раствором препарата и сверху
накладывают стерильную повязку. Дренаж меняют ежедневно до образования
грануляционного вала.
При мыте лошадей и наличии абсцессов в подчелюстном пространстве и на других
частях тела после предварительного туалета, полости абсцессов промывают 15-20%
раствором препарата или вводят в них пропитанные раствором тампоны, один раз в день до
очищения раны от гноя и появления грануляции.
Молоко дойных животных и яйцо птицы после применения препарата используется
без ограничений. В случае вынужденного убоя животных мясо используется без
ограничений.
При применении препарата АСД-2Ф в соответствии с наставлением побочных
явлений и осложнений не наблюдается, противопоказаний не установлено.
УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ
Хранят АСД- 2Ф в упаковке предприятия изготовителя в защищенном от света месте,
при температуре от 4 до 35°С.
Срок годности препарата при соблюдении указанных условий хранения - 2 года со
дня изготовления.
УПАКОВКА.
Выпускают препарат в форме стерильного раствора, расфасованного по 20, 100 и 200
мл в стеклянные флаконы, закрытые резиновыми пробками и обкатанные алюминиевыми
колпачками.
Лабораторное занятие №16
Тема: Иммуномодуляторы
Цель: Изучить механизм действия опиоидных пептидов, интерферона и интерлейкина
левамизола, изопринозина.
Рекомендуемая литература:
Основная: 1. В.Д.Соколов Фармакология, 1997г..
Дополнительная: 1. В.Д.Соколов Фармакология, 1997г.
2. Столяров И.Д. Иммунодиагностика и иммунокоррекция в клинической практике. Спб:
Сотис, 1999
3. В.М.Субботин «Современные лекарственные вещества в ветеринарии». 2003г.
4. Внутренние незаразные болезни сельскохозяйственных животных /Б. М. Анохин, В. М.
Данилевский, Л. Г. Замарин и др.; Под ред. В. М. Данилевского. — М.: Агропромиздат, 1991.
Контрольные вопросы:
1.Коррекция иммуного статуса у высокопродуктивных коров.
2.Применение аминотона при откорме цыплят-бройлеров.
3.Эффективность применения премикса и вакцин против респираторных болезней свиней.
Методические рекомендации:
ГОРМОНЫ ТИМУСА. В настоящее время описана биологическая активность
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 47 из 134
основных гормонов тимуса (ГТ), которые стимулируют Т-кл сточную активность за счет
увеличения цГМФ. Лечебный эффект препаратов ГТ и их фрагментов при ряде
иммунодефицитных состояний не вызывает сомнений. Предполагается, что роль ГТ в
развитии Т-лимфоцитов состоит в подготовке претимоцитов к миграции в тимус, а с другой
стороны в "дозревании" Т-клеток, мигрирующих из тимуса в периферические органы
иммунной системы. К этой группе препаратов относятся тимозин V, альфа1 -тимозин,
тимопоэтин и сывороточный тимический фактор (тимулин). Один гормон (гуморальный
тимический фактор) увеличивает уровень цАМФ в лимфоцитах и таким образом может
оказывать иммуносупрессивное действие.
С терапевтической целью ГТ вводят для стабилизации нормального уровня Т-клеток
пациентам с дефицитом зрелых Т-лимфоцитов. При этом, ГТ не оказывают влияния на
количество и функциональную активность Т-клеток у здоровых животных. Использование
ГТ для лечения людей с некоторыми иммунодефицитами (например, гипоплазия тимуса)
оказалось успешным. В ветеринарии был также установлен эффект от применения ГТ для
коррекции Т-клеточных дефицитов у собак. Способы получения и физико-химические
характеристики всех основных тимусных факторов (особенно Т-активина), методы
иммунологического тестирования их активности и результаты клинического применения
изложены в работах В.Я.Ариона с соавторами (1981, 1983, 1989) и других исследователей.
ОПИОИДНЫЕ ПЕПТИДЫ. Опиоидные пептиды, синтезируемые гипофизом
(эндорфины) и надпочечниками (энкефалины), также оказывают стимулирующее действие
на функции лимфоцитов. Взаимодействие поверхностных рецепторов лимфоцитов с этими
пептидами приводит к модулированию внутриклеточного уровня циклических нуклеотидов
и таким образом увеличивает пролиферацию Т- и В-клеток. Кроме того, они могут
поддерживать уровень иммунного ответа, способствуя Т- и В-клеточной кооперации.
Имеются данные о том, что эндорфины и энкефалины совместно с адренокорти-котропными
гормонами облегчают стрессовую реакцию организма.
Тимусные
факторы
и
опиоидные
пептиды
являются
истинными
иммуностимулирующим и гормонами, поскольку они образуются в одном месте и влияют на
активность клеток периферических лимфоидных органов. В дополнение к этим системным
гормонам, иммунокомпетентными клетками синтезируются локальные медиаторы иммунной
реактивности (цитокины). Лимфокины и монокины, секретируемые стимулированными
лимфоцитами и макрофагами, оказывают сильное влияние на активность других клеток в
том же местном окружении. Кроме того, локально секретируемые простагландины, обладают
потенциальной способностью изменять иммунный ответ. Образование и секреция этих
медиаторов находится под контролем таких гормонов, как тимозин и эндорфины. Эти же
гормоны контролируют межклеточную кооперацию и антигенную стимуляцию.
ИНТЕРФЕРОН И ИНТЕРЛЕЙКИНЫ
Действие интерферона далеко не исчерпывается его противовирусной активностью и
антибластомным эффектом. Хорошо известно его иммуномодулирующее действие.
Интерферон модулирует активность клеток иммунной системы путем активации
макрофагов, стимуляции В-клеток и повышения защитных свойств естественных киллерных
и цитотоксических Т-клеток. In vitro, а при определенных условиях и in vivo, интерферон
ингибирует бластогенез лимфоцитов и может вызывать иммуносупрессивный эффект.
Проявление того или иного иммуностимулирующего эффекта в существенной мере зависит
от дозовых и временных параметров применения препарата, вида антигена и некоторых
характеристик самого интерферона. 1РКальфа - активирует NK- и В-клетки, обладает
антивирусной активностью; IFN6eTa- активирует NK-клетки и также обладает антивирусной
активностью; 1Р№амма - активирует моноциты, макрофаги, фибробласты, Т-супрессоры, Вклетки, экспрессию молекул МНС класса II, ингибирует общий рост клеток и слабо
ингибирует вирусную репликацию.
Интерлейкины являются неспецифическими препаратами и имеют по сравнению с
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 48 из 134
интерфероном большие потенциальные возможности использования в качестве
терапевтических препаратов для коррекции Т-клеточных дефицитов. Они являются
медиаторами иммунного ответа и необходимы для дифференцировки, активации и
регуляции активности Т-, В-лимфоцитов и других клеток иммунной системы. Компоненты
системы IL координирование вовлечены в регуляцию иммунного ответа и интегрированы в
цито-кинную сеть. Существует тесная функциональная взаимосвязь системы IL с нервной и
эндокринной системами. IL-1-активирует Т-, В-, NK-клетки, полиморфонуклеары, клетки
эндотелия, хондроциты, остеокласты, фибробласты, тиреоциты, Р-клетки, гепатоциты; IL-2усиливает рост Т-, В-, NK-клеток; IL-3-активирует гемопоэтические, тучные клетки,
полипоэтин; IL-4- усиливает рост Т- и В-клеток, связан с IgE-ответом; IL-5- усиливает
дифференцировку эозинофилов и В-клеток; IL-6- усиливает конечную дифференцировку Вклеток; IL-7 - активирует дифференциацию стволовых лим-фоидных клеток костного мозга,
Т-, В-клетки и тромбоциты; IL-8- хемоаттрактант для нейтрофилов, Т-лимфоцитов и
моноцитов;! 1—10-активирует Т-киллеры и тимоциты, ингибирует Т-хелперы типа 1.
ЛЕВАМИЗОЛ И ИЗОПРИНОЗИН
Левамизол является производным имидазола и принадлежит к группе
фенилмидотиазолов. Его иммуномодулирующие свойства связаны с изменениями
пролиферации, миграции и секреторной функции лимфоцитов, макрофагов и нейтрофилов.
Левамизол стимулирует процесс созревания предшественников Т-лимфоцитов в зрелые Тлимфоциты, увеличивает продукцию цитокинов и повышает количество Т-хелперов
относительно Т-супрессоров. Он не оказывает прямого влияния на образование антител, но
усиливает клеточный иммунный ответ у пациентов с иммуносупрессией. Подобно ГТ,
левамизол не оказывает воздействия на здоровых животных. Изопринозин (метизопринол)
является антивирусным препаратом, обладающим иммуномодулирующими свойствами. Он
увеличивает цГМФ в лимфоцитах и макрофагах, и результатом его воздействия является
изменение пролиферации лимфоцитов, усиление активности естественных киллеров,
супрессорных и цитотоксических Т-клеток. Кроме того, изопринозин увеличивает
продукцию цитокинов и вызывает изменения в разнообразии функций макрофагов.
Отмечено также прямое действие изопринозина на продукцию интерлейкина-2. Препарат
успешно применяется в медицине; в ветеринарии работы с ним пока не проводятся.
БАКТЕРИАЛЬНЫЕ ЭНДОТОКСИНЫ И ВАКЦИНА БЦЖ
Бактериальные липополисахариды (ЛПС) содержатся в оболочке грамнегативных
бактерий и обладают иммуномо-дулирующими свойствами, влияющими на повышение или
снижение иммунного ответа. ЛПС воздействуют на клеточные мембраны лимфоцитов и
макрофагов, что приводит к изменениям в балансе цитоплазматических нуклеотидов.
Действие ЛПС in vitro зависит от присутствия моноцитов, что свидетельствует о
необходимости интерлейкина-1 в клеточном ответе на ЛПС. Мурамилдипептид (МДП)
является другим продуктом клеточной оболочки бактерий и как ЛПС может быть
стимулятором или депрессантом иммунного ответа.
Вакцина БЦЖ готовится из живого, аттенуированного штамма Mycobacterium bovis и
является неспецифическим иммуностимулятором моноцитарно-фагоцитарной системы за
счет активации Т-клеток, естественных киллеров и синтеза лимфокинов. Препарат
используется для лечения людей, страдающих новообразованиями, например, меланомой.
ПРЕПАРАТЫ
НУКЛЕИНОВЫХ
КИСЛОТ
И
СИНТЕТИЧЕСКИЕ
ПОЛИНУКЛЕОТИДЫ
Гетерологичная РНК и Na-PHK повышают антиинфекционную резистентность
животных за счет повышения фагоцитарной активности и изменения свойств лимфоцитов.
Препарат Na-PHK обладает интерферогенной активностью, стимулирует образование
антител при совместном введении с антигеном, увеличивает превентивную активность
сыворотки и иммунологическую эффективность вакцин.
Неспецифическими стимуляторами иммунной системы организма являются
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 49 из 134
синтетические двухцепочечные полинуклеотиды - полиИЦ, полиГЦ, полиАУ.
Иммуномодулирующие свойства полиИЦ связаны с повышением синтеза интерферона
лимфоцитами, увеличением активности Т-хелперов и изменением антительной активности.
Кроме того, полинуклеотиды стимулируют макрофаги, ингибируют рост опухолей и
усиливают различные проявления клеточного иммунитета (бласттрансформацию на антиген
in vitro, кожные реакции ГЧЗТ и др.) у животных и человека.
Кроме описанных выше препаратов, обладающих иммуностимулирующими
свойствами, в настоящее время в медицине используются иммуностимуляторы, полученные
из костного мозга (миелопид), синтетические (ликопид или ГМДП- усовершенствованный
аналог МДП) и другие. В ветеринарной практике рядом фирм выпускаются коммерческие
Иммуномодулирующие препараты типа иммунофан, "Риботан" и др., применять которые
необходимо согласно прилагаемых инструкций. При этом, необходимо иметь в виду
характеристики используемого препарата, источник получения и методы контроля.
Лабораторное занятие №17
Тема: Иммунный статус и инфекционные болезни новорожденных и поросят
Цель: Изучить механизм действия пассивного иммунитета.
Рекомендуемая литература:
Основная: 1. В.Д.Соколов Фармакология, 1997г..
Дополнительная: 1. В.Д.Соколов Фармакология, 1997г.
2. Столяров И.Д. Иммунодиагностика и иммунокоррекция в клинической практике. Спб:
Сотис, 1999
3. В.М.Субботин «Современные лекарственные вещества в ветеринарии». 2003г.
4. Внутренние незаразные болезни сельскохозяйственных животных /Б. М. Анохин, В. М.
Данилевский, Л. Г. Замарин и др.; Под ред. В. М. Данилевского. — М.: Агропромиздат, 1991.
Контрольные вопросы:
1..Антистрессовые средства ( что происходит в организме при стрессе).
2.Коррекция иммунитета при ассоциативной инвазии лошадей.
3.Иммуносупрессия, вызываемая бактериями.
Методические рекомендации:
ИММУННЫЙ СТАТУС И ИНФЕКЦИОННЫЕ БОЛЕЗНИ НОВОРОЖДЕННЫХ
ТЕЛЯТ И ПОРОСЯТ
Многим хозяйствам большой ущерб наносят инфекционные болезни молодняка
первых месяцев жизни. Этот возраст можно подразделить на 2 периода: новорожденности
(питание материнским молозивом до 6 - 8 сут) и молочный (питание молоком до отъема от
матки - до 2-месячного возраста). Каждый из них характеризуется своеобразными
физиологическими особенностями и присущими им инфекционными болезнями
бактериальной и вирусной природы. В период новорожденности проявляются в основном
желудочно - кишечные болезни , а в молочный респираторные. Такая последовательность
возникла на фоне своеобразного иммунного статуса молодого организма, формирование
которого зависит от особенностей внутриутробного развития телят и поросят, а также
биологических свойств возбудителей, являющихся пусковым механизмом эпизоотических
процессов каждого из заболеваний. Известно, что становление нового организма начинается
с момента слияния мужской и женской половых клеток, а преобразование (трансформация)
оплодотворенной яйцеклетки происходит по стадиям: зигота превращается в бластомер.
бластомер - в зародыш, а зародыш - в плод. В первое время зародыш питается собственными
запасами яйцеклетки и специфическим секретом желез стенки матки. Поверхностный слой
клеток зародыша, обеспечивающий процесс питания, называют трофобластом. Из него в
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 50 из 134
дальнейшем формируется наружный слой сосудистой оболочки плода (хориона) с
многочисленными ворсинками, которые внедряются и врастают в эндометрий матки, происходит имплантация зародыша. После имплантации у зародыша образуются три
околоплодные оболочки: хорион, амнион и аллантоис. Хорион обволакивает зародыш,
фиксирует его в матке, и через его капилляры осуществляется питание Амнион бессосудистая околоплодная оболочка, окружающая плод и образующая амниотическую
полость с жидкостью, выполняющей в отношении плода роль внешней среды. Аллантоис
формирует мочевую полость путем выпячивания стенки мочевого пузыря через пупочное
отверстие. Околоплодные оболочки с их структурными элементами и полости заполненные
соответствующими жидкостями, представляют плодную часть плаценты. В матке образуется
материнская часть плаценты, включающая углубления в стенке (крипты). Клеточные слои
плодной и материнской частей плаценты принято называть плацентарным барьером,
играющим ведущую роль в проницаемости ее для белков крови матери в кровь плода. Чем
больше клеточных слоев в плацентарном барьере, тем меньше его проницаемость для
крупномолекулярных
соединений,
в
частности
белков
и
гамма-глобулинов
(иммуноглобулинов) из крови матери в самостоятельное кровообращение плода. После
формирования плаценты между организмом матери и плодом устанавливается плацентарное
кровообращение, при котором кровь плода и матери не смешиваются, а питательные
вещества проникают через клеточные слои плацентарного барьера избирательно.
В процессе эволюции у разных видов животных образовались плаценты разных
типов, морфологическая структура которых оказывает решающее влияние на
иммунологический и физиологический статус плодов и новорожденных. В основу их
классификации положены структура клеточных слоев сосудистой оболочки (хориона) плода
и количество слоев клеток в криптах матки, а также характер расположения (дислокация)
ворсинок на хорионе (В.И.Канторова, 1957; Ю. Н. Федоров. 1970; Ю.Т.Техвер, 1973).
В соответствии с принятой классификацией (Ю.Т.Техвер, 1973) различают
гемохориальную,
эндотелиохориальную,
десмохориальную
(смешанную),
эпителиохориальпую и ахориальную плаценты (у кенгуру, китообразных).
У гемохориальной плаценты, которую имеют человек, обезьяны, кролики, морские
свинки и некоторые грызуны, ворсинки хориона плода, пронизанные многочисленными
капиллярами, размещаются в своеобразных криптах матки, представляющих собой
сосудистые полости (лакуны), заполненные материнской кровью. Ворсинки "плавают" в
лакунах, постоянно омываясь кровью. Вследствие такого строения крипт кровеносная
система плода отделена от таковой материнского организма только эпителием ворсинок и
пронизывающих их эндотелием капилляров.
У эндотелиохориальной плаценты (собаки, кошки, мыши, крысы) ворсинки
выстланных эпителием и эндотелием капилляров. Благодаря такому строению этих 2 типов
плацент в период беременности из крови матери в кровь плода свободно проникают
материнские белки ( в неизмененном виде) и иммуноглооулины (гамма-глобулины). Поэтому
новорожденные этих видов животных имеют в крови материнские иммуноглобулины и
антитела, образовавшиеся у матери в процессе жизни.
Жвачные животные (коровы, овцы, козы), а также однокопытные, свиноматки и
некоторые другие имеют соответственно десмохориальную (синдесмохориальную или
смешанную) и эпителиохориальную плаценты, в материнской и плодной частях которых
насчитывается по 3 клеточных слоя. Кровь плода у этих видов животных отделяется от
таковой матери 3 клеточными слоями хориона и 3 слоями крипт стенки матки. При таком
строении в период беременности через плаценту этих видов животных в кровь плода не
проходят материнские белки, в том числе ииммуноглобулины (и антитела). Поэтому в крови
родившихся телят, ягнят, козлят, жеребят, поросят нет иммуноглобулинов -состояние
агаммаглобулинемии, что характерно для абсолютного иммунодефицита, и это
физиологическое состояние новорожденных нельзя расценивать как патологию. В их крови
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 51 из 134
понижено также содержание общего белка (гипопротеинемия), некоторых витаминов,
минеральных и других веществ.
У таких новорожденных образующиеся Т- и В-лимфоциты не имеют на поверхности
белковых структур, позволяющих распознавать и отличать свое от чужого. Эпителий
тонкого отдела кишечника к моменту рождения не завершил цикла созревания, и через него
из просвета кишечника в лимфу, а затем в кровь легко проникают без изменения химической
конфигурации любые чужеродные белки, в том числе крови матери, молозива, а также
бактериальные клетки, токсины и другие соединения. Слизистые оболочки открытых
полостей организма (желудочно-кишечного, респираторного и мочеполового трактов) не
содержат микроорганизмов и в новых условиях они быстро заселяются той микрофлорой,
которая находится во внешней среде. Поэтому новорожденные должны получить как можно
раньше после рождения иммуноглобулины и клеточные элементы иммунной системы в
качестве средства экстренной защиты гомеостаза и фактора, обеспечивающего своеобразный
запуск механизмов распознавания чужого и синтеза собственных иммуноглобулинов. Без
этого они под влиянием заселяющей кишечник патогенной и условно-патогенной
микрофлоры обречены на гибель. Следовательно, поступление иммуноглобулинов должно
опережать заглатывание новорожденным микрофлоры внешней среды (Ю.П.Федоров, 1970;
М.А.Сидоров. 2004; В.В.Субботин, М.А.Сидоров. 2004).
Единственным источником гамма-глобулинов (иммуноглобулинов) как гуморального
фактора экстренной защиты организма от вредного действия попавшей в кишечник
микрофлоры, а также как стимулятора и корректора иммунной системы для новорожденных
является материнское молозиво.
Молозиво - специфический секрет, образующийся в молочной железе за несколько
дней до и 6-7 дней после родов. В молозиве содержится большое количество клеточных
элементов, главным образом фагоцитов, Т - и В-лимфоцитов с многочисленными белковыми
структурами на поверхности, до 20 % белков и 15% иммуноглобулинов, витаминов всех
групп, минеральных солей и микроэлементов. В молозиве коров уровень иммуноглобулинов
классов С. А и М достигает 60 мг%, а в молозиве свиноматок - 70 - 75 мг%. Для обеспечения
жизнедеятельности и защиты от патогенной, условно-патогенной микрофлоры ("хлевной")
новорожденным очень важно как можно раньше (но не позднее 2 ч после рождения)
скормить материнское молозиво. Первые 8 - 12 ч после родов оно содержит максимальное
количество всех перечисленных жизненно важных компонентов (для телят это молозиво 2-3
первых удоев, выдоенное с интервалом 3 - 5 ч, для поросят -первых 12 ч после опороса ),
поэтому его обязательно нужно скормить новорожденному. Молозиво более поздних сроков
по своему белковому составу приближается к молоку и утрачивает способность устранять
физиологический (врожденный) иммунодефицит (агаммаглобулинемию).
В связи с тем что эпителий кишечника новорожденных не завершил цикла полного
созревания, то его стенка свободно пропускает в кровь все молозивные белки,
иммуноглобулины и иммунокомпетентные клетки, обеспечивая при поступлении молозива
устранение иммунодефицита. Такая проницаемость стенки кишечника сохраняется у разных
видов животных от нескольких часов до нескольких дней ( у телят 6 -24 ч при максимуме 48
ч, у поросят - до 2 сут, у некоторых грызунов - до 16-20 дней), и время ее сохранения строго
индивидуально для каждого новорожденного и зависит оно от длительности плодоношения.
Например, у коров продолжительность стельности (плодоношения) 270 -300 дней, у
свиноматок - 110 - 118 дней. Если роды произошли в срок ближе к минимальному, то
следует ожидать более длительный период пропускающей способности кишечника у
новорожденных, необходимый для "дозревания" эпителия в новых условиях.
Иммуноглобулины молозива, проникая через кишечную стенку в кровь, выполняют
функцию нормальных или специфических антител, что зависит от иммунного статуса
матери. После контакта с молозивом недозревший эпителий кишечника быстро заменяется
полноценным и стенка его становится непроницаемой для белков. Иммуноглобулины -
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 52 из 134
антитела, в молозиво поступают из крови и частично образуются в молочной железе матери.
Они формируются в организме матери на все антигены, с которыми в процессе жизни
контактировала ее иммунная система. С молозивом новорожденный получает своеобразный
"иммунологический опыт" в виде иммуноглобулинов и клеток иммунной системы,
позволяющих противостоять многочисленным видам микроорганизмов окружающей среды,
обеспечивая подобно гипериммунным сывороткам экстренную защиту. Молозивные
иммуноглобулины. адсорбируясь на поверхности эпителиальных клеток кишечника,
блокируют адгезивные свойства микробов и вирусов, ингибируют их развитие или
действуют губительно и совместно с молозивными фагоцитами. Т- и В- лимфоцитами
обеспечивают созревание иммунной системы новорожденного.
Наши исследования показали, что после скармливания достаточного количества
материнского молозива в крови новорожденных телят и поросят концентрация гаммаглобулинов к суточному возрасту достигает 40 - 50 % от общего количества белка сыворотки
крови.
Для достижения подобного эффекта необходимо, чтобы новорожденный теленок в
первые сутки жизни получил не менее 6 - 8 л материнского молозива (по 2 л 4 раза в день), а
поросенок - до 300 мл. Так как за каждый цикл кормления поросенок высасывает 15-25 мл
молозива, его нужно подпускать к матери каждые 1 -2 ч. а к маломолочным -каждые 30 - 40
мин. Только при таком режиме кормления новорожденных телят и поросят можно ожидать
формирование у них высокой резистентности к микрофлоре, заселяющей желудочнокишечный тракт в течение первой недели жизни.
Молозивные иммуноглобулины, выполнив функцию экстренной защиты в первые дни
жизни, уже с 6 - 8-го дня постепенно разрушаются и выводятся из организма созревающей и
начинающей функционировать собственной иммунной системой новорожденных. Взамен
отторгнутых как чужеродных молозивных иммуноглобулинов в организме постепенно
увеличивается синтез собственных неспецифических иммуноглобулинов, этот процесс
завершается к 25 - 35-му дню. В этот период в организме телят и поросят возникает второй
пик иммунодефицита (материнские защитные белки выведены из организма, а синтез
собственных не обеспечивает физиологическую норму), являющийся благоприятным фоном
для микроорганизмов, вызывающих патологию респираторных органов. При нарушении
санитарных правил проведения родов, приема, размещения новорожденных и особенно
скармливания материнского молозива в животноводческих хозяйствах регистрируют
желудочно-кишечные болезни новорожденных первых дней жизни и респираторные - в 35 60-дневном возрасте. В некоторых хозяйствах телятам, родившимся ночью, материнское
молозиво выпаивают только утром (спустя 8 - 12 ч после рождения), а затем 2 раза в сутки. В
течение ночи такие телята, облизав окружающие предметы с попавшей "хлевной".
условнопатоге иной и патогенной микрофлорой ( преобладают эшерихии. в том числе и
энтерогоксигенные. которые имеют фимбрии и спустя 2 - 3 ч начинают беспрепятственно
размножаться в желудочно-кишечном тракте), к утру становятся клинически больными.
Пассируясь через организм безмолозивных животных, патогенные разновидности эшерихии
усиливают вирулентность и приобретаю']' способность вызывать заболевание и у тех телят,
которые получили своевременно материнское молозиво. Вот так запускается эпизоотический
процесс колибактериоза (эшерихиоза) и других инфекционных болезней, вызываемых
бактериями и вирусами, обитающими в кишечнике взрослых животных.
В данных хозяйствах постоянно регистрируют колибактериоз, анаэробную
энтеротоксемию (возбудитель Clostridium perfringens типов С и А часто заносится с
мясокостной мукой, а также с концентрированными кормами), ротавирусную и
коронавирусную инфекции. В дальнейшем на втором пике иммунодефицита в этих
хозяйствах отмечают сальмонеллез. хламидийную и микоплазменную пневмонии,
стрептококкоз, гемофильные инфекции, актинобациллезную плевропневмонию, пастереллез.
вызванный разными капсульными серотипами Pasteurella multocida. и другие респираторные
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 53 из 134
болезни.
Против желудочно-кишечных и некоторых респираторных болезней разработаны
вакцины из штаммов с фенотипом факторов вирулентности. Этими биопрепаратами
вакцинируют стельных коров или супоросных свиноматок за несколько дней до ожидаемых
родов. В организме беременных животных вырабатываю гея специфические антитела,
которые с молозивом (и только с молозивом) получает родившийся молодняк. Если
новорожденные своевременно и в достаточном количестве не получат материнское
молозиво, они становятся жертвой губительного действия различной патогенной, условнопатогенной микрофлоры и энтеровирусов, носителями которых являются их матери.
Иммунодефицитные новорожденные телята и поросята заболевают, становятся источником
возбудителя повышенной вирулентности (вследствие пассирования патогенов через
организм иммунодефицитных особей), сами погибают, заражая здоровых животных, а
вакцинация как основное средство профилактики инфекционных болезней раннего
постнатального периода становится скомпрометированной и главное - бесполезной.
Заключение.
Первый
пик
физиологического
иммунодефицита
является
благоприятным фоном для возникновения желудочно-кишечных, а второй - респираторных
болезней молодняка.
В животноводческих хозяйствах, в которых нарушаются правила приема родов и
скармливания материнского молозива, вакцинация маток в период беременности для
профилактики желудочно-кишечных и некоторых респираторных болезней неэффективна
потому, что новорожденные не получают специфических антител с молозивом и. находясь в
состоянии иммунодефицита, остаются чувствительными к патогенному действию
возбудителей.
Лабораторное занятие №18
Тема: Лечение и профилактика селенодефицитных состояний животных
Цель: Изучить эффективность препарата при профилактике акушерской патологии.
Рекомендуемая литература:
Основная: 1.В.Д.Соколов Фармакология, 1997г.
2.Ветеринария №2, 2008, с.12.
Дополнительная: 1. В.Д.Соколов Фармакология, 1997г.
2. Столяров И.Д. Иммунодиагностика и иммунокоррекция в клинической практике. Спб:
Сотис, 1999
3. В.М.Субботин «Современные лекарственные вещества в ветеринарии». 2003г.
4. Внутренние незаразные болезни сельскохозяйственных животных /Б. М. Анохин, В. М.
Данилевский, Л. Г. Замарин и др.; Под ред. В. М. Данилевского. — М.: Агропромиздат, 1991.
Контрольные вопросы:
1.Ферменты - необходимость применения их при кормлении животных.
2.Действие лигфола на естественную резистентность организма овец.
3.Пробиотики вместо антибиотиков- это реально.
Методические рекомендации:
Проблема повышения производства животноводческой и птицеводческой продукции
в сельскохозяйственных предприятиях страны и высокой рентабельности отрасли
животноводства может быть решена только при максимальном использовании потенциала
животных и птицы.
Разработка и внедрение эффективных мер борьбы при алиментарных и эндокринных
болезнях - условие повышения прибыльности животноводства и птицеводства, улучшения
биологической полноценности молока, мяса, яиц и другой продукции, снижения бесплодия
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 54 из 134
маточного поголовья.
Болезни, связанные с дефицитом или избытком питательных и биологически активных веществ в рационах животных и возникающие в результате нарушения функций желез
внутренней секреции, имеют тесную этиопато-генетическую связь и протекают с выраженным нарушением обмена веществ. Они распространены довольно широко и наносят значительный экономический ущерб хозяйствам страны. Это напрямую связано с применяемым
типом кормления и условиями содержания: уменьшением в структуре потребляемых кормов
сена, увеличением концентратов, силосованных кислых кормов, недостатком инсоляции и
аэрации,гипокинезией.
В условиях интенсивного животноводства,и птицеводства _болезни протекают в
субклинической форме с охватом больших групп животных. Нередко одна болезнь
осложняется другой, при этом поражаются различные органы и системы, патологический
процесс усложняется, а признаки, характерные для основного заболевания, стипаютгя шения
эффективности борьбы с ними необходимо особенно тщательно проводить диагностику,
изучать причины их развития.
Цель исследований - изучение эффективности витаминно-минерального препарата Еселен, разработанного в ЗАО "Нита-Фарм" в качестве средства терапии и профилактики
гиповитаминозов, отечной болезни поросят, акушерской патологии у коров, а также беломышечной болезни у цыплят.
Материалы и методы. Эффективность препарата при профилактике акушерской
патологии оценивали в опыте, проведенном на 30 глубокостельных коровах в возрасте 3-5
лет в осенне-зимний период. Животные содержались привязно, с предоставлением моциона
на выгульной площадке. Рацион состоял из бобового сена, сенажа, кукурузного силоса и
концентратов. Для его балансирования по витаминам, макро- и микроэлементам применяли
премикс. Коровам первой группы (п=8) препарат вводили внутримышечно в дозе 1 мл на 50
кг массы тела на 246 - 256-й день стельности, второй группы (п=14) - на 260 - 265-й день
стельности. Коровам третьей группы (п=8) Е-селен не применяли (контроль).
В 1 мл водорастворимого комплекса Е-селен содержится 50 мг витамина Е и 0,5 мг
селена в форме селенита натрия. Его можно применять в виде инъекций и раствора для
выпаивания.
Являясь синергистами, витамин Е и селен усиливают свое антиоксидантное действие.
Кроме того, они способствуют лучшему усвоению друг друга организмом, что важно в отношении селена. Препарат безопасен и его можно назначать высокопродуктивным животным в
рекомендуемых дозах без ограничений.
Терапевтическую и профилактическую эффективность Е-селена определяли в условиях хозяйств Саратовской, Волгоградской, Пензенской областей и Ставропольского края
при различных нарушениях обмена веществ у свиней, отечной болезни поросят, задержке
роста и развития молодняка, нарушении репродуктивной функции, отравлении нитратами и
поваренной солью. Кроме того, после обработки препаратом супоросных свиноматок (за 2 4 нед до опороса) определяли жизнеспособность получаемого от них приплода. В опытах
было 1664 голов различных половозрастных групп (поросята в возрасте 0-4 мес, супоросные
свиноматки 2-4 лет).
Диагноз на заболевания ставили комплексно: на основании клинических признаков и
данных лабораторных исследований. При оценке терапевтической эффективности Е-селена
учитывали сроки исчезновения клиничеческих симптомов болезни, отставания животных в
росте и развитии, увеличение прироста массы тела и лабораторные данные. Профилактическую эффективность препарата оценивали по количеству больных и здоровых животных, которым назначали Е-селен.
Препарат применяли в соответствии с наставлением, особое внимание обращали на
клиническое состояние животных и его переносимость ими.
При оценке эффективности Е-селена при беломышечной болезни цыплят в хозяйствах
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 55 из 134
Саратовской области и Ставропольского края использовали 5488 цыплят с первых дней
жизни до 4 мес.
Результаты исследований. При использовании препарата с целью профилактики
акушерской патологии у крупного рогатого скота стельность у всех подопытных животных
завершилась спонтанными родами и был получен жизнеспособный приплод. У коров второй
и третьей групп задержание последа диагностировали соответственно в 14,29 и 25 % случаев,
послеродовой эндометрит - в 21,43 и 37,5 %. У коров первой группы задержание последа не
наблюдали, заболеваемость послеродовым эндометритом составила 12,5 %. Таким образом,
применение коровам Е-селена способствовало профилактике задержания последа и
снижению заболеваемости послеродовым эндометритом в 1,7 - 3 раза.
Для профилактики акушерской патологии коровам на 246 - 256-й день стельности
рекомендуем вводить внутримышечно Е-селен в дозе 1 мл на 50 кг массы тела.
Установили, что после 2 - 3-кратного введения препарата (с интервалом 7-10 сут) у
поросят исчезали клинические признаки авитаминоза, они быстрее набирали массу тела и
догоняли своих сверстников в росте и развитии (см. таблицу).
Комплексное лечение поросят при отечной болезни препаратом Е-селен (1-2
введения) вместе с сывороткой против эшерихиозов и другими средствами приводило к
выздоровлению 81-89 % животных, а однократное его применение за 1 - 1,5 нед до отъема
позволяло сократить частоту возникновения отечной болезни на 85-93%.
Использование Е-селена при отравлениях свиней сокращало сроки их выздоровления
в среднем на 2 - 2,3 дня.
При однократном введении препарата супоросным свиноматкам за 2 - 3 нед до опороса получали более жизнеспособный молодняк. Смертность среди новорожденных сокращалась в 2,5 - 3 раза по сравнению с необработанными животными. Кроме того, у подопытных поросят средняя масса тела при рождении была больше на 100 - 120 г, чем в контроле.
При внутримышечном введении Е-селена 989 поросятам в 3 - 5-дневном возрасте и
затем 1 раз в 2 - 3 мес ни у одного животного в течение срока наблюдения (6 мес) признаков
авитаминозов не проявлялось.
Одновременное применение препарата при обработках (вакцинации, дегельминтизации и др.) профилактировало возникновение стресса у поросят, повышало иммунный статус
организма.
После 2 - 3-кратного выпаивания Е-селена в течение 2-3 нед с питьевой водой 1089
цыплятам в возрасте 30 - 45 сут выздоровело 80,7 - 85,4 %.
Выращивание цыплят (начиная с суточного возраега} с применением 2 - 3-кратного (с
интервалом 2-3 нед) вольного выпаивания Е-селена в дозе 1 - 2 мл на 10 гол. (в разведении
1:100) падеж уменьшался на 75 - 85 % по сравнению с контролем (без витаминизации). При
этом резко сокращалось возникновение бело-мышечной болезни, цыплята интенсивнее росли
и быстрее достигали кондиционной массы.
Заключение. Е-селен обладает высокими антистрессовыми свойствами, усиливает
адаптационные возможности, способствует нормализации уровня селена в организме
животных и птицы. Препарат эффективен при профилактике беломышечной, отечной
болезни и лечении животных. При его использовании повышаются сохранность молодняка,
продуктивность птицы и, как следствие, рентабельность животноводства.
Лабораторное занятие №19
Тема: Действие лигофола на естественную резистентность организма овец
Цель: Изучить механизм действия коррекора лигофола для повышения резистентности
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 56 из 134
организма у овец в период ягнения.
Рекомендуемая литература: 1. В.Д.Соколов Фармакология, 1997г.
Основная: .
Дополнительная:.
Контрольные вопросы: 1.Эрготропики - кормовые антибиотики, механизм действия.
2.Назовите основные причины вторичных иммунодефицитов у животных.
3.Применеие иммуномодуляторов при вакцинации животных против сальмонеллеза .
Методические рекомендации:
В России изучение применения гуминовых препаратов в качестве кормовой добавки
для сельскохозяйственных животных начато в 60-х годах XX в. и продолжается до
настоящего времени. Большой экспериментальный материал подтверждает, что гуминовые
вещества обладают широким спектром биологической активности, оказывая воздействие на
обменные процессы в организме животных и человека. Они поставляют микроэлементы,
обогащая иммунную систему, что даёт возможность эффективно противостоять болезням.
Гуминовые препараты применяют в качестве биологических стимуляторов при выращивании
сельскохозяйственных животных. Они активизируют рост и развитие, повышают
продуктивность, снижают заболеваемость и отход молодняка.
Установлено, что гуминовые вещества влияют на регуляторные системы клетки.
Механизм их фармакологического действия связан с интенсификацией синтеза белка и
иммунореактивных факторов клетками организма животных и птиц.
Гуминовые,
фульвокислоты,
пиримидины,
аминокислоты
влияют
на
аденилатциклазную систему клетки и систему ферментов, ответственных за синтез
олигоаденилата - медиатора действия интерферона. В частности, их действие опосредеется
одновременной
активацией
АЦ
(аденилакциклазы)
и
нгибированием
ФДЭ
(фосфодиэстеразы), что приводит к усилению синтеза цАМФ (аденозинмонофосфатазы).
Повышение внутриклеточной концентрации цАМФ может приводить к биологияеским
эффектам в зависимости от типа клетки и её состояния в данный момент. Происходит
регуляция ферментов углеводного и жирового обмена, иммунных реакций, факторов
естественной резистентности организма.
Перед нами была поставлена задача - оценить возможность использования адаптогена
стресс - корректора лигфол для повышения естественной резистентности организма овец в
период ягнения, профилактики патологий родов и послеродовых осложнений, а также для
улучшения продуктивности качества ягнят.
Лигфол представляет собой композиционное средство, в состав которого входят
гуминовые вещества, полученные при гидролизе природного (древесного) лигнина, а также
натрия гидрохлорида и натрия пирофосфата десятиводного. Это стерильный препарат в
форме инъекционного раствора для парентерального применения.
В овцеводческом сельскохозяйственном предприятии проведены испытания
препарата на овцах ставропольской породы в возрасте 1,5 года.
В опытной группе препарат вводили суягным животным двукратно, за 10 и 5 дней до
ягнения в дозе 1,0 мл/гол., в контрольной делали инъекции физраствора. Проводили общее
клиническое и акушерско-гинекологическое обследование животных, определяли
температуру, пульс, дыхание. Исследовали дыхательную, сердечно - сосудистую,
пищеварительную, нервную систему. У овцематок обеих групп перед родами (через 5 дней
после первой инъекции) и через 7 и 14 дней после родов определяли содержание
эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобина, общего белка, АлАТ, АсАТ, глюкозы, резервной
щелочности, железа, бактерицидную, лизоцимную, активность сыворотки крови,
фагоцитарную функцию. Изучали неспецифические факторы местной защиты фагоцитарный индекс и фагоцитоз (%) в мазках маточной слизи.
В эксперименте учитывали количество случаев патологических родов, послеродовых
осложнений, мертворождённых ягнят. Через 14 дней после ягнения определяли процент
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 57 из 134
заболеваемости ягнят, полученных от овцематок опытной и контрольной групп. Через 14
мес. После ягнения овец (отбивка ягнят) оценивали качество потомства, полученного от овец
обеих групп. Определяли сохранность поголовья, проводили диспансеризацию молодняка,
зоотехнические исследования.
Анализ результатов проведённых исследований показал, что двукратное введение
лигфола в дозе 1 мл на овцематку не оказывает отрицательного влияния на животных до
после родов. Все показатели крови овец в процессе эксперимента находились в пределах
физиологических норм. Введение лигфола не провоцировало изменений морфологических и
биохимических показателей крови овец, характерных для токсических или воспалительных
процессов. Через 14 дней после родов количество эритроцитов в среднем составило 11,0±0,2
г/л в опытной и 8,2±0,3 г/л в контрольной группах лейкоцитов -13,4±0,3 тыс/мкл и 13,2±0,25
тыс/мкл; гемоглобин - 86,8±1,2 г/л и 70,0±2,4 г/л; общий белок 68,2±1,4 г/л; глюкоза 46,3±0,2
мг/л и 45,02±0,5 мг/л; резервная щелочность 53,06±0,2 об % железо 22,3±1,0 мкмоль/л. При
изучении показателей естественной резистентности организма животных отмечено
повышение в опытной группе всех показателей: лизоцимной, бактерицидной активности
сыворотки крови, фагоцитарной функции в динамике проведения исследований.
В опытной группе по сравнению с контрольной бактерицидная активность
повысилась в9,4 раза, лизоцимная активность увеличилась в 2,3 раза, также достоверно
возросла фагоцитарная активность крови овец.
В результате исследования маточной слизи животных установлено повышение
факторов местной защиты организма овцематок после применения лигфола. Важность этих
тестов обусловлена тем, что мукополисахариду слизистых оболочек гениталиев играют
важную местную защитно-барьерную функцию. С одной стороны, они абсорбируют
микробы, клеточные элементы, продукты распада белков и микробов и этим механически
очищают половые органы овец. С другой стороны, препятствуют проникновению вирусов в
эпителиальные клетки, подавляют рост и развитие грибов.разрушение мукополисахаридов
слизистых оболочек гениталий и соответственно маточной слизи способствует развитию
воспалительных процессов в матке. У животных опытной группы в результате применения
препарата регистрировали разрушение мукополисахаридов маточной слизи в 3 раза реже,
чем у животных контрольной группы.
Уровень фагоцитоза нейтрофилов маточной слизи у овец опытной группы после
ягнения был выше в 1,4 раза, чем у контрольных.
По сравнению с животными, которым инъецировали физиологический раствор, у
подопытных овец после родов - фагоцитарный индекс повысился в 1,5 раза.
Таким образом, применение овцематкам перед родами адаптогена стресс-корректора
лигфол увеличивает общую резистентность организма беременных животных, повышает
неспецифические иммунные факторы местной защиты. Это облегчает ягнение,
профилактирует патологии родов и послеродового периода, способствует рождению
здорового жизнеспособного потомства.
В процессе эксперимента у овец опытной группы отсутствовали случаи заболевания.
У всех животных благополучно прошли роды, не было зарегистрировано субинволюции
матки, задержания последа, послеродовых эндометритов. Родились полноценные здоровые
ягнята. Достоверно увеличилась живая масса баранчиков при рождении, полученных от
овцематок опытной группы, по сравнению с живой массой контрольных ягнят. При отбивке
молодняка живая масса баранчиков, полученных от овец, которым инъецировали лигфол,
была в среднем достоверно на 1,4 кг больше, чем у контрольных. Отмечено также
увеличение у них основных промеров телосложения (высоты в холке, косой длины
туловища, глубины, ширины и обхвата груди), что свидетельствует о более интенсивном
уровне их развития. Сохранность молодняка соответственно составила 100% в опытной и
93,3% в контрольной группах.
При исследовании функций дыхательной, сердечно-сосудистой, пищеварительной,
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 58 из 134
нервной систем не наблюдали отличий у животных контрольной и опытной групп.
Лабораторное занятие №20
Тема: Коррекция иммунитета при ассоциативной инвазии лошадей
Цель: Изучить возможность коррекции иммунного статуса лошадей при разных методах
лечения.
Рекомендуемая литература:
Основная: 1. В.Д. Соколов, Фармакология 1977..
Дополнительная: 1. В.Д.Соколов Фармакология, 1997г.
2. Столяров И.Д. Иммунодиагностика и иммунокоррекция в клинической практике. Спб:
Сотис, 1999
3. В.М.Субботин «Современные лекарственные вещества в ветеринарии». 2003г.
4. Внутренние незаразные болезни сельскохозяйственных животных /Б. М. Анохин, В. М.
Данилевский, Л. Г. Замарин и др.; Под ред. В. М. Данилевского. — М.: Агропромиздат, 1991.
Контрольные вопросы:
1.Анитоксиданты, вещества входящие в эту группу, механизм действия,
2.Методы клинико-иммунологической диагностики.
3.Тканевые препараты, назовите препараты, входящие в эту группу.
Методические рекомендации:
Значительный урон коневодству наносят болезни инвазионной этиологии. Среди них
особое место занимают гельминтозы желудочно-кишечного тракта, зараженность которыми
достигает у лошадей 80- 100%.
В литературе в основном встречаются работы, посвященные эпизоотологии
гельминтов, разработке мер профилактики и лечения животных, изучению эффективности
антгельминтиков [1 - 3, 5]. Однако слабоизученными остаются вопросы влияния
гельминтозов (а они протекают более чем в 75 - 80 % случаях ассоциативно) на состояние
иммунитета [4].
Цель нашей работы - изучить возможности коррекции иммунного статуса лошадей
при ассоциативной стронгилоидозно-оксиурозно-параскариозной инвазии с помощью
разных методов лечения.
Исследования проводили на животных пяти групп: первая - здоровые, оставляли без
лечения, со второй по пятую - больные стронгилоидозно-оксиурозно-пара-скариозным
заболеванием. Лошадей третьей - пятой групп дегельминтизиро-вали дектомаксом в дозе 0,2
мг/кг из расчета 1 мл 1%-ного раствора на 50 кг массы тела однократно, подкожно.
Дополнительно животным четвертой группы вводили в рацион препарат микровитам
(аминокислотно-витаминно-минеральный комплекс) в дозе 0,3 мл на 10 кг массы тела
внутримышечно, 1 раз в день в течение 1 месяца; пятой - микровитам + бактонеотим
(иммуностимуля-тор), последний за 30 - 40 мин до кормления из расчета 10 таблеток на
голову 1 раз в день в течение 7 дней. Курс лечения повторяли 2 раза с интервалом 7 дней.
Материалы для иммуноморфологических исследований лимфоидных органов отбирали во
время сдачи лошадей на мясокомбинат: до начала опытов 3/ол. здоро-вых и 3 гол. больных, а
затем на 60-й день по 3 гол. из каждой группы.
Фракции лимфоцитов выделяли центрифугированием периферической крови в
градиенте плотности - фиколл-верографин. Популяции Т- и В-лимфоцитов определяли
методом спонтанного розеткообра-зования, субпопуляции Т-лимфоцитов - в реакции
розеткообразования с теофилли-ном; пунктаты костного мозга, лимфатических узлов и
селезенки в мазках, окрашенных по Паппенгейму, - по методу, описанному Г.А. Симоняном
и Ф.Ф. Хисамутдино-вым (Ветеринарная гематология, 1995).
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 59 из 134
Полученные цифровые данные обрабатывали статистически с использованием
программ Statistica v.5.5 для Windows 98 по Стьюденту (Г. Ф. Лакин, 1980).
Уровень Т-Е-РОК-лимфоцитов в брыжеечном лимфатическом узле больных животных к началу опытов снизился на 16,5 % и 42,2 млн. Подобная тенденция прогрессировала, и
к концу исследований (60 дней) данный показатель в лимфоузле лошадей, не подвергнутых
лечению, был ниже такового в контроле на 24,3 % и 56,0 млн и по
сравнению с первоначальным значением на 8,9 % и 21,0 млн. Содержание Т-Е-РОКлимфоцитов в лимфатическом узле лошадей третьей, четвертой и пятой групп по ходу опыта
повышалось неодинаково. Максимальное их увеличение регистрировали в пятой группе. Так,
к 60-му дню уровень Т-Е-РОК-лимфоцитов у животных данной группы был выше, чем
таковой во второй, в третьей и четвертой группах, соответственно на 23,2 % и 53,2 млн; на
8,7 % и 23,4 млн и на 3,4 % и 16,1 млн.
К началу опытов реакция Т-хелперов в лимфатическом узле лошадей второй группы
по сравнению с контролем снизилась на 9,3 % и 24,4 млн, а к 60-му дню исследований - на
19,5 % и 55,3 млн. В то же время у животных третьей группы по сравнению со второй к 60му дню данный показатель увеличился на 12,2 % и 29,8 млн. При этом он был ниже
контрольного уровня на 7,3 % и 22,6 млн. Несколько больше увеличивалось число Тхелперов в лимфоузле лошадей четвертой группы, достигая максимальных значений среди
животных пятой группы. Так, к 60-му дню исследований содержание хелперных клеток в
лимфоузле животных данной группы соответствовало контрольному значению и превышало
таковое во второй группе на 18,9 % и 53,2 млн, третьей - на 6,7 % и 23,4 млн, четвертой - на
4,5 % и 19,2 млн.
Уровень Т-супрессоров в брыжеечном лимфатическом узле лошадей второй группы
был выше, чем у контрольных, на 6,0 % и 5,4 млн. Супрессивная реактивность в организме
животных данной группы нарастала, и к концу исследований (60 дней) содержание Тсупрессоров увеличилось на 9,4 % и 6,2 млн. В лимфатическом узле лошадей третьей и
четвертой групп данный показатель снижался, однако продолжал превышать контрольные
значения, а в пятой группе в конце опытов соответствовал контролю.
Содержание В-ЕАС-лимфоцитов в брыжеечном лимфатическом узле лошадей первой
группы за период исследований колебалось от 28,6 до 29,2 % и от 88,8 до 90,9 млн. У
больных животных данный показатель к началу опытов был снижен на 10,9 % и 38,8 млн, а к
60-му дню - на 18,8 % и 60,1 млн. Уровень В-ЕАС-лимфоцитов в лимфатическом узле кобыл
третьей группы по сравнению с первоначальным показателем у больных животных
увеличился на 5,3 % и 20,5 млн и с их количеством в конце опыта- на 13,8% и 43,9 млн. У
лошадей четвертой группы к 60-му дню данный показатель был выше, чем таковой во второй
группе, на 14,4 % и 45,4 млн и третьей на 0,6 % и 1,5 млн, при этом ниже, чем в контроле, на
4,4 % и 14,7 млн.
Максимально уровень В-ЕАС-лимфоцитов повысился в лимфатическом узле кобыл
пятой группы. Так, по сравнению с таковым во второй, третьей и четвертой группах
соответственно на 17,0 % и 49,6 млн; на 3,2 % и 5,7 млн и на 2,6 % и 4,2 млн, но в то же
время уступал показателям контроля на 1,8 % и 10,5 млн.
Содержание Т-Е-РОК-лимфоцитов в селезенке животных первой контрольной группы
за период исследований существенно не изменялось и достигало 32,6 -33,1 %и 130,1 -132,4
млн. Данный показатель у больных кобыл к началу опытов снизился на 12,4 % и 48,8 млн. К
60-му дню в селезенке не леченных животных второй группы по сравнению с
первоначальным значением он увеличился на 6,7 % и 23,0 млн, а с контролем - на 19,6 % и
74,1 млн.
Уровень Т-Е-РОК-лимфоцитов в селезенке лошадей третьей, четвертой и пятой групп
по сравнению с таковым у больных животных второй группы увеличился соответственно на
12,2 % и 61,5 млн; на 16,9 % и 69,8 млн; на 19,4% и 71,9 млн. Однако данный показатель у
лошадей третьей и четвертой групп не достигал контрольного значения соответственно на
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 60 из 134
7,4 % и 12,6 млн; на 2,7 % и 4,3 млн. При этом у кобыл пятой группы к концу опытов он
составлял 32,9 % и 130,2 млн.
За период исследований содержание В-ЕАС-лимфоцитов в селезенке лошадей первой
контрольной группы колебалось от 41,9 до 42,6 % и от 170,2 до 172,6 млн. У кобыл второй
группы к началу опытов данный показатель был снижен на 16,3 % и 41,1 млн, а к 60-му дню
с прогрессированием заболевания регистрировали истощение селезенки В-ЕАСлимфоцитами. Уровень В-ЕАС-лимфоцитов в селезенке лошадей третьей, четвертой и пятой
групп, леченных по разным схемам, по сравнению с таковым у кобыл второй группы
увеличивался соответственно на 22,1 % и 8,8 млн; на 28,6% и 107,7 млн; на 31,5% и 119,0
млн. При этом данный показатель у лошадей пятой группы соответствовал контрольному
уровню, а третьей и четвертой групп уступал ему соответственно на 10,5 % и 29,9 млн; на 4,0
% и 12,8 млн.
Содержание Т-Е-РОК-лимфоцитов в тимусе здоровых лошадей колебалось от
568,0 до 571,6 млн на орган. Описываемый показатель у больных кобыл второй
группы к началу опытов был снижен на 225,2 млн. Истощение тимуса Т-лимфо-цитами
прогрессировало, и к концу опыта их уровень у животных данной группы по сравнению с
первоначальным значением уменьшился на 145,4 млн и с контрольным показателем - на
366,0 млн. К 60-му дню количество Т-Е-РОК-лимфоцитов в тимусе лошадей третьей группы,
подвергнутых дегельминтизации, был выше, чем таковой у больных и нелеченых кобыл
второй группы, на 244,7 млн, но в то же время ниже, чем в контроле, на 121,3 млн. Более
высоким данный показатель был у лошадей четвертой группы, которым на фоне
дегельминтизации применяли вита-минно-аминокислотно-минеральную подкормку. Так, по
сравнению с таковым у животных второй группы он повышался на 318,3 млн и третьей - на
73,6 млн, но в то же время уступал контролю на 47,7 млн. Максимального значения уровень
Т-Е-РОК-лимфоцитов достигал в тимусе кобыл пятой группы, которых подвергали дегельминтизации на фоне аминокислотно-ми-нерально-витаминной подкормки и пробиотикотерапии. У лошадей данной группы к 60-му дню он был выше, чем таковой во
второй группе, на 368,5 млн, третьей - на 123,8 млн и четвертой - на 50,2 млн.
При изучении миелограммы отмечали глубокие цитологические изменения при
стронгилоидозно-оксиурозно-параска-риозной инвазии лошадей (рис. 1, 2).
Результаты исследования аденограм-мы и спленограммы при ассоциативной
стронгилоидозно-оксиурозно-параска-риозном заболевании животных представлены на рис.
3.
Заключение. Ассоциативная стронги-лоидозно-оксиурозно-параскариозная инвазия
лошадей способствует развитию в организме вторичных иммунодефици-тов, проявляющихся
нарушением в лим-фоидных органах баланса иммунокомпетентных клеток Т- и В-систем иммунитета, иммуноцитологическим истощением
костного мозга, лимфатических узлов и селезенки. Полному восстановлению иммунного
статуса больных животных способствует дегельминтизация декто-максом на фоне
аминокислотно-мине-рально-витаминной
подкормки
микрови-тамом
и
иммунопробиотикотерапии бак-тонеотимом.
Лабораторное занятие №21
Тема: Витамин-сберегающий эффект малоновой кислоты у цыплят при темновом стрессе.
Цель: Изучить предотвращение повышенного расхода витамина С при нарушении режима
освещения скармливанием малоновой кислоты.
Рекомендуемая литература:
Основная: 1. В.Д. Соколов, Фармакология 1977..
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 61 из 134
Дополнительная: 1. В.Д.Соколов Фармакология, 1997г.
2. Столяров И.Д. Иммунодиагностика и иммунокоррекция в клинической практике. Спб:
Сотис, 1999
3. В.М.Субботин «Современные лекарственные вещества в ветеринарии». 2003г.
4. Внутренние незаразные болезни сельскохозяйственных животных /Б. М. Анохин, В. М.
Данилевский, Л. Г. Замарин и др.; Под ред. В. М. Данилевского. — М.: Агропромиздат, 1991.
Контрольные вопросы:
1. Химическая сущность малоновой кислоты
2. Последствия темнового стресса
3. Механизм действия малоновой кислоты при снятия темнового стресса
Методические рекомендации:
Известно, что домашние птицы в целом независимы от поступления извне аскорбиновой кислоты, необходимой для биосинтеза катехоламинов, кортикостероидов, гидроксипролина, детоксикации ксенобиотиков. Она поддерживает на низком уровне содержание
метгемоглобина, участвует в метаболизме железа и в высоких концентрациях является
компонентом антиоксидантной системы организма. В условиях производственных стрессов
(транспортировка, хэндлинг, перевешивание, дебикирование, вакцинация, нарушение режимов освещенности, кормления и поения) эндогенный синтез витамина С может оказаться
недостаточным для возросших метаболических потребностей. Для понимания роли
аскорбиновой кислоты необходимо также учитывать аномально высокую концентрацию
глюкозы в крови у птиц и стратегию их борьбы против гипергликемии [10]. Определенное
значение для реализации метаболических эффектов витамина С имеет мочевая кислота,
концентрация которой у птиц выше, чем у многих других животных [9]. Дополнительное
введение в корм аскорбиновой кислоты не всегда возможно в связи с токсическим действием
ее метаболитов [2].
Цель работы - изучение возможности предотвращения повышенного расхода
витамина С при нарушении режима освещения скармливанием малоновой кислоты,
защищающей животных от гипоксического стресса [3].
Материалы и методы. Исследования провели на 24 цыплятах - бройлерах кросса
"Гибро-6", разделенных в возрасте 16 дней на 3 группы (по 8 гол.в каждой). В первой группе
были интактные цыплята, адаптированные к освещению в течение 21 ч. Молодняк второй и
третьей групп находился в течение суток в темноте, но бройлеры третьей группы за день до
начала опыта и в последующие сутки получали с кормом по 30 мг малоновой кислоты на
голову.
После окончания опыта птицу убивали декапитацией. В крови определяли содержание гемоглобина и метгемоглобина - спектро-фотометрически, в сыворотке крови - концентрацию малонового диальдегида (МДА), который является конечным продуктом перекисного окисления липидов (ПОЛ) - с помошью тиобарбитуровой кислоты, уровень аскорбиновой кислоты - титрованием безбелкового
фильтрата сыворотки 0,001 N раствором 2,6 - ди-хлорфенолиндофенола, в сыворотке крови
концентрацию мочевой кислоты - по фотоме-трированию комплекса урата с вольфраматом
натрия при 640 нм. Активность сукцинатдеги-дрогеназы (СДГ) печени определяли в забуференном сахарозном гомогенате (1:10) по восстановлению феррицианида в условиях торможения переноса электронов на кислород.
Полученные данные обрабатывали с помощью компьютерной программы "Statistica",
разность средних считали значимой при Р<0,05.
Результаты исследований. Дезадапта-ция бройлеров к режиму освещения приводила
к достоверному повышению уровня метгемоглобина, МДА, мочевой кислоты и активности
СДГ печени (см. таблицу). Отмечали резкое (на 53 %) достоверное снижение концентрации
аскорбиновой кислоты (Р<0,001), содержание гемоглобина практически не изменялось, что
объясняется общим высоким уровнем этого белка в крови и небольшой длительностью
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 62 из 134
опыта.
Наши данные в целом хорошо согласуются с результатами, полученными при
изучении изменения метаболизма в условиях стрессового воздействия (в том числе при
резком нарушении режима освещенности), которые характеризуются снижением активности
и дисбалансом механизмов аитиокислительной защиты [6]. В основе их лежит
гиперактивация СДГ (на 49,2 %, см. таблицу), приводящая к генерации активных форм
кислорода (супе-роксидный анион-радикал, гидроксил, син-глетный кислород, пероксид
водорода) со всеми вытекающими отсюда последствиями, из которых можно выделить
активацию ПОЛ, снижение концентрации низкомолекулярных антиоксидантов, торможение
активности ферментов антиоксидантной защиты и др. Повышение содержания мочевой
кислоты, обмен которой тесно связан с метаболизмом витамина С при оксидативных
стрессах [10], обусловлено мобилизацией этого соединения из тканей, где оно образуется
при катаболизме нуклеиновых кислот в стадию тревоги, и его рассматривают в качестве
фактора, отягощающего течение темнового стресса. Хотя мочевую кислоту считают
антиоксидантом [10], образование ее под влиянием ксантиноксида-зы приводит к генерации
уратного радикала, что на фоне снижения концентрации аскорбиновой кислоты можно
расценивать как угнетение антиокислительной защиты [4]. О снижении антиоксидантного
статуса при нарушении режима освещения свидетельствуют также данные о генерации
пероксисомами перекиси водорода при повышении концентрации мочевой кислоты [11].
Таким образом, дача малоновой кислоты за сутки до начала опыта и в течение его
предотвращала снижение концентрации витамина С, вызванное световой дезадаптацией
бройлеров. Более того, отмечали даже достоверное ее повышение на 31,0 % по сравнению с
птицей первой группы, вероятно за счет повышения биосинтеза. Возрастанию концентрации
витамина С соответствовало достоверное снижение содержания мочевой кислоты на 33,4 %.
Интерпретация полученных данных, несмотря на некоторую их разнородность, может
быть сфокусирована на анализе одного показателя - активности СДГ. Действительно,
малоновая кислота, являющаяся конкурентным ингибитором СДГ, в условиях опыта предотвращала гиперактивацию фермента [8], способствовала уменьшению оттока электронов
из дыхательной цепи и, следовательно, тормозила генерацию активных форм кислорода.
Сниженный уровень одноэлектронного окисления субстратов, в свою очередь, тормозил
ПОЛ (восстановление исходной величины МДА) и поддерживал метаболически активную
форму железа в состоянии 2+ (уменьшение уровня метгемоглобина).
Снижение концентрации мочевой кислоты при скармливании бройлерам малоновой
кислоты было связано с более мягким течением темнового стресса в этих условиях [5], что
ограничивало выход мочевой кислоты из тканей и образование свободных радикалов [4]. В
свою очередь, это приводило к снижению расхода витамина С для инактивации уратных
радикалов, образующихся при синтезе пури-нового производного. С другой стороны,
наблюдаемое повышение концентрации аскорбиновой кислоты качественно изменяло
характер действия витамина С на окислительный метаболизм: из прооксиданта он становился антиоксидантом [7]. Такое рассмотрение полученных нами данных находится в русле
представлений об антиоксидантном действии малоновой кислоты в условиях нарушения
светового режима при выращивании цыплят-бройлеров [1].
Заключение. Малоновая кислота через регуляцию распределения электронного потока, идущего от субстратов на кислород, и воздействия на течение катаболической стадии
стресса у цыплят-бройлеров минимизирует процессы, связанные с повреждающим влиянием
активных форм кислорода при смене светового режима. Антиоксидантная направленность
малоната в итоге приводит к сохранению и пополнению тканевых пулов витамина С, в
котором животные особенно остро нуждаются в условиях чрезвычайных ситуаций.
2. ЛЕКЦИИ
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 63 из 134
Лекция 1. Введение.
Содержание лекционного занятия:
1. Определение дисциплины
2. Значение дисциплины
2. Цели и задачи дисциплины
Интерес к иммунодефицитам возрос в последние годы в связи с большой важностью
их в клиническом (им сопутствуют многочисленные патологические процессы) и
теоретическом отношении.
Термином иммунодефициты обозначают нарушения нормального иммунологического
статуса организма, которые обусловлены дефектом одного или нескольких механизмов
иммунного ответа. Они являются результатом нарушения функциональной активности
клеток неспецифической иммунной системы (моноциты, макрофаги и нейтрофилы) и/или
специфической иммунной системы (Т- и В-лимфоциты). Клинические проявления
иммунодефицитов ассоциируются с увеличением частоты и тяжести инфекций.
Инфекционные процессы у животных с иммунологической недостаточностью становятся
хроническими и не поддаются традиционному лечению, или же непатогенные
микроорганизмы могут стать причиной развития болезней.
Дефекты неспецифической иммунной системы ассоциированы с недостаточным
разрушением бактерий и, как правило, связаны с повторяющимися кожными или с
системными пиогенными инфекциями. Специфические иммунодефициты являются
результатом дефектов в В- или/и в Т-клеточном звене иммунной системы. В зависимости от
уровня нарушений и локализации дефектов различают преимущественно гуморальные,
клеточные и комбинированные иммунодефициты. У животных с гуморальными
иммунодефицитами обычно наблюдается повышенная чувствительность к бактериальным
инфекциям. Дефициты в клеточной иммунной системе являются результатом повторных или
персистентных грибковых, вирусных и протозойных болезней. Различают первичные и
вторичные иммунодефициты.
Под иммунологической недостаточностью первичного происхождения принято
понимать генетически обусловленную неспособность организма продуцировать то или иное
эффективное звено иммунного ответа. Первичные иммунодефициты называют также
врожденными, поскольку они проявляются вскоре после рождения, имеют четко
выраженный наследственный характер и, как правило, наследуются по аутосомнорецессивному типу. Наиболее выраженные нарушения иммунной системы проявляются при
первичных иммунодефицитах.
Вторичные иммунодефициты носят приобретенный характер и обусловлены
воздействием на организм вирусов, бактерий, паразитов, нарушением обмена веществ. Они
развиваются также под влиянием цитотоксических препаратов, ионизирующей радиации,
вследствие нарушений в передаче материнских антител новорожденным животным.
При рассмотрении возможностей для развития иммунодефицита заслуживает
внимание множество стадий, на которых может возникнуть дефект во время созревания и
дифференциации элементов костного мозга, происходящих из плюрипотентных
зародышевых клеток.
Существующая классификация иммунодефицитов отражает уровень наших знаний в
этой области на сегодняшний день, она требует дальнейшего совершенствования с учетом
накопления новых данных о генетических, биохимических и клеточных основах иммунного
ответа.
Вопросы для самоконтроля:
1. Определение дисциплины
2. Цели и задачи дисциплины
3. Значение «Современные иммуномодулирующие биопробиотики применяемые в
ветеринарии» для ветеринарных специалистов
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 64 из 134
Рекомендуемая литература:
1. 1. В.Д. Соколов, Фармакология 1977.
2. Первый Евразийский ветеринарный конгресс. 2007. С.69-72
Лекция 2. Иммунная система: Основные понятия.
Содержание лекционного занятия:
1. общие положения
2. Гуморальный иммунитет
3. Клеточный иммунитет
4. Неспецифические факторы иммунитета
1. Иммунная система сформировалась в процессе эволюции позвоночных для защиты
от инфекций, обеспечения индивидуальности и целостности организма, элиминации
чужеродных агентов как экзогенной, так и эндогенной природы. Эти функции
осуществляются специализированными клетками-лимфоцитами, макрофагами и их
продуктами, многочисленными добавочными клетками, широко распространенными по
организму с преимущественной локализацией в лимфоидных органах, включая костный
мозг, тимус, лимфатические узлы, селезенку, пейеровы бляшки в стенке тонкого кишечника
и др.
Основой понимания иммунной системы является концепция, что каждый из
миллиардов лимфоцитов несет на своей поверхности антигенные рецепторы. Набор
рецепторов предполагает возможность для индивидуального лимфоцита отвечать на любой
антиген, в котором представлены соответствующие антигенные детерминанты. Антигенные
рецепторы развиваются независимо от антигена как результат случайных
последовательностей расположения генов.
Действие иммунных механизмов основано на реакциях двух типов: клеточного и
гуморального. Это связано с наличием двух независимых популяций лимфоцитов: В-клеток,
вырабатывающих антитела, и Т-клеток, осуществляющих реакции клеточного типа.
Иммунная система характеризуется прежде всего специфичностью ее реакций,
спектром специфичности антител и лимфоцитов, а также существованием
иммунологической памяти. Уже на ранних стадиях своего развития происходит супрессия Ви Т-клеток, несущих рецепторы для антигенных детерминант собственного организма
(возникает состояние естественной иммунологической толерантности); в результате
иммунная система в норме способна отвечать только на чужеродные антигены. Связывание
чужеродного антигена с лимфоцитом вызывает иммунный ответ, направленный против этого
антигена. При этом, некоторые из лимфоцитов пролиферируют и дифференцируются в
клетки памяти, и при вторичном воздействии того же иммуногена иммунный ответ
развивается быстрее и оказывается гораздо сильнее (вторичный иммунный ответ).
Оптимальный иммунный ответ реализуется только при Т- и В-клеточной кооперации.
Лимфоциты являются ключевыми клетками иммунной системы, обеспечивающими
основные реакции иммунитета. Они развиваются из плюрипотентных стволовых клеток
костного мозга (у взрослых) и печени (у плода). Потомки стволовых клеток мигрируют из
этих кроветворных тканей с током крови в центральные лимфоидные органы (тимус у
млекопитающих и Фабрициева сумка у птиц), где они размножаются и дифференцируются в
лимфоциты. В тимусе Т-лимфоциты окончательно созревают в функционально полноценную
иммунокомпетентную клетку. Млекопитающие не имеют
Фабрициевой сумки, и у них лимфоциты частично образуются из стволовых клеток в
самих кроветворных тканях, а затем мигрируют в периферические лимфоидные ткани, где
становятся В-лимфоцитами. Часть новообразованных лимфоцитов мигрирует в
периферические лимфоидные ткани (лимфатические узлы, селезенка, лимфоидные
структуры кишечника), где они взаимодействуют с антигеном.
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 65 из 134
2. Гуморальный иммунитет. 1.1. В-лимфоциты. В-лимфоциты - клеточные элементы
иммунной системы, предназначенные для реализации гуморального иммунного ответа с
образованием специфических антител.
1.1.1. АНТИТЕЛА
В процессе инфекции антитела к антигенам (обычно белковой природы)
синтезируются В-лимфоцитами. В совокупности называемые иммуноглобулинами (Ig),
антитела образуют один из основных классов белков в крови, составляя по весу примерно
20% суммарного белка плазмы. Антитела защищают позвоночных от инфекций, нейтрализуя
вирусы или бактериальные токсины, мобилизуя комплемент, фагоциты и киллерные клетки.
Молекула иммуноглобулина имеет Y-образную форму и состоит из двух идентичных
тяжелых (Н) цепей и двух идентичных легких (L) цепей. Части Н- и L-цепей образуют
антиген-связывающие участки, вступающие в контакт с соответствующими детерминантами
антигена. Существует пять классов иммуноглобулинов (IgG, IgM, IgA, IgE, IgD), имеющих
различные Н-цепи. Участки Н-цепей формируют Fc-область, определяющую биологические
свойства каждого класса иммуноглобулинов.
IgG - является основным классом иммуноглобулинов, находящихся в крови и
синтезирующихся при вторичном иммунном ответе. В процессе инфекции Fc-область
молекулы IgG связывается со специфическими рецепторами фагоцитов (макрофаги и
полиморфноядерные лейкоциты), способствуя эффективному поглощению и разрушению
иммуногена, покрытого IgG-антителами, синтезированными в иммунном ответе. Кроме того,
Fc-область IgG активирует комплемент путем связывания с первым компонентом системы
комплемента, что в конечном итоге приводит к бактериолизису или цитолизу чужеродного
микроорганизма.
IgM - является основным классом иммуноглобулинов, синтезируемых на ранних
стадиях первичного иммунного ответа. Молекулы IgM наряду с молекулами IgD,
встраиваясь в плазматическую мембрану в процессе превращения пре-В-клеток в Влимфоциты, являются антиген-специфическими рецепторами. Хотя это свойство характерно
для иммуноглобулинов всех классов, известно, что на поверхности большинства покоящихся
В-клеток находятся главным образом IgM и IgD. Пентамеры IgM более эффективны в
реакциях гемолиза, в лизисе бактерий, а также значительно эффективнее активируют
комплемент по сравнению с IgG антителами.
IgA - является основным классом антител в секретах и играет решающую роль в
иммунологической защите слизистых по отношению к вирусам. Помимо этого, IgA снижает
адгезию бактерий и вирусов на поверхности эпителиальных клеток, а в комплексе с
лизоцимом может активировать систему комплемента.
IgE-антитела ответственны за клинические проявления аллергических реакций и
имеют важное значение в активизации механизмов защиты организма против паразитов.
Иммуноглобулины этого класса связываются с тучными клетками и базофилами,
присоединение к ним антигена приводит к секреции клетками гистамина или серотонина,
способствуя расширению кровеносных сосудов и увеличению проницаемости их
стенок. Предполагается, что IgE делают область воспаления более доступной для
лейкоцитов, антител и компонентов комплемента.
Функция IgD-антител неизвестна; они обнаруживаются, главным образом, в виде
антигенных рецепторов на цитоплазматической мембране некоторых В-лимфоцитов.
Имеются сведения о направленности антител IgD к хронически присутствующим в крови
антигенам.
Количество специфических антител к разнообразным антигенам можно определить с
помощью различных иммунологических тестов. Однако, при вирусной инфекции только
вируснейтрализующие антитела непосредственно обеспечивают иммунную защиту. Другие
же антитела способствуют защите организма путем опсонизации и агглютинации вириона,
участия в комплементарном и клеточном лизисе вирус-инфицированных клеток. Ингибиция
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 66 из 134
вирусного синтеза антителами при их взаимодействии со специфическими антигенами на
клеточной поверхности показана на главных моделях вирусных инфекций in vitro.
Несмотря на то, что роль антител при выздоровлении от первичных инфекций
зачастую не определена, они несомненно обеспечивают защиту при повторном
инфицировании этими или сходными по антигенной структуре микроорганизмами.
Основным фактором при первичных вирусных инфекциях является иммунный ответ
клеточного типа. Например, при персистентной вирусной инфекции даже с активной
репликацией вируса, антитела часто обнаруживают в сыворотке крови, иногда в
значительных количествах. Этих антител оказывается недостаточно для того, чтобы
инфицированному организму освободиться от вируса, однако эти антитела играют
решающую роль в распространении вируса и могут быть ключевым элементом в
преобладании латентного периода при многих персистентных инфекциях.
3. КЛЕТОЧНЫЙ ИММУНИТЕТ
Т-ЛИМФОЦИТЫ. Лимфоциты тимусного происхождения (Т) являются эффекторами
иммунного ответа на воздействие различных вирусных, бактериальных, грибковых и других
агентов. В этот процесс вовлечены по крайней мере 3 субпопуляции клеток:
• Т-клетки-хелперы (Тп), обеспечивающие развитие гуморального (синтез антител) и
клеточного ответов, а также активацию макрофагов;
• цитотоксические Т-клетки (Те или CTL), участвующие в разрушении чужеродных
или инфицированных клеток;
• Т-клетки-супрессоры (Ts), подавляющие иммунный ответ и отвечающие за
иммуносупрессию, обусловленную микроорганизмами.
Главными регуляторами иммунного ответа являются Т-хелперы и Т-супрессоры.
Многочисленные эксперименты с основными вирусами, патогенными для человека и
животных, показали важную роль Т-клеток в выздоровлении организма.
К иммунным реакциям клеточного типа относятся:
• реакции клеточного типа на внутриклеточные микроорганизмы (вирусы, бактерии,
грибки);
• цитотоксическое действие лимфоцитов на трансплантированные клетки тканей и
органов;
• разрушение опухолевых клеток активированными Т-лимфоцитами;
• ГЗТ аллергических реакций клеточного типа;
• реакции клеточного типа при аутоиммунных расстройствах.
Общим признаком для этих разнообразных реакций служит Т-лимфоцит в качестве
клетки-эффектора, конечного продукта процесса дифференцировки.
Т-лимфоциты, как и В-клетки, несут на мембране антигенспецифические рецепторы,
структура которых принципиально не отличается от иммуноглобулиновых рецепторов Вклеток. Антигенный рецептор Т-клеток представляет собой гетеродимер, в состав которого
входят два основных гликопептида (ос- и р- цепи) с молекулярной массой 40-50 и 35-45 кД
соответственно. Эти антигенные рецепторы обнаруживаются у 90% периферических Тклеток и почти у всех тимоцитов. Существуют еще две полипептидные цепи (у- и 5-),
формирующие уб-рецепторы и идентифицированные у Т-клеток лимфатических узлов,
сосудов кожи и кишечника.
Важнейшей функцией Т-лимфоцитов является возможность CTL разрушать вирусинфицированные клетки. Они не только удаляют пораженные клетки и вирусы, но и часто
являются причиной иммунопатологических нарушений, протекающих с разрушением тканей
организма. В этой связи, Ts и другие клетки-супрессоры обеспечивают важное содействие
целостности организма, ограничивая такие разрушительные процессы.
Чужеродные антигены подвергаются воздействию Т-клеток только в тех случаях,
когда они экспрессируются на поверхности клеток и ассоциируются с мембранными
гликопротеинами, которые кодируются генами главного комплекса гистосовместимости
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 67 из 134
(МНС). Как и в реакциях гуморального типа, в индукции клеточного иммунного ответа
важную роль играют макрофаги.
1.2.2. МОНОЦИТЫ / МАКРОФАГИ
Моноциты крови и тканевые макрофаги занимают центральное место в защите
организма от вирусных, бактериальных и опухолевых болезней. Они являются
доминирующими клетками мононуклеарной фагоцитарной системы, выполняют несколько
функций в иммунитете, первыми встречают чужеродные частицы и чаще всего являются
первыми клетками, взаимодействующими с микроорганизмами в момент их внедрения в
организм. При этом, патоген переваривается и разрушается макрофагами, или же он
размножается и переносится в другие клетки и ткани. В зависимости от формы развития
инфекции, вирусные антигенные комплексы могут быть представлены на поверхности
макрофагов (как дополнительные клетки), которые являются инструментом взаимодействия
Т- и В-лимфоцитов, обеспечивающим иммунный ответ против вируса.
Особое значение для иммунной системы имеет синтез макрофагами интерлейкина-1
(IL-1) и дополнительных растворимых факторов, которые могут подключать и активировать
другие клетки, в частности, покоящиеся Т-клетки. Наиболее интересными из известных
факторов макрофагов являются а-интерферон и фактор некроза опухолей. Через синтез осинтерферона макрофаги регулируют резистентность организма к вирусной инфекции.
Таким образом, макрофаги могут быть эффекторными клетками,
антигенпредставляющими клетками (для Т- и В-) и хелперными клетками. Кроме
того, макрофаги являются неспецифическими супрессорными клетками, регулирующими
разнообразие функций лимфоцитов. Существенную роль в резистентности,
осуществляемой
макрофагами,
играет
синтез
этими
клетками
колониестимулирующих факторов (G-CSF, GM-CSF) миело- и моноцитопоэза костного
мозга.
1.2.3. ЕСТЕСТВЕННЫЕ КЛЕТКИ - КИЛЛЕРЫ
Естественные клетки-киллеры (NK) были впервые описаны как антиопухолевые
клетки, которые осуществляют анти-телонезависимый лизис клеток-мишеней без
предварительной сенсибилизации, которая необходима для активации цитотоксических Тклеток. NK представляют собой небольшие лимфоцитоподобные клетки, не относящиеся к
типу Т- и В-клеток, характеризующиеся довольно высокой активностью рецепторного
аппарата. Они происходят из больших гранулярных лимфоцитов (LGL) и лизируют
опухолевые и инфицированные вирусами клетки. NK обеспечивают первую линию защиты
против опухолевых клеток и внутриклеточных инфекций до включения иммунных
механизмов.
Активность естественных клеток-киллеров увеличивается с первых дней при многих
вирусных инфекциях, при этом эффект обусловлен действием а- и у- интерферона и
интерлейкина-2. Таким образом, NK-клетки можно также включить в первую линию защиты
против вирусов.
1.2.4. АНТИТЕЛО-ЗАВИСИМАЯ КЛЕТОЧНАЯ ЦИТОТОКСИЧНОСТЬ (ADCC)
ADCC является комбинацией гуморального и клеточного иммунитета. Она
предполагает присутствие клеток-эффекторов и антител IgG-класса в качестве лиганда
между эффектором и клеткой-мишенью. Этот ответ может быть выполнен несколькими
типами клеток, включая моноциты, нейтрофилы и эозинофилы. Сравнительная значимость
этих клеток как эффекторов ADCC в иммунопатогенезе заболеваний зависит от патогена и
антительного ответа на этот патоген. Классически, уничтожение осуществляют клетки LGLпопуляции (К-клетки), которые имеются в виду, когда речь идет о ADCC. Родство между Ки NK-клетками не установлено.
Исследования in vitro показали, что К-клетки могут разрушать вирусинфицированные клетки в присутствии специфических антител.
Этот процесс значительно более эффективен чем цитолиз, связанный с
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 68 из 134
комплементом. 1.3. НЕСПЕЦИФИЧЕСКИЕ РАСТВОРИМЫЕ ФАКТОРЫ
Защитные механизмы организма в процессе инфицирования усиливаются за счет
растворимых факторов, продуцируемых клетками иммунной системы.
1.3.1. КОМПЛЕМЕНТ
Комплемент представляет собой сложную систему из 11 сывороточных белков,
активность которых регулируется большим количеством факторов и является основой
защитных сил организма. Комплемент является важным элементом системы резистентности,
а также эффективным звеном гуморального иммунитета за счет своих литических и
опсонических компонентов. Существует прямая функциональная связь между системой
комплемента и фагоцитарной системой, поскольку прямое или опосредованное через
антитела связывание компонентов комплемента является необходимым условием
фагоцитоза.
Комплемент совместно с цитотоксическими клетками вовлекается в лизис вирусных
частиц или в лизис вирус-инфицированных клеток также как вирус-нейтрализация. Это
действие может быть обусловлено активацией комплемента по классическому пути,
"запускающейся" связыванием специфических антител с антигенами-мишенями.
Оболочечные вирусы и клетки, инфицированные этими вирусами, могут также активировать
альтернативный путь комплемента. Это может происходить за счет лизиса вирионов или
инфицированных клеток до начала выработки антител к вирусам.
Кроме того, СЗЬ компонент комплемента может участвовать в разрушении вирусных
частиц и в отсутствие антител.
Микроорганизмы, несущие на своей поверхности ковалентно связанный
активированный СЗЬ, легко поглощаются и разрушаются фагоцитами.
Кроме того, активация комплемента является доминирующим компонентом реакции
воспаления, что приводит к накоплению лейкоцитов в местах репликации вируса и
выраженному воздействию на фагоциты, обмен веществ и свертываемость крови.
1.3.2. ИНТЕРЛЕЙКИНЫ
Растворимые вещества, которые способствуют взаимодействию между лейкоцитами,
носят название интерлейкинов (IL). Особенно интенсивный синтез интерлейкинов отмечают
при Т-клсточной стимуляции. IL-1 секретеруется макрофагами и другими клетками и
активизирует покоящиеся Т-лимфоциты. Эту же функцию осуществляет и выделяемый ТЪ
интерлейкин-2, который стимулирует рост Т-клеток и участвует в антивирусном и
антиопухолевом иммунитете.
Установлено, что распространение клонов Тс-клеток напрямую зависит от IL-2,
действие которого обусловлено связыванием его на поверхности активированных Т-клеток и
стимуляцией их пролиферации.
Кроме того, IL-1 активирует синтез белков острой фазы печени и является
пирогенным, что также оказывает влияние на патогены (в частности, на репликацию вируса)
за счет высокой температуры тела. Дополнительные факторы, такие как IL-3- IL-6, входят в
перечень веществ, участвующих в регулировании роста и дифференциации лейкоцитов.
1.3.3. ИНТЕРФЕРОНЫ
Интерферон (IFN) был впервые описан в 1957 году Isaacs and Lindenmann как
антивирусное вещество, секретируемое многими типами клеток в ответ на вирусную
инфекцию. Его действие непосредственно направлено на репликацию вируса, в основном на
его транспортный уровень. Известны 3 класса интерферонов:
• лейкоцитарный (IFNa), секретируемый при ответе на вирусные и бактериальные
агенты;
• фибробластный (IFNp), секретируемый в процессе вирусной инфекции другими
типами клеток;
• иммунный (IFNy), секретируемый Т-лимфоцитами в ответ на антигенную или
митогенную стимуляцию.
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 69 из 134
Интерфероны обладают не только прямой антивирусной активностью, но также и
иммуномодуляторной активностью. Они могут стимулировать или подавлять антивирусные
функции Т-лимфоцитов, макрофагов, МК-клеток в зависимости от времени,
дозы и других факторов. Они секретируются лейкоцитами и другими клетками
организма, участвуя в его иммунной защите.
Вопросы для самоконтроля:
1. Определение иммунитета
2. гуморальный иммунитет
3. клеточный иммунитет
4. Неспециифческие факторы иммунитета
Рекомендуемая литература:
1.В.Д.Соколов, Фармакология 1977г.
2. Первый Евразийский ветеринарный конгресс. 2007.Алматы С.72-75.
Лекция 3.
Содержание лекционного занятия:
1. Определение
2. комбинированный иммунодифецит
Первичные иммунодефициты возникают в результате лежащих в их основе дефектов
Т-или В-клеток, а также нейтрофилов, влияющих на их абсолютное число и
функциональную активность в защитной системе организма (Табл.1). Первая форма
врожденного иммунодефицита была обнаружена Брутоном в 1952 г. у 8-летнего мальчика,
при электрофоретическом анализе у которого не были выявлены гамма-глобулины. Этот
иммунодефицит вошел в литературу под названием агаммаглобулинемии брутоновского
типа, который характеризуется неспособностью организма вырабатывать иммуноглобулины.
С этого времени началось изучение иммунодефицитов. Одной из основных причин ранней
смертности животных с состоянием иммунодефицита является возникновение инфекций.
Одним из наиболее очевидных и хорошо изученных первичных иммунодефицитов в
ветеринарии является тяжелый, со смертельным исходом комбинированный иммунодефицит
арабских жеребят (КПП), впервые описанный Периманом с сотр. в 1973 г. КИД наследуется
по аутосомно-рецессивному типу и характеризуется полным отсутствием зрелых Т- и Влимфоцитов. Около 26% взрослых арабских лошадей несут летальный ген КИД и около 3%
арабских новорожденных жеребят погибают от болезни прежде, чем достигнут возраста 5
месяцев. Патогенез болезни полностью не изучен, предполагается, что нарушение
пуринового обмена играет ключевую роль в ее развитии. У человека установлена корреляция
между комбинированным иммунодефицитом "швейцарского типа" и дефектом в пуриновом
обмене. В отсутствие ферментов аденозиндезаминазы и пуриннуклеозидфосфорилазы
нарушается метаболизм аденозина с накоплением АТФ в тканях до уровня, токсичного для
лимфоцитов. Блокада в пуриновом метаболизме вызывает развитие дефекта в созревании Ти В-лимфоцитов, обусловливая лимфоидную гипоплазию тимуса, селезенки, лимфатических
узлов, агаммаглобулинемию и лимфопению. При этом уровень нейтрофилов, моноцитов и
комплемента остается в норме.
КИД у арабских жеребят диагностируется на основании обнаружения у клинически
нормальных жеребят резко выраженной лимфопении, при нормальном количестве
лейкоцитов и отсутствия IgM в радиальной иммунодиффузии (РИД) в пробах крови до
приема молозива. В норме жеребята рождаются без IgG, однако их сыворотка содержит
небольшое количество IgM (0,08-0,2 мг/мл). При получении молозива в сыворотке крови
жеребят обнаруживаются иммуноглобулины всех классов. Учитывая, что период
полураспада IgM составляет в среднем 6 дней, колостральный IgM исчезает в течение
нескольких дней после рождения. У нормальных жеребят после этого срока обнаруживаются
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 70 из 134
иммуноглобулины этого класса, в то время как у жеребят с КИД IgM в сыворотке крови не
обнаруживается. Содержание IgG в сыворотке крови жеребят с КИД не отличается от
такового у нормальных жеребят. Внутрикожный тест на введение 50 мкг ФГА позволяет
диагностировать КИД по отсутствию реакции Т-клеток на введение митогена. Кроме того, у
жеребят с КИД не проявляется клеточный и гуморальный иммунный ответ на введение
эритроцитов барана.
Клинический диагноз на КИД основывается на том, что в возрасте от 1 до 4 месяцев у
жеребят наблюдаются периодически возникающие инфекции, лимфопения, гипогаммаглобулинемия и отсутствие в крови IgM. На этой стадии болезни у животных отмечается
глубокая лимфоидная гипоплазия селезенки, лимфатических узлов и тимуса. Диагноз на
КИД может быть установлен при обнаружении двух из трех следующих критериев:
• очень низкое количество или полное отсутствие лимфоцитов;
• выраженная гипоплазия первичных или вторичных лимфоидных органов;
• отсутствие IgM в сыворотке крови.
После исчезновения колострального иммунитета у животных периодически
развивается широкий спектр бактериальных инфекций.
Гибель жеребят наступает в 4-6-месячном возрасте обычно по причине вторичных
инфекций, вызываемых аденовирусом, Pneumocystis carinii, различными видами
криптоспоридий и Rhodococcus equi. При вскрытии обнаруживается гипоплазия всех
лимфоидных органов. Тимус и лимфатические узлы уменьшены и трудно
идентифицируются макроскопически, на срезе селезенки отсутствуют видимые белые
корпускулы. Микроскопически тимус состоит из эпителиальных клеток и телец Гассаля,
погруженных в остатки жировой ткани, при отсутствии лимфоцитов. В лимфатических узлах
отсутствуют дифференциация корковой и мозговой тканей, фолликулы и зародышевые
центры. Селезенка не содержит зародышевых центров, периартериальные оболочки лишены
лимфоцитов. Кроме того, строма, поддерживающая в норме лимфоидные фолликулы,
отсутствует, что является важным диагностическим признаком в дифференциации
лимфоидной гипоплазии при КИД от других форм лимфоидной атрофии, имеющей место
при вторичных иммунодефицитах.
Никакие средства не оказывают эффективного лечения КИД, нет и тестов, которые
позволяли бы выявлять взрослых животных, являющихся носителями гена КИД. Поэтому
профилактика этого иммунодефицита направлена на то, чтобы исключить из
воспроизводства особей, в потомстве которых рождаются жеребята с КИД.
Сцепленным с Х- хромосомой комбинированный иммунодефицит - у собак
породы Бассет-хаунд характеризуется дефектом Т- и В-клеток. У собак с этой формой
иммунодефицита в возрасте от 3 до 6 месяцев периодически возникают инфекции, появление
которых коррелирует со снижением материнского иммунитета. С помощью лабораторных
тестов, относящихся к оценке Т-клеток, обнаруживается отсутствие гиперчувствительности
замедленного типа (ГЗТ), низкий уровень Т-клеток в крови и выраженное снижение реакции
бласпрансформации на ФГА и наличие циркулирующих бластоподобных предшественников
Т-клеток. Низкий уровень или отсутствие IgG и IgA, отсутствие специфических антител
характеризуют дефицит В-клеток. При этом, концентрация IgM вариабельна. На вскрытии у
павших собак отмечается дисплазия тимуса и глубокая гипоплазия других лимфоидных
органов. В сравнении с КИД арабских жеребят, у которых отсутствуют Т-и В-лимфоциты, у
Бассет-хаундов отмечается дефект в дифференциации и/или созревании Т- и В-клеток. При
этом, В-клетки функционально способны продуцировать IgM, но не способны
переключаться на синтез IgG и IgA. Это переключение зависит от созревания и
функциональной активности Т-хелперов, которая у этих пациентов нарушена. Поэтому,
первичный дефект, основанный на нарушении созревания Т-клеток, вторично вызывает
отрицательное влияние на В-клеточную дифференциацию.
Агаммаглобулинемия лошадей - второй более дискретный пример глубокого
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 71 из 134
первичного иммунодефицита. Пациенты с этим расстройством имеют нормальное
количество Т-клеток, но у них полностью отсутствуют В-лимфоциты. Все три лошади, у
которых была диагностирована эта форма иммунодефицита, являлись жеребцами, что
позволяет предполагать, что этот дефицит имеет сходство со сцепленным с Х-хромосомой
заболеванием у мальчиков (болезнь Брутона).
Исследования показали, что у всех трех пораженных лошадей отсутствовали Вклетки, все субклассы Ig при нормальном количестве Т-клеток. Несмотря на то, что
животные были нормальными при рождении и в течение всего раннего периода жизни, все
три пациента пали в возрасте 18 мес. На вскрытии отмечено отсутствие первичных лимфоидных фолликулов и зародышевых центров в лимфоузлах и селезенке. Ткани лишены
плазматических клеток. Другие поражения связаны с перемежающимися инфекциями,
которые возникают вследствие дисфункции гуморального звена иммунной системы.
Селективные дефициты иммуноглобулинов - связаны с дефектами В-клеток,
которые продуцируют IgG, IgM, IgA. Селективные дефициты обусловливают
предрасположенность пациентов к инфекциям, которые и вызывают их преждевременную
гибель.
Селективный IgA-дефцит - был впервые описан Фелсбургом с сотр. в 1985 г. Под
наблюдением находилась колония собак породы Бигль, у которых регистрировали
повторяющиеся отиты, дерматиты и респираторные болезни. Селективный IgA-дефицит
также отмечен у клинически нормальных Шар-пеев и Немецких шефердов. IgA играет
важную роль в защите слизистых поверхностей (респираторного и желудочно- кишечного
тракта), он инги-бирует адгезию и колонизацию вирусов и бактерий, ограничивая абсорбцию
патогенов из желудочно-кишечного тракта. Поэтому дефицит IgA у животных
предрасполагает к возникновению бактериальных и вирусных инфекций.
Результаты изучения патогенеза селективного дефицита IgA выдвигают на первый
план дефект в превращении В-клеток в IgA- секретирующие плазматические клетки. Эта
блокада на конечной стадии дифференциации поражает все В-клетки, генетически
запрограммированные продуцировать IgA, в результате чего антитела этого класса не
обнаруживаются в крови и тканях. Дисбаланс Т-хелперов и Т-супрессоров является
единственным возможным объяснением этого дефекта дифференциации.
Клинически диагноз ставится на основании чрезвычайно низкого содержания или
полного отсутствия IgA в сыворотке. При этом уровень IgG и IgM остается нормальным.
Некоторые собаки имеют положительные результаты на ревматоидный фактор.
Значение этого наблюдения непонятно, однако следует иметь в виду, что IgA-дефицит у
человека ассоциируется с системной волчанкой, ревматоидным артритом и лимфоцитарным
тиреоидитом.
Селективный IgA-дефицит в ветеринарии редко диагностируется, поскольку РИД не
всегда используется в оценке уровня иммуноглобулинов у хронически инфицированных
пациентов. Поэтому, нормальный общий уровень сывороточных иммуноглобулинов
маскирует наличие селективного дефицита их отдельных классов. Немецкие шеферды в
норме имеют низкий уровень IgA в крови, что может обусловливать возникновение частых
случаев энтеритов у собак этой породы.
У Шар-пеев также отмечается высокая степень IgA-дефицита, при этом животные
страдают болезнями с поражением респираторного тракта. При исследовании уровня
иммуноглобулинов у больных животных отмечается низкое содержание IgA. У собак этой
породы наблюдается высокая степень проявления дерматитов, стафилококковых
фолликулитов и демодекоза.
Селективный IgM-дефицит - установлен у лошадей Арабской породы и
ассоциируется с плохим ростом животных и с периодически повторяющимися инфекциями с
поражением респираторного тракта. Клинические признаки развиваются в месячном
возрасте. При этом поражаются как самцы так и самки, гибель наступает в возрасте от 4 до
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 72 из 134
24 месяцев. Соотношение Т- и В-клеток в крови у животных с этим дефицитом нормальное,
однако отсутствуют IgM или их количество составляет 10% от нормального уровня.
Подобный синдром, характерный для IgM-дефицита, также установлен у собак породы
Доберман-пинчер. Диагноз основывается на отсутствии IgM в сыворотке крови при
количественном его определении в РИД. Уровень IgG и IgA при этом в норме.
Селективный IgG- дефицит - описан в виде дефицита IgG2 у красного датского
скота. Клинически животные с этим иммунодефицитом имеют повышенную
чувствительность к пиогенным инфекциям, гангренозным маститам, бронхопневмониям и
перитонитам. Способ наследования IgG-дефицита не установлен, нет данных по патогенезу и
дефектам клеток при его возникновении.
Временная
гипогаммаглобулинемия
в
отличие
от
персистентной
гипогаммаглобулинемии, при которой отсутствуют В-лимфоциты, характеризуется низким
уровнем иммуноглобулинов в сыворотке крови только в первые несколько месяцев жизни.
Количество В-лимфоцитов у животных с этим дефицитом нормальное, однако нарушен
синтез иммуноглобулинов. В связи с этим, временная гипогаммаглобулинемия должна
учитываться при дифференциальной диагностике первичных иммунодефицитов Вклеточного происхождения.
Пораженные пациенты имеют низкий уровень иммуноглобулинов в крови в возрасте
до 2-х месяцев, когда происходит снижение уровня пассивно приобретенных материнских
антител. Способность продуцировать собственные иммуноглобулины у этих животных
проявляется только в возрасте 4-5 месяцев. В период временной гипогаммаглобулинемии у
пациентов повышается чувствительность к оппортунистическим и перемежающимся
вирусным и бактериальным инфекциям. Животные, которые выживают к 6-месячному
возрасту, имеют хороший прогноз для нормального развития.
Т- клеточный дефицит - (летальный признак А-46 у черно-пестрого датского скота,
летальный акродерматит у собак породы Бультерьер и гипоплазия тимуса у собак породы
Веймаранер). В отличие от первичных иммунодефици-тов, связанных с дефектом Вклеток, эти три заболевания в ветеринарии связаны с изменениями количества и
функциональной активности Т-клеток.
Летальный признак А-46 - наследуется по аутосомно-рецессивному типу у чернопестрого датского скота (из фризского происхождения). Клинически этот иммунодефицит
проявляется глубокими дерматитами у животных в возрасте от 4 до 8 недель, с характерным
образованием корок и аллопеции вокруг рта, глаз, челюстей. Вторично быстро развиваются
бактериальные инфекции, и пораженные телята обычно погибают в 4-месячном возрасте.
Такие же признаки имеют место у телят Голштинской породы. При этом дефекте отмечается
глубоко выраженные изменения Т-клеток и ослабление клеточного иммунного ответа.
Уровень сывороточных иммуноглобулинов и число В-клеток у животных при этом остается
в норме. У павших животных на вскрытии обнаруживают выраженную гипоплазию тимуса и
Т-зависимых зон лимфоузлов, селезенки, пейеровых бляшек. Эту патологию характеризует
низкое содержание в плазме крови цинка. Применение препаратов цинка приводит к
выздоровлению, поскольку цинк играет важную роль в полинуклеотидном синтезе, чем и
можно объяснить его влияние на возникновение этого дефекта.
Летальный акродерматит собак породы Бультерьер -аутосомно-рецессивный
дефект, вызываемый, по всей видимости, нарушением абсорбции и метаболизма цинка.
Пораженные щенки имеют более светлую шерсть при рождении, и вскоре у них развивается
диарея, перемежающиеся инфекции респираторного тракта и кожные заболевания.
Отмечается образование трещин и покрытие коркой лап, дистрофия когтей, дерматиты.
Главным образом, поражаются конечности (подошвы) и зоны вокруг естественных
отверстий. Уровень иммуноглобулинов у пораженных животных несколько ниже нормы,
отмечаются нарушения функций Т-клеток. Гиперкератоз и паракератоз устанавливаются
гистологически. Содержание цинка в сыворотке у таких животных обычно низкое, а иногда
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 73 из 134
оно не отличается от такового у нормальных животных. В сравнении с летальным признаком
А-46 у крупного рогатого скота, животные с этой патологией не реагируют или слабо
реагируют на ежедневное введение сульфата цинка. Пораженные животные погибают от
бронхопневмонии в возрасте 15 месяцев.
Гипоплазия тимуса - Т-клеточный дефицит у собак породы Веймаранер, который
связан с дефицитом гормона роста при нормальном количестве В-клеток и нормальном
уровне иммуноглобулинов. Пораженные щенки быстро отстают в росте, у них развивается
повышенная чувствительность к инфекциям, животные погибают в течение нескольких
недель или месяцев. При вскрытии павших животных обнаруживается гипоплазия тимуса.
Экспериментальное лечение путем ежедневного введения экзогенного гормона роста (0,1
мг/кг в течение 30 дней) нормализует в некоторой степени функцию эпителия тимуса,
способствует появлению кортикальных тимоцитов и Т-клеточному созреванию. Это
заболевание как и синдром Ди-Джорджи у человека сопровождается полным отсутствием
клеточного иммунного ответа.
Дефекты нейтрофилов. Некоторые первичные иммунодефициты включают
количественные и качественные дефекты нейтрофилов. К этим заболеваниям относятся:
циклический гематопоэз собак породы Колли, болезнь Чедиак-Хигаши, синдром
гранулоцитопатии собак (плотоядных), бактерицидный дефект собак породы Доберманпинчер.
Болезнь Чедиак-Хигаши - аутосомно-рецессивный дефект, при котором поражаются
все клетки, содержащие цитоплазматические гранулы, такие как нейтрофилы, тромбоциты,
меланоциты, почечный
тубулярный эпителий, слизистые (гипофизарные) клетки, панкреатический эпителий
и другие. Описанная в 1964 году Падгеттом с сотр. у алеутских норок, эта болезнь теперь
установлена у голубых персидских кошек, герефордовского скота, промысловых китов,
голубых и серебристых лис.
У пораженных животных клинически болезнь проявляется частичным глазным и
кожным альбинизмом, фотофобией, тенденцией к кровотечениям и повышенной
чувствительностью к бактериальным инфекциям. Эти признаки являются результатом
функциональных дефектов меланоцитов, тромбоцитов и нейтрофилов. При цитологических
исследованиях нейтрофилов, эозинофилов, моноцитов и меланоцитов у пораженных
животных обнаруживают сильно увеличенные внутрицитоплазматические гранулы, которые
обусловливают функциональные дефекты. При нормальном количестве нейтрофилов,
нарушены их функции (дефект хемотаксиса, дегрануляции и бактерицидной активности).
Пациенты с болезнью Чедиак-Хигаши предрасположены к бактериальным инфекциям. У
персидских кошек не отмечено повышенной чувствительности к инфекции, несмотря на то,
что обнаруживаются морфологически дефектные гранулы в их нейтрофилах. Лечение
болезни направлено на коррекцию дефекта гранулоцитов с использованием средств (таких
как аскорбиновая кислота), которые способствуют дегрануляции и увеличивают уровень
циклического гуанин монофосфата. Однако, такая стратегия в терапии этого дефекта
оказывается эффективной только в ограниченном числе случаев.
Синдром гранулоцитопатии - врожденный дефект функции нейтрофилов, поражает
собак породы Ирландский сеттер и наследуется как аутосомно-рецессивный признак.
Клинически дефект проявляется возвратной лихорадкой, пиодермой, гингвитами,
остеомиелитами и часто ассоциируется с периферической лимфаденопатией. Пациенты
имеют выраженную нейтрофилию с гиперсегментацией зрелых нейтрофилов. При этом
имеет место вариабельная эозинофилия, лимфоцитоз и моноцитоз. Функциональный дефект
связан с пониженной бактерицидной активностью, выражающийся в нарушении адгезии,
хемотаксиса и агрегации у нейтрофилов. Гуморальный и клеточный иммунный ответ у
животных при этом не нарушается.
Бактерицидный дефект у собак породы Доберман-пинчер - подобен таковому у
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 74 из 134
ирландских сеттеров, однако угнетение продукции супероксидного аниона у них связано с
дефектом в респираторном взрыве.
Аномалия Pelger-Huet - является редким дефектом, характеризующимся
гипосегментацией нейтрофилов, эозинофилов, вызывающим "сдвиг влево" в гемограмме.
Морфологический дефект нейтрофилов вызывает нарушение их подвижности. Имеется
предположение, что у пораженных животных присутствуют сывороточные супрессорные
факторы, которые вызывают интерференцию бластогенеза лимфоцитов. Аномалия
передается как аутосомнодоминантный признак и наиболее известна у кроликов.
Спорадически имеет место у собак некоторых пород (коккер-спаниели, терьеры, фоксхаунды и др.) и у кошек.
Нейтропения новорожденных - поражает новорожденных многих видов животных и
характеризуется нарушением хемотаксиса и фагоцитоза нейтрофилов. Поскольку эти
функциональные дефекты непродолжительны по времени, они не оказывают заметного
влияния на здоровье новорожденных.
Дефект комплемента - идентифицирован у лабораторных животных: мышей, крыс,
морских свинок, хомяков и кроликов. Установлен этот дефект и у человека. Имеется
сообщение о врожденном дефиците СЗ комплемента у собак породы Британский спаниель.
Дефицит компонента СЗ системы комплемента, имеющего важнейшее значение в
противоинфекционной защите организма, наследуется по аутосомно-рецессивному типу и
клинически проявляется часто повторяющимися бактериальными инфекциями у
гомозиготных индивидуумов. Уровень комплемента в крови животных составляет 10% от
нормального уровня. В результате снижения функции опсонизации, хемотаксиса и
иммуноприлипания у пораженных животных увеличивается чувствительность к инфекциям.
Гуморальный и клеточный иммунный ответ у пораженных Британских спаниелей остается в
норме.
В литературе имеются сообщения об иммунодефиците у Голштино-Фризского скота,
обусловленного дефектом адгезии лейкоцитов (BLAD). Эта форма иммунодефицита
наследуется по аутосомно-рецессивному типу и ассоциирована с поверхностным
лейкоцитарным гликопротеином Mac-1 (GDI lb/CD18), который ответственен за
устойчивость животных к инфекциям. Разработана система ПЦР-скрининга для обнаружения
BLAD-аллелей у наиболее важных представителей этой породы в Дании.
Вопросы для самоконтроля:
1. определение иммунодифецита
2. виды иммунодифецита
3. селективный иммунодифецит
Рекомендуемая литература: 1.В.Д.Соколов, Фармакология 1977г.
Лекция 4. Вторичные (приобретенные) иммунодефициты.
Содержание лекционного занятия:
1. Определение
2. иммуносупрессия индуцированная вирусами
3. иммуносупрессия индуцированная бактериями
4. иммунодифецит ассоциированный с демодекозом у собак
Вторичные (приобретенные) иммунодефицита имеют более широкое распространение
в сравнении с врожденными иммунодефицитами. Приобретенные иммунодефицита могут
быть результатом воздействия факторов окружающей среды и эндогенных субстанций.
Факторы, ответственные за индукцию вторичных иммунодефицитов, включают в себя
возбудителей инфекционных и инвазионных болезней, фармакологические вещества,
эндогенные гормоны. Они могут быть результатом спленектомии, старения организма,
неправильного питания, развития опухолей и радиоактивного облучения.
Инфекционные агенты. Вирус чумы собак, парвовирус собак, вирус панлейкопении
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 75 из 134
кошек, вирус лейкемии кошек, вирус иммунодефицита кошек и другие вирусы индуцируют
подавление клеточного звена иммунного ответа. Такие болезни, как демодекоз, эрлихиоз и
системные грибковые болезни, также сопровождаются глубокой иммуносупрессией.
Фармакологические вещества. Кортикостероиды и различные антиопухолевые
препараты являются наиболее распространенными фармакологическими агентами,
индуцирующими
иммуносупрессию.
Такие
препараты,
как
хлорамфеникол,
сульфаметоксипиридазин, клиндамицин, дапсон, линкомицин, гризеофульвин, также
связаны с иммуносупрессией.
Эндогенные гормоны. Гиперадренокортицизм, дефицит гормона роста, сахарный
диабет и гиперэстрогенизм ассоциированы с приобретенными иммунодефицитными
болезнями. Гиперадренокортицизм проявляется подавлением иммунных функций вследствие
увеличения глюкокортикоидов, тогда как дефицит гормона роста вызывает
иммунодефицитное состояние,связанное с торможением созревания Т-лимфоцитов за счет
подавления
развития
тимуса.
Пациенты
с
сахарным
диабетом
проявляют
предрасположенность к кожным, системным и инфекциям мочеполового тракта, которые
могут быть напрямую связаны со снижением концентрации сывороточного инсулина или с
гликемией. Иммуносупрессивный эффект гиперэстрогенизма подобен таковому при
лейкопении.
3.1. ИММУНОСУПРЕССИЯ, ИНДУЦИРУЕМАЯ ВИРУСАМИ
То, что вирусы могут влиять на показатели иммунитета, было обнаружено von Pirquet
еще в 1908 году, когда он показал, что коревая инфекция задерживает развитие
гиперчувствительности замедленного типа у пациентов, у которых был нормальный ответ на
введение антигенов из микобактерий. Таким образом, von Pirquet был первым кто внес
иммунологический аспект объяснения в проявлении повышенной чувствительности к
суперинфекциям пациентов с вирусными заболеваниями. Следующим сообщением (1919г.),
подтвердившим эту гипотезу, явилось то, что вирус инфлюэнцы также подавляет реакцию
организма на туберкулин. В течение последующих 40 лет не было публикаций о влиянии
вирусов на иммунную систему. С начала 1960 года появились данные о том, что онкогенные
вирусы обладают иммуносупрессивным действием. Old и коллеги были первыми в этом
вопросе, а затем пять лет спустя Good с соавторами представили первую
систематизированную оценку супрессии антител, вызываемой вирусом лейкемии мышей. В
течение конца 1960-х и начала 1970-х наблюдался бум в этой области: появилось большое
количество сообщений, подтверждающих концепцию подавления иммунитета онкогенными
вирусами. Причем было показано, что угнетается как гуморальное, так и клеточное звено
иммунитета. Изучение многих неонкогенных вирусов показало, что они также проявляют
иммуносупрессивную активность. Многие исследователи рассматривали иммуносупрессию,
обусловленную вирусами, как важный фактор, вызывающий персистентные инфекции,
ведущие к хроническим заболеваниям и к формированию опухолей. Однако, в середине 70-х
количество исследований в этой области вирусологии резко сократилось, и их возрождение
относится к 80-м годам. При этом авторы пытались выяснить молекулярные механизмы,
обуславливающие вирус-индуцированную иммуносупрессию. Таким образом, "наука" об
изучении взаимоотношений между вирусом и иммунитетом не является новой. Активизация
исследований в этой области наметилась в последние годы. Этому способствовало открытие
и изучение вируса иммунодефицита человека.
Вирусы могут препятствовать развитию иммунного ответа несколькими путями:
• непосредственно лизировать лимфоидные клетки (например, вирус кори и вирус
чумы собак);
• инфицировать лимфоциты и различными путями нарушать их функции (например,
вирус лейкоза крс);
• продуцировать вирусные субстанции, которые могут непосредственно
препятствовать антигенному распознаванию или клеточной кооперации (например,
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 76 из 134
вирус лейкемии кошек);
• вторично индуцировать иммуносупрессию образованием большого количества
иммунных комплексов (например, вирус инфекционного перитонита кошек).
Вирус чумы собак (CDV), вирус лейкемии кошек (FeLV), парвовирусы вызывают
вирус-индуцированную иммунную дисфункцию через различные механизмы.
Вирусная коревая инфекция у человека может индуцировать временное состояние
иммуносупрессии за счет разрушения Т-лимфоцитов в Т-зависимых зонах лимфоидных
структур. Это обусловлено наличием специфических рецепторов вируса кори на
поверхности Т-клеток.
Вирус чумы собак тесно связан с вирусом кори, и хотя наличие эквивалентных
вирусных рецепторов на поверхности Т-клеток собак не доказано, имеются убедительные
клинические и экспериментальные данные, показывающие, что этот вирус также вызывает
состояние временной иммуносупрессии. В результате инфицирования им собак-гнотобиотов
наблюдается атрофия тимуса с генерализованным лимфоидным истощением, приводящее к
лимфопении. При этом нарушается бласттрансформация лимфоцитов in
vitro, однако способность отторгать аллогенный кожный трансплантат не изменяется.
Степень лимфоидного истощения, и, следовательно, появление Т-клеточной
иммуносупрессии коррелирует с исходом болезни. Более сильно поражены животные, у
которых отсутствует ответ на внутрикожное введение ФГА, они быстро погибают от
энцефалитов, в то время как животные, сохранившие Т-клеточный иммунный ответ, часто
выздоравливают.
Впрус чумы собак вызывает иммуносупрессию прежде всего за счет
цитотоксического действия при ранней репликации вируса в лимфоретикулярной ткани. В
результате, возникают некроз лимфоцитов в лимфатических узлах, селезенке, тимусе и
лимфопения. Кроме того, отмечается снижение Т-клеточного ответа на митогены in vitro и
снижение гуморального иммунного ответа при инфекциях, сопутствующих CDV. Это
наблюдается на ранней стадии заболевания с последующим вторичным развитием
бактериальных инфекций.
Иные механизмы лежат в основе иммуносупрессии, вызываемой вирусом лейкемии
кошек.
Заболевание, вызываемое FeLV, вероятно, является наиболее изученным в
ветеринарии. Инфицирование котят ведет к вирус-индуцированной деструкции лимфоидных
тканей с последующей их атрофией и повышенной чувствительностью к инфекциям. При
этом, большинство иммунных показателей снижены, и у животных нарушается способность
отторгать аллогенный кожный трансплантат. Обычно, инфекция ведет к иммуносупрессии
без явного разрушения лимфоидных тканей. Это связано с продукцией излишних количеств
вирусного оболочечного белка р!5Е. Точный механизм действия этого избытка неясен, но
есть предположение, что он препятствует активации лимфоцитов и распознаванию антигена.
В литературе описана иммуносупрессия, вызываемая дефект-реплицированным мутантом
вируса лейкемии кошек, которая происходила во время естественной болезни. Хотя FeLV
часто называют AIDS у кошек из-за его сходства с HIV инфекцией, более подходящей
моделью для животных может служить описанный Т-лимфотропный лентивирус кошек.
Для инфекции, вызываемой FeLV, характерным является атрофия тимуса,
лимфопения, низкий уровень комплемента в крови и высокий уровень иммунных
комплексов. При этом у кошек наблюдается повышенная чувствительность к различным
инфекциям, включающих инфекционный перитонит, герпесвирусные риниты, вирусную
панлейкопению, гемобартонеллез и токсоплазмоз. Дальнейшее развитие этих болезней
вызывает фундаментальный дефект Т-клеток, который проявляется in vitro выраженным
снижением Т-клеточного ответа на митогены. Первичному Т-клеточному дефекту
сопутствует вторичный функциональный дефект В-клеток. Но дефект В-клеток может быть
и не связан с дефектом Т-клеток. В-клетки не способны продуцировать IgG-антитела в
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 77 из 134
отсутствие Т-хелперов, но могут сохранять способность синтеза IgM-антител через Тклеточные независимые механизмы. Поэтому активность В-клеток только частично
нарушена при инфекции, вызываемой FeLV.
Проявление дефекта Т-клеток связано с отсутствием требуемой стимуляции для
активации Т-клеток. Сопутствующей проблемой является нарушение в продукции
интерлейкина-2, лимфокина, необходимого для сохранения и поддержки активации Тклеток, пролиферации и продукции Т-хелперов, что благоприятно влияет на продукцию
антител В-клетками. В иммуносупрессивном действии FeLV инфекции, вероятно, участвуют
два сывороточных фактора. Вирусный оболочечный белок р!5Е непосредственно вызывает
иммуносупрессию лимфоцитов и отменяет ответ лимфоцитов на различные митогенные
стимулы in vitro. Это действие, возможно, связано с его
способностью блокировать ответ Т-41 лимфоцитов на интерлейкин-1 и интерлейкин-2
и отменять синтез интерлейкина-2. Когда р!5Е вводят кошкам одновременно с вакциной
против FeLV, не происходит образования защитных антител к мембранному клеточному
антигену онкорнавируса кошек. Таким образом, р!5Е играет центральную роль в
иммуносупрессии, вызываемой FeLV как in vivo так и in vitro. К тому же, пораженные кошки
имеют высокий уровень циркулирующих иммунных комплексов, которые сами по себе
являются иммуносупрессорами.
FeLV может непосредственно нарушать миграцию Т-клеток из костного мозга в
периферические лимфоидные ткани, уменьшает число нормальных Т-клеток в тимусе,
селезенке и в лимфатических узлах. Очевидно, несколько различных механизмов поражения
В- и Т-клеток могут способствовать иммуносупрессии кошек, инфицированных FeLV.
Парвовирусная инфекция многих видов животных приводит к иммуносупрессии за
счет митолитического влияния вируса на деление стволовых клеток в костном мозге.
Следовательно, лимфопения и гранулоцитопения являются следствием прямого воздействия
инфекции, вызываемой этим вирусом. Парвовирусная инфекция собак также сопровождается
иммуносупрессией, и энцефалиты, обусловленные вакцинацией против чумы, описаны у
собак, экспериментально инфицированных парвовирусом.
Вирус панлепкопенпп кошек, как и парвовирус, обладает менее сильным
иммуносупрессивным эффектом, который в большей степени ограничивает временное
истощение Т-клеток. Возможный иммуносупрессивный эффект живой аттенуированной
вакцины, в частности, вакцины против парвовируса собак, остается под вопросом, но
считается, что одновременная иммунизация аттенуированными парвовирусом и вирусом
чумы безопасна и эффективна.
Инфекция жеребых кобыл, обусловленная герпесвирусом лошадей, может
вызывать аборты в последней трети беременности. Если жеребенок вынашивается к сроку,
он предрасположен к тяжелым инфекциям, которые обусловлены вирус-индуцированной
атрофией всех лимфоидных структур.
Вирусная диарея крупного рогатого скота - другой пример вирус-индуцированной
иммуносупрессии, которая сопровождается повреждением Т- и В-клеточного иммунитета.
Это способствует развитию хронического изнуряющего синдрома с персистирующей
инфекцией. Этот вирус также способен проходить через плаценту, вызывая
иммунологическую толерантность и снижение иммунного ответа у телят.
Вирус лейкоза крупного рогатого скота - проявляет тропизм к В-клеткам, в которых
он вызывает пролиферацию и иногда неопластическую трансформацию. Влияние его на
иммунологические параметры зависит от типа и стадии болезни. Обычно наблюдается
лимфоцитоз с увеличением количества В-клеток, экспрессирующих поверхностные
иммуногл обул ины.
3.2. ИММУНОСУПРЕССИЯ, ВЫЗЫВАЕМАЯ БАКТЕРИЯМИ
В сравнении с вирусными инфекциями, при которых иммуносупрессивный эффект
обычно связан с прямым инфицированием лимфоидных тканей, механизм вторичной
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 78 из 134
иммуносупрессии при бактериальных болезнях недостаточно изучен.
При болезни Ионе наблюдается парадокс, при котором несмотря на выраженный
клеточный иммунный ответ к возбудителю, соответствующая реакция к другим антигенам
может быть нарушенной или не проявляться совсем. Так у пораженного крупного
рогатого скота не развивается кожная реакция на туберкулин. Такая же ситуация
наблюдается при хронических микобактериальных болезнях у человека, при которых
отмечается состояние анергии. При этом, лимфоциты не подвергаются трансформации в
ответ на ФГА in vitro, увеличивается число клеток-супрессоров в присутствии растворимого
фактора, который препятствует проявлению клеточных реакций.
К концу последнего десятилетия стало очевидным, что отсутствие стимуляции
лимфоцитов in vitro ассоциируется со многими хроническими болезнями инфекционного и
неинфекционного происхождения. Лимфоциты не способны отвечать на митогены в
присутствии гомологичной нормальной сыворотки или фетальной сыворотки крупного
рогатого скота. В других случаях лимфоциты проявляют реакцию, которая возникает при
выделении их из аутологичной сыворотки. Супрессия в этом случае связана с действием
супрессивных сывороточных иммунорегуляторных факторов. Причастность этих веществ к
иммунному ответу in vivo остается неясной. Известно только, что вещества с такими
свойствами обнаружены во многих сыворотках, полученных от нормальных и больных
животных, однако природа этих веществ не установлена. Также неясно, являются ли они
причиной болезни, или образуются в процессе ее, участвуя в механизме, с помощью
которого микробный агент проявляет в дальнейшем свою патогенность. Необходимы
эксперименты, чтобы показать повышение патогенности микроорганизмов под воздействием
этих факторов, поскольку возможно, что они в этих случаях не играют никакой роли.
3.3. ИММУНОДЕФИЦИТ, АССОЦИИРОВАННЫЙ С ДЕМОДЕКОЗОМ У
СОБАК
Демодекоз собак является очень интересным, хотя не очень понятым примером
иммуносупрессии, ассоциированной с паразитарными инфекциями. Это расстройство часто
встречается у чистокровных собак, которые являются хозяином большого количества
чесоточных клещей Demodex canis. Болезнь появляется как результат наследственного
дефекта, позволяющего клещам размножаться и персистировать у хозяина. В то же время
установлено, что клещи вызывают дополнительную иммуносупрессию посредством
различных механизмов.
Особая генетическая чувствительность собак, предопределяющая развитие
демодекоза, детерминируется их неспособностью к развитию гиперчувствительности
замедленного типа при внутрикожной инъекции клещевого антигена. Молекулярные основы
этого дефекта остаются невыясненными.
Многие исследователи изучают роль иммуносупрессии как этиологический фактор
при демодекозе у собак с различными результатами, которые далеки от убедительных и
каждая сторона имеет своих оппонентов. В защиту гипотезы, что демодекоз является
результатом иммунодефицита Т-клеток свидетельствуют следующие наблюдения:
• лимфоциты, полученные от животных с демодекозом, проявляют in vitro слабую
реакцию бласттрансформации под воздействием ФГА;
• внутрикожная проба с ФГА у Доберман-пинчеров сильно пораженных
демодекозом, значительно снижена в сравнении со здоровыми животными того же
возраста.
Другие данные свидетельствуют против предполагаемой роли иммунодефицита при
демодекозе:
• иммуносупрессия исчезает при уничтожении популяции клещей;
• иммуностимуляция животных левамизолом приводит к реверсии иммуносупрессии;
• факторы, супрессирующие бластогенез, обнаруживаются при демодекозе только при
наличии вторичной стафилококковой инфекции, и не обнаруживаются в сыворотке собак с
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 79 из 134
чешуйчатой формой болезни, при которой нет ассоциации со вторичными бактериальными
инфекциями. Поэтому, угнетение функции Т-клеток не связано с пролиферацией клещей
Demodex, а скорее всего является результатом вторичной стафилококковой инфекции.
Большинство данных свидетельствуют о том, что иммуносупрессия, наблюдаемая при
демодекозе, является результатом вторичной пиодермы и не имеет этиологической роли в
пролиферации клещей Demodex. Если в действительности иммунный ответ связан с
этиологией демодекоза, существует одна гипотеза, по которой имеет место первичный
дефект антиген-специфичных Т-клеток, который дает начальную пролиферацию клещей.
Несмотря на вероятность того, что иммуносупрессия не является причиной
демодекоза, необходимо помнить, что у животных с генерализованной формой болезни, всетаки, отмечается состояние иммуносупрессии. В результате этого, иммунопрофилактические
мероприятия у них оказываются недостаточно эффективными.
Генерализованный демодекоз собак приводит к развитию иммуносупрессии. Функции
Т-клеток, как показывают результаты исследований бласттрансформации лимфоцитов под
воздействием митогенов in vitro, и реакция гиперчувствительности замедленного типа на
конкавалин А резко снижены. Интересным является то, что подавление реакции лимфоцитов
на митогены in vitro имеет место только в присутствии сыворотки от пораженных собак.
Если лимфоциты от пациента отмываются и инкубируются с нормальной сывороткой
собаки, то процесс бласттрансформации протекает нормально. Эти результаты позволяют
предполагать присутствие в сыворотке фактора супрессии, индуцированного популяцией
клещей. В поддержку этого положения свидетельствует тот факт, что лимфоциты от
нормальных собак имеют пониженную реакцию на митогены в случае, когда инкубируются с
сывороткой от собак больных демодекозом. Фактор супрессии располагается в бетаглобулиновой фракции сыворотки пациента, и некоторые исследователи предполагают, что
он действительно представляет комплекс антиген-антитело, состоящий из антигена клеща и
антител хозяина. Поэтому, иммуносупрессивное действие циркулирующих иммунных
комплексов выражается в снижении функции Т-клеток, что характерно для многих
заболеваний подобных вирусной лейкемии кошек. Если возникает такая ситуация, дефект Тклеток следует рассматривать как результат болезни, или же он связан С образованием
пиодермы. Вряд ли здесь имеют место какие-либо другие причины. Это положение
подтверждается наблюдениями, когда уничтожение популяции клещей и вызываемых ими
пиодермальных эффектов, возвращает способность к нормальному Т-клеточному ответу на
митогены. Гуморальный иммунитет, функции нейтрофилов и количество Т-клеток у собак с
демодекозом остаются в норме.
В заключение, следует отметить, что демодекоз скорее всего является результатом
врожденного дефекта Т-клеток, позволяющего клещу Demodex canis инфицировать хозяина.
Присутствие большого числа клещей способствует дополнительному снижению функции Тклеток посредством образования сывороточного фактора супрессии, приводящего к
генерализованному иммунодефициту.
Вопросы для самоконтроля:
1. Определение
2. иммуносупрессия индуцированная вирусами
3. иммуносупрессия индуцированная бактериями
4. иммунодифецит ассоциированный с демодекозом у собак
Рекомендуемая литература: 1.В.Д.Соколов Фармакология, 1977г.
Лекция 5. Нарушение пассивной передачи антител.
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 80 из 134
Содержание лекционного занятия:
1. Определение
2. Особенности трансплацентарной передачи иммунитета
3. Нарушения и особенности колострального иммунитета
Нарушение пассивной передачи материнских антител -один из наиболее
распространенных примеров приобретенного иммунодефицита в ветеринарии, который
является главной причиной неонатальной инфекции и ранней смертности преимущественно
у жеребят, телят, козлят, ягнят и поросят. Нарушение в получении молозива вызывает у
новорожденных омфалофлебиты, септические артриты, септицемию, пневмонию и диарею.
Повышенная чувствительность к инфекции является результатом отсутствия материнских
иммуноглобулинов, которые необходимы для прямого бактерицидного действия на патогены
и для их опсонизации.
Важность этого положения зависит от родственного содействия плацентарной в
сравнении с колостральной передачей антител в защите новорожденных, которое является
отражением формирования плаценты. Плацента кобыл, ослиц, коров, овец и свиней
препятствует передаче иммуноглобулинов от матери потомству, в то время как эндотелиохориальная плацента у собак и кошек обеспечивает ограниченный их трансплацентарный
перенос. Считается, что кишечная абсорбция иммуноглобулинов имеет место только в
первые 24 часа, и один из авторов отмечает, что у собак не происходит абсорбции после
этого времени. Абсорбция наиболее эффективна в первые 6 часов.
Недостаток молозива у матери не оказывает существенного влияния на щенков, пока
поддерживаются гигиенические условия, однако есть сообщения, которые предполагают, что
недостаток молозива у кошек способствует увеличению заболеваемости и смертности у
котят. Безусловно, недостаток пассивной передачи антител с молозивом имеет важное
значение у коров, лошадей, овец и свиней, и очень трудно вырастить новорожденных телят,
жеребят, ягнят и поросят даже в идеальных условиях при полном отсутствии молозива.
Жеребята обычно рождаются по существу агаммаглобулинемичными только с
небольшим количеством IgM, обнаруживаемого в их сыворотке. С другой стороны, ягнята
способны образовывать низкий уровень IgGl и IgM в поздней стадии беременности, но
лишены IgG2 и IgA при рождении. В обоих случаях защита новорожденных зависит от
получения молозива. Отсутствие материнских антител у новорожденных препятствует
борьбе организма с инфекционными агентами, с которыми он сталкивается в ранней жизни.
Получение молозива новорожденными приводит к кишечной абсорбции большого
количества интактных материнских иммуноглобулинов в течение первых 6-8 часов жизни.
Ингибиторы трипсина в молозиве препятствуют разрушению глобулинов в желудке
новорожденного. Абсорбция этих глобулинов происходит посредством рецепторов для Fcфрагмента иммуноглобулина, расположенных на поверхности эпителиальных клеток
кишечника. Эти свойства клеток, которые обеспечивают кишечную абсорбцию материнских
антител, быстро снижаются после 12 часов; между 24 и 48 часами после рождения кишечник
не способен абсорбировать иммуноглобулины, несмотря на высокую концентрацию
иммуноглобулинов в кишечном содержимом. Прекращение абсорбции ассоциируется с
замещением специализированных иммуноабсорбтивных энтероцитов зрелым эпителием.
Обычно, абсорбированные материнские антитела постепенно исчезают в течение 6-8 недель
жизни, как только новорожденные начинают синтезировать собственные антитела.
Нарушение пассивной передачи материнских антител может иметь место у любого
вида домашних животных, но наиболее документировано у лошадей. Сообщения
показывают, что нарушение передачи материнских антител может достигать у 24% жеребят.
Нарушение передачи может определяться материнскими факторами, а также состоянием
самих новорожденных и факторами окружающей среды. У некоторых матерей может
нарушаться образование молозива с достаточной концентрацией иммуноглобулинов,
преимущественно из-за генетического дефицита. С другой стороны, матери с нормальной
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 81 из 134
продукцией молозива теряют иммуноглобулины в связи с преждевременной лактацией.
Преждевременная лактация является главной причиной нарушения пассивной передачи и
ассоциируется с плацентитами, двойневой беременностью и преждевременным отделением
плаценты у лошади. Концентрация колостральных иммуноглобулинов ниже чем Юмг/мл,
свидетельствующая о ненормальной продукции или преждевременной лактации, вызывает
нарушение в пассивной передаче.
Жеребенок должен получать адекватное количество молозива в течение первых 12
часов жизни. Слабые или неприспособленные жеребята могут не получить необходимого
количества. Скользкие полы усложняют процесс приема молозива. В этих случаях
необходимо его скармливать из бутылки. Некоторые новорожденные жеребята не
приспособлены хорошо пить из бутылки, поэтому они могут получать недостаточное
количество молозива. Если жеребенок получил адекватное количество молозива, эпителий
кишечника должен абсорбировать иммуноглобулины, причем скорость абсорбции варьирует
у каждого жеребенка. Эндогенная продукция глюкокортикоида, ассоциированная со
стрессом, может приводить к уменьшению абсорбции IgG специализированными
иммуноабсорбтивными энтероцитами. Таким образом, нарушение пассивной передачи
может иметь место по следующим причинам: количество и качество материнского молозива,
способность жеребенка потреблять достаточное количество молозива и способность
жеребенка абсорбировать иммуноглобулины.
В последние годы в литературе широко представлены данные по иммунодефицитам у
телят, поросят и ягнят, связанные с несвоевременным и недостаточным получением
молозива после рождения. Показано, что на процесс абсорбции иммуноглобулинов
кишечником новорожденных животных влияют различные факторы окружающей среды и
хозяйственной деятельности. При этом, заболеваемость и смертность молодняка находятся в
прямой зависимости от времени получения первого молозива.
Диагноз нарушения пассивной передачи антител основан на определении
концентрации IgG в сыворотке крови новорожденных животных в течение первых 12 часов
жизни. Для этого используются 3 метода: тест помутнения с сульфатом цинка, радиальная
иммунодиффузия или латекс-агглютинация. Тест помутнения является быстрым простым
методом, в котором сульфат цинка (у жеребят), сульфат натрия (у телят) или сульфат
аммония (у поросят) добавляется к испытуемой сыворотке. Полученные преципитаты
иммуноглобулинов, могут быть качественно измерены колориметрически при 485 нм.
Жеребята, которые имеют в сыворотке больше чем 8 мг/мл иммуноглобулинов, имеют
хорошую материнскую передачу. Значение между 4 и 8 мг/мл свидетельствует о частичном
нарушении передачи, и уровень ниже 4 мг/мл указывает на значительное нарушение
колостральной абсорбции. Значения для каждого вида отличаются. Телята с содержанием
иммуноглобулинов более 16 мг/мл имеют хорошую абсорбцию, уровень между 8 и 16 мг/мл
показывает пониженную абсорбцию, и нарушение материнской передачи является явной,
когда уровень ниже 8 мг/мл. Тест помутнения с сульфатом цинка является
полуколичественным и имеет тенденцию к завышенной оценке уровня IgG в сыворотке.
Поэтому, действительная концентрация IgG в сыворотке ниже 4 мг/мл может казаться выше
в тесте помутнения, и эти иммунологически дефицитные жеребята могут не получать
надлежащего лечения. Реакция с сульфатом цинка зависит от таких факторов, как
температура, срок хранения и приготовления раствора сульфата цинка.
Более точным методом, с помощью которого определяется уровень IgG в сыворотке
крови животных, является простая радиальная иммунодиффузия. Этот тест является
коммерчески доступным, но время инкубации (18-24 часа), необходимое для постановки
реакции, сдерживает его использование для диагностики пассивной передачи в течение
первых критических 12 часов жизни. Латекс-агглютинация является коммерчески доступным
тестом в практике для диагностики пассивной передачи и является более точным, чем
турбидиметрический тест. Данные латекс-агглютинации на 90% согласуются с данными РИД
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 82 из 134
в определении уровня IgG менее чем 4 мг/мл. Латекс-тест требует смеси 5 мкл исследуемой
сыворотки с разведенным соответствующим образом набором с последующей визуальной
оценкой агглютинации. Главным недостатком этого теста является то, что он не позволяет
дифференцировать концентрацию 4 мг/мл от 8 мг/мл у жеребят.
Как только установлено нарушение пассивной передачи, для коррекции дефицита
необходимо выпаивание молозива из бутылки или внутривенное введение
иммуноглобулинов (в зависимости от возраста новорожденного). Введение 4 л плазмы в
течение 2-5 дней необходимо для обеспечения надежного уровня IgG. Доноры плазмы
должны быть свободны от антиэритроцитарных лизинов и агглютининов и содержаться в
этих же условиях что и жеребята по крайней мере в течение нескольких месяцев.
Коммерчески доступная плазма лошади, сертифицированная как негативная к
эритроцитарным аллоантителам, также может быть использована в практике коневодства
при лечении нарушения пассивной передачи.
Вопросы для самоконтроля:
1. Определение
2. Особенности трансплацентарной передачи иммунитета
3. Нарушения и особенности колострального иммунитета
Рекомендуемая литература: 1.В.Д.Соколов, Фармакология 1977г.
Лекция 6. Механизм вирус-индуцированной иммуносупрессии.
Содержание лекционного занятия:
1. Инфицирование лимфоидных клеток.
2. Активация клеток супрессоров
3. Супрессорные факторы
4. Другие механизмы напрвленные на возникновение вирус-индуцированной
иммуносупрессии.
5. Факторы способные оказать влияние на иммуносупрессию, вызываемую вирусами.
6. Генерализованная вирус-индуцированная иммуносупрессия
7. Влияние иммуносупрессии на патогенез
Несмотря на то, что существуют убедительные доказательства того, что фактически
все вирусы подавляют иммунную систему, механизмы их воздействия различны. В этой
главе дается краткое описание различных механизмов, которые могут быть вовлечены в
иммуносупрессию, обусловленную вирусами.
1. Инфицирование лимфоидных клеток
Основной и очевидный путь подавления функции иммунной системы у вируса - это
его репликация в клетках, отвечающих за эти функции (рис.2).
Это механизм для ряда вирусов, способных внедряться в Т- и В-лимфоциты или
макрофаги. Инфицирование лимфоидных или моноцитарных клеток может приводить к
направленному их разрушению. Снижение количества иммунокомпетентных клеток
однозначно приводит к снижению иммунной функции в целом. Даже если только одна
субпопуляция клеток направленно инфицирована, возникает нарушение иммунной системы,
например, Th-клетки, поражающиеся при HIV-инфекции. При разрушении Th-клеток
происходит увеличение Ts-клеток и усиливается иммуносупрессия; если инфицируются Tsклетки, происходит усиление активности В-клеток или Т-эффекторных клеток, что может
вызывать усиление имму-нопатологических процессов.
В отсутствие открытой литической инфекции, поражение лимфоидных клеток
приводит к возникновению персистентной инфекции, что представляет собой вирусную
реплика-цию, не сопровождающуюся активным (полным) разрушением клеток организма.
Важным является то, что в лимфоидной системе должен быть хотя бы один
подходящий участок для персистенции вируса. Все вирусы, которые реплицируются в
лимфоцитах и макрофагах, известны. Высокоцитопатические вирусы, такие как адено- и
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 83 из 134
энтеровирусы, способны персистировать в этих клетках, устанавливая т.н. культуральное
равновесие с клеточной популяцией. В присутствии этих персистирующих вирусов
инфицированные клетки могут нормально функционировать, прекращать или изменять свои
функции.
Одной из таких функций является повышение активности клеток-супрессоров. В
дополнение к этому, инфицирование лимфоцитов может изменять их способность к
нормальной миграции, что приводит к определенному увеличению или снижению
популяций или субпопуляций лимфоидных клеток в лимфоидных органах и кровеносных
сосудах. При некоторых вирусных инфекциях установлено избирательное истощение
специфических лимфоидных зон. Соответствующие изменения в микросреде органов,
возникающие благодаря дефекту в геноме, могут способствовать иммунодепрессии. При
ряде вирусных инфекций животных и человека подобный механизм иммуносупрессии не
установлен.
2. АКТИВАЦИЯ КЛЕТОК-СУПРЕССОРОВ
Усиление активности клеток-супрессоров может происходить при вирусных
инфекциях, подобных ретровирусным. Инфицирующие вирусы, непохожие на большинство
антигенов, являются самореплицирующими иммуногенами. Они не только экспрессируют
свои антигены на поверхности различных типов клеток, но также стимулируют экспрессию
новых клеточных антигенов. Если новые антигены являются антигенами МНС, они могут
создавать условия для антигенной презентации клеткам, имеющим обычно в своем составе
другие антигены.
Таким образом, вирусы способствуют перегрузке иммунной системы и активируют ее
различными способами. При этом избыточная стимуляция иммунорегуляторного механизма
способствует повышению активности клеток-супрессоров. Большинство супрессорных
клеток, описанных при вирусных инфекциях, являются Ts или макрофагами, хотя В- и NKклетки также обладают супрессорной активностью. Супрессорные клетки могут
стимулировать свою активность напрямую через клеточные взаимодействия или с помощью
супрессорных факторов.
3. СУПРЕССОРНЫЕ ФАКТОРЫ
Супрессорные факторы могут продуцироваться лимфоцитами, макрофагами или
инфицированными клетками. Ряд факторов, имеющий широкий спектр молекулярной массы
и различную активность, описан для лимфоидных клеток и макрофагов. Эти факторы
специфически подавляют только иммунный ответ к вирусам или же обладают
неспецифической активностью. При некоторых инфекциях могут обнаруживаться факторы
со специфическими и неспецифическими компонентами. Супрессорные факторы также
секретируются вирустрансформированными опухолевыми клетками. Когда супрессия
связана с факторами, продуцируемыми макрофагами, это может быть обусловлено
действием простагландина Е2 (PGE2). Это свидетельствует о том, что инфекция может вести
к избыточной продукции нормальных факторов организма, которые вызывают
иммуносупрессию. Другим примером природного фактора, который
может сдерживать иммунные функции в процессе инфекции, является интерферон.
Несмотря на то, что IFN обладает прямым антивирусным и иммуностимулирующим
действием, при определенных обстоятельствах он может быть иммуносупрессором.
Компоненты вириона
Вирион сам по себе может быть иммунодепрессантом за счет компонентов,
токсичных для лимфоцитов и способных выключать клеточные функции или индуцировать
супрессорные клетки. В некоторых случаях инактивированный вирус или очищенные
компоненты вириона могут подавлять иммунитет в отсутствие репликации вируса. При этом
неизбежна реверсия иммунной супрессии, если не удается попытка не только нейтрализовать
вирус, но и удалить вирусные белки.
4. ДРУГИЕ МЕХАНИЗМЫ, НАПРАВЛЕННЫЕ НА ВОЗНИКНОВЕНИЕ
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 84 из 134
ВИРУС-ИНДУЦИРОВАННОЙИММУНОСУПРЕССИИ
Повреждение нелимфоидных тканей вирусами может опосредованно привести к
супрессии иммунного ответа.
Например, инфицирование мышей некоторыми вирусами вызывает повреждение
тканей поджелудочной железы в результате повышенного уровня ферментов, что в конечном
счете обусловливает иммунную супрессию. Воздействие вируса на кору надпочечников
может служить причиной кортикостероидного дисбаланса, ведущего к иммунной супрессии.
Несмотря на то, что трудно объяснить механизм возникновения иммуносупрессии под
воздействием вирус-индуцированного стресса, тем не менее значение этого фактора
необходимо учитывать. В ряде случаев адреналэктомия, предшествующая вирусной
инфекции, препятствовала или способствовала развитию функциональных нарушений
иммунной системы. Роль других физиопатологических нарушений, способных изменять
иммунитет организма при вирусных инфекциях, изучается.
5.
ФАКТОРЫ,
СПОСОБНЫЕ
ОКАЗАТЬ
ВЛИЯНИЕ
НА
ИММУНОСУПРЕССИЮ, ВЫЗЫВАЕМУЮ ВИРУСАМИ
Множество факторов может оказать непосредственное влияние на развитие вирусных
инфекций или в большей степени опосредованно через иммунную систему, способствуя
возникновению и проявлению иммуносупрессии. Наиболее важные из них: возраст, генотип,
наличие других инфекций или болезней и факторы окружающей среды. При
функциональном нарушении иммунной системы по физиологическим, или патологическим
причинам, организм подвергается воздействию вирус-индуцированной иммуносупрессии в
большей степени, чем организм с нормально функционирующей иммунной системой.
5.1. Возраст
Установлено, что очень молодые животные часто более восприимчивы к инфекциям,
чем взрослые. Это связано с иммунной компетенцией организма, особенно с Т-клеточной ее
функцией. Пожилые особи также более чувствительны к вирусным инфекциям, что связано с
их иммунным статусом. То, что молодые животные более восприимчивы к
иммунодепрессивному действию большинства вирусов, было показано в различных
системах, включая ретровирусы. Однако, если патологические процессы, вызываемые
вирусом иммунологически опосредованы, снижение иммунной компетенции в ряде
случаев может оказаться благоприятным. Примером может служить инфицирование
мышей вирусом лимфоцитарного хориоменингита (LCMV), летальный эффект которого
зависит от функционирования Т-лимфоцитов. У новорожденных мышей эти клетки
недостаточно развиты, поэтому вирус накапливается в высоких титрах, но болезнь протекает
не в острой форме. У этих мышей развивается Т-клеточная толерантность к LCMV, которая,
в свою очередь, вызывает проявление генерализованной имму но депрессии.
5.2. Генотип
Устойчивость к вирусным инфекциям контролируется на генетическом уровне. Эти
гены могут быть ассоциированы с главным комплексом гистосовместимости (МНС) или
присутствовать в другом месте генома. В некоторых случаях генетический контроль
макрофагальной или МК-клеточной функций требует сопутствующих действий генов
локусов МНС и других вовлеченных локусов. Было установлено, что у вирус-резистентных
мышей, как правило, не наблюдается подавления иммунной реактивности при абортивных
инфекциях, не учитывая поражения клеток.
5.3. Наличие других инфекций и болезней
Иммунокомпромиссные особи имеют почти такую же вероятность инфицирования
вирусом, как и нормальные особи, но при инфицировании у них отмечают более тяжелую
форму болезней и высокий уровень смертности. Некоторая иммунологическая стимуляция
может увеличивать восприимчивость к инфекции. Супрессия при большинстве вирусных
инфекций обычно следует за активным, часто очень высоким иммунным ответом. Таким
образом, иммуносупрессивное состояние организма является следствием причин, иногда
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 85 из 134
приводящих к репликации вируса в небольшом проценте клеток, когда организм не способен
противостоять малому количеству инфекционных частиц. Активизация процесса
пролиферации может приводить к увеличению количества клеток для вируса до
формирования иммунитета. В это же время вирус может накапливать свою супрессивную
активность до возникновения иммунного ответа.
6.
ГЕНЕРАЛИЗОВАННАЯ
ВИРУС-ИНДУЦИРОВАННАЯ
ИММУНОСУПРЕССИЯ
Вне зависимости от механизма супрессии, характер и уровень снижения иммунитета
может изменяться в зависимости от вируса. Это касается вирусов, которые подавляют одно
или несколько звеньев иммунного ответа (главным образом реакции клеточного звена
иммунитета). Иногда вирус может быть причиной генерализованной иммуносупрессии, при
которой все иммунные функции снижаются.
Это наблюдается на поздних стадиях многих ретровирусных инфекций.
В то же время можно наблюдать снижение ответа к митогенам или невирусным
антигенам, в то время, как антивирусный ответ остается нормальным. Причины этого
непонятны, но, возможно, они связаны с селективным эффектом в особой лимфоидной
клеточной субпопуляции. Также отмечена обратная ситуация, при которой иммунный ответ
на вирусный антиген угнетается, а иммунная реакция на другие антигены остается
неизменной. В этом случае, супрессируются только антивирусные эффекторные клетки или
их
предшественники.
Для
объяснения
этих
фактов
выдвинута
концепция
вирусиндуцированной иммунологической толерантности и супрессии как механизмов, с
помощью которых вирусы могут изменять иммунную реактивность. При индуцированной
толерантности происходит генерализованное воздействие только на иммунный ответ
к вирусным антигенам, и Т-6 специфический (антигены МНС класса И) и/или В- и Тспецифический ответ может быть подавлен. С другой стороны, при инфекциях, которые
сопровождаются индукцией супрессорных клеток, также наблюдается нарушение ответа на
гетерологичные антигены и/или на митогены. В иных случаях, связь между
вирусспецифической и генерализованной иммуносупрессией непонятна. Скорее всего, что
второе необходимо для первого.
7. ВЛИЯНИЕ ИММУНОСУПРЕССИИ НА ПАТОГЕНЕЗ
Комплекс взаимодействий между вирусами и иммунной системой до конца не изучен.
Однако, в ряде случаев существует объяснение того, как эта связь может изменить баланс в
пользу организма или вируса. Это характерно для инфекций, при которых вирус может быть
причиной разрушения большого числа иммунокомпетентных клеток. В конечном итоге,
развитие генерализованных иммунодефицитов увеличивает вероятность того, что в
организме будут развиваться вторичные инфекции, которые зачастую фатальны.
При определенных обстоятельствах возможность вируса сделать компромиссной
иммунную систему кажется несущественной в патогенезе. Это характерно для некоторых
живых аттенуированных вакцин, которые временно подавляют иммунитет с неясными
последствиями для иммунокомпетентных индивидуумов. Однако, в иммунокомпромиссном
организме эти вакцины могут иметь разрушительный эффект. Отсутствие иммунной
супрессии при некоторых патологических состояниях в какой-то степени является загадкой,
но чаще всего это связано с тем, что пораженная иммунная система не включает важные
механизмы антимикробной защиты, такие как CTL. Кроме того, возможно, супрессивные
эффекты, вызванные вирусом, являются непродолжительными для того, чтобы быть
причиной нарушений в организме.
В заключение, можно отметить позитивные аспекты иммунной супрессии с точки
зрения организма. Вирусспецифический иммунный ответ может иметь патологические
последствия, которые устраняются супрессией этого ответа. Хотя в этих случаях необходимо
иметь в виду, что снижение иммунных реакций, предотвращающее острый патогенез, может
способствовать персистенции вируса и возникновению хронических болезней. Таким
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 86 из 134
образом, необходимо поддерживать баланс иммунного ответа и вирусиндуцированной
иммуносупрессии при разработке методов эффективной терапии, противодействующей
вирусным инфекциям. Повышенная иммунная реактивность, если она не сбалансирована,
зачастую является бесполезной для организма.
Вопросы для самоконтроля:
1. Как происходит инфицирование лимфоидных клеток.
2. Какое значение имеет активация клеток супрессоров
3. Супрессорные факторы
4. Другие механизмы напрвленные на возникновение вирус-индуцированной
иммуносупрессии.
5. Факторы способные оказать влияние на иммуносупрессию, вызываемую вирусами.
6. Генерализованная вирус-индуцированная иммуносупрессия
7. Влияние иммуносупрессии на патогенез
Рекомендуемая литература: 1.В.Д.Соколов, Фармакология 1977г.
Лекция 7. Методы клинико-иммунологической диагностики.
Содержание лекционного занятия:
1.Иммунологические методы.
2. Определение Т-клеточных дефицитов
3. Определение В-клеточных дефицитов
4. Определение дефицитов нейтрофилов
5. оперделение дефицита комплимента
6. Современные методы изучения нарушений функциональной активности иммунной
системы.
1. Иммунологические методы, используемые в экспериментальных исследованиях и
клинической практике, достаточно разнообразны. С их помощью можно определять
иммунный статус животных в норме и при патологии, осуществлять контроль за
восстановлением иммунологической компетентности организма в процессе лечения
методами иммунотерапии. Для определения первичного или вторичного иммунодефицита
необходимо использовать лабораторные методы, которые позволяют определить количество
и функциональную активность Т-, В-клеток и нейтрофилов. Кроме того, проводится
количественное определение компонентов комплемента в сыворотке крови для установления
их роли в иммунной дисфункции. При этом, выбор методов и рекомендаций по их
практическому применению представляет определенную проблему, поскольку многие из них
не являются рутинными в ветеринарной клинической практике и используются только в
научно-исследовательских лабораториях или находятся на стадии разработок. Тем не менее,
некоторые методы могут служить важным инструментом распознавания и понимания
иммунодефицитов животных (Табл.5, 6).
2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ Т-КЛЕТОЧНЫХ ДЕФИЦИТОВ
Для определения количества или функциональной активности Т-клеток обычно
используется следующие лабораторные тесты:
• дифференциальный подсчет количества лейкоцитов (лейкограмма);
• реакция гиперчувствительности замедленного типа (кожный тест);
• спонтанное розеткообразование лимфоцитов с эритроцитами барана;
• реакция бласттрансформации лимфоцитов.
Лимфопения, обнаруженная с помощью обычной лейкограммы, часто отражает
уменьшение числа Т-клеток, поскольку у большинства видов животных Т-клетки составляют
около 75% лимфоцитов крови. Поэтому, уменьшение общего количества лимфоцитов
обычно связано с уменьшением Т-клеток.
Реакция гиперчувствительности замедленного типа, определяемая с помощью
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 87 из 134
кожного теста, используется у некоторых видов животных для оценки функциональной
активности Т-клеток. Например, когда жеребятам с комбинированным иммунодефицитом
вводят внутрикожно фитогемагглютинин, то у них не развивается положительная реакция. У
собак наблюдается слабая реакция гиперчувствительности замедленного типа на введение
большинства антигенов и митогенов, поэтому использование этого метода для оценки Тклеточного дефицита у этого вида требует осторожной интерпретации результатов.
У человека 100% циркулирующих Т-клеток спонтанно образуют розетки с
эритроцитами барана, поэтому этот метод является простым и достоверным методом
определения Т-клеток. У животных этот метод менее достоверен, поскольку не все Т-клетки
формируют розетки с эритроцитами барана (у собак только 50%).
Способность лимфоцитов in vitro отвечать на некоторые митогены клеточным
делением и пролиферацией лежит в основе реакции бласттрансформации, используемой для
оценки функций Т-клеток. В этом методе наиболее часто используются такие митогены как
конкавалин А и фитогемагглютинин. Использование В-клеточного митогена позволяет
оценивать функцию В-клеток. Различные виды животных отличаются по чувствительности к
митогенам, поэтому необходим тщательный выбор митогена и схемы его применения.
3. ОПРЕДЕЛЕНИЕ В-КЛЕТОЧНЫХ ДЕФИЦИТОВ
Для определения количества функционально активных В-клеток в крови
используются:
• метод иммунофлюоресценции основан на выявлении молекул иммуноглобулина,
находящихся на поверхности В-клеток с использованием конъюгированных антител к IgG,
IgA, IgM соответствующего вида животных;
• метод комплементарного розеткообразования (ЕАС) основан на образовании розеток
с эритроцитами барана, сенсибилизированных антителами к эритроцитам барана и
комплементом. Метод недостаточно стандартизирован для рутинного использования в
ветеринарии;
• метод гемолитических бляшек используется для идентификации антителопродуцирующих В-лимфоцитов и включает химическое связывание антигена с
эритроцитами барана, использование плат с кровяным агаром, куда добавляется суспензия
лимфоцитов. Иммуноглобулины, секретируемые В-клетками, связываются с эритроцитами,
покрытыми антигеном. При добавлении раствора, содержащего комплемент, происходит
лизис сенсибилизированных эритроцитов с образованием зоны гемолиза вокруг каждой
функционально активной В-клетки. Число В-клеток определяется подсчетом количества
гемолитических бляшек. Вариации этого теста (прямой, непрямой, обратный) используются
для идентификации таких состояний как селективная субкласс-специфическая
агаммаглобулинемия (например, селективный IgA-дефицит). В этом случае используется
обратный вариант метода, который включает в себя взаимодействие эритроцитов барана с
aHTH-IgA-антителами;
• метод радиальной иммунодиффузии (РИД) для количественного определения
уровня иммуноглобулинов (IgG, IgM, IgA) в сыворотке крови, по результатам которого
можно судить о функциональных свойствах В-клеток. При постановке РИД
моноспецифическую антисыворотку (или моноклональные антитела, обладающие
преципитирующей активностью) к отдельным классам иммуноглобулинов диспергируют в
агаровый гель, смесь наносят на стекло и в застывшем агаре вырезают лунки, в которые
вносят испытуемые сыворотки. Антиген (IgG, IgM, IgA) диффундирует в гель, и,
взаимодействуя с антителами, образует вокруг лунки кольцо преципитации, диаметр
которого прямо пропорционален концентрации иммуноглобулина в испытуемой пробе.
Наряду с исследуемым материалом в другие лунки вносят раствор антигена уже известной
концентрации (стандартная сыворотка). Диаметр кольца преципитации, измеренный через
24- 48 часов, сравнивают со стандартом. Количество Ig определяется по измерению диаметра
кольца преципитации относительно калибровочной кривой, которая строится с
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 88 из 134
использованием стандартной сыворотки. Метод обладает высокой чувствительностью и
воспроизводимостью, кроме того он прост и доступен;
• метод ракетного иммуноэлектрофореза (или электроиммунодиффузии), является
модификацией РИД и может также широко применяться для количественного определения
1д в исследуемых сыворотках. Метод основан на соединении техники электрофореза и
основных принципов РИД (феномен преципитации, определение концентрации антигена по
стандартной кривой). При этой модификации антиген, внесенный в лунки агара, смешанного
с антителами, подвергают электрофоретическому разделению до формирования пика
преципитата в форме ракеты. Высота полосы преципитации пропорциональна концентрации
антигена. Метод более чувствителен и менее продолжителен, чем РИД.
Кроме
вышеперечисленных
методов,
для
определения
В-клеточных
иммунодефицитов также используются турбидиметрический тест (основан на измерении
оптической плотности смеси сыворотка - Na2SO4 для крупного рогатого скота, сыворотка (NH4 для свиней, сыворотка - ZnSO4 для лошадей), реакция бласттрансформации
лимфоцитов, реакция латекс-агглютинации, а также иммуноферментный (ИФА) и
радиоиммунный (РИА) методы.
4. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ДЕФИЦИТОВ НЕЙТРОФИЛОВ
Наиболее
распространенным
методом
количественного
определения
и
характеристики морфологических дефектов нейтрофилов является лейкограмма и
цитологические исследования с использованием световой и электронной микроскопии.
Для определения хемотаксической активности нейтрофилов применяют метод
исследования миграции лейкоцитов с использованием камеры Бойдена. Метод основан на
разделении микропористым фильтром в растворе двух реагирующих компонентов:
нейтрофилов и хемотаксических агентов (например C5a-des Arg.), которые помещаются в
нижнюю камеру и создают концентрационный градиент. Помещенные в верхнюю камеру
нейтрофилы мигрируют вдоль градиента и собираются на нижней поверхности фильтра.
После стандартной инкубации фильтры извлекают, окрашивают и подсчитывают количество
клеток. Метод довольно прост и отличается весьма высокой воспроизводимостью. Этот же
принцип лежит в основе метода клеточной миграции под агарозным гелем, который
используется для определения хемотаксического индекса.
Фагоцитарный индекс нейтрофилов определяется путем подсчета количества
поглощенных бактерий одной клеткой после инкубации клеток пациента со стандартными
препаратами St.aureus или E.coli и окраски полученных мазков. Модификацией этого теста
является метод определения бактерицидной активности, при котором отмытая суспензия
клеток инкубируется с бактериальной суспензией, затем смесь наносится на поверхность
кровяного агара и через определенное время подсчитывается количество выросших
бактериальных колоний. Оба метода требуют стандартизации для использования в каждой
конкретной лаборатории и сведений об антибиотиковой терапии, которая может быть
причиной недостоверных результатов или ошибок в их интерпретации.
Для определения фагоцитарной метаболической (кислородо-зависимой) активности
нейтрофилов используется реакция восстановления нитросинего тетразолия (НСТ). Тест
включает в себя инкубацию нейтрофилов с НСТ in vitro, и по формированию нерастворимых
окрашенных зерен формазана можно судить о восстановлении НСТ супероксидным
радикалом, образующимся при активации фагоцитов. Отсутствие осадка свидетельствует о
неспособности клеточной популяции фагоцитов к метаболизму. Очень важным при
получении проб клеток крови пациентов является отсутствие гепарина в антикоагулянте, так
как высокая концентрация гепарина может негативно влиять на результаты этого теста.
Другим методом оценки "респираторного взрыва" в фагоцитах является измерение
спонтанной и индуцированной хемилюминесценции. Феномен респираторного (или
метаболического) взрыва связан со значительным увеличением кислорода, поглощаемого
лейкоцитами при фагоцитозе, в результате чего происходит образование супероксидного
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 89 из 134
радикала (Оз-) и перекиси водорода. Все эти соединения обладают микробоцидными
свойствами, и их идентификация представляет собой важный этап в оценке функциональной
активности фагоцитарных клеток.
5. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ДЕФИЦИТА КОМПЛЕМЕНТА
Количественное определение компонентов системы комплемента (главным образом
СЗ) проводят с использованием специфических антисывороток методом радиальной
иммунодиффузии. Уменьшение количества СЗ в крови отмечается при лимфоцитарном
тиреоидите и гломерулонефрите, связанным с образованием иммунных комплексов у собак.
При ревматоидном артрите наблюдается значительное снижение концентрации комплемента
в суставной жидкости собак. В будущем рутинное использование РИД для определения
уровня СЗ у животных несомненно будет полезным для диагностики иммунодефицитов и
других болезней, связанных с иммунной системой. Для определения уровня комплемента в
крови используется метод определения гемолитическои активности комплемента. Принцип
метода заключается в том, что иммунные комплексы активируют систему комплемента с
образованием мембраноатакующего компонента. Исследуемую сыворотку крови
инкубируют с эритроцитами барана, нагруженными антителами, в результате чего
происходит лизис эритроцитов за счет присутствия комплемента в испытуемой пробе.
Активность комплемента выражают в условных гемолитических единицах (СН50). За СН50
принимают последнее разведение сыворотки, которое вызывает 50% гемолиз стандартного
числа сенсибилизированных эритроцитов. Этот метод может быть использован для
определения всех компонентов системы комплемента.
Вопросы для самоконтроля:
1. Какие вы знаете иммунологические методы.
2. Общие принцыпы определения Т-кеточных дефицитов
3. Общие принцыпы определения В-клеточных дефицитов
4. Общие принцыпы определения дефицитов нейтрофилов
5. Общие принцыпы определения дефицита комплимента
6. Современные методы изучения нарушений функциональной активности иммунной
системы.
Рекомендуемая литература: 1.В.Д.Соколов, Фармакология 1977г.
Лекция 8. Современные методы изучения нарушений функциональной активности
иммунной системы.
Содержание лекционного занятия:
1. общие сведения, напрвления и перспективы создания новых методов
2. метод ELISPOD и «сендвич-ИФА»
1. В практику медицинских лабораторно-диагностических подразделений постепенно
внедряются новые и более совершенные методы обследования больных с различной
иммунопатологией. В настоящее время для проведения массовых иммунологических
обследований в медицине внедрена система микротестов с использованием моноклональных антител. Моноклональные антитела широко используются для определения
субпопуляций Т-лимфоцитов с помощью иммунофлуоресцентного микроскопирования и
проточной цитометрии. Существуют также коммерческие наборы для выявления и
количественного определения хелперных и супрессорных субпопуляций Т-лимфоцитов, а
также Т- и В-лимфоцитов, состоящие из синтетических пластиковых микросфер или
микробусинок, к поверхности которых присоединены специфические антитела. Внедрение
аналогичных методов в практику ветеринарной клинической иммунологии на сегодняшний
день представляет проблему, хотя их использование открывает новые перспективы для
диагностики иммунодефицитов животных.
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 90 из 134
Все высокочувствительные методы требуют наличия вы-сокоспецифичных
моноклональных антител к маркерам различных субпопуляции лимфоцитов и других клеток
иммунной системы, которые в соответствии с международной классификацией сведены в
группы и обозначены, как кластеры дифференцировки или CD. Каждой группе CD присвоен
порядковый номер, общий для человека и животных, и соответствующие наборы антител
позволяют выявлять клетки иммунной системы, несущие конкретные антигены. В
ветеринарии работ в этом направлении значительно меньше, хотя такие фирмы как "Serotec"
(Англия), VMRD, Inc. (США) уже предлагают для научных целей ряд моноклональных
антител к маркерам лейкоцитов, молекулам МНС и иммуноглобулинам различных видов
животных. Интенсивные научные разработки в этом направлении ведутся в лабораториях
ряда университетов и в научно- исследовательских центрах США и Европы.
2. Помимо этого, очень перспективными для ветеринарной иммунологии следует
признать такие методы, как ELISPOT и "сэндвич"-ИФА, которые в настоящее время
используются только в научно-исследовательских лабораториях и пока не нашли широкого
применения в качестве рутинных тестов. В частности, метод ELISPOT может использоваться
для количественного подсчета В-лимфоцитов, секретирующих иммуноглобулины каждого
класса (G, М, А), а "сэндвич" - ИФА может применяться для количественного определения
уровня Ig. Эти методы также требуют наличия моноклональных антител и являются одними
из самых чувствительных и специфичных.
В заключение этого раздела необходимо отметить, что существующие на
сегодняшний день методы оценки иммунного статуса в норме и патологии практически не
внедрены в ветеринарную практику, что не позволяет совершенствовать уровень
иммунологических исследований и разрабатывать новые подходы диагностики
иммунодефицитных состояний животных.
Вопросы для самоконтроля:
1. общие сведения, напрвления и перспективы создания новых методов
2. Основа методов ELISPOD и «сендвич-ИФА»
Рекомендуемая литература: 1.В.Д.Соколов, Фармакология 1977г.
Лекция 9. Стратегия иммунокоррекции.
Содержание лекционного занятия:
1. Определение и общие положения иммунокоррекции
2. Иммуностимуляторы
2.1 Гормоны тимуса
2.2 Опиоидные пептиды
2.3 интерферон и интерлейкины
2.4 левамизол и изопринозин
2.5 бактериальные эндотоксины и вакцина БЦЖ
2.6 перпараты нуклеиновых кислот и синтетические полинуклеотиды
3. Иммуносупрессанты
1.
Иммунокоррекция
(иммуномодуляция)
предполагает
использование
фармакологических средств для изменения функциональной активности иммунной системы.
Они могут увеличивать (иммуностимуляция) и снижать (иммуносупрессия) уровень
иммунного ответа. Специфическая иммунокоррекция ограничивается действием одного
антигена, а неспецифическая - вызывает более общие изменения в иммунном ответе и
приводит к изменению реактивности организма ко многим различным антигенам. Для
понимания действия иммуномодуляторов необходимо знание клеточных компонентов
иммунной
системы
и
механизма
их
взаимодействия,
поскольку
введение
иммуномодуляторов вызывает изменения в их активности.
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 91 из 134
Основные компоненты иммунной системы: Т- и В-лимфоциты, моноциты/макрофаги,
гранулоциты и основные продукты секреции являются мишенями для иммуномодуляции.
Иммуномодуляторы подразделяются на три группы:
физиологические вещества (например, цитокины), препараты, полученные из
микробов (например, вакцина БЦЖ) и синтетические. Хотя механизмы действия
представителей разных групп могут отличаться и зачастую не совсем понятны, в основном,
они направлены на иммунологическую активацию клеток и связаны с дисбалансом
цитоплазматических нуклеотидов, таких, как циклический аденозин монофосфат:
циклический гуанозин монофосфат (цАМФ : цГМФ). Препараты, увеличивающие уровень
цАМФ за счет активации рецепторов мембран лимфоцитов (глюкокортикоиды и
простагландины), являются иммуносупрессорами. Такие препараты, как тимопоэтин и
интерлейкин-1, увеличивающие уровень цГМФ, обладают иммуностимулирующим
эффектом.
2. ИММУНОСТИМУЛЯТОРЫ 2.1. ГОРМОНЫ ТИМУСА
В настоящее время описана биологическая активность основных гормонов тимуса
(ГТ), которые стимулируют Т-клеточную активность за счет увеличения цГМФ. Лечебный
эффект препаратов ГТ и их фрагментов при ряде иммунодефицитных состояний не вызывает
сомнений. Предполагается, что роль ГТ в развитии Т-лимфоцитов состоит в подготовке
претимоцитов к миграции в тимус, а с другой стороны в "дозревании" Т-клеток,
мигрирующих из тимуса в периферические органы иммунной системы. К этой группе
препаратов относятся тимозин V, альфа!-тимозин, тимопоэтин и сывороточный тимический
фактор (тимулин). Один гормон (гуморальный тимический фактор) увеличивает уровень
цАМФ в лимфоцитах и таким образом может оказывать иммуносупрессивное действие.
С терапевтической целью ГТ вводят для стабилизации нормального уровня Т-клеток
пациентам с дефицитом зрелых Т-лимфоцитов. При этом, ГТ не оказывают влияния на
количество и функциональную активность Т-клеток у здоровых животных. Использование
ГТ для лечения людей с некоторыми иммунодефицитами (например, гипоплазия тимуса)
оказалось успешным. В ветеринарии был также установлен эффект от применения ГТ для
коррекции Т-клеточных дефицитов у собак. Способы получения и физико-химические
характеристики всех основных тимусных факторов (особенно Т-активина), методы
иммунологического тестирования их активности и результаты клинического применения
изложены в работах В.Я.Ариона с соавторами (1981, 1983, 1989) и других исследователей.
2.2. ОПИОИДНЫЕ ПЕПТИДЫ
Опиоидные пептиды, синтезируемые гипофизом (эндорфины) и надпочечниками
(энкефалины), также оказывают стимулирующее действие на функции лимфоцитов.
Взаимодействие поверхностных рецепторов лимфоцитов с этими пептидами приводит к
модулированию внутриклеточного уровня циклических нуклеотидов и таким образом
увеличивает пролиферацию Т- и В-клеток. Кроме того, они могут поддерживать уровень
иммунного ответа, способствуя Т- и В-клеточной кооперации. Имеются данные о том, что
эндорфины и энкефалины совместно с адренокорти-котропными гормонами облегчают
стрессовую реакцию организма.
Тимусные
факторы
и
опиоидные
пептиды
являются
истинными
иммуностимулирующим и гормонами, поскольку они образуются в одном месте и влияют на
активность клеток периферических лимфоидных органов. В дополнение к этим системным
гормонам, иммунокомпетентными клетками синтезируются локальные медиаторы иммунной
реактивности (цитокины). Лимфокины и монокины, секретируемые стимулированными
лимфоцитами и макрофагами, оказывают сильное влияние на активность других клеток в
том же местном окружении. Кроме того, локально секретируемые простагландины, обладают
потенциальной способностью изменять иммунный ответ. Образование и секреция этих
медиаторов находится под контролем таких гормонов, как тимозин и эндорфины. Эти же
гормоны контролируют межклеточную кооперацию и антигенную стимуляцию.
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 92 из 134
2.3. ИНТЕРФЕРОН И ИНТЕРЛЕЙКИНЫ
Действие интерферона далеко не исчерпывается его противовирусной активностью и
антибластомным эффектом. Хорошо известно его иммуномодулирующее действие.
Интерферон модулирует активность клеток иммунной системы путем активации
макрофагов, стимуляции В-клеток и повышения защитных свойств естественных киллерных
и цитотоксических Т-клеток. In vitro, а при определенных условиях и in vivo, интерферон
ингибирует бластогенез лимфоцитов и может вызывать иммуносупрессивный эффект.
Проявление того или иного иммуностимулирующего эффекта в существенной мере зависит
от дозовых и временных параметров применения препарата, вида антигена и некоторых
характеристик самого интерферона. ШКальфа - активирует NK- и В-клетки, обладает
антивирусной активностью; ШМбета- активирует NK-клетки и также обладает антивирусной
активностью; 1РМгамма - активирует моноциты, макрофаги, фибробласты, Т-супрессоры, Вклетки, экспрессию молекул МНС класса II, ингибирует общий рост клеток и слабо
ингибирует вирусную репликацию.
Интерлейкины являются неспецифическими препаратами и имеют по сравнению с
интерфероном большие потенциальные возможности использования в качестве
терапевтических препаратов для коррекции Т-клеточных дефицитов. Они являются
медиаторами иммунного ответа и необходимы для дифференцировки, активации и
регуляции активности Т-, В-лимфоцитов и других клеток иммунной системы. Компоненты
системы IL координирование вовлечены в регуляцию иммунного ответа и интегрированы в
цито-кинную сеть. Существует тесная функциональная взаимосвязь системы IL с нервной и
эндокринной системами. IL-1-активирует Т-, В-, NK-клетки, полиморфонуклеары, клетки
эндотелия, хондроциты, остеокласты, фибробласты, тиреоциты, Р-клетки, гепатоциты; IL-2усиливает рост Т-, В-, NK-клеток; IL-3-активирует гемопоэтические, тучные клетки,
полипоэтин; IL-4- усиливает рост Т- и В-клеток, связан с IgE-ответом; IL-5- усиливает
дифференцировку эозинофилов и В-клеток; IL-6- усиливает конечную дифференцировку Вклеток; IL-7 - активирует дифференциацию стволовых лим-фоидных клеток костного мозга,
Т-, В-клетки и тромбоциты; IL-8- хемоаттрактант для нейтрофилов, Т-лимфоцитов и
моноцитов;! 1 — 10-активирует Т-киллеры и тимоциты, ингибирует Т-хелперы типа 1.
2.4. ЛЕВАМИЗОЛ И ШОПРИНОЗИН
Левамизол является производным имидазола и принадлежит к группе
фенилмидотиазолов. Его иммуномодули-рующие свойства связаны с изменениями
пролиферации, миграции и секреторной функции лимфоцитов, макрофагов и нейтрофилов.
Левамизол стимулирует процесс созревания предшественников Т-лимфоцитов в зрелые Тлимфоциты, увеличивает продукцию цитокинов и повышает количество Т-хелперов
относительно Т-супрессоров. Он не оказывает прямого влияния на образование антител, но
усиливает клеточный иммунный ответ у пациентов с иммуносупрессией. Подобно ГТ,
левамизол не оказывает воздействия на здоровых животных. Изопринозин (метизопринол)
является антивирусным препаратом, обладающим иммуномодулирующими свойствами. Он
увеличивает цГМФ в лимфоцитах и макрофагах, и результатом его воздействия является
изменение пролиферации лимфоцитов, усиление активности естественных киллеров,
супрессорных и цитотоксических Т-клеток. Кроме того, изопринозин увеличивает
продукцию цитокинов и вызывает изменения в разнообразии функций макрофагов.
Отмечено также прямое действие изопринозина на продукцию интерлейкина-2. Препарат
успешно применяется в медицине; в ветеринарии работы с ним пока не проводятся.
2.5. БАКТЕРИАЛЬНЫЕ ЭНДОТОКСИНЫ И ВАКЦИНА БЦЖ
Бактериальные липополисахариды (ЛПС) содержатся в оболочке грамнегативных
бактерий и обладают иммуномо-дулирующими свойствами, влияющими на повышение или
снижение иммунного ответа. ЛПС воздействуют на клеточные мембраны лимфоцитов и
макрофагов, что приводит к изменениям в балансе цитоплазматических нуклеотидов.
Действие ЛПС in vitro зависит от присутствия моноцитов, что свидетельствует о
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 93 из 134
необходимости интерлейкина-1 в клеточном ответе на ЛПС. Мурамилдипептид (МДП)
является другим продуктом клеточной оболочки бактерий и как ЛПС может быть
стимулятором или депрессантом иммунного ответа.
Вакцина БЦЖ готовится из живого, аттенуированного штамма Mycobacterium bovis и
является неспецифическим иммуностимулятором моноцитарно-фагоцитарной системы за
счет активации Т-клеток, естественных киллеров и синтеза лимфокинов. Препарат
используется для лечения людей, страдающих новообразованиями, например, меланомой.
2.6. ПРЕПАРАТЫ НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ И СИНТЕТИЧЕСКИЕ
ПОЛИНУКЛЕОТИДЫ
Гетерологичная РНК и Na-PHK повышают антиинфекционную резистентность
животных за счет повышения фагоцитарной активности и изменения свойств лимфоцитов.
Препарат Na-PHK обладает интерферогенной активностью, стимулирует образование
антител при совместном введении с антигеном, увеличивает превентивную активность
сыворотки и иммунологическую эффективность вакцин.
Неспецифическими стимуляторами иммунной системы организма являются
синтетические двухцепочечные полинуклеотиды - полиИЦ, полиГЦ, полиАУ.
Иммуномодулирующие свойства полиИЦ связаны с повышением синтеза интерферона
лимфоцитами, увеличением активности Т-хелперов и изменением антительной активности.
Кроме того, полинуклеотиды стимулируют макрофаги, ингибируют рост опухолей и
усиливают различные проявления клеточного иммунитета (бласттрансформацию на антиген
in vitro, кожные реакции ГЧЗТ и др.) у животных и человека.
Кроме описанных выше препаратов, обладающих иммуностимулирующими
свойствами, в настоящее время в медицине используются иммуностимуляторы, полученные
из костного мозга (миелопид), синтетические (ликопид или ГМДП- усовершенствованный
аналог МДП) и другие. В ветеринарной практике рядом фирм выпускаются коммерческие
иммуномодулирующие препараты типа иммунофан, "Риботан" и др., применять которые
необходимо согласно прилагаемых инструкций. При этом, необходимо иметь в виду
характеристики используемого препарата, источник получения и методы контроля.
3. ИММУНОСУПРЕССАНТЫ
Исторически, глюкокортикоиды использовались как лекарственные препараты,
угнетающие иммунные функции у пациентов с заболеваниями иммунной системы.
Получение
цитотоксических
антираковых
препаратов,
способных
вызывать
иммуносупрессию, дает возможность дополнительного выбора терапевтических средств для
лечения пациентов с аутоиммунными болезнями. Цитотоксические препараты
подразделяются на два типа: клеточно-циклические препараты, которые уничтожают
быстроделящиеся клетки (антиметаболиты) и неклеточно-циклические препараты,
являющиеся токсическими для всех клеток (алкилирующие агенты). Большинство из этих
препаратов используется в терапии рака и трансплантации органов, однако, некоторые из
них используются самостоятельно или в сочетании с глюкокортикоидами для лечения
аутоиммунных или других иммунологических нарушений.
Глюкокортикоиды составляют одну из основных групп иммуносупрессоров
клеточного и гуморального иммунитета с довольно глубоко изученным механизмом этого
действия. Иммунодепрессивный эффект глюкокортикостероидов осуществляется не через
деструкцию и лизис лимфоцитов, как это имеет место при использовании цитотоксических
препаратов. Скорее всего, он связан с изменением миграции лейкоцитов, изменениями
функциональной способности лейкоцитов как клеток- эффекторов и ингибиции продукции
или высвобождения растворимых медиаторов воспаления, функциональные изменения в
лимфоцитах, связанные с применением глюкокортикоидов, включают снижение
дифференциации и пролиферации, уменьшение количества поверхностных рецепторов,
подавление продукции интерлейкина-2, осуществляемой Т-клетками, снижение хелперной и
увеличение супрессорной активности.
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 94 из 134
Циклоспорин является препаратом, полученным из грибов, и обладает высокой
степенью специфичности к определенным субпопуляциям Т-клеток. Он блокирует
продукцию интерлейкина-1 Т-клетками, ингибирует распознавание и продукцию ИЛ-2 Тхелперами, ограничивает размножение цитотоксических Т-клеток, препятствует
пролиферации Т-хелперов, необходимых для активации В-клеток и поддерживает экспансию
Т-супрессоров. Циклоспорин является потенциальным антагонистом для многих функций Тклеток, ассоциированных с патогенезом болезней иммунной системы. Препарат успешно
используется в медицине после трансплантации органов и для лечения некоторых Тклеточных новообразований. Имеются данные по его использованию в лечении
аутоиммунных болезней.
Алкилирующие препараты (хлорамбуцил, мелфалан, циклофосфамид, бузулфан)
являются неклеточно-циклическими иммунодепрессантами, используемые для лечения
болезней иммунной системы. Их основное действие включает ионизацию лекарственной
молекулы, которая затем химически алкилирует составные части нуклеиновых кислот,
например гуанин. Это действие вызывает повреждение хромосом и гибель клеток.
Антиметаболиты (метотрексат, азотроприн, 6-меркапто-пурин и др.) действуют подобно
алкилирующим препаратам, блокируя синтез нуклеиновых кислот. Использование этих
препаратов при заболеваниях иммунной системы основано на том принципе, что
антиметаболиты разрушают лимфоциты, пролиферирующие в ответ на антигенный стимул,
таким образом отменяя иммунный ответ. Азотиоприн -наиболее распространенный препарат
этой группы, обладающий цитотоксическим эффектом на Т-и В-клетки и блокирующий
пролиферацию предшественников моноцитов.
Вопросы для самоконтроля:
1. Определение и общие положения иммунокоррекции
2. Иммуностимуляторы
3. Гормоны тимуса
4 . Опиоидные пептиды
5 . интерферон и интерлейкины
6 . левамизол и изопринозин
7. бактериальные эндотоксины и вакцина БЦЖ
8. перпараты нуклеиновых кислот и синтетические полинуклеотиды
9. иммуносупрессанты
Рекомендуемая литература: 1.В.Д.Соколов, Фармакология 1977г.
Лекция 10. Классификация пробиотиков
Содержание лекционного занятия:
1. Общие положения
2. Требования предъявляемые к пробиотикам
3. Классификация микрорганимов используемых как пробиотики.
4. Механизм действия и показания к применению проибиотиков
Традиционные стратегии лечения бактериальных и вирусных болезней, аллергии,
рака, аутоиммунных болезней нацелены не столько на создание симбиоза и реактивацию
гомологичной защиты, сколько на постоянное подавление и безжалостное уничтожение. При
оказании скорой медицинской помощи такой подход неизбежен, так как спасает жизни.
Вопрос лишь в том, являются ли серьёзные побочные явления, сознательное подавление и
без того ослабленной иммунной системы, стимулирование дисбаланса и возникновение'
резистентности соразмерным средством в лечении опасных дл-я жизни болезней.
При лечении инфекционных болезней в организм, будь то человека или животного,
регулярно вводят антибиотики, которые без разбора уничтожают все бактерии; об этом
говорит само название ("Антибио" = "Против жизни"). Для антибиотиков все без исключения
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 95 из 134
микроорганизмы агрессоры. Также ведут себя при лечений онкологических болезней
цитостатики и лучи, которые уничтожают клетки, не различая, какие из них живоносные, а
какие дегенерированные. При лечении тяжелых вирусных болезней (СПИД) применяются
виростатики, которые могут всего лишь притормозить размножение вирусов. При лечении
астмы, аллергии и некоторых аутоиммунных болезней иммунная система постоянно
подавляется кортизоном и другими блокираторами, что в свою очередь открывает дорогу
другим заболеваниям.
Слабая дифференциация действия антибиотиков, которые почти не различают между
хорошими друзьями, злейшими врагами и безобидными попутчиками причиняет
непоправимый вред. Если инфекцию подавить антибиотиками, то можно считать, что
организм так ничему и не научился. Наоборот: помощь извне против коварного неприятеля
вводит организм в долговременную зависимость от такой поддержки и ведет к его
ослаблению. Бактерии все лучше приспосабливаются к антибиотикам, становятся все более
резидентными. Если выживет хотя бы одна из миллиарда этих опасных бактерий, то она
займет всё пространство, так как проведённое лечение убрало с дороги всех её естественных
противников. Результат хуже исходной ситуации: враги торжествуют после первых побед
антибиотиков, разрушая окружение. А дисбаланс организма причиняет вред иммунной
системе.
Почти 80% клеток, производящих антитела, находятся в стенке кишечника. Это
идеальное место, так как большая, часть возбудителей болезней попадает в организм через
желудочно-кишечный тракт с пищей. Половина возбудителей болезней уничтожается в
желудке, остальные проникают в тонкий кишечник со множеством лимфофолликул прямо
под слизистой. Эти скопления клеток поглощают чужеродные, опасные для организма
инфекционные вещества (антигены). С помощью этих антигенов они побуждают различные
белые кровяные тельца нашей иммунной системы к активации, благодаря этому и возникает
неспецифические и специфические защитные иммунные реакции.
В кишечнике обитает свыше 400 видов бактерий, которые не только переваривают
пищу, но и угнетают и уничтожают болезнетворные бактерии. Они же, вытесняя их,
препятствуют их проникновению в стенку кишечника, Кроме того, полезные
микроорганизмы кишечника постоянно тренируют защитные клетки и тем самым косвенно
укрепляют иммунологи.ческий барьер слизистой оболочки кишечника.
Попытки воздействовать на кишечный биоценоз и через него — на здоровье
животных, имеют долгую историю Еще И. И. Мечников в 1910 предлагал использовать
кисломолочные продукты для омоложения и продления жизни. С 30-х годов прошлого
столетия ведут отсчет препараты, содержащие лактобактерии и бифидобактерии, так
называемые пробиотики. Сам термин «пробиотики», буквально означающий «за жизнь»,
возник позднее, как альтернатива термину «антибиотики», буквально означающему «против
жизни». Наиболее современное определение пробиотиков было дано рабочей группой ВОЗ в
2002 г:
Пробиотики — это .живые микроорганизмы, которые при применении в адекватных
количествах вызывают улучшение здоровья организма-хозяина.
В этом определении заложены основные требования, предъявляемые к препаратам,
которые претендуют на то, чтобы быть отнесенным к пробиотикам: сохранность живых
микробов, их достаточное количество и доказанная эффективность.
Пробиотики — бактериальные препараты из живых микробных культур,
представителей нормофлоры кишечника, - не вызывают побочных реакций, не имеют
противопоказаний к применению в ветеринарно-оздоровительных целях. Оздоравливающие
свойства пробиотиков заключаются в антагонистический активности против патогенных
микробов и их метаболитов, в создании благоприятных условий для микрофлоры
желудочно-кишечного тракта и снабжении организма животных биологически активными
веществами, повышающими конвертируемость корма, улучшающими процессы
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 96 из 134
жизнедеятельности и иммунный статус организма.
Пробиотики:
• Должны быть фено- и генотипически классифицируемыми
• Не должны обладать патогенностъю
• Должны сохраняться живыми
• Должны"
быть
кислотоустойчивыми
или
заключены
в
кислотоустойчивую капсулу
• Способны к адгезии к кишечному эпителию
• Способны к колонизации кишечника
• Должны быть безопасными
Только доказавшие свою клиническую . эффективность в плацебо-контролируемых
исследованиях штаммы могут быть использованы для производства пробиотиков (табл. 1).
Микроорганизмы можно классифицировать также по происхождению:
1 группа: Кисломолочные штаммы [L acidophilus, L. plantarum, L. bulgaricum, L. casei,
L. fermentum, Str. thermophylus, Enterococci L-3, B. lactis)
2 группа: Донорские штаммы [Bifidobacteriae bifidum, В. longum, В. infantis, В.
adolescents, L. rhamnosus GG, L. gassed, Enterococci faecium, salivarius)
3 группа: Антагонисты [3- subtilis, S. boulardii]
При выборе пробиотического препарата возникает несколько проблемных вопросов,
первый из которых выживаемость. Как указывалось выше, пробиотическими свойствами
обладают только живые микробы. Более того, целым рядом работ было показано, что
минимально достаточной дозой, способной осуществлять значимое действие, может
считаться доза не менее 107 КОЕ. Как обеспечить доставку пробиотиков в кишечник в"
достаточной дозе?
Выживаемость бактерий зависит от технологии производства и условий хранения
препарата. Например, добавление бифидобактерий в кефир не гарантирует их сохранности и
способности к вегетации; жизнеспособность, микрофлоры как в жидких, так и в простых
сухих формах препаратов может быть утрачена рапсе официального срока. Для большинства
пробиотиков, особенно для жидких лекарственных форм, требуются особые условия
хранения, например, температура. Следует учитывать разрушительное действие
желудочного сока на незащищенную флору. Доказано, что лишь небольшое число штаммов
лактобактерий (L..reuteri, L. plantarum NCIB8826, S. boulardii, L. acidophHus, L. casei Shirota)
и бифидобактерий обладает кислотоустойчивое i ыо, большинство микробов погибает в
желудке. Поэтому предпочтительны пробиотики, заключенные в кислотоустойчивую
капсулу. .
В тонкой кишке пробиотики подвергаются воздействию желчных кислот и
панкреатических ферментов. Вследствие этого многие микробы, например, L. fermentum
KLD, L. lactis MG1363 почти полностью погибают. Это может объясняться усилением
проницаемости клеточной мембраны бактерий, которое возникает в ответ на воздействие
желчных кислот. Выживание же большинства бактерий зависит от того, каким образом они
принимаются: в защитной капсуле, в виде йогурта, с молоком или без всякой защиты.
Вопросы для самоконтроля:
1. Общие положения
2. Требования предъявляемые к пробиотикам
3. Классификация микрорганимов используемых как пробиотики.
Рекомендуемая литература: 1.В.Д.Соколов, Фармакология 1977г.
Лекция 11. Влияние пробиотиков на иммунную систему, показания к назначению
Содержание лекционного занятия:
1. Механизм действия пробиотиков и возможности применения
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 97 из 134
2. Конкурентное действие
3. Применение пробиотиков при инфекционной диарее
4. Применение пробиотиков при антибиотикоассоциированной диарее.
5. Влияние пробиотиков на иммунную систему.
6. Показания к назначению пробиотиков.
1. Механизм действия иробиотиков и возможности применения.
Действие пробиогиков не сводится к простому заселению кишечника, как это
зачастую представляется. Их влияние более сложно и многопланово. Это: конкуренция с
патогенной и условно-патогенной микрофлорой; адгезия к слизистой оболочке кишечника и
взаимодействие с эпителиоцитами," иммуномодулирующий эффект.
2. Конкурентное действие иробиотиков осуществляется благодаря: способности
синтезировать бактерицидные вещества (молочная кислота и КЦЖК, перекись водорода,
сероводород); конкуренции за питательные вещества и факторы роста; снижению
внутриполостной рН (молочная кислота); предотвращению адгезии и инвазии в слизистую
оболочку патогенных микробов.
3. Применение пробиотиков при инфекционной диарее.
Пробиотики оказывают защитное действие по отношению к чужеродной патогенной и
условно-патогенной микрофлоре за счет нескольких механизмов. Они прямо конкурируют с
ней за питательные вещества и сайты адгезии, вырабатывают метаболиты, подавляющие- ее
рост (короткоцепочечные жирные кислоты, молочную кислоту, перекись водорода,
пироглютамат). Многие штаммы вырабатывают бактериоцины —антибиктериальные
субстанции, которые также ингибируют рост других микробов. Этой способностью в
высокой степени обладают энтерококки и лактобактерии. Многие пробиотики обладают
прямым антитоксическим действием. Они способны нейтрализовать цито- и энтеротоксины
вирусов и бактерий: энтеропагогенных и энтеротоксигенных эшерихий, клостридий, холеры.
Прямое антимикробное и антитоксическое действие пробиотиков позволяет с успехом
применять их при лечении легких и среднетяжелых форм кишечных инфекций. Особенно
эффективны пробиотики при вирусных диареях (рота-, адено-, калици-, астровирусы),
энтеропатогенных эшерихиозах и антибиотикоассоциированной диарее.
4. Применение пробиотиков при антибиотикоассоциированной диарее.
Широкое использование антибиотиков в клинической практике сопряжено с
возможными осложнениями, одним из которых является антибиотикоассоцинрованная
диарея (АЛД). В большинстве случаев ААД связана с ростом С!, difficile, обладающей
резистентностью к большинству антибиотиков, у 20% АЛД имеет рецидивирующее течение.
Назначение ванкомицина и мефонидаюла, к которым Cl. difficile обычно чувствительна, не
предотвращаем рецидивов. Конкурентное действие пробиотиков, в частности, конкуренция с
(Л. difficile за питательные вещества и сайты адгезии, антитоксическое их действие дают
возможность применять пробиотики для профилактики и лечения ЛАД.
5. Влияние пробиотиков на иммунную систему.
Иммунорегулирующсе действие пробиотиков расширяет возможности их
использования и раскрывае'1 широкие перспективы для применения в разных клинических
ситуациях:
• При лечении хронических инфекций, вызванных:
Helicobacter pylori
Giardia lamblia
• Для лечения и профилактики пищевой аллергии
• При лечении воспалительных и других хронических заболеваний кишечника
• У часто длительно болеющих животных.
6. Показания к назначению пробиотиков.
Учитывая многообразие механизмов действия пробиотиков, их возможности отнюдь
не ограничиваются просто коррекцией кишечного биоценоза, показания к их назначению
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 98 из 134
достаточно широки:
• Острые кишечные инфекции легкой и средней степени тяжести, особенно
вирусные
• Затяжные диареи, обусловленные условно-патогенной флорой
• Антибиотикоассоциированная диарея — лечение и профилактика
• Инфекция Н. pylori — на фоне и после эрадикации
• Лямблиоз — на фоне и после лечения
• Воспалительные заболевания кишечника — поддержание ремиссии
• Пищевая аллергия — лечение и профилактика
Учитывая различия в составе препаратов пробиотиков и строгие требования, которые
предъявляются сегодня к ним, можно рекомендовать к применению лишь те препараты,
которые соответствуют этим требованиям и доказали свою клиническую эффективность в
рандомизированных исследованиях. Современным пробиотик должен иметь:
• Живые бактерии штаммов:
о Lactobucillus acidophylus или Lactobacillus GG
о Bifidobacterium bifidum, longium, infantis
о Enterococcus faecium
• Сочетание симбионтных микробов
• Антибиотикоустойчивость
•
Кислотоустойчивость
Этими свойствами обладают лишь немногие препараты.
Вопросы для самоконтроля:
1. Механизм действия пробиотиков и возможности применения
2. Конкурентное действие
3. Применение пробиотиков при инфекционной диарее
4. Применение пробиотиков при антибиотикоассоциированной диарее.
5. Влияние пробиотиков на иммунную систему.
6. Показания к назначению пробиотиков.
Рекомендуемая литература: 1.В.Д.Соколов, Фармакология 1977г.
Лекция 12. Ферменто-пробиотические кормовые добавки
Содержание лекционного занятия:
1. Пробиотик «Споровит»
2. Ферментно-пробиотичекая добавка «Бацелл»
3. Пробиотик «Моноспорин»
1. Пробиотик «Споровит»
Исследования показывают, что «Споровит» оказывают иммуномодулирующее
действие: восстанавливают нарушенный патологией иммунный статус, увеличивают
продукцию эндогенного интерферона, усиливают функциональную активность
макрофагальных клеток, повышают фагоцитарную активность лейкоцитов крови, моноцитов и нейтрофилов .
Из бактериальной массы Bacillus subtilis был получен белковьщ компонент протодин. В опытах на мышах было показано, что протодин обладает выраженной
митогенной активностью, стимулирует выработку. опухоль-некротизирующего о фактора,
интерлейкина 1, (Houba V. et al., 1992).
При использовании пробиотиков, в частности, «Споровита» в качестве средства
лечения острых кишечных инфекций регистрируется постепенное увеличение удельного
веса гамма-глобулиновой фракции; при лечении хронических инфекций нормализуется
соотношение белковых фракций крови.
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 99 из 134
Показано, что введенные перорально биопрепарат из В.subtilis проявляет
антитоксическое действие, степень которого зависит от интервала между введением
препарата и токсина. В сравнительных экспериментах показано, что биопрепарат из бацилл
близок по антитоксической эффективности к вилозену или камизолу (Вьюницкая В.А., 1990).
Предполагают, то и противоаллергическое действие биопрепаратов из бацилл, отмеченное
клиницистами, в значительной мере объясняется комплексным ферментативным действием
спорообразующих бактерий расщеплением пищевых или микробных аллергенов на
субъединицы, лишенные биологической активности. Изучение адгезивной активности
производственных штаммов рода Bacillus показало, что бациллы не формируют биопленок,
поскольку их адгезивные свойства к эпителиальным клеткам кишечника слабо выражены.
Их активность осуществляется в просвете кишечника и связана прежде всего не с
конкурентными взаимоотношениями за места прикрепления к слизистой, а с высокой
антагонистической активностью в отношении патогенных микроорганизмов, не оказывая
антагонистического действия на представителей нормальной микрофлоры, что создает
условия для бесконкурентного восстановления аутофлоры (Сорокулова И.Б., 1996).
Через 3-5 суток после приемов препарата «Сноровит» увеличивается, а затем
восстанавливается до нормальных показателей количество лактобактерий,
бифидобактерий, кишечных палочек и др.
Адаптация спорообразующих бактерий к условиям существования в кишечнике
зависит от индивидуальных особенностей макроорганизма. Они не всегда включаются в
состав микробиоценоза. В большинстве наблюдений, у получавших препараты из бацилл,
через месяц после окончания курса приема препарата, спорообразующие бактерии не
обнаруживались.
Исходя из вышеизложенного следует, что пробиотик «Споровит», является
перспективным препаратом для медицинской и ветеринарной практики. Он обладает
уникальным сочетанием качеств, таких как, активное и избирательное подавление роста
бактериальной, вирусной .и грибковой флоры (кандидочы, трихофшия, микроспория и Др.),
высокая ферментативная и биоеинтетическая активности, безвредность для макроорганизма
и аутомикрофлоры, высокая устойчивость -к неблагоприятным УСЛОВИЯМ внешней среды.
2. Ферментно - пробиотическая кормовая добавка «Бацелл».
Биологическая кормовая добавка «Бацелл» - ферментно - пробиотический препарат,
полученный на основе твердофазной ферментации микроорганизмов нелл юл о
политического, пробиотического и пребиотического действия выделенные из желудочнокишечного тракта животных и птиц.
Пробиотические свойства препарата позволяют:
• Предупреждать
многие
болезни,
вызываемые
патогенной
микрофлорой.
• Формировать нормальную, полезную микрофлору кишечника, в первую
очередь за счеч lactobacillus sp.
•
Повышать имунный статуе роста, как аминокислоты, легкодоступные сахара,
витамины, микроэлементы и др.
Применение «Бацелла» как микробной ферментно - пробиотической добавки
позволяет в наиболее естественном варианте мобилизовать синтез полезньгх биологически
аюивныч комгюнетов в организме, без снижения эффективности продуцирования
внутренних ферментов самого организма, что всегда характерно для очищенных ферментных
препаратов.
В этой связи повышается продуктивность животных и птиц, снижается на 10 - 15%
расход па 20% стоимость на единицу продукции, улучшаются показатели воспрои ;водства.
повышается сохранность поголовья, снижаются затраты на лечебные препараты и
улучшается экономические показатели.
Форма выпуска, срок и условия хранения
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 100 из 134
«Брацелл» - сухой сыпучий продукт коричневого цвета со слабым специфическим
запахом, с массовой долей влаги не более 12% расфасован в многослойных бумажных
мешках по 1,25 кг.
Срок хранения в суом месте при температуре 10-25оС не более 6 месяцев.
3. Пробиотик: «Моноспорин»
Кормовая смей, пробиотического действия "Моноспорин" выгодно отличается от
всех известны ч аналогов более широким спектром действия и новой лекарственной формой
применения с высоким содержанием в ней активных жзинеспм обных микроорганизмов.
Назначение с миси "Моиосиорин":
Подавляет условно-патогенную микрофлору и нормализует пищеварение.
Промышленно ценный шгамм микроорганизмов - основа препарата "Моноспорин" обладает высокими антагонистическими свойствами в отношении возбудителей кишечных
инфекций: грамотрицательных .-представителей родов Klebsiella, Escherichia, Salmonella,
Proteus, Pseudomonas; грамположнтельные - Staphylocoecus, Streptococcus. Препарат также
хорошо уживается с нормофлорой кишечника и стимулирует ее рост. "Моноспорин"
применяется для профилактики и лечения дисбактериозов, токсичной
диспепсии,
клебсиеллезов, эшерихиозов, сальмонеллезов, кандидомикозов, кокковых кишечных
инфекций сельскохозяйственных животных и птицы.
Увеличивает усвояемость корма и прирост живой массы. Бактерии разлагают
сахарозу, мальтозу, глюкозу, продуцируют каталазу, эндоглюконазу и другие ферменты
(целлюлазу, целлобиазу и пектиназу), участвующие в расщеплении целлюлозы и пектиновых
веществ. Стимулирует развитие кишечных целлюлозолитических руминококков,
лактобацилл, гидролизует крахмал.
Повышает сохранность молодняка и увеличивает продуктивность
животных, так как "Моноспорин":
•
обеспечивает необходимое регулирующее действие на функциональную
способность щитовидной железы, что можно считать одним из .механизмов его влияния на
биохимические процессы организма;
•
повышает активное гь клеточного ответа крови - увеличивает на 63% НСТ-тест
моноцитов, на 39% нейтрофилов и фагоцитарное число до 1,63;
•
активирует обмен веществ в организме животных, стимулирует синтез
аминокислот и витаминов, подавляет патогенную микрофлору;-повышает общую
резистентноеть организма к различным неблагоприятным факторам.
Является эффективной альтернативой антибиотикам. "Моноспорин", благодаря
высокой активности в подавлении патогенов, может применяться в качестве как
превентивного (профилактического) так и терапевтического (лечебного) средства. Препарат
безопасен для животных в любых дозах, при этом сохраняет продукты животноводства
безопасными для человека, в отличии от антибиотиков.
Форма выпуска: жидкая и сухая
"Моноспорин" (жидкий) выпускается в виде гелеобразной жидкости от светлокоричневого до темно-коричневого цвета.
Расфасован во флаконы по -400мл, упакован в гофроящики по 12 флаконов. Хранить
при температуре oi ОС до +ЗОС. Срок годности - 1 1 од.
"Моноспорин" (сухой) выпускается в виде сухой сыпучей смести от светлокоричневого до темно-коричневого цвета. Расфасован в бумажные мешки по 25 кг.
Препарат хранится при температуре от -1 ОС до +ЗОС в сухом помещении без
попадания прямых солнечных лучей. Срок годности - шесть месяцев.
Вопросы для самоконтроля:
1. Что входит в состоав ферментно пробиотических добавок
2. Назначение и применение пробиотика «Споровит»
3. Ферментно-пробиотичекая добавка «Бацелл»
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 101 из 134
4. Пробиотик «Моноспорин»
Рекомендуемая литература: 1.В.Д.Соколов, Фармакология 1977г.
Лекция 13. Новые биоцидные составы пролонгированного действия.
Содержание лекционного занятия:
1. Введение
2. Метропол
3. Альбипен LA
4. Амоксициллин
5. Биогель-5
6. Бифитрилак
7. Докси
1.Введение. В современном представлении любое лекарственное вещество имеет
точное химическое строение, и действие его обусловлено определенными химическими или
физическими процессами. Термин «биоцидное действие» теперь употребляют для
выражения действия лекарственных веществ на возбудителей заразных заболеваний,
находящихся в организме животных.
Избирательное терапевтическое влияние происходит чаще всего потому, что препарат
адсорбируется в возбудителе в количествах, более значительных, чем в тканях животного,
или нарушает такие процессы метаболизма, которые крайне необходимы для жизни
возбудителя и не имеют существенного значения для макроорганизма. Чем выше
доза лекарственного вещества, тем
ярче проявляется его терапевтический эффект. Но
большинство этих препаратов в какой-то мере неблагоприятно влияет на животных,
а отрицательное действие их тем слабее, чем меньше доза вещества. Чтобы правильно
выбрать дозу, обеспечивающую надежное лечебное действие и не оказывающую
токсического влияния, нужно применять препараты с высоким химиотерапевтическим
индексом (соотношение
доз
максимальных переносимых и минимальных
лечебных).
В ветеринарии при заразных заболеваниях лекарственные вещества
применяют и для профилактики.
В настоящее время открытие новых биоцидных составов очень актуально. Так
например компания ООО "ТРИНИТИ ФАРМА" основана в 2000 г. с целью научноисследовательских разработок, клинических испытаний и внедрения в практику лечебных
средств для животных на основе высоких технологий производит биоцидные препараты для
животных.
В 2001 г., впервые в ветеринарии, был разработан, испытан и серийно выпущен
уникальный препарат - водорастворимый антиоксидант «Эмицидин», обладающий
пролонгированным действием и выраженным антигипоксическим эффектом.
Субстанция Эмицидина зарегистрирована в Российской Федерации за № ПВР- 21.1/00643.
Сертификат соответствия на серийный выпуск выдан 30.07.2002 г. № РОСС RU.
ФВ01. В07834. Многие препараты ещё в стадии разработки. Но есть и такие, которые
проверены временем.
2)МЕТРОПОЛ
МЕТРОПОЛ - оригинальный лекарственный препарат с длительным биоцидным и
иммунностимулирующим действием, представляет собой инклюзивный комплекс известного
лекарственного средства метронидазола с поливинилпирролидоном.
МЕТРОПОЛ обладает выраженной активностью против анаэробных микробов.
Минимальная ингибирующая концентрация (МИК) для Cl. havоi не превышает 5 мкг/мл, для
С/, perfingens составляет от 2.5 до 10 мкг/мл, для Сl. septicum от 10 до 40 мкг/мл. Он также
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 102 из 134
активен и по отношению к неспорообразующей анаэробной микрофлоре: МИК для Вас.
Melaninogenicus составляет 0.5-10 мкг/мл, для F. Nucleatum 0.25-5.0 мкг/мл. Ингибирующее
действие МЕТРОПОЛА на анаэробную микрофлору обнаруживается через 30-40 часов после
однократного введения животным внутривенно, в то время как не иммобилизованный на
полимере метронидазол выводится через 6-8 часов. Совместное использование
МЕТРОПОЛА с антибиотиками позволяет снизить дозы последних в 1.5-2 раза, сохраняя при
этом их бактерицидные свойства. МЕТРОПОЛ может найти применение в хирургии,
гинекологии, стоматологии, ветеринарии как новый пролонгированный препарат
антимикробного действия.
Препарат проходит расширенные доклинические испытания. Подготовлен проект
Временной фармакопейной статьи. Препарат патентуется
3) АЛЬБИПЕН LA. ОПИСАНИЕ АДВ - 10% ампициллин пролонгированного
действия Полусинтетический пенициллиновый антибиотик с широким спектром действия,
активен в отношении грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов, в том
числе стрептококков, пневмококков, энтерококков, стафилококков, эшерихий и сальмонелл.
После однократного введения Альбипена ЛА терапевтическая концентрация ампициллина в
организме животных сохраняется двое суток.
СОСТАВ 100 мг/мл ангидрида ампициллина в эмульсии алюминия стеарата и
кокосовое масло.
ЛЕКАРСТВЕННАЯ ФОРМА Стерильная белая водно-маслянная эмульсия.
ВИД ЖИВОТНЫХ Лошадям, жеребятам, коровам, телятам, свиньям, овцам,
ягнятам, поросятам, собакам и кошкам.
ПОКАЗАНИЯ Для лечения инфекционных заболеваний желудочно-кишечнго тракта,
мочеполовых путей, пневмонии, хирургических инфекций, маститов, полиартритов,
септицемии, вторичных инфекций после перенесенных вирусных заболеваний.
ДОЗИРОВКА В зависимости от возраста и массы животного 15 мг/кг – для взрослых
и 25 мг/кг - для молодых животных один раз в 48-72 ч.
ПОРЯДОК ПРИМЕНЕНИЯ Подкожно или внутримышечно.
ПЕРИОД ОЖИДАНИЯ Мясо животных можно использовать в пищу через 14 суток
после последнего применения препарата, а молоко через 72 часа. Ранее указанных сроков
молоко можно использовать на корм животным после кипячения, а мясо в случае
вынужденного убоя животных для производства мясокостной муки.
ФОРМА ВЫПУСКА Флаконы по 100 мл.
ХРАНЕНИЕ При температуре от 15°С до 25"С. Срок годности - 2 года со дня
выпуска партии.
ПРЕДОСТЕРЕЖЕНИЯ Иногда у собак после инъекции отмечают болевые реакции.
У лошадей и жеребят может наблюдаться припухлость в месте инъекции, которая исчезает в
течение нескольких дней. При аллергических реакциях у оператора на пенициллиновые
антибиотики остерегаться контакта с препаратом.
Для инъекций использовать только сухой шприц, так как в присутствии капель воды
суспензия может закрывать отверстие иглы.
ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ И ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ Не назначать при
повышенной чувствительности у животных. Не использовать при отсутствии
чувствительности патогенной микрофлоры к В-лактамным антибиотикам
УПАКОВКА 100мл
ПРОИЗВОДИТЕЛЬ ИНТЕРНЕТ, Голландия
4) АМОКСИЦИЛЛИН
ОПИСАНИЕ АДВ - 15 % амоксициллин пролонгированного действия. (Amoxycillin)
Полусинтетический антибиотик.
ПОКАЗАНИЯ при инфекциях пищеварительного тракта, маститах, метритах,
нефритах, уретритах, циститах, абсцессах, пододерматитах, артритах, офтальмитах,
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 103 из 134
инфекциях тканей и кожи, перед хирургическими вмешательствами, при атрофическом
рините и синдроме ММА у свиней. Вводят внутримышечно 1 раз в сутки, крупному
рогатому скоту и овцам 7-10 мг, свиньям 7—15, собакам и кошкам 7 мг на 1 кг массы
животного ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ И ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ препарат при повышенной
чувствительности животных к пенициллиновым антибиотикам, в том числе грызунам.
Возможны аллергические реакции, при которых препарат отменяют и назначают
антигистаминные средства и глюкокортикостероиды. Амоксициллин нельзя применять с
другими бактериостатическими средствами ХРАНЕНИЕ в защищенном от света и
недоступном для неспециалистов месте. УПАКОВКА 10 мл, 100 мл суспензии
ПРОИЗВОДИТЕЛЬ ИНВЕСА ИСПАНИЯ
БИМОКСИЛ LA
АДВ - 15 % амоксициллин пролонгированного действия. УПАКОВКА 100мл
ПРОИЗВОДИТЕЛЬ БАЙМИДА Ирландия
5) БИОГЕЛЬ-5
Комплексный препарат для лечения заболеваний ЖКТ с экстрактом прополиса с
бактерицидным, противовоспалительным и регенеративным действием. Однородная
полужидкая масса от светло-желтого до светло-коричневого цвета со специфическим
запахом, горьковатого вкуса, с легко разбивающимся при встряхивании небольшим осадком.
Действует выражение бактерицидно и бактериостатически на грамположительные и
грамотрицательные микроорганизмы, препятствует всасыванию токсических веществ,
стимулирует естественную резистентность организма и иммунитет.
ПОКАЗАНИЯ орально при болезнях желудочно-кишечного тракта телят и поросят,
сопровождающихся диареей. Препарат выпаивают индивидуально за 30—40 мин до
кормления в дозе 3—5 мл на 1 кг массы животного 2 раза в день до выздоровления. Через
5—7 дней дачи делают перерыв на такой же срок, затем курс лечения повторяют. С
профилактической целью препарат дают в дозе 1 -2 мл на 1 кг массы тела 2 раза в сутки в
течение 2—3 дней после рождения. Перед применением препарат тщательно взбалтывают и
подогревают до 38—40 0С.
ХРАНЕНИЕ в темном месте при температуре от 0 до 15 'С в течение 12 мес.
Обладает адсорбентными свойствами. ' УПАКОВКА 100 мл, до 1000 мл
ПРОИЗВОДИТЕЛЬ ЗАО "ФАРМАКС", Россия
6) БИФИТРИЛАК
комплексный пробиотик для ветеринарии Препарат для лечения собак, кошек,
декоративных птиц и сельскохозяйственных животных. ОПИСАНИЕ Bifidobacterium
bifidum, Lactobacillis acidophilus, Lactobacillis dulgaricus, Lactobacillis fermentum, сорбент.
Применяется при острых желудочно-кишечных заболеваниях и с целью их профилактики.
ДОЗИРОВКА собака - 0,3г (1/3 ч. ложки), кошка - 0,1г (1/10 ч. ложки), птица -0,2г (1/5 ч.
ложки) теленок - 0,5г (1/2 ч. ложки). Применять с кормом 1 раз в день в течение 5-10 дней, с
профилактической целью 1 раз в день 3-5 дней. . Хранить в сухом защищенном от света
месте, изготовитель ЗАО "БАКС"
7)ДОКСИН - 200 ВС®
оральный водорастворимый порошок для ветеринарного применения Состав в 1 гр
порошка: доксициклин гиклат 100 мг тилозин тартрат 100 мг наполнитель до lгp.
ОПИСАНИЕ по внешнему виду Доксин -200 ВС® представляет собой
мелкокристаллический порошок светло-желтого цвета. Фармакологические свойства:
доксициклин гиклат является полусинтетическим производным окситетрациклина. Активен
в отношении большинства грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов, в
т.ч. микоплазм, хламидий, риккетсий, бруцелл, вибрионов, клостридий. Ингибирует синтез
протеинов в микробной клетке, нарушая связь транспортных - РНК с субъединицей
рибосомальной мембраны. Относится к препаратам пролонгированного действия - быстро
всасывается и медленно выводится из организма. Биодоступность доксициклина не
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 104 из 134
изменяется под влиянием пищи. Имеет высокую степень растворимости в липидах. С
белками плазмы связывается на 80-92%. Пик содержания в крови отмечается через 2,5 ч.
после приема. Терапевтический уровень антибиотика в тканях сохраняется в течение не
менее 20 часов. Доксициклин проникает в большинство тканей и жидкостей организма.
Концентрируется в печени, выделяется с желчью, мочой и фекалиями в биологически
активной форме. Тилозин тартрат принадлежит к группе макролидов, является продуктом
ферментационной активности актиномицета Streptomyces fradiae. Активен против ряда
грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов, в т.ч. микоплазм, пастерелл,
клостридий, вибрионов, риккетсий, спирохет, хламидий, эризипелотриксов, пневмококков,
стрептококков и стафилококков. Особенно чувствительны к антибиотику патогенные
микоплазмы. Тилозин подавляет белковый синтез бактериальных
- клеток в результате образования комплекса с субъединицами рибосом. При
пероральном введении хорошо всасывается, проникает во все внутренние органы и
поддерживается на терапевтическом уровне в крови животных и птиц в течение 6-8 ч.
Максимальные концентрации в крови достигаются через 30 минут после введения препарата.
Биодоступность тилозина не изменяется под влиянием пищи. Выделяется из организма с
мочой, желчью и фекалиями. Показания к применению: доксин -200 ВС® используют для
лечения и профилактики гастроинтестинальных инфекций у животных и птиц, вызванных
чувствительными к доксициклину и тилозину микроорганизмами, а также при инфекциях
дыхательных и мочевыводящих путей. Антибактериальная активность препарата
распространяется на Mycoplasma, Escherichia coli, Salmonella spp., Haemophilias spp., Brucella
spp., Pasteurella spp., Bordetella, Clostridium spp., Campylobacter, Chlamydia, Rickettsia,
Staphylococcus spp. и Streptococcus spp. Приобретенная бактериальная резистентность
развивается очень медленно. Перед применением следует проверить чувствительность
возбудителей к доксициклину и тилозину. Во время лечения единственным источником
питья должна быть вода с растворенным в ней препаратом. ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ И
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ: не рекомендуется применять Доксин-200ВС® одновременно с
пенициллинами, цефалоспоринами и линкомицином в связи с выраженным снижением
антибактериального эффекта тилозина; доксициклин не сочетается с препаратами железа,
поскольку при этом может нарушаться всасывание и тех, и других.
ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ И ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ для применения препарата
является обнаружение штаммов патогенных бактерий, резистентных к доксициклину и
тилозину. Побочные эффекты: в очень редких случаях может наблюдаться
сверхчувствительность. ДОЗИРОВКА только для орального использования. Для лечения
птиц и поросят дозировка препарата составляет -1кг на 1000 л питьевой воды в сутки.
Продолжительность курса- 3-4 дня; при смешанных инфекциях, а также хроническом
течении болезни - 5 дней. Если в течение 2-3 дней не произойдет заметного клинического
улучшения, рекомендуется повторно проверить чувствительность микроорганизмов к
доксициклину и тилозину. С профилактической целью Доксин -200 ВС®
ПОКАЗАНИЯ из расчета 1 кг на 2000 л питьевой воды в сутки, в течение 3-5 дней.
Телятам, овцам и козам Доксин -200 ВС® назначают из расчета 5' гр. препарата на 100кг.
живой массы тела животного, в течение 3-5 дней. Препарат растворяют в небольшом
количестве теплой воды, молока или заменителя молока. Период полного выведения
препарата из организма животных: мясо жвачных животных ....... 14 дней, мясо свиней....... 8
дней, мясо птицы....... 7 дней. Ограничения в применении: мясо животных и птицы,
вынужденно убитых до истечения указанных сроков, используют непосредственно для
кормления плотоядных или для производства мясокостной муки. Хранение:
ХРАНЕНИЕ. Препарат хранят в сухом, защищенном от света месте, при температуре
15 - 25°С.
Срок годности смотри на упаковке.
УПАКОВКА пластиковые банки по 1000гр. и бочки по 25 кг
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 105 из 134
Вопросы для самоконтроля:
1. Принципи значение прологации би оцидных препаратов
2. Особенности действия применения препарата Эмицидин
3. Особенности действия применения препарата Метропол
4. Особенности действия применения препарата Альбипен
5. Особенности действия применения препарата Амоксициллин
6. Особенности действия применения препарата Биогель
7. Особенности действия применения препарата Бифитрилак
8. Особенности действия применения препарата Доксин
Рекомендуемая литература: 1.В.Д.Соколов, Фармакология 1977г.
2. Ветеринария. №№9-12 2008 г.
Лекция 14. Структурно-функциональная клиническая оценка влияния иммуномодуляторов
природного происхождения на организм.
Содержание лекционного занятия:
1. Введение
2. Характеристика изучаемых препаратов
3. Влияние иммунокорректоров на организм животных.
1. Введение. Иммунная система выполняет важную функцию по сохранению
постоянства внутренней среды организма, осуществляемую путем распознавания и
элиминации из организма чужеродных веществ антигенной природы (Хаитов P.M., Пинегин
Б.В., 2003; Черешнев В.А. и др., 2006).
Проблема иммунокоррекции нарушенного гомеостаза является центральной в
клинической практике. Она включает в себя как поиск, так и создание эффективных
иммунокорригирующих
средств,
а
также
разработку
эффективных
методов
иммунодиагностики и лечения. Актуальность фармако-коррекции иммунологической
недостаточности прежде всего обусловлена широким распространением иммунодефицитных
состояний у животных, являющихся причиной различных заболеваний, успех лечения
которых во многом зависит от выбора адекватных средств и методов иммунокоррекции. Известно, что иммунодепрессивным свойством обладают многие факторы и воздействия:
неадекватные условия содержания и кормления животных, стрессы, бактерии и вирусы,
токсические вещества, ионизирующая радиация (Серых М.М. и др., 2000; Смирнов П.Н. и
др., 2000; Шахов А.Г. и др., 2001; Воронин Е.С. и др., 2002; Федоров Ю.Н., 2005, 2006;
Федоров Ю.Н., Верхов-ский О.А., 2007; Донник И.М., Шкуратова И.А., 2007). Стратегия
современных научных исследований в данном русле прежде всего направлена на детальное
изучение механизмов иммунодепрессии и поиска эффективных средств коррекции
нарушенного иммунного гомеостаза (Черешнев В.А., Юшков Б.Г., Климин В.Г., 2002).
Широкое распространение иммунодефицитов у животных ставит исследователей
перед необходимостью разработки обоснованной и доказательной методологии раннего
выявления недостаточности иммунной системы с целью профилактики и своевременной ее
коррекции (Кончугова Т. В., 1997; Жаров А.В., 1998; Жаров А.В. и др., 2001; Донник И.М.,
2003; Уша Б.В. и др., 2003).
В настоящее время ветеринарный фармацевтический рынок предлагает
разнообразные лекарственные средства. Большинство из них являются синтетическими и
нередко вызывают осложнения, включая усугубление имму-носупрессивных состояний,
загрязняют сырье и продукты питания, окружающую среду (Антипов В.А., 2006). Данное
обстоятельство обусловливает необходимость дальнейшей разработки и внедрения в
ветеринарную практику препаратов природного происхождения, которые лишены указанных
недостатков и их можно применять как в отдельности, так и в комплексе с другими
средствами. Большинство из этих препаратов имеют ряд преимуществ перед синтетическими
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 106 из 134
препаратами: многоплановость влияния на организм, иммуномодулирующее действие,
низкая токсичность, активация функций нейроэндокринной системы, стимуляция процессов
регенерации, ослабление действия стресс-факторов, повышение иммунного ответа при
вакцинации, снижение кратности применения химиотерапевтических средств и повышение
их лечебного действия (Соколов В.Д. и др., 1997).
Значительную перспективу в этом плане имеют растительные средства, препараты,
полученные из органов и тканей животных, хитинового покрова ракообразных и др.
(Воронин Е.С. и др., 1990; Морозов В.Г. и др., 2000; Горлов И.Ф. и др., 2002; Тетерев И.И.,
2004; Таирова А.Р., Мещерякова Г.В., 2005; Албулов А.И. и др., 2006; Новых Н.Н., 2006;
Самуйленко А.Я., 2006).
Несмотря на некоторую изученность проблемы применения препаратов природного
происхождения с иммуностимулирующей активностью, многие аспекты их клинического
использования требуют дальнейшей разработки, обоснования и внедрения в ветеринарную
практику. Особенно это касается установления закономерностей развития типовых гисто- и
органотипических реакций с позиций оценки динамики нейроэндокринной (и в частности
гипоталамической нонапептидергической) регуляции иммунного статуса животных. Данный
аспект проблемы к настоящему времени недостаточно изучен, в том числе и в отношении
обоснования патогенетической терапии иммуноде-фицитных состояний.
2. Характеристика изучаемых препаратов.
Рибав - спиртовой экстракт, содержащий сбалансированный, сложный комплекс
биологически активных веществ (аминокислот, пептидов, фосфорсодержащих соединений,
витаминов, ферментов, пигментов, липидов и др.) продуктов синтеза эндофитных
микромицетов.
Олетим - препарат, полученный из тимуса северных оленей методом водно-солевой
экстракции. Содержит комплекс пептидов с молекулярной массой 1,0-10 кД и Д-маннит в
качестве стабилизатора и наполнителя.
Хитозан - линейный полисахарид, поли[(1-4)-2-амино-2-дезокси-Ь-В-глюкоза],
который получают при дезацетилировании хитина. Хитин входит в состав панцирей морских
ракообразных (крабов, креветок, криля), содержится в скелетах насекомых, клеточных
стенках грибов и т.д.
Хитомаст — лечебный препарат в состав которого входит хитозан и ге-леобразующая
основа. Содержание активного хитозана в препарате составляет 3%. Хитомаст-2 - раствор 20
мг гентамицина сульфата в 1 мл 1,5%-го хитозана. Хитомаст-3 - раствор 20 мг цефалексина
моногидрата в 1 мл 1,5%-го хитозана. Хитомаст-4 - 0,02%-ный раствор мирасепта-10 в 1,5%ном хитозане.
3. Влияние иммунокорректоров на организм животных.
В гиперпластических зонах, содержащих плазмоци-тарно-макрофагальные элементы,
отмечается значительное число дегенери-рованных и гибнущих клеток. Значимое
возрастание Т-зависимых (периарте-риальных) зон не происходило.
У исследованных животных обнаружено увеличение (в 2-3 раза) размеров как
подкожных, так и мезентериальных лимфатических узлов. В них расширяются
маргинальные, промежуточные корковые и мозговые синусы, а также кровеносные сосуды в
капсуле и трабекулах. При этом в гемокапиллярах отмечены явления сладжирования
форменными элементами крови и микротромбы. Плазмоциты имеют признаки гиперплазии
органелл и ультраструктурных повреждений цитомембран. Макрофагические клетки
регистрируются не только в кортикальной зоне лимфатических узлов, но и в составе
мозговых (мякотных) тканей (рис. 9).
В почках наблюдались множественные, локального характера поли-морфноклеточные
инфильтраты как в корковом, так и мозговом отделах. Они были представлены макрофагами,
лимфоцитами (включая лимфобласты), чаще всего располагающиеся по ходу
внутриорганных сосудов (дуговых, междольковых, прямых), а также перитубулярно вокруг
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 107 из 134
извитых и прямых канальцев нефронов. В юкстамедулярных отделах почки отмечены
интерсти-циальный отек, разволокнение и дезорганизация стромальных элементов.
Лечебное воздействие выбранных препаратов на организм экспериментальных
животных вызывает понижение воспалительных реакций со стороны соединительной ткани
и иммунокомпетентных клеток. Уменьшается сосудистая реакция, умеряется экстравазация
плазмы и форменных элементов крови, предотвращаются деструктивные изменения
висцеральных органов, создаются предпосылки к коррекции иммунного гомеостаза (в
частности, Т- и В-звеньев иммуногенеза). Относительно механизмов развития указанных
процессов можно высказать суждение о том, что они могут быть связаны с состоянием
ГГАКС. Лечебная коррекция привела к коррекции функциональной активности этой
системы. При этом происходит усиление высвобождения адаптивных гипоталамических
нонапептидов и кортикотропных гормонов, поступающих в общий кровоток и оказывающих
позитивный эффект на нормализацию нарушенного гомеостаза висцеральных органов.
Вопросы для самоконтроля:
1. Какую роль выполняет иммунная система в организме
2. Каковы основные проблемы на сегодняшний день в области предложения рынка
лекарственных средств
3. Какие преимущества иммунокорректоров природного происхождения перед
синтетичесикими
4. Характеристика изучаемых препаратов Олетим, Хитозан, Хитомаст, Рибав.
5. Влияние иммунокорректоров на организм животных.
Рекомендуемая литература: 1.В.Д.Соколов, Фармакология 1977г.
Лекция 15. Иммунодеперессанты
Содержание лекционного занятия:
1. Общая характеристика группы иммунодепрессантов
2. Азатиоприн
3. Базиликсимаб
4. Батриден
5. Зенапакс
6. Имуран
7. Рапамун
8. Тимодепрессин и Циклорал
1. Общая характеристика группы иммунодепрессантов. В определенных условиях
иммунные механизмы, играющие важную роль в защите организма от различных вредных
воздействий, могут быть причиной нежелательных реакций. Так, отторжение пересаженных
тканей и органов связано с иммунологической несовместимостью. При тканевой
несовместимости организм вырабатывает к антигенам чужеродной ткани антитела, которые
совместно с лимфоидными клетками вызывают ее повреждение и гибель. По современным
данным некоторые заболевания могут рассматриваться как аутоиммунные процессы, возникающие в результате высвобождения содержащихся в организме специфических антигенов.
В нормальных условиях эти антигены находятся в связанном состоянии и
иммунопатологических реакций не вызывают. В связи с указанными причинами получило
развитие новое направление поиска лекарств, тормозящих иммуногенез, подавляющих
продукцию антител: поскольку антитела вырабатываются лимфоцитами и плазматическими
клетками, иммунодепрессивной активностью должны обладать химические соединения,
подавляющие пролиферативные процессы в лимфоидных (иммунокомпетентных) тканях и
угнетающие биосинтез нуклеиновых кислот. Как оказалось, иммунодепрессантное влияние
оказывают многие вещества.
Классифицируют их следующим образом: подавляющие иммунный ответ в целом
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 108 из 134
(например, цитостатики), оказывающие специфическое иммунодепрессивное действие (в т.ч.
антилим-фоцитарная сыворотка), устраняющие реакции, сопровождающие иммунные
процессы, обладающие противовоспалительным и лишь частично иммунодепрессивным
действием (например, глюкокортикоиды).
Особенно выраженная иммунодепрессивная активность присуща цитостатикам алкили-рующим препаратам (циклофосфан, хлорбутин, тиофосфамид, проспидин и др.),
антиметаболитам (6-меркаптопурин, 5-фторурацил и др.), некоторым антибиотикам
(актиномицин и др.). Представители этих групп применяются в настоящее время как
иммунодепрессанты. Специфическим иммунодепрессантом является азатиоприн, близкий по
строению и действию к 6-меркаптопурину (антиметаболиту). Иммунодепрессивные
препараты могут снизить тканевую несовместимость и быть весьма эффективными при
лечении аутоиммунных заболеваний. Однако ныне существующие препараты не обладают
достаточной избирательностью действия, и их применение может сопровождаться
побочными явлениями. Они подавляют продукцию интерферона, угнетают кроветворение
(приводя к лейкопении, тромбоцитопении, анемии и даже панцитопе-нии), возможно
понижение общих защитных функций организма, активация вторичной инфекции, развитие
септицемии, при длительном применении они могут способствовать развитию злокачественных новообразований. Иммунодепрессанты (цитостатики, в том числе азатиоприн
и др.) должны применяться по строгим показаниям с соблюдением необходимых мер
предосторожности.
2. Азатиоприн
Характеристика
Светло-желтый с зеленоватым оттенком кристаллический порошок, практически
нерастворим в воде и спирте, легко растворим в щелочах.
Фармакологическое действие
Фармакологическое действие - иммунодепрессивное. Является структурным аналогом
(антиметаболитом) аденина, гипоксантина и гуанина, входящих в состав нуклеиновых
кислот (ДНК и РНК), нар ушает биосинтез нуклеотидов и подавляет пролиферацию тканей.
После приема внутрь быстро и полностью всасывается. С_тах достигается через 1-2 ч.
Связывается с белками плазмы крови на 30%. После "первого прохождения" через печень
биотрансформируется в активный метаболит - меркаптопурин. Т_1/2 составляет 5 ч.
Проникает через плацентарный барьер и секретируется в грудное молоко. Окисляется
(инактивируется) в печени при участии ксанти-ноксидазы с образованием 6-тиомочевой
кислоты. Окисление и метилирование азатиоприна происходит также в эритроцитах.
Концентрация в крови не коррелирует с выраженностью эффекта, т.к. сам азатиоприн и его
активный
метаболит
меркаптопурин,
быстро
утилизируются
из
крови
тканями.Иммунодепрессивное действие обусловлено гипоплазией лимфоидной ткани,
снижением количества Т-лимфоцитов, нарушением синтеза иммуноглобулинов, появлением
в крови ати-пичных фагоцитов и, в конечном итоге, подавлением клеточно-опосредованных
реакций гиперчувствительности .
3. Базиликсимаб
Характеристика
Химерные мышино/человеческие моноклональные антитела, полученные с помощью
ре-комбинантной ДНК-технологии.Растворим в воде, молекулярная масса около 144000 Д.
Фармакологическое действие
Фармакологическое действие - иммунодепрессивное. Антагонист рецепторов
интерлейки-на-2. Связывается с альфа-субъединицей интерлейкин-2 рецепторного комплекса
и препятствует взаимодействию с ним интерлейкина-2. Предупреждает интерлейкин-2опосредованную активацию лимфоцитов и нарушает ответ иммунной системы на антиген.
Полная блокада рецептора интерлейкина-2 поддерживается до тех пор, пока концентрация
базиликсимаба в сыворотке превышает 0,2 мкг/мл и продолжается в течение 36+14 дней. Не
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 109 из 134
вызывает высвобождения цитоки-нов или миелосупрессии. Длительных исследований на
канцерогенность не проводилось. В клинических испытаниях увеличения числа
лимфопролиферативных заболеваний у пациентов при непродолжительном применении
базиликсимаба не наблюдалось. Однако нельзя исключать повышенный риск возникновения
злокачественных заболеваний при применении иммуносупрес-сивной терапии. Адекватных и
хорошо контролируемых исследований по изучению влияния на фертильность не
проводилось. По результатам теста Эймса и теста V79 на хромосомную аберрацию не
обладает мутагенностью. Проходит через плаценту. После в/в введения в дозе 20 мг С_тах 7,1+5,1 мг/л, значения С_тах и AUC возрастают пропорционально увеличению разовой дозы
(до 60 мг). У взрослых объем распределения (при достижении равновесной концентрации) 8,6+4,1 л, Т_1/2 - 7,2+3,2 дня, клиренс - 41 + 19 мл/ч. У детей объем распределения - 5,2+2,8
л, Т_1/2 - 11,5+6,3 дня, клиренс - 20+4 мл/ч, у подростков объем распределения 10,1+7,6 л,
Т_1/2 -7,2+3,6 дня.
4. Батриден
Состав и форма выпуска
Аморфный порошок от ярко-красного до темно-красного цветов, гигроскопичен.
Практически нерастворим в воде и спирте
Фармакологическое действие
Иммунодепрессор (лекарственное средство, подавляющее защитные силы организма),
оказывающий лимфоцитотоксическое (повреждающее лимфоциты - форменные элементы
крови, принимающие участие в формировании защитных сил организма) действие. При
длительном применении увеличивает время выживания почечных аллотрансплантатов
(почек, полученных для пересадки от донора).
Форма выпуска
Таблетки по 0,1 г в упаковке по 50 штук.
5. Зенапакс
Фармакологическое действие
Иммунодепрессивное, профилактика отторжения трансплантата.
Условия хранения
Список Б. В защищенном от света месте, при температуре 2-8 °С (не замораживать). В
защищенном от света месте, при температуре 2-8 °С, не замораживать. Приготовленный
раствор - в течение 24 ч при температуре 2-8 °С, или в течение 4 ч при комнатной
температуре.
6. Имуран
Состав и форма выпуска
Таблетки, покрытые оболочкой - 1 табл.азатиоприн - 50 мгв блистере 25 шт.; в
коробке 4 блисте-ра.
Фармакокинетика
Имеет очень вариабельное всасывание. Биодоступность - 20%, поскольку быстро
превращается в 6-меркаптопурин (биодоступность последнего - 60%). С_тах - 2 ч. Создает
высокие концентрации в ткани печени, кишечника; уровень в почках, легких, селезенке,
мышцах равен таковому в плазме. Т_1/2 - 5 ч.
Фармакодинамика
Тормозит рост и развитие иммунокомпетентных клеток (лимфоцитов, плазматических
клеток), влияет на кооперативный иммунный ответ (Т-лимфоциты-макрофаги-Влимфоциты), угнетает миграцию стволовых клеток. В больших дозах (10 мг/кг) угнетает
функцию костного мозга, подавляет пролиферацию гранулоцитов, вызывает лейкопению.
Беременность и лактация
Противопоказано.
Противопоказания
Гиперчувствительность (в т.ч. к 6-меркаптопурину).
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 110 из 134
7. Рапамун
Состав и форма выпуска
Сиролимус 1 мг, вспомогательные вещества (азот, аскорбилпальмитат, жирные
кислоты, моно-глицериды, полисорбат, пропиленгликоль, фосфатидилхолин, этанол) - 1 мл.
Фармакологическое действие
Иммунодепрессивное.
8. Тимодепрессин
Состав и форма выпуска
1 мл раствора для инъекций содержит тимодепрессина 0,001 г; в ампулах по 1 мл, в
коробке 5 шт. в комплекте с ампульным ножом.
Характеристика
Синтетический пептид, состоящий из D-аминокислотных остатков глутаминовой
кислоты и триптофана.
Фармакологическое действие
Иммунодепрессивное. Ингибирует реакции гуморального и клеточного иммунитета.
На клеточном уровне уменьшает абсолютное содержание лифмоцитов периферической
крови (как хелпе-ров, так и супрессоров). Способствует сохранению числа стволовых клеток
периферической крови при выраженных аутоиммунных процессах (цитопения,
псориаз).Сокращает сроки восстановления популяций коммитированных и полипотентных
предшественников гемопоэза после воздействия цитостатиков.Не токсичен, не оказывает
мутагенного и тератогенного действия.
Циклорал
Состав и форма выпуска
1 капсула содержит циклоспорина 25, 50 или 100 мг; в упаковке 50 шт.1 мл раствора
для приема внутрь - 100 мг; во флаконах по 50 мл.
Фармакологическое действие
Иммунодепрессивное. Подавляет антигениндуцированную продукцию и секрецию
лимфокинов (в т.ч. интерлейкин-2-фактор роста Т-лимфоцитов) активированными Тлимфоцитами. Не подавляет гемопоэз, не влияет на процессы фагоцитоза.
Вопросы для самоконтроля:
1. Характеристика иммунодеперссантов их действие.
2. Показания к применению иммунодеперессантов
3. Заболевания аутоиммунной этиологии
4. Классификаци иммунодеперссантов
5. Меры предосторожности при применении имунодепрессантов
1. Самостоятельная работа студентов
Самостоятельная работа №. 1 Премиксы
Необходимые материалы. Премиксы в стандартных фасовках.
Животные. Куры , кролики, овцы..
Цель занятия. Научить студентов расчитывать колическтво необходимых премиксов в
зависимости от физиологического состояния животных с целью профилактики заболеваний.
Премикс (от лат. Рrae — вперёд, предварительно и лат. misceo — смешиваю) технологическое понятие, означающее предварительно смешанные сухие компоненты,
дозируемые в микроколичествах. Премиксы применяются в технологических процессах, где
производится сухое смешивание компонентов для решения проблемы неравномерности
смешивания.
Области
использования премиксов
комбикормовая,
пищевая,
резинотехническая, полимерная и др. промышленность. В узком смысле Премикс —
обогатительная смесь биологически активных веществ. Применяется для повышения
питательной ценности комбикормов и улучшения их действия на организм
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 111 из 134
сельскохозяйственных животных. Различают: витаминные, минеральные, витаминнотерапевтические, витаминно-минеральные и прочие премиксы. В состав премиксов входят:
1. наполнитель (продукт, способный растворять и удерживать активные вещества) —
овсяная мука, отруби, травяная мука, жмыхи, дрожжи и др.;
2. БАВ (биологически активные вещества) — витамины, микроэлементы,
аминокислоты, химико-терапевтические препараты и др. Премиксы производятся на
специализированных заводах или на специальных линиях комбикормовых предприятий.
Вырабатываются для животных разных видов, возрастов и направлений продуктивности.
Премиксы
(минерально-витаминные
концентраты)
—
это
однородные
порошкообразные смеси биологически активных веществ с наполнителем. Механизм
действия премиксов обусловлен наличием в них витаминов (А, ДЗ, Е, К, С, группы В),
микроэлементов (железа, меди, марганца, кобальта, йода, селена), макроэлементов (магния,
серы), антиоксидантов (бутилокситолуола, сантохина), противомикробных препаратов
(кормовые антибиотики и др.) в оптимальных количествах и соотношениях.
Кормовые добавки, применяемые при недостатке в рационах животных некоторых
химических элементов. В практике кормления рационы контролируют по кальцию, фосфору,
натрию, хлору и некоторым микроэлементам. К кормовым добавкам относятся поваренная
соль, мел, ракушка, костная мука, красная глина, кормовой фосфат. Кормовые добавки
необходимы животным как источник минеральных элементов. Промышленность выпускает
специальные брикеты, состоящие в основном из поваренной соли с необходимыми
микроэлементами.
Витаминно-минеральная кормовая добавка СА-37.
Основная проблема кормления домашних и экзотических животных в городских
условиях состоит в том, что зачастую хозяева не задумываются над понятием
«сбалансированный рацион», и как следствие к животному попадают и специальные корма и
пища с кухонного стола. Такое «разнообразие» при отсутствии должного моциона, как
правило, приводит к различным патологиям, особенно у молодых, старых, беременных и
кормящих животных. Каждый день ветеринарным врачам приходится сталкиваться с такими
заболеваниями, как алопеции, дерматиты, рахит, остеомаляция, остеопороз, дисбактериоз,
заболевания сердечно-сосудистой системы, печени и почек. Обычно к врачу приводят
пациента, который нуждается в комплексном и длительном лечении с применением как
симптоматической, так и патогенетической терапии, которая включает в себя использование
витаминов, минеральных веществ, пробиотиков и т. д. Самые распространенные проблемы
при недостаточном или неправильном снабжении организма животного микроэлементами и
витаминами — это заболевания кожных покровов. Шелушение, ломкая и тусклая шерсть,
аллергические реакции — это далеко не полный перечень расстройств, проявляющихся на
фоне гипо- и гипервитаминозов. Безусловно, для устранения этих признаков требуется
хорошо сбалансированное питание, и, прежде всего по витаминам и микроэлементам.
Нарушение обмена веществ в следствие отсутствия или переизбытка макроэлементов
в организме приводит к заболеваниям опорно-двигательного аппарата. Среди них наиболее
часто встречается рахит, который характеризуется нарушением образования тканей скелета,
которые возникают из-за недостаточного количества кальция в новообразующейся костной
ткани, неправильного соотношения кальций — фосфор, или недостатка вит.О в течение
периода роста. Данное заболевание животные начинают приобретать с первых дней своей
жизни. Сначала недостаточность минералов и витаминов возникает из-за неправильного
питания кормящей матери, а затем уже и самих детенышей. Как правило, у кормящих сук
после родов развивается дисбактериоз, сопровождающийся расстройством ЖКТ. Это также
является предпосылкой к возникновению рахита у щенков. В этом случае врачу приходиться
применять одновременно соли Са и Р, масляные растворы витаминов, вяжущие средства,
пробиотики и многое другое. Если потомство оказалось многоплодным, то кормящее
животное рискует приобрести такое расстройство, как остеомаляция, причиной которого
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 112 из 134
является чрезмерное выделение минеральных веществ из костей без их достаточной
обратной суплементации. В свою очередь это расстройство провоцирует возникновение
более сложных заболеваний, таких как остеопороз и артрозы.
Самостоятельная работа №. 2 Современные иммуномодуляторы, основные принципы их
применения.
Необходимые материалы. иммуномодуляторы.
Животные. Куры , кролики, овцы..
Цель занятия. Научить студентов использовать иммуномодуляторы для профилактики
илечения заболеваний.
Многочисленные публикации показывают, что включение пробиотиков в систему
выращивания молодняка животных снижает заболеваемость желудочно-кишечными
болезнями, сокращает продолжительность выращивания, снижает затраты кормов, повышает
сохранность. Пробиотики улучшают убойные и мясные качества молодняка свиней и
цыплят-бройлеров.В настоящее время на вооружении ветеринарной практики имеется
достаточное количество отечественных и импортных пробиотических препаратов различного
видового состава, предназначенных для коррекции кишечного биоценоза, стимуляции
откорма, повышения , естественной резистентности молодняка.
Перечень пробиотиков, зарегистрированных в Российской Федерации, насчитывает
около 80 наименований отечественных и импортных пробиотических препаратов.
Пробиотические культуры используются в составе кормовых добавок для молодняка
животных. Ими обогащают заменители цельного молока, витаминные, минеральные,
ферментные кормовые добавки.
В состав пробиотических лекарственных средств входят микроорганизмы, безопасные
для здоровья человека и животных, обладающие широким спектром протективных свойств, в
частности, бифидобактерии видов Bif.adolescentis, Bif.bifidum, Bif.langum, Bif.globosum,
Bif.thermophilus; молочнокислые бактерии L.acidophilus, L.planlarum, Lbulgaricus.
L.rhamnosus, L.fermentum; стрептококки Str.faecium, Str.lactis diastaticus; спорообразующие
бактерии Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis, Bacillus cereus van Toyi, Ruminococcus albus,
Bacillus panthothenticus. Бактерии-пробионты широко используют для изготовления
микробиологических консервантов для кормов (силосных заквасок) и в виде молочнокислых
продуктов. Микроорганизмы, входящие в состав силосных заквасок, усиливают
молочнокислое брожение и подавляю! бродильные и гнилостные процессы при консервации
кормов. Таким образом, концепция государственной политики в области здорового питания
населения Российской Федерации может быть реализована только при принятии концепции
рационального кормления животных, обеспечивающей оптимальное использование
генетического потенциала животных, получение продукции, полноценной как с точки зрения
содержания необходимых макро- и микронутриентов, так и безопасной с позиций
контаминации ксенобиотиками техногенного и биологического происхождения. Что такое
пробиотики?
Пробиотики это микробиологические добавки к пище или корму, которые содержат
в составе живые микроорганизмы, являющиеся представителями нормального биоциноза.
Для чего применяют пробиотики?
Цель применения пробиотиков
стимулировать рост сельскохозяйственных
животных и устранять заболевания их желудочно кишечного тракта.
Пробиотик OLIN - что это такое?
OLIN обладает уникальным сочетанием свойств: избирательное и активное
подавление широкого спектра бактериальной, вирусной и грибковой (кандидозы,
трихофития и др.) флоры, высокие ферментативная и биосинтетическая активности,
безвредность для организма и полезной микрофлоры, высокая устойчивость к
неблагоприятным условиям внешней среды.
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 113 из 134
В составе пробиотика запатентованные штаммы B.subtilis DSM 21097, B.licheniformis
DSM 21098, пробиотик имеет высокую технологическую стабильность, выдерживает
температуры и давления гранулирования и экспандирования комбикормов в промышленных
условиях. Выпускается ООО «Пробиотик Плюс» (г.Москва) по лицензии Otto Christian
Luders Handels GmbH (Германия). Может быть закуплен в порядке установленном
законодательством РФ.
Современные пробиотики - что это такое?
Современные пробиотики делятся по способу производства на дешевые кормовые из
культуральной жидкости непосредственно с ферментера вместе с остатками питательной
среды и продуктами метаболизма , и на более дорогие пробиотики из чистых
пробиотических культур. У кормовых пробиотиков выражены качества стимуляторов роста,
у чистых пробиотиков - имунномодулирующие и лечебно-профилактические. И те и другие
пробиотики делятся также по составу культур на молочнокислые (Lactobacillus acidophilus,
Lactobacillus plantarum), целлюлозолитические (Ruminococcus album) и спорообразующие
(Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis).
Самостоятельная работа №. 3 Иммунодиагностика и иммунокоррекция в клинической
практике.
Необходимые материалы. Центрифуг, пробирки, эритроцыты барана, стандартая
взвесь микроорганизмов, исследуемая кровь.
Животные. Куры, кролики, овцы..
Цель занятия. Научить студентов определять иммунный статус животных с целью
проведения иммунокоррекции состояния животного.
Накопленный фактический материал и многочисленные научные публикации
последних лет свидетельствуют о том, что характерной чертой современной инфекционной
патологии молодняка является неукоснительный рост оппортунистических кишечных
инфекций, возбудителями которых являются условно-патогенные бактерии. Эти
микроорганизмы широко циркулируют в хозяйствах, обладают широким спектром
вирулентности
(энтеротоксигенности,
адгезивности,
гемолитической
активности,
антибиотикоустойчивости).
Основным биотопом условно-патогенных бактерий родов Escherichia, Proteus,
Citrobacter, Klebsiella, Peptococcus, Bacillus, Clostridium, Bacteroides, Yersinia, Ervinia,
Salmonella, Streptococcus, Staphylococcus, Pseudomonas является кишечник теплокровных
животных. Высокая экологическая пластичность условно-патогенных бактерий позволяет им
длительно сохраняться в различных объектах внешней среды. /" На фоне высокой
обсемененности кормов и различных объектов внешней среды условно-патогенными
микроорганизмами происходит опережающее заселение кишечника новорожденных
животных энтеробактериями и замедление процессов колонизации кишечной стенки
нормальной
микрофлорой
молочнокислыми
бактериями,
бифидобактериями,
пропионовокислыми бактериями и энтерококками/
Не случайно болезни молодняка, сопровождающиеся диарейным синдромом,
остаются наиболее сложной проблемой ветеринарной медицины.
Практика показывает, что существующий в настоящее время комплекс
технологических, зоогигиенических, ветеринарно-санитарных приемов при выращивании
молодняка животных не позволяет поддерживать высокий уровень резистентности к
бактерийным инфекциям, вызванным условно-патогенной микрофлорой. Применение
антибиотиков для профилактики и лечения при желудочно-кишечных болезнях небезопасно
и становится все менее эффективным.
Особую тревогу в современных условиях ведения животноводства и птицеводства
вызывает тенденция увеличения массовой заболеваемости и падежа новорожденных телят и
поросят, а также цыплят второго периода откорма от желудочно-кишечных инфекций.
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 114 из 134
Доказано, что интенсивная технология выращивания животных искажает процессы
формирования кишечного микробиотопа у новорожденных. В отличие от домашних
сородичей у животных промышленного стада - поросят, телят и цыплят - существенно
снижен общий индекс кишечной микрофлоры. Состав кишечного микробиотопа молодняка
характеризуется присутствием анаэробных спорообразующих бактерий, стафилококков,
протея, плесневых и дрожжеподобных грибов. Количество эшерихий со сниженной
ферментативной ативностью может достигать 30-40 %. Значительно снижен уровень
молочнокислой флоры. Количество бифидобактерий минимально.
Защитный потенциал кишечной популяции лактобацилл и бифидобактерий у
молодняка продуктивных животных существенно снижен. Большую часть популяции
лактобацилл и бифидобактерий представляют клоны с низкими колонизационными
характеристиками и слабыми антагонистическими свойствами.
Под действием ряда экзогенных (антибиотики, вакцинация) и технологических
факторов нарушается микроэкологическое равновесие кишечного биотопа, что приводит не
только к доминированию потенциально патогенных микробов. Ускоряются темпы
изменчивости условно-патогенных микроорганизмов, усиливаются генетический обмен и
скорость формирования клонов, несущих плазмиды лекарственной устойчивости и нередко
включающих гены, детерминирующие адгезивные, цитотоксические и энтеротоксические
свойства условно-патогенных бактерий.
Нарушение эволюционно сложившегося равновесия в кишечном микробиотопе
приводит к развитию дисбактериоза и дисбактериозной диареи. На фоне дефицита
нормальной кишечной микрофлоры и ее низких защитных характеристик под прессингом
энтеробактерий происходит прорыв барьеров слизистой кишечника и проникновение их в
кровь и паренхиматозные органы. Накоплены многочисленные факты о проницаемости
слизистой кишечника для микроорганизмов, постоянной миграции бактерий в кровь в
составе макрофагов, о транслокации под действием большого числа факторов, в результате
чего у животного с ослабленной иммунной системой развивается генерализо-ванная
инфекция. Переболевшие животные отстают в росте и развитии и длительное время могут
быть скрытыми носителями условно-патогенных бактерий.
Не случайно одним из основных источников пищевых токсикоинфекций человека
являются животные, вынужденно убитые, а также с латентно протекающими бактерийными
заболеваниями. /В результате постоянного попадания бактерий во внутренние среды в крови
животных накапливаются промежуточные и конечные продукты фагоцитоза, чужеродные
молекулы, представляющие собой компоненты клеточных стенок микроорганизмов, а также
низкомолекулярные соединения микробного происхождения, которые блокируют факторы
естественной резистентности организма.
Дисбактериоз кишечника замыкает патогенетический порочный круг, разорвать
который необходимо как для успешной профилактики основного заболевания, так и для
ликвидации его последствий/
Научные исследования подтверждают, что отдельные компоненты рациона являются
особо полезными для здоровья животных. Использование кормов, обогащенных биологически активными кормовыми добавками, натуральными продуктами с лекарственными
свойствами, минеральными соединениями и витаминами позволяет предотвратить развитие
многих патологий у животных.
С этих позиций пробиотики следует рассматривать как часть рационального
потенциала животных, поддержания их здоровья и получения продукции высокого качества,
безопасной как в бактериальном, так и в химическом отношении.
Самостоятельная работа №. 4 Проблемы иммуностимулирующей терапии
Необходимые материалы. иммуномодуляторы.
Животные. Куры , кролики, овцы..
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 115 из 134
Цель занятия. Испытать иммуностимуляторы для определения эффективности их
иммуномодулирующих свойств.
Все иммуностимулирующие препараты по происхождению разделяются на
эндогенные и экзогенные.
К
экзогенным
препаратам
относятся
вещества
бактериального
и
грибкового происхождения, а также препараты растительного
происхождения. К эндогенным относятся иммунорегуляторные пептиды и цитокины.
Пептидами являются экстракты из органов иммунной системы (тимус, селезенка) или
продукты их жизнедеятельности. Препараты, полученные из тимуса, могут содержать его
гормоны. Цитокины представляют собой биологически активные белки, продуцируемые
лимфоцитами и макрофагами: интерлейкины, монокины, интерфероны. На практике их
используют в составе с рекомбинантными препаратами. Имеется большая группа
иммунокоррегирующих препаратов, которые были получены путем химического синтеза.
Они являются аналогами тех же препаратов, полученных из микробов или организмов
животного происхождения. Некоторые из этих препаратов обладают также и
иммунотропными свойствами. Для достижения полноценного лечебного эффекта в
современной клинической ветеринарной иммунологии непременным условием является
включение
в
комплексну
терапию иммунокоррегирующих препаратов,
восстанавливающих расстройства иммунной системы.
Аспекты иммунокоррекции животных при вирусных инфекциях имеют еще
много неразрешенных проблем.
Количество
иммуномодуляторов
непрерывно
возрастает, синтезируются все более новые, обладающие еще и иммуностимулирующим
действием. Предлагаются препараты для лечения заболеваний, не связанных с нарушением
функций 4 иммунной системы, но проявляющих способность к стимуляции или
угнетению их, однако результаты их применения во многом желают оставлять лучшего.
Однако, ни один из имеющихся иммуномодуляторов применяемых против инфекционных
болезней не обладает направленным вирусингибирующим свойством, не оказывает
этиотропного воздействия, следовательно, для cпецифической иммунокоррекции являются
не пригодными.
В настоящее время проблематичность лечения инфекционных болезней связана с
запретом ВОЗ применения в медицинской практике гипериммунных специфических
сывороток. Общеизвестно, что все патологические
процессы
в тканях
при
инфекционных болезнях_ обусловлены двумя основными причинами: вследствие
выделения токсических веществ возбудителем болезни или образованием длительно
циркулирующих в крови иммунных комплексов.
Самостоятельная работа №. 5 Современные аспекты иммунокоррекции в ветеринарии.
Необходимые материалы. иммуномодуляторы.
Животные. Куры , кролики, овцы..
Цель занятия. Научить студентов использовать иммуномодуляторы для профилактики и
лечения заболеваний.
.
Иммунокоррекция
(иммуномодуляция)
предполагает
использование
фармакологических средств для изменения функциональной активности иммунной системы.
Они могут увеличивать (иммуностимуляция) и снижать (иммуносупрессия) уровень
иммунного ответа. Специфическая иммунокоррекция ограничивается действием одного
антигена, а неспецифическая - вызывает более общие изменения в иммунном ответе и
приводит к изменению реактивности организма ко многим различным антигенам. Для
понимания действия иммуномодуляторов необходимо знание клеточных компонентов
иммунной
системы
и
механизма
их
взаимодействия,
поскольку
введение
иммуномодуляторов вызывает изменения в их активности.
Основные компоненты иммунной системы: Т- и В-лимфоциты, моноциты/макрофаги,
гранулоциты и основные продукты секреции являются мишенями для иммуномодуляции.
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 116 из 134
Иммуномодуляторы подразделяются на три группы:
физиологические вещества (например, цитокины), препараты, полученные из
микробов (например, вакцина БЦЖ) и синтетические. Хотя механизмы действия
представителей разных групп могут отличаться и зачастую не совсем понятны, в основном,
они направлены на иммунологическую активацию клеток и связаны с дисбалансом
цитоплазматических нуклеотидов, таких, как циклический аденозин монофосфат:
циклический гуанозин монофосфат (цАМФ : цГМФ). Препараты, увеличивающие уровень
цАМФ за счет активации рецепторов мембран лимфоцитов (глюкокортикоиды и
простагландины), являются иммуносупрессорами. Такие препараты, как тимопоэтин и
интерлейкин-1, увеличивающие уровень цГМФ, обладают иммуностимулирующим
эффектом.
2. ИММУНОСТИМУЛЯТОРЫ 2.1. ГОРМОНЫ ТИМУСА
В настоящее время описана биологическая активность основных гормонов тимуса
(ГТ), которые стимулируют Т-клеточную активность за счет увеличения цГМФ. Лечебный
эффект препаратов ГТ и их фрагментов при ряде иммунодефицитных состояний не вызывает
сомнений. Предполагается, что роль ГТ в развитии Т-лимфоцитов состоит в подготовке
претимоцитов к миграции в тимус, а с другой стороны в "дозревании" Т-клеток,
мигрирующих из тимуса в периферические органы иммунной системы. К этой группе
препаратов относятся тимозин V, альфа!-тимозин, тимопоэтин и сывороточный тимический
фактор (тимулин). Один гормон (гуморальный тимический фактор) увеличивает уровень
цАМФ в лимфоцитах и таким образом может оказывать иммуносупрессивное действие.
С терапевтической целью ГТ вводят для стабилизации нормального уровня Т-клеток
пациентам с дефицитом зрелых Т-лимфоцитов. При этом, ГТ не оказывают влияния на
количество и функциональную активность Т-клеток у здоровых животных. Использование
ГТ для лечения людей с некоторыми иммунодефицитами (например, гипоплазия тимуса)
оказалось успешным. В ветеринарии был также установлен эффект от применения ГТ для
коррекции Т-клеточных дефицитов у собак. Способы получения и физико-химические
характеристики всех основных тимусных факторов (особенно Т-активина), методы
иммунологического тестирования их активности и результаты клинического применения
изложены в работах В.Я.Ариона с соавторами (1981, 1983, 1989) и других исследователей.
Самостоятельная работа №. 6 Пробиотики вместо антибиотиков – это реально.
Необходимые материалы. пробиотик ветом 1.1.
Животные. Куры..
Цель занятия. Научить студентов использовать пробиотик Ветом1.1для лечения нарушения
пищеварения.
В ветеринарной практике все большее применение находят препараты из живых
микроорганизмов — пробиотики. Учеными Новосибирского ГНЦВБ «Вектор» создан ряд
биопрепаратов на основе спорообразующих бактерий Bacillus subtilis (сенная палочка),
отличающихся высокой антагонистической активностью в отношении многих патогенных и
условно-патогенных микробов, а также безвредностью для лакто- и бифи-добактерий,
находящихся в желудочно-кишечном тракте всех теплокровных. Помимо этого, пробиотики
серии «Ветом» благодаря альфа-2-интерферону, продуцированному рекомбинантным
штаммом Bacillus subtilis, обладают антивирусными свойствами. В нашем центре получена
лекарственная форма препарата, эффективная при пероральном применении, удобная для
хранения и транспортировки. Препарат предназначен для лечения и профилактики
желудочно-кишечных заболеваний, диспепсии, бактериальных инфекций (сальмонеллез,
коли-бактериоз, стрептококкоз), вирусных инфекций (рото- и парвови-русный энтерит,
грипп, парагрипп, гепатит, чума плотоядных), кокцидиоза, для коррекции иммунодефицитных состояний, лечения и профилактики дизбактериозов у телят, поросят, плотоядных,
собак, птицы, а также для стимуляции роста и развития молодняка.
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 117 из 134
Нормальная микрофлора у животных, поселившаяся как на кожных покровах, так и в
ЖКТ, играет огромную роль в поддержании их здоровья. Функции микроорганизмов
чрезвычайно многообразны:
регуляция работы кишечника, участие в обмене протеинов, жиров, углеводов,
наработка биологически активных соединений (витаминов, аминокислот, ферментов),
нейтрализация токсинов и др. Кроме того, нормальная микрофлора противодействует многим возбудителям болезней, защищает животное от инфекций.
Лечебный эффект препаратов серии «Ветом» обеспечивается продуктами
жизнедеятельности бактерий Bacillus subtilis и Bacillus licheniformis в ЖКТ животных. Эти
пробиотики подавляют широкий спектр патогенных и условно-патогенных микроорганизмов
и обладают противовирусной, проте-олитической, амилолитической, целлюлозолитической
активностью, нормализуют клеточные и гуморальные факторы иммунитета теплокровных,
повышают неспецифическую резистентность, стимулируют регенерационные процессы,
нормализуют обмен веществ.
Самостоятельная работа №. 7. Новый пробиотик «Микроцил», «Споробактерин»
Необходимые материалы. Пробиотики «Микроцил», «Моноспорин»
Животные. Куры , кролики, овцы..
Цель занятия. Научить студентов использовать пробиотики «Микроцил», «Моноспорин»
для профилактики илечения заболеваний.
Кормовая смей, пробиотического действия «Моноспорин» выгодно отличается от
всех известных аналогов более широким спектром действия и новой лекарственной формой
применения с высоким содержанием в ней активных жзинеспм обных микроорганизмов.
Назначение смеси "Моноспорин":
Подавляет условно-патогенную микрофлору и нормализует пищеварение.
Промышленно ценный шгамм микроорганизмов - основа препарата "Моноспорин" обладает высокими антагонистическими свойствами в отношении возбудителей кишечных
инфекций: грамотрицательных .-представителей родов Klebsiella, I-scherichia, Salmonella,
Proteus, Pseudomonas; грамположнте 1ьныч - Staphyloeoecus, Streptococcus. Препарат также
хорошо уживается с нормофлорой кишечника и стимулирует ее рост. "Моноспорин"
применяется для профилактики и лечения дисбактериозов, токсичной
диспепсии,
клебсиеллезов, эшерихиозов, сальмонеллезов, кандидомикозов, кокковых кишечных
инфекций сельскохозяйственных животных и птицы.
Увеличивает усвояемость корма и прирост живой массы. Бактерии разлагают
сахарозу, мальтозу, глюкозу, продуцируют каталазу, эндоглюконазу и другие ферменты
(целлюлазу, целлобиазу и пектиназу), участвующие в расщеплении целлюлозы и пектиновых
веществ. Стимулирует развитие кишечных целлюлозолитических руминококков,
лактобацилл, гидролизует крахмал.
Повышает сохранность молодняка и увеличивает продуктивность
животных, так как "Моноспорин":
• беспечивает необходимое регулирующее действие на функциональную способность
щитовидной железы, что можно считать одним из .механизмов его влияния на
биохимические процессы организма;
• повышает активность клеточного ответа крови - увеличивает на 63% НСТ-тест
моноцитов, на 39% нейтрофилов и фагоцитарное число до 1,63;
• активирует обмен веществ в организме животных, стимулирует синтез аминокислот
и витаминов, подавляет патогенную микрофлору, повышает общую резистентноеть
организма к различным неблагоприятным факорам.
Является эффективной альтернативой антибиотикам. "Моноспорин", благодаря
высокой активности в подавлении патогенов, может применяться в качестве как
превентивного (профилактического) так и терапевтического (лечебного) средства. Препарат
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 118 из 134
безопасен для животных в любых дозах, при этом сохраняет продукты животноводства
безопасными для человека, в отличии от антибиотиков.
Форма выпуска: жидкая и сухая
"Моноспорин" (жидкий) выпускается в виде гелеобразной жидкости от светлокоричневого до темно-коричневого цвета.
Расфасован во флаконы по -400мл, упакован в гофроящики по 12 флаконов. Хранить
при температуре oi ОС до +ЗОС. Срок годности - 1 1 од.
"Моноспорин" (сучой) выи /скается в виде сухой сыпучей смести от светлокоричневого до темно-коричневого цвета. Расфасован в бумажные мешки по 25 кг.
Препарат хранится при температуре от -1 ОС до +ЗОС в сухом помещении без
попадания прямых солнечных лучей. Срок" годности - шесть месяцев.
Самостоятельная работа №. 8 Биостимулятор для бройлеров
Необходимые материалы. Биостимулятор для бройлеров
Животные. цыплята.
Цель занятия. Научить студентов использовать пробиортик групповым методом цыплятам с
целью стимуляции роста.
Цель работы - оценка эффективности ферментно-пробиотического препарата бацелл
и кормовой смеси пробиотического действия моноспорин, производимых предприятиями
группы компаний «Кубань-биотехагро» при выращивании цыплят-бройлеров.
Бацелл содержит ассоциацию бактерий, выделенных из желудочно-кишечного
тракта животных: Bacillus subtilis, Ruminococcus albus и Lactobacillus acidophilus. Он обладает
выраженными пробиотическими свойствами, а также целлюлозолитической и глюканазной
активностью. Готовый препарат представляет собой сухой сыпучий порошок со слабым,
специфическим для данного продукта запахом.
Моноспорин производится промышленным способом на основе штамма
микроорганизмов Bacillus subtilis 090 в гелевой форме. Лн обладает высокими
антагоническими свойствами в отношении многих возбудителей кишечных инфекций и
используется как для профилактики дисбактериозов, так и для их лечения. Благодоря
наличию спор эффективность препарата не снижается при прохождении через желудочнокишечный тракт.
Научно-хозяйственный опыт проводили в ОАО "ППЗ Русь" г. Кореновска
Краснодарского края на цыплятах-бройлерах экспериментального кросса «СК Русь 6».
Кормление осуществляли кормосмесями, сбалансированными по основным
питательным и биологически активным веществам по нормам, рекомендуемым ВНИТИП
(2004) для цыплят-бройлеров, за исключением клетчатки.
К основному рациону цыплят первой группы в течение периода выращивания
добавляли бацелл - 0,2% от массы корма, птице второй группы в тот же срок скармливали
бацелл в той же дозе и выпаивали моноспорин - по 3 мл на 100 гол. С 3-го по 14-й и с 30-го
по 35-й день. Молодняку третьей группы в продолжение периода выращивания давали
препарат-аналог с пробиотико-ферментативной активностью - 0,1% от массы корма. В
течение опыта учитывали сохранность поголовья, определяли динамику массы тела, расход
кормов на 1 кг прироста и исследовали состав кишечной микрофлоры (молочнокислые и
целлюлозолитические бактерии, бациллы).
Установили, что совместное использование кормовых добавок бацелл и моноспорин
обеспечивало увеличение интенсивности роста птицы при низких затратах корма.
Для более детального анализа воздействия изучаемых кормовых добавок на птицу
исследовали микробный состав слепых отростков кишечника.
При анализе содержания в слепых отростках целлюлозолитических бактерий и бацилл
отмечали, что наиболее высокий титр микроорганизмов был у цыплят второй группы,
потреблявшей бацелл и моноспорин, что связано с их взаимным стимулированием, которое
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 119 из 134
обеспечивало активизацию обменных процессов и в конечном итоге влияло на
интенсивность роста птицы.
Заключение. При выращивании цыплят-бройлеров на растительных кормах
целесообразно использовать ферменто-пробиотический препарат бацелл и кормовую смесь
пробиотического действия моноспорин
Самостоятельная работа №. 9 Селен и токоферол на фоне пробиотика
Необходимые материалы.
Животные. Куры , кролики, овцы, цыплята.
Цель занятия. Научить студентов использовать препараты микроэлементов в сочетании с
пробмотиками.
Важнейшими показателями, позволяющими судить об эффективности кормления,
являются сохранность поголовья, скорость роста молодняка и эффективность использования
корма. В ходе третьего опыта самая высокая сохранность поголовья была в третьей группе,
которая благодаря добавкам бифидума-СХЖ и «ловита» превзошла контроль на 7%.
Результаты первого опыта позволили сделать вывод, что лучшее действие на прирост
живой массы бройлеров оказала совместная добавка токоферола и селенита натрия (третья
группа). Разница в 12% достоверна (Р>0,95) по сравнению с контролем.
Во втором эксперименте наиболее высокой интенсивности роста цыплят
способствовали добавки бифидумбактерина, селенита натрия и витамина Е. Эта группа
также достоверно превосходила контрольную по приросту живой массы (на 11,9%).
При проведении третьего опыта лучшим приростом живой массы отличились цыплята
третьей группы: разница с контролем в 13,3% достоверна. На наш взгляд, причиной этого
явилось лучшее усвоение токоферола и селена из комплексного соединения и более высокий
уровень депонирования их в печени.
Из показателей продуктивности, наиболее эффективно использовали корм бройлеры
третьей группы заключительного эксперимента: по сравнению с контролем на 1 кг прироста
массы тела израсходовано на 9,5% корма меньше.
Показатели перекисного окисления ли-пидов и системы антиоксидантной защиты в
крови цыплят-бройлеров приведены в таблице 2.
Препарат «ловит Е + Se» в комплексе с бифидумом-СХЖ, относительно добавок
селенита натрия и витамина Е в сочетании с пробиотиком, в большей мере ингибировал в
организме цыплят процессы свободно-радикального окисления и стимулировал
антиоксидантный механизм защиты (3-я группа). При этом концентрация конъюгированных
диен (начальных продуктов ПОЛ) у птицы этой группы была ниже на 40% (Р>0,95).
По сравнению с контролем в крови цыплят, потреблявших комплексный препарат в
сочетании с бифидумом-СХЖ, малонового диальдегида (вторичного продукта ПОЛ)
содержалось на 30% меньше (Р>0,95).
Установлено также, что добавки «ловита» в комплексе с бифидумом-СХЖ способствовали более высокой концентрации в крови глутатионпероксидазы и глутатионредуктазы, чем селенит натрия, витамин Е и пробиотик. Это свидетельствует о том,
что комплексное соединение в наибольшей мере активизировало ферментативную систему,
которая содействовала накоплению энергии в макроэргических связях АТФ, катализируя тем
самым синтез глутамина из глутаминовой кислоты.
Более интенсивное вовлечение селена и витамина Е в механизм ингибирования
свободнорадикального окисления за счет повышения уровня депонированных
антиоксидантов в печени цыплят-бройлеров третьей группы позволило у них по сравнению с
контрольными аналогами снизить активность каталазы на 16,5%.
В целом, комплексное соединение селена и токоферола в сочетании с пробиотиком
оказывает наиболее ярко выраженное стимулирующее действие на антиоксидантную
систему организма птицы, ингибируя в нем свободнорадикальное окисление.
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 120 из 134
Самостоятельная работа №. 10 Лечение мочекислого диатеза
Необходимые материалы.
Животные. Куры.
Цель занятия. Научить студентов использовать пробиотики с целью лечения моческислого
диатеза.
Мочекислый диатез (подагра) весьма распространен в птицеводческих хозяйствах
Армении. Отход кур порой достигает 20% и более.
У заболевших особей значительно снижаются продуктивность, резистентность, на
этом фоне развиваются секундарные инфекции, вызванные условно-патогенными
микробами.
Совершенствование методов диагностики,профилактики и лечения этого заболевания
имеет большое значение для промышленного птицеводства не только нашей республики.
Мы изучали терапевтический эффект милурита, настоя петрушки и гидрокарбоната
натрия в опыте на 30 курах 78-79-недельного возраста кросса «Хай лайн».
Поголовье разделили на три равные по численности группы. Первую, контрольную,
перевели на обычный рацион. Вторую и третью, у которых воспроизвели так называемый
«протеин-Са-пурининдуцированный» мочекис-лый диатез, перевели на рацион,
обогащенный «протеин-Са-пуриновыми» компонентами.
В дополнение куры третьей группы получали препарат милу-рит (ДВ-аллопуринол) в
дозе 10 мг на 1 кг корма в два приема за сутки, а вместо питьевой воды — настой петрушки в
0,5%-ном водном растворе гидрокарбоната натрия в соотношении 1:300. Наблюдения за
птицей вели с первого дня эксперимента. Птица выглядела подавленной, у нее отмечались
снижение яйценоскости, потеря аппетита, анемичность сережек и гребня, диарея с выделением белого помета, полидипсия, резкое снижение яйценоскости.
После скармливания лечебных средств на 5-й день у кур третьей группы наметилось
улучшение общего состояния, помет стал более оформленным, менее водянистым (но белый
налет присутствовал, и в большом количестве), анемичность сережек и гребня была слабо
выражена, появился аппетит, но полидипсия сохранилась; у птицы второй группы были
такие симптомы, как диарея, анорексия, анемичность сережек и гребня.
По сравнению с исходными данными (до лечения) яйценоскость кур третьей группы
повысилась в 3,6 раза, температура тела снизилась, частота пульса уменьшилась на 26%,
дыхания — на 62%, достигнув нормы.
Клинические показатели в динамике приводятся на рис. 1. Температура тела и частота
дыхания приблизились к величинам здоровых особей. Яйценоскость по сравнению с курами
второй группы повысилась, от 10 кур за 5 дней получено 13 яиц.
На 10-й день лечения у кур третьей группы общее состояние было хорошим, сережки
и гребень порозовели, помет стал нормальной консистенции с небольшим беловатым
налетом, прием корма и воды — удовлетворительный.
Во второй группе на 8-й день эксперимента пали две курицы с характерными
признаками подагры, на 14-й день — еще столько же. Патологоанатомические изменения —
идентичные.
Температура тела у кур второй и третьей групп на 15-й день была повышенной,
частота сердечных сокращений в третьей группе уменьшилась на 17%, частота дыхания
практически приблизилась к норме. Яйценоскость по сравнению со второй группой повысилась.
На 5-й день лечения у кур третьей группы замечена тенденция к увеличению в крови
количества эритроцитов, а на 15-й день их стало больше уже на 23,5% (4,3 т/л).
Содержание лейкоцитов у птицы третьей группы за 15 дней лечения уменьшилось на
16%, оставаясь при этом выше нормы, уровень гемоглобина превышал норму на 10%.
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 121 из 134
Параллельно изменялась и кислородная емкость крови.
Цветовой показатель у кур на 5-й день лечения приблизился к норме, но потом начал
снижаться и на 15-й день составил 0,8 (на 20% ниже нормы). Производственная проверка
применимой нами схемы лечения спонтанной подагры кур показала высокий лечебный
эффект — до 95,2%.
Для лечения мочекислого диатеза предлагаем использовать препарат милурит в дозе
10 мг/кг (с кормом в два приема), а вместо питьевой воды — настой петрушки (1:300) в
0,5%-ном растворе гидрокарбоната натрия. Курс лечения — 15 дней.
Современная сельскохозяйственная птица, обладающая генетически обусловленной
высокой скоростью роста, чувствительна даже к незначительным колебаниям в рационе
уровня питательных веществ, в том числе и антиоксидантов.
В биохимических процессах селен, как и витамин Е, играет роль антиоксиданта.
Недостаток этого элемента в рационе вызывает у птицы заболевание, похожее на авитаминоз
Е. При полном обеспечении селеном потребность ее в токофероле снижается, предотвращая
тем самым мышечную дистрофию, экссудативный диатез. Кроме того, в печени витамин Е и
селен участвуют в регуляции перекисного окисления липидов.
Самостоятельная работа №. 11 Ферментный препарат на основе фитазы.
Необходимые материалы.
Животные. Куры , кролики, овцы, цыплята.
Цель занятия. Научить студентов использовать ферментные перпараты на основе фитазы
для иммунокоррекции организма животных.
Компания «АгроГрад-Трейд» на протяжении нескольких лет поставляет
животноводству наиболее эффективный из фосфатов — монокальцийфосфат. Не так давно
компания освоила достаточно новую технологию получения дополнительного источника
фосфора для птицы и свиней на основе фитазы. Как ферментный препарат фитаза не
заменяет полностью истчники фосфора, однако их совместное применение позволяет
существенно уменьшить в комбикорме количество минерального сырья и таким образом
повысить концентрацию питательных веществ. Вследствие этого сокращается объем
потребления корма сегодня компания предлагает животноводам отечественный продукт—
фитазосодержащий препарат кормофит (на основе фитазы А). Он разработан группой
ученых МГУ им. М.Е. Ломоносова и Российской академии наук с использованием самых
последних достижений мировой микробиологии и энзимологии. Опыт ученых, а также тот
факт, что производство данного продукта начато а Европе, где применяется высокотехнологичное оборудование, позволяют гарантировать, стабильно высокое качество
фитазы — основного действующего вещества препарата.
Фитазы (мио-инозитол-гекса-кисфосфат-3(6)фосфогидролазы, КФ 3.1.3.8 и 3.1.3.26)
являются фосфатазами, которые гидролизуют фитат до миоинозитола неорганического
фосфата легко усваиваемых животными. Попав в рацион, они таким образом повышают
усвояемость зерновых и бобовых, в том числе сои.
В растениях фитазная активность проявляется при прорастании семян. Продуцентами
фитаз служат также бактерии, дрожжи и грибы. Фитаза А секретируется грибным штаммом
рода Penicillium.
Кормофит выпускается в виде порошка светло-бежевого цвета и обладает
активностью 2500 фитазных единиц в грамме.
«АгроГрад-Трейд» совместно с ВНИТИП поставили в производственных условиях
эксперименты по скармливанию фитазосодержащих препаратов цыплятам-бройлерам и
курам-несушкам. Подобранные для опытов группы птицы получали: первая, контрольная, —
основной рацион (ОР) с монокаль-цийфосфатом, вторая — ОР с пониженным на 30-40%
уровнем фосфата и добавкой распространенного европейского фитазного препарата
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 122 из 134
(натуфос-5000) в рекомендованных производителем дозах, третья — ОР, содержащий
фосфата также меньше на 30-40% и добавку кормофита. Для определения оптимальных доз
испытуемого препарата одновременно с этими группами птицы в опыте участвовали группы,
в рационе которых нормы кормофита были уменьшены или увеличены.
Сравнительное испытание показало, что по эффективности кормофит в дозах от 130
до 160 г на 1 т комбикорма не уступает натуфосу. В частности, бройлеры кросса «Кобб» в
опытных группах (с различными дозами кормофита) по сравнению с контролем весили на 48% больше (2119-2195 г против 2028 г). Затраты корма на прирост у них снижались на 3-10%
(1,51-1,62 кг против 1,67). По сравнению с бройлерами второй группы, получавшими
натуфос, их живая масса выше на 3-/%, а затраты корма ниже на 2,5-8%.
Внесение фитазосодержащих ферментов в комбикорма позволяет в 1,5-2 раза
уменьшать норму монокальцийфосфата без отрицательного влияния на минеральный обмен,
сохранность поголовья, продуктивность бройлеров, кур и качество яиц [26].
Самостоятельная работа №. 12 Микрогранулят тилозина: эффективность и экономичность.
Необходимые материалы.
Животные. овцы.
Цель занятия. Научить студентов использовать тилозин для лечения животных при
различных заболеваниях
ДОКСИН - 200 ВС®
оральный водорастворимый порошок для ветеринарного применения Состав в 1 гр
порошка: доксициклин гиклат 100 мг тилозин тартрат 100 мг наполнитель до lгp.
ОПИСАНИЕ по внешнему виду Доксин -200 ВС® представляет собой
мелкокристаллический порошок светло-желтого цвета. Фармакологические свойства:
доксициклин гиклат является полусинтетическим производным окситетрациклина. Активен
в отношении большинства грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов, в
т.ч. микоплазм, хламидий, риккетсий, бруцелл, вибрионов, клостридий. Ингибирует синтез
протеинов в микробной клетке, нарушая связь транспортных - РНК с субъединицей
рибосомальной мембраны. Относится к препаратам пролонгированного действия - быстро
всасывается и медленно выводится из организма. Биодоступность доксициклина не
изменяется под влиянием пищи. Имеет высокую степень растворимости в липидах. С
белками плазмы связывается на 80-92%. Пик содержания в крови отмечается через 2,5 ч.
после приема. Терапевтический уровень антибиотика в тканях сохраняется в течение не
менее 20 часов. Доксициклин проникает в большинство тканей и жидкостей организма.
Концентрируется в печени, выделяется с желчью, мочой и фекалиями в биологически
активной форме. Тилозин тартрат принадлежит к группе макролидов, является продуктом
ферментационной активности актиномицета Streptomyces fradiae. Активен против ряда
грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов, в т.ч. микоплазм, пастерелл,
клостридий, вибрионов, риккетсий, спирохет, хламидий, эризипелотриксов, пневмококков,
стрептококков и стафилококков. Особенно чувствительны к антибиотику патогенные
микоплазмы. Тилозин подавляет белковый синтез бактериальных
- клеток в результате образования комплекса с субъединицами рибосом. При
пероральном введении хорошо всасывается, проникает во все внутренние органы и
поддерживается на терапевтическом уровне в крови животных и птиц в течение 6-8 ч.
Максимальные концентрации в крови достигаются через 30 минут после введения препарата.
Биодоступность тилозина не изменяется под влиянием пищи. Выделяется из организма с
мочой, желчью и фекалиями. Показания к применению: доксин -200 ВС® используют для
лечения и профилактики гастроинтестинальных инфекций у животных и птиц, вызванных
чувствительными к доксициклину и тилозину микроорганизмами, а также при инфекциях
дыхательных и мочевыводящих путей. Антибактериальная активность препарата
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 123 из 134
распространяется на Mycoplasma, Escherichia coli, Salmonella spp., Haemophilias spp., Brucella
spp., Pasteurella spp., Bordetella, Clostridium spp., Campylobacter, Chlamydia, Rickettsia,
Staphylococcus spp. и Streptococcus spp. Приобретенная бактериальная резистентность
развивается очень медленно. Перед применением следует проверить чувствительность
возбудителей к доксициклину и тилозину. Во время лечения единственным источником
питья должна быть вода с растворенным в ней препаратом. ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ И
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ: не рекомендуется применять Доксин-200ВС® одновременно с
пенициллинами, цефалоспоринами и линкомицином в связи с выраженным снижением
антибактериального эффекта тилозина; доксициклин не сочетается с препаратами железа,
поскольку при этом может нарушаться всасывание и тех, и других.
ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ И ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ для применения препарата
является обнаружение штаммов патогенных бактерий, резистентных к доксициклину и
тилозину. Побочные эффекты: в очень редких случаях может наблюдаться
сверхчувствительность. ДОЗИРОВКА только для орального использования. Для лечения
птиц и поросят дозировка препарата составляет -1кг на 1000 л питьевой воды в сутки.
Продолжительность курса- 3-4 дня; при смешанных инфекциях, а также хроническом
течении болезни - 5 дней. Если в течение 2-3 дней не произойдет заметного клинического
улучшения, рекомендуется повторно проверить чувствительность микроорганизмов к
доксициклину и тилозину. С профилактической целью Доксин -200 ВС®
ПОКАЗАНИЯ из расчета 1 кг на 2000 л питьевой воды в сутки, в течение 3-5 дней.
Телятам, овцам и козам Доксин -200 ВС® назначают из расчета 5' гр. препарата на 100кг.
живой массы тела животного, в течение 3-5 дней. Препарат растворяют в небольшом
количестве теплой воды, молока или заменителя молока. Период полного выведения
препарата из организма животных: мясо жвачных животных ....... 14 дней, мясо свиней....... 8
дней, мясо птицы....... 7 дней. Ограничения в применении: мясо животных и птицы,
вынужденно убитых до истечения указанных сроков, используют непосредственно для
кормления плотоядных или для производства мясокостной муки. Хранение:
ХРАНЕНИЕ. Препарат хранят в сухом, защищенном от света месте, при температуре
15 - 25°С.
Срок годности смотри на упаковке.
УПАКОВКА пластиковые банки по 1000гр. и бочки по 25 кг
Самостоятельная работа №. 13 Дисбактериозы молодняка – проблема актуальная.
Необходимые материалы.
Животные. Куры , кролики, овцы, цыплята.
Цель занятия. Научить студентов определять причину дисбактериозов, способы
профилактики дисбактериозов и устранения дисбактериозов.
Накопленный фактический материал и многочисленные научные публикации
последних лет свидетельствуют о том, что характерной чертой современной инфекционной
патологии молодняка является неукоснительный рост оппортунистических кишечных
инфекций, возбудителями которых являются условно-патогенные бактерии. Эти
микроорганизмы широко циркулируют в хозяйствах, обладают широким спектром
вирулентности
(энтеротоксигенности,
адгезивности,
гемолитической
активности,
антибиотикоустойчивости).
Основным биотопом условно-патогенных бактерий родов Escherichia, Proteus,
Citrobacter, Klebsiella, Peptococcus, Bacillus. Clostridium, Bacteroides, Yersinia, Ervinia,
Salmonella, Streptococcus, Staphylococcus, Pseudomonas является кишечник теплокровных
животных. Высокая экологическая пластичность условно-патогенных бактерий позволяет им
длительно сохраняться в различных объектах внешней среды. На фоне высокой
обсемененности кормов и различных объектов внешней среды условно-патогенными
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 124 из 134
микроорганизмами происходит опережающе заселение кишечника новорожденных
животных условно патогенной микрофлорой, нормальной микрофлорой молочнокислыми бактериями.
Не случайно болезни молодняка, сопровождающиеся диарейным синдромом,
остаются наиболее сложной проблемой ветеринарной медицины. Практика показывает, что
существующий в настоящее время комплекс технологических, зоогигиенических,
ветеринарно-санитарных приемов при выращивании молодняка животных не позволяет
поддерживать высокий уровень резистентности к бактерийным инфекциям, вызванным
условно-патогенной микрофлорой. Применение антибиотиков для профилактики и
лечения при желудочно-кишечных болезней становиться все менее эффективным, и
способствует развитию дисбактериоза.
Особую тревогу в современных условиях ведения животноводства и птицеводства
вызывает тенденция увеличения массовой заболеваемости и падежа новорожденных телят и
поросят, а также цыплят второго периода откорма от желудочно-кишечных инфекций.
Доказано, что интенсивная технология выращивания животных искажает процессы
формирования кишечного микробиотопа у новорожденных. В отличие от домашних
сородичей у животных промышленного стада -поросят, телят и цыплят - существенно
снижен общий индекс кишечной микрофлоры. Состав кишечного микробиотопа молодняка
характеризуется
присутствием анаэробных спорообразующих бактерий, стафилококков, протея,
плесневых и дрожжеподобных грибов. Количество эшерихий со сниженной ферментативной
активностью может достигать 30-40 %. Значительно снижен уровень молочнокислой
флоры, количество б и ф и д о б а к т е р и й и мало. Большую часть популяции лактобацилл
и бифидобактерий представляют клоны с низкими колонизационными характеристиками и
слабыми антагонистическими свойствами. Под действием ряда экзогенных (антибиотики,
вакцинация) и технологических факторов нарушается микроэкологическое равновесие,
кишечного биотопа, что приводит не только к доминированию потенциально патогенных
микробов. Ускоряются темпы изменчивости условно-патогенных микроорганизмов,
усиливаются генетический обмен и скорость формирования клонов, несущих плазмиды
лекарственной устойчивости и нередко включающих гены, детерминирующие адгезивные,
цитотоксические и энтеротоксические свойства условно-патогенных бактерий.
Нарушение эволюционно сложившегося равновесия в кишечном микробиотопе
приводит к развитию дисбактериоза и дисбактериозной диареи. На фоне дефицита
нормальной кишечной микрофлоры и ее низких защитных характеристик под прессингом
энтеробактерий происходит прорыв барьеров слизистой кишечника и проникновение их в
кровь и паренхиматозные органы.
Накоплены многочисленные факты о проницаемости слизистой кишечника для
микроорганизмов, постоянной миграции бактерий в кровь в составе макрофагов, о
транслокации под действием большого числа факторов, а результате чего у животного с
ослабленной иммунной системой развивается генерализованная инфекция. Переболевшие
животные отстают в росте и развитии, и длительное время могут быть скрытыми носителями
условно-патогенных бактерий. Не случайно одним из основных источников пищевых
токсикоинфекций человека являются животные, вынужденно убитые, а также с латентно
протекающими бактерийными заболеваниями.
В результате постоянного попадания бактерий во внутренние среды в крови
животных накапливаются промежуточные и конечные продукты фагоцитоза, чужеродные
молекулы, представляющие собой компоненты клеточных стенок микроорганизмов, а также
низкомолекулярные соединения микробного происхождения, которые блокируют факторы
естественной
резистентности
организма.
Дисбактериоз
кишечника
замыкает
патогенетический порочный круг, разорвать который необходимо как для успешной
профилактики основного заболевания, так и для ликвидации его последствий.
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 125 из 134
Научные исследования подтверждают, что отдельные компоненты рациона являются
особо полезными для здоровья животных. Использование обогащенных биологически
активными кормовыми добавками, натуральными продуктами с лекарственными
свойствами.
Самостоятельная работа №. 14 Применение лактобифадола в сочетании с лизином при
откорме бройлеров
Необходимые материалы.
Животные. Куры , кролики, овцы, цыплята.
Цель занятия. Научить студентов использовать лактобифадол в качестве
иммуномодулятора при различных заболеваниях животных.
Лактобифадол - препарат ветеринарного назначения, в форме порошка.
Лактобйфадол содержит живые микроорганизмы - представители нормальной
микрофлоры кыиечника животных: лактобактерии (не менее 1 млн./г и бифидобактерии не
менее 80 млн/г ), а также витамины, микроэлементы, незаменимые и органические кислоты,
другие биологически активные вещества.
Лактобифадол - повышает иммунитет и резистентность организма, обеспечивает
заселение кишечного тракта нормальной микрофлорой, препятствуя развитию условнопатогенных и патогенных бактерий (эшерихий, сальмонеллы, стафилококки, протей и т.д.) и
грибов. Лактобифадол - способствует восстановлению нормального микробиоценоза кожи и
открытых полостей в том числе мочеполовой системы. Лактобифадол восстанавливает
аппетит, пищеварение после перенесённых заболеваний, применения антибиотиков и др.
лекарственных препаратов. Улучшает рост, развитие здоровых животных, обеспечивает
хорошее состояние кожи и шерсти. Нормализует обмен веществ, усвоение макро - и
микроэлементов корма. Лактобифидол - благоприятно влияет на кальциево-фосфорный
обмен, структуру костяка и суставной хрящ. Профилактирует развитие ожирения,
способствует нормализации веса. Препарат Лактобифадол изготовлен из живых бактерий
видов Лактобактериум ацидофилюм и Бифидобактериум адолесиентис, смешанных со
специальным наполнителем и выделенных контактно-сорбционным способом.
Форма выпуска: По внешнему виду препарат представляет собой однородный
сыпучий порошок от белого до светло-коричневого цвета. В 1 г содержится не менее 80 млн
живых клеток бифидобактерий и 1 млн клеток лактобактерий. Препарат выпускают
расфасованным в полиэтиленовые пакеты по 50, 100, 500 и 1000 г, запаянные термическим
способом. Условия хранения и срок годности
Лактобифадол храпят в cyxoм, темном месте при температупе от 2° до 10°С. Срок
годности препарата - 12 месяцев со дня изготовления.
Биологические свойства.
Лечебно-профилактическое: эффект препарата обеспечивается за счет раннего
заселения кищечника новорожденных животных ацидофильными и бифидобактериями
которое препятствуют размножению патогенной и условнопатогенноп микрофлоры, в
том числе эшерихий, протея, сальмонелл, стафилококков.
Применение npeпарата способствует восстановлению кишечного нормо-биоза,
предупреждает развитие секундарных инфекций при вирусных заболеваниях, снижает
вероятность развития инфекционных осложнений в послеродовой период, стимулирует рост
и развитие животных, повышает их общую резистентность. Порядок применении
препарата
Препарат лактоблфадол предназначен для профилактики и лечения желудочнокишечных заболеваний бактериальной этиологии (колибактериоз, садьмонеллез и др.), а
также заболеваний различной этиологии, сопровождающихся дисбактерисзом у телят,
жеребят, поросят, пушных зверей, птицы, собак и кошек.
С профилактической целый препарат дают с первого дня жизни один раз в сутки
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 126 из 134
ежедневно в течении пяти дней в дозах (на 1 кг массы): цыплятам - 0,3-0,5 г в смеси с
кормом; другим зидам животных - 0,2-0,4 г с молозивом, молоком или с кипяченой видой.
Профилактический курс повторяют с 12-15 дневного возраста используют теже дозы,
продолжительность и способ введения препарата.
С лечебной целью удвоенную дозу препарата суспендируют в молоке или кипяченой
воде, либо примешивают к корму и дают один раз в день до выздоровления.
В период применения препарата пероральное введение антибиотиков и других
химиотерапевтических
веществ
не
разрешается,
т.к.
они препятствуют
приживлению в кишечнике ацидофильных и бифидобактерий.
Внутримышечное применение антибиотиков при наличии показаний не
ограничивается.
Побочные действия
Лактобифадол не вызывает осложнений или побочных действий.
Противопоказанно
Противопоказаний для применения препарата не установлено.
Самостоятельная работа №. 15. Применение иммуномодуляторов продуктивным животным.
Необходимые материалы.
Животные. Куры , кролики, овцы, цыплята.
Цель занятия. Научить студентов использовать иммуномодуляторы для продуктивных
животных с целью профилактики снижения иммуннного статуса животных.
Продукты убоя животных при определенных условиях могут быть источником
возникновения не только типичных инфекционных и инвазионных болезней у людей, но и
различных пищевых заболеваний, к которым относят пищевые токсикоинфекции и
токсикозы. Микробные контами-нанты - возбудители пищевых токсикоинфекций - создают
особый риск для здоровья человечества. Актуальность этой проблемы вытекает из того, что
почти миллион диарейных инфекций в год связаны с микробиологическим фактором.
Отчеты ВОЗ показывают, что увеличение производства продукции животного
происхождения сопровождается последовательным нарастанием вспышек пищевых
токсикоинфекций у человека, в том числе сальмонеллеза в 7 раз, иерсиниоза и
кампилобактериоза - в 15 раз.
Важным звеном в решении проблемы здорового питания является интенсификация
животноводства, и в первую очередь птицеводства и свиноводства, которая возможна только
при принятии и неукоснительном исполнении концепции рационального кормления
животных. Данная концепция предусматривает применение полноценных кормов,
обеспечивающих оптимальное и бережное использование генетического потенциала
продуктивности животных и получение от них продукции, благополучной в ветеринарно-санитарном отношении.
Накопленный фактический материал и многочисленные научные публикации
последних лет свидетельствуют о том, что характерной чертой современной инфекционной
патологии молодняка является неукоснительный рост оппортунистических кишечных
инфекций, возбудителями которых являются условно-патогенные бактерии. Эти
микроорганизмы широко циркулируют в хозяйствах, обладают широким спектром
вирулентности
(энтеротоксигенности,
адгезивности,
гемолитической
активности,
антибиотикоустойчивости).
Механизм действия пробиотиков в отличие от антибиотиков направлен не на
уничтожение, а на конкурентное исключение условно-патогенных бактерий из состава
кишечного микробиотопа, чтобы предотвратить усиление и передачу факторов
вирулентности в популяции условно-патогенных бактерий.
Бактерии-пробионты
обеспечивают
опережающее
заселение
кишечника
новорожденных животных нормальной микрофлорой и создают биологический барьер,
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 127 из 134
преграждающий доступ к ней условно-патогенных бактерий.
В процессе жизнедеятельности бактерии-пробионты вырабатывают комплекс
биологически активных соединений, избирательно воздействующих на условно-патогенные
микробы. Например, лизоцим резко снижает способность грамнегативных бактерий к
делению и размножению, молочная кислота замедляет их рост, перекись водорода разрушает
их клеточную стенку. Бактериоцины обладают общим бакте-риостатическим действием на
грамотрицатель-ную микрофлору. Таким образом, по силе воздействия на негативную
кишечную микрофлору пробиотики, препараты из живых бактерий могут быть
альтернативой антибиотикам. Снижение популяционного уровня и блокада факторов
патогенное™ у грамотрицательной микрофлоры лежит в основе профилактического эффекта
пробиотиков.
Дополнительным механизмом, усиливающим защитные свойства бактерийпробионтов, является обмен сигнальными молекулами с иммунокомпетентными клетками
слизистой кишечника, усиливая продукцию секреторного иммуноглобулина А, комплемента,
лизоцима, которые блокируют прикрепление энтеропато-генных бактерий к поверхности
слизистой.
Первые попытки использовать пробиотики были связаны с поиском путей
профилактики сальмонеллеза и колибактериоза в промышленном птицеводстве без
применения антибиотиков, хотя по существу доказательство регуляторного влияния
молочнокислых бактерий на микрофлору кишечника установил еще И.И. Мечников (19031905).
Эта задача остается актуальной и в настоящее время, поскольку в международном
сообществе существует четкое понимание того факта, что мясо птицы является не только
диетическим продуктом, но и наиболее дешевым, доступным источником белка животного
происхождения.
В промышленном птицеводстве на смену старым кроссам приходят
высокопродуктивные и быстрорастущие кроссы цыплят-бройлеров, срок выращивания
которых сократился до 35-36 дней. Быстрорастущие цыплята успевают пройти стадию роста;
но не стадию развития. Несформированная иммунная и ферментная системы делают их
высокочувствительными к бактерийным и вирусным агентам.
Дефицит нормальной микрофлоры у цыплят первых дней жизни приводит к бурному
размножению нежелательной кишечной микрофлоры, замедлению процессов формирования
иммуно-компетентных органов, перерасходу энергии, заложенной в желточном мешке.
Снижение иммунного гомеостаза сопровождается повышенной восприимчивостью цыплят к
бактерийным и вирусным инфекциям.
Желудочно-кишечные болезни наносят огромный ущерб животноводству вследствие
высокой заболеваемости и падежа, затрат на лечебные мероприятия, снижения продуктивных качеств и племенной ценности животных, хотя в современных условиях ведения отрасли
не представляется возможным оценить реальные масштабы экономических потерь, связанных с нарушением микроэкологии желудочно-кишечного тракта.
Контаминация кишечника условно-патогенными бактериями приводит к
существенным изменениям в обмене веществ за счет продукции ими энтеротоксинов и
эндотоксинов, которые помимо прямого раздражающего действия на слизистую оболочку
кишечника активируют процессы перекисного окисления липидов, вызывая обезвоживание и
антиоксидантный стресс.
Избыточное присутствие в составе кишечного микробиотопа условно-патогенной
флоры негативно сказывается на процессах кишечного микробного пищеварения и снижает
усвоение кормов. Сбраживание углеводов энтеробакте-риями, клостридиями, гнилостными
бактериями и плесневыми грибами происходит по типу уксуснокислого и маслянокислого
брожения, снижающего энергетическую ценность корма. Побочные продукты метаболизма
условно-патогенных бактерий и плесневых грибов - биогенные амины и микотоксины в
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 128 из 134
высокой мере токсичны для теплокровных животных. Учитывая, что до 20 % энергии
рациона расходуется на поддержание жизнедеятельности кишечной микрофлоры, потери
энергии при негативном изменении состава кишечного микробиотопа бывают ощутимы.
Включение пробиотиков в технологию выращивания молодняка - наиболее
современный способ профилактики желудочных болезней, основанный на экологически
безопасных механизмах поддержания высокого уровня колонизационной резистентности
кишечника. Мировая практика доказала, что пробиотики предупреждают риск контаминации
кишечника теплокровных животных условно-патогенными бактериями и снижают частоту
их выделения из органов животных при убое.
Пробиотики в отличие от антибиотиков не вызывают привыкания со стороны
условно-патогенных
микроорганизмов,
обладающих
R-плазмидой,
кодирующей
устойчивость к химио-препаратам. Продукты жизнедеятельности бактерий-пробионтов не
накапливаются в органах и тканях животных и не влияют на товарное качество
птицеводческой продукции. Пробиотики не усиливают экологические характеристики
энтеробактерий, ответственных за вирулентность. Они безопасны для окружающей среды и
обслуживающего персонала.
Возможности использования пробиотиков в ветеринарии затрагивают довольно
широкий круг проблем, начиная от коррекции кишечного
биоценоза и распространяв на коррекцию иммунной, гормональной и
ферментативной систем молодняка.
В этой связи отечественные и зарубежные ученые считают необходимым внедрение
пробиотиков в систему выращивания животных для профилактики неинфекционных
желудочно-кишечных
заболеваний
молодняка,
поддержания
колонизационной
резистентности кишечника, повышения физиологического статуса организма новорожденных животных, стимуляции роста и развития, получения качественной продукции,
безопасной в ветеринарно-санитарном отношении.
Широкомасштабную работу по разработке новых пробиотиков и обоснованию
концепции их применения ФГУ ВГНКИ проводит с начала 90-х годов прошлого столетия. За
это время проведены экологические исследования микробиотопов промышленной и
домашней птицы, здоровых и больных желудочно-кишечными болезнями поросят и телят
разновозрастных групп.
Проведено изучение экологических характеристик изолятов лактобацилл и
бифидобактерий, выделенных из кишечника здоровых и больных животных. Определен
видовой состав лакто- и бифидофлоры кишечника поросят и цыплят. Научно обоснованы
критерии отбора штаммов для производства пробиотиков ветеринарного назначения.
Наши исследования показали, что популяция лактобацилл в кишечнике животных
представляет собой сформированное, устойчивое к химическим детерминантам сообщество,
антагонистические свойства которого статистически достоверно ассоциируют с уровнем
продукции молочной кислоты, перекиси водорода и других биологических соединений,
синергидно усиливающих бактериостатические свойства этих микроорганизмов.
Выявлено, что антагонистические свойства лактобацилл и бифидобактерий
коррелируют с их адгезивной активностью. Наибольшие шансы для колонизации кишечника
и выживания в нем имеют штаммы лактобацилл и бифидобактерий с высокой
антагонистической и адгезивной активностью. Нами установлено, что в процессе
жизнедеятельности лактобацил-лы и бифидобактерий вырабатывают метаболиты, которые
снижают колонизационный и перси-стентный потенциал энтеробактерий.
Исследования сотрудников отдела пробиотиков и биологически активных препаратов
ФГУ ВГНКИ выявили механизмы влияния пробиотических микроорганизмов на иммунную
систему животных. В период дачи пробиотиков у животных происходит выраженная
перестройка систем, ответственных за неспецифическую резистент-ность и активацию Тклеточного звена иммунитета. Под влиянием пробиотиков возрастает активность
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 129 из 134
сывороточного лизоцима, увеличиваются фагоцитоз и бактерицидная активность.
Многочисленные публикации показывают, что включение пробиотиков в систему
выращивания молодняка животных снижает заболеваемость желудочно-кишечными
болезнями, сокращает продолжительность выращивания, снижает затраты кормов, повышает
сохранность. Пробиотики улучшают убойные и мясные качества молодняка свиней и
цыплят-бройлеров.
В настоящее время на вооружении ветеринарной практики имеется достаточное
количество отечественных и импортных пробиотических препаратов различного видового
состава, предназначенных для коррекции кишечного биоценоза, стимуляции откорма,
повышения естественной резистентности молодняка.
Пробиотические культуры используют в составе кормовых добавок для молодняка
животных. Ими обогащают заменители цельного молока, витаминные, минеральные,
ферментные кормовые добавки.
В состав пробиотических лекарственных средств входят микроорганизмы, безопасные
для здоровья человека и животных, обладающие широким спектром протективных свойств, в
частности, бифидобактерий видов Bif. adolescentis, Bif. bifidum, Bif. longum, Bif. globosum,
Bif. thermo-philus; молочнокислые бактерии L. acidophilus, L. plantarum, L. bulgaricus, L.
rhamnosus, L. fermen-tum; стрептококки Sir. faecium, Str. lactis diastati-cus; спорообразующие
бактерии Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis, Bacillus cereus var. Toyi, Rurpinococcus albus,
Bacillus panthothenticus. Бактерии-пробионты широко используют для изготовления
микробиологических консервантов для кормов (силосных заквасок) и в виде молочнокислых
продуктов. Микроорганизмы, входящие в состав силосных заквасок, усиливают молочнокислое брожение и подавляют бродильные и гнилостные процессы при консервации кормов.
Таким образом, концепция государственной политики в области здорового питания
населения может быть реализована только при принятии концепции рационального
кормления животных, обеспечивающей оптимальное использование генетического
потенциала животных, получение продукции, полноценной как с точки зрения содержания
необходимых макро- и микронутриентов, так и безопасной с позиций контаминации
ксенобиотиками техногенного и биологического происхождения.
Многолетнее использование пробиотиков свидетельствует, что про-биотики должны
рассматриваться
как
неотъемлемый
компонент
рационального
кормления
высокопродуктивных животных.
1
Лекционные занятия
Введение. Иммунодефициты домашних
1
1.
1.
В.Д.
Соколов,
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
животных
2
Иммунная система: Основные понятия.
3
Первичные (врожденные)
иммунодефициты.
1
4
Вторичные (приобретенные)
иммунодефициты.
1
5
Нарушение пассивной передачи антител.
6
Механизм вирус-индуцированной
иммуносупрессии.
1
7
Методы клинико-иммунологической
диагностики.
1
8
9
Современные методы изучения нарушений
функциональной активности иммунной
системы.
Стратегия иммунокоррекции.
10
Классификация пробиотиков
11
Влияние пробиотиков на иммунную
систему, показания к назначению
пробиотиков.
Ферменто-пробиотические кормовые
добавки
12
1
1
1
1
1
1
1
Страница 130 из 134
Фармакология 1977. С.370
2.
Первый
Евразийский
ветеринарный конгресс. 2007.
С.69-72
1.В.Д.Соколов, Фармакология
1977г.
2. Первый Евразийский
ветеринарный конгресс.
2007.Алматы С.72-75.
1.В.Д.Соколов, Фармакология
1977г.
Первый
Евразийский
ветеринарный
конгресс.
2007.Алматы С.75-77.
1.В.Д.Соколов, Фармакология
1977г.
2.
В.Н.Данилевский
Внутренние
незаразные
болезни. 1991г.
3. Первый Евразийский
1.В.Д.Соколов, Фармакология
1977г.
1.
Столяров
И.Д.
Иммунодиагностика
и
иммунокоррекция
в
клинической практике. Спб:
Сотис, 1999 с. 48-64
1.В.Д.Соколов, Фармакология
1977г.
2.Птицеводство №2, 2005, с.
17.
1.В.Д.Соколов, Фармакология
1977г.
2.Ветеринария №3, 2007г.,
с.31.
1.В.Д.Соколов, Фармакология
1977г.
2. Ветеринария, №3, 2007
1.В.Д.Соколов, Фармакология
1977г.
2. Птицеводство, №10, 2005г.,
с.51,21.
1.В.Д.Соколов, Фармакология
1977г.
2. Ветеринария, №2, 2007г.,
с.6, 17.
1.В.Д.Соколов, Фармакология
1977г.
2. Ветеринария № 7, 2006г. с.3
1.В.Д.Соколов, Фармакология
1977г.
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
13
Новые биоцидные составы
пролонгированного действия.
14
Структурно-функциональная клиническая
оценка влияния иммуномодуляторов
природного происхождения на организм.
Иммунодеперессанты
15
1
1
1
Страница 131 из 134
2.В.М.Субботин
«Современные лекарственные
вещества в ветеринарии».
2003г.
1.В.Д.Соколов, Фармакология
1977г.
2. Ветеринария, №2, 2008
с.6,7.
1.В.Д.Соколов, Фармакология
1977г.
2. Ветеринария, №4, 2007 с.6,7
1.В.Д.Соколов, Фармакология
1977г.
15
Лабораторные занятия
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
Применение пробиотика «Ветом1.1» в
лечении желудочно-кишечных
заболеваний диарейной симптоматики.
2
Современные ветеринарные препараты и
методы лечения болезней
сельскохозяйственных животных.
2
Новые препараты в программе сохранения
молочной продуктивности коров и
повышения качества молока
2
Влияние применения комплексного
препарата «гемобаланс» на
иммунологический характер крови
жеребых кобыл.
Пробиотики – неотъемлемый компонент
рационального кормления животных.
Пробиотики вместо антибиотиков это
реально.
Иммуномодулирующие свойства
эндогенного интерферона у телят.
Профилактика диарей новорожденных
телят пробиотиками
1
2
1.
В.Д.
Соколов,
Фармакология 1977.
2.
Первый
Евразийский
ветеринарный конгресс. 2007.
С.69-72
1.В.Д.Соколов, Фармакология
1977г.
2. Первый Евразийский
ветеринарный конгресс.
2007.Алматы С.72-75.
1.В.Д.Соколов Фармакология,
1977г.
Первый
Евразийский
ветеринарный
конгресс.
2007.Алматы С.75-77.
1.В.Д.Соколов Фармакология,
1977г.
2.
В.Н.Данилевский
Внутренние
незаразные
болезни. 1991г.
3.
Первый
Евразийский
ветеринарный
конгресс.
2007.Алматы С.100-101.
1.
Столяров
И.Д.
Иммунодиагностика
и
иммунокоррекция
в
клинической практике. Спб:
Сотис, 1999 с. 48-64
Птицеводство №2, 2005, с. 17.
1
Ветеринария №3, 2007г., с.31.
2
1
Ветеринария, №3, 2007 с.10,
47, 51
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
9.
10.
11.
12.
Селен и токоферол на фоне пробиотика,
«Лечение мочекислого диатеза».
Кормовые антибиотики, пробиотики,
подкислители и их комплексы с
ферментами при производстве яиц.
Эффективность кормовых добавок бацелл
и моноспорин при выращивании цыплятбройлеров
Кормовые добавки
1
2
Птицеводство, №10, 2005г.,
с.51,21.
Ветеринария, №2, 2007г., с.6,
17.
Ветеринария № 7, 2006г. с.3
1
2
13.
Страница 132 из 134
Антиоксиданты
В.М.Субботин «Современные
лекарственные вещества в
ветеринарии». 2003г.
Ветеринария, №2, 2008 с.6,7.
1
14.
15.
Лечение собак с применением
антистрессовых препаратов.
Тканевые препараты
Ветеринария, №4, 2007 с.6,7
1
2
16.
Иммуномодуляторы
2
17.
18.
19.
20.
21.
Иммунный статус и инфекционные
болезни новорожденных и поросят
Лечение и профилактика
селенодефицитных состояний животных
Действие лигофола на естественную
резистентность организма овец
Коррекция иммунитета при ассоциативной
инвазии лошадей
Витамин-сберегающий эффект малоновой
кислоты у цыплят при темновом стрессе.
итого
1
1
1
1
1
В.Д.Соколов Фармакология,
1997г.
В.Д.Соколов Фармакология,
1997г.
В.Д.Соколов Фармакология,
1997г.
1.В.Д.Соколов Фармакология,
1997г.
2.Ветеринария №2, 2008, с.12
В.Д.Соколов Фармакология,
1997г.
В.Д.Соколов Фармакология,
1997г.
В.Д.Соколов Фармакология,
1997г.
30
5 ПЕРЕЧЕНЬ ТЕМ ДЛЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ РАБОТЫ СТУДЕНТОВ
5.1 Премиксы
5.2 Современные иммуномодуляторы, основные принципы их применения.
5.3 Иммунодиагностика и иммунокоррекция в клинической практике
5.4 Проблемы иммуностимулирующей терапии
5.5 Современные аспекты иммунокоррекции в ветеринарии
5.6 Пробиотики вместо антибиотиков – это реально.
5.7 Новый пробиотик «Микроцил», «Споробактерин»
5.8 Биостимулятор для бройлеров
5.9 Селен и токоферол на фоне пробиотика
5.10 Лечение мочекислого диатеза
5.11 Ферментный препарат на основе фитазы.
5.12 Микрогранулят тилозина: эффективность и экономичность.
5.13 Дисбактериозы молодняка – проблема актуальная.
5.14 Применение лактобифидола в сочетании с лизином при откорме бройлеров
5.15. Применение иммуномодуляторов продуктивным животным.
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 133 из 134
4.2 Перечень вопросов по дисциплине.
Для РК1
1. Лекарственные препараты модулирующие процессы иммунитета.
2. Влияние природных минералов резистентность организма кур-несушек, (рассказать о
цеолитах).
3. Средства, устраняющие общие проявления аллергических реакций типа
анафилактического шока.
4.Назовите препараты, стимулирующие иммунологические процессы, левализол, механизм
действие.
5.Применение пробиотика «Ветом-1» в лечении желудочно - кишечных заболеваний.
6.Назовите
средства, уменьшающие повреждение тканей, (кортикоостероиды и др.
противоспалительные средства)
7.Иммуностимулятор -тималин, механизм действия, доза
8.Адоптогены - вещества, входящие в эту группу, механизм действия.
9.Пробиотики - неотъемлемый компонент рационального кормления животных.
10.Влияние природных минералов на активность пробиотика «торулакт».
11 .Назовите современные методы изучения нарушений функциональной активности
иммунной системы.
12.Биостимулятор для бройлеров.
13.Использование препарата- синбиотик «цеоторулакт» для кормления животных.
14.Стратегия иммунокоррекции ( иммуностимуляторы, гормоны тимуса интерферон,
интерлейкины).
15. Кормовые добавки назовите препараты , входящие в эту группу.
16.Средства, корректирующие иммунный статус.
17.Новые препараты компании «Байер» для сохранения молочной продуктивности коров и
повышения качества молока.
18.Регуляторы обмена веществ, назовите препараты, повышающие обмены веществ.
19.Иммуномодуляторы, основные задачи.
20.Применеие селена и токоферола на фоне пробиотика.
21 .Нарушение пассивной передачи антител.
22.Иммунодепрессанты.
23 .Профилактика диарей новорожденных телят пробиотиками.
24.Эрготропики, механизм действия, основные подгруппы.
25.Противоаллергические средства , препятствующие освобождению из
сенсибилизированных
тучных клеток физиологически активных веществ
26.Эрготропики- кишечные стабилизаторы, механизм действия.
27.Иммуностимуляторы: растительные средства.
УМК 042-14.1.01.3.20.01-2006 Редакция №1 от
Страница 134 из 134
28.Противоаллергические средства, препятствующие взаимодействию свободного гистамина
к тканевым рецепторам.
29.Иммуномодулирующие свойства эндогенного интерферона у телят.
Для РК2
30.Корректоры продуктивности, назовите основные группы.
31.Иммуностимуляторы: синтетические препараты.
32.Бацитрацин-механизм действия назовите препараты, входящие в эту грудпу.
33.Проблемы иммунокорекции инефционных болезней.
34.Определение - что такое пробиотики, механизм действия пробиотиков.
35.Производные хиноксолина, назовите стабилизаторы, входящие в эту группу.
36.Иммунодефициты, ассоцированные с демодекозом у собак.
37.Назовите препараты разнопланового антистрессового действия.
38.Применение лактобифадола в сочетание с лизином при откорме бройлеров.
39.Гармональное препараты , механизм действия и основные фармакодинамические
эффекты.
40.Иммуностимуляторы: препараты бактериальной природы.
41.Премиксы-механизм действия.
42.Эффективность апрамицина при пневмониях.
43.Иммуностимуляторы: средства из органов и тканей животных.
44.Селен- цеолитовые препараты при диарее телят.
45.Стресс- протекторы , что входить в эту группу, механизм действия.
46.Коррекция иммуного статуса у высокопродуктивных коров.
47..Применение аминотона при откорме цыплят-бройлеров.
48.Эффективность применения премикса и вакцин против респираторных болезней свиней.
49.Антистрессовые средства ( что происходит в организме при стрессе).
50.Коррекция иммунитета при ассоциативной инвазии лошадей.
51.Иммуносупрессия, вызываемая бактериями.
52.Ферменты - необходимость применения их при кормлении животных.
53.Действие лигфола на естественную резистентность организма овец.
54.Пробиотики вместо антибиотиков- это реально.
55.Эрготропики - кормовые антибиотики, механизм действия.
56.Назовите основные причины вторичных иммунодефицитов у животных.
57.Применеие иммуномодуляторов при вакцинации животных против сальмонеллеза.
58.Анитоксиданты, вещества входящие в эту группу, механизм действия,
59.Методы клинико-иммунологической диагностики.
60.Тканевые препараты, назовите препараты, входящие в эту группу.