Создание и внедрение в клиническую практику противораковой вакцины на основе аутологичных дендритных клеток
advertisement
Номинация: «Перспективный проект» Создание и внедрение в клиническую практику противораковой вакцины на основе аутологичных дендритных клеток ООО «Интера-Мед инновационные технологии в медицине» Руководитель проекта: Егоров Олег Борисович, технический дир ектор, Ph. D. Документ составил: Афанасьев Андрей Анатольевич andrei.afanasiev@gmail.com 12 мая 2011 г. Аннотация проекта Цель проекта: Трансфер из США и совместное внедрение в практику РФ современной перспективной медицинской технологии лечения рака предстательной железы. В рамках проекта планируется создание лабораторно-терапевтических комплексов в СанктПетебурге и Подмосковье. Актуальность проекта: Терапия на основе дендритных клеток может применяться для лечения опухолей самых различных локализаций, однако в первую очередь будет внедрена для рака предстательной железы. Это широко распространенное у мужчин онкологическое заболевание часто диагностируется на поздних стадиях (в России доля III и IV стадий гораздо выше, чем в США и Европе). Поздние стадии заболевания ограничивают выбор стратегии лечения, не позволяя применять высокоэффективные методики. В 2009 году в России было выявлено около 24 000 новых случаев заболевания РПЖ, более 12 000 новых больных на III-IV стадии. Из них умерло более 9 000 человек, из которых 3 600 умерли в первый год после диагностирования. Данная статистика подтверждает отсутствие адекватных видов терапии для этой группы пациентов. История проекта: Проект является результатом совместной работы с ведущей клиникой РФ в области урологии ФГУ «НИИ Урологии» по поиску перспективных методов лечения рака предстательной железы 3-4 стадии. В рамках проекта будет осуществлён трансфер из США инновационной медицинской технологии нового поколения лечения РПЖ, разработанной специалистами компании Medvio (г. Сиэтл). Ранняя версия технологии, разработанная этими специалистами была коммерциализирована компаниями Sangretech и Bostwick Labs и проходит клинические испытания в США. Первый препарат подобного принципа действия (Provenge) был одобрен FDA США в 2010 году и стал сенсацией года в онкологии. Капитализация компании, занимающейся выпуском препарата Provenge, составляет $5 млрд. при выручке $40 млн. Стоимость курса лечения больного в США $90 тыс. Технология: Суть технологии заключается в обучении иммунитета человека распознаванию раковых клеток и вызове специфичного иммунного ответа против онкологического заболевания. Продуктом проекта является курс иммунотерапии рака предстательной железы 3-4 стадии. Ожидаемая стоимость курса лечения примерно 20 тыс. долларов. Препарат изготавливается индивидуально для каждого пациента из его крови. Лечение на первом этапе проекта будет проходить в Санкт-Петербурге на базе НИИ Онкологии им. Петрова (около 100 пациентов в первый год, затем до 300 пациентов в год). На втором этапе планируется создание лечебного центра в Подмосковье мощностью 1500 пациентов в год. Забор крови должен происходить в создаваемых центрах. Операции по введению вакцины могут производиться в урологических операционных областного и городского уровня. Краткое медицинское обоснование: Дендритные клетки играют важнейшую роль в функционировании иммунитета человека, отвечая за распознавание вражеских клеток и антигенов и обучение Tлимфоцитов их атаке (дендритные клетки презентуют антигены T-лимфоцитам). Из крови пациента выделяются моноциты, из которых затем выращивают дендритные клетки, способные распознавать антигены, характерные для клеток опухоли. Полученная субстанция из дендритных клеток вводится непосредственно в раковую опухоль, которую перед этим разрушают охлаждением (стандартная клиническая процедура) или другим абляционным воздействием. Дендритные клетки распознают антигены раковых клеток в очаге опухоли и презентуют их лимфоцитам, вызывая специфичный иммунный ответ, разрушающий остатки опухоли и отдалённые метастазы. О технической реализуемости: Предыдущая версия технологии успешно прошла доклинические испытания на Филиппинах на 26 гражданах США. Показана эффективность и безопасность. Показано увеличение средней выживаемости на 1 год для пациентов с поздними стадиями заболевания. В 2008 году технология была передана на первую/вторую стадию клинических испытаний FDA США. Права на технологию на территории США выкуплены одним из ведущих центров в области диагностики и лечения рака предстательной железы в США Bostwick Laboratories. В рамках проекта медицинская технология дополнительно пройдёт клинические испытания в РФ. О льготных условиях передачи технологии: Технология с рядом улучшающих модификаций будет воспроизведена ключевыми разработчиками компании MedVio за оклад и долю в компании в г. Санкт-Петербурге, что является результатом длительных переговоров с американской стороной. Часть американских специалистов будет работать в РФ в течение нескольких месяцев в рамках создания производства и внедрения медицинской методики. Команда проекта: Американская сторона — ключевые специалисты компании MedVio, имеют обширный опыт работы в различных биотехнологических компаниях, принимали активное участие в разработке противораковых вакцин на основе дендритных клеток, находящихся сегодня на 2-3 стадии клинических испытаний FDA. Российская сторона представлена ведущими специалистами ФГУ «НИИ Урологии», имеющих успешный опыт внедрения в российскую практику ряда медицинских технологий (например, брахитерапии), специалистами НИИ Онкологии им. Петрова, а так же рядом ведущих разработчиков противораковых лекарственных препаратов. Этапы проекта и капитальные вложения: Этап 1 (2 года). Капитальные вложения - 74 млн. рублей. Трансфер технологии из США, создание лечебного центра в Санкт-Петербурге, прохождение КИ, лечение частных пациентов. Этап 2. (2 года) Капитальные вложения - 109 млн. рублей. Создание второго лечебного центра в Подмосковье, расширение портфеля препаратов компании, выход на госзакупки. Информация о заявителе Название организации ООО «Интера-Мед инновационные технологии в медицине» Адрес Юридический адрес: 105264, Москва, ул. Парковая 10-я, д. 18, офис 39 Фактический адрес: 115419, Москва, ул. Орджоникидзе, д. 11, стр. 2, этаж 3, оф. 3 Адрес электронной почты, страницы в Интернете www.interamed.ru obegorov@gmal.com Фамилия, телефона, факс имя, отчество руководителя организации, номер Генеральный директор: Арутюнов Роман Эдуардович Телефон/факс: +7 495 465 06 93 Направления деятельности организации Научные биотехнологий. исследования и разработки в области ядерной медицины и Инновационный потенциал: перечень реализованных за последние 7 лет инновационных проектов 1. Разработка диагностического таргетного пептидного препарата, меченного изотопом технеция-99m, для выявления метастазов и контроля лечения меланомы 2. Разработка технологии производства диагностических белковых радиофармпрепаратов на основе альфа-фетопротеина и технеция-99m 3. Разработка технологии производства нового поколения пептидных диагностических радиофармацевтических препаратов с механизмом адресной доставки на основе изотопов технеция-99m и галлия-68 Производственный и трудовой потенциал 1. Величина годового оборота за последние три календарных года – компания существует с 18.09.2009, оборот за 2010 год – 30 млн. рублей. 2. Среднесписочная численность работающих – 7 человек 3. Наличие производственных мощностей – в рамках кооперации с ФГУ НИИ Урологии , НИИ Онкологии им. Петрова, ФМБЦ им. Бурназяна Руководитель проекта Олег Борисович Егоров, ООО «Интера-Мед инновационные технологии в медицине», технический директор, Ph. D. Адрес: 115419, Москва, ул. Орджоникидзе, д. 11, стр. 2, этаж 3, оф. 3 Телефон: +7 926 308 56 82 E-mail: obegorov@gmail.com Важнейшие достижения: IsoRay Medical Inc. Ричланд, шт. Вашингтон, США. 2005- 2009. Директор по развитию радиохимии, Директор по исследованиям и научно-техническим разработкам. Лауреат награды «R&D 100» за создание источника брахитерапии с использованием Cs131. Clemson University, Department of Environmental Science and Engineering, Адъюнктпрофессор. o Награда за выдающуюся работу в области радионуклидных технологий для лечения раковых заболеваний (1998). o Награда за выдающийся вклад в научную деятельность (1998). o Номинация на награду “R&D 100” за создания генератора медицинских изотопов для онкологии. o Награда “R&D 100” за создание производства микроисточников o Четыре награды за выдающиеся заслуги (2000, 2001, 2002, 2004). o Премии за успешную коммерциализацию научных разработок (2003, 2004). o Номинация на награду Американского химического общества за выдающиеся достижения молодого специалиста в области аналитической химии. o Награда федерального консорциума национальных лабораторий за коммерциализацию радиоиммунной альфа-терапии для лечения лейкемии (2004) • Пять патентов и две текущих заявки в области аналитической химии/радиохимии/медицинских изотопов. • Тридцать девять научных публикаций включая четыре главы в книгах. • Многочисленные приглашенные доклады и лекции на престижных международных конференциях Современное состояние исследований и разработок в области реализации проекта. Новизна предлагаемого подхода по сравнению с известными. В последние годы в здравоохранении РФ отмечается заметный прогресс в области онкологии. Появились новые хирургические лучевые и терапевтические методы лечения злокачественных новообразований. С другой стороны, в клинической практике зарубежных стран отмечается развитие альтернативных методик лечения, в первую очередь, таргетная химиотерапия и иммунная терапия. К разработке предлагается иммунотерапевтическая методика лечения онкологических заболеваний с использованием индивидуализированной in vivo вакцины на основе аутологичных дендритных клеток. In vivo вакцинация является ключевым аспектом данной методики выделяющая её среди конкурирующих методов. Методика относится к самому передовому направлению лечения онкологических заболеваний активной клеточной иммунной терапии (АКИТ) (терапевтические вакцины против рака). АКИТ основана на активации антиген-специфичного противоопухолевого иммунного ответа с использованием клеток иммунной системы. Наиболее передовым направлением АКИТ являются методы основанные на использовании антигенпрезентующих клеток иммунной системы, дендритных клеток, участвующих в активации и развитии Т-клеточного ответа. Активация Т-клеточного иммунного ответа осуществляется зрелыми или обученными дендритными клетками. Наивные дендритные клетки поглощают и процессируют антиген, представляя его на своей поверхности и превращаясь в зрелые дендритные клетки. Зрелые дендритные клетки мигрируют в лимфатические узлы, где активируют и развивают Т-клеточный иммунный ответ. Из существующих аналогов данного вида лечения необходимо отметить Provenge (США) – первый препарат данной группы получивший одобрение FDA и вошедший в реестр Medicare страхового возмещения на территории США. Однако, пока данный препарат разрешён к применению только в США. В большинстве случаев, под ДК вакциной подразумевают ДК нагруженные опухоль-ассоциированным антигеном in vitro. В качестве антигенов используются лизаты опухолей, экстракты опухолевых белков, синтетические пептидные эпитопы и фьюжнбелки «опухолевый антиген + GM-CSF». Опухолевые антигены также могут вводиться в ДК с помощью плазмидной трансфекции, ретровирусных векторов, рекомбинантных аденовирусов, лентивирусов, электропорации, и опухолевой РНК. Антигены также могут быть представлены ДК с помощью ДК-специфичных антител. В качестве альтернативного варианта может осуществляться слияние ДК с опухолевыми клетками для получения гибридных клеток. Среди российских разработок подобных вакцин можно отметить вакцину Российского научно-исследовательского нейрохирургического института им. проф. А.Л.Поленова (Патент РФ № 2192263), вакцину ЗАО "Клеточные технологии" из Томска (Патент РФ № 2392946), а также две разработки Ирины Александровны Балдуевой и соавторов из НИИ Онкологии им. Петрова (Патенты РФ №№ 2267326 и 2376033). В результате переговоров было получено согласие И.А. Балдуевой на участие в проекте ООО «Интера-Мед». В рамках работ по исследованию ДК вакцин были разработаны методы получения больших количеств дендритных клеток in vitro из моноцитов или их клетокпредшественников. Большинство клинических исследований сегодня используют ДК, полученные из моноцитов с использованием Гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора (GM-CSF) и интерлейкина-4. После 3-5 дней инкубации с данными веществами, моноциты превращаются в незрелые ДК. Поскольку только зрелые ДК могут мигрировать в дренирующие лимфоузлы и активировать Т-клеточный ответ, большинство методов получения препаратов ДК вакцин включают дополнительную стадию созревания продолжительностью 1-2 дня с использованием особых факторов созревания. К настоящему времени уже проведён целый ряд клинических исследований безопасности и эффективности различных типов ДК вакцин для ряда онкологических заболеваний. Введение вакцин осуществлялось подкожно, внутрикожно, внутривенно, и напрямую в лимфатические узлы. Итоговый обзор, обобщающий результаты клинических исследований с участием более 1000 пациентов подтверждает безопасность введения ДК вакцин. Наблюдались незначительные побочные эффекты в виде лихорадки, местных реакций, увеличении лимфатических узлов и усталости. Серьёзные, угрожающие жизни побочные эффекты не наблюдались. В некоторых случаях наблюдался измеряемый иммунологический эффект. Клиническая эффективность вакцин была различной и в некоторых случаях наблюдались клинически значимые эффекты лечения. Тем не менее, лишь в небольшом проценте случаев клинические эффекты были продолжительными или полными. Предлагаемый нами подход заключается в внутриопухолевом введение аутологичных ДК, что позволит осуществлять процесс представления антигена in situ и даёт доступ к спектру аутологичных опухоль-специфичных антигенов. Этот подход устраняет необходимость процедур идентификации, выбора, выделения, переработки и in vitro презентации антигенов дендритным клеткам, что существенно упрощает и удешевляет производство вакцины. Для того чтобы усилить процесс высвобождения и поглощения антигенов дендритными клетками, опухоль может быть предварительно подвергнута воздействию стандартных аблятивных процедур (например химиотерапии, лучевой терапии, криотерапии, радиочастотной абляции, термоабляции или фотодинамической терапии) проводимых непосредственно перед процедурой введения дендритных клеток в опухоль. Присутствие большого числа мёртвых и умирающих опухолевых клеток в ткани подвергшейся абляции предоставляет широкий набор индивидуальных аутологичных антигенов для их поглощения и процессирования дендритными клетками, введёнными в очаг абляции. Таким образом, ДК нагруженные антигенами in situ могут вызвать широкий спектр системных противоопухолевых иммунных ответов. Эта гипотеза была подтверждена целым рядом исследований на животных. Процедура лечения одного пациента выглядит следующим образом: • Забор крови (палата афереза) • Производство по стандарту сGMP • Транспортировка замороженной индивидуальной дозы в клинику • Размораживание, введение после абляции опухоли Задел, необходимый для реализации данного проекта, обеспечен многолетней работой как отечественных специалистов (Ирина Александровна Балдуева и ее команда занимаются ДК вакцинами уже 15 лет), так и зарубежных коллег, участников проекта (об их работах, лежащих в основе проекта, будет рассказано ниже в разделе «команда проекта»). Сущность предлагаемой разработки. Проект направлен на внедрение в клиническую практику передового метода лечения онкологических заболеваний – аутологичной вакцины на основе дендритных клеток в сочетании с абляцией опухоли. Терапия основана на использовании потенциала иммунной системы пациента для борьбы с опухолью. От других вакцин на основе дендритных клеток предлагаемая технология отличается по ряду ключевых параметров: опухолевый очаг разрушается методом абляции, с последующим введением преактивированных дендритных клеток, а процесс обучения дендритных клеток антигенами происходит непосредственно в очаге некроза опухоли. Это позволяет получить наиболее индивидуализированную вакцину и устраняет необходимость выделения или синтеза опухолевых антигенов, необходимых для обучения дендритных клеток вне организма. Внутриопухолевое введение аутологичных ДК позволяет осуществлять процесс представления антигена in situ и даёт доступ к спектру аутологичных опухольспецифичных антигенов. Этот подход устраняет необходимость процедур идентификации, выбора, выделения, переработки и in vitro презентации антигенов дендритным клеткам, что существенно упрощает и удешевляет производство вакцины. Для того чтобы усилить процесс высвобождения и поглощения антигенов дендритными клетками, опухоль может быть предварительно подвергнута воздействию стандартных аблятивных процедур (например химиотерапии, лучевой терапии, криотерапии, радиочастотной абляции, термоабляции или фотодинамической терапии) проводимых непосредственно перед процедурой введения дендритных клеток в опухоль. Присутствие большого числа мёртвых и умирающих опухолевых клеток в ткани подвергшейся абляции предоставляет широкий набор индивидуальных аутологичных антигенов для их поглощения и процессирования дендритными клетками, введёнными в очаг абляции. Таким образом, ДК нагруженные антигенами in situ могут вызвать широкий спектр системных противоопухолевых иммунных ответов. Эта гипотеза была подтверждена целым рядом исследований на животных. Все эти исследования подтвердили, что использование ряда аблятивных методов в комбинации с введением наивных сингенных ДК действительно приводит к существенно более высокой степени замедления роста опухоли по сравнению с использованием либо абляции, либо введения ДК в опухоль без комбинации этих методов. Были опубликованы результаты четырёх клинических исследований с использованием внутриопухолевого введения ДК. Эти исследования подтвердили безопасность данного метода (только четыре случая побочных эффектов III степени в когорте из 57 пациентов). Triozzi впервые опубликовал результаты внутриопухолевого введения аутологичных незрелых ДК пациентам страдающим метастатической меланомой и опухолью молочной железы. (Triozzi et al. 2000). Несмотря на то, что в этих исследованиях не использовалась аблятивная методика воздействия на опухоль перед введением ДК, у 6 из 10 пациентов наблюдалась непродолжительная регрессия опухоли после введения 3 x 107 ДК. Chi опубликовал результаты фазы I клинических исследований внутриопухолевого введения незрелых аутологичных ДК (две дозы по 5 x 107 клеток) после конформной внешней лучевой терапии у пациентов с рефрактерной гепатомой.(Chi et al. 2005). Из 12 пациентов, завершивших два курса терапии, у 6 наблюдался частичный клинический ответ. В дополнение, сокращение уровня альфа-фетопротеина (АФП), специфичная иммунная реакция была обнаружена у 8 пациентов, обследованных с использованием анализа на выделения цитокина (IFN-) и у 7 с помощью анализа ELISPOT. Mazzolini опубликовал исследование с участием 17 пациентов с метастатическим раком поджелудочной железы, колоректальным раком и первичным раком печени. (Mazzolini et al. 2004). Пациентам в опухоль вводились аутологичные незрелые ДК трансфецированные для продуцирования интерлейкина-12. В метастатические очаги вводились 3 дозы по 5 x 107 клеток. Частичный клинический ответ был обнаружен у одного пациента и стабилизация болезни у 2 пациентов. Пять пациентов продемонстрировали усиление активности НК клеток. Кожный тест замедленной гиперчувствительности на лизат опухоли был отрицательным у 13 пациентов. Guo опубликовал исследование с участием 18 пациентов с метастатической меланомой (Guo et al. 2007). В этом исследовании 9 пациентов получали интертуморальные инъекции аутологичных ДК без абляции, а 9 пациентов получили дополнительно курс локальной гипертермии. Вводилось 6 доз аутологичных незрелых ДК в количестве 5 x 107 клеток. Среднее время до прогрессии было существенно дольше в группе с комбинированным лечением (5 месяцев по сравнению с 2 месяцами, p<0.05). Все больные, получившие комбинированную терапию показали значительное увеличение числа меланомаспецифичных CD8+ T клеток после терапии. Безопасность, наличие опухоль специфического иммунного ответа и благоприятные клинические результаты, полученные в данных исследованиях продемонстрировали потенциал интертуморального введения незрелых дендритных клеток в сочетании с аблятивным воздействием на опухоль как многообещающего метода создания противоопухолевых терапевтических вакцин. Тем не менее, для наиболее полной и успешной реализации данного метода необходимо решить следующие проблемы: 1) улучшить эффективность процесса поглощения и процессирования антигена (созревание ДК) при интертуморальном введении незрелых ДК 2) обеспечить надёжную миграцию зрелых ДК в дренирующие лимфоузлы для запуска и развития эффективного противоопухолевого иммунного ответа. Незрелые ДК обладают возможностью процессировать антигены, но являются плохими стимуляторами Т-клеток. Зрелые/активные ДК могут мигрировать в лимфатические узлы и усиленно экспрессируют МНС и костимуляторные пептиды необходимые для активации Т-лимфоцитов, но при этом теряют возможность процессировать антигены. В вышеупомянутых исследованиях незрелые ДК были выбраны для введения в опухоль, исходя из их возможности процессировать антигены. Для осуществления успешной активации Т-клеток должен одновременно осуществляться и эффективный процесс созревания ДК введённых в опухоль. Возникновение специфичного Т-клеточного ответа, подтверждённое в этих исследованиях доказывает тот факт, что процесс созревания ДК осуществляется, по крайней мере в некоторой степени. В одном из исследований миграция ДК в лимфатический узел была обнаружена у нескольких пациентов, подвергавшихся гипертермии в сочетании с введением ДК. Тем не менее, несколько исследований также показало наличие незрелых ДК в области введения в опухоль через несколько недель после интертуморальной инъекции. Кроме того, незрелые ДК нагруженные антигеном (ДК клетки не достигшие полной зрелости) вызывали толерантность посредством активации антигенспецифичных CD8+ регуляторных Т-клеток, подавляющих цитотоксические функции Т клеток. (Dhodapkar and Steinman 2002). Таким образом, методы обеспечивающие одновременное созревание и активацию ДК введённых интертуморально являются одним из ключевых моментов в успешном создании эффективных противоопухолевых вакцин. Было предложено несколько подходов к улучшению эффективности развития активного иммунитета при использовании интертуморального введения дендритных клеток. Исследования на животных с использованием генетически изменённых ДК, экспрессирующих интерлейкин 12 (IL-12) были опубликованы тремя исследовательскими группами. (Hu et al. 2006; Melero et al. 1999; Nishioka et al. 1999). Интерлейкин IL-12 представляет собой мощный иммунностимуляторный цитокин, усиливающий развитие противовоспалительного Т-клеточного ответа первого типа. В этих исследованиях наблюдалось развитие мощного системного противоопухолевого CD8+ T-клеточного ответа, уничтожавшего удалённые опухолевые очаги. К сожалению, клиническая эффективность этого подхода у пациентов с метастатической желудочно-кишечной карциномой был неудовлетворительной. (Mazzolini et al. 2004). Схожие методы с использованием ДК трансдуцированных CD40-лигандом (Kikuchi et al. 2000), IL-12 и IL-18 (Tatsumi et al. 2003), IL-15 (Vera et al. 2005), CCL21 (Yang et al. 2004), p-53 геном (Murakami et al. 2004), интерфероном- (Pan et al. 2005) интерфероном (Okada et al. 2004), инъекцией стрептококкового препарата OK-432 (Ahmed et al. 2004), анти-CD137 антител (Tirapu et al. 2004) продемонстрировали мощный противоопухолевый ответ у животных. Два исследования изучали возможные преимущества интертуморального введения полуаллогенных ДК, экспрессирующих молекулы как собственного, так и чужого МНС. (Kondoh et al. 2010; Tirapu et al. 2004). Проверялась гипотеза усиления противоопухолевого ответа за счёт стимуляции аллогенного ответа, вызванного присутствием чужого МНС. Прямое распознавание аллогенных молекул приводит к активации мощного Т-клеточного ответа, что наблюдается в случае отторжения трансплантатов. (Lindahl and Wilson 1977). Сильный аллогенный ответ несёт в себе потенциал для создания локальной микросреды, богатой воспалительными цитокинами и Т-клеточными костимуляторными лигандами. Эта среда усиливает Т-клеточный ответ, как показано в ряде исследований. (Danzer et al. 1994; Laurin et al. 2004; Wallgren et al. 2005). Было показано, что интертуморальное введение полуаллогенных ДК способно вызывать противоопухолевый ответ у мышей. Тем не менее, существенных преимуществ по сравнению с использованием аутологичных ДК не наблюдалось. Схожие результаты были получены при использовании гибридных опухолевых/ДК, когда сравнивалась эффективность введения гибридов аллогенные ДК/опухолевые клетки и аутологичные ДК/опухолевые клетки в экспериментах на мышах. Преимуществ, связанных с использованием аллогенных ДК, не наблюдалось. Кроме того, было обнаружено что нагруженные пептидами полуаллогенные ДК вызывали пролиферацию специфичных Т-клеток in vitro, но они имели более низкую эффективность активации наивных цитотоксичных Т-клеток in vivo. (Merrick et al. 2008; Wells et al. 2007). Одним возможным объяснением этих результатов является тот факт, что сильная иммунная реакция на аллогенный компонент существенно понижает время жизни полуаллогенных ДК в дренирующих лимфоузлах. (Kondoh et al. 2010; Wells et al. 2007). Поскольку взаимодействие АПК с Т-клетками является критичным с точки зрения презентации антигена и инициации сильного Т-клеточного ответа, то короткое время жизни ДК может являться лимитирующим для такого взаимодействия ограничивающего эффективность активации Т-клеток. Однако, адъювантный фактор аллогенного ответа может быть эффективно использован для усиления иммунного ответа с использованием аутологичных ДК, если будет использоваться отдельная доза аллогенных ДК, вводимых в опухоль до и вместе дозой незрелых аутологичных ДК, выступающих в роли АПК. Данная стратегия предоставляет возможность использование аллогенного эффекта (создание окружения, богатого воспалительными цитокинами, индуцирующими созревание и активацию незрелых аутологичных ДК, введённых интертуморально) без снижения срока выживаемости аутологичных ДК, нагруженных антигеном, в лимфатических узлах. Данный подход основан на понимании того факта, что введение антигенпрезентирующих клеток, таких как ДК в опухоль (интертуморальное введение) является преимущественным методом активной иммунотерапии рака, поскольку предоставляет возможность осуществлять процесс нагрузки АПК опухолевыми антигенами самого пациента in situ, без необходимости идентификации, селекции, выделения, производства и нагрузки ДК антигеном in vitro. Этот метод может быть существенно улучшен за счёт его комбинации с методами, способными высвобождать антигены in vivo, такими как различные методы абляции опухоли, включая криоабляцию, радиочастотную абляцию, фотодинамическую терапию, локальную гипертермию, и высокоинтенсивную фокусированную ультразвуковую терапию (HIFU) и им подобные. Этот метод также основывается на понимании того факта, что незрелые ДК используются для интертуморального введения исходя из их возможности поглощать антигены путём фаго- и эндоцитоза непосредственно от опухолевых клеток in situ. После поглощения антигена in situ, незрелые ДК должны пройти процесс созревания/активации для приобретения способности к миграции в лимфатические узлы и эффективной активации антигенспецифичного Т клеточного ответа. Этот подход позволяет обойти те ограничения, которые накладывались на вакцины второго поколения на основе дендритных клеток, сохранив все их достоинства. Данный подход является революционным и позволяет резко увеличить вероятность иммунного ответа, и, соответственно эффективность значительно возрастает. Метод универсален и потенциально применим для любой солидной опухоли. Ожидается, что стоимость вакцины будет существенно ниже аналогов, поскольку отпадает необходимость в идентификации, выделении и синтезе опухолевых антигенов. Мероприятия собственность. по охране прав на интеллектуальную Данная технология описана в патентной заявке США US 2005/0214268. Авторы патентной заявки, William Cavanagh и Benjamin Tjoa, являются участниками предлагаемого проекта. Получено положительное заключение о возможности создания патентоспособного улучшенного варианта данной технологии и методики медицинского применения при непосредственном участии разработчиков. При этом разработка, внедрение и патентование улучшенного варианта данной технологии будет производиться в России, а не в США. В настоящее время ведётся подготовка заявки на патент РФ, суть улучшений охраняется в режиме «ноу-хау». Основные идеи технологии изложены в следующей статье разработчиков: Chemotherapy Followed by Syngenic Dendritic Cell Injection in Mouse: Findings and Implications for Human Treatment, W. Cavanagh, B. Tjoa, and Haakon Radge, Urology, 70(6A), 36-41, 2007 Конкурентные преимущества. Ближайшим аналогом продукции проекта является вакцина Provenge производства компании Dendreon. Капитализация компании на сегодняшний день превышает 5,5 млрд. долларов, прогнозируемый объем продаж вакцины в США – более 1 млрд. долларов в год при страховом покрытии в 93 000 долларов за курс. Кроме того, на рассмотрении комиссии FDA на сегодняшний день находится более 300 вакцин на основе дендритных клеток для различных заболеваний. Зарегистрированные вакцины На сегодняшний день в мире зарегистрированы лишь две противораковые вакцины – Provenge компании Dendreon (получила одобрение FDA в США в 2010 году) и Oncophage компании Antigenics (зарегистрирована в России в 2008 году). Далее мы опишем эти вакцины более подробно. Oncophage Oncophage (Vitespen, HSPPC-96) компании Antigenics - это аутологичная вакцина, состоящая из комплексов белков теплового шока и их ассоциированных пептидов, полученных из собственных опухолевых клеток пациента. Эти комплексы представляют собой своего рода антигенные «отпечатки», которые уникальны для каждого пациента. Вакцина вызывает специфический иммунный ответ против раковых клеток, используя эти «отпечатки». Oncophage прошёл третью фазу клинических исследований в США (728 пациентов с раком почки) и был зарегистрирован в России в апреле 2008 года. Хотя в США результаты фазы III были признаны неудовлетворительными, однако вакцина была одобрена FDA, но лишь для адъювантного лечения больных раком почки, после чего компания сменила название на Agenus, a название вакцины на Prophage. На сегодняшний день проведено более 15 клинических испытаний различных фаз для этой вакцины и компания продолжает развиваться и пытаться получить одобрение FDA. Provenge Provenge (Sipuleucel-T, APC8015) компании Dendreon – аутологичная вакцина на основе дендритных клеток, подвергнувшихся созреванию in vitro в присутствии кислой фосфатазы предстательной железы (PAP) и GM-CSF. Она активирует Т-клетки, делая их способными распознавать и уничтожать клетки опухоли, презентирующие на своей поверхности PAP. В отличие от индивидуализированных вакцин, использующих опухолевый материал пациента для получения широкого спектра антигенов, Provenge использует лишь один распространённый антиген. По результатам фазы III клинических исследований в апреле 2010 года вакцина Provenge была одобрена FDA, став сенсацией года в онкологии и открыв рынок противораковых вакцин. Вакцины на поздних стадиях клинических испытаний OncoVAX OncoVAX (Intracel) компании Vaccinogen, Inc – поливалентная аутологичная вакцина на основе облучённых опухолевых клеток с адъювантом БЦЖ. Используется после хирургического вмешательства в опухоль. Находится в фазе III клинических исследований, одобрена для ограниченного клинического использования в Нидерландах. Reniale Reniale (ATL) компании LipoNova AG – аутологичная вакцина на основе лизата опухолевых клеток пациента. Опухолевые клетки очищаются, затем инкубируются с гамма-интерфероном и лишаются жизнеспособности. Проведена фаза III клинических исследований. Stimuvax Stimuvax (Biomira) компании Merck – неперсонализированная липосомальная вакцина на основе синтетического пептида - аналога антигена MUC-1, инкапсулированного в липосоме. Подобный дизайн требуется для нейтрализации иммуносупрессивного эффекта MUC-1. Вакцина находится на фазе III клинических исследований для рака лёгкого и рака молочной железы. Испытания приостанавливались в марте 2010 года в связи с «подозреваемой неожиданной серьёзной неблагоприятной реакцией», однако были возобновлены в июне 2010 года. GSK1572932A GSK1572932A компании GlaxoSmithKline – неперсонализированная вакцина на основе рекомбинантного белка MAGE-A3 в сочетании со специальными адъювантами. Вакцина запускает иммунный ответ против клеток экспрессирующих белок MAGE-A3 и внастоящий момент находится на фазе III клинических исследований. Другие вакцины различных компаний Celldex Therapeutics (вакцины CDX110, CDX1307 и CDX1401), Geron Corporation (вакцины GRNVAC1 и GRNVAC2), BN ImmunoTherapeutics (вакцина PROSTVAC), GlobeImmune (вакцина Tarmogens, GI-4000), Advaxis (вакцины ADXS11-001, ADXS31-001, ADXS31-164), GeneMax Corp (вакцина GMXX), Apthera, Inc. (вакцина NeuVax), Avax Technologies (вакцина AC Vaccine) Immatics biotechnologies (вакцина IMA901) Scancell Holdings, (вакцина SCIB1) и ещё великое множество других вакцин Вакцины, чьи испытания прекращены Некоторые примеры вакцин, чьи испытания были прекращены из-за неудовлетворительных результатов фазы III клинических исследований, несмотря на обнадёживающие результаты фазы II и сильный иммунный ответ: GVAX компании Cell Genesys Canvaxin компании CancerVax MyVax компании Genitope Corp FavId компании Favrille Inc В России на сегодняшний день аналогичные разработки вакцин ведутся только в научных центрах (см. указанные выше патенты) и не выходят на коммерциализацию. Альтернативных лечебных технологий для гормон-резистентного рака предстательной железы 3-4 стадий нет. Рынок сбыта. Рынок вакцины на основе дендритных клеток в России оценивается в 4 тысячи пациентов ежегодно, однако из-за относительно высокой цены курса (600 тысяч рублей, из которых 500 тысяч составляет цена вакцины) его насыщение возможно только при участии государства или страховых компаний. Прогноз продаж проекта начинается от 130 курсов в первый год после регистрации технологии и постепенно растет до 1 600 курсов в год через 6 лет. По консервативным оценкам, для всех онкоурологических заболеваний минимальная потребность составит 2 000 случаев в год, с учетом кумуляции больных и прогрессированием заболевания 3 000 случаев год. По мере распространения методики и расширения показаний число их может увеличиться до 15 000 случаев в год, а с учетом кумуляции больных и прогрессированием заболевания может превысить 20 000 случаев в год. В случае успешных испытаний вакцины для других локализаций опухоли (почка, печень, молочная железа) число случаев вырастет на порядок. Средняя стоимость процедуры в США составляет около $30 000 (900 000 рублей). Исходя из планируемой ориентировочной стоимости процедуры в России 300 000 рублей, потенциальный рынок может составить 6 млрд. рублей в год только для РПЖ, и на порядок больше при одобрении всех других локализаций. Поскольку технология потенциально применима для любых солидных опухолей и будет использоваться на поздних стадиях заболевания, данная технология может замещать дорогостоящие импортные химиотерапевтические препараты при более высокой эффективности и значительно менее выраженным побочным эффектам. После разработки и внедрения технологии в России, возможно тиражирование метода в странах СНГ и создания центра международного медицинского туризма. После успешного прохождения полного объема клинических исследований – в странах Европы и Азии. Продажи предлагается осуществлять через партнерские программы с крупными медицинскими исследовательскими центрами, специализирующимися в области онкологии и урологии (НИИ онкологии им. Н.Н. Петрова, Санкт-Петербург и ФГУ НИИ урологии, Москва). Пациенты этих центров будут направляться в центр забора крови, где будет проводиться процедура афереза для получения сырья для вакцины. Непосредственно лечение будет проводиться в больнице после завершения процесса изготовления вакцины (около 2-х недель). Получено принципиальное согласие администрации центров на участие в проекте. На начальном этапе курсы лечения будут проводиться на собственные средства пациентов, однако в ближайшей перспективе планируется получение государственных квот на проведение лечения и включение вакцины в перечни услуг страховых компаний. Порядок коммерциализации результатов разработки. Этот раздел подробно описан в прилагаемой презентации проекта и финансовой модели. План действий по реализации проекта укрупненно: Этап 1. Запуск проекта (22-24 месяца): ◦ Организация работающей клеточной производственной лаборатории; ◦ Воспроизводство технологии производства дендритной вакцины ◦ Проведение пилотного кинического исследования эффективности и безопасности полученного препарата у больных РПЖ ◦ Прохождение регистрационных процедур в Росздравнадзоре ◦ Начало коммерческих продаж Этап 2. Клинические испытания, вывод продукта на рынок и коммерциализация новых разработок (18-24 месяцев): ◦ Организация полномасштабного производства препарата ◦ Прохождение регистрационных процедур производства МПТ ◦ Проведение пилотных кинических исследований эффективности и безопасности полученного препарата у больных опухолями других локализаций (почка, поджелудочная железа, колоректальный рак) ◦ Создание государственных стандартов лечения онкологических заболеваний методами иммунотерапии и выход на госзакупки продукции компании Этап 3. Продвижение продукции и расширение производства: ◦ Тиражирование методики (Создание типового проекта и создание региональных центров) ◦ Освоение других типов вакцин ◦ Создание линейки противоопухолевых клеточных вакцин ◦ Расширение продаж выход на централизованные закупки (местный и государственный бюджет) Этап 1. Производственный участок в НИИО им. Н.Н. Петрова и клинические испытания (параллельно) – 22-24 месяца Организация участка производства Закупка оборудования. Организация рабочего участка. (4 месяца) Монтаж оборудования. Создание производственных регламентов. Обучение персонала. (2 месяца) Выпуск опытной партии отвечающей необходимым требованиям спецификации продукта. (1 месяц) Клинические испытания и регистрация Создание протокола клинических исследований. (4 месяца) Доклинические исследования (6 месяцев, параллельно с протоколом КИ) Проведение клинических исследований (12 месяцев) Подготовка отчета об исследовании. Передача результатов в МЗ на регистрацию (2 месяца) Регистрация МТ (2 месяца) Начало продаж частным пациентам Риски и меры по их устранению Наработанная партия дендритных клеток испорчена Вероятность наступления: Ниже средней. Действия в случае наступления: Приостановка производства до выяснения причин. Затем повторный забор крови и инкубирование вакцины. Ущерб: Потеря 3-6 недель времени и удорожание себестоимости одной конкретной дозы вакцины. Устранение: Жёсткий контроль всех операций, мотивация сотрудников. Невозможность дальнейшей эксплуатации арендованной площадки Вероятность наступления: Ниже средней. Действия в случае наступления: Перенос производства на другую площадку. Ущерб: Потеря 3-6 месяцев на перенос производства, денежные потери. Устранение: Диверсификация производственных площадок со второго этапа, выбор запасных площадок. Для выхода на госзакупки потребуются дополнительные клинические испытания Вероятность наступления: Малая. Действия в случае наступления: Расширение показаний применения. Выбор альтернативных орфанных индикаций, не требующих объёмных клинических испытаний. Ущерб: Увеличение стоимости и срока окупаемости проекта. Устранение: Грамотное составление клинического протокола. Привлечение сторонних инвестиций. Работа с заинтересованными лицами. Осложнения или смерть пациента при проведении клинических исследований Вероятность наступления: Малая. Действия в случае наступления: Страховые и медицинские разбирательства. Ущерб: Удлинение и удорожание клинических исследований. Устранение: Оптимизация клинического протокола и тщательный подбор пациентов. Привлечение клинических специалистов для контроля, предотвращения и экстренных вмешательств в непредвиденных клинических ситуациях. Команда проекта Разработчик вакцины, Вильям Кавена, начал свою карьеру в области технологий лечения онкологических заболеваний в начале 90-х. Возглавлял исследования и разработки технологии брахитерапии в Институте Предстательной Железы в Сиэтле. Он является организатором ряда клинических исследований в области онкологии, автором 34 научных публикаций и заявки на патент США US 2005/0214268. Работал генеральным директором по научным исследованиям и разработкам в компании Sangretech Biomedical, где отвечал за полный цикл разработки и внедрения противораковых вакцин. В настоящий момент Вильям Кавена является консультантом ООО «Интера-Мед», где возглавляет разработку улучшенного варианта вакцины на основе дендритных клеток в России. Разработчик технологии получения дендритных клеток, Бенджамин Тоа, Ph. D. по специальности биохимия и иммунология (Университет штата Иллинойс) имеет опыт работы в ряде биотехнологических компаний. В качества ведущего научного сотрудника компании North-West Biotherapeutics участвовал в разработке вакцины на основе дендритных клеток для лечения рака предстательной железы. В качестве генерального директора по исследования м и разработкам в компании Botswick Therapeutics отвечал за разработку технологии получения дендритных клеток для противоопухолевых вакцин. В настоящее время является консультантом ООО «Интера-Мед» по клеточным производственным технологиям в соответствии со стандартами GMP. Руководитель проекта, Егоров Олег Борисович, Ph. D. по аналитической химии, является топ-менеджером и признанным научным специалистом высочайшего уровня в области производства медицинских изотопов, радиотерапии (брахитерапия, радиоиммунная терапия), аналитической и радиохимии. Имеет опыт создания и руководства научно-исследовательскими программами в области высоких технологий (ядерная медицина, радиохимия, нанотехнологии) и их коммерциализации. Имеет опыт развития бизнеса, создания стратегической корпоративной политики, маркетинга, развития/поддержки рынка и создания транснациональных корпоративных проектов. В совершенстве владеет английским языком и имеет многолетний опыт работы в США. Автор 39 публикаций, в том числе 4 глав в книгах, 5 патентов и двух заявок на патент, из которых 3 лицензированы частными компаниями. Член Американского Химического Общества и Американского Ядерного Общества. Лауреат награды «R&D 100» за создания источника брахитерапии с использованием Cs-131. Сивков Андрей Владимирович, медицинский консультант, родился 22 сентября 1957 г. В 1981 году закончил лечебный факультет 2 МОЛГМИ им Пирогова. В 1981-1983 гг. прошел обучение в клинической ординатуре по урологии на базе урологической клиники 1 ММИ им. Сеченова. С 1993 года работает в НИИ урологии. С апреля 2007 года занимает должность первого заместителя директора по научной работе. В 1999 году доктором Сивковым защищена кандидатская диссертация на тему: ”Значение ультразвуковых исследований органов мочеполовой системы при профилактических осмотрах“. За последние годы благодаря деятельности Сивкова в НИИ урологии получили развитие следующие направления: o ранняя диагностика рака предстательной железы с помощью определения уровня ПСА и мультифокальной трансректальной биопсии простаты под УЗ наведением; o брахитерапия локализованного рака предстательной железы (первая операция в России выполнена им в 2000г); o термальные методы лечения заболеваний предстательной железы; o скрининг рака предстательной железы; o диагностика и комплексное лечение хронического простатита, дифференциальная диагностика синдрома хронической тазовой боли; Под руководством Андрея Владимировича защищено 4 кандидатских диссертации, готовятся к защите ещё 4 работы. Сивков является инициатором создания в НИИ урологии компьютерной сети, проведения телемедицинских конференций, консультаций и, как результат, организации отдела Телемедицины и компьютерных технологий, работу которого он курирует в настоящее время. В 2002 году Сивков избран членом Президиума Правления Российского общества урологов и заместителем Председателя Московского отделения Общества. Он является членом редколлегии журнала ”Урология“ и «Экспериментальная и клиническая урология», Интернет-сайта www.uro.ru. А.В. Сивков автор более 270 научных публикаций, соавтор З-х томного Руководства по урологии, З-х глав в новом учебнике ”Урология“, нескольких монографий и 3-х монографий. Является действительным членом профессиональных ассоциаций РОУ, EAU и SIU. Ощепков Василий Николаевич, медицинский директор, к.м.н., сотрудник НИИ урологии Минздравсоцразвития РФ, Москва. Является разработчиком ряда медицинских технологий, зарегистрированных на территории РФ, главным образом малоинвазивных методов лечения заболеваний предстательной железы. Выполнил первую операцию брахитерапии в РФ и внедрил в отечественную практику этот метод. Один из авторов национального руководства, автор монографий, множества публикаций по данной тематике в России и за рубежом. Активный член профессиональных ассоциаций РОУ, РООУ, ОБР, EAU, SIU, ESTRO. Балдуева Ирина Александровна, д.м.н., профессор ФГУ НИИ онкологии им. Н.Н. Петрова Минздравсоцразвития РФ, Санкт-Петербург. Имеет опыт применения иммунотерапии злокачественных новообразований различной локализации более чем у 300 пациентов, что является самым большим опытом на территории РФ. В настоящее время заведует лабораторией иммунологии Клинического Центра передовых медицинских технологий, имеет опыт (c 1995 года) работы в области иммунотерапии злокачественных новообразований, имеет ряд публикаций и патенты по данной тематике. Является признанным экспертом в данной области. Состояние и источники инвестирования в реализацию проекта. В настоящее время проект развивается за счёт собственных средств, при этом активно ищутся инвестиции. Проект выдвигался на конкурс Фонда содействия развитию малых форм предприятий в научно-технической сфере «Разработка высокоэффективных технологий получения лекарственных субстанций и лекарственных средств на их основе для применения в медицине и животноводстве» в июле 2010 года и не добрал 1 балла из 100 для получения финансирования. В сентябре-ноябре 2010 года велись переговоры с частным инвестором из Екатеринбурга, которые не увенчались успехом по независящим от качества проекта причинам. В марте 2011 года велись переговоры с фондом «Биопроцесс», проект был отклонен из-за внутренней конкуренции проектов в портфеле фонда, однако качество проекта было оценено как высокое. В настоящее время ведутся переговоры с несколькими частными инвесторами из Москвы, а также с Биофондом РВК, который выразил потенциальный интерес в финансировании данного проекта. Проводятся переговоры с рядом других венчурных фондов. Также готовятся документы для подачи заявки в «Сколково» в самое ближайшее время. Рассматривается возможность участия инвестора в уставном капитале в размере до 55%. Рабочее название проектной компании – Medvio. Предстоящие затраты по проекту. Затраты на предстоящую реализацию проекта подробно описаны в прилагаемой финансовой модели. Потребность в инвестициях укрупненно: ПРИЛОЖЕНИЯ http://inno.ru/inno_us_files/pdf.pdf - Противораковые вакцины - описания и принцип действия http://inno.ru/inno_us_files/xls.xlsx - Бизнес-план
