На правах рукописи БРАГИНА ЕВГЕНИЯ АРКАДЬЕВНА ЭРЛИХИОЗЫ И АНАПЛАЗМОЗЫ ЧЕЛОВЕКА В ПРИРОДНЫХ ОЧАГАХ ТРАНСМИССИВНЫХ ИНФЕКЦИЙ НА ТЕРРИТОРИИ ТЮМЕНСКОЙ ОБЛАСТИ 03.02.11 - паразитология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Тюмень - 2010 2 Работа выполнена в Федеральном государственном учреждении науки «Тюменский научно-исследовательский институт краевой инфекционной патологии» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека НАУЧНЫЙ РУКОВОДИТЕЛЬ: доктор медицинских наук, профессор СТЕПАНОВА Татьяна Федоровна ОФИЦИАЛЬНЫЕ ОППОНЕНТЫ: доктор медицинских наук, профессор ПУСТОВАЛОВА Вера Яковлевна (ФГУН Тюменский НИИ краевой инфекционной патологии, Роспотребнадзора) кандидат биологических наук, старший научный сотрудник СТОЛБОВ Николай Максимович (ГНУ Всероссийский НИИ ветеринарной энтомологии и арахнологии) ВЕДУЩАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ: ФГУН «Омский научноисследовательский институт природноочаговых инфекций», Роспотребнадзора Защита диссертации состоится 16 декабря 2010 года в 10 часов на заседании диссертационного совета ДМ 006.009.01 при ГНУ «Всероссийский научноисследовательский институт ветеринарной энтомологии и арахнологии», по адресу: 625041, г.Тюмень, ул.Институтская, 2, ГНУ ВНИИВЭА, тел.(3452) 625-708 С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГНУ Всероссийском научно-исследовательском институте ветеринарной энтомологии и арахнологии Россельхозакадемии и на сайте www.vniivea.ru Автореферат разослан «15» ноября 2010 года Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наук В.Ю.Неверов 3 Введение Актуальность проблемы. Эрлихиозы и анаплазмозы человека – это классические природно-очаговые трансмиссивные инфекции. Изучение этих заболеваний началось в 1987 году в США, а с 1997 года их регистрируют во многих странах Европы и Азии [Dawson, 1992; Dumler, 1994, 2000]. В России, в том числе и в Тюменской области, в пределах нозоареала клещевого энцефалита (КЭ) и иксодовых клещевых боррелиозов (ИКБ) обнаружены природные очаги и выявлены больные моноцитарным эрлихиозом (МЭЧ) и гранулоцитарным анаплазмозом человека (ГАЧ) [Коренберг и др., 1999, 2001; Григорян, 2002; Шпынов и др., 2004; Степанова и др., 2006; Мусина, 2009]. Основным переносчиком эрлихий и анаплазм является таежный клещ Ixodes persulcatus P.Sch., который так же участвует в циркуляции вируса КЭ и боррелий. Наличие единого механизма передачи инфекций, общих резервуаров и переносчиков возбудителей определяют возможность существования сочетанных очагов трансмиссивных природно-очаговых инфекций: КЭ, ИКБ, эрлихиоз, анаплазмоз [Коренберг, 2001]. К настоящему времени нет сведений о роли клещей Ixodes trianguliceps в циркуляции эрлихий и анаплазм в природных очагах. Ixodes trianguliceps Bir. (Exopalpiger) – это один из наиболее распространенных в Евразии клещей [Филиппова, 1977]. Из клещей I.trianguliceps изолированы возбудители клещевого энцефалита [Малюшина, Катин, 1965], Ку-риккетсиоза [Пчелкина и др., 1975] и иксодовых клещевых боррелиозов [Горелова, Коренберг, Ковалевский и др., 1996]. Этого клеща рассматривают как важное звено эпизоотического процесса в очагах туляремии [Олсуфьев, Дунаева, 1970] и бабезиоза [Hussein, 1980]. Цель работы: Выявление особенностей распространения эрлихий и анаплазм в природных очагах трансмиссивных инфекций на территории Тюменской области. 4 Задачи: 1. Выявить распространение природных очагов моноцитарного эрлихиоза и гранулоцитарного анаплазмоза в различных ландшафтных подзонах Тюменской области. 2. Определить показатели естественной зараженности клещей Ixodes persulcatus и Ixodes trianguliceps эрлихиями, анаплазмами, вирусом клещевого энцефалита, боррелиями в различных ландшафтных подзонах Тюменской области. 3. Установить частоту микст-инфицированности иксодовых клещей эрлихиями, анаплазмами, боррелиями и вирусом клещевого энцефалита. 4. Оценить степень риска заражения людей возбудителями инфекций, передаваемыми клещами, по уровню иммунной прослойки и частоте контакта населения с клещами. Научная новизна. Выявлены природные очаги трансмиссивных болезней человека на территории Тюменской области, установлена их связь с иксодовыми клещами. Впервые на территории южной тайги Тюменской области выявлена ДНК возбудителей эрлихиозов и анаплазмозов в гнездово-норовых клещах Ixodes trianguliceps Bir. (Exopalpiger). Впервые установлена микст-инфицированность клещей I.trianguliceps эрлихиями и анаплазмами. Из клещей I.persulcatus выявлена ДНК возбудителей моноцитарного эрлихиоза и гранулоцитарного анаплазмоза человека и установлена их микст-инфицированность в различных ландшафтных подзонах области. Впервые на территории Тюменской области I.persulcatus выявлена ДНК - Ehrlichia chaffeensis. из клещей 5 Определены анаплазмами показатели населения, риска заражения проживающего эрлихиями в и различных ландшафтных подзонах Тюменской области. Практическая значимость. Получены новые данные об особенностях распространения природных очагов эрлихиозов и анаплазмозов человека в различных ландшафтных подзонах Тюменской области, которые являются фактической основой для их своевременной диагностики. Результаты спонтанной зараженности иксодовых клещей возбудителями инфекций позволят прогнозировать риск заболеваемости людей и проводить необходимые профилактические мероприятия. Материалы районирования используются управлениями для формирования программ профилактики и определения комплекса профилактических мероприятий. Внедрение результатов научных исследований. Материалы наших исследований использованы в научном отчете «Предварительная оценка эпидемической и эколого-эпизоотической ситуации на территории освоения Приполярного Урала» (2008 г.); научном отчете «Совершенствование технологий эколого-эпизоотологического мониторинга и эпидемического надзора в сочетанных природных очагах трансмиссивных инфекций на территории Тюменской области» (2008 г.); Кадастре территорий юга Тюменской области по клещевым инфекциям (2010 г.). По результатам исследований инфекций, подготовлено информационное передающихся клещами» письмо «Профилактика (утверждено Управлением Роспотребнадзора по Тюменской области, 2010 г.), данные используются в учебном процессе кафедры инфекционных болезней Тюменской медицинской академии. Положения, выносимые на защиту: 1. Гнездово-норовые паразиты млекопитающих – клещи Ixodes trianguliceps Bir. (Exopalpiger) как переносчики эрлихий и анаплазм. 6 2. Природные очаги моноцитарного эрлихиоза и гранулоцитарного анаплазмоза распространены во всех ландшафтных подзонах Тюменской области. 3. Показатели риска заражения людей эрлихиями и анаплазмами в различных ландшафтных подзонах является основой для районирования территории Тюменской области по этим нозоформам. Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены: на юбилейной конференции, посвященной 70-летию открытия вируса КЭ, IV Дальневосточный конгресс (Владивосток, 2007 г.); IХ съезде Всероссийского научно-практического общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов (Москва, 2007 г.); заседаниях межлабораторного совета ФГУН ТНИИКИП Роспотребнадзора (2008, 2009, 2010 гг.), Всероссийской конференции «Актуальные аспекты паразитарных заболеваний в современный период», (Тюмень, 2008 г.); Всероссийской конференции с международным участием, посвященной 70-летию теории академика Е.Н.Павловского о природной очаговости болезней (Омск. 2009 г.). Публикации. По теме диссертации опубликовано 6 работ, 1 из них в издании, рекомендованном ВАК РФ. Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, 3 глав собственных исследований, заключения, выводов, списка литературы и приложений. Работа изложена на 123 листах, иллюстрирована 20 таблицами и 19 рисунками. Список литературы включает 233 источника, из них 132 отечественных и 101 зарубежный. Личное участие автора в получении научных результатов. Личный вклад заключается в разработке идеи работы, в постановке экспериментов, лабораторных исследований, в статистической обработке результатов и интерпретации полученных результатов. 7 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ Материал и методы исследований Сбор материала осуществлялся в период с 2006 по 2010 год в различных ландшафтных подзонах Тюменской области. Также были использованы архивные материалы института с 2003 года. Всего исследовано 9192 особи иксодовых клещей, из них 254 - Ixodes trianguliceps, снятых с 505 экземпляров мелких млекопитающих в южной тайге Тюменской области, отловленных живоловками, и 6130 сывороток крови людей. Клещей исследовали на наличие: боррелий - методом темнопольной микроскопии [Ковалевский с соавт, 1988], вируса клещевого энцефалита методом ИФА (иммуноферментный анализ), возбудителей анаплазмоза и эрлихиоза методом ПЦР (полимеразной цепной реакции). Для выявления антител к боррелиям сыворотки крови людей исследовали в НРИФ (непрямая реакция иммунофлуоресценции) с корпускулярным антигеном Borrelia burgdorferi производства НИИЭМ им. Н.Ф.Гамалеи РАМН и в ИФА (тест-системы производства ООО «Омникс», г.Санкт-Петербург, «Боррелиоз-ИФА-комби»). Антитела к вирусу клещевого энцефалита выявляли в РТГА (реакция торможения гемагглютинации) с антигеном производства НПО г.Томск и в ИФА (тест-системы производства ЗАО «Вектор-Бест» г.Новосибирск, «ВекторВЭК- IgM и IgG–стрип»). Антитела класса IgM и IgG к возбудителям эрлихий и анаплазм выявляли с использованием тест-систем производства ООО «Омникс», г.Санкт-Петербург, («ГАЧ-ИФА-IgM (IgG)» и «МЭЧ-ИФА-IgM (IgG). Постановку ПЦР осуществляли с использованием тест-систем ООО «Омникс», г.Санкт-Петербург «Ампли-МЭЧ-ГФ», «Ампли-ГАЧ-ГФ». Расчет основных статистических показателей выполнен с использованием программы «Stаtistika-97». Достоверность разницы величин, исследуемых в динамике, определяли с помощью критериев Стьюдента (t). 8 РОЛЬ КЛЕЩЕЙ IXODES TRIANGULICEPS В ПАРАЗИТАРНЫХ СИСТЕМАХ ЭРЛИХИОЗОВ И АНАПЛАЗМОЗОВ В ТЮМЕНСКОЙ ОБЛАСТИ На территории Тюменской области ареал I.trianguliceps ограничен подзонами южной тайги и осиново-березовых лесов и совпадает с ареалом липняков, являющихся здесь реликтовой формой. Основными местами обитания I.trianguliceps являются хорошо увлажненные леса с развитым подлеском и травостоем. Дерново-подзолистые почвы, рыхлая подстилка и достаточная увлажненность создают оптимальные условия для развития I.trianguliceps в южной тайге Тюменской области. Наибольшая численность клещей отмечена в осинниках и в липняках [Малюшина, 1967]. В прокормлении I.trianguliceps в южной тайге Тюменской области участвуют 18 видов мелких млекопитающих. Основными прокормителями являются рыжая европейская, красная сибирская полевки и бурозубки. I.trianguliceps паразитирует в течение всего года. Причем в весенне-летний и осенний периоды активны все фазы клеща, зимой на мелких млекопитающих обнаружены только личинки. Полный цикл развития клеща в южной тайге Тюменской области протекает в течение 3-5 лет. I.trianguliceps способен многократно присасываться и питаться в период одной фазы развития, эта способность обеспечивает более интенсивную диссеминацию возбудителя, чем у других видов клещей. Роль I.trianguliceps в экологии возбудителей, передающихся клещами, может возрастать в связи с тем, что в период снижения активности I.persulcatus в летне-осенние месяцы этот вид оказывается единственным интенсивно паразитирующим переносчиком возбудителей передающихся клещами среди мелких млекопитающих, численность которых в этот период значительно увеличивается [Малюшина, 1967]. С мелких млекопитающих снято нами 185 личинок клеща I.trianguliceps (135 голодных и 50 напитавшихся), 10 нимф (7 голодных и 3 9 напитавшихся), 59 самок (34 голодных и 25 напитавшихся). I.trianguliceps найден на 80 зверьках (22,16% осмотренных особей): полевки рыжая и красная. Максимально с одной полевки было снято 28 личинок клеща I.trianguliceps и 6 самок. Впервые на территории Тюменской области из клещей I.trianguliceps выявлена ДНК возбудителей Ehrlichia muris (у голодных и напитавшихся личинок и самок), Ehrlichia chaffeensis - у голодных личинок и одной напитавшейся самки, ДНК анаплазм (Anaplasma phagocytophila) обнаружена только у голодных личинок и самок клеща I.trianguliceps (табл.1). Таблица 1 Спонтанная зараженность клещей Ixodes trianguliceps эрлихиями и анаплазмами Возбудитель E.muris E.chaffeensis A.phagocytophila Фаза клещей кол-во исслед. из них зараж. (абс.) Р±mр, % кол-во исслед. из них зараж. (абс.) Р±mр, % кол-во исслед. из них зараж. (абс.) Р±mр,% Личинки:голодные, напитавшиеся, всего 135 7 5,18±2,0 135 6 4,45±1,8 135 1 0,74±0,74 50 185 7 4 11 0 8,0±4,0 5,94±1,7 - 50 185 7 0 6 0 3,24±1,3 - 50 185 7 0 1 0 0,54±0,54 - 3 10 34 0 0 2 5,88±4,0 3 10 34 0 0 2 5,88±4,0 3 10 34 0 0 6 17,64±6,5 25 59 254 0 2 13 3,4±2,3 5,12±1,4 25 59 254 1 3 9 4,0±4,0 5,1±2,9 3,54±1,1 25 59 254 0 6 7 10,17±4,0 2,75±1,0 176 9 5,11±1,6 176 8 4,54±1,5 176 7 4,0±1,5 78 4 5,13±2,5 78 1 1,3±1,3 78 0 - Нимфы: голодные, напитавшиеся, всего Самки: голодные, напитавшиеся, всего Всего в т.ч. голодных, напитавшихся Выявлена также микст-инфицированность I.trianguliceps эрлихиями и анаплазмами (табл.2). Сочетание всех трех нозоформ выявлено только у голодных самок, а сочетание E.chaffeensis+A.phagocytophila только у голодных личинок. Впервые в Тюменской области в клещах Ixodes trianguliceps выявлена ДНК возбудителей инфицированность эрлихиозов данных и клещей. анаплазмозов. Таким Показана образом, клещи микстIxodes trianguliceps являются переносчиком и резервуаром эрлихий и анаплазм. 10 Таблица 2 Микст-инфицированность клещей Ixodes trianguliceps эрлихиями и анаплазмами Возбудитель Фаза клещей Личинки:голодные, напитавшиеся, всего Нимфы: голодные, напитавшиеся, всего Самки: голодные, напитавшиеся, всего Всего в т.ч. голодных, напитавшихся E.muris+ E.chaffeensis+ A.phagocytophila кол-во из них Р±mр ,% исслед. зараж. 135 0 50 0 0 185 7 0 3 0 0 10 34 2 5,88±4,0 25 0 59 2 3,4±2,3 2 0,79±0,56 254 176 2 1,13±0,8 78 0 - Всего микстов E.chaffeensis+ A.phagocytophila кол-во исслед. 135 50 185 7 3 10 34 25 59 254 176 78 из них зараж. 1 0 1 0 0 0 0 0 0 1 1 0 Р±mр , % 0,74±0,74 0,54±0,54 0,4±0,4 0,57±0,57 - кол-во исслед. 135 50 185 7 3 10 34 25 59 254 176 78 из них зараж. 1 0 1 0 0 0 2 0 2 3 3 0 Р±mр, % 0,74±0,74 0,54±0,54 5,88±4,0 3,4±2,3 1,2±0,7 1,7±0,9 - СПОНТАННАЯ ЗАРАЖЕННОСТЬ ИКСОДОВЫХ КЛЕЩЕЙ ЭРЛИХИЯМИ, АНАПЛАЗМАМИ, БОРРЕЛИЯМИ И ВИРУСОМ КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА В РАЗЛИЧНЫХ ЛАНДШАФТНЫХ ПОДЗОНАХ ТЮМЕНСКОЙ ОБЛАСТИ Уровень спонтанной зараженности таежных клещей возбудителями МЭЧ, ГАЧ, боррелиями, вирусом КЭ – наиболее демонстративный показатель эпидемической опасности территории. При исследовании клещей I.persulcatus на наличие в них эрлихий и анаплазм (табл.3) ДНК к возбудителю A.phagocytophila выявили из клещей, обитающих в южной тайге и подтайге, к возбудителю моноцитарного эрлихиоза (E.chaffensis) – в южной и средней тайге, к E.muris - в подтайге и в средней тайге. Микстинфицированность клещей I.persulcatus выявлена в 11 случаях, при сочетании E.muris + A.phagocytophila. В Тюменской области спонтанная зараженность иксодовых клещей боррелиями колеблется в пределах от 23,4±0,9% до 37,2±2,2%. Зараженность клещей боррелиями в подтайге (37,2±2,2%) и средней тайге (34,0±1,2%) выше, чем в южной тайге (23,4±0,9%) и лесостепи (27,7±3,1%). 11 Одновременно исследование клещей проводили на зараженность их вирусом клещевого энцефалита. В Тюменской области в 2003-2009 гг. вирусофорность клещей колебалась в среднем от 3,9±0,7% до 7,0±0,8%. В средней тайге и лесостепи зараженность клещей вирусом КЭ в 1,5 раза выше, чем в южной тайге и подтайге. Таблица 3 Спонтанная зараженность Ixodes persulcatus эрлихиями и анаплазмами Ландшафтная подзона кол-во исс-х E.chaffeensis из Р±mp, них (%) клещей зараж. Средняя кол-во E.muris из Р±mp, исс-х них (%) клещей зараж. A.phagocytophila кол-во из Р±mp, исс-х них (%) клещей зараж. 159 5 3,14±1,37 0 - - 183 0 - 193 22 11,39±2,2 103 2 1,94±0,7 439 17 3,87±0,9 Подтайга 0 - - 180 9 5,0±1,6 417 9 2,15±0,7 Лесостепь 0 - - 0 - - 80 0 - По области 352 27 7,67±1,41 283 11 3,8±1,1 1119 26 2,32±0,4 тайга Южная тайга Зараженность клещей рода Dermacentor вирусом КЭ составила 5,5±1,2%, а боррелиями 2,5±0,9%. Количественная оценка содержания возбудителя в клеще отражает реальную опасность заражения при присасывании переносчика, а именно, чем выше инфицированность клеща, тем больше риск заболевания человека. В Тюменской области в последние годы наиболее часто встречаются клещи со слабой и средней степенью инфицированности боррелиями. До 60,0±3,0% клещей со слабой степенью инфицированности (до 10 боррелий) обитает в подзоне средней тайги. Средняя степень инфицированности боррелиями (от 10 до 50) зарегистрирована в подтайге (44,4±3,7%) и лесостепи (44,0±4,0%). В этих же районах обнаружены клещи с высокой степенью зараженности (50250 боррелий) – 16,0±3,0%. Клещи, содержащие боррелии более 250 на 100 полей зрения - 2,33±1,1% выявлены в подзоне подтайги. 12 Таким образом, в подзоне средней тайги и лесостепи зараженность клещей вирусом КЭ выше, чем в южной тайге и подтайге. А показатель зараженности клещей боррелиями самый высокий в подзоне подтайги. Клещи Ixodes persulcatus в Тюменской области, являются переносчиком и резервуаром эрлихий и анаплазм; в подзоне южной тайги выявлена ДНК A.phagocytophila, E.muris и впервые E.chaffeensis; в подзоне подтайги выявлена ДНК A.phagocytophila и E.muris; в подзоне средней тайги выявлена ДНК E.chaffeensis; в подзоне лесостепи ДНК этих возбудителей нами не обнаружены. РИСК ЗАРАЖЕНИЯ ЛЮДЕЙ ИНФЕКЦИЯМИ, ПЕРЕДАВАЕМЫМИ ИКСОДОВЫМИ КЛЕЩАМИ В РАЗЛИЧНЫХ ЛАНДШАФТНЫХ ПОДЗОНАХ ТЮМЕНСКОЙ ОБЛАСТИ По данным Л.П.Колчановой (1996) частота контактов населения с клещами во всех подзонах очень высокая, как среди людей, профессионально связанных с лесом, так и посещающих лес по бытовым нуждам. Важнейшим и наиболее объективным показателем риска заражения является уровень иммунной прослойки населения к эрлихиям, анаплазмам, боррелиям, вирусу КЭ. Поэтому было проведено серологическое обследование людей проживающих в различных ландшафтных подзонах области (табл.4). Уровень иммунной прослойки населения к возбудителям ГАЧ и МЭЧ во всех ландшафтных подзонах, колебался в среднем от 7,3 до 11,5% (табл.4, рис.1). Наиболее высокие показатели иммунной прослойки населения к боррелиям выявлены в средней тайге – 52,2% (СГТА -1:339,2), что в 1,4 раза превышает таковой в южной тайге и подтайге и в 1,8 раза - в лесостепи. Иммунная прослойка населения к вирусу КЭ в подзоне средней тайги Тюменской области в 1,3 раза ниже, чем в остальных подзонах (рис.2). 13 Таблица 4 Иммунная прослойка населения к возбудителям эрлихиозов, анаплазмозов, клещевого энцефалита и боррелиям в различных ландшафтных подзонах Тюменской области в 2006 – 2009 гг. Подзона МЭЧ Р±mp, % СГТА 7,75±1,7 1:223 Средняя тайга Южная 8,28±2,0 1:194 тайга Подтайга 7,29±0,7 1:208 Лесостепь 9,82±3,0 1:158 ГАЧ Р±mp, % СГТА 9,75±2,0 1:239 11,11±2,34 10,63±0,8 11,50±3,0 1:194 1:223 1:158 ИКБ Р±mp, % СГТА 52,2±2,6 1:339,2 КЭ Р±mp, % СГТА 30,6±2,4 1:2104 35,6±3,0 39,42±3,0 1:933 40,0±0,7 36,0±3,5 1:928 1:930 1:207,9 37,4±0,7 1:239 28,3±3,3 1:239 12 % 10 8 6 4 2 0 средняя тайга южная тайга МЭЧ подтайга лесостепь ГАЧ Рисунок 1. Иммунная прослойка населения к возбудителям моноцитарного эрлихиоза и гранулоцитарного анаплазмоза человека в различных ландшафтных подзонах Тюменской области (2006-2009 гг.) 14 % 60 50 40 30 20 10 0 средняя тайга южная тайга подтайга КЭ ИКБ лесостепь Рисунок 2. Иммунная прослойка населения к боррелиям и вирусу клещевого энцефалита в различных ландшафтных подзонах Тюменской области (2006-2009 гг.) О риске заражения в сравниваемых ландшафтных подзонах судили также по уровню заболеваемости населения. Заболеваемость людей клещевым энцефалитом (КЭ) в нашей стране регистрируется с 1937 года, а иксодовыми клещевыми боррелиозами (ИКБ) с 1992 года. Случаи заболеваний ИКБ и КЭ зарегистрированы во всех районах Тюменской области (по данным клиники ТНИИКИП и ФГУЗ Центра гигиены и эпидемиологии). Наибольшее число заболевших КЭ и ИКБ в 2003-2009 гг. отмечено в подзоне подтайги (более 500 человек), что в 4 раза больше, чем в средней тайге, в 5 раз – южной тайги и 10 раз лесостепи (рис.3). При серологическом исследовании 228 сывороток крови людей, обратившихся в клинику ТНИИКИП с лихорадочными заболеваниями после присасывания клеща, обнаружены антитела к возбудителю МЭЧ в 68 сыворотках (29,8%) и к возбудителю ГАЧ в 78 сыворотках (34,2%). Из них 12 сывороток с титрами антител к возбудителю МЭЧ 1:400; 1:800; 1:1600 и 22 сыворотки с аналогичными титрами антител к возбудителю ГАЧ. У 195 пациентов были выявлены антитела к вирусу КЭ и боррелиям [Степанова, 15 Колчанова, 2006]. Клиническая картина характеризовалась многообразием симптомов поражения нервной системы (отмечены менингеальные знаки и очаговая симптоматика), общеинфекционным синдромом, а также поражением опорно-двигательного аппарата (каждый пятый больной отмечал боли в суставах, мышцах и костях). В общем анализе крови, у больных наблюдалось снижение показателей уровня лимфоцитов, моноцитов и тромбоцитов, более выраженное при микстпатологии. количество человек 600 500 400 300 200 100 0 средняя тайга южная тайга ИКБ подтайга лесостепь КЭ Рисунок 3. Распределение заболеваемости людей иксодовыми клещевыми боррелиозами и клещевым энцефалитом в различных ландшафтных подзонах Тюменской области в 2003-2009 гг. В ходе обследования больных выявлено несколько вариантов сочетаний нозоформ МЭЧ, ГАЧ, ИКБ, КЭ. В исследованных сыворотках крови людей доля микст-инфекций составила 10,0±0,4% (рис.4). Первое место в структуре верифицированных случаев клещевых инфекций занимало сочетание нозоформ ИКБ+КЭ – 66,5±2,0%. СГТА к ИКБ составил 1:239, к ВКЭ – 1:288. Сочетание микстов ГАЧ+ИКБ – 8,82±1,14%. СГТА к ГАЧ составил 1:275, к ИКБ – 1:288,9. Сочетания ГАЧ+КЭ и МЭЧ+ИКБ встречаются значительно меньше предыдущих 5,4±0,9%. Сочетание всех 16 четырех инфекций ИКБ+КЭ+МЭЧ+ГАЧ выявлено в 0,5±0,3% исключительно в подзоне подтайги. Среднегеометрические титры в данном сочетании составили: к ВКЭ – 1:39, к ИКБ – 1:2067, к МЭЧ – 1:147, к ГАЧ – 1:128. Доля сочетаний остальных микст-инфекций колебалась в пределах от 0,82±0,4% до 5,0±0,9%. 0,49% 1,14%3,10% 5,07% 5,39% 8,82% 1,14% 0,82% 2,12% 5,39% 66,50% МЭЧ+ГАЧ ГАЧ+ИКБ МЭЧ+КЭ МЭЧ+ГАЧ+ИКБ МЭЧ+ИКБ МЭЧ+ГАЧ+КЭ ГАЧ+ИКБ+КЭ ИКБ+КЭ МЭЧ+ГАЧ+ИКБ+КЭ ГАЧ+КЭ МЭЧ+ИКБ+КЭ Рисунок 4. Микст-инфицирование людей «клещевыми» инфекциями в 2006-2009 гг. Наибольший процент микст-инфицированных людей выявлен в подтаежной зоне. Антитела у населения, ко всем четырем инфекциям, зарегистрированы на большей части Тюменской области (рис.5). В Бердюжском, Абатском, Белоярском и Нефтеюганском районах встречалось сочетание ИКБ и КЭ. 17 Рисунок 5. Иммунная прослойка населения к возбудителям «клещевых» инфекций на территории Тюменской области. 18 В Березовском районе ХМАО у обследованных нами людей обнаружены антитела к возбудителям ИКБ, в Октябрьском – МЭЧ + ИКБ, в ХантыМансийском – КЭ+ИКБ+ГАЧ. У населения на территории Ямало-Ненецкого автономного округа и в Советском районе Ханты-Мансийского автономного округа антитела к инфекциям, переносимым иксодовыми клещами, не обнаружены. Результаты исследований свидетельствуют о широком распространении в Тюменской области не только ИКБ и КЭ, но также МЭЧ и ГАЧ. ВЫВОДЫ 1. Установлено широкое распространение активных природных очагов моноцитарного эрлихиоза человека и гранулоцитарного анаплазмоза человека во всех ландшафтных подзонах Тюменской области в пределах ареала иксодовых клещей – переносчиков возбудителей этих инфекций. 2. Впервые на территории Тюменской области в клещах Ixodes trianguliceps выявлена ДНК возбудителей Anaplasma phagocytophilа (2,75±1,0%), Ehrlichia muris (5,12±1,4%), Ehrlichia chaffeensis (3,54±1,1%) и установлен высокий уровень их микст-инфицированности. 3. Впервые на территории Тюменской области из клещей I.persulcatus, отловленных в подзонах средней и южной тайги, выявлена ДНК Ehrlichia chaffeensis. 4. Уровень спонтанной зараженности клещей I.persulcatus эрлихиями вида E.muris варьировал от 1,94±0,7% до 5,0±1,6%, E.chaffeensis от 3,14±1,37% до 11,39±2,2%, а A.phagocytophilа - от 2,15±0,7% до 3,87±0,9% от числа исследованных. Самая высокая зараженность E.chaffeensis и A.phagocytophilа оказалась в подзоне южной тайги, а E.muris - в подтайге. 5. Частота контакта населения варьирует в различных ландшафтных подзонах области: с возбудителями моноцитарного эрлихиоза человека от 19 7,29±0,7% до 9,82±3,0% и гранулоцитарного анаплазмоза человека от 9,75±2,0% до 11,5±3,0% от числа обследованных людей. 6. Заболеваемость населения моноцитарным эрлихиозом и гранулоцитарным анаплазмозом человека в виде моноинфекции установлена во всех ландшафтных подзонах. Микст-инфицирование людей наиболее часто встречается в таких сочетаниях: иксодовые клещевые боррелиозы + клещевой энцефалит – 66,5±2,0%; гранулоцитарный анаплазмоз + иксодовые клещевые боррелиозы – 8,82±1,14%; гранулоцитарный анаплазмоз + клещевой энцефалит + иксодовые клещевые боррелиозы – 5,4±0,9%. 20 Список работ, опубликованных по материалам диссертации 1. Колчанова Л.П. Особенности клещевого энцефалита при смешанных клещевых инфекциях в Тюменской области/ Колчанова Л.П., Степанова К.Б., Степанова Т.Ф., Брагина Е.А. //Материалы юбилейной конференции, посв. 70-летию открытия клещевого энцефалита. Дальневосточный журнал инфекционной патологии. Владивосток, 2007. - №11. - С.125-126. 2. Колчанова Л.П. Клещевые инфекции в ХМАО / Колчанова Л.П., Степанова Т.Ф., Брагина Е.А. //Материалы IX съезда Всероссийского научно-практического общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов, М: РАМН, 2007. - С.185. 3. Брагина Е.А. Эпидемические особенности эрлихиозов на территории Западной Сибири/ Брагина Е.А., Колчанова Л.П. // Тезисы докладов Всероссийской конференции «Актуальные аспекты паразитарных заболеваний в современный период». Тюмень: Тюм.аграрный академический союз, 2008. - С.32-33. 4. Колчанова Л.П. Смешанные клещевые инфекции различных ландшафтных подзон Тюменской области/ Колчанова Л.П., Брагина Е.А., Степанова Т.Ф., Степанова К.Б. // Материалы юбилейной научнопрактической конференции, посвященной 200-летию кафедры биологии им.Е.Н.Павловского. СПб: Военно-медицинская академия им. С.М.Кирова, 2009. - С.55. 5. Брагина Е.А. Спонтанная зараженность клещей в сочетанных очагах клещевых инфекций в различных ландшафтных подзонах Западной Сибири/ Брагина Е.А., Колчанова Л.П., Степанова Т.Ф. //Материалы Всероссийской посвященной конференции 70-летию теории с международным академика участием, Е.Н.Павловского о природной очаговости. Омск: Омский научный вестник, 2009. - С. 162. 21 6. Брагина Е.А. Риск заражения людей моноцитарным эрлихиозом и гранулоцитарным анаплазмозом в различных ландшафтных подзонах Тюменской области/ Брагина Е.А., Колчанова Л.П., Степанова Т.Ф. //Вестник Тюменского государственного университета. Тюмень: ТГУ, 2010. - №3. - С.111-116. 22 23 На правах рукописи БРАГИНА ЕВГЕНИЯ АРКАДЬЕВНА ЭРЛИХИОЗЫ И АНАПЛАЗМОЗЫ ЧЕЛОВЕКА В ПРИРОДНЫХ ОЧАГАХ ТРАНСМИССИВНЫХ ИНФЕКЦИЙ НА ТЕРРИТОРИИ ТЮМЕНСКОЙ ОБЛАСТИ 03.02.11 - паразитология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Тюмень – 2010 Подписано в печать 08.11.2010. Формат 60х841/16. Бумага офсетная. Печать трафаретная. Тираж 100 экз. Заказ 35. Отпечатано в печатном цехе «Ризограф» Тюменского Аграрного Академического Союза 625003, г. Тюмень, ул. Республики, 7 24