Е.В. Домрачева, А.Л. Неверова, А.В. Захарова, Л.В. Дяченко,Н.М

ЗНАЧЕНИЕ СТАНДАРТНОЙ ЦИТОГЕНЕТИКИ В ПОИСКЕ ДОПОЛНИТЕЛЬНЫХ
АНОМАЛИЙ ПРИ ДИАГНОСТИКЕ И МОНИТОРИНГЕ ХРОНИЧЕСКОГО
МИЕЛОЛЕЙКОЗА. ВОПРОС ВЫБОРА МЕТОДА ИССЛЕДОВАНИЙ.
Е.В. Домрачева, зав лаб., д.м.н., проф., А.Л. Неверова, с.н. с., к.б.н.,
А.В. Захарова, в.н.с., к.м.н., Л.В. Дяченко, н.с., Н.М. Тимофеева, врач-цтоген.,
И.В. Клеина, врач-цтоген.
ГНЦ РАМН, Лаборатория кариологии.
В последнее
время
широкое распространение в диагностике и
мониторинге
хронического миелолейкоза (ХМЛ) получили новые методы детекции химерного гена
BCR/ABL и уровня экспрессии его продукта. Эти методы бесспорно имеют ряд
преимуществ. Так, широко используемый метод полимеразной цепной реакции (PCR) имеет
очень высокую чувствительность и позволяет определять уровень экспрессии химерного
белка bcr/abl в крови, не прибегая к стернальной пункции. Метод флуоресцентной in situ
гибридизации (FISH), введенный в поточные исследования в нашей лаборатории, позволяет
определить присутствие химерного гена BCR/ABL в клетках костного мозга. Этот метод
дает возможность получить результат в отсутствие делящихся клеток. Кроме того, он
позволяет обходиться без культивирования и сокращает время анализа с 3-5 до 2 дней. Также
нами введена в практику модификация метода, позволяющая проводить гибридизацию in situ
на мазках костного мозга. Мы используем его, когда нет возможности доставить пунктат
костного мозга в лабораторию за 24 часа из отдаленных регионов страны.
С
развитием
и
распространением
описанных
методов
доля
стандартных
цитогенетических исследований (СЦИ) при ХМЛ в целом уменьшилась. Однако мы
полагаем, что отказываться от проведения СЦИ следует только в случае крайней
необходимости и хотели бы предостеречь цитогенетиков и клиницистов от перехода
преимущественно на PCR и FISH исследования при мониторинге ХМЛ. Результат PCR или
FISH исследования дает врачу ответ только на вопрос о размере опухолевого клона в
костном мозге (или, в случае PCR, скорее об уровне экспрессии гена BCR/ABL). Вопрос о
состоянии всего остального кариотипа остается в тени – а это вопрос крайне важный.
За последние годы в литературе
активно обсуждается
значение дополнительных
хромосомных аберраций при ХМЛ. Показано, что они могут возникать как в Ph-позитивном
клоне, так и в Ph-негативном на фоне терапии ингибиторами тирозинкиназ (ИТК). Размер
клонов с дополнительными аномалиями может существенно варьировать, периодически
снижаясь ниже уровня детекции СЦИ. Выявляемые дополнительные аберрации довольно
1
разнообразны. Наиболее распространены одиночные аберрации, реже встречаются клоны с
множественными хромосомными перестройками.
В кариологической лаборатории ГНЦ РАМН с 2004 по 2008 год наблюдались 41 пациент
с удвоением Ph-хромосомы, 32 пациента с трисомией хромосомы 8, 21 пациент с инверсией
хромосомы 9, 10 пациентов с различными аномалиями хромосомы 7, 9 пациентов с
аномалиями хромосомы 17, 5 пациентов с аномалиями хромосомы 3, а также 36 пациентов со
сложными транслокациями с участием трех и более хромосом.
Наиболее исследована такая дополнительная аберрация как удвоение Ph хромосомы.
Предполагается, что при этом может увеличиваться количество аномальной тирозинкиназы
bcr/abl. Поэтому при ее обнаружении показано повышение дозы Гливека или переход на
терапию ИТК второй линии. По поводу значения других аберраций единого мнения пока
нет, необходимо дальнейшее накопление материала и его подробный анализ. Для этого
важно максимально часто получать результаты мониторинга на фоне терапии ИТК с
помощью СЦИ. Накопленные таким образом данные позволят со временем понять
патогенетическое значение дополнительных хромосомных аберраций, их
влияние на
прогноз заболевания и результат терапии.
2