АЛЛЕЛЬНЫЙ ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНОВ ЦИТОКИНОВ И ЭФФЕКТИНОСТЬ ВАКЦИНАЦИИ ПРОТИВ ГЕПАТИТА В М.А.Риттер, К.П. Вахания, Н.С. Ракитина, А.М. Романенко

АЛЛЕЛЬНЫЙ ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНОВ ЦИТОКИНОВ И ЭФФЕКТИНОСТЬ
ВАКЦИНАЦИИ ПРОТИВ ГЕПАТИТА В
М.А.Риттер, К.П. Вахания, Н.С. Ракитина, А.М. Романенко
Волгоградский государственный медицинский университет, г. Волгоград
Гепатит В — глобально распространенная вирусная инфекция. По оценкам на 2005 год
около двух миллиардов человек подверглись воздействию вируса гепатита В, ежегодно
регистрируется более 350 миллионов случаев хронической инфекции. В общей
сложности, гепатит В вызывает от 500 тысяч до 1,5 миллионов смертей ежегодно [3]. В
России каждый год регистрируется свыше 50 000 новых случаев заболевания и
насчитывается свыше 5 миллионов хронических носителей данного вируса, которые
клинически проявляют себя через 10-15 лет после инфицирования. Группой высокого
профессионального риска распространения вируса гепатита В являются медицинские
работники. По данным ряда отечественных исследователей уровень заболеваемости
медицинского персонала гепатитом В зависит от профиля отделений лечебнопрофилактических учреждений и превышает показатели заболеваемости населения в
1,6-3 раза [4]. Значимость данной проблемы для России многократно подчеркивалась
на коллегиях Минздрава России, Заседаниях Совета безопасности России,
международных и общероссийских научных форумах, страницах научной литературы и
в средствах массовой информации [1]. Вакцинопрофилактика является одним из самых
надежных, действенных и, в то же время, экономически эффективным средством
современной медицины. Интенсивность иммунного ответа при вакцинации
определяется не только иммуногенностью вводимого препарата, способом введения
вакцины, но и иммунной реактивностью организма, обусловленной сочетанием
генетических и онтогенетических факторов. Таким образом, вопрос о влиянии
генетических маркеров на исход вакцинации против гепатита В остается открытым,
определив значимые критерии можно будет прогнозировать индивидуальную реакцию
организма на введение вакцины. При наличии риска развития осложнений или слабом
синтезе защитных антител, скорректировать возможную иммунизацию у данных групп.
Цель работы: исследовать взаимосвязь аллельного полиморфизма промоторных генов
цитокинов с напряженностью поствакцинального иммунитета к вирусу гепатита В у
медицинских работников г.Волгограда.
Материалы и методы. Обследовано 160 сотрудников медицинских учреждений г.
Волгограда, вакцинированных против гепатита В. Медицинские работники, вошедшие
в исследование, были разделены на две группы по уровню защитных антител к HBsAg,
первая группа с эффективным иммунитетом (уровень антител более 10 мМЕ/мл) и
вторая группа с неэффективным иммунитетом (уровень антител ниже 10 мМЕ/мл).
Всем обследуемым проведено генотипирование промоторных областей интерлейкина10 и интерлейкина-6. Все работы по исследованию были проведены согласно
Методическим указаниям МУ 1.3.1888-04 «Организация работы при исследованиях
методом ПЦР материала, инфицированного патогенными биологическими агентами IIIIV групп патогенности» (от 04.03.2004г.) и Санитарным правилам СП 1.2.731-99
«Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности и гельминтами»
(1999г.). Определение полиморфизмов промоторных участков генов осуществляли
методом ПЦР с аллель-специфичными праймерами, синтезированными в НПФ
«Литех». Геномную ДНК выделяли из лейкоцитов цельной крови с помощью реагента
«ДНК-экспресс-кровь» («Литех», Россия). Первым этапом было выделение ДНК из
биопроб, затем проводилась амплификация (аппарат Biosystems), разделение продуктов
амплификации проводили в геле путем электрофореза. После его окончания гель
переносили на стекло УФ-трансиллюминатора с длиной волны 310 нм. Статистическая
обработка данных проведена с использованием пакета прикладных программ
«STATISTICA for Windows 6.0». Данные анализировали с помощью
непараметрических методов, в частности χ2 с поправкой Йетса.
Результаты и их обсуждение:
Распределение аллелей генов, формирующих адекватную реакцию на вакцинацию,
зависит от изучаемой популяции [2], что может быть одной из причин разнообразного
иммунного ответа на введение HBsAg. Поэтому, учитывая этот факт, представлялось
интересным исследовать аллельные варианты генов интерлейкина-10 и интерлейкина6. Полиморфные позиции, изучаемые нами, были выбраны на основе анализа
литературных данных. Интерлейкин-10 относится к супрессорным факторам,
продуцируется Th2-лимфоцитами и В-лимфоцитами, ингибирует клеточный ответ,
подавляет продукцию интерлейкина-2, интерферона-ɣ. Возможность интерлейкина-10
ингибировать функцию Th1 и играть роль в определении класса иммунного ответа,
послужило основой для его изучения. Однако, исследование полиморфизма промотора
гена интерлейкина-10 (С592А) не выявило различий в распределении аллельных
вариантов между пациентами с эффективной и неэффективной вакцинацией против
гепатита В. Участие интерлейкина-6 в активации и дифференцировке Т-клеток,
созревании В-клеток, побудило проверить его возможное влияние на
поствакцинальный иммунитет. Анализ полиморфизма промотора гена интерлейкина-6
(С174G) показал, что в группе с неэффективным иммунитетом наблюдается увеличение
частоты (92,31%) встречаемости генотипа -174CG полиморфного участка гена
интерлейкина-6 по сравнению с группой с эффективным иммунитетом (53,1%), р<0,05.
Выводы:
При анализе распределения полиморфизмов генов интерлейкинов 10 и 6 у медицинских
работников с эффективным и неэффективным поствакцинальным иммунитетом
обнаружено, что генотип -174CG полиморфного участка гена интерлейкина-6 чаще
встречается у пациентов с уровнем антител к HBsAg ниже протективного.
Список литературы:
1. Онищенко Г.Г. О государственных мерах по предупреждению' распространения в
Российской Федерации заболеваемости инфекционными гепатитами.// Эпидемиология
и инфекционные болезни. — 2002.-№3. - С.3-8.
2. Ракитина, Н.С., Полиморфизм G-330T гена IL-2 у реципиентов почки в
Волгоградской области/ Н.С. Ракитина, О.П. Гумилевская, Б.Ю. Гумилевский, У.Б.
Хвесько // Клиническая лабораторная диагностика, 2013.- №9. – С. 106.
3. Таточенко В.К. Иммунопрофилактика / В.К. Таточенко, H.A. Озерецкий: 8-е изд.,
доп: - М.: ИПК Контент-Пресс, 2007. - 176 с.
4. Lavanchy D. Worldwide epidemiology of HBV infection, disease burden, and vaccine
prevention. Journal of Clinical Virology, 2005, p. 34.