На правах рукописи МЕРКУШЕНКОВА ОЛЬГА ВАЛЕРЬЕВНА СПЕКТР ПСИХОТРОПНОГО ДЕЙСТВИЯ НОВЫХ ПРОИЗВОДНЫХ

На правах рукописи
МЕРКУШЕНКОВА ОЛЬГА ВАЛЕРЬЕВНА
СПЕКТР ПСИХОТРОПНОГО ДЕЙСТВИЯ НОВЫХ ПРОИЗВОДНЫХ
ГАММА-АМИНОМАСЛЯНОЙ И ГЛУТАМИНОВОЙ КИСЛОТ,
ИМЕЮЩИХ СХОДНЫЕ АРОМАТИЧЕСКИЕ И
ГЕТЕРОЦИКЛИЧЕСКИЕ ЗАМЕСТИТЕЛИ
14.00.25 фармакология, клиническая фармакология
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени
кандидата медицинских наук
ВОЛГОГРАД 2009
2
Работа выполнена на кафедре фармакологии и биофармации факультета
усовершенствования врачей Волгоградского государственного медицинского
университета
Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор
Тюренков Иван Николаевич
Официальные оппоненты: Заслуженный деятель науки РФ,
доктор медицинских наук, профессор
Воронина Татьяна Александровна
доктор медицинских наук, профессор
Островский Олег Владимирович
Ведущая организация: Ростовский государственный медицинский
университет
Защита состоится «_____»____________2009 г. в __________часов
на заседании Диссертационного совета Д 208.008.02 при Волгоградском
государственном медицинском университете (400131, Россия, г. Волгоград,
пл. Павших борцов, 1).
С диссертацией можно ознакомиться в фундаментальной библиотеке
Волгоградского государственного медицинского университета по адресу:
400131, Россия, г. Волгоград, пл. Павших борцов, 1
Автореферат разослан «_____»_______________2009 г.
Ученый секретарь
д.м.н., проф.
Диссертационного Совета
А.Р. Бабаева
3
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность проблемы
Актуальность проблемы обусловлена тенденцией к нарастанию
частоты разного рода психических нарушений в условиях современного
общества с высоким темпом жизни и обилием стрессовых ситуаций, которые,
как известно, могут провоцировать и усугублять течение психических
расстройств. Область применения фармакологических средств для коррекции
психических функций чрезвычайно широка: помимо собственно психиатрии
препараты с психотропной активностью используются специалистами
различных отраслей медицины, включены в стандарты терапии многих
соматических заболеваний. На российском и зарубежном фармацевтических
рынках данный класс лекарственных средств представлен огромным
количеством препаратов различных производителей. Тем не менее, даже на
современном
уровне
развития
фармакологии
и
фармацевтической
промышленности остается высокой потребность в разработке новых
психотропных средств, поскольку многие из имеющихся препаратов
обладают
недостаточной
эффективностью,
низкой
избирательностью
действия и большим количеством побочных эффектов. Поскольку главной
научной основой для направленного поиска психотропных средств является
представление о том, что эффекты всех препаратов данного класса
реализуется за счет взаимодействия с нейромедиаторными системами
головного мозга, поиск новых психотропных средств в ряду производных
гамма-аминомасляной и глутаминовой кислот можно считать весьма
перспективным, что и послужило основанием к проведению данного
исследования.
Цель исследования сравнительное изучение спектра психотропного
действия новых производных гамма-аминомасляной (ГАМК), глутаминовой
кислот (ГК), имеющих одинаковые заместители по углероду в бета
положении и изучение возможных механизмов действия.
Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи:
4
1. Провести скрининг в ряду новых ароматических и гетероциклических
производных ГАМК и глутаминовой кислоты соединений, обладающих
психотропной активностью.
2. Определить острую токсичность наиболее активных веществ и провести
изучение зависимости их психотропного действия от дозы.
3. Изучить нейропротекторное действие наиболее активных веществ на
различных экспериментальных моделях судорог, острого и хронического
стресса с использованием стандартных психофармакологических тестов,
отражающих функциональное состояние ЦНС.
4. Изучить возможный нейрохимический механизм психотропного действия
наиболее активных веществ с использованием агонистов и антагонистов
основных медиаторных систем.
5. Изучить влияние наиболее активных веществ на обмен моноаминов и
нейроактивных аминокислот в структурах мозга.
Научная новизна исследования:
Впервые
проведено
сравнительное
исследование
спектра
психотропного действия новых производных ГАМК и глутаминовой кислоты
и выявлены вещества с высоким антидепрессивным, анксиолитическим,
ноотропным эффектом, перспективные для дальнейшего доклинического
изучения.
Впервые получены данные о церебропротекторном действии новых
производных глутаминовой кислоты при экспериментальном судорожном и
стрессорном воздействии.
Впервые
определены
возможные
механизмы
нейрохимического
действия нового производного глутаминовой кислоты соединения РГПУ-135,
оказывающего
антидепрессивное,
анксиолитическое,
активирующее
и
неропротекторное действие. Изучено его влияние на обмен моноаминов и
нейроактивных кислот в структурах мозга.
Научно-практическая ценность работы и реализация результатов
исследования.
5
Тема
диссертации
исследовательской
является
работы
составной
кафедры
частью
фармакологии
плана
и
научно-
биофармации
факультета усовершенствования врачей Волгоградского государственного
медицинского университета и утверждена на заседании Ученого совета
(Протокол №6 от 14 ноября 2007 года).
Полученные результаты исследования нейропсихотропной активности новых
производных гамма-аминомасляной и глутаминовой кислот указывают на
перспективность дальнейшего поиска веществ с психотропным действием в
ряду структурных аналогов данных нейроактивных аминокислот, имеющих
ароматические и гетероциклические заместители.
Выделенное
новое
производное
ГК
соединение
РГПУ-135
с
выраженным антидепрессивным, анксиолитическим, нейропротекторным и
активирующим
действим
является
перспекивным
для
дальнейшего
углубленного изучения.
Результаты диссертационного исследования используются в учебном
процессе на кафедре фармакологии и биофармации ФУВ и на кафедре
фармакологии ВолГМУ Полученные данные используются химикамисинтетиками Российского государственного педагогического университета
им. А.М. Герцена для проведения дальнейшего целенаправленного поиска в
ряду новых производных ГАМК и ГК новых веществ с психотропным
действием,
а
фармакологии
также
и
в
научно-исследовательской
биофармации
ФУВ
ВолГМУ
работе
и
кафедры
лаборатории
психофармакологии НИИ фармакологии ВолГМУ.
Положения, выносимые на защиту:
1. Новые структурные аналоги ГАМК и ГК, имеющие одинаковые
заместители в бета-положении существенно отличаются по спектру
психотропного действия.
2. Соединение РГПУ-135 обладает выраженной антидепрессантной
активностью, не уступающей действию мелипрамина и значительно
превосходящей эффекты коаксила и флуоксетина.
6
3.
Соединения
РГПУ-135,
РГПУ-160
и
РГПУ-202
обладают
анксиолитической активностью сопоставимой между собой. РГПУ-135 и
РГПУ-202 при сравнении с препаратами позитивного контроля не уступали
диазепаму и статистически значимо превосходили афобазол.
4. Соединение РГПУ-135 как при однократном, так и при курсовом
лечебно-профилактическом энтеральном введении проявляет выраженную
нейропротекторную
активность
в
условиях
действия
различных
экстремальных факторов: хемоиндуцированных генерализованных судорог,
острого эмоционально-болевого стресса и хронического, вызванного путем
депривации парадоксальной фазы сна.
5. Психотропная активность соединения РГПУ-135 вероятно связана со
стимулирующим действием на дофаминергическую и серотонинергическую
нейропередачу
и,
в
меньшей
мере,
стимулирующим
влиянием
на
центральную адренергическую нейропередачу.
Апробация работы
Материалы диссертации докладывались и обсуждались на следующих
научно-практических конференциях: 62-ой, 65-ой юбилейной и 66-ой
открытых итоговых конференциях студентов и молодых ученых ВолГМУ,
2004, 2007, 2008 гг.; ХII, XIII Региональных конференциях молодых
исследователей
Волгоградской
области,
«Экспериментальные
аспекты
медицины», ноябрь 2007, ноябрь 2008 г, ; Симпозиуме: Результаты
фундаментальных и прикладных исследований для создания новых
лекарственных средств, Москва, 9 -11 июня 2008 г.
Публикации: По материалам диссертации опубликовано 12 работ.
Структура и объем диссертации:
Диссертация изложена на 168 страницах машинописного текста и
включает следующие разделы: введение, обзор литературы, описание
материалов и методов исследования, 4 главы собственных исследований,
обсуждение результатов, научно-практические рекомендации, выводы,
список литературы, содержащий 202 источника, из них 109 отечественных и
7
93 зарубежных. Диссертация иллюстрирована 27 рисунками и содержит 22
таблицы.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Исследование выполнено на 510 крысах-самцах линии Вистар массой
180-220 г и 274 мышах-самцах линии BALB/C массой 20-25 г.
В настоящем исследовании изучена психотропная активность 7 новых
производных нейромедиаторных аминокислот – ГАМК и глутаминовой,
соединений с лабораторными шифрами: РГПУ-135, РГПУ-136, РГПУ-146,
РГПУ-160, РГПУ-202, РГПУ-204 и РГПУ-205, а также фенибут, толибут и
баклофен. Все вещества синтезированы на кафедре органической химии
Российского государственного педагогического университета им. А.Н.
Герцена (Санкт-Петербург, Россия)*.
Скрининг осуществлен с применением доз, составляющих 1/10 от
молекулярной массы (мг/кг): РГПУ-135 - 25,95 мг/кг, РГПУ-136 - 21,8 мг/кг,
РГПУ-146- 29,4 мг/кг, РГПУ-160 - 30,8 мг/кг, РГПУ-202 - 27,35 мг/кг, РГПУ204 – 29,8 мг/кг РГПУ-205 – 31,2 мг/кг. В качестве препаратов позитивного
контроля использовались: фенибут и фенотропил –25 мг/кг (синтезированы
на
кафедре
органической
химии
Российского
государственного
педагогического университета им. А.Н. Герцена (Санкт-Петербург, Россия)),
мелипрамин – 15 мг/кг (Egis Pharmaceuticals, Венгрия), флуоксетин - 20 мг/кг
(ЗАО-Здоровье, Россия), коаксил – 12,5 мг/кг (Лаборатория Сервье,
Франция), афобазол – 10 мг/кг («Мастерфарм», Россия), диазепам – 1 мг/кг
(Simplex pharma Pvt. Ltd.). Исследуемые вещества, препараты сравнения, а
также 2% крахмальная слизь контрольным группам животных вводились
внутрижелудочно за 45 минут до проведения экспериментов.
* - Приносим искреннюю благодарность зав. кафедрой органической химии Российского
государственного педагогического университета им. А.М. Герцена (Санкт-Петербург,
Россия) ЗДН РФ, д.х.н., профессору А.М. Берестовицкой и старшему научному
сотруднику, к.х.н. О.С. Васильевой, предоставивших исследуемые вещества для нашей
работы.
8
Для
изучения
использовались
нейропсихотропной
следующие
активности
психофармакологические
соединений
тесты:
тест
«открытое поле» (ОП) (Хаунина Р.А., Лапин И.П. 1976 г., Воронина Т.А.
1982; Гельман В.Я., Кременевская С.И., 1990); тест «приподнятый
крестообразный лабиринт» (ПКЛ) (Pellow S. et al., 1985); тест «условная
реакция пассивного избегания» (УРПИ) (Буреш Я., Бурешова О., Хьюстон
Д.П.,
1991;
Воронина
экстраполяционного
Т.А.,
избавления»
Островская
(ТЭИ)
Р.У.,
(Бондаренко
2000),
«тест
Н.А.,
1992.),
«вертикальный экран-сетка» (Калуев А.В., 2002; Nagatani T. et al., 1987);
«принудительное плавание с грузом» (Суркова В.В., Тюренков И.Н., 1979;
Воронина Т.А., Островская Р.У., 2000); «методика конфликтной ситуации»
(вариант
Vogel)
(Воронина
Т.А.,
Середенин
С.Б.,
2000);
«модель
пролонгирования снотворного действия барбитуратов» (Воронина Т.А.,
Неробокова Л.Н., 2000); тест термического раздражения хвоста путем
погружения в воду температурой 58оС (Судаков С.К. и др., 1995); тест
раздражения лап электрическим током до вокализации (Гузеватых Л.С.,
Валуйских Д.В., Воронина Т.А., 2005); тест подвешивания мышей за хвост
(ПМХ) (Steru L. et al., 1985) и методика принудительного плавания по
Порсолту (Porsolt R.D. et al., 1977).
Изучение нейропротекторного действия соединений проводилось с
использованием следующих моделей нейропсихопатологии:
- модели хемоиндуцированного эпилептогенеза вызванного введением
пикротоксина (5 мг/кг) и коразола (90 мг/кг), (Воронина Т.А., Неробокова
Т.Н., 2000).
- модели острого эмоционально-болевого стресса, вызываемого путем
подвешивания
животных
за
дорсальную
шейную
кожную
складку
длительностью 24 часа (Островский О.В., Дудченко Г.П., 1985);
- модели хронического стресса, вызванного пятикратной 24-х часовой
депривацией парадоксальной фазы сна. Животные на 24 часа лишались
полноценного сна с перерывом 24 часа, цикл повторяли 5 раз, общая
9
продолжительность стрессирования составила 10 суток. В перерывах между
помещениями животных в стрессовые условия, крысы находились в
индивидуальных клетках со свободным доступом к воде и пище (Воронина
Т.А. и др., 1990; Jouvet et al. 1964).
Стресспротекторное действие соединений оценивалось по влиянию на
психоневрологический статус животных и по «стрессорной триаде» гипертрофии надпочечников, инволюции тимуса и селезенки (в мг/100 гр.
веса животного) и степени изъязвления слизистой желудка (по шкале
Перцова С.С., 1995). Кроме перечисленных тестов был проведен анализ
влияния соединений на резистентность эритроцитов методом кислотного
гемолиза.
- противогипоксическое действие веществ изучалось на моделях острой
генерализованной гипоксии: нормобарической гипоксии с гиперкапнией и
гемической гипоксии, вызванной нитритной интоксикацией (нитрит натрия
250 мг/кг подкожно) (Воронина Т.А., Островская Р.У., 2000);
Нейрофармакологический анализ возможных механизмов действия
соединения РГПУ-135 проведен в соответствии с требованиями "Руководства
по
экспериментальному
фармакологических
(доклиническому)
веществ"
-
изучению
Фармакологический
новых
государственный
комитет, МЗ РФ, Москва, 2005".
Нейрохимический анализ влияния вещества РГПУ-135 на содержание
моноаминов и их метаболитов определялось методом высокоэффективной
жидкостной хроматографии с электрохимической детекцией (ВЭЖХ/ЭД) на
хроматографе LC-304T (BAS, West Lafayette, США) с инжектором Rheodyne
7125 c петлёй на 20 мкл для нанесения образцов (И.И.Мирошниченко, 1988).
Статистическая обработка результатов исследования проводилась с
использованием непараметрического U-критерия Манна-Уитни, рангового
однофакторного
анализа
Крускала-Уоллиса,
критерия
Дана
для
множественных сравнений, двухфакторного дисперсионного анализа с
повторениями,
теста
Тьюки,
критерия
Хи-квадрат,
пробит-анализ
10
выживаемости. Обработка данных производилась с помощью пакетов
программ Microsoft Excel XP, STATISTICA 6.0, BioStat 2008 Professional
5.1.3.1. Статистически значимыми расценивались эффекты при p<0,05.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.
Данные о направленности и выраженности психотропного действия
новых производных ГАМК и ГК в суммированном виде представлены в
таблице 1 и на рисунке 1, они свидетельствуют о различных спектрах
психотропного действия исследуемых веществ.
Таблица 1.
Анализ результатов скринингового изучения нейропсихотропных свойств
новых производных ГАМК и ГК
Показатели
Новые производные
Новые производные
психофармакологических
ГАМК
ГК
тестов
РГПУ- РГПУ- РГПУ- РГПУ- РГПУ- РГПУ- РГПУ136
160
204
205
135
146
202
1
2
3
4
5
6
7
8
Тест «Открытое поле» (ОП)
Двигательная активность + (↓)
+ (↑)
+ (↑)
++ (↑) ++ (↓)
Ориентировочно+ (↓)
++ (↑) + (↓)
++ (↓)
исследовательская
активность
Число выходов в центр
+ (↑)
++ (↑) + (↑)
+ (↓)
++ (↑) + (↑)
+ (↓)
Количество актов
+ (↓)
+ (↓)
+ (↑)
+ (↑)
+ (↑)
+ (↓)
++ (↓)
кратковременного
груминга
Тест «приподнятый крестообразный лабиринт» (ПКЛ)
Время
в
открытых + (↑)
++ (↑) + (↑)
+ (↑)
+ (↑)
++ (↑)
рукавах,с.
Количество выходов в + (↑)
+ (↑)
++ (↑) + (↑)
+ (↑)
открытые рукава
Сумма переходов между ++ (↑)
+ (↑)
+ (↑)
++ (↑) + (↑)
+ (↓)
рукавами
Время в центре ПКЛ
++ (↑)
+ (↓)
+ (↑)
+ (↑)
++ (↓) + (↓)
++ (↓)
Тест «условная реакция пассивного избегания» (УРПИ)
ЛП при воспроизведении + (↑)
+ (↑)
+ (↑)
+ (↓)
+ (↑)
через
24 часа
ЛП при воспроизведении ++ (↑)
+ (↑)
+ (↑)
+ (↑)
++ (↑)
через
7 суток
ЛП при воспроизведении ++ (↑)
+ (↑)
++ (↑)
через
14 суток
11
1
2
3
4
5
6
7
Тест «тест экстраполяционного избавления» (ТЭИ)
Процент снижения
+ (↓)
++ (↑) + (↓)
++ (↑) + (↓)
++ (↑)
времени решения
экстраполяционной
задачи, Δ %.
Тест конфликтной ситуации по Вогель
ЛП первого наказуемого ++ (↓)
++ (↓) + (↓)
+ (↑)
++ (↓) ++ (↑)
взятия воды из поилки
Количество наказуемых
+ (↑)
++ (↑) + (↑)
++ (↑) + (↓)
попыток утолить жажду
Сон, вызванный введением тиопентала натрия
Количество заснувших
+ (↑)
++ (↑) + (↑)
+ (↑)
животных
ЛП наступления сна
++ (↑)
++ (↑) + (↓)
+ (↑)
+ (↓)
++ (↑)
Длительность сна
+ (↑)
+ (↓)
Тест ПМХ
ЛП иммобилизации
+ (↓)
+ (↑)
Длительность
+ (↑)
+ (↑)
++ (↓) + (↓)
иммобилизации
Тест принудительного плавания по Порсольту
ЛП иммобилизации
+ (↑)
++ (↑) ++ (↑)
Длительность
++ (↓) ++ (↓)
иммобилизации
Количество прыжков
++ (↑) + (↑)
Тест термического раздражения хвоста
ЛП отдергивания хвоста ++ (↑)
++ (↑)
(однокр
(однокр
на 180
на 180
мин)
мин)
Тест электроболевого раздражения лап
ЛП вокализации
-
8
++ (↑)
++ (↓)
++ (↑)
+ (↓)
+ (↑)
+ (↑)
+ (↓)
++ (↑)
++ (↓)
++ (↑)
++ (↓)
(однокр
на 120
мин)
++ (↓)
(однокр
на 180
мин)
Тест принудительного плавания с грузом (20% от массы тела)
Продолжительность
+++ (↑) ++ (↓) ++ (↓) ++ (↓)
+ (↑)
плавания
Тест подвешивание на горизонтальную сетку
ЛП первого падения
+ (↑)
+++
+ (↓)
+++ (↓) (↓)
Общее время удержания ++ (↑)
+ (↓)
+ (↑)
+++ (↓) при 3-х кратном
подвешивании
Фармакологическая активность по результатамскрининговых тестов для
выявления психотропной активности.
Психотропные свойства
Ноотр Анкс; АДД
АДД;
Седат.
Актив
Сниж
Анкс
миорел Анкс;
физ раб физ
Актив.
АДД
раб
Ноотр.
Обозначения: + – изменения показателя не имеют статистической значимости
12
++ – изменение показателя статистически значимое, р<0,05
+++ – изменение показателя статистически значимое, р<0,01
- – изменение показателя отсутствуют
(↑) – увеличение показателя
(↓) – уменьшение показателя
Ноотр – ноотропные свойства; Анкс – анксиолитические свойства; Актив –
психостимулирующие свойства; Седат – седативные свойства; Актив физ раб –
стимулирует физическую работоспособность; Сниж физ раб- снижает физическую
работоспособность; Миорел –миорелаксирующее действие; АДД – антидепрессивное
действие
а) фенибут
нейропротекторно
е
антигипоксическое
а) РГПУ-135
седатив ное
4
анксиолитическое
3
2
1
актив ирующее
0
против осудорожно
е
миорелаксирующе
е
антидепрессантно
е
ноотропное
нейропротекторно
е
антигипоксическое
против осудорожно
е
миорелаксирующе
е
б) толибут
нейропротекторно
е
антигипоксическое
анксиолитическое
актив ирующее
антидепрессантно
е
ноотропное
нейропротекторно
е
антигипоксическое
антигипоксическое
против осудорожно
е
миорелаксирующе
е
седатив ное
4
3
2
1
0
анксиолитическое
актив ирующее
антидепрессантно
е
ноотропное
в) РГПУ-146
седатив ное
4
3
2
1
0
ноотропное
против осудорожно
е
миорелаксирующе
е
в) баклофен
нейропротекторно
е
антидепрессантно
е
б) РГПУ-202
седатив ное
4
3
2
1
0
против осудорожно
е
миорелаксирующе
е
седатив ное
4
анксиолитическое
3
2
1
актив ирующее
0
анксиолитическое
актив ирующее
антидепрессантно
е
ноотропное
нейропротекторно
е
седатив ное
4
антигипоксическое
против осудорожн
ое
миорелаксирующе
е
3
2
1
0
анксиолитическое
актив ирующее
антидепрессантно
е
ноотропное
Рисунок 1. Сравнительный спектр психотропного действия производных
ГАМК и глутаминовой кислоты, имеющих фенильный (а), толильный (б) и
парахлорфенильный (в) радикалы в бета положении.
13
Таким образом, из представленных данных наибольший интерес
представляют соединения РГПУ-135 и РГПУ-202, являющиеся новыми
производными
глутаминовой
психоактивирующее
действие
кислоты.
с
Первое
преимущественно
оказывает
локомоторным
компонентом, поскольку статистически значимо увеличивает количество
пересеченных квадратов в тесте ОП и количество переходов между рукавами
в тесте ПКЛ. Соединение РГПУ-135 уменьшало продолжительность
иммобилизации и увеличивало количество прыжков у животных в тесте
ТЭИ, статистически значимо снижало латентный период иммобилизации в
тесте ПМХ и тесте неизбегаемого принудительного плавания по Порсольту.
Помимо этого в последнем тесте указанное вещество статистически значимо
уменьшало
длительность
иммобилизации
и
увеличивало
количество
прыжков и продолжительность активного плавания, что можно трактовать,
как
антидепрессивное
действие.
Указанное
вещество
обладает
анксиолитическими свойствами, поскольку достоверно снижало латентный
период первого наказуемого взятия воды из поилки и повышало количество
наказуемых попыток утолить жажду в тесте конфликтной ситуации по
Вогель и увеличивало количество выходов в открытые рукава ПКЛ и
количество заходов в центр ОП.
Второе
соединение
РГПУ-202
обладает
анксиоседативными
свойствами, поскольку статистически значимо снижало двигательную и
ориентировочно-исследовательскую активность, а также
число
актов
кратковременного груминга у крыс в тесте ОП, при этом достоверно
увеличивало продолжительность пребывания животных в открытых рукавах
ПКЛ, снижало латентный период первого наказуемого взятия воды из поилки
и повышало количество наказуемых попыток утолить жажду в тесте
конфликтной ситуации по Вогель. Кроме того, указанное соединение
проявляет ноотропные свойства, что выражалось в статистически значимом
увеличении латентного периода первого захода в тёмный отсек и
14
уменьшении количества животных в группе, зашедших в него при
воспроизведении навыка на 7 и 14 сутки после обучения в тесте УРПИ, а
также проявляет антидепрессивные свойства, так как статистически значимо
уменьшало продолжительность иммобилизации у животных в тесте ТЭИ,
увеличивало латентный период иммобилизации, количество прыжков и
снижало длительность иммобилизации животных в тесте принудительного
плавания по Порсольту.
Изучение острой токсичности.
При энтеральном пути введения соединений РГПУ-135 и РГПУ-202 не
выявлено случаев острой (суточной) и отдаленной (в течение 7 дней)
летальности в дозах до 3000 мг/кг включительно. Дальнейшее увеличение
испытуемой
дозы
не
представлялось
возможным,
из-за
плохой
растворимости веществ в воде и согласно существующим нормативным
требованиям по ограничению объема жидкости, вводимого в желудок.
ЛД50 веществ РГПУ-135 и РГПУ-202 при внутрибрюшинном введении
составил 802,4892,64 и 760 81 мг/кг соответственно. Разница ЛД50 при
двух путях введения, вероятно, обусловлена медленным или неполным
всасыванием веществ при энтеральном введении.
По результатам проведенных исследований можно заключить, что
вещества РГПУ-135 и РГПУ-202 относятся к классу малотоксичных
(Саноцкий И.В., Уланова И.П.,1975).
Изучение зависимости доза-эффект соединения РГПУ-135 проводилось
в дозах 13, 26, 52 и 80 мг/кг, а вещества РГПУ-202 в дозах 13,27,54 и 75 мг/кг
с использованием стандартных психофармакологических тестов: ОП, ПКЛ,
тест конфликтной ситуации в модификации Вогель и тест принудительного
плавания по Порсольту, в которых указанные вещества проявили наиболее
выраженную активность.
У соединения РГПУ-135 во всех дозах отмечалось однонаправленное
действие (рис. 2, 3, 4, 5), но с различной степенью выраженности
(психостимулирующее, анксиолитическое и антидепрессивное), при этом в
15
низкой дозе (13 мг/кг) преобладало активирующее и антидепрессивное
действие, в средних (26 и 52 мг/кг) психоактивирующий эффект становился
умеренным,
антидепрессивное
анксиолитические
свойства,
действие
сохранялось,
выраженность
последних
добавлялись
2-х
эффектов
уменьшалась по мере дальнейшего увеличения дозы. В высокой дозе
оставался лишь психоактивирующий эффект.
Таким образом, изучение зависимости доза-эффект для вещества
РГПУ-135 показало, что наиболее перспективной для дальнейшего изучения
является доза 26 мг/кг, в которой вещество обладает наиболее оригинальным
спектром
фармакологической
активности:
сочетание
выраженного
антидепрессивного действия, анксиолитической активности и умеренного
активирующего эффекта.
80
60
40
20
0
-20
-40
-60
*
*
*
*
13 (13)
26 (27)
*
*
52 (54)
80 (75)
*
б) Ориентировочноисследовательская активность.
% по отношению
к контролю
% по отношению
к контролю
а) Двигательная активность
дозы (мг/кг)
% по отношению
к контролю
*
150
100
50
0
13 (13) 26 (27) 52 (54) 80 (75)
-100
дозы (мг/кг)
РГПУ-135
*
0
-50
13 (13)
26 (27)
*
-100
РГПУ-135
в) Количество актов
кратковременного груминга
-50
*
*
*
50
РГПУ-202
200
*
52 (54)
80 (75)
*
дозы (мг/кг)
РГПУ-202
% по отношению
к контролю
РГПУ-135
100
РГПУ-202
г) Количество выходов в
центральную зону
250
200
*
150
100
50
0
-50
-100
13 (13) 26 (27) 52 (54) 80 (75)
дозы (мг/кг)
РГПУ-135
РГПУ-202
Рисунок 2. Влияние РГПУ-135 и РГПУ-202 в различных дозах на спонтанное
поведение животных в тесте «открытое поле».
Обозначения:* - p<0,05 – достоверность различий по сравнению с контрольной группой
животных (ранговый однофакторный анализ Крускала-Уоллиса, критерий Дана для
множественных сравнений).
а) число пересеченных квадратов
16
б) ОИА – сумма стоек и заглядываний в отверстия
В скобках указаны дозы для РГПУ-202
а) Время пребывания животных
в открытых рукавах ПКЛ.
*
50
*
% по отношению к
контролю
% по отношению к
контролю
60
*
40
30
20
10
0
-10
13 (13)
26 (27)
52 (54)
б) Количество выходов в открытые
рукава ПКЛ.
100
*
80
*
60
40
20
0
13 (13)
80 (75)
дозы (мг/кг)
РГПУ-135
РГПУ-135
РГПУ-202
40
*
*
*
20
0
-20
13 (13) 26 (27) 52 (54) 80 (75)
дозы (мг/кг)
РГПУ-135
80 (75)
РГПУ-202
г) Время пребывания
животных в центре ПКЛ.
% по отношению к
контролю
% по отношению к
контролю
в) Сумма переходов между
рукавами
60
26 (27)
52 (54)
дозы (мг/кг)
20
0
-20
-40
13 (13)
26 (27)
*
52 (54)
80 (75)
*
*
-60
-80
*
*
дозы (мг/кг)
РГПУ-135
РГПУ-202
РГПУ-202
Рис.3. Влияние РГПУ-135 и РГПУ-202 в различных дозах на эмоциогенное поведение
животных в тесте «приподнятого крестообразного лабиринта».
Обозначения: как на рис. 2.
60
40
20
0
-20
-40
-60
-80
б) Количество наказуемых
взятий воды из поилки
*
*
13 (13) 26 (27) 52 (54) 80 (75)
*
*
дозы (мг/кг)
РГПУ-135
% по отношению к
контролю
% по отношению к
контролю
а) ЛП наказуемого взятия воды
из поилки
150
100
*
*
*
*
50
0
-50
-5
13 (13) 26 (27) 52 (54) 80 (75)
дозы (мг/кг)
РГПУ-202
РГПУ-135
РГПУ-202
Рис.4 Влияние РГПУ-135 и РГПУ-202 в различных дозах на психоэмоциональный
статус животных в тесте «конфликтной ситуации по Vogel».
Обозначения: как на рис.1
б) Продолжительность
иммобилизации
а) Латентный период
иммобилизации
200
150
100
*
*
*
*
*
*
*
50
0
13 (13) 26 (27) 52 (54) 80 (75)
дозы (мг/кг)
РГПУ-135
% по отношению к
контролю
% по отношению к
контролю
17
20
0
*
*
*
*
13 (13)
0
-50
13 (13)
-100
*
*
26 (27) 52 (54)
дозы (мг/кг)
РГПУ-135
*
*
26 (27)
*
52 (54)
80 (75)
*
*
*
дозы (мг/кг)
РГПУ-135
% по отношению к
контролю
% по отношению
к контролю
60
40
50
РГПУ-202
в) Количество прыжков
100
80
*
100
80 (75)
РГПУ-202
г) продолжительность активного
плавания
150
100
50
*
*
*
*
*
*
*
0
13 (13)
РГПУ-202
26 (27) 52 (54)
дозы (мг/кг)
РГПУ-135
80 (75)
РГПУ-202
Рис.5. Влияние РГПУ-135 и РГПУ-202 в различных дозах на выраженность
поведенческой депрессии у животных в тесте «неизбегаемого, принудительного
плавания по Порсольту».
Обозначения: как на рис.2
У соединения РГПУ-202 (рис. 2, 3, 4, 5) средних дозах (27 и 54 мг/кг)
отмечалось анксиоседативное действие, а в высокой дозе (75 мг/кг) к
анксиолитическому
добавлялось.
Во
всех
дозах
отмечались
антидепрессивные свойства.
Таким образом, у производного ГК с фенильным заместителем (РГПУ135) преобладало антидепрессивное и психостимулирующее действие, а у
производного с толильным радикалом (РГПУ-202) - анксиолитическое и
антидепрессивное.
Оба вещества оказывали наиболее выраженное психотропное действие
в дозе 1/30 от ЛД50.
Сравнительное изучение психотропного действия соединений
РГПУ-135, РГПУ-202 и препаратов позитивного контроля.
При 14-дневном введении вещества РГПУ-135, РГПУ-202 и препаратов
позитивного контроля, у первого соединения отмечалось выраженное
18
антидепрессивное действие, не уступающее мелипрамину, и значительно
превосходящее эффекты коаксила и флуоксетина; по анксиолитической
активности оно превосходило коаксил и афобазол, а по активирующему
**
**
**
а)
**
**
**
*
тр
РГ оль
П
У
РГ 135
П
У
20
ко 2
фл акс
уо ил
к
ме сет
л и ин
пр
ам
а ф ин
об
аз
ди о л
аз
еп
ам
*
Количество подходов
*
4
3,5
3
2,5
2
1,5
1
0,5
0
ко
н
**
тр
РГ оль
П
У
РГ 135
П
У
2
ко 02
фл акс
уо ил
к
ме се
ли тин
пр
ам
а ф ин
об
а
ди зол
аз
еп
ам
140
120
100
80
60
40
20
0
ко
н
Латентный период,с.
действию было сопоставимо с мелипрамином (рис. 6,7)
б)
Рис. 6. Влияние курсового введения новых производных ГК и препаратов
позитивного контроля на на эмоциогенное поведение животных в тесте
конфликтной ситуации по Vogel
Обозначения:* - p<0,05, ** - p<0,01 – достоверность различий по сравнению с
контрольной группой животных (ранговый однофакторный анализ Крускала-Уоллиса,
критерий Дана для множественных сравнений, непараметрический U- критерий МанаУитни).
20
**
**
*
*
15
10
5
0
тр
РГ ол
П ь
У
РГ 13
П 5
У
2
ко 02
а
фл кс
уо ил
ме ксе
ли ти
пр н
ам
а ф ин
об
а
ди зол
аз
еп
ам
в)
**
25
ко
н
Количество прыжков
30
г)
*
**
**
тр
РГ ол
П ь
У
РГ 13
П 5
У
2
ко 02
фл ак
уо сил
ме ксе
ли ти
пр н
ам
а ф ин
об
а
ди зол
аз
еп
ам
б)
**
180
160
140
120
100
80
60
40
20
0
**
*
*
**
*
т
РГ рол
П ь
У
РГ 13
П 5
У
ко 202
фл ак
уо си
ме кс л
ли ети
пр н
а
аф мин
об
ди азо
аз л
еп
ам
а)
*
ко
н
*
ко
н
*
тр
РГ оль
П
У
РГ 13
П 5
У
2
ко 02
фл акс
уо ил
ме ксе
ли тин
пр
ам
а ф ин
об
а
ди зол
аз
еп
ам
*
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
Продолжительность
иммобилизации
**
Продолжительность
активного плавания
**
ко
н
ЛП иммобилизации
70
60
50
40
30
20
10
0
Рис.7. Влияние курсового введения новых производных ГК и препаратов
позитивного контроля на выраженность поведенческой депрессии у животных в
тесте неизбегаемого принудительного плавания по Порсольту.
Обозначения: как на рис.6
19
Второе вещество - РГПУ-202 обладало выраженной анксиолитической
активностью, которая сопоставима с активностью диазепама и превосходит
активность афобазола; оказывало седативное действие, менее выраженное,
чем
у
диазепама,
а
также
проявляло
антидепрессивные
свойства,
сопоставимые по выраженности с аналогичным эффектом коаксила и
флуоксетина. (рис 6, 7).
Нейропротекция является важной составляющей фармакологического
действия
многих
психотропных
препаратов.
Нами
изучено
нейропротекторное действие новых производных глутаминовой кислот на
модели хемоиндуцированного судорожного повреждения мозга и при остром
и хроническом стрессорном воздействии.
Не оказывая противосудорожного действия, соединение РГПУ-135
выражено
предотвращало
поведения
и мнестических функций у животных, что проявлялось в
статистически
значимом
постсудорожные
увеличении
изменения
двигательной
спонтанного
активности
и
ориентировочно-исследовательской активности у животных, подвергавшихся
генерализованным судорогам и снижение количества животных с амнезией
рефлекса пассивного избегания (УРПИ). РГПУ-202 не оказывал достоверного
влияния на показатели поведения животных в тестах ОП и УРПИ. Таким
образом, представленные данные позволяют считать, что соединение РГПУ135 проявляет нейропротекторное действие при судорожном повреждении
мозга (табл.2).
Таблица 2.
Влияние исследуемых соединений на постсудорожные изменения поведения и
мнестических функций.
ДА в ОП
ОИА в ОП
амнезия в УРПИ
контроль-интакт
41,1±4,00
10,1±0,93
0/8 (0%)
контроль-судороги
17,1±1,35#
3,2±0,52#
5/7 (71%)#
РГПУ-135
26,2±2,26*
6,7±0,61*
1/10 (10%)*
РГПУ-202
19,8±1,47
3,6±0,37
4/8 (50%)
Обозначения: ДА в ОП – двигательная активность в тесте «открытое поле»
ОИА в ОП – ориентировочно-исследовательская активность в тесте «открытое поле»
амнезия в УРПИ – количество животных, посетивших темный отсек в тесте УРПИ
# - p<0,05 – достоверность различий по сравнению с группой контроль-интакт
(ранговый однофакторный анализ Крускала-Уоллиса, критерий Дана для множественных
сравнений, непараметрический U- критерий Мана-Уитни).
* - p<0,05 – достоверность различий по сравнению с группой контроль-судороги (то же)
20
При моделировании острого и хронического стресса соединение РГПУ-135
оказывает выраженное нейропротективное действие сопоставимое по
выраженности с фенибутом и несколько уступающее фенотропилу, которое
проявлялось
в
уменьшении
психоневрологических
и
выраженности
морфосоматических
постстрессорных
нарушений:
улучшении
когнитивных функций в тестах УРПИ и ТЭИ; увеличении скорости
ориентировочных реакций и устранении тревожности в ПКЛ; препятствии
инволюции лимфоидных органов – тимуса и селезенки в сравнении с
животными контрольной группы. Помимо перечисленного РГПУ-135
способствовало стабилизации
мембран эритроцитов в условиях стресс-
обусловленной активации ПОЛ, что может являться одним из механизмов
его
нейропротективного действия в условиях острого эмоционально-
болевого стресса (табл.3).
Таблица 3.
Влияние соединений на когнитивные и мнестические функции стрессированных
животных в тестах УРПИ и ТЭИ.
группы
Воспроизведение УРПИ
Воспроизведение ТЭИ
ЛПз
Число животных с
ЛПп
Число животных, не
(М±m)
амнезией
(М±m)
решивших задачу
n/N
%
n/N
%
контрольинтакт
контрольстресс
РГПУ-135
180
17±
0/8
0
1,13
136,37±
6/8
75
84,12±
2/8
25
17,96#
24,76#
154±
4/8
50 *
35,5*±
0/8
0
9,42
3,33
147,87±
5/8
62,5
56,62±
1/8
12,5
РГПУ-202
12,04
21,02
160,12±
4/8
50 *
31,12±
0/8
0
фенибут
10,95
2,65*
175±
3/8
37,5 *
22,37±
0/8
0
фенотропил 3,61*
2,41*
Обозначения: % - % животных посетивших темный отсек УРПИ, не решивших
экстраполяционную задачу.
* - p<0,05 – достоверность различий по сравнению с контрольной группой животных
(ранговый однофакторный анализ Крускала-Уоллиса, критерий Дана для множественных
сравнений, критерий Хи-квадрат).
Соединение
влиянию
острого
исследовательскую
0/8
РГПУ-202
стресса
0
противодействовало
растормаживающему
на
и
активность,
двигательную
гипертрофии
ориентировочно-
надпочечников
при
21
хроническом стрессе, на остальные
стрессиндуцированные нарушения
показателей
и
психоневрологического
морфосоматического
статуса
соединение не влияло. По полученным данным можно сделать заключение,
что РГПУ-202 осуществляет пассивное нейропротекторное действие только в
условиях острого стресса.
На модели гемической гипоксии вещество РГПУ-135 проявляло
умеренные противогипоксические свойства.
Исходя из изложенного нами для дальнейшего углубленного изучения
было выбрано соединение РГПУ-135, с которым был выполнен анализ
возможных
нейрохимических
механизмов
психотропного
действия
с
использованием нейрофармакологических и нейрохимических методов.
Данное вещество, вероятно, оказывает стимулирующее действие на
дофаминергическую
систему,
поскольку
проявляло
синергическое
взаимодействие с апоморфином (агонистом дофаминовых рецепторов),
снижая латентный период (ЛП) стереотипных движений, увеличивая
интенсивность стереотипии и достоверно снижая выраженность каталепсии,
вызванной
галоперидолом
Стимулирующее
проявлялось
в
действие
(блокатором
на
достоверном
дофаминовых
серотонинергическую
увеличении
рецепторов).
нейропередачу,
интенсивности
гиперкинеза,
вызванного введением 5-окситриптофана (предшественником серотонина).
Совокупность
стимулирующего
серотонинергическую
действия
нейропередачу
и
на
дофаминергическую
стимулирует
и
центральную
адренергическую нейропередачу, что проявлялось в статистически значимом
усилении гипотермического эффекта клофелина (агониста центральных
пресинаптических α-адренорецепторов).
Выявлено отчетливое влияние РГПУ-135 на обмен дофамина во
фронтальной коре и гиппокампе головного мозга крыс, т.е. в структурах,
задействованных в формировании эмоционального поведения. Кроме того,
данное вещество статистически значимо изменяет обмен дофамина, главным
образом в стриатуме (табл. 4, 5).
Гиппока
мп
Стриатум
Фронтал
ьная кора
22
Таблица 4.
Эффекты соединений РГПУ-135 на содержание моноаминов и их метаболитов в структурах мозга крыс (% к контролю)
НА
ДА
ДОФУК
ГВК
5-ОТ
5-ОИУК ДОФУК/ДА ГВК / ДА 5- ОИУК /
5-ОТ
контроль
100,0 + 7,0 100,0 + 9,3 100,0 + 6,0 100,0 + 19,1 100,0 + 3,6 100,0 + 3,8 100,0 + 5,6 100,0 + 13,9 100,0 + 5,7
РГПУ-135
94,9 + 7,6
контроль
100,0 + 14,7
РГПУ-135
115,1 + 10,7 126,3 + 7,9* 107,4 + 13,2
92,7 + 5,9
106,6 + 4,7
110,5 + 8,5
101,4 + 15,4 117,1 + 9,3
100,0 + 8,4
100,0 + 10,6 100,0 + 10,7 100,0 + 3,6 100,0 + 3,3
100,0 + 3,0
100,0 + 7,2
79,1 + 12,1
107,5 + 9,8
124,4 + 10,9 143,9 + 15,8 103,0 + 5,3 109,8 + 5,7 117,2 + 2,1** 133,3 + 9,2* 106,8 + 6,0
контроль
100,0 + 6,3
100,0 + 13,7 100,0 + 16,4 100,0 + 25,0 100,0 + 3,1 100,0 + 5,5 100,0 + 16,9 100,0 + 29,1 100,0 + 6,2
РГПУ-135
87,5 + 7,1
123,5 + 9,8
126,9 + 32,6 219,8 + 25,2* 87,8 + 5,7
93,0 + 5,6
91,9 + 23,4
100,0 + 5,4
179,8 + 38,0 106,6 + 6,3
Таблица 5.
Влияние соединения РГПУ-135 на содержание нейротрансмиттерных аминокислот во фронтальной коре крыс (% к контролю)
контроль
Аsp
100,0 + 2,336
Glu
100,0 + 13,882
Фронтальная
РГПУ-135
кора
94,213 + 4,657
113,463 + 5,809 106,442 + 2,298 102,757 + 4,232
Препарат
Стриатум
Гиппокамп
контроль
100,0 + 3,773
РГПУ-135
97,157 + 4,961
контроль
100,0 + 2,081
РГПУ-135
91,227 + 7,718
100,0 + 2,357
Gly
100,0 + 4,005
100,0 + 3,6
Tau
100,0 + 2,228
100,0 + 1,122
103,413 + 5,034 110,069 + 5,448 112,119 + 5,885
100,0 + 1,822
100,0 + 1,992
100,0 + 2,225
GABA
100,0 + 2,713
96,756 + 4,241
100,0 + 4,646
99,52 + 5,698
100,0 + 2,6
100,079 + 6,733 107,762 + 8,351 107,262 + 8,979 100,793 + 5,762
Обозначения: НАнорадреналин, ДАдофамин, ДОФУК-3,4диоксифенилуксусной
кислоты, ГВКгомованилиновая
кислота,5-ОИУК-5оксииндолуксусная
кислота.
Аsp-аспартат, Gluглутамат, Gly-глицин,
Tau-таурин, GABA-ГАМК
23
ВЫВОДЫ
1. Новые производные ГАМК и ГК, имеющие в бета-положении
ароматические и гетероциклические заместители имеют различный спектр
психотропного действия: антидепрессивное (соединения РГПУ-135, РГПУ146, РГПУ-202), анксиолитическое (соединения РГПУ-135, РГПУ-160 и
РГПУ-202), активирующее (соединение РГПУ-135), седативное (соединение
РГПУ-202), ноотропное (РГПУ-160, РГПУ-202) действие, а также повышают
физическую работоспособность (РГПУ-136) у животных.
2. Соединения РГПУ-135 и, в меньшей мере, РГПУ-202 и РГПУ-146
оказывают выраженное антидепрессивное действие. Соединение РГПУ-135
статистически значимо превосходит по активности коаксил и флуоксетин и
не
уступает
мелипрамину.
Соединение
РГПУ-202
проявляет
антидепрессивные свойства, сопоставимые по выраженности с аналогичным
эффектом коаксила и флуоксетина, но уступает мелипрамину и соединению
РГПУ-135.
3.
Соединения
РГПУ-202,
РГПУ-135
и
РГПУ-160
оказывают
анксиолитическое действие, не уступающее по выраженности действия
диазепаму и превосходящее эффект афобазола.
4. В условиях острого эмоционально-болевого стресса и хронического,
вызванного
путем
депривации
парадоксальной
фазы
сна,
а
также
генерализованного судорожного воздействия, соединение РГПУ-135 как при
однократном
профилактическом,
профилактическом
нейропротекторную
пероральном
так
и
введении
активность,
при
курсовом
проявляет
уменьшая
лечебно-
выраженную
выраженность
психоневрологических нарушений. По выраженности нейропротекторного
эффекта соединение РГПУ-135 сопоставим с препаратом сравнения
фенибутом и несколько уступает фенотропилу.
5. Новое производное глутаминовой кислоты с лабораторным шифром
РГПУ-135 по данным нейрохимического и нейрофармакологического
анализа
оказывает
стимулирующее
влияние
на
дофамин-
и
24
серотонинергическую нейропередачу, что вероятно объясняет наличие у него
антидепрессантной
и
анксиолитической
активности;
усиливает
адренергическую нейротрансмиссию, что может объяснять наличие у него
активирующего эффекта.
Соединение
6.
РГПУ-135,
оказывающее
антидепрессивное,
анксиолитическое, психоактивирующее и нейропротекторное действие
относится
к
классу
малотоксичных
веществ,
т.е.
имеет
большую
терапевтическую широту и является перспективным для дальнейшего
углубленного доклинического изучения.
НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
1. Полученные данные указывают на перспективность дальнейшей
разработки соединения РГПУ-135 в качестве антидепрессанта с выраженной
анксиолитической
и
нейропротекторной
активностью,
а
также
активирующим действием.
2. Полученные данные могут являться полезными для химиков,
осуществляющих целенаправленный синтез веществ с определенным
спектром психотропной и нейротропной активности.
Список опубликованных работ по теме диссертации:
1. Епишина В.В., Багметов М.Н., Бородкина Л.Е., Воронков А.В., Воловик
О.В. Изучение влияния новых производных ГАМК на когнитивные функции
и двигательную активность животных в условиях острого стресса. //
Актуальные проблемы эксперим. и клин. медицины: материалы 62-ой
открытой итоговой конференции студентов и молодых ученых / ВолГМУ Волгоград, 2004. – С. 97-98.
2. Меркушенкова О.В., Епишина В.В. Экспериментальное изучение
психотропных свойств новых производных глутаминовой кислоты –
соединений РГПУ-135 и РГПУ-202 // Актуальные проблемы эксперим. и
клин.
медицины:
материалы
65-ой
юбилейной
открытой
научно-
практической конференции молодых ученых и студентов с международным
участием / ВолГМУ. - Волгоград, 2007. - С. 150-151.
25
3. Епишина В.В., Меркушенкова О.В. Сравнительное экспериментальное
изучение психотропных свойств новых производных глютаминовой кислоты
– соединений РГПУ-135 и РГПУ-202 // Бюллетень Волгоградского Научного
Центра РАМН и Администрации Волгоградской области – Волгоград, 2007. №2. – С.11-13.
4. Меркушенкова О.В., Епишина В.В., Тюренков И.Н., Остроглядов Е.С.
Изучение влияния новых производных глутаминовой кислоты на сон у
животных, вызванный введением тиопентала натрия. // Матер. науч. межд.
конф. «Фундаментальные и прикладные исследования в медицине», Китай
(Пекин). – / Фундаментальные исследования. - 2007. - №12. – С.523-524.
5. Меркушенкова О.В., Епишина В.В., Тюренков И.Н. Изучение влияния
нового
гетероциклического
производного
ГАМК
на
физическую
работоспособность, мышечный тонус и координацию движений у животных.
// Матер. науч. межд. конф. «Фундаментальные и прикладные проблемы
медицины и биологии», Объединенные Арабские Эмираты (Дубаи). – /
Фундаментальные исследования. - 2007. - №12 (часть 2). – С.290-291.
6. Меркушенкова О.В., Епишина В.В.. Изучение ноотропной активности
нового производного глутаминовой кислоты. // ХII Регион. конф. молодых
исследователей Волгоградской области, направление «Актуальные проблемы
экспериментальной
медицины»:
Тезисы
докладов
/
Волгоградский
государственный медицинский университет. Изд-во ВолГМУ: Волгоград,
2008. – С. 26-27.
7. Меркушенкова О.В., Епишина В.В. Экспериментальное сравнение
анксиолитической активности нового производного ГАМК соединения
РГПУ-160 и диазепама. // Материалы межрегиональной научно-практической
конф. студентов и молодых ученых с международным участием «Молодежь
и наука: итоги и перспективы»– Изд-во СГМУ. – Саратов, 2007. – С.97-98.
8. Тюренков И.Н., Меркушенкова О.В., Епишина В.В., Берестовицкая
В.М., Васильева О.С. Анксиолитические свойства нового производного
глутаминовой кислоты // Разработка, исследование и маркетинг новой
26
фармацевтической продукции: сб. науч. трудов. – Пятигорск, 2008. – Вып.63.
С.506-508.
9. Меркушенкова О.В., Епишина В.В., Тюренков И.Н. Изучение
анксиолитических свойств нового соединения РГПУ-206 // Человек и
лекарство: тезисы докладов XV Российского нац. конгресса, - Москва, 2008.
– С.666-667.
10. Меркушенкова О.В., Епишина В.В. Влияние нового производного
глутаминовой кислоты на эмоциональный статус животных. // Актуальные
проблемы эксперим. и клин. медицины: материалы 66-ой открытой научнопрактической конференции молодых ученых и студентов с международным
участием /Изд-во ВолГМУ. - Волгоград, 2008. - С. 159-160.
11. Тюренков И.Н., Епишина В.В., Багметов М.Н., Меркушенкова О.В.,
Берестовицкая В.М., Васильева О.С. Изучение фармакологических свойств
нового вещества с антидепрессантным и психостимулирующим действием //
Результаты фундаментальных и прикладных исследований для создания
новых лекарственных средств. Материалы симпозиума. Москва, 9-11 июня
2008 г. – М.: Фирма «Слово», 2008. – С.210-211
12.
Тюренков
И.Н.,
Психофармакологические
Меркушенкова
свойства
новых
О.В.,
Багметова
производных
ГАМК
В.В.
с
гетероциклическим заместителем в β-положении // Вестник ВолГМУ - 2008,
№4, с.83-86.