НИЖЕГОРОДСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ МЕДИЦИНСКАЯ АКАДЕМИЯ

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования
НИЖЕГОРОДСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ МЕДИЦИНСКАЯ АКАДЕМИЯ
Российского федерального агентства здравоохранения и социального развития
Фармацевтический факультет
__________________________
Кафедра фармацевтической химии и фармакогнозии
Стандартизация
лекарственных средств
Учебно–методическое пособие для студентов 5 курса
фармацевтического факультета,
Нижний Новгород
2006
УДК 615.1
Стандартизация лекарственных средств. Учебно-методическое пособие
для студентов 5 курса фармацевтического факультета. – Нижний Новгород: Изд-во Нижегородской государственной медицинской академии,
2006.
Учебно–методическое пособие составлено для студентов 5 курса фармацевтического факультета в соответствии с программой по фармацевтической химии (Москва, 2002 г.). В пособии рассмотрены общие положения
статистической обработки данных при количественном определении лекарственных средств химическими и физико–химическими методами, а
также представлены образцы написания пояснительных записок к ФС.
Рекомендовано к изданию Центральным методическим советом Нижегородской государственной медицинской академии. Протокол № 3 от 28
ноября 2005 года
Составители: проф. Н.Б. Мельникова, О.Е. Зимнякова, В.М. Пожидаев,
Т.В. Саликова.
Рецензент: сотрудник ООО «Фармстандарт – Фитофарм НН» Пожидаева
К.А.
© Н.Б. Мельникова,
О.Е. Зимнякова,
В.М. Пожидаев,
Т.В. Саликова, 2006
2
3
ВВЕДЕНИЕ
Каждый результат анализа по тем или иным причинам имеет
погрешность определения. Исследователь всегда получает лишь
приближенное значение определяемой величины. Поэтому завершающей стадией количественного анализа химического состава вещества любым методом является статистическая обработка результатов измерений.
Метрологические характеристики.
1. n - количество опытов (n >3), (или объем выборки, или количество измерений)
2. f - число степеней свободы: f=n - l
3. µ - истинное значение измеряемой величины (по ГФ X или
ФС)
4. Р - доверительная вероятность (надежность) - доля случаев, в
которых среднее (арифметическое) при данном числе определений будет лежать в определенных пределах,
5. х - результат измерения (опыта)
6. x - среднее арифметическое из результатов, полученных при
всех измерениях
x
x1  x2  x3 ..  xn
n
(1)
Резковыпадающие значения (промахи) сильно влияют на величину среднего. Например, в ряду из десяти значений: 10,10;
10,20; 10,40; 10,46; 10,50; 10,54; 10,60; 10,80; 10,90; 12,80 среднее значение, равняющееся 10,73 больше любого из трех близ4
корасполагающихся в середине ряда значений 10,46; 10,50;
10,54. Очевидно, что оно является мене правдоподобной оценкой «центрального значения» равного 10,50. Причина состоит в
том, что в данном случае значение 12,80 является промахом и
желательно его в расчет не принимать.
7. S2 - выборочная дисперсия - это рассеяние результатов относительно среднего значения
( x1  x ) 2  ( x2  x ) 2  ( x3  x ) 2 ..( xn  x )
S 
n  1( f )
2
2
(2)
8. S - средняя квадратичная ошибка отдельного определения (или
стандартное отклонение, или стандартное выборочное отклонение)
S  S2
(3)
  ( xi  x ) 2
S   i

n 1







1
2
(4)
S (стандартное отклонение) - характеризует воспроизводимость
метода. Чем меньше S, тем воспроизводимей метод.
9. S x - средняя квадратичная ошибка среднего арифметического
(или стандартное отклонение среднего результата)
Sx 
S2
S

n
n
(5)
10. ∆ x - доверительный интервал среднего значения (или точность прямого измерения)
5
∆ x = t(P,f)·S x ,
(6)
где (p, f)- коэффициент нормированных отклонений (критерий
Стьюдента) при Р = 95% и f = n -1 (число степеней свободы).
Находится по специальным таблицам (ГФ XI, ч. 1, с. 249).
Числовые значения критерия Стьюдента
f
1
2*
3
4
5
6
7
Критерий Стьюдента. t(P,f)
90%
95%
99%
6.31
12.70
63.70
2.92
4.30
9.92
2.35
3.18
5.84
2.13
2.78
4.60
2.01
2.57
4.03
1.94
2.45
3.71
1.89
2.36
3.50
Обычно для расчетов доверительного интервала пользуются
значением Р= 95%; иногда Р = 90%, но при ответственных измерениях требуется более высокая надежность (Р = 99%).
Если Р = 95%, f = n -1 = 3 - 1 = 2, то t (Р, f) = 4,30*.
Чем меньше ∆ x , тем точнее метод.
Величины, вычисляемые описанным выше способом, характеризуют только влияние случайных, но не систематических
ошибок. Анализ может оказаться неправильным, несмотря на хорошую воспроизводимость, т.е. на малую величину S (стандартное отклонение), если при анализе были какие-либо систематические ошибки. Отсутствие систематических ошибок может быть
установлено сопоставлением разницы между полученным при
6
анализе средним арифметическим x и истинным содержанием µ
определяемого вещества.
11. ∆ - достоверность (правильность): ∆ =/ x -µ / , где µ - находят по ГФ X или ФС.
Если ∆<∆ x , то систематические ошибки отсутствуют. Если
∆.  ∆ x , то имеют место систематические ошибки (см. правильность, достоверность).
12. E отн. - относительная ошибка опыта (относительное стандартное отклонение), выражается в %:
Eотн 
х
 100%
х
(7)
S
x
(8)
или
Eотн 
13. х±∆ x - интервальное значение определяемой величины
(или граничные значения доверительного интервала среднего
результата).
Требования к методам количественного определения.
1. Количественное определение должно проводится по фармакологически активной части молекулы лекарственного вещества
(специфичность метода).
2. Селективность (избирательность) - возможность определения лекарственного вещества в присутствии других компонентов
лекарственной формы.
3. Унификация - определение нескольких лекарственных ве7
ществ (чаще всего одной группы) по единой методике.
4. Воспроизводимость (точность) - характеризует отклонение
отдельных измерений от их среднего арифметического значения.
Часто воспроизводимость называют случайной ошибкой, так как
она возникает вследствие случайных причин. Среди случайных
отклонений выделяют промахи-отклонения с большими значениями, резко отличающиеся от других, но их не берут в расчет при
обработке результатов. В качестве меры воспроизводимости широко используют следующие величины: стандартное выборочное
отклонение (формулы 3 и 4), относительное стандартное отклонение (формулы 7 и 8), дисперсия или выборочная дисперсия
(формула 2)
5. Правильность (достоверность) - степень близости результата анализа к действительному содержанию вещества. Правильность отражает разницу среднего арифметического и истинного
содержания определяемого вещества (  / x   /) . В литературе
правильность часто называют систематической ошибкой. Возникают последние постоянно и вызваны неточностью аппаратуры,
мерной посуды Их устраняют, проверяя и калибруя аппаратуру и
посуду, а также с помощью стандартных образцов.
6. Чувствительность метода - что позволяет определять малые
количества вещества.
7. Безвредность, доступность и устойчивость реагента.
8. Экономичность (дешевизна) реагентов и анализа.
9. Простота методики выполнения.
10.
Экспрессность (быстрота выполнения анализа).
8
ЛАБОРАТОРНОЕ ЗАНЯТИЕ № 1
Тема: Стандартизация методов количественного определения лекарственных средств химическими методами.
Цель: Освоение статистической обработки экспериментальных данных и закрепление навыков работы по выбору химического метода количественной оценки качества лекарств, навыков
оформления протокола исследования, как части фармакопейной
статьи.
Самостоятельная подготовка. Ошибки анализа: систематические, случайные. Воспроизводимость. Правильность (знать основные положения теории ошибок с целью использования данной информации при оптимизации методик). Математическая обработка результатов химического эксперимента (знать значение
метрологических терминов и последовательность выполнения
математических операций при проведении статистической обработки). Значащие цифры. Достоверные и недостоверные числа.
Правильность действия с ними (уметь правильно производить
математические действия с числами фиксировать результаты в
виде определенного числа). Порядок разработки НТД по разделу
«Количественный анализ лекарственных препаратов». (знать
правила формулирования текста ФСП и пояснительной записки в
соответствии с требованиями ОСТа 91500.05.001-00.)
Составить письменные конспекты вопросам самоподготовки.
Литература:[1, с. 191-200, 208-211,]; [2, с. 122-126]; [3, с. 3132, 28-29]; [4, с. 126-128]; [6].
9
Задание 1 Провести количественное определение лекарственного вещества.
По методу количественного определения написать: уравнение реакции, лежащее в основе метода, расчет фактора эквивалентности, расчет титра и процентного содержания лекарственного вещества, провести статистическую обработку результатов анализа
по обоим методам и данные представить в виде таблицы по предлагаемой форме (табл. 1), охарактеризовать методы в плане требований (табл. 2)
Таблица 1
Название
метода
Навес- Объем
ка ве- титранщета,
ства, а V(мл)
а1 V1 –
Статистические данные
Содержание
х%
x
х1-
а2 -
V2 –
х2-
а3 -
V3 –
х3-
а4 -
V4 –
х4-
а5 -
V5 -
х5-
а1 -
V1 –
х1-
а2 -
V2 –
х2-
а3 -
V3 –
х3-
а4 -
V4 –
х4-
а5 -
V5 -
х5-
10
S2
S
Sx
Δ
Еотн
x  x
Таблица 2
№
п/п
1
Требования к методам анализа
Специфичность
Селективность (избирательность)
2
3
4
5
Методы
1-ый метод 2-ой метод
Унификация
Воспроизводимость (точность). Характеризует S (стандартное отклонение).
Правильность (достоверность)
(  / x   /)
6
Безвредность, доступность, устойчивость реагента
7
Экономичность (дешевизна)
8
Простота методики выполнения
9
Экспрессность (быстрота)
Варианты лабораторной работы по количественному
определению ЛВ химическими методами.
№
варианта
Лекарственное вещество
1
Раствор кальция хлорида
2
3
Кислота аскорбиновая
4
5
Раствор пероксида водорода 3%
6
Магния оксид
7
8
Новокаин
9
11
Методы определения
Комплексонометрическое,
Аргентометрическое
Йодатометрическое,
Алкалиметрическое
Йодатометрическое,
Йодометрическое
Алкалиметрическое,
Йодометрическое
Перманганатометрическое, Йодометрическое
Комплексонометрическое,
Ацидиметрическое
Нитритометрическое,
Аргентометрическое
Аргентометрическое,
Алкалиметрическое
Нитритометрическое, Алкалиметрическое
Методики количественного определения
лекарственных веществ.
1. Раствор кальция хлорида 10%
(Мr 219, 08).
10 мл препарата помещают в мерную колбу вместительностью 100 мл и доводят объем раствора водой до метки.
1.1. Комплексонометрическое определение. (ГФ X, ст. 120).
10 мл полученного раствора переносят в колбу для титрования, добавляют 15 мл воды, 5 мл аммиачного буферного раствора, 0,12 г индикаторной смеси или 7 капель раствора кислотного
хром темно-синего и титруют раствором трилона Б (0,05 моль/л)
до появления сине- фиолетового окрашивания.
1.2. Аргентометрическое определение.
К 5 мл разведения прибавляют 1-2 капли калия хромата и
титруют раствором серебра нитрата (0,05 моль/л) до появления
красноватого осадка.
2. Раствор пероксида водорода 3% (Мr 34,01).
10 мл раствора пероксида водорода помещают в мерную
колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора водой до
метки.
2.1. Перманганатометрическое определение (ГФ X, ст. 621).
К 10 мл разведения прибавляют 5 мл кислоты серной разведенной и титруют раствором калия перманганата 0,1 моль/л, (УЧ
1/5 КМnО4) до появления слабо-розового окрашивания.
2.2. Йодометрическое определение. 10 мл разведения помещают в склянку с притертой пробкой, прибавляют 5 мл 10% рас12
твора калия йодида, 5 мл кислоты серной разведенной и оставляют в темном месте на 10 минут. Титруют раствором натрия тиосульфата (0,1 моль/л) до обесцвечивания раствора (индикатор крахмал).
3. Магния оксид
(Мr 40,32)
Около 0,5 г препарата (точная навеска) растворяют в 40 мл
раствора кислоты хлороводородной (0,1 моль/л) в мерной колбе
вместимостью 250 мл и доводят объем раствора водой до метки.
3.1. Комплексонометрическое определение (ГФ X, ст. 380).
К 25 мл полученного разведения прибавляют 20 мл воды, 10
мл аммиачного буферного раствора и титруют при энергичном
перемешивании раствором трилона Б (0,05 моль/л) до появления
синего окрашивания (индикатор - кислотный хром черный специальный).
3.2. Ацидиметрическое определение.
К 20 мл разведения прибавляют 2-3 капли раствора метилового оранжевого и титруют раствором натрия гидроксида (0,1
моль/л) до появления желтого окрашивания.
Содержание магния оксида рассчитывают по формуле:
% MgO 
4.
TMgO / 0,1моль/ лHCl  (VHCl
0.1 моль/ л
 KпHCl  VNaOH
0,1 моль/ л
 KпNaOH )  100
a(ф.н.)
Кислота аскорбиновая (Мr 176,13.)
Около 0,5 препарата (т.н.) растворяют в воде в мерной
колбе вместимостью 50 мл, доводят объем водой до метки и
13
перемешивают.
4.1. Йодатометрическое определение (ГФ X, ст. 6).
К 10 мл разведения прибавляют 0,5 мл 1% раствора калия
иодида, 2 мл раствора крахмала и 1 мл 2% раствора кислоты
хлороводородной и титруют раствором калия йодата 0,1
моль/л (УЧ 1/6 КIO3,) до появления стойкого слабо-синего
окрашивания.
4.2. Алкалиметрическое определение.
К 20 мл разведения прибавляют 5-7 капель раствора фенолфталеина и титруют раствором натрия гидроксида (0,1 моль/л) до
появления розового окрашивания.
4.3. Йодометрическое определение.
К 10 мл разведения прибавляют 1-2 мл крахмала и титруют
раствором йода 0,1 моль/л (УЧ 1/2 I2,) до появления синего окрашивания.
5.
Новокаин (Мr.
272,8.)
5.1. Нитритометрическое определение (ГФ X, ст. 467).
Около 0,3 г препарата (точная навеска) растворяют в смеси 10
мл воды и 10 мл разведенной кислоты хлороводородной. Добавляют воды до общего объема 80 мл, 1 г калия бромида, 3 капли
нейтрального красного и при постоянном перемешивании медленно титруют раствором натрия нитрита (0,1 моль/л) от малиновой окраски до голубой. Либо используют индикатор - 4 капли
раствора тропеолина 00 и 2 капли метиленовой сини, титруют от
красно-фиолетовой окраски до голубой.
5.2. Аргентометрическое определение.
Около 0,1 г препарата (точная навеска) растворяют в 10 мл
14
воды, прибавляют 2-3 капли раствора бромфенолового синего и
по каплям кислоту уксусную разведенную до перехода фиолетового окрашивания в зеленовато-желтое и титруют раствором серебра нитрата(0,05 моль/л) до появления фиолетового окрашивания.
5.3. Алкалиметрическое определение.
Около 0,3 г препарата (точная навеска) растворяют в 10 мл
воды, прибавляют 5 мл нейтрализованной по фенолфталеину
смеси спирта этилового с хлороформом (1:2), 3-5 капель раствора
фенолфталеина и титруют при перемешивании раствором натрия
гидроксида (0,1 моль/л) до слабо-розового окрашивания водного
слоя.
Задание 2 Оформить протокол исследования, как часть «пояснительной записки» к проекту ФСП.
Пример.
ПОЯСНИТЕЛЬНАЯ ЗАПИСКА
К ПРОЕКТУ ФСП 42-1-01 В ЧАСТИ «КОЛИЧЕСТВЕННОЕ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ КАЛИЯ ХЛОРИДА»
Определение адекватности фармакопейного (аргентометрического) и меркуриметрического методов анализа калия хлорида
(КС1; Мr 74,56)
Стандартный метод
Около 1 г препарата (точная масса) растворяют в воде в мерной
колбе вместимостью 50 мл и доводят объём раствора водой до
метки. Аликвоту объемом 5 мл полученного раствора разбавляют
водой до 40 мл и титруют раствором серебра нитрата (0,1 моль/л)
15
до появления оранжевого окрашивания (индикатор - калия хромат).
КСl + AgN03 = AgCl  + КNO3
Э.м. = Мr = 74,56;
T
0,1  74,56
 0,007456 г
1000
В лабораторном оформлении были представлены бюретки
вместимостью 25 мл, следовательно, рационально было определять величину пробы на анализ в расчете на 20 мл титранта, т.е.:
0,007456

20 = 0,15г. С учётом планирования 5-6 параллельных
анализов массу пробы увеличивали в 10 раз. Таким образом, величина пробы на анализ составила 1,5 г. В итоге скорректированная методика отличалась от изложенной выше только величиной
массы пробы на анализ (для серии однотипных измерений).
Результаты измерения массы пробы на анализ:
Масса часового стекла
12,5432
Масса стекла с навеской
13,9958
Масса навески
1,4526
Проверка однородности выборки:
Результаты титрования (в порядке возрастания), мл: 19,3;
19,4; 19,4; 19,5; 19,6.
R (размах варьирования): 19,6 - 19,3 = 0,3.
16
Q
19,3  19,4
0,3
Q
 0,33
19,6  19,5
0,3
 0,33
Q(5: 95%) = 0,64 (таб. 1, ГФ XI, вып. 1, см. Приложение)
Q ~ критерии, рассчитанные по результатам эксперимента
меньшие табличного значения (0,33< 0,64), следовательно гипотеза о том, что значение 19,3 мл и 19,5 мл отягощены грубой
ошибкой, была отвергнута (при доверительной вероятности 95%).
Расчёт результатов титрования проводили по формуле:
X 
V  0,007456  50  100
, где
1,4526  5
Х- содержание препарата, %;
V- объём титранта, мл.
Таблица 1
Результаты титрования по стандартной методике
№
Объём титранта,
Взято препарата, г·10
п/п
мл
1
1,4526
19,3
Найдено
препарата, %
99,06
2
1,4526
19,4
99,58
3
1,4526
19,6
100,60
4
1,4526
19,5
100,09
5
1,4526
19,4
99,58
17
Математическая обработка результатов анализа препарата
по стандартной методике:
а) находим среднее x ,:
x
99,06  99,58  100,60  100,09  99,58
 99,78
5
б) дисперсия S2:


(99,78  99,06) 2  2 (99,78  99,58) 2  (99,78  100,6) 2  (99,78  100,09) 2
S1 
 0,3417
5 1
2
в) стандартное отклонение S:
S1  0,3417  0,5846
Метод сравнения
Пробу препарата растворяют в воде, прибавляют 5-7 капель
раствора дифенилкарбазона, 2-5 капель разведённой азотной кислоты и титруют раствором нитрата окисной ртути 0,05 моль/л
(УЧ 1/2 Hg(NO3)2) до появления фиолетового окрашивания.
КСl + Hg(N03)2 = HgCI2 + 2KN03
Расчёты Э, T и величины пробы на анализ - аналогичны приведенным выше.
Таким образом, анализ проводился по следующей методике:
около 1,5 г препарата (точная масса) растворяли в воде в мерной
колбе вместимостью 50 мл и доводили объём раствора водой до
метки. Аликвоту объемом 5 мл полученного раствора разбавляли
18
водой до 20 мл и далее действовали, как указано выше, начиная
со слов: «прибавляют 5 - 7 капель раствора дифенилкарбазона» и
далее по тексту.
Результаты измерения массы навески:
Масса часового стекла
12,5425
Масса стекла с навеской
14,0526
Масса навески
1,5101
Проверка однородности выборки
Результаты титрования (полученные объемы титрованных
растворов в порядке возрастания, мл): 19,9; 20,0; 20,1; 20,1; 20,3;
20,3.
Q (размах варьирования) : 20,3 - 19,9 = 0,4,.
Q1 
19,9  20,0
0,4
 0,25 ;
Q2 - не рассчитывали.
Q(6; 95%) = 0,56 (Таб.1, ГФ XI, вып. 1, с. 248, см. Приложение)
Величина Q - критерия, рассчитанная по результатам эксперимента, меньше табличного значения Q - критерия (0,25 < 0,56),
следовательно, гипотеза о том, что значение 19,9 мл отягощено
грубой ошибкой, была отвергнута (при доверительной вероятности 95%).
Расчёт результатов титрования проводили по формуле:
Y 
V  0,007456  50  100
1,5101 5
19
Таблица 2
Результаты титрования по методу сравнения
№
п/п
1
2
3
4
5
6
Взято препарата,
г ·10
1,5101
1,5101
1,5101
1,5101
1,5101
1,5101
Объём титранта,
мл
20,3
20,1
20,2
20,3
19,9
20,0
Найдено препарата,
%
100,23
99,24
99,74
100,23
98,25
98,75
Математическая обработка результатов анализа препарата по методу сравнения:
а) находили среднее: x
x
100,23  99,24  99,74  100,23  98,25  98,75
 99,41
6
2
б) дисперсия S 2 :
S2 
2


(99,41  99,24)2  2 (99,41  100,23)2  (99,41  99,74)2  (99,41  99,25)2  (99,41  98,75)2
 0,7388
6 1
в) стандартное отклонение S2:
S 2  0,7388  0,8595
Сравнение методов анализа по признаку «воспроизводимость»:
Критерий Фишера (F):
S12
F  2 (S12 > S22)
S2
F
0,7388
 2,16
0,3417
F(99%,4,5) =15,52 (таб. III, ГФ XI, вып. 1, с. 249, см. Приложение)
20
Величина критерия Фишера, рассчитанная по результатам
эксперимента, меньше табличного соответствующего критерия
(2,16 < 15,52), следовательно, гипотеза о том, что расхождение
дисперсий сравниваемых методов статистически несущественно,
была принята, а изучаемые методы признаны адекватными по
воспроизводимости.
В случае если величина критерия Фишера больше соответствующего табличного значения, то необходимо произвести
сравнение методов анализа по расхождению средних значений
полученных результатов.
Сравнение методов анализа по расхождению средних значений полученных результатов.
а) Средневзвешенное стандартное отклонение (S1,2):
S1, 2 
(5  1) * 0,5846  (6  1) * 0,8595
 0,6418
562
б) Критерий Стьюдента (t):
t
99,41  99,78
0,6418

5*6
 0,952
56
t (95%.9) = 2,26 (таб. III, ГФ XI, вып. 1, с. 249, см. Приложение)
Величина критерия Стьюдента, рассчитанная по результатам
эксперимента, меньше табличного t- критерия (0,952 < 2,26), следовательно, гипотеза о том, что x1  x2 была принята с доверительной вероятностью 95%. Это дало основание утверждать, что
сравниваемые методы статистически значимо не отличаются друг
от друга (с указанной вероятностью).
Разработчик, студент________________ группы
Фамилия, имя, отчество
21
(подпись)
Вопросы, упражнения, задания для самоконтроля.
1.
Приведите примеры систематических, случайных оши-
бок и промахов из практики фармацевтического анализа.
2.
Дайте понятия следующим терминам: «воспроизводи-
мость анализа», «правильность результатов» и соотнесите эти
понятия с систематическими и случайными погрешностями.
3.
Объясните происхождение коэффициентов в формуле
расчёта относительной недостоверности измерения массы 0,05г
на весах аналитических
0,0001  100
 0,2%
0,05
4.
Чему равны величины абсолютных недостоверностей
при взвешивании на весах ручных равноплечных ВР-1 и ВР-5?
5.
Чему равны величины абсолютных недостоверностей
титрования на бюретках второго класса точности вместимостью
10 мл, 25мл, 50 мл?
6.
Как зависит правильность и воспроизводимость мето-
дики анализа от количества операций в ней?
7.
Рассчитайте относительную недостоверность при от-
меривании пипеткой вместимостью 1 мл (второй класс точности,
цена деления 0,01 мл) объёмов: а)0,5 мл; 6)1 мл.
8.
Определите величины относительной недостоверности
показаний бюретки (цена наименьшего деления 0,1 мл), если на
титрование израсходовано: а) 5 мл объёма титранта; б) 20 мл объёма титранта.
22
9.
Чему равны абсолютное и относительное значения не-
достоверности при отвешивании 0,02 г препарата; а) на весах
ручных равноплечных ВР-1; б) на весах аналитических?
10.
Дайте объяснение терминам: «дисперсия», «стандарт-
ное отклонение», «доверительный интервал», «среднее».
11.
При аттестации методики количественного определе-
ния использовался Государственный стандартный образец (ГСО)
препарата (содержание 99,9%). По итогам статистической обработки данных эксперимента получены следующие результаты:
содержание основного вещества в анализируемой субстанции
ГСО составляет 100,1 ± 0,5%. Определите, чему равны абсолютные и относительные величины правильности и воспроизводимости аттестуемой методики?
12.
По данным количественного анализа содержание ос-
новного вещества в субстанции препарата составляет 99,0 ± 0,5%.
Требование соответствующей ФС по данному признаку качества
сформулировано как «не менее 99,0%». Можно ли сделать заключение о соответствии результата анализа требованию ФС?
13.
В ходе объемно-аналитической ацидиметрии препарата
«Раствор натрия барбитала 10%» в восьми параллельных опытах
были получены следующие объемы титрованных растворов, мл:
3,7; 4,7; 4,7; 4,7; 4,8; 4,8; 4,8; 4,9. Определите однородность выборки. Ответ подтвердите расчетами.
14.
По результатам количественного определения препара-
та «Раствор кислоты никотиновой 1 %» в 10 параллельных экспериментах были получены следующие значения, %: 0,98; 0,99;
23
0,99; 1,00; 1,00; 1,00; 1,00; 1,01; 1,01; 1,01. Определите однородность выборки. Ответ подтвердите расчетами.
15.
Уясните понятие значащих цифр на примере ряда:
0,104; 1,04; 104; 1,04·10-4. Какие из приведённых цифр являются
недостоверными?
16.
Покажите различную степень недостоверности чисел в
зависимости от формы её записи на примере: 11000; 1,10·104.
17.
Чему равна недостоверность двух чисел: 0,0105 г, 10,5
18.
Вычислите суммарную концентрацию ионов ОН- ряда
мг?
отдельных значений: 4,00·10-2; 5,55·10-3; 1·10-6. Запишите в
округлённом виде результат, ориентируясь на слагаемое с
наименьшей абсолютной недостоверностью.
19.
Найдите для числа «123» количество значащих цифр,
абсолютную и относительную погрешности записи указанного
числа.
20.
Какой из следующих текстов взят из фармакопейной
статьи?
а) Потеря в массе должна быть не менее 36,6%.
б) Потеря в массе была не менее 36,6%.
в) Потеря в массе будет не менее 36,6%.
г) Потеря в весе не менее 36,6%.
21.
Как правильно сформулировать текст фармакопей-
ной статьи:
а) 1,5 г препарата взбалтывали с 30 мл воды и фильтровали...
24
б) 1,5 г препарата надо взболтать с 30 мл воды и отфильтровать...
в) 1,5 г препарата должны взболтать с 30 мл воды и отфильтровать...
г) 1,5 г препарата взбалтывают с 30 мл воды и фильтруют...
д) 1,5 г препарата нужно будет взболтать с 30 мл воды и
отфильтровать...
Эталоны ответов:
15. Каждое число имеет по 3 значащих цифры. Цифры 1 и 0,
стоящие в середине, достоверны, а цифры 4 - недостоверны.
16. ±l,±lx 102 (то есть ± 100).
17. Одинаковая, т.е. ±1 (± 0,0001 г или ± 0,1 мг.)
18. 4,56·10-2 М.
ЛАБОРАТОРНОЕ ЗАНЯТИЕ № 2
Тема: Стандартизация методик количественного определения
лекарственных средств физико-химическими методами.
Цель: Освоение статистической обработки экспериментальных
данных и закрепление навыков работы по выбору физикохимического метода количественной оценки качества лекарств,
навыков оформления протокола исследования, как части фармакопейной статьи.
Самостоятельная
подготовка.
Характеристики
физико–
химических методов по чувствительности, специфичности, точ25
ности (знать для объективной характеристики метода), аналитические сигналы и единицы измерения в инструментальных методах, основные методологические варианты использования спектроскопии для качественного анализа.
Составить письменные конспекты по вопросам самоподготовки.
Литература: [1, с. 29-46]; [2, с. 67-78]; [4, с. 262-270, 333-338];
[5, с. 12-39]; [6].
Самостоятельная работа студентов.
Задание 1 Провести фотометрическое исследование анализируемого вещества.
1. Нахождение длины волны рабочего светофильтра: провести
фотометрическое исследование стандартного раствора, построить график зависимости оптической плотности А(D) от
длины волны (λ), найти максимум на графике;
2. Выявление оптимальной рабочей концентрации стандартного раствора и толщины слоя фотометрируемого раствора
(кюветы), полученные данные занести в таблицу 1
Таблица 1
Длина волны, Концентрация,
нм
%
Толщина слоя,
см
Оптическая
плотность
3. Рассчитать удельный показатель поглощения анализируемого вещества.
Задание 2 Проверить подчинение закону Бугера – Ламберта – Бера:
26
1. Приготовить 7-10 эталонных растворов различной концентрации (для интервала плотностей 0,2 – 0,8)
2. Измерить оптические плотности приготовленных растворов,
данные представить в виде таблицы 2,
Таблица 2
Общий
Объем стан- объем этаКонцентрация,
дартного
лонного
%
раствора, мл раствора,
мл
Оптическая плотность
1
2
3
Среднее
3. построить «грубый» калибровочный график.
Задание 3 Рассчитать и сделать статистическую оценку параметров линейной зависимости:
1. Рассчитать основные метрологические характеристики (коэффициент корреляции, угловой коэффициент и свободный
член линейной зависимости), данные представить в виде
таблицы 3
Таблица 3
№
С
D
C2
C·D
D2
Dp
Dp-Dn
(Dp-Dn)
1
2
Σ
2. Рассчитать величину оптических плотностей по уравнению
калибровочного графика.
3. Построить калибровочный график линейной зависимости
рассчитанных величин оптических плотностей от концен27
трации.
Задание 4 Сформулировать методику определения и провести ее
апробацию.
1. Составить схему приготовления растворов для фотометрирования предложенной ЛФ,
2. Сформулировать окончательную методику,
3. Приготовить растворы и провести их фотометрирование.
4. Рассчитать содержание фотометрируемого компонента в
ЛФ,
5. Провести статистическую обработку полученных данных.
Отчет о проделанной работе представить в виде стандартных
сброшюрованных листов, которые должны содержать:
а) проект НТД на количественное определение фотометрируемого компонента в лекарственной форме, который включает
информацию о составе ЛФ, описание органолептических свойств,
подробную текстовую методику анализа, расчетные формулы по
обработке конечных данных и информации о допустимом содержании анализируемого компонента;
б) пояснительную записку с подробным обоснованием сформулированной методики фотометрического анализа, расчетами
предварительных аналитических данных и конечными результатами количественного определения.
28
Объекты фотометрического анализа.
1. Рибофлавина 0,01% - 10,0
Кислоты аскорбиновой
Кислоты никотиновой по 0,02
2. Раствор рибофлавина 0,02% - 500,0
3. Рибофлавина 0,005
Натрия хлорида 0,9
Воды для инъекций до 100 мл.
4. Кислоты фолиевой 0,005
Глюкозы 0,25
5. Фурагина растворимого 0,1
Натрия хлорида 0,9
Воды для инъекций до 100 мл
6. Фурацилина 0,1 в табл.
7. Раствор бриллиантовой зелени 1% - 20,0
8. Раствор бриллиантовой зелени 0,5% - 50,0
9. Раствор фурагина растворимого 1% - 50,0
10.
Раствор хинозола 5% - 100,0
Пример отчета о выполненной работе.
Проект ФСП 42-2-01 на метод количественного определения
лекарственной формы состава:
Раствор рибофлавина 0,01 % - 10,0
Описание. Прозрачная жидкость жёлтого цвета, без запаха.
Количественное определение. 2 мл препарата помещают в
пробирку и добавляют точно 8 мл воды очищенной. Тщательно
перемешивают и измеряют оптическую плотность полученного
раствора на фотоколориметре типа КФК (светофильтр с длиной
волны 440 нм) в кювете с толщиной слоя 1 см. В качестве раствора сравнения используют воду. Содержание рибофлавина (х) в
граммах вычисляют по формуле:
29
x
D V  P
E1см
1%
 a  100
,
где: D - оптическая плотность полученного раствора;
V - объем фотометрируемого раствора, мл;
Р - величина одной дозы (фасовки) лекарственной формы,
мл;
E1см
1%
- удельный показатель рибофлавина при светофиль-
тре с длиной волны 440 нм;
а - величина пробы (объем, мл) препарата, взятая на анализ;
100 - фактор пересчета из процентов в граммы.
Содержание рибофлавина должно быть в пределах 0,0008 0,0012 г, считая на объем лекарственной формы.
Разработчик, студент _________________группы
Фамилия, имя, отчество
(подпись)
ПОЯСНИТЕЛЬНАЯ ЗАПИСКА К ПРОЕКТУ ФСП 42-2-01 НА
МЕТОД КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ СОСТАВА:
Раствор рибофлавина 0,01% -10,0.
1. Исследование фотометрических характеристик.
Для проведения предварительных испытаний по выявлению
аналитических фотометрических характеристик анализируемого
вещества использовали 0,02% раствор рабочего стандартного образца* (РСО) рибофлавина. Указанный раствор фотометрировали
30
на фотоколориметре типа КФК последовательно на всех светофильтрах, используя кювету толщиной слоя 1 см. Раствором
сравнения служила вода очищенная.
Поскольку величина оптической плотности в случае использования светофильтра с длиной волны 440 нм превышала значение
2,0, что, как известно, отягощено большой ошибкой, то раствор
РСО разбавили до 0,002% и повторно фотометрировали при данном значении длины волны. Оптическая плотность в этом случае
составила величину 0,573.
По данным эксперимента (см. табл.1.1) построили график зависимости (рис.1) оптической плотности от длины световой волны
(спектр). Максимум поглощения наблюдается при светофильтре с
длиной волны 440 нм.
Рис. 1 Спектр поглощения рибофлавина.
*Рабочим стандартным образцом (РСО) считают раствор
субстанции, из которой приготавливают лекарственные
31
формы и отвечающую требованиям соответствующей фармакопейной статьи.
Таблица 1.1
Результаты предварительных фотометрических
испытаний раствора РСО рибофлавина
Длина волны
светофильтра, нм
315
340
400
440
490
540
590
670
750
870
440
Концентрация, %
0,02
0,02
0,02
0,02
0,02
0,02
0,02
0,02
0,02
0,02
0,002
Оптическая
плотность, A
0,000
0,333
1,862
2,268
0,878
0,029
0,022
0,02
0,014
0,00
0,573
По данным эксперимента находили удельный показатель по1%
глощения E1см рибофлавина в данных условиях по формуле:
E1см
1%

A
C d ,
где: А - оптическая плотность испытуемого раствора;
С - концентрация рабочего стандартного раствора, в процентах;
d - толщина слоя, см.
E1см
1%

32
0,573
0,002 1
С целью проверки подчиненности закону Ламберта - Бугера
-Бера приготовили серию из 7 эталонных растворов рибофлавина
с интервалом концентраций 0,005 - 0,0035%. Предварительный
расчет концентраций для диапазона оптических плотностей 0,2 1 ,0 показал, что минимальная (Сmin = 0,2/286,5) составляет
0,0007%, а максимальная (Сmax = 1,0/286,5) - 0,0035%. Для приготовленной серии эталонных растворов проводили измерения оптических плотностей в трех повторностях, результаты которых
приведены в табл. 2.1
Таблица 2.1
Оптические плотности эталонных растворов
КонценОбъем
Общий
трация, стандартного
объем, мл
%
раствора, мл
0,0005
0,0010
0,0015
0,0020
0,0025
0,0030
0,0035
0,25
0,50
0,75
1,00
1,25
1,50
1,75
10
10
10
10
10
10
10
Оптическая плотность,
измерения
1
2
3
Среднее
0,163
0,293
0,425
0,573
0,691
0,793
0,946
0,165
0,294
0,426
0,573
0,693
0,794
0,950
0,167
0,292
0,426
0,573
0,692
0,794
0,948
0,165
0,293
0,426
0,573
0,692
0,794
0,948
2. Расчет параметров линейной зависимости и статистическая оценка.
Расчет метрологических характеристик линейной зависимости
проводился по результатам аналитической информации, приведенной в табл. 3.1
33
Таблица 3.1
Параметры линейной зависимости
№
С
D
С2
1 0,0005
0,165
2,5·10-7
8,25·10-5 0,0272 0,169
0,004
1,6·10-5
2 0,0010
0,293
10·10-7
29,3·10-5 0,0858 0,298
0,005
2,5·10°-5
3 0,0015
0,426
22,5·10-7 63,9·10-5 0,1815 0,428
0,002
0,40·10-5
4 0,0020
0,573
40·10-7
114,6·10-5 0,3283 0,557
0,016
25,6·10-5
5 0,0025
0,692
62,5·10-7
173·10-5 0,4789 0,686
0,006
3,6·10-5
6 0,0030
0,794
90·10-7
238·10-3 0,6304 0,815
0,021
44,1·10-5
7 0,0035
0,948
122·10-7 331,8·10-3 0,8987 0,944
0,004
1,6·10-5
Σ
3,891
3,5·10-5
-
0,000794
0,014
D2
C·D
Dp
0,00959 2,6308
Dp-Dn (Dp-Dn)
-
Коэффициент корреляции (r), вычисленный по уравнению:
r
r
n  C  D  C   D
n   С
2
 
  С   n  D 2   D 
2
2
7  0,00959  0,014  3,891
7  3,5  10
5

 (0,014) 2 7  2,6308  15,140

 0,999
позволяет сделать заключение о жесткости изучаемой линейной
зависимости между концентрациями и величинами оптических
плотностей растворов рибофлавина.
Угловой коэффициент (b) и свободный член (а) линейной зависимости, вычисленные по уравнениям:
b
b
n   C  D    C   D
n   C 2   C 
2
7  0,00959  0,014  3,891
 258,4;
7  3,5  10 5  19,6  10 5
34
 D   C   C   C  D 
a
n   C   C 
2
2
2
3,891  3,5 10 5  0,014  0,00959
a
 0,039
7  3,5 10 5  19,6 10 5
использовали для расчетов исправленных значений оптических
плотностей (Dр) по формуле:
Dр =Cb + a, или: Dр =Cх 258,4 + 0,039.
Рассчитанные величины заносили в табл. 3.1 и на основании
вновь полученных данных строили график (рис.2) линейной зависимости оптических плотностей (Dp) от концентраций (Сn).
Рис. 2. График линейной зависимости оптической плотности от
концентрации раствора рибофлавина.
2. Формулирование и апробация методики количественного
анализа лекарственной формы.
Для
фотометрирования
готовили
35
растворы
рибофлавина
0,002% концентрации в расчете на то, что наименьшее отклонение оптических плотностей от истинных значений обычно
наблюдается в окрестностях центра графика. Для этого лекарственную форму «раствор рибофлавина 0,01%» следует разбавить в 5 раз (0,01/0,002 = 5). При использовании кюветы с толщиной слоя 1см следует приготовить не менее 10 мл фотометрируемого раствора.
Итак, рабочая методика количественного анализа рибофлавина для лекарственной формы «Раствор рибофлавина
0,01%» формулируется следующим образом: к 2 мл (пипетка
ГОСТ 20922 - 74; 2 мл) лекарственной формы добавили 8 мл (пипетка ГОСТ тот же, 10 мл) воды очищенной. Перемешали. Полученный раствор фотометрировали при тех же условиях (светофильтр с длиной волны 440 нм, толщина слоя кюветы 1 см). Готовили три раствора рибофлавина для фотометрирования. Результаты испытаний приведены в табл. 4. Расчет содержания рибофлавина (х) в лекарственной форме в граммах проводили по
формуле:
x
D V  P
, где :
E1cм  l  a  100
1%
D - оптическая плотность;
1%
E1см -удельный показатель поглощения;
а - объем лекарственной формы, взятый на анализ;
l - толщина слоя кюветы, см;
V - объем фотометрируемого раствора, мл;
100 - пересчет в граммы. Результаты расчетов приведены в
табл. 4.
36
Таблица 4.
Аналитические данные
количественного определения рибофлавина
№ опыта
1
2
3
Оптическая
плотность
0,579
0,578
0,579
Содержание
рибофлавина,г
0,000988
0,000986
0,000988
Статистическая обработка результатов эксперимента
Определение среднего значения ( C ):
C 
0,000988  0,000986  0,000988
 0,000987
3
Определение стандартного отклонения (S):
2(0,000988  0,000988) 2  (0,000987  0,000986) 2
S
 1,22  10 6
2
Определение доверительного интервала (  c ) при доверительной
вероятности 95%:
1,22  10 6
 c  4,303 
 3,03  10 6
3
Определение ошибки метода (  %):
3,03  106  100
%  
 0,31%
0,000987
Полученная величина содержания рибофлавина укладывается
в допустимые пределы отклонений (согласно инструкции по
оценке качества лекарств от 16.10.97 , приказ МЗ РФ №305), что
37
составляет ± 20% , т.е. 0,008 - 0,012 г. Окончательная формулировка методики анализа приводится в проекте ФСП 42-2-01 в соответствии с ОСТ 91500.001-00.
Разработчик, студент ______ группы
Фамилия, имя, отчество
(подпись).
Вопросы, задания, упражнения для самоконтроля.
1. Дайте сравнительную характеристику гравиметрическим, титриметрическим и фотометрическим методам анализа по следующим критериям: чувствительность, достоверность, специфичность.
2. Почему для этинилэстрадиола не предусмотрено количественное определение (ФС 36, ГФ X, с. 74)?
3. Почему фотометрические методы применяются в основном
для количественного определения лекарственных форм, а не
для лекарственных субстанций?
4. Какие из оптических методов анализа относятся к абсорбционным (по характеру взаимодействия с лучистой энергией):
а) люминисцентный;
б) турбидиметрический;
в) фотоколориметрический;
г) флуориметрический;
д) нефелометрический;
е) спектрофотометрический.
5. Что понимают под оптической плотностью? Зависит ли она от
концентрации анализируемого вещества?
6. Что понимают под УФ -спектром вещества?
7. От чего зависит величина удельного показателя поглощения?
38
8. В чём основные отличия спектрофотометрии от фотоколориметрии?
9. В чём сущность взаимодействия лучистой энергии с веществами в абсорбционных фотометрических методах?
10. Соотнесите название физико-химических методов их аналитическим сигналам и единицам измерения:
Нефелометрия
Оптическая плотность
Поляриметрия
Рефрактометрия
Фотоколориметрия
Потенциал полуволны
Удельный показатель поглощения
Флуориметрия
Полярография
УФ – спектроскопия
Показатель преломления
Величина рН
Величина Rf
Хроматография
Потенциометрия
Интенсивность флюорисценции
Высота полярографической
волны
Градусы угловые
Удельный угол вращения
Показатель преломления
11. Назовите основные методологические варианты использования спектрофотометрии для качественного анализа (сравните ФС 587, 575, 521,497, 402, 94 в ГФ X).
12. С учётом каких особенностей выбираются длинна волны и
концентрация раствора при нормировании удельного показателя поглощения?
13. Пользуясь приведёнными данными экспериментального
определения удельного показателя поглощения этинилэстрадиола, найдите недостающие значения в таблице:
39
D
E1см
1%
Толщина слоя,
см
Концентрация
0,63
-
2,5
35 мкг/мл
0,58
72,5
2
-
-
71,0
1,5
0,04 мг/мл
14. Почему в ФС 405 (ГФ X, с. 422) не требует определения
удельного показателя поглощения для метиландростендиола,
хотя для всех остальных гормональных препаратов данной
группы эта характеристика контролируется?
15. Почему для количественного определения не используют
ИК -область спектра?
16. Как наиболее быстро подобрать светофильтр в фотоколориметрии для окрашенных жидкостей?
17. Можно ли использовать жёлтый светофильтр в фотометрическом определении рибофлавина по естественной окраске?
18. Какая область длин волн используется для целей фотометрирования:
а) соответствующая максимуму поглощения;
б) соответствующая минимуму поглощения;
в) соответствующая максимальной полуширине пика поглощения;
г) соответствующая минимальной полуширине пика поглощения.
19. Поясните путём вывода происхождения коэффициентов,
приведённых в расчётных формулах обработки результатов
анализов в ФС 37 (ГФ X, с. 75), ФС 410 (ГФ X, с. 427), ФС 662
(ГФ X, с. 675), ФС 207 (ГФ X, с. 237).
20. С целью реализации требования ФС 36 (ГФ X, с. 74) по
определению удельного показателя поглощения предложите
подробную методику приготовления 0,005% раствора этинил40
эстрадиола в 95% спирте, которая предусматривала бы экономное расходование растворителя и обеспечивала достаточную точность измерения. С учётом предложенной методики
приведите расчётную формулу определения искомой величины.
21. С целью спектрофотометрического определения кортизона
ацетата как основного вещества в его субстанции точную массу 0,0519 г препарата растворили в этаноле в мерной колбе
вместимостью 500 мл по общим правилам. Полученный раствор разбавили спиртом в соотношении 1 : 100 и измерили оптическую плотность последнего раствора при длине волны 238
нм в кювете с толщиной слоя 1 см. Она составила величину
0,50. Рассчитайте содержания кортизона ацетата в его субстанции в процентах, если удельный показатель поглощения кортизона ацетата в аналогичных условиях равен 490.
22. Таблетки метилтестостерона со средней массой 0,1022 г были подвергнуты количественному определению по следующей
схеме: 0,0615 г порошка растёртых таблеток растворили в 50
мл этанола и фильтровали. 5 мл фильтрата поместили в мерную колбу вместимостью 25 мл и довели этанолом до метки.
Оптическая плотность полученного раствора, измеренная на
спектрофотометре при длине волны 241 нм в кювете толщиной
слоя 2 см, оказалась равной 0,52. Сделайте расчёт количественного содержания метилтестостерона в граммах, если оптическая плотность в параллельном измерении 0,001% раствора рабочего стандартного образца (РСО) метилтестостерона
равна 0,60.
23. Как правильно записать текст фармакопейной статьи:
а) содержание C20H30O2 было 0,0045 - 0,0055 г, считая на
среднюю массу таблетки;
41
б) содержание C20H30O2 должно быть 0,0045 - 0,0055 г, считая
на среднюю массу таблетки;
в) содержится C20H30O2 0,0045 - 0,0055 г, считая на среднюю
массу таблетки.
24. Какой из следующих текстов взят из фармакопейной статьи:
а) около 0,05 г порошка (точная масса) поместили в мерную колбу вместимостью 50 мл.
б) около 0,05 г порошка (точная масса) нужно поместить в
мерную колбу вместимостью 50 мл...
в) около 0,05 г порошка (точная масса) помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл.
ПЕРЕЧЕНЬ ПРИОБРЕТАЕМЫХ
ПРАКТИЧЕСКИХ НАВЫКОВ И УМЕНИЙ
В результате изучения темы студент должен:
 знать метрологическую и аналитическую характеристики физико-химических методов, применяемых в фармацевтическом
анализе; возможность стандартизации лекарственных средств
физико-химическими методами;
 уметь характеризовать взаимосвязь физико-химических методов с химической структурой анализируемых веществ, а также
формой их применения (субстанция, лекарственная форма);
обосновывать фармакопейные требования к методикам определения качества лекарств фотоколориметрическими методами; разрабатывать методики фотоколориметрического определения лекарственных средств на основе оптических характеристик анализируемых веществ, формы их применения; формулировать текст проекта ФСП и составлять пояснительную записку в соответствии с порядком разработки НТД на лекарственные средства.
42
ЛИТЕРАТУРА
1. Государственная фармакопея СССР XI изд., «Медицина», М.,
1987.
2. Васильев В.П., Аналитическая химия, в двух частях, «Высшая школа», М., 1989.
3. Фритц Дж., Шенк Г., Количественный анализ, «Мир», М.,
1978.
4. Беликов В.Г., Фармацевтическая химия, Часть 1, «Высшая
школа», М., 1993.
5. Руководство к лабораторным занятиям по фармацевтической
химии. Под ред. А.П. Арзамасцева, «Медицина», М., 1995.
6. Отраслевой стандарт «Стандарты качества лекарственных
средств. Основные положения» №91500.05001-00.
43
ПРИЛОЖЕНИЕ
Числовые значения контрольного критерия Q (P, n)
n
Q
P = 95%
0,94
0,77
0,64
0,56
0,51
0,48
0,46
P = 90%
0,89
0,68
0,56
0,48
0,43
0,40
0,38
3
4
5
6
7
8
9
P = 99%
0,99
0,89
0,76
0,70
0,64
0,58
0,55
Числовые значения критерия Фишера F(P, f1, f2) при Р = 99%
f2
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
1
2
3
4
5
f1
6
4052
4999
5403
5625
5764
5859
8
10
12
16
20
5981
6056
6106
6169
6208
98,49 99,00 99,17 99,25 99,30 99,33 99,36 99,40 99,42 99,44 99,45
34,12 30,81 29,46 28,71 28,24 27,91 27,49 27,23 27,05 26,83 26,65
21,20 18,00 16,69 15,98 15,52 15,21 14,80 14,54 14,37 14,15 14,02
16,26 13,27 12,06 11,39 10,97 10,77 10,27 10,05
9,89
9,68
9,55
13,74 10,92
9,78
9,15
8,75
8,47
8,10
7,87
7,72
7,52
7,39
12,25
9,55
8,45
7,85
7,46
7,19
6,84
6,62
6,47
6,27
6,15
11,26
8,65
7,59
7,01
6,63
6,37
6,03
5,82
5,67
5,48
5,36
10,56
8,02
6,99
6,42
6,06
5,80
5,47
5,26
5,11
4,92
4,80
10,04
7,56
6,55
5,99
5,64
5,39
5,06
4,85
4,71
4,52
4,41
44
СОДЕРЖАНИЕ
Введение . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .3
Лабораторное занятие № 1 . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . 8
Пример пояснительной записки . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .14
Вопросы, упражнения, задания для самоконтроля . . . . . . . . 21
Лабораторное занятие № 2 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .24
Пример отчета о выполненной работе . . . . . . . . . . . . . . . . . . 28
Пример пояснительной записки . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 29
Вопросы, упражнения, задания для самоконтроля . . . . . . . . 37
Перечень приобретаемых практических навыков и умений 41
Литература . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 42
Приложение . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 43
Содержание . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .44
45
СТАНДАРТИЗАЦИЯ
ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ
Учебно-методическое пособие для студентов 5 курсов
фармацевтического факультета
Печатается в авторской редакции
Компьютерная верстка – авторская
Подписано к печати ___________ Формат 60×841/16.
Бумага писчая. Гарнитура «Таймс». Печать офсетная.
Усл. печ. л. _____. Уч.-изд. л. ____. Тираж 300 экз. Заказ _____
Издательство Нижегородской государственной
медицинской академии
603005, Н.Новгород, пл. Минина 10/1
Полиграфический участок НижГМА
603005, Н.Новгород, ул. Алексеевская, 1.
46