Опыт применения ВПЧ-тестирования для раннего выявления

Опыт применения ВПЧ-тестирования для раннего выявления
предрака шейки матки в дерматовенерологической службе.
Краснова Н.В., Прокопьева А.Е., Зайцева О.А., Садыкова о.И., Андреева С.И.
БУ «Республиканский кожно-венерологический диспансер» Министерства здравоохранения и социального развития Чувашской Республики
Введение. В настоящее время доказана ведущая роль вируса папилломы человека (ВПЧ) в этиопатогенезе 70% случаев рака шейки матки. Рак шейки матки (РШМ) – одна из наиболее распространенных онкологических патологий, занимающая второе место
по частоте встречаемости среди женщин в мире. Всего в мире ежегодно регистрируются
около 600 тысяч новых случаев РШМ и более 250 тысяч смертельных исходов. В случае
предрака и рака ВПЧ выявляется почти в 100% случаев, выявление ВПЧ на стадии отсутствия дисплазии характеризуется минимум 300-кратным увеличением риска развития
РШМ. Так как РШМ имеет длительный период развития и надежно распознаваемую преклиническую фазу, существует возможность раннего выявления и предотвращения заболевания. До настоящего времени единственным тестом для скрининга и отвечающим многим из перечисленных требований является ДНК-диагностика ВПЧ.
Молекулярно-генетический скрининг ВПЧ имеет важную клиническую значимость, так как детекция ВПЧ помогает выделить группы женщин с высоким риском развития рака шейки матки. Для решения этой задачи необходимо не только само по себе выявление папилломавирусов, но и осуществление ВПЧ- генотипирования, позволяющего
дифференцировать папилломавирусы «высокого» и «низкого» риска. Известно, что частота возникновения рака шейки матки у женщин, инфицированных ВПЧ «высоко риска»,
возрастает в среднем в 30 раз по сравнению с незараженной ВПЧ популяцией, поэтому
данный контингент обследуемых требует особенно пристального мониторинга. Выявление ВПЧ «низкого» риска имеет преимущественно вспомогательное значение, так как
данные типы папилломавирусов ассоциированы с кондиломатозом, папилломатозом и
другими доброкачественными изменениями цервикального эпителия.
Наиболее прогрессивным на сегодняшний день является определение вирусной
нагрузки при помощи ПЦР в режиме реального времени.
Инфекция ВПЧ имеет ряд важных особенностей, без учета которых использовании ВПЧ-тестирования сопряжено с рядом трудностей в трактовке результатов.
С одной стороны:
- при инфицировании большинства женщин (около 80%) излечиваются от ВПЧ в
течении 9-15 месяцев от момента заражения без проведения лечебных процедур
- инфекция приводит к развитию предрака у малой части инфицированных женщин (около 0,5 %)
- от заражения до развития предрака и рака шейки матки в среднем проходит 20
лет
- отсутствуют эффективные методы лечения на стадии латентной инфекции (нет
изменений в цитологической и/или кольпоскопической картине, но выявляется вирус)
С другой стороны:
- ВПЧ является основной причиной рака шейки матки
- инфицированные женщины имеют в 300 раз более высокий риск развития рака
- инфекция является коварной и довольно часто не вызывает никаких жалоб у пациентки и не выявляется при осмотре до перехода в стадию инвазивного рака
- клинические проявления папилломавирусной инфекции высокого риска может
маскироваться другими заболеваниями урогенитально тракта, что не позволяет во время
выявить их с использованием традиционных методов.
Цель: Папилломавирусная инфекция является инфекцией, передаваемой половым
путем и наиболее часто встречается среди пациентов, обратившихся за помощью в учреждения дерматовенерологического профиля. В связи с этим женщины, обратившиеся за
помощью в кожно-венерологческий диспансер, требуют прохождения обязательного цервикального скрининга. При прогнозировании развития рака шейки матки и для оценки
противовирусной терапии неоценимую помощь оказывает количественное определения
вируса на основе ПЦР с детекцией в режиме реального времени.
Материалы и методы: обследовали пациенток, обратившихся в БУ «РКВД»
г.Чебоксары (2027 женщин). Взятие материала проводили из цервикального канала с использованием эндоцервикальной щетки в 500 мкл транспортной среды. Проводили выявление ВПЧ высокого канцерогенного риска 16,18, 31, 33,35,39,45,51,52,56,58,59 типов с
одновременным количественным определением вирусной нагрузки с использованием реагентов «АмплиСенс ВПЧ ВКР Скрин Титр Fl ». Результат рассчитывался в логарифмах
геномных эквивалентов вируса (ГЭ) нормализованных на 100 тысяч (105) геномов человека. Порог ревалентного количества вируса принимался равным 103 ГЭна 105 геномов человека (порог клинической значимости).
Пациентки с положительным результатом ВПЧ направлялись на цитологическое
исследование.
Результаты: Наши исследования выявили достаточно высокую встречаемость
ВПЧ среди пациентов, обратившихся за помощью в учреждения дерматовенерологического профиля. Из числа обследованных женщин положительные результаты выявлены у 840
пациенток, что составляет 41%. У здоровых женщин, так же как и у больных наиболее часто обнаруживаются ВПЧ-16 генотип -228 случаев (27%) и ВПЧ 18 генотип- 98 случаев
(11%). Среди других чаще других выявляются 31 генотип -160 (19%), 33 генотип-106
(12%), 35 генотип -40 (4%), 39 генотип -90 (10%), 45 генотип-95 (11%), 51 генотип-166
(19%), 52 генотип 113 (13%), 56 генотип -86 (10%), 58 генотип-80 (9%), 59 генотип -72
(8%).
Имеется ряд работ, указывающих на то, что вирусная нагрузка ниже порога клинической значимости (103 ГЭ 105 геномов человека) не встречается в образцах тяжелой
дисплазии и рака и ассоциирована с регрессией инфекции (клинически незначимое инфицирование). Нагрузка выше данного порога обозначается как клинически значимое инфицирование. Так же выделяется второй порог (порог прогрессии -105 ГЭ 105 геномов человека). Вирусная нагрузка выше данного значения обозначается как повышенная и ассоциирована с большей вероятностью наличия или прогрессии в CIN2,3.
В наших исследованиях повышенная вирусная нагрузка (lg>5) диагностирована у
76% вирус -инфицированных больных, малозначимая вирусная нагрузка (lg <3) выявлено
в 6% случаев.
Выводы: результаты проведенного нами исследования убедительно демонстрируют важность проведения скрининговой ВПЧ диагностики пациентов дерматовенерологической службы. Примененная нами схема тестирования на наличие ДНК ВПЧ с использованием ПЦР, генотипирования ВПЧ, определения вирусной нагрузки на первом этапе
позволяет эффективно выявлять случаи предрака и рака шейки матки.