Питательные среды

Питательные среды
Питательные среды являются основой бактериологических исследований. Они
служат основой для выделения из исследуемого материала чистой культуры бактерий,
изучения их свойств. В состав сред должны входить вещества необходимые для
построения всех компонентов клетки, т.е. источники азота, углерода, водорода и
кислорода.
Источником водорода и кислорода в питательных средах является вода. Источником
азота являются органические соединения, которые получают из мяса, рыбы, плаценты,
молока, яиц, крови. В результате гидролиза панкреатином или трипсином из этих
продуктов получаются так называемые гидролизаты, содержащие большое количество
аминокислот, пептонов, и которые хорошо усваиваются большинством
микроорганизмов. Гидролизаты являются основой для приготовления сред. Источником
углерода являются главным образом различные углеводы, моно- и дисахара,
многоатомные спирты, органические кислоты и их соли. Кроме органогенов бактериям
необходимы неорганические соединения, содержащие фосфор, калий, серу, натрий,магний, железо, а также микроэлементы – кобальт, йод, марганец, бор, цинк, медь и др.
Некоторые микроорганизмы кроме этого нуждаются в факторах роста, т.е. в веществах,
которые они сами не могут синтезировать и их необходимо добавлять в питательную
среду в готовом виде.
ТРЕБОВАНИЯ, ПРЕДЪЯВЛЯЕМЫЕ К ПИТАТЕЛЬНЫМ СРЕДАМ
1. Среды должны содержать необходимые питательные вещества для бактерий
2. Иметь реакцию рН, оптимальную для выращиваемого микроба.
3. Должны иметь достаточную влажность и вязкость.
4. Должны быть стерильны.
По консистенции различают плотные и жидкие питательные среды. Плотные готовят
на основе жидких посредством добавления к ним агар-агара или желатина. Агар-агар (по
мплийски – желе) продукт растительного происхождения, готовится из морских
водорослей.
Классификация питательных сред
1. Среды общего назначения (простые питательные среды) – используются для
выращивания микроорганизмов и как основа сложных питательных сред.
Примеры: МПА, МПБ, желатин.
2. Сложные питательные среды
2.1 Среды элективные (селективные). Принцип создания – добавление в
питательные среды ингибитора подавляющего рост сопутствующей флоры, но
не влияющий на рост и размножение выделяемого вида бактерий.
Примеры: желчный бульон – МПБ+ бычья желчь, которая является
ингибитором роста кокков и воздушной флоры, но благоприятна для
размножения сальмонелл.
2.2 Среды специальные. Необходимы для культивирования бактерий, не
растущих на питательных средах.
Примеры: сывороточный бульон, сывороточный агар, кровяной агар – для
менингококков и пневмококков, сахарный агар, сахарный бульон – для
стрептококков.
2.3 Дифференциально-диагностические среды по своему назначению
подразделяются
а) для выявления протеолитической активности микробов и содержат в
своем составе молоко, желатин, кровь и т.д.
б) для обнаружения сахаралитической способности микробов – среды с
углеводами и многоатомными спиртами.
в) для определения редуцирующей способности бактерий
Среды для выявления сахаролитических свойств бактерий
Примеры: Среда Эндо. Состав – МПА + лактоза + индикатор фуксин
обесцвеченный сульфитом натрия. Среда имеет слаборозовый цвет.
Используется для дифференциации бактерий разлагающих лактозу
(лактозопозитивные , например кишечная палочка) от бактерий
неспособных разлагать лактозу (лактозонегативные, например
сальмонеллы, шигеллы). Колонии лактозопозитивных бактерий имеют
малиновый цветя, а лактозонегативных – бесцветные.
Среды Гисса (пестрый ряд). Готовится на основе пептонной воды, к
которой добавляют химически чистые моно- ди- полисахариды и
многоатомные спирты, индикатор и стеклянный поплавок в виде
перевернутой маленькой пробирки, для улавливания газообразных
продуктов. В состав сред Гисса входит МПБ для определения индола и
сероводорода (продукты разложения белков).