Морфология эритроцитов при гипоксических состояниях
advertisement
МОРФОЛОГИЯ ЭРИТРОЦИТОВ ПРИ ГИПОКСИЧЕСКИХ СОСТОЯНИЯХ У НОВОРОЖДЕННЫХ Дементьева Ю.Н., Кусельман А.И., Светухин В.В., Нагорнов Ю.С., Костишко Б.Б., Ламзин И.М. ФГБОУ ВПО Ульяновский государственный университет, г.Ульяновск, Россия Продолжительные гипоксические состояния у новорожденных приводят к развитию гипоксически-ишемической энцефалопатии, механизмом патогенеза которой является нарушение мозгового кровотока, кроме этого доставка кислорода тканям снижается и от изменения реологических свойств крови. При развивающейся гипоксемии изменяется структурная вязкость крови, строение и функции форменных элементов крови. В настоящее время изменение морфологических параметров клеток крови человека проецируют на физиологические свойства, что наряду с функциональной характеристикой дает полноценную информацию об их участии в поддержании гомеостаза. Оценка формы эритроцитов имеет значительный практический интерес, поскольку определяет функциональную состоятельность этой клетки. Исходя из вышеизложенного, были определены цель и задачи исследования. Цель работы новорожденных при - изучение гипоксических структурных состояниях, изменений используя эритроцитов метод крови атомно-силовой микроскопии. Научная новизна - для оценки морфологии эритроцитов крови новорожденных при гипоксических состояниях впервые использован новейший метод атомно-силовой микроскопии, позволяющий увидеть трехмерную структуру эритроцита. Материалы и методы - для исследования пригоден простой мазок крови, приготовленный на предметном стекле стандартным для клинической лаборатории методом. Сканирование препаратов проводили на сканирующем зондовом микроскопе Smena A (NT-MDT, Зеленоград, Россия) на базе лаборатории Сканирующей зондовой микроскопии НИТИ Ульяновского государственного университета. Для реализации поставленной цели были обследованы 41 новорожденный в возрасте от 1 суток до 3 месяцев, находившихся на лечении в отделении анестезиологии и реанимации новорожденных и отделении патологии новорожденных ГУЗ Ульяновской областной детской клинической больницы и 10 новорожденных, находившихся в роддоме ГУЗ Ульяновской областной клинической больницы. Новорожденные были разделены на группы – 1 группа - дети раннего неонатального периода (группа контроля, условно здоровые дети) (n=10); 2 – пациенты с церебральной ишемией 1-2 ст. (n=10); 3 – пациенты с церебральной ишемией 2-3 ст. (n=9); 4 - пациенты с церебральной ишемией и ВЖК (n=6); 5 – пациенты с церебральной ишемией (в возрасте старше 10 дней до 1 мес.) (n=6); 6 – пациенты с дыхательной недостаточностью (респираторная гипоксия) старше 1 месяца жизни (n=10). Во всех исследуемых группах проводилось вычисление следующих размеров эритроцитов: диаметр эритроцита и его «впадины», глубину впадины эритроцита, соотношение диаметра эритроцита к диаметру впадины. (рис.1) Рис.1 Исследуемые показатели Отмечается различие данных в зависимости от состояния наблюдаемых новорожденных. На рисунках представлены препараты крови исследуемых групп. ( рис.2, 3,4) Рис. 2 Новорожденный Х., 10 сутки жизни, Церебральная ишемия 1-2 ст. Рис. 3 Новорожденный Д., 7 дней жизни. Церебральная ишемия 2-3 ст. 3D формат. Рис. 4 Новорожденный Г.,9 дней жизни, Церебральная ишемия 3 ст, ВЖК Результаты и обсуждения В зависимости от степени церебральной ишемии и длительности течения гипоксического процесса проанализировано состояние эритроцитов. При оценке изменения диаметра эритроцитов отмечается снижение диаметра в зависимости от тяжести состояния, при этом показатели диаметра в группе с церебральной ишемией 2-3 ст. достоверно снижены по отношению к показателю у условно-здоровых детей раннего неонатального периода р<0,05. Однако при анализе показателей в структуре группы с гипоксически-ишемическим поражением ЦНС, выявляется стойкое достоверное снижение диаметра эритроцита по отношению к группе детей раннего неонатального периода р<0,05, при этом при анализе пациентов в структуре группы с ишемией, показатели не достоверны, при стихании остроты процесса в динамике отмечается тенденция к возрастанию диаметра впадины. Рассматривая показатели глубины «впадины» эритроцитов, достоверное увеличение глубины отмечается лишь в группе детей с церебральной ишемией 2-3 степени. При анализе соотношения диаметра эритроцита к диаметре впадины отмечается увеличение соотношения, с наибольшим показателем в группе у детей с ВЖК. При анализе морфологического распределения форм эритроцитов внутри групп не удается установить четкой корреляционной зависимости от степени тяжести гипоксическиишемического процесса, при этом во всех группах отмечается снижение количества нормальных форм эритроцитов (дискоцитов), что говорит о сниженной устойчивости мембран эритроцитов, что приводит к снижению времени жизни эритроцита и развитию анемических состояний у детей. Форма эритроцитов имеет взаимосвязь с тяжестью нарушений с наибольшими изменениями в группе детей с ВЖК и церебральной ишемией 2-3 ст. (увеличение числа сфероцитов, дрепаноцитов), что свидетельствует о нарушении устойчивости мембраны эритроцита. Таким образом, увеличение соотношения диаметра эритроцита к диаметру впадины и снижение размеров эритроцита при отсутствии клиники ВЖК может являться прогностическим признаком данного состояния. При сравнении результатов общего анализа крови (ОАК), проводимого световой микроскопией, и АСМ имеется диссонанс полученных данных, так как при ОАК не учитываются ранние изменения формы эритроцитов, отмечается более детальное описание форм эритроцита и ранняя диагностика анизо- и пойкилоцитоза. Величина этих изменений не доступна световой микроскопии, что свидетельствует о точности и достоверности атомно-силовой микроскопии.
