Краткий отчёт ФГБУН КНИИГиПК ФМБА России за 2013 год

Краткий отчет
об основных результатах научно-исследовательской деятельности
ФГБУН «Кировский НИИ гематологии и переливания крови ФМБА
России» в 2013 году
Основные результаты научной и инновационной деятельности
По государственному заданию на 2013 год (заказчик ФМБА России) 13 тем (2011-2013 гг.):
Тема «Разработка дифференцированной терапии рецидивов и
рефрактерных форм неходжкинских лимфом с учетом клиникогематологических, биохимических, иммунологических и молекулярногенетических нарушений» (шифр «001»)
Многофакторный анализ показал, что содержание NK- и NKT-клеток
(естественных киллерных клеток) в момент постановки диагноза является
независимым прогностическим критерием выживаемости, свободной от
лечения, и беспрогрессивной выживаемости больных. Установлено, что
количество клеток с del13q14 влияет на особенности клинического течения
хронического
лимфолейкоза
(ХЛЛ)
и
ответ
на
химио-
и
иммунохимиотерапию. У больных с del11q23 в ≥ 40% клеток достоверно
чаще отсутствовал эффект на лечение по программе FC (флударабин,
циклофосфан) и были значительно короче общая выживаемость (ОВ) и
выживаемость,
применения
свободная
от
моноклональных
монорежиме у
лечения.
анти-CD52
Определена
антител
эффективность
(алемтузумаба)
в
больных с рефрактерными формами и рецидивами
хронического лимфолейкоза (ХЛЛ). Установлена прямая зависимость
времени до прогрессии заболевания от положительной экспрессии ZAP-70 и
наличия у пациентов комплексных хромосомных нарушений.
Тема «Конституциональные и приобретенные особенности
генома при хронических лейкозах» (шифр «002»)
Проведена идентификация антигенов HLA класса I локусов A, B и
специфичностей HLA класса II локусов DRB1*, DQB1*
у
больных
хроническим
миелолейкозом
(ХМЛ).
Выявлены
особенности
в
распределении исследованных параметров у больных ХМЛ по сравнению со
здоровыми
лицами.
Установлена
возможная
протективная
роль
гомозиготного носительства мажорного («дикого») аллеля MTHFR*1298A в
отношении развития первичного миелофиброза. При этом гомозиготное
носительство минорного («мутантного») аллеля
1298С гена MTHFR
повышает риск развития ПМФ.
Тема «Состояние эндотелия и нарушения коагуляционного гемостаза у
больных ОЛЛ на этапах химиотерапии и при воспалении» (шифр «003»)
Доказано, что уровень С-реактивного белка (СРБ)
может служить
достоверным косвенным маркером развития инфекции у больных острым
лимфобластным
лейкозом
(ОЛЛ)
в
периоде
миелотоксического
агранулоцитоза, независимо от курса проводимой терапии. Предложены
диагностически значимые уровни СРБ, позволяющие с высокой точностью
определять у больных ОЛЛ возможный переход локализованной инфекции в
генерализованную. В качестве дополнительных диагностических критериев
развития инфекционных осложнений при ОЛЛ могут использоваться
повышение уровней фибриногена и РФМК с одновременным снижением
активности ПрС. Содержание СРБ позволяет косвенно оценивать переход
локализованной инфекции в генерализованную форму.
Тема «Тема «Иммуноморфологическая характеристика структуры
селезенки при цитопениях иммунного генеза» (шифр «004»)
Разработан способ морфометрической оценки прогноза течения
апластической анемии (АА) после спленэктомии путем вычисления массы
маргинальной зоны селезенки по гистологическим срезам. Установлено, что
масса маргинальной зоны
≤ 1,9 г отражала благоприятный прогноз, а – >
1,9 г указывала на неблагоприятное течение заболевания. Доказано, что при
иммунной тромбоцитопении макрофаги селезенки (СD68+), захватывающие
опсонизированные тромбоциты через FcγRI, являются главными АПК
GPIIb/IIIa
пептидов
и
играют
центральную
роль
в
продукции
антитромбоцитарных антител.
Разработка лабораторных подходов к иммунофенотипической и
молекулярно-биологической
оценке
клеточных
популяций
при
заболеваниях системы крови» (шифр «005»)
Показано, что в период манифестации хронического лимфолейкоза
влияние степени поражения костного мозга опухолевыми лимфоцитами на
выраженность
тромбоцитопении
более
значимо,
чем
наличие
аутосенсибилизации. Выявлено, что уровень экспрессии молекулы CD3 в
пределах популяции CD3+CD19- у больных с аутосенсибилизацией оказался
более низким, чем у больных без аутотромбоцитарных антител, что может
быть расценено как признак понижения функциональной активности Тлимфоцитов при аутосенсибилизации. Установлено, что при оценке
результата
иммунофенотипирования
при
В-клеточных
хронических
лимфопролиферативных заболеваниях на основании базовых маркеров
параметры плотности экспрессии антигена CD45 имеют дополнительное
диагностическое значение. Двухцветное окрашивание CD45/CD14 имеет
определенную ценность при выполнении иммунофенотипирования, так как
позволяет наиболее корректно выделять лимфоцитарный полигон для
анализа.
Тема «Характеристика иммунного ответа у онкогематологических
больных - носителей HCV» (шифр «006»)
Доказано, что рецептор/лигандная система инициации апоптоза при Вклеточных опухолях лимфатической системы (В-ОЛС) имеет статистически
значимые взаимосвязи между рецепторными и растворимыми факторами
апоптоза
различной
направленности.
Большинство
корреляционных
взаимоотношений найдено между степенью экспрессии CD14+ и CD95+антигенов, а также концентрацией TRAIL, TNF-α, и IL-2. Кроме того,
установлена генетическая компонента в развитии В-ОЛС, заключающаяся в
достоверном преобладании С аллеля гена CD14 (C-159T). Полученные
данные свидетельствуют о дефектности механизмов апоптоза при В-ОЛС,
приводящей к прогрессированию опухолей и снижению эффекта от
проводимой химиотерапии.
Тема «Разработка новой схемы гепатотропной терапии больных
гемофилией» (шифр «007»)
Доказана эффективность гепатотропной терапии препаратами гептрал
и фосфоглив у больных гемофилией с хроническим посттрансфузионным
вирусным гепатитом С. За счет репаративного, иммуномодулирующего и
противовирусного действий фосфоглива у данной категории лиц достигнут
более быстрый и значимый эффект, чем при использовании гептрала. Однако
только продление курса внутривенного введения фосфоглива позволило
достичь нормализации всех биохимических показателей:
общего
билирубина,
целесообразность
АсАТ
и
использования
АлАТ.
данной
Обоснована
схемы
концентраций
экономическая
терапии
у
больных
гемофилией с хроническим посттрансфузионным вирусным гепатитом С.
Тема «Медико-социальная характеристика донорских кадров»
(шифр «008»)
Выявлены разнонаправленные изменения со стороны показателей
коагуляционного гемостаза у различных категорий доноров. Установлено,
что у доноров, длительно сдающих
кровь и ее компоненты, нарушения
обмена железа имеют гендерные отличия: среди доноров с наличием ,
имеющих число донаций до 10 преобладают женщины, а свыше 10 –
мужчины.
Следовательно, риск развития анемии повышен у доноров-
женщин с общим числом донаций от 1 до 3. У мужчин снижение
гемоглобина чаще развивается с увеличением донорского стажа при общем
количестве донаций более 10. Показано, что среди доноров с анемией, за
исключением первичных, превалируют лица, сдающие только цельную кровь
(44,1%), а также доноры со смешанным типом донаций (47,7%). Нельзя
исключить вероятности развития железодефицитных состояний у доноров
ПДФ, поскольку среди лиц, отведенных от донаций из-за низкого уровня
гемоглобина, 13,0% мужчин и 6,6% женщин, сдававших только плазму.
Тема «Разработка нового криоконсерванта для сохранения клеток крови
при температурах минус 80° и минус 196°С» (шифр «009»)
В результате проведенных исследований выявлено, что одним из
эффективных режимов замораживания клеточных суспензий в программном
замораживателе PLANER PLC является: охлаждение биоматериала от
температуры плюс 20-24оС до температуры плюс 4оС - со скоростью 2оС/мин.
Применяемая программа позволила сохранить от 94,2 до 97,1% ЯКК от их
исходного количества при замораживании-отогревании и сроке хранения в
жидком азоте до 60 суток.
Тема «Разработка и внедрение иммунологических методов повышения
эффективности гемокомпонентной терапии, профилактики
посттрансфузионных осложнений и диагностики иммунных цитопений»
(шифр «0010»)
Установлено,
что
антиэритроцитарные
антитела
выявляются
достоверно чаще у реципиентов, чем у доноров. Частота выявления анти-с и
анти-К антител достоверно не различается у доноров и реципиентов. В то же
время, индекс сенсибилизации к антигену Е достоверно выше у реципиентов,
чем у доноров компонентов крови.
Определена
частота встречаемости
редких фенотипов системы Резус у доноров крови и (или) ее компонентов.
Типирование антигенов эритроцитов является также одним из основных
исследований
при
создании
банка
долгосрочного
хранения
криоконсервированных компонентов крови.
Тема «Совершенствование методов контроля качества препаратов
иммуноглобулина человека» (шифр «0011»)
Завершены ускоренные и долгосрочные испытания стабильности
кандидатов в стандартный образец (КСО) антител человека к вирусу
клещевого энцефалита. Полученные результаты сопоставлены с «базовыми»
показателями образцов, заложенных на хранение при температуре минус
(150 ± 2) °С. Установлен срок хранения КСО, в течение которого снижение
содержания целевых антител не превышает 5 % от исходного уровня.
Разработана методика определения специфической активности сырья
(плазмы крови доноров) и препарата иммуноглобулина против клещевого
энцефалита
с
использованием
стандартного
образца.
Эмпирически
установлены оптимальные условия и порядок определения Fc-функции
препаратов
иммуноглобулина
человека.
Проведены
валидационные
испытания разработанной методики.
Тема «Изучение иммуногематологических аспектов репродукции»
(шифр «0012»)
Определена частота встречаемости НРА генов у активных доноров
компонентов крови станции переливания крови института и
пациентов
гематологической клиники. Наибольшее клиническое значение имеет
определение частоты аллеля НРА-1b в гомозиготном состоянии. Выявление
данного генетического сочетания у реципиентов сопряжено с высоким
риском образования
анти-НРА-1а антител и, как следствие, рефрактерности
к переливаниям тромбоцитов. Генотип НРА-1bb у беременных женщин
является
показанием
возможности
новорожденных
рождения
(NAIT).
для
углубленного
ребенка
Трансфузии
с
обследования
иммунной
тромбоцитов
вследствие
тромбоцитопении
таким
пациентам
возможны только от доноров НРА-1bb.
Тема "Разработка комплексного лечения больных с глубокими
отморожениями конечностей с использованием инфузионнотрансфузионных средств" (шифр «0013»)
Разработана схема комплексного лечения больных с использованием
инфузионно-трансфузионных средств.
Применение
названной
схемы
терапии существенно улучшает результаты лечения данной категории
больных,
что
подтверждается
положительной
гемостаза и иммунитета, а также вязкости крови.
динамикой
показателей