EUROLINE Neuronal Antigens Profile 2 (IgG)
advertisement
1 Neuronal Antigens Profile 2 EUROLINE (IgG), EUROIMMUN AG ___________________________________________________________________________________________ Регистрационное удостоверение ФСЗ №2010/07279 от 24.06.2010 г. Нейрональные Антигены Профиль 2 (IgG) EUROLINE Neuronal Antigens Profile 2 (IgG) Набор для качественного определения in vitro аутоантител класса IgG к 6 нейрональным антигенам: амфифизину, CV2.1, PNMA2 (Ma2/Ta), Ri, Yo и Hu в сыворотке или плазме крови человека методом иммуноблотинга. Номер по каталогу: DL 1111-1601-2 G Набор рассчитан на 16 определений НАЗНАЧЕНИЕ Набор Neuronal Antigens Profile 2 EUROLINE (IgG) предназначен для качественного определения in vitro аутоантител класса IgG человека к 6 различным нейрональным антигенам: амфифизину, CV2.1, PNMA2 (Ma2/Ta), Ri, Yo и Hu в сыворотке и плазме крови. ПОКАЗАНИЯ К ПРИМЕНЕНИЮ Паранеопластический неврологический синдром (PNS). ПРИНЦИП МЕТОДА Тест Neuronal Antigens Profile 2 EUROLINE (IgG) основан на методе иммуноблотинга. Набор содержит тестовые стрипы, на которые нанесены параллельные полосы высокоочищенных антигенов. Тестовые стрипы инкубируют на первой стадии реакции с образцом разведенной сыворотки или плазмы крови пациента. В случае если образец положительный, специфические антитела класса IgG (а также классов IgA и IgM) будут связываться с соответствующими антигенами. Для обнаружения связанных антител проводится вторая инкубация с использованием ферментного конъюгата (антитела к IgG человека, меченые щелочной фосфатазой), который способен вызывать развитие цветной реакции. МАТЕРИАЛЫ И РЕАГЕНТЫ Компонент 1. Тестовые стрипы, покрытые антигенами: амфифизин, CV2.1, PNMA2 (Ma2/Ta), Ri, Yo и Hu 2. Положительный контроль (IgG человека), 100× концентрат 3. Ферментный конъюгат Козьи антитела к IgG человека, конъюгированные с щелочной фосфатазой; 10× концентрат 4. Буфер для разведения образцов Готов к использованию 5. Промывочный буфер 10× концентрат 6. Раствор субстрата Нитроголубой тетразолий хлорид/5-бром-4-хлор-3индолил-фосфат (NBT/BCIP), готов к использованию 7. Оценочный протокол 8. Лоток для инкубации 9. Пластиковая пленка 10. Инструкция по применению набора Серия Для in vitro диагностики Количество Обозначение 16 × 1 1 × 0,02 мл STRIPS POS CONTROL 100× 1 × 3 мл CONJUGATE 10× 1 × 100 мл SAMPLE BUFFER 1 × 50 мл WASH BUFFER 10× 1 × 30 мл SUBSTRATE 1 шт. 2 × 8 каналов 1 шт. 1 экз. Температура хранения Невскрытый набор использовать до ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ НАБОРА Набор следует хранить при температуре от +2 °С до +8 °С. Не замораживать. Невскрытые компоненты набора сохраняют стабильность в течение всего указанного срока годности набора. УДАЛЕНИЕ ОТХОДОВ Неразведенную сыворотку крови пациентов и тестовые стрипы после инкубации следует рассматривать как инфицированные отходы и обращаться с ними соответствующим образом. Все реагенты следует удалять в соответствии с действующими официальными инструкциями. Следующие компоненты набора не поставляются вместе с набором, но могут быть заказаны: ZD 9899-0130/10 – Лоток для инкубации на 30 каналов (черный, белый) ___________________________________________________________________________________________ © Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2011 тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru 2 Neuronal Antigens Profile 2 EUROLINE (IgG), EUROIMMUN AG ___________________________________________________________________________________________ ZD 9899-0148/10 – Лоток для инкубации на 48 каналов (черный) Для создания рабочего протокола и оценки проинкубированных стрипов с использованием программного обеспечения EUROLineScan необходимы зеленая бумага и адгезивная пленка (обращайтесь в ЗАО «АНАЛИТИКА»): ZD 9880-0101 - Зеленая бумага ZD 9885-0116 - Адгезивная пленка приблизительно на 16 стрипов ZD 9885-0130 - Адгезивная пленка приблизительно на 30 стрипов ПОДГОТОВКА И СТАБИЛЬНОСТЬ РЕАГЕНТОВ Примечание: Все реагенты необходимо прогреть до комнатной температуры (от +18 °С до +25 °С) в течение 30 минут перед использованием. Невскрытые реагенты стабильны до окончания срока годности при соблюдении условий хранения (от +2 °С до +8 °С). После вскрытия реагенты стабильны в течение 12 месяцев или до конца срока годности, что наступает раньше, если ниже не оговорены особые условия. Вскрытые реагенты необходимо также хранить при температуре от +2 °С до +8 °С и защищать от контаминации. Тестовые стрипы, покрытые антигенами: Готовы к использованию. Во избежание конденсации влаги на стрипах, не вскрывайте пакет до тех пор, пока он не нагреется до комнатной температуры. Вынув необходимое количество стрипов, остальные неиспользованные стрипы немедленно плотно закройте в той же защитной упаковке и храните при температуре от +2 °С до +8 °С. - Положительный контроль: Поставляется в виде 100-кратного концентрата. Для приготовления готового к использованию контроля из флакона с концентратом следует отобрать необходимое количество жидкости с помощью пипетки с чистым наконечником и разведите 1:101 буфером для разведения образцов. Например: добавьте 15 мкл контроля к 1,5 мл буфера для разведения образцов и тщательно перемешайте. Готовый к использованию разведенный контроль следует использовать до конца рабочего дня. - Ферментный конъюгат: Поставляется в виде 10-кратного концентрата. Отберите необходимое количество жидкости из флакона с концентратом с помощью пипетки с чистым наконечником и разведите 1:10 буфером для разведения образцов. Например, для проведения анализа на 1 тестовом стрипе, смешайте 0,15 мл концентрата ферментного конъюгата с 1,35 мл буфера для разведения образцов. Разведенный раствор ферментного конъюгата следует использовать до конца рабочего дня. - Буфер для разведения образцов: Готов к использованию. - Промывочный буфер: Поставляется в виде 10-кратного концентрата. Для приготовления готового к использованию промывочного буфера отберите необходимое количество жидкости из флакона с концентратом с помощью пипетки с чистым наконечником и разведите 1:10 дистиллированной водой. Например, для проведения анализа на 1 тестовом стрипе разведите 1 мл концентрата промывочного буфера в 9 мл дистиллированной воды. Разведенный буфер следует использовать до конца рабочего дня. Раствор субстрата: Готов к использованию. После отбора необходимого количества реагента из флакона немедленно вновь закройте его, так как раствор чувствителен к свету. Внимание! Использованный контроль был проверен на отсутствие антигена гепатита В, а также антител к вирусам ВИЧ-1 и ВИЧ-2 и вирусу гепатита С методами иммуноферментного анализа или непрямой иммунофлуоресценции. Тем не менее, все используемые материалы следует считать потенциально опасными и обращаться с ними, соблюдая необходимые меры предосторожности. Некоторые реагенты являются ядовитыми (буфер, субстратный раствор). Избегайте контакта с кожей. - ПОДГОТОВКА И СТАБИЛЬНОСТЬ ИССЛЕДУЕМЫХ ОБРАЗЦОВ Материал образцов: Сыворотка или плазма (с ЭДТА, гепарином или цитратом) крови человека. Стабильность: Исследуемые образцы, предназначенные для анализа этим методом, можно хранить до 14 дней при температуре от +2 оС до +8 оС. Разведенные образцы необходимо использовать в течение одного рабочего дня. Разведение образцов: Исследуемые образцы разводят 1:101 буфером для разведения образцов. Например: разведите 15 мкл исследуемого образца в 1,5 мл буфера для разведения образцов и тщательно перемешайте на вортексе (пипетка для перемешивания не пригодна). ___________________________________________________________________________________________ © Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2011 тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru 3 Neuronal Antigens Profile 2 EUROLINE (IgG), EUROIMMUN AG ___________________________________________________________________________________________ ПРОЦЕДУРА ИССЛЕДОВАНИЯ Блокировка стрипов Выньте из упаковки требуемое количество тестовых стрипов и поместите каждый стрип в отдельный канал. При этом должен быть виден номер стрипа, указанный в его нижней части. Заполните каналы пластикового лотка для инкубации буфером для разведения образцов (по 1,5 мл буфера на один канал). Инкубируйте 5 минут при комнатной температуре на шейкере рокерного типа («качалке»). Затем удалите всю жидкость из каждого канала. Инкубация образцов (1-я стадия) Внесите в каждый канал по 1,5 мл разведенного образца сыворотки или плазмы крови и инкубируйте при комнатной температуре (от +18 °С до +25 °С) в течение 30 минут на шейкере рокерного типа. Промывка Удалите жидкость из каждого канала и затем промойте 3 раза по 5 минут на шейкере-качалке, внося каждый раз по 1,5 мл промывочного буфера на канал. Инкубация с конъюгатом (2-я стадия) Внесите в каждый канал по 1,5 мл разведенного ферментного конъюгата (меченые щелочной фосфатазой антитела к IgG человека). Инкубируйте в течение 30 минут при комнатной температуре (от +18 ° до +25 °) на шейкере рокерного типа. Промывка Удалите жидкость из каждого канала и затем промойте 3 раза по 5 минут на шейкере рокерного типа, внося каждый раз по 1,5 мл промывочного буфера на канал. Инкубация с субстратом (3-я стадия) Внесите в каждый канал по 1,5 мл раствора субстрата. Инкубируйте в течение 10 минут при комнатной температуре (от +18 ° до +25 °С) на шейкере рокерного типа. Остановка реакции Удалите жидкость из каждого канала и затем промойте 3 раза по 1 минуте дистиллированной водой. Оценка результатов Поместите тестовый стрип на оценочный протокол, высушите на воздухе и проведите оценку результатов. Для автоматической инкубации с использованием прибора EUROBlotMaster выберите программу Euro01 AAb EL30. ОЦЕНКА И ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ ТЕСТА Neuronal Antigens Profile 2 EUROLINE (IgG) Интерпретация: Согласно правилам Немецкого неврологического общества, аутоантитела, ассоциированные с паранеопластическими неврологическими синдромами, всегда следует определять как минимум двумя независимыми методами (9). Результат, полученный с помощью данного набора Neuronal Antigens Profile 2 EUROLINE, следует сравнить с результатом непрямого иммунофлуоресцентного теста (IIFT BIOCHIP Mosaic Neurulogy). Оценивать полученные данные теста следует только тогда, когда наблюдается хорошее соответствие результатов двух тест-систем и клинической картины заболевания. Регистрация результатов реакции Для оценки проинкубированных тестовых стрипов мы рекомендуем использовать программное обеспечение EUROLineScan. После промывки дистиллированной или деионизованной водой, поместите с помощью пинцета проинкубированные влажные тестовые стрипы на покрытое адгезивной пленкой поле зеленого оценочного протокола. Пока стрип влажный, его можно двигать по пленке. Осторожно прижмите их листом фильтровальной бумаги и оставьте сохнуть на воздухе. После высыхания тестовые стрипы прочно зафиксируются на пленке. Протокол с сухими стрипами следует отсканировать на планшетом сканере и оценить с помощью программы EUROLineScan. Для получения более полной информации о программе обратитесь к инструкции пользователя EUROLineScan. В программе EUROLineScan тест Neuronal Antigens Profile 2 EUROLINE имеет код NeuroAP_2. Для визуальной оценки поместите проинкубированные стрипы на оценочный протокол и совместите их с имеющейся разметкой для визуальной оценки. На стрипах имеется контрольная полоса. Инкубация проведена правильно, если контрольная полоса в результате реакции ярко окрашена. ___________________________________________________________________________________________ © Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2011 тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru 4 Neuronal Antigens Profile 2 EUROLINE (IgG), EUROIMMUN AG ___________________________________________________________________________________________ Антигены и их размещение на стрипах: Тестовые стрипы EUROLINE покрыты следующими антигенами: Амфифизин: Белок амфифизин I, произведенный очищенный с помощью биохимических методов. и CV2.1: Рекомбинантный неполный белок CV2 человека, очищенный с помощью биохимических методов. Содержит эпитопы только N-терминальной части антигена. PNMA2 (Ma2/Ta): Белок PNMA2 (Ma2/Ta), произведенный и очищенный с помощью биохимических методов. Амфифизин CV2.1 PNMA2 (Ma2/Ta) Ri: Белок NOVA1 (Ri, 55 кДа), произведенный и очищенный с помощью биохимических методов. Ri Yo: Белок Yo (cdr62), произведенный и очищенный с помощью биохимических методов. Yo Hu: Белок HuD, произведенный и очищенный с помощью биохимических методов. Hu Контроль Нейрональные антитела Наименование антител Анти-амфифизиновые Анти-CV2 Анти-PNMA2 (Ma2/Ta) Анти-Ri / ANNA-2 Анти-Yo / PCA-1 Анти-Hu / ANNA-1 Локализация антигенов Мембрана синаптических везикул Цитоплазма олигодендроцитов Нейроны и семенники Клеточные ядра нейронов центральной нервной системы Цитоплазма клеток Пуркинье (мозжечок) Ядра клеток и нейроны центральной и периферической нервной системы На основании интенсивности сигнала все результаты можно разделить на отрицательные, пограничные и положительные. Сигнал Нет сигнала Окраска полосы очень слабая Окраска полосы от умеренной до интенсивной Окраска полосы очень интенсивная, сравнимая с окраской контрольной полосы Интенсивность в EUROLineScan 0-5 6-10 11-25 или 26-50 >50 Результат 0 (+) +, ++ +++ Отрицательный Пограничный Положительный Сильно-положительный При определении антител к нейрональным антигенам всегда параллельно с тестом Neuronal Antigens EUROLINE следует использовать непрямой иммунофлуоресцентный тест (НРИФ). Таким образом проверяется достоверность полученных данных и отсекаются ложноположительные результаты, кроме того, НРИФ обеспечивает выявление более широкого спектра антител. Особенно хорошо применять в качестве теста НРИФ набор EUROIMMUN BIOCHIP Mosaic for neurology, используя в качестве субстратов замороженные срезы следующих тканей приматов: периферических нервов, мозжечка, мозга, кишечника и печени плода (для дифференциации ANA дополнительно можно использовать Нер-2). Примечание: В настоящее время еще далеко не все паранеопластические антигены (на которые вырабатываются аутоантитела, ассоциированные с паранеопластическими синдромами) идентифицированы, очищены и достаточным образом охарактеризованы. В том случае, если тест НРИФ даст положительный результат по нейрон-специфичным антителам, а тест Neuronal Antigens Profile 2 EUROLINE – даст отрицательный результат, следует затем провести тестирование методом Вестерн-блота с помощью набора Anti-Neuronal Antigens EUROLINE WB (в котором используются электрофоретически разделенный полный экстракт антигенов мозжечка плюс рекомбинантные антигены Hu, Yo и Ri, кат. № DW 1111-2G) в качестве подтверждающего теста (22). ___________________________________________________________________________________________ © Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2011 тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru 5 Neuronal Antigens Profile 2 EUROLINE (IgG), EUROIMMUN AG ___________________________________________________________________________________________ АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ Диапазон определения: Метод EUROLINE является качественным, диапазон определения не задан. Диапазон измерения результатов в единицах интенсивности окрашивания программы EUROLineScan применим только для разведения образца 1:101, предусмотренного методикой данного теста. Перекрестные реакции Качество используемых субстратов антигенов и источников антигенов гарантирует высокую специфичность наборов EUROLINE. Данный набор EUROLINE специфически определяет антитела класса IgG к амфифизину, CV2, PNMA2 (Ma2/Ta), Ri, Yo и Hu. Перекрестных реакций с другими аутоантителами не обнаружено. Интерференция: Не отмечено изменения аналитических характеристик при исследовании в данном наборе гемолизированных, липемических или желтушных образцов с концентрациями гемоглобина вплоть до 5 мг/мл, триглицеридов – до 20 мг/мл и билирубина – до 0,4 мг/мл. Воспроизводимость результатов между опытами и в пределах одного опыта Воспроизводимость результатов между опытами оценивали многократным повторным исследованием одних и тех же охарактеризованных образцов в течение нескольких дней, воспроизводимость в пределах одного опыта – многократным исследованием охарактеризованных образцов в течение одного дня. В каждом случае интенсивность полос находилась в пределах установленного диапазона. Таким образом, данный тест EUROLINE показывает очень высокую воспроизводимость в пределах одной постановки и между постановками. Чувствительность и специфичность На антитела к нейрональным антигенам были протестированы 66 серологически охарактеризованных образцов сывороток от пациентов с паранеопластическим синдромом (PNS) и образцы сывороток от 40 доноров крови (в качестве отрицательной контрольной группы). Антигены N Чувствительность Амфифизин 2 100% PNMA2 (Ma2/Ta) 9 89% Ri (Nova1) 8 100% Yo (cdr62) 20 100% Hu (HuD) 27 100% Специфичность тест-системы, рассчитанная по образцам сывороток доноров, составляет 100%. Чувствительность и специфичность для фрагмента антигена CV2.1 (рекомбинантный неполный белок CV2 человека, очищенный с помощью биохимических методов. Содержит эпитопы только N-терминальной части антигена): Четыре сыворотки, предварительно охарактеризованные как положительные по антителам к CV2 при помощи внешней референсной тест-системы, прошедшей СЕ-сертификацию, показали положительный результат с полосой CV2.1 тестового стрипа Neuronal Antigens Profile 2 EUROLINE (IgG). Сыворотки пациентов, которые тестировались в основном на аутоантитела в рутинной лабораторной практике (n=58), показали отрицательный результат. КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ В соответствии с природой опухоли, опухолевые клетки экспрессируют антигены амфифизин, CV2, PNMA2 (Ma2/Ta), Ri, Yo или Hu, которые могут вызвать образование специфических аутоантител. Эти аутоантитела связываются с соответствующими антигенами, локализованными в нервной ткани, и таким образом возможно оказываются вовлеченными в неврологические заболевания, известные как паранеопластические синдромы [1, 2, 3]. В настоящее время используются два вида номенклатуры для обозначения антител к нейрональным антигенам: один вид включает использование первых двух букв имени пациента (например, Hu для Huill, Yo для Young, Ma для Margret), другой вид использует описание иммуногистохимического окрашивания (ANNA = антиядерные нейрональные антитела). Мы используем номенклатуру Познера (анти-Hu, Yo, Ma и т.д.), так как она основывается на названиях антигенов и, кроме того, обеспечивает дополнительную ценность в диагностическом плане, т.к. можно использовать два независимых метода исследования одних и тех же антител [2, 3, 4, 5, 6]. Паранеопластические синдромы определяются как клинические синдромы, сопровождающие раковые опухоли безотносительно сосудистых или инфекционных факторов или возникающие в результате побочного действия противоопухолевой терапии [8, 9, 10]. Их причиной являются запускаемые опухолью иммунологические механизмы, эффект которых может проявляться вдали от места локализации первичной ___________________________________________________________________________________________ © Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2011 тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru 6 Neuronal Antigens Profile 2 EUROLINE (IgG), EUROIMMUN AG ___________________________________________________________________________________________ опухоли и/или метастазов [11, 12]. Паранеопластическими синдромами сопровождаются приблизительно 15% раковых заболеваний, в особенности рак легкого и рак желудка [5, 6, 8, 9, 13, 14, 15, 16, 17, 18]. Паранеопластические отоневро-офтальмологические синдромы обычно возникают при энцефалите ствола головного мозга и/или при дегенерации мозжечка [19, 20]. Обнаруживаемая связь паранеопластических синдромов с различными иммунными ответами на онконейрональные белки (такие как анти- Hu, анти-Ri, анти-Yo, анти-Ma, анти-Ta и анти-Tr) или с иммунологическими механизмами, направленными на неизвестные антигены, способствует продвижению исследований этих механизмов [17, 19, 20]. Паранеопластический синдром или положительный результат теста на присутствие антител к вышеперечисленным антигенам могут предупреждать о развитии злокачественной опухоли еще до установления диагноза рака [21]. Пациентов с положительными результатами теста на антинейрональные антитела необходимо немедленно проверять на наличие опухолей [15, 16, 22, 23, 24, 25]. Антитела могут быть найдены и в сыворотке, и в спинномозговой жидкости. Основываясь на общем количестве IgG, концентрация антител в спинномозговой жидкости выше, чем в сыворотке [18,26,27]. Определение антител к амфифизину, CV2, PNMA2 (Ma2/Ta), Ri, Yo или Hu очень существенно для диагностики и контроля за течением заболевания и успешностью терапии при паранеопластических неврологических синдромах (PNS), так как они ассоциированы с раком. Противоопухолевая терапия также необходима при лечении неврологических симптомов [4, 10, 19, 21, 26, 27]. Антитела к амфифизину (128 кДа) направлены на белок амфифизин, отвечающий за везикулярный эндоцитоз. Определение антител к амфифизину играет важную диагностическую роль при паранеопластических синдромах (таких как миастенический синдром Ламберта-Итона (= карциноматозная миопатия), автономной чувствительной сенсо-моторной полиневропатии (болезненном процессе, затрагивающем периферические нервы), энцефаломиелите с ригидностью, мозжечковом синдроме, сенсорной невропатии, опсоклонус-миоклонус синдроме с атаксией, синдроме “скованного человека”), при мелкоклеточном бронхиальном раке, карциноме молочной железы, тимоме, карциноме кишечника и болезни Ходжкина [28, 29, 30, 31, 32, 33]. Неврональные аутоиммунные реакции могут сопровождаться эндокринными аутоиммунными реакциями, такими как синдром “скованного человека”. Параллельное появление специфических аутоантител к серому веществу (GMAb) и аутоантител к островковым клеткам (ICAb) говорит о связи между паранеопластическим синдромом и инсулин-зависимым сахарным диабетом (IDDM) [34]. Определение антител к антигену CV2 имеет большое значение для диагностики паранеопластических синдромов (таких как лимбический энцефалит, фокальная эпилепсия, синдром опсоклонуса-миоклонуса с атаксией, энцефалит ромбовидного мозга, экстрапирамидальный двигательный синдром, паранеопластическая дегенерация мозжечка, автономная чувствительная сенсомоторная полиневропатия), мелкоклеточного бронхиального рака, тимомы [4, 19, 27, 28, 35]. Определение антител к антигену PNMA2 (Ma2/Ta) имеет отношение к диагностике паранеопластических синдромов (таких как лимбический энцефалит, фокальная эпилепсия, опсоклонус-миоклонус синдром с атаксией, энцефалит ромбовидного мозга, экстрапирамидальный двигательный синдром, паранеопластическая дегенерация мозжечка), семиномы и других карцином [19, 21]. Определение антител к антигену Ri имеет диагностическое значение при паранеопластических синдромах (таких как синдром опсоклонуса-миоклонуса с атаксией, энцефалит ромбовидного мозга), при быстрорастущих опухолях ствола головного мозга, мелкоклеточном бронхиальном раке, карциноме молочной железы и карциноме яичника [7, 10, 18, 19, 27, 28, 36, 37, 38, 39]. Определение антител к антигену Yo играет важную роль в диагностике паранеопластических синдромов (таких как синдром опсоклонуса-миоклонуса с атаксией, паранеопластическая дегенерация мозжечка), аденокарциноме пищевода, карциноме простаты, карциноме матки, карциноме молочной железы, карциноме яичников и при болезни Ходжкина с антителами к клеткам Пуркинье, которые дегенерируют после успешного лечения лимфомы [19, 27, 28, 29, 36, 37]. Определение антител к антигену Hu также диагностически важно при паранеопластических синдромах (таких как ретинопатия, фокусирующий энцефалит ствола головного мозга, мозжечка и лимбической системы, фокальная эпилепсия, синдром опсоклонуса-миоклонуса с атаксией, энцефалит ромбовидного мозга, экстрапирамидальный двигательный синдром, паранеопластическая дегенерация мозжечка, миелит, автономная чувствительная сенсорно-моторная полиневропатия, мононевропатия, мотонейронные синдромы, миастенический синдром Ламберта-Итона), мелкоклеточном бронхиальном раке, карциноме простаты и нейробластоме [2, 3, 5, 9, 19, 27, 28, 37, 38, 40, 41, 42]. Антитела, неврологические синдромы и ассоциированные опухоли [5, 6, 43] Антитела Анти-Hu (ANNA-1) Анти-Yo (PCA-1) неврологические синдромы сенсорная невропатия хроническая желудочно-кишечная псевдообструкция паранеопластическая дегенерация мозжечка лимбический энцефалит паранеопластическая дегенерация мозжечка Типичные ассоциированные опухоли мелкоклеточный бронхиальный рак карцинома яичников, карцинома молочной железы ___________________________________________________________________________________________ © Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2011 тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru 7 Neuronal Antigens Profile 2 EUROLINE (IgG), EUROIMMUN AG ___________________________________________________________________________________________ Анти-CV2 Анти-Ri (ANNA2) хорея сенсорная невропатия хроническая желудочно-кишечная псевдообструкция паранеопластическая дегенерация мозжечка лимбический энцефалит лимбический энцефалит энцефалит ствола головного мозга паранеопластическая дегенерация мозжечка энцефалит ствола головного мозга Антиамфифизиновые синдром “скованного человека” различные Анти-Mа2 (Ma/Ta) мелкоклеточный бронхиальный рак, тимома семинома, карцинома легких карцинома молочной железы, мелкоклеточный бронхиальный рак карцинома молочной железы, мелкоклеточный бронхиальный рак Принятые сокращения: ANNA-1 Анти-нейрональные ядерные аутоантитела, тип 1 ANNA-2 Анти-нейрональные ядерные аутоантитела, тип 2 LEMS синдром миастении Ламберта-Итона PCA 1 антитела к клеткам Пуркинье PKD паранеопластическая дегенерация мозжечка PLE паранеопластический лимбический энцефалит POMA паранеопластическая атаксия с опсоклонией и миоклонией Европейская сеть, занимающаяся паранеопластическими неврологическими заболеваниями (PNS Euronetwork) установила диагностические критерии (Graus и др. 2004), по которым возможна постановка диагноза паранеопластического синдрома на двух уровнях, а именно: истинный (definite) и возможный (possible) паранеопластический синдром [30, 39, 40, 41]. Схема диагностики паранеопластического синдрома [2, 3, 5, 43, 44]. Неврологический синдром классический паранеопластический синдром других причин не найдено наличие хорошо отсутствие охарактеризованных антинейрональных антинейрональных антител антител диагноз опухоли в течение 5 лет Прочие случаи атипичные симптомы наличие хорошо наличие охарактеризованных недостаточно антинейрональных охарактеризованных антител антител высокий риск развития опухоли опухоль в течение 5 лет установленная опухоль отсутствие антинейрональных антител диагноз опухоли в течение 2 лет улучшение после противоопухолевой терапии истинный PNS например, истинный PNS например, возможный PNS например, истинный PNS например, возможный PNS например, сенсорная невропатия сенсорная невропатия сенсорная невропатия сенсорносенсорносенсорнодвигательная двигательная двигательная ПНП ПНП ПНП + Анти-Hu + мелкоклеточный бронхиальный рак + курение, кахексия измененный показатель СОЭ сенсорнодвигательная полиневропатия (ПНП) + Анти-Hu + атипичные антитела + меланома возможный PNS например, + атипичные антитела истинный PNS например, + карцинома кишечника + улучшение после операции возможный PNS например, сенсорнодвигательная ПНП + меланома СПИСОК ЦИТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ Список литературы приведен в оригинале инструкции на английском языке. Внимание! Перевод сделан с английского оригинала инструкции. Перед постановкой исследования сверьте номер и дату издания вложенного в набор оригинала с указанными в настоящем переводе (см. внизу справа). При несовпадении номеров или дат обратитесь в «Аналитику» за новым переводом, либо руководствуйтесь оригиналом инструкции. ___________________________________________________________________________________________ © Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2011 тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru 8 Neuronal Antigens Profile 2 EUROLINE (IgG), EUROIMMUN AG ___________________________________________________________________________________________ Neuronal_Antigens_Profile 2_EUROLINE_DL 1111 -2G.rus.doc 5/20/2011 5:22:00 PM Оригинал DL_1111-2G_A_UK_C02.doc version: 29/03/2011 10:39 ___________________________________________________________________________________________ © Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2011 тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru 9 Neuronal Antigens Profile 2 EUROLINE (IgG), EUROIMMUN AG ___________________________________________________________________________________________ EUROIMMUN Neuronal Antigens Profile 2 EUROLINE (IgG) Протокол инкубации Блокировка: Поместите блотовый стрип в канал лотка для инкубации, и внесите в лоток 1,5 мл буфера для разведения образцов 5 мин При встряхивании 1. Инкубация с образцом: Удалите жидкость, внесите в канал 1,5 мл разведенного образца сыворотки (1:101) 30 мин При встряхивании Промывка: Удалите жидкость, промойте 3 раза по 5 минут каждый канал 1,5 мл промывочного буфера 2. Инкубация с конъюгатом: Удалите жидкость, внесите в канал 1,5 мл ферментного конъюгата (1:10) 30 мин При встряхивании Промывка: Удалите жидкость, промойте 3 раза по 5 минут каждый канал 1,5 мл промывочного буфера 3. Инкубация с субстратом: Удалите жидкость, внесите в канал 1,5 мл раствора субстрата 10 мин При встряхивании Остановка реакции: Удалите жидкость, промойте 3 раза по 1,5 мл дистиллированной воды Оценка C помощью EUROLineScan ___________________________________________________________________________________________ © Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2011 тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru
