Anti-Borrelia plus VlsE-EI 2132-9601-2G_rus

Anti-Borrelia plus VlsE ELISA (IgG), EUROIMMUN
1
_________________________________________________________________________________________________
Боррелия плюс антиген VlsE ИФА (IgG)
Anti- Borrelia plus VlsE ELISA (IgG)
Иммуноферментный тест для полуколичественного или количественного определения антител класса IgG к
антигенам Borrelia (в том числе VlsE) в сыворотке и плазме крови человека
Номер по каталогу: EI 2132-9601-2G
Набор рассчитан на 96 определений
НАЗНАЧЕНИЕ
Набор предназначен для выявления инфекций, вызванных возбудителем клещевого боррелиоза. К ним
относятся такие заболевания как хроническая мигрирующая эритема, доброкачественный лимфаденоз кожи,
хронический атрофический акродерматит, артрит, кардит, лимфоцитарный менингорадикулит,
нейроборрелиоз.
ПРИНЦИП МЕТОДА
Набор для иммуноферментного анализа Anti-Borrelia plus VlsE ELISA (IgG) предназначен для
полуколичественного или количественного in vitro определения антител класса IgG к антигенам Borrelia в
сыворотке и плазме крови человека. В набор включены 8-луночные стрипы, разделяемые на отдельные
лунки, на поверхности которых иммобилизована смесь экстрактов цельных антигенов Borrelia burgdorferi
sensu stricto, Borrelia afzelii, Borrelia garinii и рекомбинантного антигена VlsE Borrelia burgdorferi. На первой
реакционной стадии в лунках инкубируют разведенные исследуемые образцы. Имеющиеся в
положительных образцах специфичные антитела класса IgG (а также классов IgA и IgM) к Borrelia
связываются с антигенами. Для выявления связавшихся антител проводят вторую инкубацию, используя
меченные ферментом антитела к IgG человека (конъюгат фермента), способные вызвать цветную реакцию.
Интенсивность формирующегося окрашивания прямо пропорциональна концентрации антител к Borrelia в
образце.
МАТЕРИАЛЫ И РЕАГЕНТЫ
Необходимые реагенты и материалы, входящие в состав набора:
Компоненты набора
1. Лунки планшета
с иммобилизованными антигенами; 12 стрипов 8-луночных
(разделяемых на отдельные лунки), в рамке-держателе;
готовые к использованию
2. Калибратор 1
200 ОЕд/мл (IgG человека); готовый к использованию
Цвет
---
Формат
12 х 8
Символ
STRIPS
темно1 × 2,0 мл
красный
CAL 1
3.
Калибратор 2
20 ОЕд/мл (IgG человека); готовый к использованию
красный 1 × 2,0 мл
CAL 2
4.
Калибратор 3
2 ОЕд/мл (IgG человека); готовый к использованию
розовый 1 × 2,0 мл
CAL 3
5.
Положительный контроль
(IgG человека); готовый к использованию
6.
7.
1 × 2,0 мл
POS CONTROL
Отрицательный контроль
(IgG человека); готовый к использованию
зеленый 1 × 2,0 мл
NEG CONTROL
Конъюгат фермента
меченные пероксидазой антитела к IgG человека (кроличьи);
готовый к использованию
зеленый 1×12 мл
8.
Буфер для разведения образцов
готовый к использованию
голубой
9.
Промывочный буфер
10х концентрат
бесцвет1×100 мл
ный
синий
1×100 мл
CONJUGATE
SAMPLE BUFFER
WASH BUFFER 10x
10. Раствор хромоген/субстрат
ТМБ/Н2О2; готовый к использованию
бесцвет1×12 мл
ный
SUBSTRATE
11. Стоп-реагент
0,5 М раствор серной кислоты; готовый к использованию
бесцвет1×12 мл
ный
STOP SOLUTION
12. Инструкция к набору
---
1 шт.
13. Протокол с целевыми значениями
---
1 шт.
____________________________________________________________________________________________
 Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2005
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru
Anti-Borrelia plus VlsE ELISA (IgG), EUROIMMUN
2
_________________________________________________________________________________________________
Серия
Температура хранения
Для in vitro диагностики
Невскрытый набор использовать до
ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ НАБОРА
Набор должен храниться при температуре 2-8 °С. Замораживание набора не допускается. Невскрытые
компоненты набора стабильны до истечения указанного срока годности.
УТИЛИЗАЦИЯ ОТХОДОВ
Обращайтесь с исследуемыми образцами, калибраторами, контролями и проинкубированными стрипами
планшетов как с потенциально инфицированными материалами. Все реагенты и материалы, являющиеся
отходами, должны быть обработаны в соответствии с действующими нормативами.
ПРИГОТОВЛЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ РЕАГЕНТОВ
Примечание. Перед использованием все реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (1825 °С) примерно в течение 30 минут. После первого использования все реагенты стабильны до истечения
указанного срока годности при хранении при температуре 2-8 °С и предохранении от микробной
контаминации, если ниже не оговорены особые условия хранения.
- Стрипы с иммобилизованными антигенами
Стрипы готовы к использованию. Вскройте предохраняющую упаковку планшета за бороздку над
застежкой. Перед вскрытием упаковки стрипы должны быть доведены до комнатной температуры во
избежание конденсации влаги внутри лунок. После вскрытия упаковки неиспользуемые стрипы сразу
верните в пакет и плотно закройте его имеющейся на пакете самоуплотняющейся застежкой. (Не
удаляйте пакет с влагопоглотителем).
После первого вскрытия упаковки стрипы с лунками, покрытыми антигенами, можно хранить в сухом
месте при температуре 2-8 °С по меньшей мере в течение 4 месяцев.
- Калибраторы и контроли
Калибраторы и контроли готовы к использованию. Перед использованием тщательно перемешать.
- Конъюгат фермента
Конъюгат фермента готов к использованию. Перед использованием тщательно перемешать.
- Буфер для разведения образцов
Буфер для разведения образцов готов к использованию.
- Промывочный буфер
Промывочный буфер является 10-кратным концентратом. Если в концентрате промывочного буфера
о
образовались кристаллы, необходимо подогреть флакон с буфером при температуре 37 С и тщательно
перемешать перед разведением. С помощью чистой пипетки отберите необходимое количество
концентрата буфера и разведите деионизированной или дистиллированной водой (1 часть реагента плюс
9 частей дистиллированной воды).
Например, для одного стрипа: 5 мл концентрата плюс 45 мл воды.
Приготовленный разведенный промывочный буфер стабилен в течение 1 месяца при хранении при
температуре 2-8 °С и соблюдении правил использования.
- Раствор хромоген/субстрат
Раствор хромоген/субстрат готов к использованию. Закрывайте флакон сразу после использования,
поскольку содержащийся в нем раствор чувствителен к свету. Используемый раствор хромоген/субстрат
должен быть бесцветен. Не используйте раствор, если он окрасился в голубой цвет.
- Стоп-реагент
Стоп-реагент готов к использованию.
Внимание! Калибраторы и контроли были проверены на наличие антигена гепатита В, а также антител к
вирусу гепатита С, ВИЧ-1 и ВИЧ-2 с помощью методов иммуноферментного анализа и непрямой
иммунофлюоресценции, и показали отрицательные результаты. Однако, все используемые материалы
следует считать потенциально инфекционно опасными и обращаться с ними, соблюдая необходимые меры
предосторожности. Часть реагентов содержит токсичный азид натрия. Избегайте контакта реагентов с
кожей.
ПОДГОТОВКА И СТАБИЛЬНОСТЬ ИССЛЕДУЕМЫХ ОБРАЗЦОВ
Исследуемые образцы:
сыворотка крови или взятая в ЭДТА, гепарин или цитрат плазма крови.
Стабильность
Исследуемые образцы сыворотки или плазмы крови могут храниться до 14 дней при температуре 2-8 °С.
Разведенные образцы следует исследовать в течение одного рабочего дня.
____________________________________________________________________________________________
 Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2005
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru
Anti-Borrelia plus VlsE ELISA (IgG), EUROIMMUN
3
_________________________________________________________________________________________________
Разведение образцов:
Образцы сыворотки или плазмы крови пациентов разводят 1:101 буфером для разведения образцов.
Например, разведите 10 мкл сыворотки крови в 1,0 мл буфера для разведения образцов и тщательно
перемешайте на вортексе (пипетка для перемешивания не пригодна).
ПРИМЕЧАНИЕ: Калибраторы и контроли уже предварительно разведены и готовы к использованию, их
разводить не следует.
ПРОЦЕДУРА ИССЛЕДОВАНИЯ
Для полуколичественного анализа используют калибратор 2, а также положительный и отрицательный
контроли и исследуемые образцы. Для количественного анализа используют калибраторы 1, 2 и 3, а
также положительный и отрицательный контроли и исследуемые образцы.
Инкубация образцов
(1-я стадия)
Внесите в отдельные лунки планшета в соответствии со схемой внесения
реагентов по 100 мкл калибраторов, положительного и отрицательного
контролей или разведенных образцов сыворотки или плазмы крови.
Инкубируйте при комнатной температуре (18-25 °С) в течение 30 минут.
Промывка
Вручную. Удалите содержимое лунок, затем последовательно промойте все
лунки 3 раза, каждый раз внося по 300 мкл приготовленного промывочного
буфера в каждую лунку.
Автоматическая: проводите промывку в режиме с переполнением, для чего
установите в программе для соответствующего автоматического вошера,
например, TECAN Columbus Washer, параметр “Overflow” с 3-мя циклами
промывки и внесением в лунки по 400 мкл рабочего промывочного буфера.
Оставляйте промывочный буфер в каждой лунке в течение 30 – 60 секунд во
время каждого цикла промывки, затем удаляйте содержимое лунок. После
промывки (вручную или автоматической) тщательно удаляйте остатки
промывочного буфера из лунок, постукивая перевернутым планшетом о
фильтровальную бумагу.
Примечание. Остатки жидкости (>10 мкл), скапливающейся в лунках после
промывки, могут повлиять на субстратную реакцию и привести к получению
ложно заниженных значений оптической плотности. Неправильная промывка
(например, менее 3 промывочных циклов, слишком маленькие объемы
промывочного буфера или слишком короткое время реакции) может привести к
ложно завышенным значениям оптической плотности.
Инкубация конъюгата
(2-я стадия)
Внесите в лунки планшета по 100 мкл конъюгата фермента (меченных
пероксидазой антител к IgG человека). Инкубируйте при комнатной температуре
(18-25 °С) в течение 30 минут.
Промывка
Удалите содержимое лунок. Промойте, как описано выше.
Инкубация субстрата
(3-я стадия)
Внесите в лунки планшета по 100 мкл раствора хромоген/субстрат. Инкубируйте
при комнатной температуре (18-25 °С) в течение 15 минут (предохраняйте от
воздействия прямых солнечных лучей).
Остановка реакции
Внесите в лунки планшета по 100 мкл стоп-реагента в той
последовательности и с той же скоростью, как и раствор хромоген/субстрат.
Измерение
С помощью планшетного спектрофотометра измеряют интенсивность
окрашивания в лунках при длине волны 450 нм (значение референтной длины
волны между 620 нм и 650 нм) в течение 30 минут после добавления стопреагента. Перед измерением осторожно встряхните планшет для обеспечения
равномерного распределения раствора.
же
____________________________________________________________________________________________
 Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2005
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru
Anti-Borrelia plus VlsE ELISA (IgG), EUROIMMUN
4
_________________________________________________________________________________________________
СХЕМА ВНЕСЕНИЯ РЕАГЕНТОВ
A
B
C
D
E
F
G
H
1
С2
pos.
neg.
Р1
Р2
Р3
Р4
Р5
2
Р6
Р7
Р8
Р9
Р10
Р11
Р12
Р13
3
Р14
Р15
Р16
Р17
Р18
Р19
Р20
Р21
4
Р22
Р23
Р24
5
6
7
С1
С2
С3
pos.
neg.
Р1
Р2
Р3
8
Р4
Р5
Р6
Р7
Р8
Р9
Р10
Р11
9
Р12
Р13
Р14
Р15
Р16
Р17
Р18
Р19
10
Р20
Р21
Р22
Р23
Р24
11
12
Схема внесения реагентов в лунки стрипов 1–4 представляет собой образец заполнения лунок при
полуколичественном анализе 24 образцов сыворотки или плазмы крови пациентов (Р1–Р24).
Схема внесения реагентов в лунки стрипов 7–10 представляет собой образец заполнения лунок при
количественном анализе 24 образцов сыворотки или плазмы крови пациентов (Р1–Р24).
Каждый из калибраторов (С1–С3), положительный (pos.) и отрицательный (neg.) контроли и каждый из
образцов сыворотки или плазмы крови пациентов вносят в отдельную лунку. Надежность
иммуноферментного анализа можно повысить внесением каждой пробы в дубликатах.
Стрип можно разделить на отдельные лунки. Это позволяет отмерить точное количество реагентов по числу
исследуемых образцов и снизить расход реагентов.
Как положительный, так и отрицательный контроли служат внутренними контролями правильной постановки
анализа. Контроли необходимо включать в каждую постановку анализа.
РАСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ
Полуколичественный анализ
Оценка результатов полуколичественного анализа производится путем расчета соотношения оптической
плотности контроля или исследуемого образца и оптической плотности калибратора 2. При вычислениях
руководствуются следующей формулой:
Оптическая плотность контроля или исследуемого образца
Оптическая плотность калибратора 2
= Соотношение
EUROIMMUN рекомендует следующую интерпретацию результатов:
Соотношение < 0,8
Соотношение > 0,8
Соотношение > 1,1
до < 1,1
отрицательный
пограничный
положительный
При получении пограничного результата через 7 дней следует взять еще один образец крови данного
пациента и провести параллельный анализ первого и второго образцов. Исследование обоих образцов
позволяет оценить изменение титра антител, произошедшее за 7 дней.
Количественный анализ
Для определения концентрации антител к Borrelia в образцах по измеренной оптической плотности строится
калибровочная кривая. По оси Y откладывают линейные значения измеренной оптической плотности 3
калибраторов, по оси X - соответственно линейные значения концентраций антител к Borrelia в этих
калибраторах, затем соседние точки соединяются. Концентрации антител в исследуемых образцах можно
вычислить с помощью компьютера, используя способ расчета по кривой «от точки к точке».
Ниже приводится образец типичной калибровочной кривой. Пожалуйста, не используйте эту кривую для
определения концентрации антител к Borrelia в образцах.
____________________________________________________________________________________________
 Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2005
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru
Anti-Borrelia plus VlsE ELISA (IgG), EUROIMMUN
5
_________________________________________________________________________________________________
2,0
Оптическая плотность
1,8
1,6
1,4
1,2
1,0
0,8
0,6
0,4
0,2
0,0
0
20
40
60
80
100
120
140
160
180
200
ОЕд/мл
Если значение оптической плотности исследуемого образца превышает значение оптической плотности
калибратора 1 (200 ОЕд/мл), результат записывают как “>200 ОЕд/мл”. Рекомендуется провести повторный
анализ этого образца после разведения его 1:400. Полученный при расчете по калибровочной кривой
результат в ОЕд/мл следует умножить на коэффициент разведения 4.
EUROIMMUN рекомендует верхний предел нормальных значений (значение cut-off или уровень
отсечения) равный 20 относительным единицам (ОЕд)/мл. EUROIMMUN рекомендует следующую
интерпретацию результатов:
< 16 ОЕд/мл
> 16 ОЕд/мл до < 22 ОЕд/мл
> 22 ОЕд/мл
отрицательный
пограничный
положительный
При постановке анализа в дубликатах следует использовать среднее значение в двух лунках. Если два
значения существенно отличаются друг от друга, анализ образца следует повторить.
При постановке диагноза наряду с серологическими результатами следует всегда учитывать и клинические
симптомы.
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Калибровка
Поскольку не существует международной референтной сыворотки для количественного определения
антител к Borrelia, набор откалиброван в относительных единицах (ОЕд)/мл.
Для каждой группы выполненных тестов значения оптической плотности калибраторов и значения в
относительных единицах и/или соотношения, определенные для положительного и отрицательного
контролей, должны укладываться в указанные для данной серии набора диапазоны. К набору прилагается
протокол, включающий эти целевые значения. Если значения концентраций контролей выходят за рамки
заданных диапазонов, следовательно результаты анализа могут быть недостоверными, и тест необходимо
повторить.
Активность использованного фермента термозависима, поэтому значения оптических плотностей могут
изменяться, если не используется термостат. Чем выше комнатная температура (18-25 °С) во время
инкубации субстрата, тем будут выше значения оптических плотностей. Сходные колебания связаны и с
изменением времени инкубации. Однако, калибраторы, контроли и исследуемые образцы подвергаются
одним и тем же воздействиям, так что результаты оказываются в значительной степени
скомпенсированными при расчете по калибровочной кривой.
Антиген
Источником антигенов служили специально подобранные штаммы Borrelia (Borrelia burgdorferi sensu stricto,
Borrelia afzelii, Borrelia garinii), а также рекомбинантный антиген VlsE (вариабельная основная
белковоподобная последовательность, экспрессированная, varible major protein-like sequence, expressed)
Borrelia burgdorferi. VlsE – недавно описанный поверхностный антиген Borrelia, который экспрессируется
только in vivo и содержит консервативные и высокоиммуногенные эпитопы. Культура Borrelia была
растворена с помощью додецилсульфата натрия. Использованная смесь антигенов содержит все значимые
белки.
Линейность
Линейность ИФА определяли, используя серийные разведения образца сыворотки крови пациента с
высокой концентрацией антител. На рисунке ниже приведены типичные кривые линейности образцов
(сывороток крови 4 пациентов). Набор Anti-Borrelia plus VlsE ELISA (IgG) обладает линейностью в диапазоне
концентраций 2–200 ОЕд/мл.
____________________________________________________________________________________________
 Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2005
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru
Anti-Borrelia plus VlsE ELISA (IgG), EUROIMMUN
6
_________________________________________________________________________________________________
Аналитическая чувствительность
Предел определения антител к Borrelia в наборе Anti-Borrelia plus VlsE ELISA (IgG) рассчитан на основании
значения оптической плотности образца, не содержащего аналита, плюс утроенное среднее квадратичное
отклонение, и является наименьшим определяемым титром антител. Минимальная определяемая
концентрация антител в наборе Anti-Borrelia plus VlsE ELISA (IgG) составляет около 1 ОЕд/мл.
Аналитическая специфичность
С помощью набора Anti-Borrelia plus VlsE ELISA (IgG) исследовали образцы сыворотки крови 30 пациентов,
положительных по ТРНА (антитела к Treponema pallidum). 5 из них были положительны и на содержание
антител к Borrelia. Это означает теоретическую перекрестную реактивность 16,6%. Следовательно, не
исключена перекрестная реакция набора Anti-Borrelia plus VlsE ELISA (IgG) с антителами к Treponema
pallidum. Тест Anti-Borrelia plus VlsE ELISA (IgG) является скрининговым; в качестве подтверждающего теста
рекомендуется использовать вестернблот.
Влияние гемоглобина, триглицеридов и билирубина
Не отмечено искажения результатов при исследовании данным набором гемолизированных, липемических
или желтушных образцов сывороток с концентрацией гемоглобина до 10 мг/мл, триглицеридов – до 20 мг/мл
и билирубина – до 0,4 мг/мл.
Воспроизводимость
Воспроизводимость ИФА оценивали по коэффициенту вариации (CV) в пределах одной постановки и между
постановками, проводя повторные исследования 3 образцов сыворотки крови с различной концентрацией
антител. Коэффициент вариации в пределах одной постановки оценивали по 20 определениям,
коэффициент вариации между постановками – по 4 определениям, выполненным в течение 6 разных дней.
Вариабельность в пределах постановки,
n = 20
Сыворотка Среднее значение
CV
(%)
крови
(ОЕд/мл)
1
128
3,6
2
97
3,5
3
52
3,5
Вариабельность между постановками,
n=4х6
Сыворотка
Среднее значение
CV
(%)
крови
(ОЕд/мл)
1
138
3,8
2
103
3,7
3
55
3,6
Клиническая специфичность и чувствительность
Концентрацию антител к Borrelia в 165 образцах сыворотки крови пациентов с подозрением на боррелиоз
определяли набором EUROIMMUN Anti-Borrelia plus VlsE ELISA (IgG) и набором EUROIMMUN Anti-Borrelia
EUROLINE-Westernblot (IgG) в качестве набора сравнения. Специфичность теста составила 90,3%,
чувствительность – 100%.
n = 165
положительные
отрицательные
ИФА
EUROIMMUN EUROLINE-Westernblot
положительные
пограничные
отрицательные
60
11
9
0
1
84
Пограничные результаты не включали в оценку специфичности и чувствительности.
Клинические исследования
Скрининг 138 пациентов с клинически охарактеризованным боррелиозом на разных стадиях развития
заболевания осуществляли с помощью наборов EUROIMMUN Anti-Borrelia plus VlsE ELISA (IgG) и AntiBorrelia plus VlsE ELISA (IgM). Клиническая чувствительность составила 89-96%.
n = 138
Симптом
мигрирующая эритема,
n = 97
моно- или полиартрит, n = 26
нейроборрелиоз,
n = 15
EUROIMMUN Anti-Borrelia plus VlsE-ELISA (IgG),
EUROIMMUN Anti-Borrelia-ELISA (IgM)
IgG
IgM
IgG и/или IgM
положительные положительные
положительные
60
68
86 (88,7%)
22
5
25 (96,2%)
13
4
14 (93,3%)
____________________________________________________________________________________________
 Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2005
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru
Anti-Borrelia plus VlsE ELISA (IgG), EUROIMMUN
7
_________________________________________________________________________________________________
Все отрицательные в ИФА результаты были подтверждены исследованием с помощью набора Anti-Borrelia
EUROLINE-Westernblot (IgG).
Ожидаемые значения
Уровни антител (IgG) к Borrelia анализировали с помощью набора Anti-Borrelia plus VlsE ELISA (IgG) на
панели сывороток 281 здоровых доноров крови. При уровне отсечения (значение cut-off) 20 ОЕд/мл 2,5%
доноров крови были анти-Borrelia (IgG) положительными, что отражает известный процент инфицированного
взрослого населения.
КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ
Borrelia burgdorferi – вид бактерии, относящейся к семейству Spirochaetaceae. Это семейство включает пять
родов: боррелия, спирохета, кристиспира, трепонема и лептоспира. B. burgdorferi является возбудителем
клещевого боррелиоза (боррелиоз Лайма или болезнь Лайма), который передается при укусе клеща.
Антитела к B. burgdorferi выявляются в сыворотке крови большинства инфицированных данной бактерией
людей. Распространенность этих антител в нормальной популяции Германии составляет в целом менее
15% без учета эндемичных областей. У людей, работающих в лесной зоне, антитела к боррелиям
обнаруживаются в 40% случаев.
Инфицирование
B.
burgdorferi
проявляется
в
виде
дерматологических,
неврологических,
офтальмологических заболеваний, заболеваний внутренних органов. По клиническим признакам выделяют
три стадии боррелиоза:
Стадия I. Типичным первичным проявлением инфицирования B. burgdorferi является хроническая
мигрирующая эритема: покраснение кожи, появляющееся вокруг области укуса клеща и
распространяющееся в виде кольца. Покраснение сопровождается напоминающими грипп общими
симптомами с лихорадкой, ознобом, головной болью и рвотой. В некоторых случаях наблюдаются
лимфаденопатии (доброкачественный лимфаденоз кожи). Исходом стадии I может быть спонтанное
выздоровление или перерастание ее в генерализованную форму боррелиоза. Переходная фаза обычно
бессимптомна: на стадии I антитела класса IgM к B. burgdorferi могут быть выявлены серологическими
методами у 50-90% пациентов. Частота образования специфических антител класса IgG значительно ниже.
Однако на этой стадии заболевания результаты серологических тестов часто бывают отрицательными. При
наличии соответствующих симптомов рекомендуется наблюдение за пациентом на протяжении нескольких
последующих недель.
Стадия II. В течение периода от нескольких недель до нескольких месяцев после укуса клеща может
развиться целый ряд симптомов. Это в первую очередь неврологические проявления: менингит, энцефалит,
асимметричный полиневрит, парез черепно-мозговых нервов, лимфоцитарный менингорадикулоневрит
Боннварда. Также часто наблюдаются артриты, особенно коленных суставов, и нелокализованные боли
костей, суставов и мышц. Реже бывают кардиологические проявления, такие как миокардит и перикардит.
На стадии II антитела к B. burgdorferi выявляются у 50-90% пациентов. На ранней фазе этой стадии
выявляются в основном антитела класса IgM, а на поздней фазе часто обнаруживаются только антитела
класса IgG. Однако антитела класса IgM могут существовать в течение длительного времени.
Стадия III. Типичным проявлением инфицирования B. burgdorferi на стадии III являются хронический
рецидивирующий эрозивный артрит, хронический атрофический акродерматит и прогрессирующий
энцефаломиелит, который может развиться в множественный склероз. При отсутствии лечения третья
стадия может продолжаться в течение нескольких лет и даже десятилетий после первичного
инфицирования. На этой стадии уровень антител класса IgG значительно повышен у 90-100% пациентов,
тогда как антитела класса IgM обнаруживаются очень редко.
Инфицирование B. burgdorferi можно диагностировать серологическими методами у многих пациентов с
разнообразными симптомами (например, с сильными артритными болями или с выраженными
неврологическими симптомами), причины которых ранее не были ясны. Для диагностики нейроборрелиоза
решающее значение, намного превосходящее серологическое тестирование, имеет определение антител в
спинномозговой жидкости. Это обусловлено тем, что в спинномозговой жидкости, в отличие от сыворотки
крови, редко присутствуют перекрестно-реагирующие антитела, которые могут исказить результаты теста;
таким образом, положительный результат можно ожидать только в случае нейроборрелиоза.
В настоящее время дискутируется использование различных методов для определения антител к B.
burgdorferi: ИФА, иммунофлюоресценции, пассивной гемагглютинации и вестернблота. Многие
исследователи применяют ИФА параллельно с методом непрямой иммунофлюоресценции для
предварительного анализа образцов сыворотки крови. Субстраты, использованные как в наборе
EUROIMMUN Anti-Borrelia-burgdorferi immunofluorescence test, номер по каталогу FI 2132, так и в наборе
EUROIMMUN Anti-Borrelia-burgdorferi ELISA, номер по каталогу EI 2132, содержат полный спектр
антигенов этих бактерий.
____________________________________________________________________________________________
 Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2005
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru
Anti-Borrelia plus VlsE ELISA (IgG), EUROIMMUN
8
_________________________________________________________________________________________________
Согласно общему мнению, использование препаратов подобного типа обеспечивает более высокий уровень
диагностической точности, чем применение отдельных антигенов. Набор EUROIMMUN Anti-Borreliaburgdorferi VIsE EUROLINE-WESTERNBLOT, номер по каталогу DY 2132-1 наиболее пригоден для
дифференциации положительных образцов сыворотки крови.
СПИСОК ЦИТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
Список литературы приведен в оригинале инструкции на английском языке.
Внимание! Перевод сделан с английского оригинала инструкции. Перед постановкой исследования
сверьте номер и дату издания вложенного в набор оригинала с указанными в настоящем переводе (см.
внизу справа). При несовпадении номеров или дат обратитесь в «Аналитику» за новым переводом, либо
руководствуйтесь оригиналом инструкции.
Anti-Borrelia plus VlsE-EI 2132-9601-2G_rus.doc
14.11.2005 16:14
Оригинал EI_2132-2G_A_UK_C04.doc
Version: 25.10.2005 15:38:00.
____________________________________________________________________________________________
 Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2005
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru